JPH0654681A - レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ及びそれを有効成分とする医薬 - Google Patents
レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ及びそれを有効成分とする医薬Info
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- JPH0654681A JPH0654681A JP3163723A JP16372391A JPH0654681A JP H0654681 A JPH0654681 A JP H0654681A JP 3163723 A JP3163723 A JP 3163723A JP 16372391 A JP16372391 A JP 16372391A JP H0654681 A JPH0654681 A JP H0654681A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】スーパーオキシドディスムターゼの安定性を向
上し、その薬理活性を強化する。 【構成】スーパーオキシドディスムターゼとレシチンと
を、直鎖状ジカルボン酸残基からなる化学的橋かけを介
して結合してなる、レシチン化スーパーオキシドディス
ムターゼ、およびそれを有効成分とする薬剤。
上し、その薬理活性を強化する。 【構成】スーパーオキシドディスムターゼとレシチンと
を、直鎖状ジカルボン酸残基からなる化学的橋かけを介
して結合してなる、レシチン化スーパーオキシドディス
ムターゼ、およびそれを有効成分とする薬剤。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、レシチン化スーパーオ
キシドディスムターゼ、およびそれを有効成分とする医
薬に関する。
キシドディスムターゼ、およびそれを有効成分とする医
薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】薬物の効果を高め、副作用を減らす試み
は、古くから行われてきているが、近年応用されて始め
ているものの一つとしてドラックデリバリーシステム
（ＤＤＳ）がある。ＤＤＳとは、薬物を必要とする部位
へ、なるべく選択的に、必要な時間の間移行させ、それ
により薬物の効果を高め全身的な副作用を大幅に減少さ
せる試みである。
は、古くから行われてきているが、近年応用されて始め
ているものの一つとしてドラックデリバリーシステム
（ＤＤＳ）がある。ＤＤＳとは、薬物を必要とする部位
へ、なるべく選択的に、必要な時間の間移行させ、それ
により薬物の効果を高め全身的な副作用を大幅に減少さ
せる試みである。
【０００３】ＤＤＳに用いられるキャリアとしては種々
のものがあり、例えばリポソームとリピッドマイクロス
フェアを挙げることができる。リポソームは、天然に存
在する脂質、例えばレシチン、コレステロールなどを有
機溶媒に溶解し、超音波処理などで水に拡散させ、これ
に薬物を封入させたものである。一方、リピッドマイク
ロスフェアは、大豆油をレシチンとともに水に懸濁した
ものであり、レシチンがその表面にあり、内部に薬物が
封入されている。
のものがあり、例えばリポソームとリピッドマイクロス
フェアを挙げることができる。リポソームは、天然に存
在する脂質、例えばレシチン、コレステロールなどを有
機溶媒に溶解し、超音波処理などで水に拡散させ、これ
に薬物を封入させたものである。一方、リピッドマイク
ロスフェアは、大豆油をレシチンとともに水に懸濁した
ものであり、レシチンがその表面にあり、内部に薬物が
封入されている。
【０００４】両者とも、薬物は主として物理的な結合に
より内部に封入されている。リポソームは、安定性が悪
く、またリピッドマイクロスフェアは、封入する薬物が
脂溶性であることが要求され、その上特殊な製造装置を
使用する必要がある。
より内部に封入されている。リポソームは、安定性が悪
く、またリピッドマイクロスフェアは、封入する薬物が
脂溶性であることが要求され、その上特殊な製造装置を
使用する必要がある。
【０００５】一方、スーパーオキシドディスムターゼ
（以下、これをＳＯＤと略記する）は、動物、植物、微
生物などの生体内に広く分布し、遊離（フリー）の反応
性に富む活性酸素であるスーパーオキシドアニオンラジ
カルを分解する酵素として知られている。薬物の面で
は、抗リウマチ剤、心筋梗塞又は臓器移植の際の使用、
抗血栓剤の使用後に生じるラジカルの除去など種々の炎
症への適用が期待されている（抗炎症剤としては、ファ
ルマシア、17巻、411 頁( 1981年) 参照）。
（以下、これをＳＯＤと略記する）は、動物、植物、微
生物などの生体内に広く分布し、遊離（フリー）の反応
性に富む活性酸素であるスーパーオキシドアニオンラジ
カルを分解する酵素として知られている。薬物の面で
は、抗リウマチ剤、心筋梗塞又は臓器移植の際の使用、
抗血栓剤の使用後に生じるラジカルの除去など種々の炎
症への適用が期待されている（抗炎症剤としては、ファ
ルマシア、17巻、411 頁( 1981年) 参照）。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】ＳＯＤを静脈内投与し
た場合、細胞親和性が低く、かつその血中半減期は僅か
４〜６分とされており、ＳＯＤは速やかに尿中に排泄さ
れる。ＳＯＤの血中半減期を増大させるために、ＳＯＤ
をフィコール、ポリエチレングリコール、ラットアルブ
ミン、デキストランで修飾し、巨大分子化させることが
試みられてきた。
た場合、細胞親和性が低く、かつその血中半減期は僅か
４〜６分とされており、ＳＯＤは速やかに尿中に排泄さ
れる。ＳＯＤの血中半減期を増大させるために、ＳＯＤ
をフィコール、ポリエチレングリコール、ラットアルブ
ミン、デキストランで修飾し、巨大分子化させることが
試みられてきた。
【０００７】しかし、フィコールまたはポリエチレング
リコールで修飾されたＳＯＤはＳＯＤの酵素活性が大幅
に低下しかつ細胞親和性が低いこと、またラットアルブ
ミンで修飾されたＳＯＤには抗原性があることが報告さ
れている。また、デキストランによる修飾では、ＳＯＤ
の抗炎症作用の増強が認められるが、免疫原性を抑制す
る効果は認められていない。
リコールで修飾されたＳＯＤはＳＯＤの酵素活性が大幅
に低下しかつ細胞親和性が低いこと、またラットアルブ
ミンで修飾されたＳＯＤには抗原性があることが報告さ
れている。また、デキストランによる修飾では、ＳＯＤ
の抗炎症作用の増強が認められるが、免疫原性を抑制す
る効果は認められていない。
【０００８】従来知られている種々の修飾ＳＯＤは、す
でに報告されている上記の理由、また巨大分子化に伴う
組織内浸透性の低下などの点でいずれも実用上問題があ
った。従って、いずれの修飾ＳＯＤも臨床応用には至っ
ていないのが現状である。
でに報告されている上記の理由、また巨大分子化に伴う
組織内浸透性の低下などの点でいずれも実用上問題があ
った。従って、いずれの修飾ＳＯＤも臨床応用には至っ
ていないのが現状である。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、これら従
来のものとは全く異なり、しかも優れた効果を挙げるこ
とができるＳＯＤのＤＤＳ化について検討した結果、下
記特定のレシチン化スーパーオキシドディスムターゼを
見い出した。本発明は、この特定のレシチン化スーパー
オキシドディスムターゼである。即ち、本発明は、下記
の特定の化学的橋かけを経てレシチンに結合した特定の
スーパーオキシドディスムターゼ、およびそれを有効成
分とする薬剤である。
来のものとは全く異なり、しかも優れた効果を挙げるこ
とができるＳＯＤのＤＤＳ化について検討した結果、下
記特定のレシチン化スーパーオキシドディスムターゼを
見い出した。本発明は、この特定のレシチン化スーパー
オキシドディスムターゼである。即ち、本発明は、下記
の特定の化学的橋かけを経てレシチンに結合した特定の
スーパーオキシドディスムターゼ、およびそれを有効成
分とする薬剤である。
【００１０】下記式［１］で表わされるレシチン化スー
パーオキシドディスムターゼ。 Ａ-[C(O)-(CH2)nC(O)-Ｂ]m ・・・［１］ ただし、 Ａ：銅及び／又は亜鉛が配位した、111 位がセリンで示
されるヒト由来のスーパーオキシドディスムターゼの残
基 Ｂ：グリセロールの２位に水酸基を有するリゾレシチン
の、その２位の水酸基の水素原子を除いた残基 m ：１以上の整数 n ：２以上の整数
パーオキシドディスムターゼ。 Ａ-[C(O)-(CH2)nC(O)-Ｂ]m ・・・［１］ ただし、 Ａ：銅及び／又は亜鉛が配位した、111 位がセリンで示
されるヒト由来のスーパーオキシドディスムターゼの残
基 Ｂ：グリセロールの２位に水酸基を有するリゾレシチン
の、その２位の水酸基の水素原子を除いた残基 m ：１以上の整数 n ：２以上の整数
【００１１】本発明のレシチン化スーパーオキシドディ
スムターゼは、従来のＳＯＤとは生物体内分布、細胞親
和性が著しく異なり、かつ残存活性が90％以上の極めて
均一な活性を保持したものが得られ、従ってＳＯＤの薬
理活性の強化、副作用の低下、吸収促進が期待できる。
スムターゼは、従来のＳＯＤとは生物体内分布、細胞親
和性が著しく異なり、かつ残存活性が90％以上の極めて
均一な活性を保持したものが得られ、従ってＳＯＤの薬
理活性の強化、副作用の低下、吸収促進が期待できる。
【００１２】本発明のレシチン化スーパーオキシドディ
スムターゼは、通常、リゾレシチンの残基に化学的橋か
け剤を結合させたレシチン誘導体を、銅及び／又は亜鉛
が配位した、かつ111 位がセリンで示されるヒト由来の
スーパーオキシドディスムターゼ（以下、 Cu-Zn型Ser
111h-SOD という）に１個以上結合させて得られる。
スムターゼは、通常、リゾレシチンの残基に化学的橋か
け剤を結合させたレシチン誘導体を、銅及び／又は亜鉛
が配位した、かつ111 位がセリンで示されるヒト由来の
スーパーオキシドディスムターゼ（以下、 Cu-Zn型Ser
111h-SOD という）に１個以上結合させて得られる。
【００１３】Ｂは、下記式［２］で表わされるグリセロ
ールの２位に水酸基を有するリゾレシチンの、その２位
の水酸基の水素原子を除いた残基である。 -O-CH(CH2OR)[CH2OP(O)(O-)(OCH2CH2N+(CH3)3)] ・・・［２］ 上記式［２］において、R は脂肪酸残基（アシル基）で
あり、特に炭素数８〜30の飽和〜不飽和の脂肪酸残基が
好ましい。特に好ましいR は、ミリストイル基、パルミ
トイル基、ステアロイル基、その他の炭素数14〜22の飽
和脂肪酸残基である。
ールの２位に水酸基を有するリゾレシチンの、その２位
の水酸基の水素原子を除いた残基である。 -O-CH(CH2OR)[CH2OP(O)(O-)(OCH2CH2N+(CH3)3)] ・・・［２］ 上記式［２］において、R は脂肪酸残基（アシル基）で
あり、特に炭素数８〜30の飽和〜不飽和の脂肪酸残基が
好ましい。特に好ましいR は、ミリストイル基、パルミ
トイル基、ステアロイル基、その他の炭素数14〜22の飽
和脂肪酸残基である。
【００１４】上記式［１］中、-C(O)-(CH2)nC(O)- は化
学的橋かけ剤の残基を表わす。この化学的橋かけ剤の残
基は、HO-C(O)-(CH2)nC(O)-OH で表わされる直鎖状ジカ
ルボン酸、およびその無水物、そのエステル、その他の
そのジカルボン酸の反応性誘導体からなる化学的橋かけ
剤の両水酸基を除いた残基である。以下、この残基を化
学的橋かけという。
学的橋かけ剤の残基を表わす。この化学的橋かけ剤の残
基は、HO-C(O)-(CH2)nC(O)-OH で表わされる直鎖状ジカ
ルボン酸、およびその無水物、そのエステル、その他の
そのジカルボン酸の反応性誘導体からなる化学的橋かけ
剤の両水酸基を除いた残基である。以下、この残基を化
学的橋かけという。
【００１５】この化学的橋かけは、上記リゾレシチン残
基とエステル結合で結合している。また化学的橋かけの
他端は、 Cu-Zn型Ser111h-SOD のアミノ基とアミド結合
などにより直接結合していると考えられる。この式にお
いて、 nは２以上の整数であり、-(CH2)n-は直鎖アルキ
レン基を表わし、特に nが２〜10の直鎖状アルキレン基
が好ましい。
基とエステル結合で結合している。また化学的橋かけの
他端は、 Cu-Zn型Ser111h-SOD のアミノ基とアミド結合
などにより直接結合していると考えられる。この式にお
いて、 nは２以上の整数であり、-(CH2)n-は直鎖アルキ
レン基を表わし、特に nが２〜10の直鎖状アルキレン基
が好ましい。
【００１６】上記式［１］で表わされるレシチン化 Cu-
Zn型Ser111h-SOD は、例えば Cu-Zn型組換えh-SOD と式
［３］のリゾレシチン誘導体とにより製造される。 Ｚ−C(O)-(CH2)nC(O)-Ｂ ・・・［３］
Zn型Ser111h-SOD は、例えば Cu-Zn型組換えh-SOD と式
［３］のリゾレシチン誘導体とにより製造される。 Ｚ−C(O)-(CH2)nC(O)-Ｂ ・・・［３］
【００１７】上記式中、Ｂ、n は式［１］の場合と同様
である。式［３］中Ｚは水酸基、または活性エステルを
形成する基からカルボニル基を除いた基を表わす。例え
ば、p-ニトロフェノール、1,3,5-トリクロロフェノー
ル、ペンタフルオロフェノール、2,4-ジニトロフェノー
ル、N-ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシピペリ
ジン、N-ヒドロキシ -5-ノルボルネン -2,3-ジカルボン
酸イミド、8-ヒドロキシキノリン、2-ヒドロキシピリジ
ンなどの水酸基含有化合物の水酸基の水素原子を除いた
基である。活性エステル体の合成法については公知の方
法を用いることができる（泉屋他、「ペプチド合成の基
礎と実験」(1985)丸善（株）発行、を参照）。
である。式［３］中Ｚは水酸基、または活性エステルを
形成する基からカルボニル基を除いた基を表わす。例え
ば、p-ニトロフェノール、1,3,5-トリクロロフェノー
ル、ペンタフルオロフェノール、2,4-ジニトロフェノー
ル、N-ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシピペリ
ジン、N-ヒドロキシ -5-ノルボルネン -2,3-ジカルボン
酸イミド、8-ヒドロキシキノリン、2-ヒドロキシピリジ
ンなどの水酸基含有化合物の水酸基の水素原子を除いた
基である。活性エステル体の合成法については公知の方
法を用いることができる（泉屋他、「ペプチド合成の基
礎と実験」(1985)丸善（株）発行、を参照）。
【００１８】式［３］で表わされるリゾレシチン誘導体
と Cu-Zn型Ser111h-SOD との結合方法としては、例えば
以下のものが挙げられる。
と Cu-Zn型Ser111h-SOD との結合方法としては、例えば
以下のものが挙げられる。
【００１９】式［３］においてＺが水酸基の場合はカル
ボジイミド法により行われる。カルボジイミド類として
は、ジエチルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジ
イミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、1-エチル-3
-(3-ジメチルアミノプロピル) カルボジイミドなどが挙
げられる。例えば、 1〜10wt％の［３］の化合物の水溶
液を塩酸でpH４〜６に調製し、室温または０℃で1-エチ
ル-3-(3-ジメチルアミノプロピル )カルボジイミドを加
え、再度pHを４〜６に調製する。ＳＯＤを加え室温また
は０℃で１時間pHを４〜６に保持しその後５〜20時間撹
拌し、レシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を得る。
ボジイミド法により行われる。カルボジイミド類として
は、ジエチルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジ
イミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、1-エチル-3
-(3-ジメチルアミノプロピル) カルボジイミドなどが挙
げられる。例えば、 1〜10wt％の［３］の化合物の水溶
液を塩酸でpH４〜６に調製し、室温または０℃で1-エチ
ル-3-(3-ジメチルアミノプロピル )カルボジイミドを加
え、再度pHを４〜６に調製する。ＳＯＤを加え室温また
は０℃で１時間pHを４〜６に保持しその後５〜20時間撹
拌し、レシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を得る。
【００２０】式［３］においてＺが活性エステルを形成
する基からカルボニル基を除いた基を表わす場合は、 C
u-Zn型Ser111h-SOD と直接結合させることができる。反
応はホウ酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリ
ウム、重炭酸ナトリウムなどの塩の水溶液中でレシチン
誘導体と Cu-Zn型Ser111h-SOD を混合することによって
行われる。
する基からカルボニル基を除いた基を表わす場合は、 C
u-Zn型Ser111h-SOD と直接結合させることができる。反
応はホウ酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリ
ウム、重炭酸ナトリウムなどの塩の水溶液中でレシチン
誘導体と Cu-Zn型Ser111h-SOD を混合することによって
行われる。
【００２１】必要に応じて、N,N-ジメチルホルムアミ
ド、N-メチルピロリド、N,N-ジメチルアセトアミド、ス
ルホラン、ジメチルスルホキシド、アセトン、1,4-ジオ
キシサン、メタノールなどの有機溶媒を加えておくこと
ができる。反応温度は -20〜50℃が好ましく、０〜20℃
が更に好ましい。反応時間は反応温度、混合方法により
異なるが通常２〜24時間である。
ド、N-メチルピロリド、N,N-ジメチルアセトアミド、ス
ルホラン、ジメチルスルホキシド、アセトン、1,4-ジオ
キシサン、メタノールなどの有機溶媒を加えておくこと
ができる。反応温度は -20〜50℃が好ましく、０〜20℃
が更に好ましい。反応時間は反応温度、混合方法により
異なるが通常２〜24時間である。
【００２２】式［３］で表わされるレシチン誘導体の仕
込み量は Cu-Zn型Ser111h-SOD のアミノ基に対して 0.2
〜８倍モル量が適当である。この仕込み比によって Cu-
Zn型Ser111h-SOD に結合させるレシチン誘導体（式
［３］）の分子数を調整することができる。
込み量は Cu-Zn型Ser111h-SOD のアミノ基に対して 0.2
〜８倍モル量が適当である。この仕込み比によって Cu-
Zn型Ser111h-SOD に結合させるレシチン誘導体（式
［３］）の分子数を調整することができる。
【００２３】このようにして得られた反応液にはレシチ
ン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD と未反応Cu-Zn型Ser111h-SOD
、及び未反応レシチン誘導体が共存するが、反応液を
ゲル濾過及びイオン交換カラムクロマトグラフィーに付
することにより所望のレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD
を得ることができる。またこのようにして得られたレシ
チン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD は Cu-Zn型Ser111h-SOD に
種々の分子数のレシチン誘導体が結合して得られたもの
の混合物である。
ン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD と未反応Cu-Zn型Ser111h-SOD
、及び未反応レシチン誘導体が共存するが、反応液を
ゲル濾過及びイオン交換カラムクロマトグラフィーに付
することにより所望のレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD
を得ることができる。またこのようにして得られたレシ
チン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD は Cu-Zn型Ser111h-SOD に
種々の分子数のレシチン誘導体が結合して得られたもの
の混合物である。
【００２４】有効成分化合物として Cu-Zn型Ser111h-SO
D に結合するレシチン誘導体の分子数が均一であるよう
なレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD が所望される場合に
は、前記の方法により得られるレシチン化 Cu-Zn型Ser
111h-SOD を更にゲル濾過、イオン交換カラムクロマト
グラフィーなどの操作に付することにより所望のレシチ
ン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を得ることが可能である。 C
u-Zn型Ser111h-SOD １分子あたりのレシチン結合数（式
［１］におけるm ）は、特に限定されるものではない
が、１〜16が好ましく、特に１〜10が好ましい。
D に結合するレシチン誘導体の分子数が均一であるよう
なレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD が所望される場合に
は、前記の方法により得られるレシチン化 Cu-Zn型Ser
111h-SOD を更にゲル濾過、イオン交換カラムクロマト
グラフィーなどの操作に付することにより所望のレシチ
ン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を得ることが可能である。 C
u-Zn型Ser111h-SOD １分子あたりのレシチン結合数（式
［１］におけるm ）は、特に限定されるものではない
が、１〜16が好ましく、特に１〜10が好ましい。
【００２５】式［３］の化合物の製造法としては、下記
式［４］で表わされる酸無水物をH-Ｂで表わされるリゾ
レシチンに反応させる方法、または下記式［５］で表わ
されるジカルボン酸ハーフエステル無水物をH-Ｂで表わ
されるリゾレシチンに反応させる方法により得られる。 [-C(O)-(CH2)nC(O)-]=O ・・・［４］ [Z'-O-C(O)-(CH2)nC(O)-]2=O ・・・［５］
式［４］で表わされる酸無水物をH-Ｂで表わされるリゾ
レシチンに反応させる方法、または下記式［５］で表わ
されるジカルボン酸ハーフエステル無水物をH-Ｂで表わ
されるリゾレシチンに反応させる方法により得られる。 [-C(O)-(CH2)nC(O)-]=O ・・・［４］ [Z'-O-C(O)-(CH2)nC(O)-]2=O ・・・［５］
【００２６】ここでＢ、n は式［１］の場合と同様であ
る。Z'はカルボキシル基の保護基、例えば、アルキル
基、メトキシメチル基、ベンジル基、フェナシル基、t-
ブチルジメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリメ
チルシリル基などを表わす。
る。Z'はカルボキシル基の保護基、例えば、アルキル
基、メトキシメチル基、ベンジル基、フェナシル基、t-
ブチルジメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリメ
チルシリル基などを表わす。
【００２７】これら酸無水物やハーフエステル無水物を
用いて式［３］の化合物を製造する反応は、通常溶媒中
で行われ、必要により有機塩基を共存させて行う。反応
溶媒としては、例えば、クロロホルムなどのハロゲン化
炭化水素が用いられ、有機塩基としては、例えば、ピリ
ジン、ピペリジン、トリエチルアミン、4-ジメチルアミ
ノピリジン、4-ピペリジノピリジンなどが用いられる。
反応温度は20〜80℃が好ましく40〜60℃が更に好まし
い。反応時間は、通常２〜24時間である。
用いて式［３］の化合物を製造する反応は、通常溶媒中
で行われ、必要により有機塩基を共存させて行う。反応
溶媒としては、例えば、クロロホルムなどのハロゲン化
炭化水素が用いられ、有機塩基としては、例えば、ピリ
ジン、ピペリジン、トリエチルアミン、4-ジメチルアミ
ノピリジン、4-ピペリジノピリジンなどが用いられる。
反応温度は20〜80℃が好ましく40〜60℃が更に好まし
い。反応時間は、通常２〜24時間である。
【００２８】式［５］の製造方法としては、当該するカ
ルボン酸ハーフエステルをベンゼン、トルエン、クロロ
ホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、などの
溶媒中でカルボジイミドと混合させることにより得られ
る。カルボジイミドとしては、例えば、ジエチルカルボ
ジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド、ジシクロヘ
キシカルボジイミド、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプ
ロピル）カルボジイミドなどが用いられる。反応温度
は、−20℃から溶媒還流温度までの範囲を用いることが
できるが、好ましくは、０℃から室温程度の温度を用い
る。
ルボン酸ハーフエステルをベンゼン、トルエン、クロロ
ホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、などの
溶媒中でカルボジイミドと混合させることにより得られ
る。カルボジイミドとしては、例えば、ジエチルカルボ
ジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド、ジシクロヘ
キシカルボジイミド、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプ
ロピル）カルボジイミドなどが用いられる。反応温度
は、−20℃から溶媒還流温度までの範囲を用いることが
できるが、好ましくは、０℃から室温程度の温度を用い
る。
【００２９】本発明で用いる Cu-Zn型Ser111h-SOD は、
例えばヒト由来のスーパーオキシドディスムターゼのア
ミノ酸配列をコードする塩基配列について、部位特異的
変異法に基づき、111 位のシステイン残基をセリン残基
に変換して得られる（特開昭62-130684 号）。
例えばヒト由来のスーパーオキシドディスムターゼのア
ミノ酸配列をコードする塩基配列について、部位特異的
変異法に基づき、111 位のシステイン残基をセリン残基
に変換して得られる（特開昭62-130684 号）。
【００３０】本発明における製剤の形態としては注射
剤、直腸吸収剤、経鼻吸収剤などが挙げられる。注射剤
は、例えば本有効成分を緩衝剤、等張化剤、pH調節剤、
安定化剤と適量に溶解した注射用蒸留水に溶解し、除菌
フィルタを通して無菌化したものをアンプルに分注する
か、または本有効成分を増量剤、安定化剤とともに注射
用蒸留水に溶解し、除菌フィルタを通して無菌化したも
のをアンプルに分注するか、バイアル瓶に分注して凍結
乾燥することにより調製される。
剤、直腸吸収剤、経鼻吸収剤などが挙げられる。注射剤
は、例えば本有効成分を緩衝剤、等張化剤、pH調節剤、
安定化剤と適量に溶解した注射用蒸留水に溶解し、除菌
フィルタを通して無菌化したものをアンプルに分注する
か、または本有効成分を増量剤、安定化剤とともに注射
用蒸留水に溶解し、除菌フィルタを通して無菌化したも
のをアンプルに分注するか、バイアル瓶に分注して凍結
乾燥することにより調製される。
【００３１】以下に本発明を具体的に説明するが、本発
明はこれら実施例に限られるものではない。
明はこれら実施例に限られるものではない。
【００３２】
［合成例１］ 9-ベンジルオキシカルボニル -1-ノナン酸無水物の合成 9-ベンジルオキシカルボニル -1-ノナン酸15ｇ(51 mmo
l) をベンゼン50mlに溶解させ０℃に冷却し、ＤＣＣ
（1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド 5.8ｇ(28mmol)
を加え、室温で15時間撹拌した。不溶物をセライトで
濾過し、減圧濃縮して、標記化合物を得た。
l) をベンゼン50mlに溶解させ０℃に冷却し、ＤＣＣ
（1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド 5.8ｇ(28mmol)
を加え、室温で15時間撹拌した。不溶物をセライトで
濾過し、減圧濃縮して、標記化合物を得た。
【００３３】［合成例２］ 2-( 9-ベンジルオキシカルボニルノナノイル）リゾレシ
チンの合成 グリセロールの２位が水酸基であるリゾレシチン３ｇ
(5.9mmol）のクロロホルム−ピリジン（80ml／20ml）懸
濁液に、ＤＭＡＰ（N,N-ジメチルアミノピリジン) 2.16
ｇ(17.7mmol)、9-ベンジルオキシカルボニル -1-ノナン
酸無水物10.0ｇ(17.7mmol)を加え、60℃で15時間撹拌し
た。その後反応液を減圧濃縮し、残渣にクロロホルム：
メタノール：水＝４：５：１（10ml）を加えて溶解し、
同液にて平衡化したイオン交換カラム（Dowex 50W-X8）
に通した。
チンの合成 グリセロールの２位が水酸基であるリゾレシチン３ｇ
(5.9mmol）のクロロホルム−ピリジン（80ml／20ml）懸
濁液に、ＤＭＡＰ（N,N-ジメチルアミノピリジン) 2.16
ｇ(17.7mmol)、9-ベンジルオキシカルボニル -1-ノナン
酸無水物10.0ｇ(17.7mmol)を加え、60℃で15時間撹拌し
た。その後反応液を減圧濃縮し、残渣にクロロホルム：
メタノール：水＝４：５：１（10ml）を加えて溶解し、
同液にて平衡化したイオン交換カラム（Dowex 50W-X8）
に通した。
【００３４】ＴＬＣにより目的化合物を分画し、溶媒を
減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムにより精製
し、標記化合物3.91ｇ(5.0mmol, 85％）を得た。 1H-NMR (CDCl3) 0.84(t,3H),1.20(brs),1.50-1.70(brs,6H),2.20-2.40(b
rs,6H),3.38(s,9H),3.80-4.00(m,4H),4.20-4.40(m,4H),
5.10(s,2H),5.20(m,1H),7.30(m,5H).
減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムにより精製
し、標記化合物3.91ｇ(5.0mmol, 85％）を得た。 1H-NMR (CDCl3) 0.84(t,3H),1.20(brs),1.50-1.70(brs,6H),2.20-2.40(b
rs,6H),3.38(s,9H),3.80-4.00(m,4H),4.20-4.40(m,4H),
5.10(s,2H),5.20(m,1H),7.30(m,5H).
【００３５】［合成例３］ 2-( 9-ヒドロキシカルボニルノナノイル）リゾレチンの
合成 合成例２で得られた2-( 9-ベンジルオキシカルボニルノ
ナノイル）リゾレシチン3.91ｇ(5.00mmol)をメタノール
−水（225ml/25ml）に溶解させ、水酸化パラジウム 3.0
ｇを加えた。水素置換後15時間１気圧、室温で撹拌し
た。セライトで濾過し減圧濃縮した後、残渣をシリカゲ
ルカラムにより精製して、標記化合物2.37ｇ(3.41mmol,
61％）を得た。
合成 合成例２で得られた2-( 9-ベンジルオキシカルボニルノ
ナノイル）リゾレシチン3.91ｇ(5.00mmol)をメタノール
−水（225ml/25ml）に溶解させ、水酸化パラジウム 3.0
ｇを加えた。水素置換後15時間１気圧、室温で撹拌し
た。セライトで濾過し減圧濃縮した後、残渣をシリカゲ
ルカラムにより精製して、標記化合物2.37ｇ(3.41mmol,
61％）を得た。
【００３６】［合成例４］ 2-( 9-ヒドロキシカルボニルノナノイル）リゾレチシン
の活性エステル体の合成 合成例３で得られたカルボン酸 2.0ｇ(2.98mmol)をジク
ロロメタン50mlに溶解させて０℃に冷却し、N-ヒドロキ
シスクシンイミド343mg(2.98mmol）、テトラゾール209m
g(2.98mmol）をこの順で加えた。次にＤＣＣ769mg(3.73
mmol）をジクロロメタン８mlに溶解した。溶液をゆっく
り滴下し、室温で15時間撹拌した。不溶物をセライトで
濾過し、活性エステル体のジクロロメタン溶液を得た。
の活性エステル体の合成 合成例３で得られたカルボン酸 2.0ｇ(2.98mmol)をジク
ロロメタン50mlに溶解させて０℃に冷却し、N-ヒドロキ
シスクシンイミド343mg(2.98mmol）、テトラゾール209m
g(2.98mmol）をこの順で加えた。次にＤＣＣ769mg(3.73
mmol）をジクロロメタン８mlに溶解した。溶液をゆっく
り滴下し、室温で15時間撹拌した。不溶物をセライトで
濾過し、活性エステル体のジクロロメタン溶液を得た。
【００３７】［合成例５］ 11-ベンジルオキシカルボニル -1-ウンデカン酸無水物
の合成 合成例１と同様に 11-ベンジルオキシカルボニル -1-ウ
ンデカン酸より合成した。
の合成 合成例１と同様に 11-ベンジルオキシカルボニル -1-ウ
ンデカン酸より合成した。
【００３８】［合成例６］ 2-(11-ベンジルオキシカルボニルウンデカノイル) リゾ
レシチンの合成 合成例２と同様に合成例５で得られた酸無水物より合成
した。
レシチンの合成 合成例２と同様に合成例５で得られた酸無水物より合成
した。
【００３９】［合成例７］ 2-(11-ヒドロキシカルボニルウンデカノイル) リゾレシ
チンの合成 合成例３と同様に合成例６で得られたベンジルエステル
体より合成した。
チンの合成 合成例３と同様に合成例６で得られたベンジルエステル
体より合成した。
【００４０】［合成例８］ 2-(11-ヒドロキシカルボニルウンデカノイル) リゾレシ
チンの活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例７で得られたカルボン酸より合
成した。
チンの活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例７で得られたカルボン酸より合
成した。
【００４１】［合成例９］ 6-ベンジルオキシカルボニル -1-ヘキサン酸無水物の合
成 合成例１と同様に6-ベンジルオキシカルボニル -1-ヘキ
サン酸より合成した。
成 合成例１と同様に6-ベンジルオキシカルボニル -1-ヘキ
サン酸より合成した。
【００４２】［合成例１０］ 2-( 6-ベンジルオキシカルボニルヘキサノイル) リゾレ
シチンの合成 合成例２と同様に合成例９で得られた酸無水物より合成
した。
シチンの合成 合成例２と同様に合成例９で得られた酸無水物より合成
した。
【００４３】［合成例１１］ 2-( 6-ヒドロキシカルボニルヘキサノイル) リゾレシチ
ンの合成 合成例３と同様に合成例１０で得られたベンジルエステ
ル体より合成した。
ンの合成 合成例３と同様に合成例１０で得られたベンジルエステ
ル体より合成した。
【００４４】［合成例１２］ 2-( 6-ヒドロキシカルボニルヘキサノイル）リゾレシチ
ンの活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例１１で得られたカルボン酸より
合成した。
ンの活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例１１で得られたカルボン酸より
合成した。
【００４５】［合成例１３］ 2-( 4-ヒドロキシカルボニルブチロイル) リゾレシチン
の合成 合成例３と同様に無水グルタル酸より合成した。精製は
ＯＤＳ（オクタデシルシラン）を充填したカラムにより
行った。 1H-NMR (CDCl3) 0.84(t,3H),1.20(brs),1.52-1.60(brs,2H),1.80-1.95
(m,2H),2.20-2.42,(m,6H),3.35(s,9H),3.78(m,4H),3.90
-4.35(m,4H),5.20(m,1H).
の合成 合成例３と同様に無水グルタル酸より合成した。精製は
ＯＤＳ（オクタデシルシラン）を充填したカラムにより
行った。 1H-NMR (CDCl3) 0.84(t,3H),1.20(brs),1.52-1.60(brs,2H),1.80-1.95
(m,2H),2.20-2.42,(m,6H),3.35(s,9H),3.78(m,4H),3.90
-4.35(m,4H),5.20(m,1H).
【００４６】［合成例１４］ 2-( 4-ヒドロキシカルボニルブチロイル）リゾレシチン
の活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例１３で得られたカルボン酸より
合成した。
の活性エステル体の合成 合成例４と同様に合成例１３で得られたカルボン酸より
合成した。
【００４７】［実施例］上記合成例で製造した化合物を
用いてレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を下記のＡ〜Ｃ
の方法を用いて製造した。
用いてレシチン化 Cu-Zn型Ser111h-SOD を下記のＡ〜Ｃ
の方法を用いて製造した。
【００４８】方法Ａ：活性エステル溶液のジクロロメタ
ンを留去し、50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解した Cu-
Zn型Ser111h-SOD として、銅及び亜鉛が配位した、111
位がセリンで示されるヒト由来のスーパーオキシドディ
スムターゼ（以下ｒ-h-SOD）を添加し、０℃で１時間、
更に室温で２時間反応させる。反応液を濾過し、セファ
クリルＳ-300（ファルマシア社製）を担体としたゲル濾
過カラムに付し、反応緩衝液と同一の緩衝液で溶出す
る。次いで、レシチン化ｒ-h-SOD溶出分画を集め、限外
濾過により濃縮する。
ンを留去し、50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解した Cu-
Zn型Ser111h-SOD として、銅及び亜鉛が配位した、111
位がセリンで示されるヒト由来のスーパーオキシドディ
スムターゼ（以下ｒ-h-SOD）を添加し、０℃で１時間、
更に室温で２時間反応させる。反応液を濾過し、セファ
クリルＳ-300（ファルマシア社製）を担体としたゲル濾
過カラムに付し、反応緩衝液と同一の緩衝液で溶出す
る。次いで、レシチン化ｒ-h-SOD溶出分画を集め、限外
濾過により濃縮する。
【００４９】方法Ｂ：活性エステル溶液のジクロロメタ
ンを留去し、ＤＭＦに溶解させた。これを50mMホウ酸緩
衝液(pH8.5) に添加し、不溶物を濾過後同一緩衝液に溶
解して０℃に冷却したｒ-h-SOD溶液に滴下する。この時
ｒ-h-SOD溶液にＤＭＦを50％加えておく。０℃で１５時
間撹拌後、方法Ａと同様に精製する。
ンを留去し、ＤＭＦに溶解させた。これを50mMホウ酸緩
衝液(pH8.5) に添加し、不溶物を濾過後同一緩衝液に溶
解して０℃に冷却したｒ-h-SOD溶液に滴下する。この時
ｒ-h-SOD溶液にＤＭＦを50％加えておく。０℃で１５時
間撹拌後、方法Ａと同様に精製する。
【００５０】方法Ｃ：50mMホウ酸緩衝液(pH8.5）に溶解
したｒ-h-SOD溶液に、20％のＤＭＦを加え０℃に冷却
し、方法Ｂと同様に調製した活性エステルのＤＭＦ溶液
をゆっくりと滴下する。０℃で15時間撹拌後、方法Ａと
同様に精製する。
したｒ-h-SOD溶液に、20％のＤＭＦを加え０℃に冷却
し、方法Ｂと同様に調製した活性エステルのＤＭＦ溶液
をゆっくりと滴下する。０℃で15時間撹拌後、方法Ａと
同様に精製する。
【００５１】［実施例１］ ｒ-h-SOD１分子あたりレシチン誘導体が平均２個結合し
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5）に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して0.4 倍モル量の合成例４で
合成した活性エステルとを方法Ａに従って反応させた。
反応溶液をゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィーに
より精製した。タンパク質濃度をローリー法（Lowry,O.
h.ら、(1951). J.Biol.Chem.,193,265)、ｒ-h-SODの残存
アミノ基をＴＮＢＳ法（トリニトロベンゼンスルホン酸
塩、Goodwin,J.F.ら、(1970).Clin.Chem.,16,24)でおこ
なうことによりｒ-h-SOD 1分子あたりのレシチン誘導体
の結合数を求めたところ、平均 2.0個であった。
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5）に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して0.4 倍モル量の合成例４で
合成した活性エステルとを方法Ａに従って反応させた。
反応溶液をゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィーに
より精製した。タンパク質濃度をローリー法（Lowry,O.
h.ら、(1951). J.Biol.Chem.,193,265)、ｒ-h-SODの残存
アミノ基をＴＮＢＳ法（トリニトロベンゼンスルホン酸
塩、Goodwin,J.F.ら、(1970).Clin.Chem.,16,24)でおこ
なうことによりｒ-h-SOD 1分子あたりのレシチン誘導体
の結合数を求めたところ、平均 2.0個であった。
【００５２】［実施例２］ ｒ-h-SOD１分子あたりレシチン誘導体が平均４個結合し
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して0.8 倍モル量の合成例１４
で合成した活性エステルとを方法Ｂに従って反応させ
た。実施例１と同様に精製し、ｒ-h-SOD１分子当たりの
レシチン誘導体の結合数を求めたところ、平均 4.0個で
あった。
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して0.8 倍モル量の合成例１４
で合成した活性エステルとを方法Ｂに従って反応させ
た。実施例１と同様に精製し、ｒ-h-SOD１分子当たりの
レシチン誘導体の結合数を求めたところ、平均 4.0個で
あった。
【００５３】［実施例３］ ｒ-h-SOD１分子あたりレシチン誘導体が平均８個結合し
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して2.0 倍モル量の合成例８で
合成した活性エステルとを方法Ｃに従って反応させた。
実施例１と同様に精製し、ｒ-h-SOD１分子当たりのレシ
チン誘導体の結合数を求めたところ、平均 8.0個であっ
た。
たレシチン化ｒ-h-SODの合成 50mMホウ酸緩衝液(pH8.5) に溶解させたｒ-h-SODと、ｒ
-h-SODの全アミノ基に対して2.0 倍モル量の合成例８で
合成した活性エステルとを方法Ｃに従って反応させた。
実施例１と同様に精製し、ｒ-h-SOD１分子当たりのレシ
チン誘導体の結合数を求めたところ、平均 8.0個であっ
た。
【００５４】［実施例４］ Forssman抗血清による呼吸抵抗に及ぼすレシチン化ｒ-h
-SODの抑制効果 Hartley 系雌性モルモット（体重 280g 〜390g）を日本
医科学動物資材研究所より購入し、実験に用いた。
-SODの抑制効果 Hartley 系雌性モルモット（体重 280g 〜390g）を日本
医科学動物資材研究所より購入し、実験に用いた。
【００５５】呼吸抵抗は Mead らのオッシレーション法
を一部改変したモルモット呼吸抵抗測定装置（Type PMR
-2、シズメメディカル）を用い、無麻酔、自発呼吸下に
て測定した。すなわち、プラスチック製チャンバーボッ
クス内にモルモットを入れ、頭部をボックス外に出し、
ボックス内を密閉した後、20Hzの正弦波を増幅器および
スピーカーで体表面に加えた。この時生ずる気流速度
（ΔＶ）は、円錐型ゴムマスクの先端の400 メッシュス
クリーンを通過して生ずる圧差をポリグラフ上に記録す
ることにより求め、同時にボックス内圧と口腔内圧との
差（ΔＰ）も求め、ΔＰ／ΔＶより呼吸抵抗値（Rrs ）
を算出した。表示した値はForssman抗血清惹起前の呼吸
抵抗値からの増加率で表わした。
を一部改変したモルモット呼吸抵抗測定装置（Type PMR
-2、シズメメディカル）を用い、無麻酔、自発呼吸下に
て測定した。すなわち、プラスチック製チャンバーボッ
クス内にモルモットを入れ、頭部をボックス外に出し、
ボックス内を密閉した後、20Hzの正弦波を増幅器および
スピーカーで体表面に加えた。この時生ずる気流速度
（ΔＶ）は、円錐型ゴムマスクの先端の400 メッシュス
クリーンを通過して生ずる圧差をポリグラフ上に記録す
ることにより求め、同時にボックス内圧と口腔内圧との
差（ΔＰ）も求め、ΔＰ／ΔＶより呼吸抵抗値（Rrs ）
を算出した。表示した値はForssman抗血清惹起前の呼吸
抵抗値からの増加率で表わした。
【００５６】惹起物質として、40倍希釈したforssman抗
血清( 抗ヒツジ赤血球血清、cappel) を１ml/kg 耳静脈
より投与し、30分間経時的に呼吸抵抗を測定した。被験
薬剤として、注射用生理食塩液（対照群）、それぞれ注
射用生理食塩液に溶解して3000U/mlとし、ｒ-h-SODを 3
000U/kg 含む混合液、実施例２で合成したレシチン化ｒ
-h-SODを 3000U/kg 含む混合液、及びｒ-h-SOD 3000U/k
g と合成例１３で合成した化合物（ 2-(4-ヒドロキシカ
ルボニルブチロイル) リゾレシチン） 123μg/kgとを含
む混合液をそれぞれ惹起５分前より3ml/kg耳静脈より投
与した。
血清( 抗ヒツジ赤血球血清、cappel) を１ml/kg 耳静脈
より投与し、30分間経時的に呼吸抵抗を測定した。被験
薬剤として、注射用生理食塩液（対照群）、それぞれ注
射用生理食塩液に溶解して3000U/mlとし、ｒ-h-SODを 3
000U/kg 含む混合液、実施例２で合成したレシチン化ｒ
-h-SODを 3000U/kg 含む混合液、及びｒ-h-SOD 3000U/k
g と合成例１３で合成した化合物（ 2-(4-ヒドロキシカ
ルボニルブチロイル) リゾレシチン） 123μg/kgとを含
む混合液をそれぞれ惹起５分前より3ml/kg耳静脈より投
与した。
【００５７】統計学的処理として Mann-Whitney のＵ検
定を用いて有意差検定を行った。Ｐ＜0.05 を有意差あ
りと判定した（図１参照）。この試験結果を図１に示
す。その結果より、実施例２のレシチン化ｒ-h-SOD 300
0 U/kg投与群は control（非投与群）に対してＰ＜0.01
で差が見られ効果があったと判定された。また、ｒ-h-S
OD 3000 U/kg 投与群と比較しても全ての測定点におい
てＰ＜0.05で差が見られ、実施例２のレシチン化ｒ-h-S
ODは、ｒ-h-SODよりフリーラジカルを有意に低減するこ
とから、効果的であったと判定された。
定を用いて有意差検定を行った。Ｐ＜0.05 を有意差あ
りと判定した（図１参照）。この試験結果を図１に示
す。その結果より、実施例２のレシチン化ｒ-h-SOD 300
0 U/kg投与群は control（非投与群）に対してＰ＜0.01
で差が見られ効果があったと判定された。また、ｒ-h-S
OD 3000 U/kg 投与群と比較しても全ての測定点におい
てＰ＜0.05で差が見られ、実施例２のレシチン化ｒ-h-S
ODは、ｒ-h-SODよりフリーラジカルを有意に低減するこ
とから、効果的であったと判定された。
【００５８】以上のように、実施例２のレシチン化ｒ-h
-SODは、forssman抗血清によるモルモットの呼吸抵抗に
対して有意な抑制効果が見られた。また、レシチン化ｒ
-h-SODをモルモット（１群５匹）に6000U/kg静脈注射し
た結果、いずれも死亡例はみられなかった。
-SODは、forssman抗血清によるモルモットの呼吸抵抗に
対して有意な抑制効果が見られた。また、レシチン化ｒ
-h-SODをモルモット（１群５匹）に6000U/kg静脈注射し
た結果、いずれも死亡例はみられなかった。
【００５９】
【発明の効果】本発明のレシチン化スーパーオキシドデ
ィスムターゼは、スーパーオキシドディスムターゼと化
学的橋かけを経てレシチンに結合させたものである。従
来の修飾体と比較すると生体内分布、細胞親和性が著し
く異なることが期待でき、薬理活性の強化が図られたと
いう効果を有する。
ィスムターゼは、スーパーオキシドディスムターゼと化
学的橋かけを経てレシチンに結合させたものである。従
来の修飾体と比較すると生体内分布、細胞親和性が著し
く異なることが期待でき、薬理活性の強化が図られたと
いう効果を有する。
【図１】 実施例４の試験結果を示すグラフ
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 水島 裕 東京都世田谷区梅丘一丁目１番11号 (72)発明者 五十嵐 理慧 神奈川県川崎市多摩区南生田三丁目３番12 号 (72)発明者 阿部 力 静岡県三島市芙蓉台１丁目16−18 (72)発明者 猪股 俊秀 東京都中央区日本橋本町二丁目１番５号 生化学工業株式会社内 (72)発明者 安田 新 神奈川県横浜市神奈川区羽沢町1150番地 旭硝子株式会社中央研究所内
Claims (4)
- 【請求項１】下記式［１］で表わされるレシチン化スー
パーオキシドディスムターゼ。 Ａ-[C(O)-(CH2)nC(O)-Ｂ]m ・・・［１］ ただし、 Ａ：銅及び／又は亜鉛が配位した、111 位がセリンで示
されるヒト由来のスーパーオキシドディスムターゼの残
基 Ｂ：グリセロールの２位に水酸基を有するリゾレシチン
の、その２位の水酸基の水素原子を除いた残基 m ：１以上の整数 n ：２以上の整数 - 【請求項２】n が２〜10の整数である、請求項１のレシ
チン化スーパーオキシドディスムターゼ。 - 【請求項３】m が平均して１〜16である、請求項１また
は２のレシチン化スーパーオキシドディスムターゼ。 - 【請求項４】請求項１〜３のいずれか一のレシチン化ス
ーパーオキシドディスムターゼを有効成分として含む医
薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3163723A JP3070980B2 (ja) | 1991-06-07 | 1991-06-07 | レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ及びそれを有効成分とする医薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3163723A JP3070980B2 (ja) | 1991-06-07 | 1991-06-07 | レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ及びそれを有効成分とする医薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0654681A true JPH0654681A (ja) | 1994-03-01 |
| JP3070980B2 JP3070980B2 (ja) | 2000-07-31 |
Family
ID=15779443
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3163723A Expired - Lifetime JP3070980B2 (ja) | 1991-06-07 | 1991-06-07 | レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ及びそれを有効成分とする医薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3070980B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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