JPH0645568B2 - 生理活性物質ｐ−２３９２４、その製造法および製剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、プロトコラーゲン・プロリン水酸化酸素阻害
作用、コラーゲン生合成抑制作用などを有する新規な生
理活性物質Ｐ−２３９２４誘導体，その製造法および製
剤に関する。

プロトコラーゲン・プロリン水酸化酵素は、動物細胞内
のリボゾームで合成されたプロトコラーゲン中のプロリ
ンを特異的に水酸化する酵素であり、コラーゲン生合成
を律速する重要な因子の一つである。従来、本酵素活性
を阻害するものとしては、鉄キレーター（例えばａ，
ａ′−ジピリジルなど）、ＳＨ酵素阻害剤（例えばｐ−
クロロマ−キューリ−ベンゾエートなど）、ある種の重
金属（例えばCu ，Zu など）などが知られているが、
これらの物質はいずれもコラーゲンおよび非コラーゲン
性蛋白質の生合成を非特異的に阻害するために副作用が
大きく、医薬とはなり得なかった。非コラーゲン性蛋白
質の生合成を阻害せず、コラーゲンの生合成のみを特異
的に阻害する物質が見いだされれば、その物質は動脈硬
化症、肝硬変症、強皮症、ケロイド、リューマチ性関節
炎、肺線維症などのコラーゲンの過剰蓄積を伴う臓器線
維症を含めた疾病の予防治療に使用することができる。

本発明者らはプロトコラーゲン・プロリン水酸化酵素活
性を阻害する物質を微生物代謝生産物中に求め、鋭意検
索を行なった結果、コラーゲンの生合成を特異的に抑制
する生理活性物質Ｐ−２３９２４Ａ，ＢおよびＣを見い
だし、またこれら化合物は、それらの還元体へ変換でき
ることを見いだした。

本発明者らは、これらの知見に基づいてさらに研究した
結果、本発明を完成した。

本発明は、(1)一般式 〔式中、Ｒ_１は水素，またはメチルを、Ｒ_２は水素また
はメトキシCOOHをそれぞれ示す。〕で表わされる化合
物， (2)一般式 〔式中、Ｒ_１は水素，またはメチルを、Ｒ_２は水素また
はメトキシをそれぞれ示す。〕で表わされる化合物を還
元反応に付すことを特徴とする一般式（Ｉ）で表わされ
る化合物の製造法，および一般式（Ｉ）で表される化合
物を含有する線維化抑制剤である。

本明細書においては、一般式 で表わされる化合物を、下表のとおり称することもあ
る。

また、本明細書においては、一般式（Ｉ）または（II）
で表わされる化合物を総称して、あるいは単一化合物を
指称して、生理活性物質Ｐ−２３９２４あるいは単にＰ
−２３９２４と称することもある。

本発明方法に使用される微生物は、ストレプトミセス属
に属し、生理活性物質Ｐ−２３９２４Ｂおよび／または
Ｃを生産する能力を有する微生物（以下、「Ｐ−２３９
２４生産菌」と略称することもある。）であればいずれ
でもよい。

その具体例としては、たとえば沖縄県石垣島の土壌から
分離されたストレプトミセス・エスピ−No.２３９２４
株（以下、「No.２３９２４株」と略称することもあ
る。）が挙げられる。

No.２３９２４株について、インターナショナル・ジャ
ーナル・オブ・システマティック・バクテリオロジー
（International Journal of Systematic Bacteriolog
y），１６巻，３号，３１３〜３４０頁（１９６６年）
記載の方法に準じて検討した性状は下記のとおりであ
る。なお、培地上の所見は、特に記載しないかぎり、２
８℃において１４日間培養し、観察したものである。

（Ｉ）形態的特徴 基生菌糸より、らせん状、時により不完全ならせん状、
開放型らせん状、あるいは鈎状に短かい胞子鎖形成菌糸
を単純分枝状に伸長し、輪生枝は認められない。成熟し
た胞子鎖は一般に５〜１０個の胞子の連鎖を認める。胞
子は円筒形ないし楕円形で大きさは０．４〜０．７×
０．７〜１．２μ、その表面は平滑である。

（II）各種培地上での成育状態 各種培地における生育の程度（Ｇ）、気菌糸（ＡＭ）の
生育および色調、可溶性色素（ＳＰ）の有無および色調
などについて以下に列記する。なお、色の記載について
()で示す標準色調記号はコンティナー・コーポレーショ
ン・オブ・アメリカ（Container Corporation of Ameri
ca）のザ・カラー・ハーモニー・マニュアル（The Calo
r Harmony Manual）第４版、１９５８年によった。

(ア)シュークロース・硝酸塩寒天培地 （Ｇ）：貧弱 （AM）：貧弱，淡灰褐色（３ｇｅ） （SP）：なし (イ)グルコース・アスパラギン寒天培地 （Ｇ）：貧弱 （AM）：なし （SP）：なし (ウ)グリセリン・アスパラギン寒天培地 （Ｇ）：なし (エ)スターチ・無機塩寒天培地 （Ｇ）：豊富 （AM）：豊富、粉状、灰色（３ｉｈ） （SP）：黄褐色（４ｇｃ） (オ)チロシン寒天培地 （Ｇ）：貧弱 （AM）：貧弱，灰色（３ｂａ） （SP）：淡黄赤色（４ｅａ） (カ)栄養寒天培地 （Ｇ）：中程度 （AM）：なし （SP）：なし (キ)イースト・麦芽寒天培地 （Ｇ）：中程度 （AM）：貧弱，灰色（３ｆｅ） （SP）：淡黄褐色（４ｎｅ） (ク)オートミール寒天培地 （Ｇ）：中程度 （AM）：貧弱，淡灰褐色（３ｇｅ） （SP）：なし （III）生理的性質 (ア)生育温度範囲：１５〜３５℃ (イ)ゼラチンの液化（グルコース・ペプトン・ゼラチン
培地、２４℃、３週間）：陽性（弱） (ウ)殿粉の加水分解：陽性 (エ)脱脂乳の凝固・ペプトン化：共に陰性 (オ)硝酸塩の還元性：陰性 (カ)メラニン様色素の生成： チロシン寒天培地：凝陽性 ペプトン・イースト鉄寒天培地：陰性 （IV）炭素源の同化性（プリードハム・ゴットリーブ寒
天培地） Ｌ−アラビノース ± イノシトール − Ｄ−キシロース Ｌ−ラムノース− Ｄ−グルコース ラフイノース − Ｄ−フラクトース ± Ｄ−マンニット− シュークロース ± 対照 − （注）：：豊富な生育、±：僅かに生育、 −：生育せず 上記形態的特徴からみて、本菌株がストレプトミセス
（Streptomyces）属に属することは明らかである。

上記No.２３９２４株は、昭和５７年９月２０日に財団
法人発酵研究所（ＩＦＯ）に受託番号ＩＦＯ１４２０５
として寄託されている。また本微生物は昭和５７年１０
月１日に通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所
（ＦＲＩ）に受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−６７３９として寄
託され、該寄託はブダペスト条約に基づく寄託に切換え
られて受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−３３８として同研究所
（ＦＲＩ）に保管されている。

一般に、ストレプトミセス属菌はその性状が変化しやす
く、たとえばＸ線照射，紫外線照射，放射線照射，人工
変異剤を用いる人工変異手段などで容易に変異し得る。
このような変異株であっても、Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂお
よび／またはＣ生産能を有するものはすべて本発明の方
法に使用し得る。

Ｐ−２３９２４生産菌の培養にあたっては、培地は液状
でも固状でもよいが通常は液体培地による振蘯培養また
は通気攪拌培養が便利である。培地は放線菌の生育に適
し、Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂおよび／またはＣを生産させ
得るものであればどのようなものでもよい。すなわち、
炭素源として例えばグルコース，ラクトース，グリセリ
ン，澱粉，シュークロース，デキストリン，糖蜜，有機
酸類（例、酢酸、酒石酸など）など、窒素源としては例
えばペプトン，カザミノ酸（デイフコ社製），Ｎ−Ｚア
ミンＡ（シエフイ−ルド社製）などの蛋白加水分解物、
酵母エキス，麦芽エキス，大豆粕，コーン・スティープ
リカー，アミノ酸類（例、アスパラギン酸，グルタミン
酸など），各種アンモニウム塩（例、硫酸アンモニウ
ム，塩化アンモニウムなど）などが用いられる。無機塩
として各種リン酸塩（例、第一リン酸ナトリウム，第二
リン酸カリウムなど），硫酸マグネシウム，塩化ナトリ
ウム，硫酸第一鉄などの金属塩，重金属塩（例、硫酸マ
ンガン，硫酸亜鉛など）などを添加してもよく、また菌
の生育を促進する目的でビタミン類（例、ビタミン
Ｂ_１，パントテン酸カルシウムなど），該酸関連化合物
（例、アデニン，ウラシルなど）などを添加してもよ
い。また培養方法および培養条件によっては、シリコー
ン，ポリプロピレン・グリコール誘導体（例、アクトコ
ール（武田薬品工業株式会社製）など〕，大豆油などの
消泡剤を培地に加えることにより、Ｐ−２３９２４Ａ，
Ｂおよび／またはＣの生産量を増大させるのに効果的な
場合もある。

培養温度，培養時間，培地の液性などの培養条件は使用
する微生物の種類、培地組成などによって変動するが、
最終的にはＰ−２３９２４Ａ，Ｂおよび／またはＣの生
産量が最大となるよう適当に選択、調節されればよく、
多くの場合好気的条件下に約２０〜４０℃でおよそ２４
時間〜２４０時間培養し、この間培地の液性をpH約４〜
９付近に保つのがよい。

このようにして得られた培養液から生理活性物質Ｐ−２
３９２４Ａ，Ｂおよび／またはＣ採取するにあたっては
本物質の性状に基づいて、種々の方法を適当に組み合わ
せることによって容易に行ないうる。すなわち、例え
ば、中性ないし微酸性で、水と混和しない有機溶媒、例
えば酢酸エチル，酢酸ブチル，クロロホルム，ブタノー
ル，ベンゼン，トルエン，ジエチルエーテル，メチレン
クロライド，メチルイソブチルケトンなどによる抽出、
活性炭，シリカゲル，アルミナなどを用いる吸着クロマ
トグラフィー、セファデックスカラムによるゲル過、
イオン交換樹脂によるイオン交換クロマトグラフィーな
どである。

これらの手段を適当に組み合わせて使用することによ
り、生理活性物質Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂおよび／または
Ｃは培養物から結晶あるいは結晶性粉末として単離され
る。

後述の参考例２で得られた生理活性物質Ｐ−２３９２４
Ａ，ＢおよびＣの理化学的性質を以下に示す。

(a)融点：Ａ １８６〜１８８℃；Ｂ ２００〜２０２
℃；Ｃ １８７〜１９０℃ (b)元素分析値（実測値）： (c)分子量（マス・スペクトルによる）および分子式： (e)溶解性：Ｐ−２３９２４ＡおよびＢはいずれもジメ
チルスルホキシド，ジメチルホルミアミド，ピリジン，
５％炭酸水素ナトリウム水に易容。メタノール，ジオキ
サン，酢酸に可溶。水，アセトン，クロロホルム，ｎ−
ヘキサン，石油エーテルに難溶ないし不溶。Ｐ−２３９
２４Ｃはジメチルスルホキシド，ジメチルホルムアミ
ド，ピリジン，５％炭酸水素ナトリウム水に易溶。メタ
ノール，ジオキサン，アセトン，酢酸に可溶。水，クロ
ロホルム，ｎ−ヘキサン，石油エーテルに (f)紫外部および可視部吸収スペクトル：第１〜第３図
に示す。各溶剤に溶解した直後の極大吸収を示す波長
（ｎｍ）および 値は下記の第１表の通りである。なお、第１〜第３図に
おいて はメタノール中での測定結果を、 は０．１Ｎ HC1−９０％メタノール水中での測定結果
を、 は０．１Ｎ NaOH−９０％メタノール水中での測定結果
をそれぞれ示す。

(g)赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠により測定
した赤外線吸収スペクトルを第４〜６図に示す。極大吸
収を示す主要な波数は次のとおりである。

（）Ｐ−２３９２４Ａ 3300，2930，1710，1665，1640， 1620，1570，1540，1500，1460， 1420，1380，1335，1280，1240， 1200，1180，1110，1040，1000， 970， 900， 860， 800 第４図参照 （）Ｐ−２３９２４Ｂ 3300，2950，1725，1705，1660， 1630，1590，1540，1460，1420， 1370，1330，1300，1270，1210， 1190，1170，1130，1100，1060， 1020， 980， 950， 890， 860， 790， 760， 700 第５図参照 （）Ｐ−２３９２４Ｃ 3400，3070，2940，1720，1680， 1635，1600，1540，1490，1460， 1420，1380，1350，1310，1250， 1220，1180，1120，1100，1040， 990， 930， 880， 820， 800， 705 第６図参照 (h)呈色反応：Ｐ−２３９２４Ａ，ＢおよびＣ，はいず
れも塩化第二鉄反応、アルコール性酢酸マグネシウム反
応、リドン−スミス反応陽性。

ニンヒドリン反応、エールリッヒ反応陰性。

(f)性状：Ｐ−２３９２４Ａ，ＢおよびＣはいずれも酸
性脂溶性であり、黄色ないし黄橙色又は橙黄色の結晶、
結晶性粉末あるいは粉末を示す。

(j)該磁気共鳴スペクトル：４００メガヘルツ、ジメチ
ル−ｄ_６スルホキシド中で測定したスペクトルを第７〜
９図に示す。特徴的ピークを以下に示す。

（）Ｐ−２３９２４Ａ δ DMSO−d₆ppm:１．８６（３Ｈ，ｓ），２．０９ （３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），２．７１（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝８．８，１３，６Ｈｚ），２．９１（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝５．０，１３．６Ｈｚ），３．６６（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），３．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
２．９Ｈｚ），３．９６（３Ｈ，ｓ），４．４７（１
Ｈ，dtlike，Ｊ＝５．０，８．３，８．８Ｈｚ）６．８
９（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）７．０９（１Ｈ，
ｓ），８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），１２．
４０（１Ｈ，ｓ） 第７図参照 （）Ｐ−２３９２４Ｂ δ DMSO−d₆ppm:１．８６（３Ｈ，ｓ），１．９５ （３Ｈ，ｓ），２．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１
３，７Ｈｚ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，１
３．７Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈ
ｚ），３．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ），３．
９５（３Ｈ，ｓ），４．０３（３Ｈ，ｓ），４．４７
（１Ｈ，dtlike，Ｊ＝４．９，８．１，８．８Ｈｚ），
７．１１（１Ｈ，ｓ），８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
１Ｈｚ），１２．５９（１Ｈ，ｓ） 第８図参照 （）Ｐ−２３９２４Ｃ δ DMSO−d₆ppm:１．８５（３Ｈ，ｓ），２．７１（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１３．７Ｈｚ），２．９１（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，１３．７Ｈｚ），３．６６（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２，９Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１２．９Ｈｚ），３．８８（３Ｈ，ｓ），３．９５
（３Ｈ，ｓ），４．４７（１Ｈ，dtlike，Ｊ＝４．９，
８．１，８．８Ｈｚ），６．２６（１Ｈ，ｓ），７．１
５（１Ｈ，ｓ），８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈ
ｚ），１２．７３（１Ｈ，ｓ） 第９図参照 (k)薄層クロマトグラフィーのRf値：シリカゲル・プレ
ート（メルク社製、商品番号5729）および逆相系HPTLC
プレート、ＲＰ−８（メルク社製、商品番号１３７２
５）上でのRf値は下記の通りである。

上記の理化学的諸性質から、Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂおよ
びＣの推定構造式は以下に示される。

化合物（II）は遊離のカルボキシ基を有するので、塩を
形成することができる。該塩を形成するには、自体公知
の方法が用いられる。該塩としてはたとえばカルシウム
塩，マグネシウム塩，バリウム塩，ナトリウム塩，カリ
ウム塩，マンガン塩，鉄塩，銅塩，亜鉛塩などが挙げら
れる。

化合物Ｉは、化合物（II）を還元反応に付すことにより
製造される。

本発明の還元反応は、自体公知の方法を採用すればよ
い。たとえば、接触還元，電解還元，還元剤を用いる還
元などが挙げられる。

接触還元を行なうには、化合物（II）を触媒の存在下に
還元を行なう。化合物（II）をまず溶媒（例、アルコー
ル（例、メタノール，エタノール，イソプロパノー
ル），ジオキサン，テトラハイドロフラン，ジメチルホ
ルムアミドあるいはそれらの混合物など〕に溶かし、触
媒〔例、ラネーニッケル，パラジウム−炭素，パラジウ
ム−炭酸バリウム，酸化白金，ロジウムコンプレック
ス，コバルトのラネー型触媒，鉄のラネー型触媒，銅の
ラネー型触媒など〕の存在下に上記溶液中に水素ガスを
導入する。

本反応は、約２０℃ないし１００℃、さらに好ましくは
約６０℃ないし８０℃の温度で、約１０分ないし１０時
間反応させることにより行なわれる。常圧でも反応は進
行するが、約５ないし２００kg／cm²の加圧下に行なう
と好都合である。

還元剤を用いる還元を行なうには、化合物（II）を、還
元剤〔例、金属水素化合物（例、水素化アルミニウムリ
チウム，水素化ホウ酸ナトリウム，トリブチル錫ハイド
ライドなど），アルカリ金属（例、リチウム，ナトリウ
ムなど），金属塩（例、塩化クロム，酢酸クロムなどの
二価のクロム塩類など），亜鉛，亜鉛アマルガムなど〕
と、溶媒〔例、メタノール，エタノール，ｔ−ブタノー
ル，アミルアルコール，ジメチルホルムアミド，ジオキ
サン，テトラヒドロフラン，ジメチルスルホキシド，エ
チレングリコール，エチレンジアミン，ジエチレントリ
アミンなど〕中で処理することにより行なわれる。本反
応は、約−５０℃ないし１５０℃、さらに好ましくは室
温ないし約８０℃で、約０．５ないし１０時間反応させ
る。

電解還元を行なうには、化合物（II）を適当な溶媒に溶
かし、通常用いられる方法で行なわれる。たとえば、化
合物（II）を溶媒〔例、アルコール（例、メタノール，
エタノール），アンモニア，ジメチルホルムアミドな
ど〕に溶解し、低過電圧電極（例、白金，タングステン
など）または高過電圧電極（例、鉛，亜鉛，水銀など）
を用いて行なわれる。この場合、溶液のpHを酸性側に、
たとえばpH３ないし５に調整すると好都合である。本反
応は、約２０℃ないし１００℃で、さらに好ましくは約
６０ないし８０℃で、約１ないし５時間反応させる。

このようにして得られた化合物（Ｉ）を採取，精製する
にあたっては、本物質の性状に基づいて、種々の方法を
適当に組み合せることによって容易に行ないうる。すな
わち、例えば、中性ないし微酸性で、水と混和しない有
機溶媒、例えば酢酸エチル，酢酸ブチル，クロロホル
ム，ブタノール，ベンゼン，トルエン，ジエチルエーテ
ル，メチレンクロライド，メチルイソブチルケトンなど
による抽出、活性炭，シリカゲル，アルミナなどを用い
る吸着クロマトグラフィー、セファデックスカラムによ
るゲル過、イオン交換樹脂によるイオン交換クロマト
グラフィーなどである。これらの手段を適当に組み合わ
せて使用することにより、化合物Ｉを結晶あるいは結晶
性粉末として精製，単離される。

後述の状態１〜３で得られたＰ−２３９２４ＡＲ，ＢＲ
およびＣＲの物理化学的性質を以下に記載する。

(a)融点： Ｐ−２３９２４AR１４５〜１４９℃；BR１５６〜１５９
℃；CR２１０〜２１２℃ (b)元素分析値（実測値）： (c)分子量（マススペクトルによる）および分子式 (d)比旋光度▲〔ａ〕²³ _D▼（ジメチルスルホキシド中，
ｃ＝０．２０％） AR ０° BR ０° CR ０° (e)溶解性： Ｐ−２３９２４ＡＲ，ＢＲ，ＣＲはいずれもジメチルス
ルホキシド，ピリジン，酢酸エチル，クロロホルム，ジ
オキサンに易溶又は可溶。水，ｎ−ヘキサン，石油エー
テルに難溶又は不溶。

(f)紫外部および可視部吸収スペクトル： 第１０〜１２図に示す。

各溶剤に溶解した直後の極大吸収を示す波数（ｎｍ）お
よび 値は下記の第２表の通りである。なお、第１０〜１２図
において はメタノール中での測定結果を、 は０．１NHCl−９０％メタノール水中での測定結果を、 は０．１N NaOH−９０％メタノール水中での測定結果を
それぞれ示す。

(e)赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠により測定
した赤外線吸収スペクトルを第１３〜１５図に示す。極
大吸収を示す主要な波数は次のとおりである。

(1)AR 3400−3450，2900−3000，1660， 1630，1605，1570，1490，1420， 1370，1330，1310，1275，1240， 1200，1165，1140，1060，1000， 910， 870， 810， 800， 700， 620 第３図参照 (2)BR 3400−3500，2960 1670，1630， 1600，1490，1455，1420，1380， 1330，1290，1230，1220，1150， 1110，1080，1020， 980， 920， 870， 820， 790， 705， 第１４図参照 (3)CR 3400−3450，2930 1680，1640， 1600，1485，1420，1380，1350， 1310，1260，1250，1220，1210， 1140，1120，1015， 980， 960， 920， 870， 850， 790， 710 第１５図参照 (h)呈色反応：Ｐ−２３９２４ＡＲ，ＢＲ，ＣＲはいず
れも塩化第二鉄反応、ハイドロサルファイトによる還元
反応陽性。

ニンヒドリン反応、ｐ−アニスアルデヒド−硫酸反応陰
性。

()性状：Ｐ−２３９２４ＡＲ，ＢＲ，ＣＲはいずれも
弱酸性脂溶性であり、橙色ないし橙赤色ないし赤橙色の
結晶又は結晶性粉末を示す。

(j)該磁気共鳴スペクトル：４００メガヘルツ・ジメチ
ル−ｄ_６・スルホキシド中で測定したスペクトルを第１
６〜１８図に示す。特徴的ピークとその帰属を以下に示
す。

(1)AR δDMSO-d₆ppm：２．０８５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈ
ｚ，２−CH₃），６．８６７（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１．６Ｈ
ｚ，３−Ｈ），７．０５７（１Ｈ，ｓ，５−Ｈ），３．
９５２（３Ｈ，ｓ，６−OCH₃），２．０４９（３Ｈ，
ｓ，７−CH₃），１２．３１４（１Ｈ，ｓ，重水置換に
より消失，８−ＯＨ） 第１６図参照 (2)BR δDMSO-d₆ppm：１．９４９（３Ｈ，ｓ，２−CH₃），
４．０２６（３Ｈ，ｓ，３−OCH₃），７．１００（１
Ｈ，ｓ，５−Ｈ），３．９４９（３Ｈ，ｓ，６−OC
H₃），２．０５３（３Ｈ，ｓ，７−CH₃），１２．５１
０（１Ｈ，ｓ，重水置換により消失，８−ＯＨ） 第１７図参照 (3)CR δDMSO-d₆ppm：６．２４２（１Ｈ，ｓ，２−Ｈ），３．
８７０（３Ｈ，ｓ，３−OCH₃），７．１２７ （１Ｈ，ｓ，５−Ｈ），３．９４９（３Ｈ，ｓ，６−OC
H₃），２．０６３（３Ｈ，ｓ，７−CH₃），１２．６３
１（１Ｈ，ｓ，重水置換により消失，８−ＯＨ） 第１８図参照 (k)薄層クロマトグラフィーのRf値；シリカゲル・プレ
ート（メルク社製，商品番号５７２９）および逆相系HP
TLCプレート，ＲＰ−１８（メルク社製，商品番号１３
７２４）上でのRf値は下記の通りである。

Ｐ−２３９２４の生物学的性質を以下に示す。

(a)プロトコラーゲン・プロリン水酸化酵素阻害作用：
阻害活性の測定はK.I.KivirrikoらおよびJ.Halmeらの方
法〔Journal of Biological Chemistry242，4007（196
7）およびBiochimica et Biophysica Acta 198，460（1
967）〕に準じて、鶏胚より調製した部分精製酵素標品
を使用し、（Pro-Pro-Gly）_５・4H₂O（蛋白質研究奨励
会製，大阪）を基質として、R.E.Rhoadsらの方法〔Meth
ods in Enzymology XVII B，306（1971）〕に準じて行
なった。本法により部分精製酵母１００μｇ（蛋白質と
して）の活性を５０％阻害するのに必要なＰ−２３９２
４の濃度は下記の通りであった。

Ｐ−２３９２４Ａ：６．７×１０^−５Ｍ Ｐ−２３９２４Ｂ：９．５×１０^−５Ｍ Ｐ−２３９２４Ｃ：５．７×１０^−５Ｍ 上記と同様の方法で、Ｐ−２３９２４ＡＲ，ＢＲまたは
ＣＲのプロトコラーゲン・プロリン水酸化酵素阻害作用
を測定した。結果を下表に示す。

上記の結果から明らかなように、P-23924は、プロトコ
ラーゲン・プロリン・水酸化酵素活性を強く阻害する作
用を有する。

(b)コラーゲン生合成抑制作用：T.Ishimaruらの方法〔B
iochemical Pharmacology 31，９１５（１９８２）〕に
準じて、Ｐ−２３９２４を１日１回、６日間、ＳＤ−系
ラット（雌，３週令）の腹腔内に投与し、子宮のコラー
ゲン量および非コラーゲン蛋白質量を対照群と比較し
た。以下の第３表に示したようにＰ−２３９２４はそれ
ぞれコラーゲンの生合成を選択的にかつ有意に抑制し
た。

尚、実験は１群１０匹のラットを使用した。

Ｐ−２３９２４の急性毒性（ＬＤ_５０値（ラット、腹腔
内投与）〕を以下に示す。

Ｐ−２３９２４Ａ：１００〜２００mg／kg，Ｐ−２３９
２４Ｂ：５０〜１００mg／kg，Ｐ−２３９２４Ｃ：１０
０〜２００mg／kg 上記したように、Ｐ−２３９２４は、プロコトラーゲン
・プロリン水酸化酵素阻害作用および選択的なコラーゲ
ン生合成抑制作用を有するので、例えば生化学的試薬あ
るいは動物組織の線維化抑制剤などとして有用である。

すなわち、Ｐ−２３９２４は、哺乳動物（ウサギ，ラッ
ト，マウス，イヌ，ネコ，人など）の臓器線維症の予防
・治療剤としてたとえば肺線維症，肝硬変症，腎硬化
症，動脈硬化症，強皮症，骨髄線維症，慢性関節炎など
の予防・治療のために用いられる。

Ｐ−２３９２４の投与量は対象疾患，症状，投与対象，
投与方法によって異なるが、臓器線維症の予防・治療剤
として投与する場合は哺乳動物１日あたり０．２ないし
２０mg／kgとなる量を１ないし３回に分けて投与され
る。

Ｐ−２３９２４を投与するにあたっては、それ自体ある
いは適宜の薬理的に許容される担体，賦形剤，希釈剤と
混合し、粉剤，顆粒剤，錠剤，カプセル剤，注射剤など
の剤型で経口的または非経口的に投与することができ
る。

上記経口製剤、例えば錠剤を製造する際には、結合剤
（例、ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロ
ピルメチルセルロース，マクロゴールなど），崩壊剤
（例、デンプン，カルボキシメチルセルロースカルシウ
ムなど），賦形剤（例、乳糖，デンプンなど），滑沢剤
（例、ステアリン酸マグネシウム，タルクなど）などを
適宜配合することができる。

また、非経口製剤、たとえば注射剤を製造する際には、
等張化剤（例、ブドウ糖，Ｄ−ソルビトール，Ｄ−マン
ニトール，塩化ナトリウムなど），防腐剤（例、ベンジ
ルアルコール，クロロブタノール，パラオキシ安息香酸
メチル，パラオキシ安息香酸プロピルなど），緩衝剤
（例、リン酸塩緩衝液，酢酸ナトリウム緩衝液など）な
どを適宜配合することができる。

Ｐ−２３９２４は、生化学的試薬として、たとえば動物
の培養細胞におけるコラーゲン生合成の阻害剤として、
あるいはプロトコラーゲン・プロリン水酸化酵素活性に
対する特異的阻害剤として有効に利用できる。

以下に本発明を参考例および実施例によりさらに具体的
に説明する。培地のパーセントは、重量／容量パーセン
トを示す。

参考例１ ストレプトミセス・エスピーNo.２３９２４（IFO １４
２０５，FERM BP−３３８）をグルコース２．０％、グ
リセリン１．０％、生大豆粉０．５％、コーン・スティ
ープ・リカー０．５％、ポリペプトン（大五栄養化学株
式会社製）０．３％、塩化ナトリウム０．３％、炭酸カ
ルシウム０．５％、pH７．０からなる液体培地４００ml
を含む２容坂口フラスコ５本に接種し、２８℃で２日
間往復振盪培養して培養液約２を得た。この培養液を
上記と同一の培地１００を含む２００容タンクに移
し、２８℃で２日間、通気攪拌培養した。得られた培養
液６０を可溶性澱粉４％、脱脂大豆粉２％、チオ硫酸
ナトリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．０５％、リ
ン酸二カリウム０．０５％、塩化カリウム０．０３％
（pH６．０）からなる液体培地１２００を含む２００
０タンクに移殖し、２４℃で５日間通気攪拌培養を行
なった。得られた培養液約１１５０に、トプコパーラ
イト^＃３４（東興パーライト工業株式会社製）１５kgを
加え、ハイフロスーパーセル（ジョンズ・マンビル社
製，米国）３４kgをプレコートしたフイルタープレスを
用いて菌体および固形物を過し、液約１０００を
得た。菌体および固形物は水１５０で洗浄後再過し
て洗液１５０を得た。この液と洗液を合わせ、硫酸
でpH３．０に調整し、1/2容の酢酸エチルを用いて６１
５０型ポドビルニアック抽出装置（ポドビルニアック社
製，米国）により向流抽出した。得られた抽出液約４３
０は１％炭酸水素ナトリウム水1/2容で同じ装置を用
いて転溶し、転溶液２１５を得た。転溶液を硫酸でpH
３．０に調整したのち、再び1/2容の酢酸エチルで抽出
し、1/2容の水で２回繰返し洗浄後、減圧濃縮した。濃
縮液（４００ml）をシリカゲル（メルク社製，西ドイ
ツ）カラム（４．６×６５cm）に流し、酢酸エチル５０
０ml、つづいて１％蓚酸含有酢酸エチル３で溶出し
た。活性区分（約３）を集め、５００mlの水で２回洗
浄したのち減圧下濃縮乾固し、得られた固形物をジメチ
ルスルホキサイド約３００mlに溶解した。この溶液に水
３０mlを加えたのち、Prep PAK−５００／Ｃ_１８ カラ
ムを装着したPrep LC／System５００Ａ型分取用液体ク
ロマトグラフ装置（ウオーターズ社製、米国）に導入
し、メタノール−水（１：１）に混液３、つづいてメ
タノール−水（３：２）混液５、最後にメタノール２
を用いて溶出し、溶出液を５００mlづつ分取した。主
としてＰ−２３９２４Ａ，Ｃ，ＤおよびＥを含有する画
分（フラクション２〜８）３．５と、主としてＰ−２
３９２４Ｂを含有する画分（フラクション９〜１３）
２．５に分けた。Ｐ−２３９２４Ｂ含有画分は室温で
放置すると約２．３ｇの黄橙色のＰ−２３９２４Ｂ結晶
が析出したのでこれを別したのち、母液を減圧濃縮し
て約１とし、1/3溶の酢酸エチルで３回抽出し、抽出
液に無水硫酸ナトリウム５０ｇ添加して脱水後、約３０
mlまで濃縮し、ｎ−ヘキサン２００mlを加えると黄橙色
結晶性のＰ−２３９２４Ｂ粗粉末約７．１ｇがえられ
た。この粗粉末をメタノール溶液から再結晶し、Ｐ−２
３９２４Ｂの結晶約３ｇを得た。Ｐ−２３９２４Ａ，
Ｃ，ＤおよびＥ含有画分を約１００mlまで濃縮し、シリ
カゲル・カラム（４．０×４２cm）に流し、１％蓚酸含
有酢酸エチル２で溶出した。溶出液は１００mlづつ分
散し、主としてＰ−２３９２４ＡおよびＤを含有する画
分（フラクション２〜７）６００mlと、主としてＰ−２
３９２４ＣおよびＥを含有する画分（フラクション８〜
１４）７００mlとに分けた。主としてＰ−２３９２４Ａ
およびＤを含有する画分（６００ml）を水洗後、濃縮乾
固し、メタノール５０mlに溶解し、水５０mlを加えて希
釈したのち、上記と同一の分取用液体クロマトグラフ装
置にかけ、メタノールー水（１：１）混液５．５で溶
出した。溶出液は５００mlづつ分取し、フラクション１
３〜１５までの区分１．５を集め、約７００mlまで減
圧濃縮したのち、２００mlの酢酸エチルを添加して３回
反復抽出した。抽出液を合わせて無水硫酸ナトリウム３
０ｇを添加して脱水後、減圧濃縮し、濃縮液約３０mlに
ｎ−ヘキサン２００mlを加えると、Ｐ−２３９２４Ａお
よびＤを含有する黄橙色粗粉末１．７ｇがえられた。こ
の粗粉末をクロロホルム−酢酸（４：１）混液１００ml
に溶解し、シリカゲル・カラム（３．５×５２cm）に流
し、クロロホルム−酢酸（４：１）混液４００ml、クロ
ロホルム−酢酸（７：３）混液１を用いて溶出した。
溶出液は１０mlづつ分取し、主としてＰ−２３９２４Ａ
を含有する区分（フラクション２５〜２９）主としてＰ
−２３９２４Ｄを含有する区分（フラクション３６〜１
３６）に分けた。Ｐ−２３９２４Ａ含有画分（５０ml）
を減圧下に濃縮乾固し、メタノール２００mlに溶解した
のち、水２００mlを添加し、上記分取用液体クロマトグ
ラフ装置を用いて再クロマトグラフィーを行ないＰ−２
３９２４Ａ区分を集めた。この区分を減圧濃縮後、酢酸
エチルを加えて抽出、脱水したのち濃縮するとＰ−２３
９２４Ａの粗粉末約２５０mgがえられた。この粗粉末を
メタノール溶液から再結晶すると黄橙色のＰ−２３９２
４Ａ結晶約１００mgがえられた。次いでＰ−２３９２４
Ｄを含有する区分１を減圧下に濃縮乾固し、乾固物を
酢酸エチル約５００mlに溶解し、２００mlの水で３回繰
返し洗浄した。洗浄酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウム
５０ｇで脱水後、酢酸エチルを減圧下に留去し、濃縮液
約３０mlにｎ−ヘキサン２００mlを加えると黄橙色のＰ
−２３９２４Ｄ粗粉末約０．７ｇがえられた。この粗粉
末をクロロホルム−酢酸（４：１）混液２５mlに溶解
し、シリカゲル・カラム（３×４５cm）に流し、クロロ
ホルム−酢酸（４：１）混液で溶出し、Ｐ−２３９２４
Ｄ区分を集めた。この区分４００mlを減圧濃縮し、濃縮
液８０mlに水１００mlを加えたのち、1/3溶の酢酸エチ
ルで３回反復抽出した。抽出液を合わせ、水洗、脱水し
たのち、酢酸エチルを留去してえられた粗粉末約５００
mgをメタノール−酢酸エチル（１：５）混液から再結晶
すると黄橙色のＰ−２３９２４Ｄの結晶性粉末約３３０
mgがえられた。次に、シリカゲル・クロマトグラフィー
によってえられた主としてＰ−２３９２４Ｃ，Ｅを含有
する区分（フラクション８〜１４）７００mlを水洗、脱
水後、酢酸エチルを留去し、残渣をメタノール５０mlに
溶解した。この溶液を水で２倍に希釈したのち、分取用
液体クロマトグラフ装置（上記と同一カラム）にかけ、
メタノール−水（１：１）混液に溶出した。溶出液は２
００mlづつ分取し、主としてＰ−２３９２４Ｅを含有す
る区分（フラクション１０〜１３）８００mlとＰ−２３
９２４Ｃを含有する区分（フラクション１４〜１８）１
とに分けた。Ｐ−２３９２４Ｅ含有画分を減圧濃縮
し、1/3溶の酢酸エチルで３回反復抽出、脱水後、約２
０mlまで濃縮し、ｎ−ヘキサン２００mlを添加すると黄
橙色のＰ−２３９２４Ｅの粗粉末約１２０mgがえられ
た。この粗粉末をクロロホルム−メタノール（３：２）
混液３０mlに溶解し、シリカゲル・カラム（３×４５c
m）に流し、クロロホルム−メタノール（３：２）で溶
出し、Ｐ−２３９２４Ｅ含有区分を集めて濃縮し、濃縮
液１０mlに酢酸エチル１０ml、ｎ−ヘキサン５０mlを加
えると黄橙色のＰ−２３９２４Ｅの結晶性粉末約３０mg
がえられた。Ｐ−２３９２４Ｃを含有する画分１は、
減圧下に濃縮乾固し、乾固物をクロロホルム１５mlに溶
解し、シリカゲル・カラム（３．０×４５cm）に流し、
クロロホルム−酢酸（４：１）混液で溶出し、Ｐ−２３
９２４Ｃを含有する区分を集めた。この区分を濃縮乾固
するとＰ−２３９２４Ｃの粗粉末約１５０mgがえられ
た。この粗粉末を酢酸エチル７０mlを加えて溶解し、２
０mlの水で３回繰返し洗浄したのち、無水硫酸ナトリウ
ム２．５ｇを加えて脱水、酢酸エチル溶液を減圧濃縮し
て約１０mlとし、ｎ−ヘキサン２５mlを加えると黄橙色
のＰ−２３９２４Ｃの結晶約８５mgがえられた。

次に前記と全く同じ方法で、培養液から酢酸エチルによ
る抽出，１％炭酸水素ナトリウム水による転溶，酸性側
での酢酸エチルによる抽出，水洗，濃縮等の操作を経て
得られた濃縮液（２００ml）をシリカゲル（メルク社
製、西ドイツ）カラム（４．６×６５cm）に流し、酢酸
エチル２、つづいて１％蓚酸含有酢酸エチル７で溶
出した。主としてＰ−２３９２４Ｆを含有する区分２
を集め、３００mlの水で２回洗浄したのち、減圧下濃縮
乾固し、得られた固形分をクロロホルム−酢酸（９：
１）混液８０mlに溶解した。この溶液をシリカゲルカラ
ム（３．４×５４cm）に流し、クロロホルム−酢酸
（９：１）混液１．２、同（８：２）混液１．２、
同（７：３）混液１．２で溶出し、主としＰ−２３９
２４Ｆを含有する区分（約１．５）を集めて減圧下に
濃縮乾固し、得られた残渣をメタノール−水（１：１）
混液４００mlに溶解したのちPrep PAK−５００／Ｃ_１８
カラムを装着したPrep LC/System５００Ａ型分取用液体
クロマトグラフ装置に導入し、メタノール−水（３：
２）混液５を用いて溶出した。

主としＰ−２３９２４Ｆを含有する区分を集めて減圧下
に濃縮乾固するとＰ−２３９２４Ｆの粗粉末１．３ｇが
得られた。これをメタノール：水（８：２）混液から再
結晶すると黄橙色のＰ−２３９２４Ｆの結晶約５００mg
が得られた。

参考例２ 参考例１と同様の種培養液６０を、可溶性澱粉４％、
デキストリン１％、脱脂大豆粉２％、チオ硫酸ナトリウ
ム０．１％、硫酸第一鉄・７結晶水０．０５％、リン酸
二カリウム０．０５％、塩化カリウム０．０３％pH６．
０からなる液体培地１２００を含む２０００溶タン
クに移植し、２４℃で６日間通気攪拌培養を行なった。
えられた培養液約１１００を実施例１と同様の方法
で、過、酢酸エチル抽出、炭酸水素ナトリウム溶液へ
の転溶、酢酸エチル再抽出したのち、濃縮し、濃縮液７
００mlを得た。この濃縮液をシリカゲル・カラム（５．
４×６cm）に流し、酢酸エチル３で、つづいて１％蓚
酸含有酢酸エチル１０で溶出し、主としてＰ−２３９
２４Ａ，ＢおよびＤを含有する区分２．６と、主とし
てＰ−２３９２４ＣおよびＥを含有する区分４．２
と、主としてＰ−２３９２４Ｆを含有する区分３．０
とに分けた。Ｐ−２３９２４Ａ，ＢおよびＤ含有画分は
水洗、脱水後、酢酸エチルを留去して得られた残渣を２
００mlのメタノールに溶解した。この溶液にジメチルス
ルホキサイド２００mlおよび水２００mlを加え、Prep P
AK−５００／Ｃ_１８カラムを装着したPrep LC/System５
００Ａ型分取用液体クロマトグラフ装置に導入し、メタ
ノール−水（１：１）混液で溶出し、主としてＰ−２３
９２４ＡおよびＤを含有する区分２．５と主としてＰ
−２３９２４Ｂを含有する区分３．１とを集めた。Ｐ
−２３９２４ＡおよびＤ含有区分は上記液体クロマトグ
ラフ装置で再クロマトグラフしたのち、濃縮、酢酸エチ
ル抽出、脱水、濃縮操作を行ない濃縮液５０mlをえた。
これをシリカゲル・カラム（４．５×７０cm）に流し、
ジクロルメタン−酢酸（９：１）混液１．５、同
（８：２）混液５．０、同（７：３）混液２の順に
溶出し、主としてＰ−２３９２４Ａを含有する区分１
とＰ−２３９２４Ｄを含有する区分１．２を集めた。
Ｐ−２３９２４Ａ含有区分を３００mlの水で３回水洗し
たのちジクロルメタン層を分散して濃縮乾固し、乾固物
をメタノール２００mlに溶解し、水２００mlを加えて、
前記と同一の条件で分取用液体クロマトグラフ装置にか
けた。Ｐ−２３９２４Ａ含有区分を集め、濃縮してメタ
ノールを留去し、1/3容酢酸エチルで３回抽出を繰返し
たのち、抽出液を合わせて脱水し、濃縮乾固した。乾固
物をメタノールに溶解し、放置するとＰ−２３９２４Ａ
の結晶３００mgが得られた。つぎにＰ−２３９２４Ｄ含
有区分（１．２）を減圧濃縮し、濃縮液３０mlをシリ
カゲル・カラム（３．５×５０cm）に流し、ジクロルメ
タン−酢酸（９：１）混液１、同（８：２）混液、同
（７：３）混液各１で順次溶出した。主としてＰ−２
３９２４Ｄを含有する区分１．４を集めて減圧下に濃
縮乾固し、乾固物にメタノール２００mlを加えて溶解し
た。この溶液に水２００mlを加え、前記と同一の条件で
分取用液体クロマトグラフを行ない、Ｐ−２３９２４Ｄ
区分２．７を集めた。この画分を減圧下にメタノール
を留去して得た濃縮液１．５に1/3容酢酸エチルを加
えて３回反復抽出したのち、脱水し、約２５mlまで濃縮
放置するとＰ−２３９２４Ｄ結晶約１ｇがえられた。Ｐ
−２３９２４Ｂを含有する画分（３．１）は室温で放
置するとＰ−２３９２４Ｂの結晶が析出した。これを集
めメタノールから再結晶してＰ−２３９２４Ｂの結晶約
３ｇがえられた。次に前記の主としてＰ−２３９２４Ｃ
およびＥを含有する画分（４．２）は１の水を用い
て３回洗浄液、無水硫酸ナトリウム３０ｇを用いて脱
水、酢酸エチルを留去して得られた残渣をメタノール２
００mlに溶解した。これに水２００mlを加えて前記と同
一の条件で液体クロマトグラフを繰返し、Ｐ−２３９２
４Ｅを含有する区分１．８とＰ−２３９２４Ｃを含有
する区分２．４を集めた。Ｐ−２３９２４Ｅ含有画分
１．８は約５０mlまで減圧濃縮し、あらかじめメタノ
ールに懸濁して充填したセファデックスＬＨ−２０（フ
ァルマシア社製、スエーデン）カラム（３．５×５２c
m）に流し、メタノールで溶出し、Ｐ−２３９２４Ｅの
みを含有する区分２００mlを集めた。この画分を減圧濃
縮し、濃縮液２０mlに酢酸エチル２０mlとｎ−ヘキサン
２００mlを加えると黄橙色のＰ−２３９２４Ｅの結晶性
粉末約７００mgが得られた。次に主としてＰ−２３９２
４Ｃを含有する区分２．４を減圧濃縮し、濃縮液１．
２に1/3容の酢酸エチルを加えて３回繰返し抽出した
のち、酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウム２０ｇを用い
て脱水し、酢酸エチルを留去して得られた残渣をメタノ
ールにとかし放置するとＰ−２３９２４Ｃの粗結晶が析
出した。これをメタノールから再結晶すると、Ｐ−２３
９２４Ｃの結晶１．５ｇが得られた。

次に前記の主としてＰ−２３９２４Ｆを含有する区分
（３．０）は水洗、脱水後、酢酸エチルを留去して得
られた残渣をクロロホルム−酢酸（９：１）混液１００
mlに溶解した。この溶液をシリカゲルカラム（３．４×
５４cm）に流し、クロロホルム−酢酸（９：１）混液１
、同（８：２）混液１、同（７：３）混液１の順
に溶出し、主としてＰ−２３９２４Ｆを含有する区分
１．８を集め、濃縮乾固した。乾固物をメタノール−
水（１：１）４００mlに溶解し、Prep PAK−５００／Ｃ
_１８カラムを装着したPrep LC／System５００Ａ型分取
用液体クロマトグラフ装置に導入し、メタノール−水
（３：２）混液で溶出し、主としてＰ−２３９２４Ｆを
含有する区分（２．４）を集めた。これを減圧下に濃
縮するとＰ−２３９２４Ｆの粗結晶が析出した。これを
メタノール：水（３：２）から再結晶するとＰ−２３９
２４Ｆの結晶２．５ｇが得られた。

実施例１ Ｐ−２３９２４Ａ１ｇをメタノール３００mlに溶解し、
溶解液を５００ml容のオートクレープに入れ、ラネーニ
ッケル５ｇを添加したのち、初圧１００kg／cm²、反応
温度７０℃で５時間接触還元した。

反応液を過して触媒を除去したのち液を約２０mlま
で減圧濃縮し、濃縮液を水で希釈して約３００mlとし
た。

この液を１００mlの酢酸エチルで３回抽出を繰返したの
ち、抽出液を５０mlの水で２回水洗したのち、酢酸エチ
ル層を分取脱水後、約２０mlまで減圧濃縮すると橙赤色
のＰ−２３９２４ＡＲの結晶１１９mgが得られた。

実施例２ Ｐ−２３９２４Ｂ２．５ｇをメタノール５００mlに溶解
し、溶解液を１容のオートクレープに入れ、ラネーニ
ッケル１５ｇを添加したのち、初圧１００kg／cm²，反
応温度７０℃で５時間接触還元した。

反応液を過して触媒を除去したのち、液を減圧下で
濃縮乾固した。乾固物を酢酸エチル２５０mlに溶解し、
溶解液を１００mlの水で３回水洗したのち、酢酸エチル
層を分取脱水後、約２５mlまで減圧濃縮すると橙赤色の
Ｐ−２３９２４ＢＲの結晶０．９ｇが得られた。

実施例３ Ｐ−２３９２４Ｃ３ｇをメタノール７００mlに溶解し、
溶解液を１容のオートクレープに入れ、ラネーニッケ
ル１５ｇを添加したのち、初圧１００kg／cm²，反応温
度７０℃で５時間接触還元した。

反応液を過して触媒を除去したのち液を減圧下で濃
縮乾固した。乾固物を酢酸エチル８００mlに溶解し、溶
解液を水３００mlで３回水洗したのち、酢酸エチル層を
分取脱水後、約５０mlまで減圧濃縮すると、橙赤色のＰ
−２３９２４ＣＲの結晶１．２３ｇが得られた。

実施例４ 上記の成分を常法（湿式法）にしたがって打錠し、錠剤
とする。

実施例５ 上記の成分(1)，(2)，(3)および(4)の1/2を混和したの
ち、常法に従って顆粒化する。これに、成分(4)の残り
を加え、常法に従って１号ゼラチンカプセル（第１０改
正日本薬局方）に封入し、カプセル剤とする。

実施例６ 上記の成分を常法（湿式法）にしたがって打錠し、錠剤
とする。

【図面の簡単な説明】

第１図ないし第３図および第１０図ないし１２図は生理
活性物質Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂ，Ｃ，ＡＲ，ＢＲ，およ
びＣＲの紫外部および可視部吸収スペクトルを、第４図
ないし第６図および第１３図ないし第１５図は生理活性
物質Ｐ−２３９２４Ａ，Ｂ，Ｃ，ＡＲ，ＢＲおよびＣＲ
の赤外部吸収スペクトルを、第７図ないし第９図および
第１６図ないし第１８図は生理活性物質Ｐ−２３９２４
Ａ，Ｂ，Ｃ，ＡＲ，ＢＲおよびＣＲの該磁気共鳴スペク
トルをそれぞれ表わす。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/12 ＡＤＤ 9283−4Ｃ Ｃ１２Ｐ 7/66 Ｚ 9282−4Ｂ // Ｃ０７Ｃ 323/59 7419−4Ｈ (Ｃ１２Ｐ 7/66 Ｃ１２Ｒ 1:465）

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 ［式中、Ｒ_１は水素またはメチルを、Ｒ_２は水素または
   メトキシをそれぞれ示す。］で表される化合物。
2. 【請求項２】一般式 ［式中、Ｒ_１は水素またはメチルを、Ｒ_２は水素または
   メトキシをそれぞれ示す。］で表される化合物を還元反
   応に付すことを特徴とする一般式 ［式中、Ｒ_１およびＲ_２は前記と同意義を有する。］で
   表される化合物の製造方法。
3. 【請求項３】一般式 ［式中、Ｒ_１は水素またはメチルを、Ｒ_２は水素または
   メトキシをそれぞれ示す。］で表される化合物を含有す
   る繊維化抑制剤。