JPH06228171A - スフィンゴミエリンの精製方法 - Google Patents
スフィンゴミエリンの精製方法Info
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- JPH06228171A JPH06228171A JP4190293A JP4190293A JPH06228171A JP H06228171 A JPH06228171 A JP H06228171A JP 4190293 A JP4190293 A JP 4190293A JP 4190293 A JP4190293 A JP 4190293A JP H06228171 A JPH06228171 A JP H06228171A
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- Japan
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- sphingomyelin
- lysolecithin
- purifying
- carrier
- egg yolk
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- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/50—Reuse, recycling or recovery technologies
- Y02W30/74—Recovery of fats, fatty oils, fatty acids or other fatty substances, e.g. lanolin or waxes
Landscapes
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 今まで分離精製が困難であったスフィンゴミ
エリンを、極めて高純度に、かつ高回収率で精製するこ
とが可能で、さらに容易にスケールアップができる。 【構成】 スフィンゴミエリンとリゾリン脂質の混合物
であるリゾレシチンを、非極性担体を充填したカラムに
供し、極性溶媒を溶出液としてスフィンゴミエリンとリ
ゾレシチンを分離することにより、高純度のスフィンゴ
ミエリン得る。
エリンを、極めて高純度に、かつ高回収率で精製するこ
とが可能で、さらに容易にスケールアップができる。 【構成】 スフィンゴミエリンとリゾリン脂質の混合物
であるリゾレシチンを、非極性担体を充填したカラムに
供し、極性溶媒を溶出液としてスフィンゴミエリンとリ
ゾレシチンを分離することにより、高純度のスフィンゴ
ミエリン得る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、スケールアップが容易
で且つ効率的に高純度のスフィンゴミエリンを得ること
のできる精製法に関する。
で且つ効率的に高純度のスフィンゴミエリンを得ること
のできる精製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】本発明において、スフィンゴミエリンと
は、スフィンゴシン骨格のアミノ基に、脂肪酸がエステ
ル結合して成るセラミドに、ホスホコリンが結合した化
合物であり、セラミド−１−ホスホコリンとも呼ばれる
スフィンゴリン脂質の一つである。本発明において、卵
黄または大豆リゾレシチンとは、リゾホスファチジルコ
リンやリゾホスファチジルエタノールアミン等に代表さ
れるリゾ型リン脂質を主要成分として含有するリゾリン
脂質混合物中に、スフィンゴミエリンを含有するリン脂
質の事であり、一般的に卵黄または大豆レシチンより常
法により得られる。スフィンゴミエリンの精製法とし
て、スフィンゴミエリン、グリセロリン脂質、スフィン
ゴ糖脂質等の混合物である豚脳抽出物をアルカリ加水分
解することで、共存するグリセロリン脂質をケン化除去
した後、スフィンゴミエリンを精製する方法が一般的に
知られている（新生化学実験講座４、脂質II、リン脂
質、Ｐ．１９９）。また、シリカゲルカラムを用いたク
ロマトグラフィーにより、分離する技術が知られてい
る。（Ｓ．Ｓ．Ｈ．Ｃｈｅｎ，Ａ．Ｙ．Ｋｏｕ；Ｊ．Ｃ
ｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２２７，２５，（１９８２））
は、スフィンゴシン骨格のアミノ基に、脂肪酸がエステ
ル結合して成るセラミドに、ホスホコリンが結合した化
合物であり、セラミド−１−ホスホコリンとも呼ばれる
スフィンゴリン脂質の一つである。本発明において、卵
黄または大豆リゾレシチンとは、リゾホスファチジルコ
リンやリゾホスファチジルエタノールアミン等に代表さ
れるリゾ型リン脂質を主要成分として含有するリゾリン
脂質混合物中に、スフィンゴミエリンを含有するリン脂
質の事であり、一般的に卵黄または大豆レシチンより常
法により得られる。スフィンゴミエリンの精製法とし
て、スフィンゴミエリン、グリセロリン脂質、スフィン
ゴ糖脂質等の混合物である豚脳抽出物をアルカリ加水分
解することで、共存するグリセロリン脂質をケン化除去
した後、スフィンゴミエリンを精製する方法が一般的に
知られている（新生化学実験講座４、脂質II、リン脂
質、Ｐ．１９９）。また、シリカゲルカラムを用いたク
ロマトグラフィーにより、分離する技術が知られてい
る。（Ｓ．Ｓ．Ｈ．Ｃｈｅｎ，Ａ．Ｙ．Ｋｏｕ；Ｊ．Ｃ
ｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２２７，２５，（１９８２））
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、豚脳抽
出物のアルカリ加水分解によるスフィンゴミエリンの分
離方法、すなわちスフィンゴミエリンとグリセロリン脂
質との混合物から、グリセロリン脂質を加水分解除去し
てスフィンゴミエリンを分離する方法では、グリセロリ
ン脂質の有効利用が図れず効率も良くない。また、シリ
カゲルクロマトグラフィーにより、卵黄または大豆レシ
チンからスフィンゴミエリンを分離精製する方法は、２
成分以下の簡単な組成の溶出液では、スフィンゴミエリ
ンがホスファチジルコリンと同じ様な挙動を示すため、
十分な分離能が得られない。そのため十分な分離能を得
るには、溶出液に酸やアルカリを添加するか、もしくは
３成分以上の複雑な溶出条件でのクロマトグラフィーが
必要となるという欠点を有しており、実用的な手段とは
言いがたい。また、ＯＤＳ等の非極性担体を充填したカ
ラムを用いたクロマトグラフィーにより、卵黄または大
豆レシチンからスフィンゴミエリンを分離しようとして
も、実験室レベルでのリン脂質の構成脂肪酸による分子
種間の分離は可能であるが、ホスファチジルコリンやス
フィンゴミエリンといったリン脂質クラスによって分離
することは不可能であった。本発明が解決しようとする
課題は、卵黄または大豆リゾレシチンを原料とし、共存
するグリセロリン脂質の有効利用が可能で、かつ工業化
の可能な効率的なスフィンゴミエリンの精製方法を提供
することにある。
出物のアルカリ加水分解によるスフィンゴミエリンの分
離方法、すなわちスフィンゴミエリンとグリセロリン脂
質との混合物から、グリセロリン脂質を加水分解除去し
てスフィンゴミエリンを分離する方法では、グリセロリ
ン脂質の有効利用が図れず効率も良くない。また、シリ
カゲルクロマトグラフィーにより、卵黄または大豆レシ
チンからスフィンゴミエリンを分離精製する方法は、２
成分以下の簡単な組成の溶出液では、スフィンゴミエリ
ンがホスファチジルコリンと同じ様な挙動を示すため、
十分な分離能が得られない。そのため十分な分離能を得
るには、溶出液に酸やアルカリを添加するか、もしくは
３成分以上の複雑な溶出条件でのクロマトグラフィーが
必要となるという欠点を有しており、実用的な手段とは
言いがたい。また、ＯＤＳ等の非極性担体を充填したカ
ラムを用いたクロマトグラフィーにより、卵黄または大
豆レシチンからスフィンゴミエリンを分離しようとして
も、実験室レベルでのリン脂質の構成脂肪酸による分子
種間の分離は可能であるが、ホスファチジルコリンやス
フィンゴミエリンといったリン脂質クラスによって分離
することは不可能であった。本発明が解決しようとする
課題は、卵黄または大豆リゾレシチンを原料とし、共存
するグリセロリン脂質の有効利用が可能で、かつ工業化
の可能な効率的なスフィンゴミエリンの精製方法を提供
することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を克服すべく、鋭意研究した結果、スフィンゴミエリ
ンとグリセロリン脂質との混合物、例えば卵黄または大
豆レシチンからスフィンゴミエリンを分離精製すること
は、非常に困難であるが、スフィンゴミエリンとリゾ型
リン脂質との混合物すなわち卵黄または大豆リゾレシチ
ンを、非極性担体に接触させる事により、スフィンゴミ
エリンを容易に精製できる事を初めて見いだし本発明を
完成させるに至った。すなわち本発明は、卵黄または大
豆リゾレシチンから、非極性担体を充填したカラムを用
い、極性溶媒を溶出液としてスフィンゴミエリンを溶出
する事による、スフィンゴミエリンの精製方法に関す
る。本発明において、原料であるリゾレシチン中のスフ
ィンゴミエリン含量は特に限定されないが、好ましくは
５％以上含有している方が良く、さらに好ましくは１０
％以上含有している方が、精製しやすい。
題を克服すべく、鋭意研究した結果、スフィンゴミエリ
ンとグリセロリン脂質との混合物、例えば卵黄または大
豆レシチンからスフィンゴミエリンを分離精製すること
は、非常に困難であるが、スフィンゴミエリンとリゾ型
リン脂質との混合物すなわち卵黄または大豆リゾレシチ
ンを、非極性担体に接触させる事により、スフィンゴミ
エリンを容易に精製できる事を初めて見いだし本発明を
完成させるに至った。すなわち本発明は、卵黄または大
豆リゾレシチンから、非極性担体を充填したカラムを用
い、極性溶媒を溶出液としてスフィンゴミエリンを溶出
する事による、スフィンゴミエリンの精製方法に関す
る。本発明において、原料であるリゾレシチン中のスフ
ィンゴミエリン含量は特に限定されないが、好ましくは
５％以上含有している方が良く、さらに好ましくは１０
％以上含有している方が、精製しやすい。
【０００５】本発明において、非極性担体とはグリセロ
リン脂質やスフィンゴリン脂質の脂肪酸鎖を認識するも
のであれば特に限定されないが、その中でもＣ８〜Ｃ１
８の炭素鎖を有する脂肪酸基で修飾されるシリカゲルを
使用するのが好ましく、さらに工業的な供給面を考慮す
るとＣ１８の炭素鎖を有する脂肪酸基により修飾されて
いるシリカゲルを使用するのが良い。本発明において炭
素数１〜５の低級アルコールとは、直鎖もしくは分枝型
アルコールを指しそれらいずれの物でも差し支えなく使
用する事が出来るが、中でも炭素数１〜３のアルコール
がより好ましく、メタノールまたはエタノールを用いる
のがさらに好ましい。スフィンゴミエリンはリゾレシチ
ンを非極性担体に接触させてリゾレシチンを担体に吸着
させた後に、炭素数１〜５の低級アルコール、もしくは
炭素数１〜５の低級アルコールと水の混合溶媒によって
スフィンゴミエリンを担体から脱離させるという一連の
操作を行う事によって分離できる。例えば、リゾレシチ
ンをＣ１８の炭素鎖を有する脂肪酸基により修飾された
シリカゲルを充填したカラム、すなわちＯＤＳカラムに
供した後、メタノールで溶出する事でスフィンゴミエリ
ンのフラクションとリゾリン脂質のフラクションを得る
事ができる。スフィンゴミエリンのフラクションから常
法に従ってメタノールを除去する事によって、純度の高
いスフィンゴミエリンを得る事ができる。またリゾリン
脂質のフラクションについても、常法に従ってメタノー
ルを除去する事により、純度の高いリゾリン脂質を得る
事ができ有効利用が図れる。以下、実施例をもって本発
明を具体的に説明する。
リン脂質やスフィンゴリン脂質の脂肪酸鎖を認識するも
のであれば特に限定されないが、その中でもＣ８〜Ｃ１
８の炭素鎖を有する脂肪酸基で修飾されるシリカゲルを
使用するのが好ましく、さらに工業的な供給面を考慮す
るとＣ１８の炭素鎖を有する脂肪酸基により修飾されて
いるシリカゲルを使用するのが良い。本発明において炭
素数１〜５の低級アルコールとは、直鎖もしくは分枝型
アルコールを指しそれらいずれの物でも差し支えなく使
用する事が出来るが、中でも炭素数１〜３のアルコール
がより好ましく、メタノールまたはエタノールを用いる
のがさらに好ましい。スフィンゴミエリンはリゾレシチ
ンを非極性担体に接触させてリゾレシチンを担体に吸着
させた後に、炭素数１〜５の低級アルコール、もしくは
炭素数１〜５の低級アルコールと水の混合溶媒によって
スフィンゴミエリンを担体から脱離させるという一連の
操作を行う事によって分離できる。例えば、リゾレシチ
ンをＣ１８の炭素鎖を有する脂肪酸基により修飾された
シリカゲルを充填したカラム、すなわちＯＤＳカラムに
供した後、メタノールで溶出する事でスフィンゴミエリ
ンのフラクションとリゾリン脂質のフラクションを得る
事ができる。スフィンゴミエリンのフラクションから常
法に従ってメタノールを除去する事によって、純度の高
いスフィンゴミエリンを得る事ができる。またリゾリン
脂質のフラクションについても、常法に従ってメタノー
ルを除去する事により、純度の高いリゾリン脂質を得る
事ができ有効利用が図れる。以下、実施例をもって本発
明を具体的に説明する。
【０００６】
【実施例】卵黄リゾレシチン（太陽化学（株）製：アセ
トン不溶物９５％以上、スフィンゴミエリン約２．５％
含有）１ｇのＭｅＯＨ溶液をＯＤＳカラム（Ｗａｔｅｒ
ｓＨＲ Ｃ１８、６ｕｍ、６０Ａ、１９ｍｍ×２５０ｍ
ｍ）に供した後に、メタノール：水＝９５：５の溶液を
１０ｍｌ／分の流速で流し各々１００ｍｌずつのフラク
ションを得た。図１に、分離パターンを示す。溶出量４
００〜１０００ｍｌの部分（フラクション４〜１０）を
分取し溶媒を除去して純度９８％以上のスフィンゴミエ
リン２２ｍｇを得た。
トン不溶物９５％以上、スフィンゴミエリン約２．５％
含有）１ｇのＭｅＯＨ溶液をＯＤＳカラム（Ｗａｔｅｒ
ｓＨＲ Ｃ１８、６ｕｍ、６０Ａ、１９ｍｍ×２５０ｍ
ｍ）に供した後に、メタノール：水＝９５：５の溶液を
１０ｍｌ／分の流速で流し各々１００ｍｌずつのフラク
ションを得た。図１に、分離パターンを示す。溶出量４
００〜１０００ｍｌの部分（フラクション４〜１０）を
分取し溶媒を除去して純度９８％以上のスフィンゴミエ
リン２２ｍｇを得た。
【０００７】
【発明の効果】本発明によれば、今まで分離精製が困難
であったスフィンゴミエリンを、簡単にスケールアップ
の可能なシステムを用いて、容易に精製する事ができ
る。さらに、共存するリゾリン脂質をロスする事無く有
効に回収でき、極めて高純度なスフィンゴミエリンと同
時に極めて高純度なリゾリン脂質を得る事ができる。
であったスフィンゴミエリンを、簡単にスケールアップ
の可能なシステムを用いて、容易に精製する事ができ
る。さらに、共存するリゾリン脂質をロスする事無く有
効に回収でき、極めて高純度なスフィンゴミエリンと同
時に極めて高純度なリゾリン脂質を得る事ができる。
【図１】スフィンゴミエリンとリゾレシチンの分離パタ
ーンの図である。
ーンの図である。
Claims (3)
- 【請求項１】 卵黄または大豆リゾレシチンを非極性担
体に接触させ、極性溶媒により非極性担体からスフィン
ゴミエリンを溶出させる事を特徴とするスフィンゴミエ
リンの精製方法。 - 【請求項２】 非極性担体がＣ８〜Ｃ１８の脂肪酸基に
より修飾されたシリカゲルである請求項１記載の精製方
法。 - 【請求項３】 極性溶媒が炭素数１〜５の低級アルコー
ル、もしくは炭素数１〜５の低級アルコールと水との混
合液である請求項１または２記載の精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04190293A JP3439498B2 (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | スフィンゴミエリンの精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04190293A JP3439498B2 (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | スフィンゴミエリンの精製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06228171A true JPH06228171A (ja) | 1994-08-16 |
| JP3439498B2 JP3439498B2 (ja) | 2003-08-25 |
Family
ID=12621221
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04190293A Expired - Fee Related JP3439498B2 (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | スフィンゴミエリンの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3439498B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000045828A1 (en) * | 1999-02-03 | 2000-08-10 | Indena S.P.A. | Soya extract containing lipids, process for its production, and pharmaceutical and cosmetic composition |
| JP2006232967A (ja) * | 2005-02-24 | 2006-09-07 | Umeda Jimusho:Kk | 複合脂質画分、それから単離されたヒト型スフィンゴミエリンとプラズマローゲンならびにこれらを含む機能性食品素材、医薬品素材および化粧品素材 |
| EP2308954A4 (en) * | 2008-06-20 | 2011-09-21 | Umeda Jimusho Ltd | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF A HIGH-PURITY PHOSPHOLIPID AND A HIGH-PURITY, GLYCEROSPHOLIPID SPHINGOMYELIC OF THE PLASMALOGEN TYPE OBTAINED BY USING THE SAME |
| CN114644649A (zh) * | 2020-12-21 | 2022-06-21 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法 |
| CN114644650A (zh) * | 2020-12-21 | 2022-06-21 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种从蛋黄粉中提取高纯度鞘磷脂的方法 |
-
1993
- 1993-02-05 JP JP04190293A patent/JP3439498B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000045828A1 (en) * | 1999-02-03 | 2000-08-10 | Indena S.P.A. | Soya extract containing lipids, process for its production, and pharmaceutical and cosmetic composition |
| JP2006232967A (ja) * | 2005-02-24 | 2006-09-07 | Umeda Jimusho:Kk | 複合脂質画分、それから単離されたヒト型スフィンゴミエリンとプラズマローゲンならびにこれらを含む機能性食品素材、医薬品素材および化粧品素材 |
| EP2308954A4 (en) * | 2008-06-20 | 2011-09-21 | Umeda Jimusho Ltd | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF A HIGH-PURITY PHOSPHOLIPID AND A HIGH-PURITY, GLYCEROSPHOLIPID SPHINGOMYELIC OF THE PLASMALOGEN TYPE OBTAINED BY USING THE SAME |
| US8524282B2 (en) | 2008-06-20 | 2013-09-03 | Umeda Jimusho Ltd. | Method for production of highly pure phospholipid, and highly pure sphingomyelin and plasmalogen-type glycerophospholipid produced by the method |
| CN114644649A (zh) * | 2020-12-21 | 2022-06-21 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法 |
| CN114644650A (zh) * | 2020-12-21 | 2022-06-21 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种从蛋黄粉中提取高纯度鞘磷脂的方法 |
| CN114644649B (zh) * | 2020-12-21 | 2023-10-24 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3439498B2 (ja) | 2003-08-25 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |