JPH0646940B2 - トルラスポラ属大型細胞酵母 - Google Patents
トルラスポラ属大型細胞酵母Info
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- JPH0646940B2 JPH0646940B2 JP59219049A JP21904984A JPH0646940B2 JP H0646940 B2 JPH0646940 B2 JP H0646940B2 JP 59219049 A JP59219049 A JP 59219049A JP 21904984 A JP21904984 A JP 21904984A JP H0646940 B2 JPH0646940 B2 JP H0646940B2
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は染色体が二倍体性を有するトルラスポラ属（To
rulaspora）に属する大型冷凍耐性パン酵母に関する。
rulaspora）に属する大型冷凍耐性パン酵母に関する。
トルラスポラ属に属する酵母、例えばトルラスポラ・デ
ルブルッキ（Torulaspora delbrueckii:旧名サッカロミ
セス・ロゼイSaccharomyces roseiは分類学的に消滅
し、新名となった。「J.A.Barnett等著、Yeasts：Chara
cteristics and Identification，５０８頁，Cambridge
University Press，Cambridge，１９８３年」及び「N.
J.W.Kreger-van Rij編著，The Yeasts，第３改訂版，４
３５頁，Elsevier Science Publishers，Amsterdam，１
９８４年」参照）は糖濃度の高い菓子パン製造に優れ
（特公昭５４−１３４９１号）、又、冷凍耐性のある酵
母（特開昭５６−１４４０３６号）として市販されてい
る。冷凍耐性とは発酵用酵母菌体を含むパン生地をあら
かじめ混捏し若干時間発酵させるか又はそのまま−２０
℃以下に冷凍保存しておき、必要に応じ解凍し再発酵さ
せパンを焼成しうる性質である。冷凍保存できるという
性質は早朝からパン製造にとりかからねばならぬという
過程を省略せしめ、又、需要を察知してパンを焼成でき
るという利点をもたらす。しかし、トルラスポラ・デル
ブルッキは一般に菌体細胞が小さいため培養後の集菌、
洗浄、脱水等の作業に時間がかかるという欠点がある。
ルブルッキ（Torulaspora delbrueckii:旧名サッカロミ
セス・ロゼイSaccharomyces roseiは分類学的に消滅
し、新名となった。「J.A.Barnett等著、Yeasts：Chara
cteristics and Identification，５０８頁，Cambridge
University Press，Cambridge，１９８３年」及び「N.
J.W.Kreger-van Rij編著，The Yeasts，第３改訂版，４
３５頁，Elsevier Science Publishers，Amsterdam，１
９８４年」参照）は糖濃度の高い菓子パン製造に優れ
（特公昭５４−１３４９１号）、又、冷凍耐性のある酵
母（特開昭５６−１４４０３６号）として市販されてい
る。冷凍耐性とは発酵用酵母菌体を含むパン生地をあら
かじめ混捏し若干時間発酵させるか又はそのまま−２０
℃以下に冷凍保存しておき、必要に応じ解凍し再発酵さ
せパンを焼成しうる性質である。冷凍保存できるという
性質は早朝からパン製造にとりかからねばならぬという
過程を省略せしめ、又、需要を察知してパンを焼成でき
るという利点をもたらす。しかし、トルラスポラ・デル
ブルッキは一般に菌体細胞が小さいため培養後の集菌、
洗浄、脱水等の作業に時間がかかるという欠点がある。
従来、トルラスポラ・デルブルッキの二倍体酵母として
は、染色体上に栄養要求性等の人為的突然変異遺伝形質
を有する酵母がプロトプラスト融合法によって得られて
いる（特開昭５８−１５５０８３号）。本発明者らはト
ルラスポラ属に属する酵母のプロトプラストを調製し、
これを再生させる際、ジメチルスルホキシドを再生培地
に添加したり、再生の際に０．５mM以下のマグネシウム
を含む培地を用いたところ、染色体の二倍体化している
が、染色体上に栄養要求性の人為的突然変異遺伝形質を
有しない大型細胞株を得ることができた。大型細胞株は
パン酵母としての性質は変らずに、しかも上記作業時間
を大幅に短縮する事ができることを見出して本発明を完
成した。
は、染色体上に栄養要求性等の人為的突然変異遺伝形質
を有する酵母がプロトプラスト融合法によって得られて
いる（特開昭５８−１５５０８３号）。本発明者らはト
ルラスポラ属に属する酵母のプロトプラストを調製し、
これを再生させる際、ジメチルスルホキシドを再生培地
に添加したり、再生の際に０．５mM以下のマグネシウム
を含む培地を用いたところ、染色体の二倍体化している
が、染色体上に栄養要求性の人為的突然変異遺伝形質を
有しない大型細胞株を得ることができた。大型細胞株は
パン酵母としての性質は変らずに、しかも上記作業時間
を大幅に短縮する事ができることを見出して本発明を完
成した。
トルラスポラ・デルブルッキは通常一倍体で増殖する酵
母である（前記のN.J.W. Kreger-van Rij，The Yeast
s，４３４頁参照）。
母である（前記のN.J.W. Kreger-van Rij，The Yeast
s，４３４頁参照）。
本発明においてはトルラスポラ属に属する酵母のプロト
プラストを再生させる際、ジメチルスルホキシドを作用
させたり、０．５mM以下のマグネシウムを含む培地で再
生させる、又はこれらの組合せにより、意外にも二倍体
株を造成樹立することができた。本発明により得られた
二倍体酵母株はその倍数性を安定に維持し、冷凍耐性は
そのままであった。又、倍数性の増加に伴ないパン生地
膨張力価も若干向上した。
プラストを再生させる際、ジメチルスルホキシドを作用
させたり、０．５mM以下のマグネシウムを含む培地で再
生させる、又はこれらの組合せにより、意外にも二倍体
株を造成樹立することができた。本発明により得られた
二倍体酵母株はその倍数性を安定に維持し、冷凍耐性は
そのままであった。又、倍数性の増加に伴ないパン生地
膨張力価も若干向上した。
本法にて得られる二倍体株は直接染色体倍数化（direct
diploidization）であり、いわゆるプロトプラスト融
合とは異なる。
diploidization）であり、いわゆるプロトプラスト融
合とは異なる。
なお、本発明に用いる親酵母株は野生型であり、あらか
じめ栄養要求性または薬剤耐性マーカー付与等の変異処
理を必要としない。従って、得られた二倍体酵母株は栄
養要求性等の人為的突然変異遺伝形質を染色体上に持た
ない。そのため、胞子を形成させる等の分離（セグリゲ
ーション）を人為的または自然におこして一倍体にもど
っても、栄養要求性等の変異遺伝形質を有する子孫株を
生じない。また、いわゆる変異処理の操作が必要でない
ため、対象とする酵母の良い遺伝形質に損傷を与えるお
それがなく、得られる二倍体酵母はパン生地試験でも良
好な結果を与える。
じめ栄養要求性または薬剤耐性マーカー付与等の変異処
理を必要としない。従って、得られた二倍体酵母株は栄
養要求性等の人為的突然変異遺伝形質を染色体上に持た
ない。そのため、胞子を形成させる等の分離（セグリゲ
ーション）を人為的または自然におこして一倍体にもど
っても、栄養要求性等の変異遺伝形質を有する子孫株を
生じない。また、いわゆる変異処理の操作が必要でない
ため、対象とする酵母の良い遺伝形質に損傷を与えるお
それがなく、得られる二倍体酵母はパン生地試験でも良
好な結果を与える。
以下に、トルラスポラ・デルブルッキを用いた場合の二
倍体株造成の実施例と得られた菌株の性質について述べ
る。
倍体株造成の実施例と得られた菌株の性質について述べ
る。
本発明に用いた親株トルラスポラ・デルブルッキＹ−１
３４−５の細胞体積は約１８μm3であるが、下記のよう
にして造成した菌株は５０〜６０μm3であり約３倍大き
い。
３４−５の細胞体積は約１８μm3であるが、下記のよう
にして造成した菌株は５０〜６０μm3であり約３倍大き
い。
実施例 (1) ジメチルスルホキシド処理による大型細胞株の造
成 トルラスポラ・デルブルッキＹ−１３４−５（微工研菌
寄第９０５号）をYPD（１％酵母エキス、１％ポリペプ
トン、２％グルコース）培地に３０℃で好気的に培養し
た。対数生育期菌体を遠心にて集め、高張液Ａ（０．６
MKCl，２０mM Tris，HClにてpH７．５）にて洗浄後、５
mlの高張液Ａに懸濁した。この際、菌数は約４×１０8c
ells／mlとなるよう調節した。２−メルカプトエタノー
ルを菌懸濁液１mlあたり１５μ加え、３０℃にて３０
分間インキユベートした。処理菌体を遠心にて集め、高
張液Ａにて２回洗浄し、２−メルカプトエタノールを完
全に除去した。菌体を５mlの高張液に懸濁し、Zymolyas
e６００００（麒麟麦酒(株)社製）を３mg加え、１時間
インキユベートすると９９％以上プロトプラスト化し
た。プロトプラスト形成率は懸濁液を１滴ずつスライド
グラス上に２個所のせ、片方に１０％Ｎ−ラウロイルザ
ルコシン・ナトリウム溶液を１μ添加し、双方を検鏡
比較することにより目算した。生成したプロトプラスト
は５００×Ｇ、１０分間の遠心により集めた。高張液Ａ
にて２回同様な遠心条件にて洗浄後、プロトプラストを
高張液Ａ５mlに懸濁し、同Ａ液にて１０倍ずつ何段階か
に希釈した。その０．２mlを採取し、４５℃の溶融寒天
（Yeast Nitrogen Base Without Amino Acids（Difco社
製品）に１％グルコース，０．６Ｍ塩化カリウム，２％
寒天を添加したもの）８mlに混入し、あらかじめ固めて
ある同様の組成の寒天平板培地（１５ml）上に重層し
た。この重層寒天平板上にジメチルスルホキシドをしみ
こませた抗生物質用ペーパーディスクを置き、３０℃で
３日間培養した。培養後、ペーパーディスクの周辺に再
生出現したコロニーを採取・検鏡し、大型細胞化したも
のを、常法により２回単一コロニー分離をくり返し、精
製した。ペーパーディスクを置く代りにジメチルスルホ
キシドを寒天再生培地にあらかじめ２．５％均一に含有
させても同じ効果が得られた。
成 トルラスポラ・デルブルッキＹ−１３４−５（微工研菌
寄第９０５号）をYPD（１％酵母エキス、１％ポリペプ
トン、２％グルコース）培地に３０℃で好気的に培養し
た。対数生育期菌体を遠心にて集め、高張液Ａ（０．６
MKCl，２０mM Tris，HClにてpH７．５）にて洗浄後、５
mlの高張液Ａに懸濁した。この際、菌数は約４×１０8c
ells／mlとなるよう調節した。２−メルカプトエタノー
ルを菌懸濁液１mlあたり１５μ加え、３０℃にて３０
分間インキユベートした。処理菌体を遠心にて集め、高
張液Ａにて２回洗浄し、２−メルカプトエタノールを完
全に除去した。菌体を５mlの高張液に懸濁し、Zymolyas
e６００００（麒麟麦酒(株)社製）を３mg加え、１時間
インキユベートすると９９％以上プロトプラスト化し
た。プロトプラスト形成率は懸濁液を１滴ずつスライド
グラス上に２個所のせ、片方に１０％Ｎ−ラウロイルザ
ルコシン・ナトリウム溶液を１μ添加し、双方を検鏡
比較することにより目算した。生成したプロトプラスト
は５００×Ｇ、１０分間の遠心により集めた。高張液Ａ
にて２回同様な遠心条件にて洗浄後、プロトプラストを
高張液Ａ５mlに懸濁し、同Ａ液にて１０倍ずつ何段階か
に希釈した。その０．２mlを採取し、４５℃の溶融寒天
（Yeast Nitrogen Base Without Amino Acids（Difco社
製品）に１％グルコース，０．６Ｍ塩化カリウム，２％
寒天を添加したもの）８mlに混入し、あらかじめ固めて
ある同様の組成の寒天平板培地（１５ml）上に重層し
た。この重層寒天平板上にジメチルスルホキシドをしみ
こませた抗生物質用ペーパーディスクを置き、３０℃で
３日間培養した。培養後、ペーパーディスクの周辺に再
生出現したコロニーを採取・検鏡し、大型細胞化したも
のを、常法により２回単一コロニー分離をくり返し、精
製した。ペーパーディスクを置く代りにジメチルスルホ
キシドを寒天再生培地にあらかじめ２．５％均一に含有
させても同じ効果が得られた。
(2) ０．５mM以下のマグネシウムを含む培地を用いる
大型細胞（倍数体）株の造成 実施例(1)と操作は全く同じであるが、プロトプラスト
を再生させる寒天培地のマグネシウム濃度を低くした。
即ち、実施例(1)で培地構成分として用いたYeast Nitro
gen Base Without Amino Acidsのマグネシウム濃度は該
製品製造元の記述（Difco Manual，第１０改訂版，１１
３６頁，Difco Laboratories Inc.,Michigan，USA）に
従って溶解すると２．０３mMとなる。硫酸マグネシウム
（MgSO4・７H2O）を1/10量とした以外はDifco社製品と
全く同じ組成の培地を自分で作り、これをプロトプラス
ト再生寒天培地の構成分として用いた。換言すればマグ
ネシウム濃度のみ０．２mMとなっている。このような寒
天培地でプロトプラストから再生させたコロニーには大
型細胞化したものがあった。これを前述と同様にして釣
菌・検鏡し、精製した。
大型細胞（倍数体）株の造成 実施例(1)と操作は全く同じであるが、プロトプラスト
を再生させる寒天培地のマグネシウム濃度を低くした。
即ち、実施例(1)で培地構成分として用いたYeast Nitro
gen Base Without Amino Acidsのマグネシウム濃度は該
製品製造元の記述（Difco Manual，第１０改訂版，１１
３６頁，Difco Laboratories Inc.,Michigan，USA）に
従って溶解すると２．０３mMとなる。硫酸マグネシウム
（MgSO4・７H2O）を1/10量とした以外はDifco社製品と
全く同じ組成の培地を自分で作り、これをプロトプラス
ト再生寒天培地の構成分として用いた。換言すればマグ
ネシウム濃度のみ０．２mMとなっている。このような寒
天培地でプロトプラストから再生させたコロニーには大
型細胞化したものがあった。これを前述と同様にして釣
菌・検鏡し、精製した。
なお、低マグネシウム培地にてジメチルスルホキシドを
添加しておくと、大型細胞株の出現頻度は上昇した。
添加しておくと、大型細胞株の出現頻度は上昇した。
(3) 得られた大型細胞株の諸性質 (1)の方法によりプロトプラストを再生させ得られた大
型細胞株のうち、パン生地膨張試験、冷凍耐性に優れて
いた株の１株をトルラスポラ・デルブルッキSANK５１８
８４（微工研菌寄第７８９６号）と命名した。同様に
０．５mM以下のマグネシウムを含む培地にてプロトプラ
ストを再生させることにより得られた大型細胞株のう
ち、優れた性質の株をトルラスポラ・デルブルッキSANK
５１９８４（微工研菌寄第７８９７号）と命名した。
型細胞株のうち、パン生地膨張試験、冷凍耐性に優れて
いた株の１株をトルラスポラ・デルブルッキSANK５１８
８４（微工研菌寄第７８９６号）と命名した。同様に
０．５mM以下のマグネシウムを含む培地にてプロトプラ
ストを再生させることにより得られた大型細胞株のう
ち、優れた性質の株をトルラスポラ・デルブルッキSANK
５１９８４（微工研菌寄第７８９７号）と命名した。
これら菌株の細胞体積は親株Ｙ−１３４−５に較べ約３
倍大きく（表１）、細胞内DNA含量も約２倍となってい
る（表２）。大型化した株は胞子形成が良好であり、胞
子形成用寒天平板培地（１％酢酸カリウム，０．１％酵
母エキス，０．０５％グルコース，２％寒天）上、２日
間、３０℃にて培養すると多数の細胞が１ないし２ケ、
稀に３ケないし４ケの胞子を保有するようになった。こ
れら子嚢を含む菌体を集め、前記とほぼ同様な操作によ
りプロトプラスト化し、これを低張液に入れ破裂させる
ことにより胞子を得ることができる。この胞子を培養す
るともはや細胞は親株Ｙ−１３４−５とほぼ同じ大きさ
になっており、一倍体に戻ることが確認された。しかし
通常の培養を続ける限り、大型細胞株SANK５１８８４及
びSANK５１９８４は細胞の大きさを維持する安定な菌株
であり、大規模培養が可能である。SANK５１８８４及び
SANK５１９８４の生育速度（doubling time）はYPD培
地、３０℃好気的条件下で８４分であり、親株Ｙ−１３
４−５に較べ遜色なく、最終菌体収量も劣らない（表
３）。炭素化合物資化性はSANK５１８８４及びSANK５１
９８４とＹ−１３４−５は全く同じである（表４）。細
胞の大きさ、細胞内DNA含量から、得られた大型細胞株S
ANK５１８８４及びSANK５１９８４は二倍体と結論し
た。その他の菌学的性質は一倍体酵母のそれと一致する
が（前記のN.J.W. Kreger-van Rij，The Yeasts,４３５
頁参照）、胞子形成に際し偽接合管を形成しないこと、
および細胞がそのまま胞子嚢に変換する点において異な
る。
倍大きく（表１）、細胞内DNA含量も約２倍となってい
る（表２）。大型化した株は胞子形成が良好であり、胞
子形成用寒天平板培地（１％酢酸カリウム，０．１％酵
母エキス，０．０５％グルコース，２％寒天）上、２日
間、３０℃にて培養すると多数の細胞が１ないし２ケ、
稀に３ケないし４ケの胞子を保有するようになった。こ
れら子嚢を含む菌体を集め、前記とほぼ同様な操作によ
りプロトプラスト化し、これを低張液に入れ破裂させる
ことにより胞子を得ることができる。この胞子を培養す
るともはや細胞は親株Ｙ−１３４−５とほぼ同じ大きさ
になっており、一倍体に戻ることが確認された。しかし
通常の培養を続ける限り、大型細胞株SANK５１８８４及
びSANK５１９８４は細胞の大きさを維持する安定な菌株
であり、大規模培養が可能である。SANK５１８８４及び
SANK５１９８４の生育速度（doubling time）はYPD培
地、３０℃好気的条件下で８４分であり、親株Ｙ−１３
４−５に較べ遜色なく、最終菌体収量も劣らない（表
３）。炭素化合物資化性はSANK５１８８４及びSANK５１
９８４とＹ−１３４−５は全く同じである（表４）。細
胞の大きさ、細胞内DNA含量から、得られた大型細胞株S
ANK５１８８４及びSANK５１９８４は二倍体と結論し
た。その他の菌学的性質は一倍体酵母のそれと一致する
が（前記のN.J.W. Kreger-van Rij，The Yeasts,４３５
頁参照）、胞子形成に際し偽接合管を形成しないこと、
および細胞がそのまま胞子嚢に変換する点において異な
る。
なお、一般に親株は培養の際、条件が悪いと凝集し、集
菌・脱水が不可能となることがある。一方、大型化した
細胞株SANK５１８８４およびSANK５１９８４には凝集性
はほとんどない。
菌・脱水が不可能となることがある。一方、大型化した
細胞株SANK５１８８４およびSANK５１９８４には凝集性
はほとんどない。
(4) 直接二倍体化の証明 ジメチルスルホキシドの存在下又は０．５mM以下のマグ
ネシウムを含む培地でのプロトプラスト再生により生ず
る大型細胞株が、いわゆるプロトプラスト融合でなく、
細胞分裂の撹乱により生じた直接二倍体化であることは
以下のようにして証明した。
ネシウムを含む培地でのプロトプラスト再生により生ず
る大型細胞株が、いわゆるプロトプラスト融合でなく、
細胞分裂の撹乱により生じた直接二倍体化であることは
以下のようにして証明した。
まずトルラスポラ・デルブルッキＹ−１３４−５をエチ
ルメタンスルホネート処理の常法（石川辰夫編，微生物
遺伝学実験法，１９５頁，共立出版，東京，１９８２
年）により、栄養要求変異株を造成した。即ちトルラス
ポラ・デルブルッキSANK52184（Ade-Ura-）とSANK５２
２８４（Arg-Met-）の二重要求株である。これら菌株か
ら栄養要求解除（野生型表現形質）株は検出されず、復
帰変異率は１０-10以下と推定される。この２株を培養
集菌後、１対１に混合し、(1)と同様にしてプロトプラ
ストとし、(2)の如き０．５mM以下のマグネシウムを含
む寒天培地及びこれに(1)の如く２．５％ジメチルスル
ホキシドを均一に添加した培地にて再生させた。この
際、培地中には各種栄養要求物をあらかじめ添加した。
各要求物を加えた寒天培地での再生コロニー数を表５Ａ
に示した。即ち、SANK５２１８４及びSANK５２２８４
共、再生する。大型細胞形成培地に再生したコロニーを
拾い検鏡すると、かなりの割合で大型細胞株の出現が認
められる。この大型細胞株の要求性を調べると表５Ｂに
みる如くAde-Ura-又はArg-Met-のどちらかであり、プロ
トプラストが融合した場合期待される栄養要求解除株は
全く出現しなかった。
ルメタンスルホネート処理の常法（石川辰夫編，微生物
遺伝学実験法，１９５頁，共立出版，東京，１９８２
年）により、栄養要求変異株を造成した。即ちトルラス
ポラ・デルブルッキSANK52184（Ade-Ura-）とSANK５２
２８４（Arg-Met-）の二重要求株である。これら菌株か
ら栄養要求解除（野生型表現形質）株は検出されず、復
帰変異率は１０-10以下と推定される。この２株を培養
集菌後、１対１に混合し、(1)と同様にしてプロトプラ
ストとし、(2)の如き０．５mM以下のマグネシウムを含
む寒天培地及びこれに(1)の如く２．５％ジメチルスル
ホキシドを均一に添加した培地にて再生させた。この
際、培地中には各種栄養要求物をあらかじめ添加した。
各要求物を加えた寒天培地での再生コロニー数を表５Ａ
に示した。即ち、SANK５２１８４及びSANK５２２８４
共、再生する。大型細胞形成培地に再生したコロニーを
拾い検鏡すると、かなりの割合で大型細胞株の出現が認
められる。この大型細胞株の要求性を調べると表５Ｂに
みる如くAde-Ura-又はArg-Met-のどちらかであり、プロ
トプラストが融合した場合期待される栄養要求解除株は
全く出現しなかった。
参考例 (1) 大型細胞株SANK５１８８４よりケーキ酵母の調製 パン用酵母はケーキ状にして市販されている。ケーキ調
製に要する時間を大型細胞株SANK５１８８４及び親株Ｙ
−１３４−５について比較試験した。SANK５１８８４と
Ｙ−１３４−５を同じ条件下で培養した。即ち、種・生
酵母３５kgを１０トン培養槽に入れ、廃糖蜜、尿素、第
二リン酸ナトリウムを添加供給しながら温度３０℃、pH
５．０〜５．５通気１v.v.m.にて１６時間通気撹拌培養
した。酵母菌体を遠心集菌し、４回洗浄、濃縮して、酵
母クリーム１０００（生酵母５２０kg含有）を得た。
食塩溶液にて処理し回転真空脱水機（デハイドレータ
ー，Alfa-Laval社製）にてケーキ酵母にした。表６に示
すように回転真空脱水機の処理面積８m2あたり、１時間
に処理しうるクリーム酵母量はＹ−１３４−５が１００
０であるに対し、SANK５１８８４は２６００であり
単位面積・時間あたり得られるケーキ酵母量は２．６倍
となっている。即ち、脱水に要する作業時間は１／２．
６と大幅に短縮された。
製に要する時間を大型細胞株SANK５１８８４及び親株Ｙ
−１３４−５について比較試験した。SANK５１８８４と
Ｙ−１３４−５を同じ条件下で培養した。即ち、種・生
酵母３５kgを１０トン培養槽に入れ、廃糖蜜、尿素、第
二リン酸ナトリウムを添加供給しながら温度３０℃、pH
５．０〜５．５通気１v.v.m.にて１６時間通気撹拌培養
した。酵母菌体を遠心集菌し、４回洗浄、濃縮して、酵
母クリーム１０００（生酵母５２０kg含有）を得た。
食塩溶液にて処理し回転真空脱水機（デハイドレータ
ー，Alfa-Laval社製）にてケーキ酵母にした。表６に示
すように回転真空脱水機の処理面積８m2あたり、１時間
に処理しうるクリーム酵母量はＹ−１３４−５が１００
０であるに対し、SANK５１８８４は２６００であり
単位面積・時間あたり得られるケーキ酵母量は２．６倍
となっている。即ち、脱水に要する作業時間は１／２．
６と大幅に短縮された。
(2) 大型細胞株SANK５１８８４の冷凍耐性 上記の如く得られたケーキ酵母を用い、表７に示す配合
と工程でパン生地を作成し、−２０℃にて冷凍後８日目
および１９日目にとり出して解凍し、パン焼成を行なっ
た。SANK５１８８４を用いた場合、焼成パン体積は冷凍
１９日後でも２１８７mlあり、親株Ｙ−１３４−５によ
る２０６５mlに勝った（表７）。
と工程でパン生地を作成し、−２０℃にて冷凍後８日目
および１９日目にとり出して解凍し、パン焼成を行なっ
た。SANK５１８８４を用いた場合、焼成パン体積は冷凍
１９日後でも２１８７mlあり、親株Ｙ−１３４−５によ
る２０６５mlに勝った（表７）。
細胞の長軸および短軸は長軸を２ａ，短軸を２ｂとし、
５０ケの細胞について写真より計測し平均値及び標準偏
差を算出した。体積は細胞が完全な楕円球と仮定し、公
式 より計算した。
５０ケの細胞について写真より計測し平均値及び標準偏
差を算出した。体積は細胞が完全な楕円球と仮定し、公
式 より計算した。
仔牛胸腺DNAを標準とし、ジフェニルアミンを用いる比
色定量にて測定した。Ｙ−１３４−５のDNA含量は約２
３fg/cell。（fg＝１０-15ｇ）。
色定量にて測定した。Ｙ−１３４−５のDNA含量は約２
３fg/cell。（fg＝１０-15ｇ）。
表4. 炭素化合物資化性 試験菌株：Ｙ−１３４−５，SANK５１８８４及びSANK５
１９８４ 資化性有：グルコース，イヌリン，乳酸，Ｄ−マンニッ
ト，ラフィノース，Ｄ−ソルビット，Ｌ−ソルボース，
シュクロース，トレハロース 資化性無：Ｄ−アラビノース，Ｌ−アラビノース，セロ
ビオース，クエン酸，エリスリット，ガラクチット，ガ
ラクトース，ラクトース，マルトース，メレジトース，
メリビオース，α−メチル−Ｄ−グルコシド，ラムノー
ス，アドニット，Ｄ−リボース，サリシン，デンプン，
コハク酸，Ｄ−キシロース 表7. 冷凍貯蔵−解凍後パン焼成体積及びその工程 〔配合〕 小 麦 粉 １００ 砂 糖 ４ 食 塩 ２ 生地改良剤 １．２ ショートニング ４ 酵 母 ６ 水 ６３ 〔工程〕 混捏時間： 捏上温度：２８℃ 前発酵：３０℃，３０分→ガス抜き，成型 冷 凍：−３０℃，６０分急速冷凍→−２０℃貯蔵 解 凍：２６℃，９０分 ホイロ：３８℃，湿度９０％，９０分 焼 成：２２０℃，２５分
１９８４ 資化性有：グルコース，イヌリン，乳酸，Ｄ−マンニッ
ト，ラフィノース，Ｄ−ソルビット，Ｌ−ソルボース，
シュクロース，トレハロース 資化性無：Ｄ−アラビノース，Ｌ−アラビノース，セロ
ビオース，クエン酸，エリスリット，ガラクチット，ガ
ラクトース，ラクトース，マルトース，メレジトース，
メリビオース，α−メチル−Ｄ−グルコシド，ラムノー
ス，アドニット，Ｄ−リボース，サリシン，デンプン，
コハク酸，Ｄ−キシロース 表7. 冷凍貯蔵−解凍後パン焼成体積及びその工程 〔配合〕 小 麦 粉 １００ 砂 糖 ４ 食 塩 ２ 生地改良剤 １．２ ショートニング ４ 酵 母 ６ 水 ６３ 〔工程〕 混捏時間： 捏上温度：２８℃ 前発酵：３０℃，３０分→ガス抜き，成型 冷 凍：−３０℃，６０分急速冷凍→−２０℃貯蔵 解 凍：２６℃，９０分 ホイロ：３８℃，湿度９０％，９０分 焼 成：２２０℃，２５分
Claims (2)
- 【請求項１】栄養要求性の人為的突然変異遺伝形質を染
色体上に持たずに、染色体が二倍体性を有するトルラス
ポラ・デルブルッキに属する大型細胞酵母。 - 【請求項２】トルラスポラ・デルブルッキに属する大型
細胞酵母がトルラスポラ・デルブルッキ SANK 51884
（微工研菌寄第 7896 号）またはトルラスポラ・デルブ
ルッキ SANK 51984 （微工研菌寄第 7897 号）である特
許請求の範囲第１項記載の大型細胞酵母。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59219049A JPH0646940B2 (ja) | 1984-10-18 | 1984-10-18 | トルラスポラ属大型細胞酵母 |
| JP3102750A JPH0771473B2 (ja) | 1984-10-18 | 1991-05-08 | トルラスポラ属大型細胞酵母の育種造成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59219049A JPH0646940B2 (ja) | 1984-10-18 | 1984-10-18 | トルラスポラ属大型細胞酵母 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3102750A Division JPH0771473B2 (ja) | 1984-10-18 | 1991-05-08 | トルラスポラ属大型細胞酵母の育種造成方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6196983A JPS6196983A (ja) | 1986-05-15 |
| JPH0646940B2 true JPH0646940B2 (ja) | 1994-06-22 |
Family
ID=16729457
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59219049A Expired - Lifetime JPH0646940B2 (ja) | 1984-10-18 | 1984-10-18 | トルラスポラ属大型細胞酵母 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0646940B2 (ja) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58155083A (ja) * | 1982-03-09 | 1983-09-14 | Oriental Yeast Co Ltd | 酵母融合株 |
-
1984
- 1984-10-18 JP JP59219049A patent/JPH0646940B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6196983A (ja) | 1986-05-15 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |