JPH06506673A - Ｈｉｖ−１感染の治療におけるグアニン誘導体またはそのプロドラッグの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＨＩＶ−１感染の治療におけるグアニン誘導体またはそのプロドラッグの使用本 発明は、ヒトおよび動物におけるＨＩＶ−１感染の治療方法、およびかかる感染 の治療用薬物の製造における化合物の使用に関する。

欧州特許出願公開Ａ第２４２４８２号（ビーチャム・グループ・パブリック・リ ミテッド・カンパニー（Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｇｒｏｕｐ　ｐ、　１．　ｃ、　）に は、抗ウィルス剤として、ＢＲＬ　４４３８５、式（Ａ）： で示される化合物またはその塩が開示されている。

欧州特許出願公開Ａ第２４２４８２号に開示されている式（Ａ）で示される化合 物のプロドラッグは、式（Ｂ）： ［式中、ＸはＣ＋−Ｓアルコキシ、ＮＨ，または水素である］で示される化合物 ならびに式（Ａ）の定義と同じその塩および誘導体である。別のプロドラッグは 、欧州特許出願公開Ａ第４１３５４４号（ビーチャム・グループ・パブリック・ リミテッド・カンパニー（Ｂ　ｅｅｃｈａ■Ｇ　ｒｏｕｐ　ｐ、　１．ｃ、　） に記載されている、側鎖がアセタール誘導体の形態のものであり、特に、２−ア ミノ−９−［３−（イソプロポキシメトキシ）プロポキシ）プリン（ＢＲＬ　５ ５７９２）である。

式（Ａ）で示される化合物およびその誘導体は、１型単純ヘルペス、２型単純ヘ ルペス、水痘−帯状庖疹ウィルスおよびエプスタイン−バーウィルスのようなヘ ルペスウィルスによつて引き起こされる感染の治療に有用であると記載されてい る。

今、この化合物が、ヘルペスウィルスにも罹患している患者においてヒト免疫不 全ウィルス（ＨＩＶ−１）に対する潜在的活性を有していること、したがって、 かかる患者においてＨＩＶ感染の治療における使用の可能性を有していることが 見いだされた。

この発見は、ＢＲＬ　４４３８５の三リン酸エステル誘導体の、１型ヒト免疫不 全ウイルス（ＨＩＶ−１）のＲＮＡ指向性ＤＮＡポリメラーゼ（逆転写酵素）プ ロウィルスｄｓ−ＤＮＡへの転換に必須のウィルスコード化酵素であり、したが って、抗ウイルス化学治療のための優れた分子標的である。

ＨＩＶの、予めヘルペスウィルスに感染している細胞（例えば、ＥＢＶ’に感染 しているＢ−リンパ球）に入る能力は知られている。同一細胞におけるヘルペス およびヒト免疫不全ウィルスの両方の存在は、個々の結果を有する。

１、ＢＲＬ　４４３８５は、高レベルのＢＲＬ　４４３８５三リン酸エステルを 誘導するヘルペスウィルスコード化チミジンキナーゼによってリン酸化される。

形成された三リン酸エステルは、ヘルペスＤＮＡポリメラーゼの抑制因子である だけではなく、この研究によって、ＨＩＶ逆転写酵素も抑制することが示される 。

２、ＨＩＶ複製は、ヘルペスウィルス相互作用化因子によって増強され得る。

Ｈ３Ｖの生産物、ＩＣＰ−４（感染細胞タンパク）は、ＨＩＶ転写の開始を増大 させることができる。

３、ヘルペスウィルスおよびＨＩＶの二重感染の結果、表現型混合およびヘルペ スウィルスエンベロープ糖タンパク！を担持している［偽性型Ｊ　ＨＩＶ粒子の 生産を生じる。ＨＳＶキャプシドタンパクによるＨＩＶゲノムＲＮＡのパッケー ジングも生じると思われる。いずれの場合も、予めこのウィルスの進入に敏感で はない、ＣＤ４−ネガティブなヘルペスウィルス許容細胞のＨＩＶによる感染を 導き得る。この結果、二重感染細胞を生じる。

したがって、本発明は、哺乳動物がヘルペスウィルスに感染しており、ＨＩＶ− １感染の治療を必要とする該哺乳動物に、式（Ａ）：Ｈｏ（ＣＢ、ｌ、０ （Ａｌ で示される化合物もしくはそのプロドラッグまたはいずれかの医薬的に許容され る塩の有効量を投与することからなる、ヒトを含む哺乳動物におけるＨＩＶ−１ 感染の治療方法を提供する。

プロドラッグ、医薬的に許容される塩および誘導体の例は、前記欧州特許文献に 記載されている（この主課題は本明細書に引用記載する）。

特に関心のあるプロドラッグは欧州特許出願公開Ａ第４１３５４４号に記載され ているとおりである。

式（Ａ）で示される化合物、プロドラッグ、塩および誘導体は、前記欧州特許文 献の記載に従って製造され得る。

当該化合物は、経口経路によってヒトに投与されてもよ（、シロップ剤、錠剤ま たはカプセル剤の形態で調製されてもよい。錠剤の形態の場合、例えば、ステア リン酸マグネシウム、デンプン、ラクトース、グルコース、米、小麦粉およびチ ョークのような、かかる固体組成物を製剤化するのに好適ないずれの医薬担体を 使用してもよい。該化合物は、化合物を含有するための、例えば、ゼラチンの経 口カプセル剤の形態、またはシロップ剤、溶液剤または懸濁液剤の形態であつて もよい。好適な液体医薬担体としては、エチルアルコール、グリセリン、生理食 塩水および水が挙げられ、これにフレーバー剤または着色剤を添加してシロップ 剤を形成してもよい。

非経口投与のためには、該化合物および無菌賦形剤を含有する液体単位投与形態 を調製する。賦形剤および濃度によって、該化合物は、懸濁または溶解すること ができる。非経口溶液は、通常、賦形剤に化合物を溶解し、濾過滅菌した後、好 適なバイアルまたはアンプルに充填し、密封することによって調製される。好都 合には、局所麻酔薬、保存剤および緩衝化剤のような補助剤も賦形剤に溶解され る。安定性を増大させるために、組成物は、バイアルに充填し、水分を真空除去 した後に冷凍することができる。

非経口懸濁液剤は、化合物を溶解する代わりに賦形剤に懸濁し、無菌賦形剤に懸 濁する前にエチレンオキサｄドへの暴露によって滅菌すること以外は、実貿的に 同様の方法で調製される。好都合には、本発明の化合物の均一な分散を容易にす るために、界面活性剤または湿潤剤が含まれる。

好ましくい非経口製剤としては、無菌水または通常生理食塩水を使用する水性製 剤が挙げられる。

一般的な実施の場合、通常、該組成物は、関連する医薬処置における使用のため の指示書を伴っている。

ウィルス感染の治療に有効な量は、感染の性質および重篤度ならびに哺乳動物の 体重に左右される。

好適な投与単位は、有効成分５０肩９〜１９、例えば、１００〜５００財を含有 する。かかる投与量は、１日に１〜４回、または通常、１日に２または３回投与 されてもよい。化合物の有効量は、一般に、１日当たり体重１にｇ当たり０．２ 〜４０調９、より一般には１日当たり１０〜２０ｍｑ／ｋｑの範囲である。

本発明は、哺乳動物がヘルペスウィルスに感染している、ヒトを含む哺乳動物に おけるＨＩＶ−１感染の治療用薬物の調製における式（Ａ）で示される化合物も しくはプロドラッグまたはいずれかの医薬的に許容される塩の使用を提供するも のでもある。

かかる治療は、前記のような手段で行われ得る。

さらに、本発明は、式（Ａ）で示される化合物もしくはプロドラッグまたはいず れかの医薬的に許容される塩の有効量および医薬的に許容される担体からなる、 ヘルペスウィルスに感染しているヒトを含む哺乳動物におけるＨＩＶ−１感染の 治療用医薬組成物を提供するものである。かかる組成物は、復配のような手段で 製造され得る。

式（Ａ）で示される化合物およびそのプロドラッグは、インターフェロンと共働 して相乗効果的抗ウイルス効果を示す：したがって、同一または異なる経路によ る、連続または同時投与用のこれら２つの成分からなる組合せ生成物を使用する 治療は、本発明の範囲内である。

ヘルペスウィルス感染患者の治療は、ヘルペスウィルスエピソード発作の予防（ 抑制治療）を含むと思われる。ＨＩＶ感染だけの患者においては、抑制治療は、 おそらく、頻繁な再発を伴う患者に与えられるだけであろう。対照的に、ＨＩｖ −１に関連する前記発見によって、ヘルペスウィルス再発、特に、Ｈ８Ｖ−１、 Ｈ５Ｖ−２およびＶＺ■再発を伴う全てのＨＩＶ−１感染患者に対して、これら の再発がめったに起こらない場合でさえ、ＢＲＬ　４４３８５またはプロドラッ グによる連続的な抑制治療の必要性が示される。

式（Ａ）で示される化合物およびそのプロドラッグは、他の抗ウィルス剤、特に 、ＡＺＴのような抗ＨＩＶ剤と組み合わせて投与することもできる。

以下の生化学的データは本発明を説明する。

ンターナショナル（Ａｍｅｒｓｈａｍ　Ｉ　ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）から購 入した。鋳型プライマー、ポリ（ｒＣ）、ｐ　（ｄＧ）ｕ−ｕおよびポリ（ｄＣ ）、ｐ（ｄＧ）＋ｔ−ｕは、イギリス国ミルトン・ケインズのファルマシア・リ ミテッド（Ｐ　ｈａｒｍａｃｉａ　Ｌ　ｔｄ、　）から入手した。ＢＲＬ　４４ ３８５三リン酸エステル（ＢＲＬ　４４３８５−ＴＰ）は、イギリス国グレート ・バーブのスミスクライン・ビーチャム・ファーマシューテイカルズ（Ｓｍｉｔ ｈＫｌｉｎｅ　Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）の研究所で 製造した。

逆転写酵素　精製したイー・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）発現ＨＩＶ−１逆転写酵素（ ＲＴ）は、アメリカ合衆国アッパー・メリオンのスミスクライン・ビーチャム・ ファーマンユーテイカルズ（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ　Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｐｈａｒ ｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）のプロティン・バイオケミストリー・デパートメント （Ｐ　ｒｏｔｅｉｎ　Ｂ　ｉｏｃｈｅｉｉｓｔｒｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ）によ って供給された。該酵素を、５０５Ｍ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ（ｐＨ８゜０）、１０ ＋＋＋Ｍ　Ｈｅｐｅｓ、１１０ｍＭ　ＮａＣ１，５，７ｍＭ　ＤＴＴ、０．３ｔ Ｍ　ＥＤＴＡ１領０６％Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００，５０％グリセロールを含有 する緩衝液中で貯蔵および希釈した。

逆転写酵素活性についてのアッセイ　１２０μｌの容量に含まれるＨＩＶ−ＩＲ Ｔアッセイ用の反応混合物：　３３ｍＭ　Ｔｒｉｓ　ＨＣＩ（ｐＨ８，０）、１ ００ｗＭＫＣｌ、３．３＋ａＭ　ＭｇＣ１ｔ、３．３ｍＭジチオトレイトール、 ０．２１１Ｍグルタチオン、０．３３＋ａＭ　ＥＧＴＡ　（エチレングリコール −ビス−（β−アミノエチルエーテル）Ｎ、　Ｎ−四酢酸）、０．０３３％Ｔｒ ｉｔｏｎ　Ｘ−１００，４，０ＭＭ　［’Ｈ］ｄＧＴＰ　（４，１６Ｃｉ／ｍｍ ｏＬ　１６．７μＣｉ／ｍ１）　Ｏ〜５０ＭＭ　ＢＲＬ　４４３８５−ＴＰ、０ ．３Ａ！８０単位／ｍｌポリ（ｒＣ）、ｐ　（ｄＧ）＋ｘ−＋ｓまたはポリ（ｄ 　Ｃ）、Ｐ　（ｄＧ）ｕ−ｕおよび１６７Ｍｇ／＋＋Ａ！ＲＴ　（ｐ　６６およ びｐ５１ポリペプチドの等モル混合物についての１．４３ｎＭと等しい）。ＲＴ を含まない反応混合物を、９６ウエルプレートのマイクロウェル中で調製し、３ ７℃でブレインキュベートした後、酵素溶液２０μｌの添加によって反応を開始 した。次いで、該プレートを３７℃で９５〜１００分間インキュベートした。Ｅ ＤＴＡ溶液（０，２Ｍ、ｐＨ６，５）４０μｌの添加によって反応を停止した。

個々の反応混合物をＤＥＡＥフィルターマット（１２０５−４０５、ＬＫＢ　Ｗ ａｌｌａｃ、フィンランド）に移し、セルハーベスタ−（１２９５−００１、Ｌ ＫＢ　Ｗａｌｌａｃ）を使用して０．３ＭＮａＣ１１０，０３Ｍクエン酸ナトリ ウムで予備湿潤させた。フィルターマットを、ＮａＣ１／クエン酸ナトリウム緩 衝液中で３回、次いで、９５％エタノール中で１回洗浄した。乾燥したフィルタ ーにシンチレーション液（ベータ・プレート・シント（Ｂｅｔａ　Ｐｌａｔｅ　 ５ｃｉｎｔ）、ＬＫＢ　Ｗａｌｌａｃ）を添加し、反応混合物を、ＬＫＢ　１２ ０５ベ一タプレート液体シンチレーシ覆ンカウンター（ＬＫＢ　１２０５Ｂｅｔ ａ　Ｐｌａｔｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　５ｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ　Ｃｏｕｎｔｅｒ ）において放射性ｄＧＭＰの取込みについてアッセイした。

結果 抑制剤の濃度に対する抑制％のプロットから、以下のとおり、ＢＲＬ　４４３８ ５−ＴＰのおおよそのＩＣ５ｏ値を得た。

実験１ ポリ（ｒＣ）、ｐ　（ｄＧ）　Ｉｘ−＋ｓ鋳型プライマーを使用したニーＩＣ６ ゜ＢＲＬ　４４３８５−ＴＰ　＝　３．７μＭ０実験２ ポリ（ｒＣ）、ｐ　（ｄＧ）　１．−＋ｓ鋳型プライマーを使用したニーＩＣ， 。ＢＲＬ　４４３８５−ＴＰ　＝　１．９μＭ０ポリ（ｄＣ）、１）（ｄＧ）ｕ −■鋳型プライマーを使用したニーＩＣ，、ＢＲＬ　４４３８５−ＴＰ　＝　１ ．２μＭ０結論 これらの結果から、ＲＮＡ鋳型を使用するＨＩＶ−１逆転写酵素の５０％抑制を 与えるのに必要なりＲＬ　４４３８５三リン酸エステルの濃度が１．９〜３，７ μＭの範囲であることが判明する。ＤＮＡを逆転写酵素についての鋳型として使 用した場合、ＩＣ，。は１．２μＭであった。これらのＢＲＬ　４４３８５−Ｔ Ｐのレベルは、ヘルペス感染細胞において得られるべきである。

引用文献 １、相補的受容体２はエプスタイン−バーウィルス担持Ｂ細胞におけるヒト免疫 不全ウィルス感染の増強を媒介する（Ｃｏｍｐｌｅｉ＋ｅｎｔ　Ｒｅｃｅｐｔｏ ｒ　２　ＭｅｄｉａｔｅｓＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　Ｉ　ｕ ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｅｐｓ ｔｅｉ■ −Ｂａｒｒ　ｖｉｒｕｓ−ｃａｒｒｙｉｎｇ　Ｂ　ｃｅｌｌｓ、）。

トレンプレイ（Ｔｒｅｍｂｌａｙ）ら、ジャーナル・オブ・イクスペリメンタル ・メソッズ（Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、）１７１．１７９１　（１９９０）。

２、ヒト免疫不全ウィルスおよび水痘性口内炎ウィルスまたは単純ヘルペスウィ ルス間の表現型混合（Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ　ｍｉｘｉｎｇ　ｂｅｔｗｅｅｎ　 ｈｕｍａｎ　ｉｗｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　ｖｅｓｉｃ ｕｌａｒ　ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ　ｏｒ　ｈｅｒｐｅｓ　５ｉｓｐ ｌｅｘ　ｖｉｒｕｓ、　）B ズー（Ｚｈｕ）ら、ジャーナル・オブ・エイズ（Ｊ、ｏｆ　Ａ　Ｉ　ＤＳ、　３ ．２１５（１９９０）。

国際調査報告 国際調査報告 フロントページの続き （７２）発明者　ケニング、マーティン・ディピッド・ジョン イギリス国すリー・ケイティー１８・５エツクスキユー、ニブツム、ニー・トウ リー・ボトム・ロード、グレート・ページ（番地の表示なし）　スミスクライン ・ビーチャム・ファーマシューティカルズ内

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．哺乳動物がヘルペスウイルスに感染しており、ＨＩＶ感染の治療が必要な該 哺乳動物に、式（Ａ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ａ）で示される化合物もしくはプロドラッ グまたはそのいずれかの医薬的に許容される塩、リン酸エステルおよび／または アシル誘導体の有効量を投与することからなる、哺乳動物におけるＨＩＶ−１感 染の治療方法。
2. ２．哺乳動物がヘルペスウイルスに感染している、哺乳動物におけるＨＩＶ−１ 感染の治療用薬物の製造における式（Ａ）：▲数式、化学式、表等があります▼ （Ａ）で示される化合物もしくはプロドラッグ、またはいずれかの医薬的に許容 される塩、リン酸エステルおよび／またはアシル誘導体の使用。
3. ３．哺乳動物がヘルペスウイルスに感染しており、式（Ａ）：▲数式、化学式、 表等があります▼（Ａ）で示される化合物もしくはプロドラッグまたはいずれか の医薬的に許容される塩、リン酸エステルおよび／またはアシル誘導体ならびに 医薬的に許容される担体からなる、哺乳動物におけるＨＩＶ−１感染の治療用医 薬組成物。
4. ４．式（Ａ）で示される化合物がＢＲＬ４４３８５である請求項１、２または３ 記載の方法、使用または組成物。
5. ５．化合物が欧州特許出願公開Ａ第４１３５４４号（ビーチャム・グループ・パ ブリツク・リミテッド・カンパニー（Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｇｒｏｕｐ　ｐ．ｌ．ｃ ．）に記載されている式（Ａ）で示される化合物のプロドラッグである請求項１ 、２または３記載の方法、使用または組成物。
6. ６．式（Ａ）で示される化合物のプロドラッグがＢＲＬ５５７９２として知られ ている２−アミノ−９−（３−（イソプロポキシメトキシ）プロポキシ）プリン である請求項５記載の方法、使用または組成物。
7. ７．薬物が経口投与に適している請求項５または６記載の方法、使用または組成 物。
8. ８．投与される化合物が５０ｍｇ〜１ｇ単位投与形態である請求項１、２または ３記載の方法、使用または組成物。
9. ９．ＨＳＶまたはＶＺＶ再発を伴うＨＩＶ患者の連続的な抑制治療用のＢＲＬ４ ４３８５、またはそのプロドッグ。