JPH0633319B2 - 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 - Google Patents
抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤Info
- Publication number
- JPH0633319B2 JPH0633319B2 JP61118494A JP11849486A JPH0633319B2 JP H0633319 B2 JPH0633319 B2 JP H0633319B2 JP 61118494 A JP61118494 A JP 61118494A JP 11849486 A JP11849486 A JP 11849486A JP H0633319 B2 JPH0633319 B2 JP H0633319B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibiotic
- reaction
- negative
- active ingredient
- methanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、新規抗生物質およびその製造法ならびにこれ
を有効成分とする抗菌剤および制癌剤に関する。
を有効成分とする抗菌剤および制癌剤に関する。
本発明者らは、抗菌性物質を産生する菌を広く自然界よ
り検索した結果、バチルス属に属する新菌株が、新規な
抗生物質ＬＩ−Ｆ０５（以下「ＬＩ−Ｆ０５」という）
を培地中に産生すること、およびＬＩ−Ｆ０５が顕著な
抗菌性および制癌性を有することを見出し、本発明を完
成するに至った。
り検索した結果、バチルス属に属する新菌株が、新規な
抗生物質ＬＩ−Ｆ０５（以下「ＬＩ−Ｆ０５」という）
を培地中に産生すること、およびＬＩ−Ｆ０５が顕著な
抗菌性および制癌性を有することを見出し、本発明を完
成するに至った。
本発明の目的は、新規抗生物質ＬＩ−Ｆ０５およびその
製造法ならびにこれを有効成分として含有する抗菌剤
（特に抗真菌剤、防黴剤および各種植物病害防除剤、細
菌感染症治療剤）および制癌剤を提供することである。
製造法ならびにこれを有効成分として含有する抗菌剤
（特に抗真菌剤、防黴剤および各種植物病害防除剤、細
菌感染症治療剤）および制癌剤を提供することである。
本発明の新規抗生物質ＬＩ−Ｆ０５の生産に用いられる
微生物は、バチルス属に属する抗生物質ＬＩ−Ｆ０５生
産菌であり、その代表的な例としては、小田原市田島で
採取された土壌から分離採取されたバチルス・ポリミキ
サＬ−１１２９株（以下「Ｌ−１１２９株」をいう）お
よびその天然もしくは人工的変異株を挙げることができ
る。Ｌ−１１２９株は昭和６０年１２月１２日付で工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託され、その受託番号
は微工研菌寄第８５６０号である。Ｌ−１１２９株は下
記の菌学的性質を有する。なお、菌学的性質および分類
は、「原核生物」（The Prokaryotes,Springer Verlag
社）、「微生物の分類と同定」（東京大学出版会）に準
じて行った。
微生物は、バチルス属に属する抗生物質ＬＩ−Ｆ０５生
産菌であり、その代表的な例としては、小田原市田島で
採取された土壌から分離採取されたバチルス・ポリミキ
サＬ−１１２９株（以下「Ｌ−１１２９株」をいう）お
よびその天然もしくは人工的変異株を挙げることができ
る。Ｌ−１１２９株は昭和６０年１２月１２日付で工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託され、その受託番号
は微工研菌寄第８５６０号である。Ｌ−１１２９株は下
記の菌学的性質を有する。なお、菌学的性質および分類
は、「原核生物」（The Prokaryotes,Springer Verlag
社）、「微生物の分類と同定」（東京大学出版会）に準
じて行った。
〈Ｌ−１１２９株の菌学的性質〉 Ａ．形態的性質 肉汁培地で３５℃にて１日培養するとき、以下の形態的
特徴が観察される。
特徴が観察される。
1)細胞の形および大きさ：寒天培地上に培養するとき
は、0.8〜1.0×2.0〜6.0ミクロンの直状の桿菌である。
また液体培地中に培養するときは、寒天培地中の形態と
ほぼ同様であるが、長さが１０ミクロン位になるものも
ある。
は、0.8〜1.0×2.0〜6.0ミクロンの直状の桿菌である。
また液体培地中に培養するときは、寒天培地中の形態と
ほぼ同様であるが、長さが１０ミクロン位になるものも
ある。
2)多形性：なし 3)運動性：周鞭毛を有し、運動性あり。
4)胞 子：形成する。胞子嚢は膨出し、胞子は楕円形で
細胞の亜端に形成される。
細胞の亜端に形成される。
5)グラム染色性：３５℃１日培養した寒天培地上の細胞
の多くは、染色性が認められないが、一部認められるも
のがある。
の多くは、染色性が認められないが、一部認められるも
のがある。
6)抗酸性：胞子を形成しない細胞には認められない。
Ｂ．培養的性質 1)肉汁寒天平板培養：無色の円形、非拡散性集落を形成
する。該コロニーは平滑で、周縁はなめらか。色素の産
生は認められない。
する。該コロニーは平滑で、周縁はなめらか。色素の産
生は認められない。
2)肉汁寒天斜面培養無色の円形、非拡散性集落を形成す
る。該コロニーは平滑で周縁はなめらか。色素の産生は
認められない。
る。該コロニーは平滑で周縁はなめらか。色素の産生は
認められない。
3)肉汁液体培養：培地全体に生育が認められ、沈殿も認
められる。
められる。
4)肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺に沿って生育し、上部は
液化する。
液化する。
5)リトマスミルク：凝固し、上部に液化が認められ、培
養時間と共に液化が進行する。
養時間と共に液化が進行する。
Ｃ．生理的性質 1)硝酸塩の還元：陽性 2)脱窒反応：陰性 3)ＭＲテスト：陰性 4)Ｖ−Ｐ反応：陽性 5)インドール生成：陰性 6)硫化水素の生成：陰性 7)デンプンの加水分解：陽性 8)クエン酸の利用：コーナー(Koser)の培地では利用す
る。
る。
クリステンセン(Christensen)の培地では利用する。
9)無機窒素源の利用：硝酸塩は利用する。
アンモニウム塩は利用する。
10)色素の生成：陰性 11)ウレアーゼ：陰性 12)オキシダーゼ：陰性 13)カタラーゼ：陽性 14)生育の温度範囲：３０〜３５℃付近（１５〜４８
℃）が良好 15)生育のpH範囲：７付近（５〜８）が良好 16)酸素に対する態度：通性嫌気性 17)ＯＦテスト（Hugh Leifson法）：発酵性 18)糖類から酸およびガスの生成：（＋；生成する−；
生成しない） Ｄ．その他の性質 1)５％NaCl存在下での発育：発育しない 2)アセトイン生成：陽性 3)カゼイン分解性：陽性 Ｌ−１１２９株は、上記の菌学的性質より、バチルス・
ポリミキサに属するが、既に報告されているペプチド系
抗生物質産生バチルス・ポリミキサおよび後述のＬＩ−
Ｆ０４類似抗生物質であるガタバリン(Gatavaline)生産
菌であるバチルス・コリスチヌスと菌学的性質を比較す
ると、Ｌ−１１２９株はクエン酸塩利用能を有するのに
対し他の株は、それを有しないことより、通常のバチル
ス・ポリミキサとは異なり、新菌株であると結論され
た。その結果を第１表に示す。
℃）が良好 15)生育のpH範囲：７付近（５〜８）が良好 16)酸素に対する態度：通性嫌気性 17)ＯＦテスト（Hugh Leifson法）：発酵性 18)糖類から酸およびガスの生成：（＋；生成する−；
生成しない） Ｄ．その他の性質 1)５％NaCl存在下での発育：発育しない 2)アセトイン生成：陽性 3)カゼイン分解性：陽性 Ｌ−１１２９株は、上記の菌学的性質より、バチルス・
ポリミキサに属するが、既に報告されているペプチド系
抗生物質産生バチルス・ポリミキサおよび後述のＬＩ−
Ｆ０４類似抗生物質であるガタバリン(Gatavaline)生産
菌であるバチルス・コリスチヌスと菌学的性質を比較す
ると、Ｌ−１１２９株はクエン酸塩利用能を有するのに
対し他の株は、それを有しないことより、通常のバチル
ス・ポリミキサとは異なり、新菌株であると結論され
た。その結果を第１表に示す。
〈抗生物質ＬＩ−Ｆ０５の製造法〉 次に本発明の抗生物質ＬＩ−Ｆ０５の製造法について説
明する。ＬＩ−Ｆ０５は、バチルス・ポリミキサＬ−１
１２９（微工研菌寄第８５６０号）またはその天然もし
くは人工的変異株を、培地に培養し、培養物中に蓄積さ
せ培養物から採取することによって得ることができる。
培地としては通常用いられる炭素源、例えばブドウ糖、
グリセリン、麦芽糖、デンプン、ショ糖、糖密、デキス
トリン、馬鈴薯などまたはこれらの混合物が使用され、
窒素源としては、コーンミール、大豆粉、肉エキス、ペ
プトン、酵母エキス、コーンスティープリカー、カゼイ
ン加水分解物、マルトエキストラクト、無機アンモニウ
ム塩など、またはこれらの混合物が使用できる。また培
地に添加できる添加物も通常の無機塩例えば塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム、燐酸塩等でよく、更に鉄、マンガン、亜鉛などの重
金属塩を微量添加することもできる。
明する。ＬＩ−Ｆ０５は、バチルス・ポリミキサＬ−１
１２９（微工研菌寄第８５６０号）またはその天然もし
くは人工的変異株を、培地に培養し、培養物中に蓄積さ
せ培養物から採取することによって得ることができる。
培地としては通常用いられる炭素源、例えばブドウ糖、
グリセリン、麦芽糖、デンプン、ショ糖、糖密、デキス
トリン、馬鈴薯などまたはこれらの混合物が使用され、
窒素源としては、コーンミール、大豆粉、肉エキス、ペ
プトン、酵母エキス、コーンスティープリカー、カゼイ
ン加水分解物、マルトエキストラクト、無機アンモニウ
ム塩など、またはこれらの混合物が使用できる。また培
地に添加できる添加物も通常の無機塩例えば塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム、燐酸塩等でよく、更に鉄、マンガン、亜鉛などの重
金属塩を微量添加することもできる。
培養方法としては、振盪培養法、深部通気攪拌培養等の
液体培地を使用する方法が適当である。培地pHは5.5〜
8.5が好ましく、培養温度は１５〜４５℃の範囲で選択
され、培養時間は２０〜７２時間が適当である。ＬＩ−
Ｆ０５は主として培養液内に蓄積される。
液体培地を使用する方法が適当である。培地pHは5.5〜
8.5が好ましく、培養温度は１５〜４５℃の範囲で選択
され、培養時間は２０〜７２時間が適当である。ＬＩ−
Ｆ０５は主として培養液内に蓄積される。
ＬＩ−Ｆ０５は後記の理化学的性状を有するので、その
性状に従って、常法により各種有機溶媒による抽出、各
種吸着剤によるクロマトグラフィーなどを組合わせて精
製することが可能であり、たとえば以下に示す方法が効
率的である。有効成分を含む培養的を菌体除去後、たと
えば、アンバーライトＸＡＤ−２（ロームアンドハース
社）、ダイヤイオンＨＰ−５０（三菱化成社）などの合
成吸着剤を充てんしたカラムに通過させると、有効成分
は吸着される。
性状に従って、常法により各種有機溶媒による抽出、各
種吸着剤によるクロマトグラフィーなどを組合わせて精
製することが可能であり、たとえば以下に示す方法が効
率的である。有効成分を含む培養的を菌体除去後、たと
えば、アンバーライトＸＡＤ−２（ロームアンドハース
社）、ダイヤイオンＨＰ−５０（三菱化成社）などの合
成吸着剤を充てんしたカラムに通過させると、有効成分
は吸着される。
カラムを脱イオン水で洗浄後有効成分をメタノールで溶
出させる。溶出液を濃縮し、さらに0.01％塩酸に溶解
し、ｎ−ブタノールで抽出すると、有効成分は、ブタノ
ール層に移る。ブタノール層は、濃縮乾固後シリカゲル
カラムクロマトグラフィーを行い、クロロホルム−メタ
ノールで溶出し、有効成分を得る。これを濃縮後メタノ
ールに溶解し、ジエチルエーテルを添加すると、有効成
分は沈殿する。沈殿を乾燥して、粗抽出物を得る。さら
に精製するために液体クロマトグラフィにより分離し、
ＬＩ−Ｆ０５の精製品を得る。
出させる。溶出液を濃縮し、さらに0.01％塩酸に溶解
し、ｎ−ブタノールで抽出すると、有効成分は、ブタノ
ール層に移る。ブタノール層は、濃縮乾固後シリカゲル
カラムクロマトグラフィーを行い、クロロホルム−メタ
ノールで溶出し、有効成分を得る。これを濃縮後メタノ
ールに溶解し、ジエチルエーテルを添加すると、有効成
分は沈殿する。沈殿を乾燥して、粗抽出物を得る。さら
に精製するために液体クロマトグラフィにより分離し、
ＬＩ−Ｆ０５の精製品を得る。
かくして得られた抗生物質ＬＩ−Ｆ０５は下記の理化学
的性質を有する。
的性質を有する。
〈抗生物質ＬＩ−Ｆ０５の理化学的性質〉 元素分析値（％）： Ｃ：45.35，Ｈ：6.49，Ｎ：11.39 分子量*（ＦＡＢ−ＭＳ法）：８９６，９１０ 融点：２２４−２２５℃ 比旋光度▲〔α〕27 D▼（Ｃ＝0.1、メタノール）−1.5
° 紫外線吸収スペクトル：第１図に示すとおり 赤外線吸収スペクトル：第２図に示すとおり 溶剤に対する溶解性：水、メタノール、アセトニトリル
にやや溶け、クロロホルム、アセトン、酢酸エチル、ジ
エチルエーテルには、ほとんど溶けない。
° 紫外線吸収スペクトル：第１図に示すとおり 赤外線吸収スペクトル：第２図に示すとおり 溶剤に対する溶解性：水、メタノール、アセトニトリル
にやや溶け、クロロホルム、アセトン、酢酸エチル、ジ
エチルエーテルには、ほとんど溶けない。
呈色反応 ニンヒドリン反応：陰性 ビウレット反応 ：陽性 エールリッヒ反応：陰性 パ ウ リ 反応：陰性 フェーリング反応：陰性 モーリッシュ反応：陰性 塩基性・酸性・中性の区別：中性 性 状：無色粉末 構成アミノ酸：（６規定の塩酸で１０５℃２２時間分解
し、アミノ酸分析計で分析した結果） アスパラギン酸、スレオニン、グルタミン酸、アラニ
ン、バリン、イソロイシン、未知ニンヒドリン陽性物質 シリカゲル薄層クロマトグラフィーのＲｆ値 〔クロロホルム：メタノール（１：１）〕： 0.71 ペーパークロマトグラフィーのＲｆ値〔ブタノール：酢
酸：水（３：１：１）〕：0.81 ＊２個の親ピークが認められることから、ＬＩ−０５は
分子量の異なる少なくとも２種の物質の混合物と考えら
れる。
し、アミノ酸分析計で分析した結果） アスパラギン酸、スレオニン、グルタミン酸、アラニ
ン、バリン、イソロイシン、未知ニンヒドリン陽性物質 シリカゲル薄層クロマトグラフィーのＲｆ値 〔クロロホルム：メタノール（１：１）〕： 0.71 ペーパークロマトグラフィーのＲｆ値〔ブタノール：酢
酸：水（３：１：１）〕：0.81 ＊２個の親ピークが認められることから、ＬＩ−０５は
分子量の異なる少なくとも２種の物質の混合物と考えら
れる。
ＬＩ−Ｆ０５はペプチド抗生物質である。バチルス属に
属する微生物が産生するペプチド抗生物質は、多数知ら
れているが、とくに構成アミノ酸の種類から、いずれも
本物質とは異なる。従って、バチルス・ポリミキサＬ−
１１２９株の産生する抗生物質ＬＩ−Ｆ０５は、新規抗
生物質であると判定した。
属する微生物が産生するペプチド抗生物質は、多数知ら
れているが、とくに構成アミノ酸の種類から、いずれも
本物質とは異なる。従って、バチルス・ポリミキサＬ−
１１２９株の産生する抗生物質ＬＩ−Ｆ０５は、新規抗
生物質であると判定した。
また、各種微生物に対する最小発育阻止濃度は第２、
３、４表に示したとおりである。
３、４表に示したとおりである。
第２、３、４表に示したように、ＬＩ−Ｆ０５は、カ
ビ、酵母、グラム陽性細菌に対して発育阻止作用を有し
ている。
ビ、酵母、グラム陽性細菌に対して発育阻止作用を有し
ている。
なお、カビ、酵母に対してさらに抗菌力を高めるために
は、既存抗真菌剤との併用が有効である。特にケトコナ
ゾール、ミコナゾール、クロトリマゾールなどのイミダ
ゾール系抗真菌剤との間に相乗作用を有し、併用効果を
有する。
は、既存抗真菌剤との併用が有効である。特にケトコナ
ゾール、ミコナゾール、クロトリマゾールなどのイミダ
ゾール系抗真菌剤との間に相乗作用を有し、併用効果を
有する。
つぎに、マウス白血病細胞（Ｌ１２１０）を、牛胎児血
清１０％を加えたイーグルのＭＥＭ(Minimum Essential
Medium)に接種し（細胞数１０4／ml）、３７℃、２４
時間培養後、１０倍系列に希釈した試料をそれぞれ一定
量加え、ひきつづき３日培養後、細胞数をカウントす
る。その後、各濃度の試料について、細胞の増殖阻止率
を求め、プロビット図解法により、阻止率５０％に対す
る試料濃度を求める。こうして得られた細胞毒性ＥＤ50
は8.5μｇ／mlである。（Murine L1210培養細胞） またマウス（ｄｄＹ雄）腹腔内投与による急性毒性は、
ＬＤ50は１５０〜２００mg／kgである。
清１０％を加えたイーグルのＭＥＭ(Minimum Essential
Medium)に接種し（細胞数１０4／ml）、３７℃、２４
時間培養後、１０倍系列に希釈した試料をそれぞれ一定
量加え、ひきつづき３日培養後、細胞数をカウントす
る。その後、各濃度の試料について、細胞の増殖阻止率
を求め、プロビット図解法により、阻止率５０％に対す
る試料濃度を求める。こうして得られた細胞毒性ＥＤ50
は8.5μｇ／mlである。（Murine L1210培養細胞） またマウス（ｄｄＹ雄）腹腔内投与による急性毒性は、
ＬＤ50は１５０〜２００mg／kgである。
〈抗菌剤〉 本発明の抗生物質は、これを抗真菌剤、細菌感染症治療
剤、等の抗菌剤として用いる場合、そのままで、または
これらを有効成分として慣用の製剤担体と共に、人およ
び動物に投与することができる。本発明の抗菌剤は経口
的にまたは非経口的に投与できる。経口剤としては、錠
剤、顆粒剤、経口用溶液剤等、また非経口剤としては、
液剤、軟膏剤、パップ剤、テープ剤、坐剤等の局所投与
剤、あるいは注射剤があげられる。
剤、等の抗菌剤として用いる場合、そのままで、または
これらを有効成分として慣用の製剤担体と共に、人およ
び動物に投与することができる。本発明の抗菌剤は経口
的にまたは非経口的に投与できる。経口剤としては、錠
剤、顆粒剤、経口用溶液剤等、また非経口剤としては、
液剤、軟膏剤、パップ剤、テープ剤、坐剤等の局所投与
剤、あるいは注射剤があげられる。
投与量は、非経口局所投与剤の場合、患部に有効成分と
して１日体重１kgあたり0.1〜３００mg、１回ないし数
回に分けて投与できる。その他の場合は、１日あたり体
重１kgあたりの有効成分投与量は１〜５００mgで、これ
は１日１回ないし数回に分けて投与できる。
して１日体重１kgあたり0.1〜３００mg、１回ないし数
回に分けて投与できる。その他の場合は、１日あたり体
重１kgあたりの有効成分投与量は１〜５００mgで、これ
は１日１回ないし数回に分けて投与できる。
本発明の抗菌剤に用いる基剤および賦形剤としては、通
常の製剤に使用されているものを使用することができ
る。例えば錠剤は有効成分をゼラチン、デンプン、乳
糖、ステアリン酸マグネシウム、滑石、アラビアゴム等
の賦形剤と混合して賦形される。
常の製剤に使用されているものを使用することができ
る。例えば錠剤は有効成分をゼラチン、デンプン、乳
糖、ステアリン酸マグネシウム、滑石、アラビアゴム等
の賦形剤と混合して賦形される。
液剤は、溶剤として水、エタノール、プロピレングリコ
ール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ソル
ビット、ポリエチレングリコールなどが利用できる。
ール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ソル
ビット、ポリエチレングリコールなどが利用できる。
軟膏には、親水軟膏や吸水軟膏等の乳剤性基剤や、白色
ワセリン軟膏やプラスチックベース軟膏等の油脂性基
剤、またマクロゴール軟膏等の水溶性基剤、さらに水性
または非水性のゲル基剤などが使用できる。
ワセリン軟膏やプラスチックベース軟膏等の油脂性基
剤、またマクロゴール軟膏等の水溶性基剤、さらに水性
または非水性のゲル基剤などが使用できる。
注射剤は水又は塩水に溶解又は懸濁して製造される。
〈制癌剤〉 本発明の抗生物質は、これを制癌剤として用いる場合、
そのままで、またはこれらを有効成分として慣用の制剤
担体と共に、人および動物に投与することができる。本
発明の制癌剤は経口的にまたは非経口的に投与できる。
そのままで、またはこれらを有効成分として慣用の制剤
担体と共に、人および動物に投与することができる。本
発明の制癌剤は経口的にまたは非経口的に投与できる。
経口剤としては錠剤、顆粒剤、溶液剤等が適当であり、
通常１日、体重１kgあたり、１〜３００mgを１回ないし
数回に分けて投与する。また注射剤としての投与量は１
日、体重１kgあたり、0.1〜１００mgが適当である。
通常１日、体重１kgあたり、１〜３００mgを１回ないし
数回に分けて投与する。また注射剤としての投与量は１
日、体重１kgあたり、0.1〜１００mgが適当である。
〈農薬〉 本発明の抗生物質を各種植物病害に対する農薬として使
用する場合、そのままで、好ましくは通常の製剤担体と
共に散布される。剤型としては、溶液、乳剤、水和剤等
の液剤、粉剤、粒剤いずれでもよい。製剤にあたって
は、水、エタノール等の有機溶剤、非イオン系界面活性
剤、アニオン系界面活性剤等の乳化剤、タルク、パイロ
フィライト、ベントナイト等の粘土鉱物、炭酸カルシウ
ム、消石灰、ニカワ、アラビアゴム、デンプン等の担体
を適宜選択し、使用する。投与量は一般に、有効成分と
して１０アールあたり１〜１００ｇが適当である。
用する場合、そのままで、好ましくは通常の製剤担体と
共に散布される。剤型としては、溶液、乳剤、水和剤等
の液剤、粉剤、粒剤いずれでもよい。製剤にあたって
は、水、エタノール等の有機溶剤、非イオン系界面活性
剤、アニオン系界面活性剤等の乳化剤、タルク、パイロ
フィライト、ベントナイト等の粘土鉱物、炭酸カルシウ
ム、消石灰、ニカワ、アラビアゴム、デンプン等の担体
を適宜選択し、使用する。投与量は一般に、有効成分と
して１０アールあたり１〜１００ｇが適当である。
第２表、第３表、第４表に示した最小発育阻止濃度よ
り、本発明の抗生物質ＬＩ−Ｆ０５は、カビ、酵母、グ
ラム陽性細菌に発育阻止作用を有すること、およびその
細胞毒性、急性毒性より、抗菌剤、および制癌剤として
有用である。
り、本発明の抗生物質ＬＩ−Ｆ０５は、カビ、酵母、グ
ラム陽性細菌に発育阻止作用を有すること、およびその
細胞毒性、急性毒性より、抗菌剤、および制癌剤として
有用である。
特に第２表に示したカビ、第３表に示した酵母のうち、
代表的真菌症原因菌であるミクロスポラム属・トリコフ
ィトン属（白癬原因菌）およびスポロトリックス属（ス
ポロトリクム症）、フォンセカエア属（黒色真菌症）、
カンジダ属（カンジダ症）、クリプトコッカス属（クリ
プトコッカス症）、ゲオトリクム属（ゲオトリクム
症）、フザリウム属（角膜真菌症）に発育阻止作用を有
することから抗真菌剤として有用である。
代表的真菌症原因菌であるミクロスポラム属・トリコフ
ィトン属（白癬原因菌）およびスポロトリックス属（ス
ポロトリクム症）、フォンセカエア属（黒色真菌症）、
カンジダ属（カンジダ症）、クリプトコッカス属（クリ
プトコッカス症）、ゲオトリクム属（ゲオトリクム
症）、フザリウム属（角膜真菌症）に発育阻止作用を有
することから抗真菌剤として有用である。
また、第２表に示したペニシリウム属（果実の青カビ病
原因菌）、クラドスポリウム（トマト青カビ病、柑橘の
黒斑病）、フザリウム属（ダイズ・イネ・アマの立枯
病）、ジベレラ属（イネ馬鹿苗病）、ヘルミントスポリ
ウム属（葉枯病）に発育阻止力を示すところから、穀類
および園芸用農薬として有用である。
原因菌）、クラドスポリウム（トマト青カビ病、柑橘の
黒斑病）、フザリウム属（ダイズ・イネ・アマの立枯
病）、ジベレラ属（イネ馬鹿苗病）、ヘルミントスポリ
ウム属（葉枯病）に発育阻止力を示すところから、穀類
および園芸用農薬として有用である。
また、第４表に示したように、グラム陽性菌に対して発
育阻止作用を有しており、グラム陽性菌によりおこされ
る感染疾患の治療剤として有用である。
育阻止作用を有しており、グラム陽性菌によりおこされ
る感染疾患の治療剤として有用である。
さらにマウス白血病細胞に対して増殖阻止作用を有する
ことから制癌剤として有用である。
ことから制癌剤として有用である。
以下本発明を実施例により説明する。
実施例１ ２０ジャーにコーンミール５％、ソリュブルスターチ
１％、酵母エキス0.1％、硫酸アンモニウム0.5％、炭酸
カルシウム１％を含む液体培地を１０投入し、１２０
℃２０分加圧滅菌し、トリプチケースソイ液体培地で培
養したバチルスポリミキサＬ−１１２９株（微工研菌寄
８５６０号）を２００ml植菌した。３０℃で２０時間培
養して遠心分離で菌体除去後、本抗生物質を含む培養的
７を得た。この培養液をアンバーライトＸＡＤ−２
（ロームアンドハース社３を充てんしたカラムに通過
させると有効成分は樹脂に吸着される。このカラムを水
で洗浄後、メタノールで有効成分を溶出させ、減圧濃縮
する。この濃縮した有効成分を２の0.01％塩酸水溶液
に溶解し、２のｎ−ブタノールで２回抽出すると有効
成分は、ｎ−ブタノール層に移る。ｎ−ブタノール層は
減圧濃縮後シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ
クロロホルム−メタノールで有効成分を溶出させる。有
効成分は、クロロホルム：メタノール＝４：１からクロ
ロホルム−メタノール＝１：１の範囲で特に溶出され
る。有効成分を集め、減圧濃縮乾固後メタノール４０ml
に溶解し、次に500mlのジエチルエーテルを加えて沈殿
させる。沈殿は、減圧したデシケーター中で乾固し、粗
抽出物４００mgを得る。続いて、高速液体クロマトグラ
フィーにより、精製を行なう。すなわち、カラムは、Co
smosil５Ｃ１８、１０×２５０mm（半井化学社製）を使
用し、移動溶媒に水：アセトニトリル＝７：４（0.05％
トリフロロ酢酸）、流量3.0ml／min、検出は２１０nmの
吸収で行う。保持時間１３分から１６分までのフラクシ
ョンを分取し、減圧濃縮後、凍結乾燥し、ＬＩ−Ｆ０５
の白色粉末５２mgを得る。
１％、酵母エキス0.1％、硫酸アンモニウム0.5％、炭酸
カルシウム１％を含む液体培地を１０投入し、１２０
℃２０分加圧滅菌し、トリプチケースソイ液体培地で培
養したバチルスポリミキサＬ−１１２９株（微工研菌寄
８５６０号）を２００ml植菌した。３０℃で２０時間培
養して遠心分離で菌体除去後、本抗生物質を含む培養的
７を得た。この培養液をアンバーライトＸＡＤ−２
（ロームアンドハース社３を充てんしたカラムに通過
させると有効成分は樹脂に吸着される。このカラムを水
で洗浄後、メタノールで有効成分を溶出させ、減圧濃縮
する。この濃縮した有効成分を２の0.01％塩酸水溶液
に溶解し、２のｎ−ブタノールで２回抽出すると有効
成分は、ｎ−ブタノール層に移る。ｎ−ブタノール層は
減圧濃縮後シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ
クロロホルム−メタノールで有効成分を溶出させる。有
効成分は、クロロホルム：メタノール＝４：１からクロ
ロホルム−メタノール＝１：１の範囲で特に溶出され
る。有効成分を集め、減圧濃縮乾固後メタノール４０ml
に溶解し、次に500mlのジエチルエーテルを加えて沈殿
させる。沈殿は、減圧したデシケーター中で乾固し、粗
抽出物４００mgを得る。続いて、高速液体クロマトグラ
フィーにより、精製を行なう。すなわち、カラムは、Co
smosil５Ｃ１８、１０×２５０mm（半井化学社製）を使
用し、移動溶媒に水：アセトニトリル＝７：４（0.05％
トリフロロ酢酸）、流量3.0ml／min、検出は２１０nmの
吸収で行う。保持時間１３分から１６分までのフラクシ
ョンを分取し、減圧濃縮後、凍結乾燥し、ＬＩ−Ｆ０５
の白色粉末５２mgを得る。
実施例２ ２０ジャーにポテト浸出液２０％、グルコース２％、
リン酸１水素カリウム0.05％を含む液体培地１２を投
入し、１２０°２０分加圧滅菌し、トリプチケースソイ
液体培地で培養したバチルスポリミキサＬ−１１２９
（微工研菌寄8560号）を種母として２００ml加え培養し
た。３０°で３０時間培養して培養液にエタノール１０
を加え、培養中に生じる粘性物質を沈殿させ除去す
る。得られた有効成分を含む上清１５を減圧濃縮して
５にし、0.5mlの濃塩酸を加え、つぎに同量のｎ−ブ
タノールを加え抽出する。ｎ−ブタノール層は、つぎに
水、５％炭酸１水素ナトリウムで抽出を行い、不純物を
除去する。有効成分を含むブタノール層は減圧濃縮し、
シリカゲルカラムクロマトグラフィーを行なう。クロロ
ホルム−メタノールで溶出すると、有効成分はクロロホ
ルム：メタノール＝４：１からクロロホルム：メタノー
ル＝１：１の範囲で特に溶出される。有効成分を含む区
分を集め、減圧濃縮後、メタノール４０mlに溶解し、つ
ぎに５００mlのジエチルエーテルを加えて沈殿させる。
沈殿は減圧にしたデシケーター中で乾固し、粗抽出物３
２０mgを得る。つづいて高速液体クロマトグラフィーに
より精製を行う。すなわち、カラムはCosmosil５Ｃ１
８、１０×２５０mm（半井化学社製）を使用し、移動溶
媒に水：アセトニトリル＝７：４（0.05％トリフロロ酢
酸）流量３ml／min、検出は２１０nmの吸収で行なう。
保持時間１３分から１６分までのフラクションを分取
し、減圧濃縮後凍結乾燥し、ＬＩ−Ｆ０５の白色粉末４
２mgを得る。
リン酸１水素カリウム0.05％を含む液体培地１２を投
入し、１２０°２０分加圧滅菌し、トリプチケースソイ
液体培地で培養したバチルスポリミキサＬ−１１２９
（微工研菌寄8560号）を種母として２００ml加え培養し
た。３０°で３０時間培養して培養液にエタノール１０
を加え、培養中に生じる粘性物質を沈殿させ除去す
る。得られた有効成分を含む上清１５を減圧濃縮して
５にし、0.5mlの濃塩酸を加え、つぎに同量のｎ−ブ
タノールを加え抽出する。ｎ−ブタノール層は、つぎに
水、５％炭酸１水素ナトリウムで抽出を行い、不純物を
除去する。有効成分を含むブタノール層は減圧濃縮し、
シリカゲルカラムクロマトグラフィーを行なう。クロロ
ホルム−メタノールで溶出すると、有効成分はクロロホ
ルム：メタノール＝４：１からクロロホルム：メタノー
ル＝１：１の範囲で特に溶出される。有効成分を含む区
分を集め、減圧濃縮後、メタノール４０mlに溶解し、つ
ぎに５００mlのジエチルエーテルを加えて沈殿させる。
沈殿は減圧にしたデシケーター中で乾固し、粗抽出物３
２０mgを得る。つづいて高速液体クロマトグラフィーに
より精製を行う。すなわち、カラムはCosmosil５Ｃ１
８、１０×２５０mm（半井化学社製）を使用し、移動溶
媒に水：アセトニトリル＝７：４（0.05％トリフロロ酢
酸）流量３ml／min、検出は２１０nmの吸収で行なう。
保持時間１３分から１６分までのフラクションを分取
し、減圧濃縮後凍結乾燥し、ＬＩ−Ｆ０５の白色粉末４
２mgを得る。
第１図はＬＩ−Ｆ０５の紫外線吸収スペクトルで0.0125
％の濃度にメタノールに溶解して測定したものである。 第２図はＬＩ−Ｆ０５の赤外線吸収スペクトルで臭化カ
リウム錠として測定したものである。
％の濃度にメタノールに溶解して測定したものである。 第２図はＬＩ−Ｆ０５の赤外線吸収スペクトルで臭化カ
リウム錠として測定したものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:07）
Claims (4)
- 【請求項１】下記の理化学的性質を有する抗生物質ＬＩ
−Ｆ０５。 元素分析値（％）： Ｃ：45.35，Ｈ：6.49，Ｎ：11.39 分子量（ＦＡＢ−ＭＳ法）：８９６，９１０ 融点：２２４−２２５℃ 比旋光度▲〔α〕27 D▼（Ｃ＝0.1、メタノール）−1.5
° 赤外線吸収スペクトル（KBr）：３３００， １６５０，１５５０cm1 溶剤に対する溶解性：水、メタノール、アセトニトリル
にやや溶け、クロロホルム、アセトン、酢酸エチル、ジ
エチルエーテルには、ほとんど溶けない。 呈色反応 ニンヒドリン反応：陰性 ビウレット反応 ：陽性 エールリッヒ反応：陰性 パ ウ リ 反応：陰性 フェーリング反応：陰性 モーリッシュ反応：陰性 塩基性・酸性・中性の区別：中性 性状：無色粉末 構成アミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、グルタミ
ン酸、アラニン、バリン、イソロイシン、未知ニンヒド
リン陽性物質 - 【請求項２】バチルス属に属する抗生物質ＬＩ−Ｆ０５
生産菌を培養し、培養物から抗生物質LI−Ｆ０５を採取
することを特徴とする抗生物質ＬＩ−Ｆ０５の製造法。 - 【請求項３】抗生物質ＬＩ−Ｆ０５を有効成分として含
有する抗菌剤。 - 【請求項４】抗生物質ＬＩ−Ｆ０５を有効成分として含
有する制癌剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61118494A JPH0633319B2 (ja) | 1986-05-23 | 1986-05-23 | 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61118494A JPH0633319B2 (ja) | 1986-05-23 | 1986-05-23 | 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62273998A JPS62273998A (ja) | 1987-11-28 |
| JPH0633319B2 true JPH0633319B2 (ja) | 1994-05-02 |
Family
ID=14738059
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61118494A Expired - Lifetime JPH0633319B2 (ja) | 1986-05-23 | 1986-05-23 | 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0633319B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08171820A (ja) * | 1994-12-16 | 1996-07-02 | Fuji Densen Kk | 防災用通信ケーブル |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20210085752A1 (en) * | 2017-03-27 | 2021-03-25 | Tenfold Technologies, LLC | Anti-pathogen composition and methods of use thereof |
| CA3168036A1 (en) | 2017-03-27 | 2018-10-04 | Tenfold Technologies, LLC | Methods and agricultural compositions for preventing or controlling plant diseases |
-
1986
- 1986-05-23 JP JP61118494A patent/JPH0633319B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08171820A (ja) * | 1994-12-16 | 1996-07-02 | Fuji Densen Kk | 防災用通信ケーブル |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62273998A (ja) | 1987-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH035398B2 (ja) | ||
| GB2084999A (en) | New antibiotic bmg162-af2 a process for production thereof and antitumor drug containing said new antibiotic as active ingredient | |
| JPS6133558B2 (ja) | ||
| Kuroda et al. | FR-900130, a novel amino acid antibiotic I. discovery, taxonomy, isolation, and properties | |
| CN101628931A (zh) | 一种抗肿瘤抗生素和其药学上可接受的盐、及其制备方法和用途 | |
| US4409210A (en) | Antibiotic compound | |
| JPH0633319B2 (ja) | 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 | |
| EP0668358B1 (en) | Antibiotic WAP-8294A, method for preparing the same and antibacterial composition | |
| JPH01193265A (ja) | 新規抗腫瘍性抗生物質ｓｆ２５８７物質及びその製造法 | |
| GB2084158A (en) | Peptide and production thereof | |
| JPS62273999A (ja) | 抗生物質ｌｉ−ｆ０５およびその製造法、抗菌剤ならびに制癌剤 | |
| JP2594167B2 (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２６９８物質およびその製造法 | |
| AU705610B2 (en) | Antibiotic WAP-8294A, method for preparing the same and antibacterial composition | |
| JPS62275677A (ja) | バチルス属微生物 | |
| EP0159004A2 (en) | Antibiotics do-248-A and B and process for preparing the same | |
| JPH03188098A (ja) | 抗生物質プラスバシン | |
| IE913058A1 (en) | Antibiotic ge1655 complex and its factors a, b, and c | |
| JPS5831918B2 (ja) | 新規抗生物質ポリミキシンｓ↓１ | |
| JPH02288890A (ja) | 新規生理活性物質ｏｆ４９４９及びその製造法 | |
| JPS6250474B2 (ja) | ||
| KR830002206B1 (ko) | 신항생물질 sf-2052 물질의 제조법 | |
| JPS5946502B2 (ja) | 新規抗生物質ポリミキシンｔ↓１ | |
| JPS601320B2 (ja) | 抗生物質ｂａ―８４３ | |
| JPS62258394A (ja) | 抗生物質ｔａｎ−７４９，その製造法およびそれを含有する細菌感染症治療剤 | |
| JPH05194571A (ja) | 新規抗生物質ｎｋ３７４１８６ａ、ｎｋ３７４１８６ｂ、ｎｋ３７４１８６ｂ３及びｎｋ３７４１８６ｃ３、その製造法及びその用途 |