JPH0622705A - 甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料の給餌方法 - Google Patents
甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料の給餌方法Info
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- JPH0622705A JPH0622705A JP5063361A JP6336193A JPH0622705A JP H0622705 A JPH0622705 A JP H0622705A JP 5063361 A JP5063361 A JP 5063361A JP 6336193 A JP6336193 A JP 6336193A JP H0622705 A JPH0622705 A JP H0622705A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 給餌により甲殻類及び魚類の生体防御機能並
びに免疫機能を増強すると共に、体重増加を図ること。 【構成】 飼料中に増加したグラム陽性菌，酵母類，真
菌類由来のペプチドグリカンが甲殻類及び魚類の生体防
御機能並びに免疫機能を増強すると共に、増体効果を奏
する。
びに免疫機能を増強すると共に、体重増加を図ること。 【構成】 飼料中に増加したグラム陽性菌，酵母類，真
菌類由来のペプチドグリカンが甲殻類及び魚類の生体防
御機能並びに免疫機能を増強すると共に、増体効果を奏
する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はエビ類，カニ類，及び魚
類に投与する甲殻類及び魚類用飼料に関する。ここでエ
ビ類とはクルマエビ(Penaeus japonicus) ，ウシエビ(P
enaeus monodon) ，コウライエビ(Penaeus chinensis)
，及びバナナエビ(Penaeus morguiensis) 等のクルマ
エビ属やその他の海水性，淡水性エビ類を含み、カニ類
とは海水性，淡水性のすべてのカニ類を包含し、かつ魚
類とは海水性，淡水性魚類を包含する。
類に投与する甲殻類及び魚類用飼料に関する。ここでエ
ビ類とはクルマエビ(Penaeus japonicus) ，ウシエビ(P
enaeus monodon) ，コウライエビ(Penaeus chinensis)
，及びバナナエビ(Penaeus morguiensis) 等のクルマ
エビ属やその他の海水性，淡水性エビ類を含み、カニ類
とは海水性，淡水性のすべてのカニ類を包含し、かつ魚
類とは海水性，淡水性魚類を包含する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】近年、
甲殻類及び魚類の養殖が盛んに行われているが、感染症
の発生が多いために、死亡または発育遅延等による経済
的損失が極めて大きく、養殖産業上問題となっている。
前記感染症にはビブリオ属やその他の細菌による感染
症，及びバキュロウイルスやその他のウイルスによる感
染症がある。
甲殻類及び魚類の養殖が盛んに行われているが、感染症
の発生が多いために、死亡または発育遅延等による経済
的損失が極めて大きく、養殖産業上問題となっている。
前記感染症にはビブリオ属やその他の細菌による感染
症，及びバキュロウイルスやその他のウイルスによる感
染症がある。
【０００３】現在、これらの疾病の予防，治療に種々の
抗生物質，サルファ剤等の抗菌剤が使用されているが、
その効果は必ずしも十分とは云えず、しかも近年抗生物
質等の抗菌剤は生体内への残留や薬剤耐性菌の出現など
により人体への影響が問題視され極力制限される方向に
ある。
抗生物質，サルファ剤等の抗菌剤が使用されているが、
その効果は必ずしも十分とは云えず、しかも近年抗生物
質等の抗菌剤は生体内への残留や薬剤耐性菌の出現など
により人体への影響が問題視され極力制限される方向に
ある。
【０００４】本発明は前記した事情に鑑みてなされたも
のであり、その目的は給餌によって甲殻類及び魚類の生
体防御機能を賦活し、生体機能並びに免疫機能を増強す
ると共に増体効果を奏する甲殻類，魚類用飼料，及び魚
類用飼料の給飼方法を提供するにある。
のであり、その目的は給餌によって甲殻類及び魚類の生
体防御機能を賦活し、生体機能並びに免疫機能を増強す
ると共に増体効果を奏する甲殻類，魚類用飼料，及び魚
類用飼料の給飼方法を提供するにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明の甲殻類，魚類用
飼料は前記した目的を達成するため、飼料中にグラム陽
性菌，酵母類，真菌類由来のペプチドグリカンを添加し
たことを特徴としている。また、本発明の魚類用飼料の
給飼方法は、魚類に対するペプチドグリカンの一日当り
の投与量とその適正投与期間の関係を予備試験により設
定し、ペプチドグリカン含有飼料を前記投与量に相当す
る割合で前記適正投与期間連日投与することを特徴とし
ている。
飼料は前記した目的を達成するため、飼料中にグラム陽
性菌，酵母類，真菌類由来のペプチドグリカンを添加し
たことを特徴としている。また、本発明の魚類用飼料の
給飼方法は、魚類に対するペプチドグリカンの一日当り
の投与量とその適正投与期間の関係を予備試験により設
定し、ペプチドグリカン含有飼料を前記投与量に相当す
る割合で前記適正投与期間連日投与することを特徴とし
ている。
【０００６】
【作用】ペプチドグリカン（以下、ＰＧと略称する）は
生体内に採り込まれて、血球の貪食活性を高めるなど、
生体防御機能を増強させ、これによって免疫増強及び体
重増加をもたらす。また、ＰＧは魚類に対する投与量と
その適正投与期間の関係を有しており、過剰に投与し続
けても効果が軽減する。
生体内に採り込まれて、血球の貪食活性を高めるなど、
生体防御機能を増強させ、これによって免疫増強及び体
重増加をもたらす。また、ＰＧは魚類に対する投与量と
その適正投与期間の関係を有しており、過剰に投与し続
けても効果が軽減する。
【０００７】
【実施例】以下、本発明を具体的な試験例によって詳細
に説明する。試験例 １ 試験方法： 平均体重２５ｇのクルマエビを３０尾ずつ
の４群に分け、本発明区１，２，３区には飼料中にＰＧ
をエビの体重１Ｋｇあたり１日量として、それぞれ０．
０５，０．２，１．０ｍｇとなるように添加して１日お
きに与えた。本発明区のＰＧ無投与の日と対照区にはＰ
Ｇ無添加の同一飼料を与えた。このような方法で７日間
飼育したのち、８日後にエビの心臓から採血して、ＭＥ
Ｍ培地中で血液１ｍｌあたり１０7 個のラテックスビー
ズ（直径０．８１ミクロン）を混合し、４５分後に血球
１００細胞中のビーズ取込み細胞数および血球１００細
胞中に取込まれたビーズ総数を調べた。
に説明する。試験例 １ 試験方法： 平均体重２５ｇのクルマエビを３０尾ずつ
の４群に分け、本発明区１，２，３区には飼料中にＰＧ
をエビの体重１Ｋｇあたり１日量として、それぞれ０．
０５，０．２，１．０ｍｇとなるように添加して１日お
きに与えた。本発明区のＰＧ無投与の日と対照区にはＰ
Ｇ無添加の同一飼料を与えた。このような方法で７日間
飼育したのち、８日後にエビの心臓から採血して、ＭＥ
Ｍ培地中で血液１ｍｌあたり１０7 個のラテックスビー
ズ（直径０．８１ミクロン）を混合し、４５分後に血球
１００細胞中のビーズ取込み細胞数および血球１００細
胞中に取込まれたビーズ総数を調べた。
【０００８】結果： 本発明区および対照区のクルマエ
ビにおける血球１００細胞あたりのラテックスビーズを
取込んだ血球細胞数を図１に示した。対照区では平均３
８．２個の血球がラテックスビーズを取込んでいたのに
対し、０．０５ｍｇ区は平均５９．０細胞，０．２ｍｇ
区は平均６２．５細胞，１．０ｍｇ区は平均５３．０細
胞であり、いずれのＰＧ投与区においても対照区にくら
べてより多くの血球細胞がラテックスビーズを貪食して
いた。
ビにおける血球１００細胞あたりのラテックスビーズを
取込んだ血球細胞数を図１に示した。対照区では平均３
８．２個の血球がラテックスビーズを取込んでいたのに
対し、０．０５ｍｇ区は平均５９．０細胞，０．２ｍｇ
区は平均６２．５細胞，１．０ｍｇ区は平均５３．０細
胞であり、いずれのＰＧ投与区においても対照区にくら
べてより多くの血球細胞がラテックスビーズを貪食して
いた。
【０００９】また、血球１００細胞当たりの取込まれた
ラテックスビーズの総数を図２に示した。対照区では平
均１３４個のビーズが取込まれていたのに対し、０．０
５ｍｇ区では平均３７２個，０．２ｍｇ区が平均４５０
個，１．０ｍｇ区が３１３個であり、いずれの本発明区
においても対照区にくらべてより多くのビーズが血球内
に取込まれていた。以上のことからクルマエビにＰＧを
投与することにより血球の貪食活性が高まることが明ら
かになった。また、図１，図２からＰＧを投与する際に
最適投与量が存在することが示唆された。
ラテックスビーズの総数を図２に示した。対照区では平
均１３４個のビーズが取込まれていたのに対し、０．０
５ｍｇ区では平均３７２個，０．２ｍｇ区が平均４５０
個，１．０ｍｇ区が３１３個であり、いずれの本発明区
においても対照区にくらべてより多くのビーズが血球内
に取込まれていた。以上のことからクルマエビにＰＧを
投与することにより血球の貪食活性が高まることが明ら
かになった。また、図１，図２からＰＧを投与する際に
最適投与量が存在することが示唆された。
【００１０】試験例 ２ 試験方法： クルマエビの稚エビ（ＰＬ３０，平均体重
０．０１ｇ）を流水式の５００リットル水槽２槽に２０
０尾ずつ収容し、試験開始後６０日に各々を５トン水槽
に移し、計９５日間飼育した。本発明区にはＰＧをエビ
の体重１Ｋｇあたり１日量として０．２ｍｇとなるよう
に添加した飼料を１週間与え、次の１週間はＰＧ無添加
飼料を与える方法を試験終了時まで反復した。対照区に
は常時ＰＧ無添加飼料を与えた。そして、ＰＧの効果を
確認するために、以下の項目について調べた。 (1) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビの生残
率 (2) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビの体重 (3) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビにおけ
る実験感染に対する防御効果 尚、試験項目(3) の実験感染については、クルマエビの
ビブリオ病原因菌Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．を１．７〜２．
７×１０7 細胞／ｍｌ，懸濁した海水中にＰＧ投与開始
後６７日目および９５日目のエビを３０尾ずつ１時間浸
漬し、その後１０日間の生残率を調べた。
０．０１ｇ）を流水式の５００リットル水槽２槽に２０
０尾ずつ収容し、試験開始後６０日に各々を５トン水槽
に移し、計９５日間飼育した。本発明区にはＰＧをエビ
の体重１Ｋｇあたり１日量として０．２ｍｇとなるよう
に添加した飼料を１週間与え、次の１週間はＰＧ無添加
飼料を与える方法を試験終了時まで反復した。対照区に
は常時ＰＧ無添加飼料を与えた。そして、ＰＧの効果を
確認するために、以下の項目について調べた。 (1) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビの生残
率 (2) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビの体重 (3) 試験開始後６０日，７５日，９５日目のエビにおけ
る実験感染に対する防御効果 尚、試験項目(3) の実験感染については、クルマエビの
ビブリオ病原因菌Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．を１．７〜２．
７×１０7 細胞／ｍｌ，懸濁した海水中にＰＧ投与開始
後６７日目および９５日目のエビを３０尾ずつ１時間浸
漬し、その後１０日間の生残率を調べた。
【００１１】結果： (1) 試験期間中の本発明区および
対照区のクルマエビの生残率を表１に示した。
対照区のクルマエビの生残率を表１に示した。
【表１】 注）（ ）内の数字は生残尾数／供試尾数を示す。
【００１２】このように、試験終了時の生残率は、本発
明区が５８．５％であったのに対し、対照区が３０．５
％であり、前者の生残率がすぐれていた。また、斃死し
たエビについて細菌検査を行ったところ、本発明区の一
部と対照区のほとんどのエビからビブリオ属細菌が分離
された。したがって、本発明区の生残率が対照区のそれ
より高かった原因についてはＰＧによって生体防御機能
が促進され、ビブリオなどによる細菌感染を防御したも
のと考えられる。
明区が５８．５％であったのに対し、対照区が３０．５
％であり、前者の生残率がすぐれていた。また、斃死し
たエビについて細菌検査を行ったところ、本発明区の一
部と対照区のほとんどのエビからビブリオ属細菌が分離
された。したがって、本発明区の生残率が対照区のそれ
より高かった原因についてはＰＧによって生体防御機能
が促進され、ビブリオなどによる細菌感染を防御したも
のと考えられる。
【００１３】(2) 試験期間中の本発明区および対照区の
クルマエビの平均体重を表２に示した。
クルマエビの平均体重を表２に示した。
【表２】 注）数字は平均値±標準偏差を示す。 このように、試験終了時の平均体重は、本発明区が２．
５８ｇであったのに対し、対照区が２．００ｇであり、
前者の成長がすぐれていた。
５８ｇであったのに対し、対照区が２．００ｇであり、
前者の成長がすぐれていた。
【００１４】(3) 本発明区および対照区のクルマエビに
おける実験感染後の生残率の推移を図３及び図４に示し
た。すなわち、試験開始後６７日目のクルマエビをＶｉ
ｂｒｉｏ ｓｐ．の菌液に１時間浸漬後の生残率は本発
明区が１日後に８６．７％，２日後に７６．７％とな
り、それ以後の斃死はみられなかった。対照区は感染１
日後に５６．７％，２日後に３０％，３日後に２６．７
％となり、最終生残率は２６．７％であった（図３参
照）。
おける実験感染後の生残率の推移を図３及び図４に示し
た。すなわち、試験開始後６７日目のクルマエビをＶｉ
ｂｒｉｏ ｓｐ．の菌液に１時間浸漬後の生残率は本発
明区が１日後に８６．７％，２日後に７６．７％とな
り、それ以後の斃死はみられなかった。対照区は感染１
日後に５６．７％，２日後に３０％，３日後に２６．７
％となり、最終生残率は２６．７％であった（図３参
照）。
【００１５】試験開始後９５日目のクルマエビをＶｉｂ
ｒｉｏ ｓｐ．の菌液に１時間浸漬後の生残率は、本発
明区が３日後に８６．７％，４日後に８０％となり、最
終生残率は８０％であった。対照区は感染１日後に７
３．３％，２日後に５６．７％，３日後に３３．３％と
なり、最終生残率は３３．３％であった。（図４参
照）。このように、本発明区はいずれも実験感染後の生
残率が有意（ｐ＜０．０１）に高かった。この原因につ
いては、ＰＧによってクルマエビの血球の貪食活性を中
心とする生体防御機能が高まったことが考えられる。
ｒｉｏ ｓｐ．の菌液に１時間浸漬後の生残率は、本発
明区が３日後に８６．７％，４日後に８０％となり、最
終生残率は８０％であった。対照区は感染１日後に７
３．３％，２日後に５６．７％，３日後に３３．３％と
なり、最終生残率は３３．３％であった。（図４参
照）。このように、本発明区はいずれも実験感染後の生
残率が有意（ｐ＜０．０１）に高かった。この原因につ
いては、ＰＧによってクルマエビの血球の貪食活性を中
心とする生体防御機能が高まったことが考えられる。
【００１６】試験例 ３ 試験方法： ＰＧを含む微細飼料（ＰＧ５ｍｇ／Ｋｇ飼
料）をウシエビのゾエア期，ミシス期およびポストラー
バ（ＰＬ１５）期の幼生に毎日投与して、生残率を調べ
ると共にゾエア期からミシス期への変態率を調べた。
尚、微細飼料の投与量は幼生１尾あたり、ゾエア期で
０．１６ｍｇ／日，ミシス期では０．２ｍｇ／日，ポス
トラーバ期では０．２４ｍｇ／日とした。飼料の投与量
から換算したＰＧの幼生１尾あたり１日の投与量は、ゾ
エア期で５×１０-7ｍｇ，ミシス期で６．２５×１０-7
ｍｇ，ポストラーバ期で７．５×１０-7ｍｇであった。
この投与量は幼生の体重１ＫｇあたりのＰＧ１日量とし
て、およそ０．１〜０．２ｍｇとなる。
料）をウシエビのゾエア期，ミシス期およびポストラー
バ（ＰＬ１５）期の幼生に毎日投与して、生残率を調べ
ると共にゾエア期からミシス期への変態率を調べた。
尚、微細飼料の投与量は幼生１尾あたり、ゾエア期で
０．１６ｍｇ／日，ミシス期では０．２ｍｇ／日，ポス
トラーバ期では０．２４ｍｇ／日とした。飼料の投与量
から換算したＰＧの幼生１尾あたり１日の投与量は、ゾ
エア期で５×１０-7ｍｇ，ミシス期で６．２５×１０-7
ｍｇ，ポストラーバ期で７．５×１０-7ｍｇであった。
この投与量は幼生の体重１ＫｇあたりのＰＧ１日量とし
て、およそ０．１〜０．２ｍｇとなる。
【００１７】結果： 本発明区および対照区のウシエビ
のゾエア期からミシス期への変態率とゾエア期からポス
トラーバ期（ＰＬ１５）までの生残率を表３に示した。
のゾエア期からミシス期への変態率とゾエア期からポス
トラーバ期（ＰＬ１５）までの生残率を表３に示した。
【表３】
【００１８】ウシエビはクルマエビなどにくらべると、
幼生期の生残率が著しく低く、通常２０％前後であると
いわれている。しかし、表３に示すように、ＰＧを投与
することによって生残率が高まるとともに、変態率が向
上することが明らかになった。
幼生期の生残率が著しく低く、通常２０％前後であると
いわれている。しかし、表３に示すように、ＰＧを投与
することによって生残率が高まるとともに、変態率が向
上することが明らかになった。
【００１９】試験例 ４ 試験方法： 平均体重約５８ｇのアユを表４に示す試験
区分に従い、各区４００尾づつを２つの池に分けて試験
に供試した。供試魚は２×１×１ｍのコンクリート池で
１カ月間飼育した。飼育期間中の水温は約２０〜２３℃
であった。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割りで添加
し、ペレットクランブルに成型したのち、ＰＧの投与量
が１日に魚体重１Ｋｇ当たり０．０１〜１．０ｍｇにな
るように試験飼料を給与した。尚、対照区にはＰＧ無添
加の飼料を給与した。
区分に従い、各区４００尾づつを２つの池に分けて試験
に供試した。供試魚は２×１×１ｍのコンクリート池で
１カ月間飼育した。飼育期間中の水温は約２０〜２３℃
であった。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割りで添加
し、ペレットクランブルに成型したのち、ＰＧの投与量
が１日に魚体重１Ｋｇ当たり０．０１〜１．０ｍｇにな
るように試験飼料を給与した。尚、対照区にはＰＧ無添
加の飼料を給与した。
【００２０】結果： ＰＧ添加飼料を１カ月間給与した
後、各区１０尾づつのアユの尾部血管より採血し、分離
して得た血漿が２×１０7 ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求めたのち、
その半量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として
求めた。その結果を表４及び図５に示した。尚、ＡＣＨ
50値は平均値±標準誤差で示した。
後、各区１０尾づつのアユの尾部血管より採血し、分離
して得た血漿が２×１０7 ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求めたのち、
その半量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として
求めた。その結果を表４及び図５に示した。尚、ＡＣＨ
50値は平均値±標準誤差で示した。
【００２１】
【表４】 注）異符号間にＤＡＮＣＡＮの検定による５％水準の有
意差あり。
意差あり。
【００２２】表４及び図５に示すとおり、すべての本発
明区のＡＣＨ50値は対照区に比べ高い傾向がみられ、Ｐ
Ｇ添加飼料の投与によりアユの血漿のＡＣＨ50値が上昇
することを確認した。ただし、ＰＧを０．１ｍｇ投与し
たときの値が最も高く、１．０ｍｇ投与した区では０．
１ｍｇ投与した区よりむしろ低い傾向がみられたことか
ら、ＰＧを投与する際には最適投与量が存在することが
示唆された。尚、ＡＣＨ50値は補体代替経路による抗原
への攻撃能力を表すが、近年貪食細胞や末梢血リンパ球
に補体のひとつであるＣ３のレセプターが存在する可能
性が報告（松山等、平成３年度日本魚病学会春季大会講
演要旨集、西村等、日水誌、５７(12)、２２１９(199
1)）されていることから、補体は貪食細胞や末梢血リン
パ球を活性化させる能力をも有し、魚類の生態防御機能
として重要な役割を果たしていると思われる。また、魚
類のＡＣＨ50値は哺乳類に比べ著しく高いことから、魚
類の場合、古典経路よりも系統発生学的に古いと言われ
ている代替経路に依存する率が高いとも考えられている
（矢野等、日水誌、５４（６）、１０４９(1988)）。本
試験において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が
向上することを確認した。
明区のＡＣＨ50値は対照区に比べ高い傾向がみられ、Ｐ
Ｇ添加飼料の投与によりアユの血漿のＡＣＨ50値が上昇
することを確認した。ただし、ＰＧを０．１ｍｇ投与し
たときの値が最も高く、１．０ｍｇ投与した区では０．
１ｍｇ投与した区よりむしろ低い傾向がみられたことか
ら、ＰＧを投与する際には最適投与量が存在することが
示唆された。尚、ＡＣＨ50値は補体代替経路による抗原
への攻撃能力を表すが、近年貪食細胞や末梢血リンパ球
に補体のひとつであるＣ３のレセプターが存在する可能
性が報告（松山等、平成３年度日本魚病学会春季大会講
演要旨集、西村等、日水誌、５７(12)、２２１９(199
1)）されていることから、補体は貪食細胞や末梢血リン
パ球を活性化させる能力をも有し、魚類の生態防御機能
として重要な役割を果たしていると思われる。また、魚
類のＡＣＨ50値は哺乳類に比べ著しく高いことから、魚
類の場合、古典経路よりも系統発生学的に古いと言われ
ている代替経路に依存する率が高いとも考えられている
（矢野等、日水誌、５４（６）、１０４９(1988)）。本
試験において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が
向上することを確認した。
【００２３】試験例 ５ 試験方法： 平均体重約０．１ｇの浮上直後のニジマス
稚魚を表５に示す試験区分に従い、各区８００尾づつを
４つの水槽に分けて試験に供試した。供試魚は６０リッ
トル容のガラス水槽にて４週間飼育した。飼育期間中の
水温は１５〜１６℃であった。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割で添加したものと、０．３〜０．５ｍｍ径に
成型したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当た
り０．０１〜０．１ｍｇになるように給与した。尚、対
照区にはＰＧ無添加飼料を給与した。
稚魚を表５に示す試験区分に従い、各区８００尾づつを
４つの水槽に分けて試験に供試した。供試魚は６０リッ
トル容のガラス水槽にて４週間飼育した。飼育期間中の
水温は１５〜１６℃であった。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割で添加したものと、０．３〜０．５ｍｍ径に
成型したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当た
り０．０１〜０．１ｍｇになるように給与した。尚、対
照区にはＰＧ無添加飼料を給与した。
【００２４】結果： ＰＧ添加飼料を４週間給与した
後、各区４０尾づつのニジマスを取り上げ、２．５×１
０5 〜２．５×１０6 ＣＦＵ／ｍｌのVibrio anguillar
umを懸濁させた生理食塩水に３０分間浸漬して、２１日
間の生残率を測定した。尚、非感染区は細菌フリーの生
理食塩水に３０分間浸漬した。その結果を表５，図６
（２．５×１０5 ＣＦＵ／ｍｌの結果）、及び図７
（２．５×１０6 ＣＦＵ／ｍｌの結果）に示した。
後、各区４０尾づつのニジマスを取り上げ、２．５×１
０5 〜２．５×１０6 ＣＦＵ／ｍｌのVibrio anguillar
umを懸濁させた生理食塩水に３０分間浸漬して、２１日
間の生残率を測定した。尚、非感染区は細菌フリーの生
理食塩水に３０分間浸漬した。その結果を表５，図６
（２．５×１０5 ＣＦＵ／ｍｌの結果）、及び図７
（２．５×１０6 ＣＦＵ／ｍｌの結果）に示した。
【００２５】
【表５】 注）表中（ ）内の数字は対照区との間の有為差を示
す。
す。
【００２６】表５及び図６，図７に示すとおり、２．５
×１０5 CFU/ml攻撃及び２．５×１０6 CFU/ml 攻撃の
場合ともに、対照区の生残率に比べて、すべての本発明
区の生残率が有意に優れていた。ＰＧの投与により、ニ
ジマス稚魚の免疫機能が活性化された結果、Vibrio ang
uillarumに対する抗病性を獲得したものと思われる。本
試験において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が
向上することを確認した。尚、非感染区の生存または生
残率が１００％であったことから、感染試験中における
魚の斃死原因は攻撃に用いたVibrio anguillarumによる
感染症であると考えられる。
×１０5 CFU/ml攻撃及び２．５×１０6 CFU/ml 攻撃の
場合ともに、対照区の生残率に比べて、すべての本発明
区の生残率が有意に優れていた。ＰＧの投与により、ニ
ジマス稚魚の免疫機能が活性化された結果、Vibrio ang
uillarumに対する抗病性を獲得したものと思われる。本
試験において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が
向上することを確認した。尚、非感染区の生存または生
残率が１００％であったことから、感染試験中における
魚の斃死原因は攻撃に用いたVibrio anguillarumによる
感染症であると考えられる。
【００２７】試験例 ６ 試験方法： 平均体重２００ｇのウナギを表６に示す試
験区分に従い、各区３０尾ずつを試験に供試した。供試
魚は２×１×１ｍのコンクリート池で１カ月間飼育し
た。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割で添加し、２日
に１回、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当たり０．
２〜１．０ｍｇになるように試験飼料を給与した。尚、
対照区にはＰＧ無添加飼料を給与した。
験区分に従い、各区３０尾ずつを試験に供試した。供試
魚は２×１×１ｍのコンクリート池で１カ月間飼育し
た。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割で添加し、２日
に１回、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当たり０．
２〜１．０ｍｇになるように試験飼料を給与した。尚、
対照区にはＰＧ無添加飼料を給与した。
【００２８】結果： ＰＧ添加飼料を１カ月給与した
後、ウナギ１尾当たり１×１０5 CFU のEdwardsiella t
ardaを腹腔内に接種し、２０日間の生残率を調べた。そ
の結果を表６及び図８に示した。
後、ウナギ１尾当たり１×１０5 CFU のEdwardsiella t
ardaを腹腔内に接種し、２０日間の生残率を調べた。そ
の結果を表６及び図８に示した。
【００２９】
【表６】 注）表中、（ ）内の数字は対照区との間の有意差を示
す。
す。
【００３０】表６及び図８に示すとおり、対照区の生残
率が５３．３％であったのに対し、本発明区のＰＧを
０．２ｍｇ投与した区は９０．０％と有意に高かった。
ＰＧの投与により、ウナギの免疫機能が活性化された結
果、Edwardsilella tarda に対する抗病性を獲得したも
のと思われる。しかし、ＰＧを１．０ｍｇ投与した区の
生残率は７３．３％であり、対照区との間に有為な差が
なかったことから、ＰＧを投与する際には最適投与量が
存在することが示唆された。本試験において、ＰＧの投
与により魚類の生体防御能力が向上することを確認し
た。尚、細菌検査ならびに病理組織学的検査の結果から
ウナギが斃死した原因はすべてEdwardsilella tarda の
感染によるものであると判断された。
率が５３．３％であったのに対し、本発明区のＰＧを
０．２ｍｇ投与した区は９０．０％と有意に高かった。
ＰＧの投与により、ウナギの免疫機能が活性化された結
果、Edwardsilella tarda に対する抗病性を獲得したも
のと思われる。しかし、ＰＧを１．０ｍｇ投与した区の
生残率は７３．３％であり、対照区との間に有為な差が
なかったことから、ＰＧを投与する際には最適投与量が
存在することが示唆された。本試験において、ＰＧの投
与により魚類の生体防御能力が向上することを確認し
た。尚、細菌検査ならびに病理組織学的検査の結果から
ウナギが斃死した原因はすべてEdwardsilella tarda の
感染によるものであると判断された。
【００３１】試験例 ７（ＰＧの長期連続投与試験） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表７に示す
試験区分に従い、各区８０尾ずつを２つの池に分けて試
験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式の
１．５ｔのＦＲＰ水槽にて２４週間飼育した。飼育期間
中水温は１７℃に調節した。本発明区は、基礎飼料にＰ
Ｇを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットに成型し
たのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当り０．０
０４ｍｇ〜４ｍｇになるように試験飼料を給与した。な
お、対照区には、ＰＧ無添加の飼料を給与した。
試験区分に従い、各区８０尾ずつを２つの池に分けて試
験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式の
１．５ｔのＦＲＰ水槽にて２４週間飼育した。飼育期間
中水温は１７℃に調節した。本発明区は、基礎飼料にＰ
Ｇを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットに成型し
たのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当り０．０
０４ｍｇ〜４ｍｇになるように試験飼料を給与した。な
お、対照区には、ＰＧ無添加の飼料を給与した。
【００３２】結果： ＰＧ添加飼料を給与後、４週間毎
に各区１０尾ずつのニジマスの尾部血管より採血し、分
離して得た血漿が、２×１０7 cells/mlのウサギ赤血球
を２０℃で９０分間に溶血する割合を求め、その半量を
溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として求めた。そ
の結果を表７に示す。
に各区１０尾ずつのニジマスの尾部血管より採血し、分
離して得た血漿が、２×１０7 cells/mlのウサギ赤血球
を２０℃で９０分間に溶血する割合を求め、その半量を
溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として求めた。そ
の結果を表７に示す。
【００３３】
【表７】 注）表中の数字はＡＣＨ50値(units/ml)（平均±標準誤
差）である。 注）縦のラインにおける異符号間にＤＡＮＣＡＮの検定
による５％水準の有意差あり。
差）である。 注）縦のラインにおける異符号間にＤＡＮＣＡＮの検定
による５％水準の有意差あり。
【００３４】表７に示すとおり、４週目においては０．
４ｍｇ投与区が、また、８週目においては０．００４ｍ
ｇ、０．０４ｍｇ、及び４ｍｇ投与区が対照区のＡＣＨ
50値より高い値を示した。しかしながら、０．４ｍｇと
４ｍｇ投与区は１２週目において、また、０．００４ｍ
ｇは１６週目、０．０４ｍｇ投与区は２０週目におい
て、それぞれ対照区よりむしろ活性が低くなった。この
ことは、ＰＧには適正な投与量もしくは投与期間があ
り、過剰に投与し続けても効果が軽減することを示して
いる。以上の試験結果から、ＰＧの投与によりニジマス
血漿のＡＣＨ50値が上昇すること、およびＰＧには適正
な投与量と投与期間があり、１日に０．４ｍｇ投与する
場合は４週間、また、０．００４ｍｇ〜０．０４ｍｇ投
与する場合には８週間あるいは１２週間が適当であるこ
とが判明した。この傾向は同じような生体防御機構をも
つ養殖対象魚種（マダイ，ブリ，ウナギ，アユ，コイ
等）においても同様に現れると考えられる。
４ｍｇ投与区が、また、８週目においては０．００４ｍ
ｇ、０．０４ｍｇ、及び４ｍｇ投与区が対照区のＡＣＨ
50値より高い値を示した。しかしながら、０．４ｍｇと
４ｍｇ投与区は１２週目において、また、０．００４ｍ
ｇは１６週目、０．０４ｍｇ投与区は２０週目におい
て、それぞれ対照区よりむしろ活性が低くなった。この
ことは、ＰＧには適正な投与量もしくは投与期間があ
り、過剰に投与し続けても効果が軽減することを示して
いる。以上の試験結果から、ＰＧの投与によりニジマス
血漿のＡＣＨ50値が上昇すること、およびＰＧには適正
な投与量と投与期間があり、１日に０．４ｍｇ投与する
場合は４週間、また、０．００４ｍｇ〜０．０４ｍｇ投
与する場合には８週間あるいは１２週間が適当であるこ
とが判明した。この傾向は同じような生体防御機構をも
つ養殖対象魚種（マダイ，ブリ，ウナギ，アユ，コイ
等）においても同様に現れると考えられる。
【００３５】試験例 ８（ＰＧに与えるエクストルージ
ョン加工の影響） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表８に示す
試験区分に従い、各区８０尾ずつを２つの水槽に分けて
試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式
の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて４週間飼育した。飼育期間
中の水温は１７℃に調節した。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットおよび
約４ｍｍ径のエクスパンジョンペレットにそれぞれ成型
したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当たり
０．０４ｍｇになるように試験飼料を給与した。なお、
対照区には、ＰＧ無添加飼料を給与した。
ョン加工の影響） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表８に示す
試験区分に従い、各区８０尾ずつを２つの水槽に分けて
試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式
の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて４週間飼育した。飼育期間
中の水温は１７℃に調節した。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットおよび
約４ｍｍ径のエクスパンジョンペレットにそれぞれ成型
したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当たり
０．０４ｍｇになるように試験飼料を給与した。なお、
対照区には、ＰＧ無添加飼料を給与した。
【００３６】結果： ＰＧ添加飼料を給与後、４週後に
各区１０尾ずつのニジマス尾部血管より採血し、分離し
て得た血漿が、２×１０7 ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求め、その半
量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として求め
た。その結果を表８に示す。
各区１０尾ずつのニジマス尾部血管より採血し、分離し
て得た血漿が、２×１０7 ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求め、その半
量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ50値として求め
た。その結果を表８に示す。
【００３７】
【表８】 注）表中数字は平均±標準誤差である。
【００３８】表８に示すとおり、エクスパンジョンペレ
ットにおいても、通常のペレットと遜色ないＰＧ添加に
よるＡＣＨ50値の上昇が確認された。エクスパンジョン
ペレットは、飼料原料中のでんぷん質をα化させること
により、通常のペレットよりエネルギーの利用性が高め
られることから、発育が優れることが知られている。ま
た、飼料の粉化が少なく、飼料が水に溶けにくいことか
ら、養殖用水の汚染が著しく低減される。また、従来、
ペレットを食さないとされていた、ブリ等の海水魚やウ
ナギなどに給与することも可能である。以上の理由か
ら、近年普及しつつある新しい形態の飼料と言われてい
る。しかしながら、一般に、飼料をエクストルージョン
加工する際、１０気圧程度の高い圧力と１００℃以上の
高い温度等の過酷な物理的条件が加わるため、原料の変
成が問題となる。本試験により、ＰＧがこのようなエク
ストルージョン加工の過酷な物理的条件の影響を受け
ず、魚類の生態防御機能を向上させ得ることを明らかに
した。このことは、ＰＧが通常のペレットやマッシュ飼
料のみでなく、エクスパンジョンペレットにも使用が可
能であり、したがって、対象生物により様々な飼料形態
が要求される甲殻類および魚類用飼料において、ＰＧが
より幅広く利用可能であることを示している。
ットにおいても、通常のペレットと遜色ないＰＧ添加に
よるＡＣＨ50値の上昇が確認された。エクスパンジョン
ペレットは、飼料原料中のでんぷん質をα化させること
により、通常のペレットよりエネルギーの利用性が高め
られることから、発育が優れることが知られている。ま
た、飼料の粉化が少なく、飼料が水に溶けにくいことか
ら、養殖用水の汚染が著しく低減される。また、従来、
ペレットを食さないとされていた、ブリ等の海水魚やウ
ナギなどに給与することも可能である。以上の理由か
ら、近年普及しつつある新しい形態の飼料と言われてい
る。しかしながら、一般に、飼料をエクストルージョン
加工する際、１０気圧程度の高い圧力と１００℃以上の
高い温度等の過酷な物理的条件が加わるため、原料の変
成が問題となる。本試験により、ＰＧがこのようなエク
ストルージョン加工の過酷な物理的条件の影響を受け
ず、魚類の生態防御機能を向上させ得ることを明らかに
した。このことは、ＰＧが通常のペレットやマッシュ飼
料のみでなく、エクスパンジョンペレットにも使用が可
能であり、したがって、対象生物により様々な飼料形態
が要求される甲殻類および魚類用飼料において、ＰＧが
より幅広く利用可能であることを示している。
【００３９】以上述べたように本発明はエビ類，カニ類
の甲殻類及び魚類に給餌して甲殻類及び魚類の生体機能
並びに免疫機能を増強すると共に、増体効果を奏する。
の甲殻類及び魚類に給餌して甲殻類及び魚類の生体機能
並びに免疫機能を増強すると共に、増体効果を奏する。
【００４０】また、本発明の給飼方法によれば魚類の生
体機能並びに免疫機能を適確な目安によって達成するこ
とができると共に、その経済的効果も高いとする実操業
上のメリットをも奏する。
体機能並びに免疫機能を適確な目安によって達成するこ
とができると共に、その経済的効果も高いとする実操業
上のメリットをも奏する。
【図１】クルマエビの血球細胞の貪食活性を示すグラフ
である。
である。
【図２】クルマエビの血球細胞の貪食活性を示すグラフ
である。
である。
【図３】クルマエビのビブリオ実験感染後の生残率を示
すグラフである。
すグラフである。
【図４】クルマエビのビブリオ実験感染後の生残率を示
すグラフである。
すグラフである。
【図５】ＰＧ添加飼料を１カ月間投与したアユの血漿の
ＡＣＨ50値を示すグラフである。
ＡＣＨ50値を示すグラフである。
【図６】Vibrio anguillarum（２．５×１０5 ＣＦＵ／
ｍｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ニジマスの生残率を示す
グラフである。
ｍｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ニジマスの生残率を示す
グラフである。
【図７】Vibrio anguillarum（２．５×１０6 ＣＦＵ／
ｍｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ニジマスの生残率を示す
グラフである。
ｍｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ニジマスの生残率を示す
グラフである。
【図８】Edwardsiella tarda（１×１０5 ＣＦＵ／ｍ
ｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ウナギの生残率を示すグラ
フである。
ｌ）で攻撃した後のＰＧ投与ウナギの生残率を示すグラ
フである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成５年６月１日
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正内容】
【発明の名称】 甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料
の給餌方法
の給餌方法
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００４】本発明は前記した事情に鑑みてなされたも
のであり、その目的は給餌によって甲殻類及び魚類の生
体防御機能を賦活し、生体機能並びに免疫機能を増強す
ると共に増体効果を奏する甲殻類，魚類用飼料，及び魚
類用飼料の給餌方法を提供するにある。
のであり、その目的は給餌によって甲殻類及び魚類の生
体防御機能を賦活し、生体機能並びに免疫機能を増強す
ると共に増体効果を奏する甲殻類，魚類用飼料，及び魚
類用飼料の給餌方法を提供するにある。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明の甲殻類，魚類用
飼料は前記した目的を達成するため、飼料中にグラム陽
性菌，酵母類，真菌類由来のペプチドグリカンを添加し
たことを特徴としている。また、本発明の魚類用飼料の
給餌方法は、魚類に対するペプチドグリカンの一日当り
の投与量とその適正投与期間の関係を予備試験により設
定し、ペプチドグリカン含有飼料を前記投与量に相当す
る割合で前記適正投与期間連日投与することを特徴とし
ている。
飼料は前記した目的を達成するため、飼料中にグラム陽
性菌，酵母類，真菌類由来のペプチドグリカンを添加し
たことを特徴としている。また、本発明の魚類用飼料の
給餌方法は、魚類に対するペプチドグリカンの一日当り
の投与量とその適正投与期間の関係を予備試験により設
定し、ペプチドグリカン含有飼料を前記投与量に相当す
る割合で前記適正投与期間連日投与することを特徴とし
ている。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１９】試験例 ４ 試験方法： 平均体重約５８ｇのアユを表４に示す試験
区分に従い、各区４００尾ずつを２つの池に分けて試験
に供試した。供試魚は２×１×１ｍのコンクリート池で
１カ月間飼育した。飼育期間中の水温は約２０〜２３℃
であった。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割りで添加
し、ペレットクランブルに成型したのち、ＰＧの投与量
が１日に魚体重１Ｋｇ当たり０．０１〜１．０ｍｇにな
るように試験飼料を給与した。尚、対照区にはＰＧ無添
加の飼料を給与した。
区分に従い、各区４００尾ずつを２つの池に分けて試験
に供試した。供試魚は２×１×１ｍのコンクリート池で
１カ月間飼育した。飼育期間中の水温は約２０〜２３℃
であった。本発明区には基礎飼料にＰＧを外割りで添加
し、ペレットクランブルに成型したのち、ＰＧの投与量
が１日に魚体重１Ｋｇ当たり０．０１〜１．０ｍｇにな
るように試験飼料を給与した。尚、対照区にはＰＧ無添
加の飼料を給与した。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２０】結果： ＰＧ添加飼料を１カ月間給与した
後、各区１０尾ずつのアユの尾部血管より採血し、分雛
して得た血漿が２×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求めたのち、
その半量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ５０値とし
て求めた。その結果を表４及び図５に示した。尚、ＡＣ
Ｈ５０値は平均値±標準誤差で示した。
後、各区１０尾ずつのアユの尾部血管より採血し、分雛
して得た血漿が２×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍｌのウサギ赤
血球を２０℃で９０分間に溶血する割合を求めたのち、
その半量を溶血させる血漿量の逆数をＡＣＨ５０値とし
て求めた。その結果を表４及び図５に示した。尚、ＡＣ
Ｈ５０値は平均値±標準誤差で示した。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２２】表４及び図５に示すとおり、すべての本発
明区のＡＣＨ５０値は対照区に比べ高い傾向がみられ、
ＰＧ添加飼料の投与によりアユの血漿のＡＣＨ５０値が
上昇することを確認した。ただし、ＰＧを０．１ｍｇ投
与したときの値が最も高く、１．０ｍｇ投与した区では
０．１ｍｇ投与した区よりむしろ低い傾向がみられたこ
とから、ＰＧを投与する際には最適投与量が存在するこ
とが示唆された。尚、ＡＣＨ５０値は補体代替経路によ
る抗原への攻撃能力を表すが、近年貧食細胞や末梢血リ
ンパ球に補体のひとつであるＣ３のレセプターが存在す
る可能性が報告（松山等、平成３年度日本魚病学会春季
大会講演要旨集、西村等、日水誌、５７（１２）、２２
１９（１９９１））されていることから、補体は貧食細
胞や末梢血リンパ球を活性化させる能力をも有し、魚類
の生体防御機能として重要な役割を果たしていると思わ
れる。また、魚類のＡＣＨ５０値は哺乳類に比べ著しく
高いことから、魚類の場合、古典経路よりも系統発生学
的に古いと言われている代替経路に依存する率が高いと
も考えられている（矢野等、日水誌、５４（６）、１０
４９（１９８８））。本試験において、ＰＧの投与によ
り魚類の生体防御能力が向上することを確認した。
明区のＡＣＨ５０値は対照区に比べ高い傾向がみられ、
ＰＧ添加飼料の投与によりアユの血漿のＡＣＨ５０値が
上昇することを確認した。ただし、ＰＧを０．１ｍｇ投
与したときの値が最も高く、１．０ｍｇ投与した区では
０．１ｍｇ投与した区よりむしろ低い傾向がみられたこ
とから、ＰＧを投与する際には最適投与量が存在するこ
とが示唆された。尚、ＡＣＨ５０値は補体代替経路によ
る抗原への攻撃能力を表すが、近年貧食細胞や末梢血リ
ンパ球に補体のひとつであるＣ３のレセプターが存在す
る可能性が報告（松山等、平成３年度日本魚病学会春季
大会講演要旨集、西村等、日水誌、５７（１２）、２２
１９（１９９１））されていることから、補体は貧食細
胞や末梢血リンパ球を活性化させる能力をも有し、魚類
の生体防御機能として重要な役割を果たしていると思わ
れる。また、魚類のＡＣＨ５０値は哺乳類に比べ著しく
高いことから、魚類の場合、古典経路よりも系統発生学
的に古いと言われている代替経路に依存する率が高いと
も考えられている（矢野等、日水誌、５４（６）、１０
４９（１９８８））。本試験において、ＰＧの投与によ
り魚類の生体防御能力が向上することを確認した。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２３】試験例 ５ 試験方法： 平均体重約０．１ｇの浮上直後のニジマス
稚魚を表５に示す試験区分に従い、各区８００尾ずつを
４つの水槽に分けて試験に供試した。供試魚は６０リッ
トル容のガラス水槽にて４週間飼育した。飼育期間中の
水温は１５〜１６℃であった。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割で添加したものを、０．３〜０．５ｍｍ径に
成型したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当た
り０．０１〜０．１ｍｇになるように給与した。尚、対
照区にはＰＧ無添加飼科を給与した。
稚魚を表５に示す試験区分に従い、各区８００尾ずつを
４つの水槽に分けて試験に供試した。供試魚は６０リッ
トル容のガラス水槽にて４週間飼育した。飼育期間中の
水温は１５〜１６℃であった。本発明区には基礎飼料に
ＰＧを外割で添加したものを、０．３〜０．５ｍｍ径に
成型したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当た
り０．０１〜０．１ｍｇになるように給与した。尚、対
照区にはＰＧ無添加飼科を給与した。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２４】結果： ＰＧ添加飼料を４週間給与した
後、各区４０尾ずつのニジマスを取り上げ、２．５×１
０５〜２．５×１０６ＣＦＵ／ｍｌのＶｉｂｒｉｏ ａ
ｎｇｕｉｌｌａｒｅｍを懸濁させた生理食塩水に３０分
間浸漬して、２１日間の生残率を測定した。尚、非感染
区は細菌フリーの生理食塩水に３０分間浸漬した。その
結果を表５，図６（２．５×１０５ＣＦＵ／ｍｌの結
果）、及び図７（２．５×１０６ＣＦＵ／ｍｌの結果）
に示した。
後、各区４０尾ずつのニジマスを取り上げ、２．５×１
０５〜２．５×１０６ＣＦＵ／ｍｌのＶｉｂｒｉｏ ａ
ｎｇｕｉｌｌａｒｅｍを懸濁させた生理食塩水に３０分
間浸漬して、２１日間の生残率を測定した。尚、非感染
区は細菌フリーの生理食塩水に３０分間浸漬した。その
結果を表５，図６（２．５×１０５ＣＦＵ／ｍｌの結
果）、及び図７（２．５×１０６ＣＦＵ／ｍｌの結果）
に示した。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２５】
【表５】
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２６】表５及び図６，図７に示すとおり、２．５
×１０５ＧＦＵ／ｍｌ攻撃及び２．５×１０６ＣＦＵ／
ｍｌ攻撃の場合ともに、対照区の生残率に比べて、すべ
ての本発明区の生残率が有意に優れていた。ＰＧの投与
により、ニジマス稚魚の免疫機能が活性化された結果、
Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍに対する抗病性
を獲得したものと思われる。本試験において、ＰＧの投
与により魚類の生体防御能力が向上することを確認し
た。尚、非感染区の生残率が１００％であったことか
ら、感染試験中における魚の斃死原因は攻撃に用いたＶ
ｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍによる感染症であ
ると考えられる。
×１０５ＧＦＵ／ｍｌ攻撃及び２．５×１０６ＣＦＵ／
ｍｌ攻撃の場合ともに、対照区の生残率に比べて、すべ
ての本発明区の生残率が有意に優れていた。ＰＧの投与
により、ニジマス稚魚の免疫機能が活性化された結果、
Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍに対する抗病性
を獲得したものと思われる。本試験において、ＰＧの投
与により魚類の生体防御能力が向上することを確認し
た。尚、非感染区の生残率が１００％であったことか
ら、感染試験中における魚の斃死原因は攻撃に用いたＶ
ｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍによる感染症であ
ると考えられる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３０】表６及び図８に示すとおり、対照区の生残
率が５３．３％であったのに対し、本発明区のＰＧを
０．２ｍｇ投与した区は９０．０％と有意に高かった。
ＰＧの投与により、ウナギの免疫機能が活性化された結
果、Ｅｄｗａｒｄｓｉｌｅｌｌａ ｔａｒｄａに対する
抗病性を獲得したものと思われる。しかし、ＰＧを１．
０ｍｇ投与した区の生残率は７３．３％であり、対照区
との間に有意な差がなかったことから、ＰＧを投与する
際には最適投与量が存在することが示唆された。本試験
において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が向上
することを確認した。尚、細菌検査ならびに病理組織学
的検査の結果からウナギが斃死した原因はすべてＥｄｗ
ａｒｄｓｉｌｅｌｌａ ｔａｒｄａの感染によるもので
あると判断された。
率が５３．３％であったのに対し、本発明区のＰＧを
０．２ｍｇ投与した区は９０．０％と有意に高かった。
ＰＧの投与により、ウナギの免疫機能が活性化された結
果、Ｅｄｗａｒｄｓｉｌｅｌｌａ ｔａｒｄａに対する
抗病性を獲得したものと思われる。しかし、ＰＧを１．
０ｍｇ投与した区の生残率は７３．３％であり、対照区
との間に有意な差がなかったことから、ＰＧを投与する
際には最適投与量が存在することが示唆された。本試験
において、ＰＧの投与により魚類の生体防御能力が向上
することを確認した。尚、細菌検査ならびに病理組織学
的検査の結果からウナギが斃死した原因はすべてＥｄｗ
ａｒｄｓｉｌｅｌｌａ ｔａｒｄａの感染によるもので
あると判断された。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３１】試験例 ７（ＰＧの長期連続投与試験） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表７に示す
試験区分に従い、各区１６０尾ずつを２つの池に分けて
試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式
の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて２４週間飼育した。飼育期
間中水温は１７℃に調節した。本発明区は、基礎飼料に
ＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットに成型
したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当り０．
００４ｍｇ〜４ｍｇになるように試験飼料を給与した。
なお、対照区には、ＰＧ無添加の飼料を給与した。
試験区分に従い、各区１６０尾ずつを２つの池に分けて
試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環式
の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて２４週間飼育した。飼育期
間中水温は１７℃に調節した。本発明区は、基礎飼料に
ＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットに成型
したのち、ＰＧの投与量が１日に魚体重１ｋｇ当り０．
００４ｍｇ〜４ｍｇになるように試験飼料を給与した。
なお、対照区には、ＰＧ無添加の飼料を給与した。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３５】試験例 ８（ＰＧに再えるエクストルージ
ョン加工の影響） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表８に示す
試験区分に従い、各区１６０尾ずつを２つの水槽に分け
て試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環
式の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて４週間飼育した。飼育期
間中の水温は１７℃に調節した。本発明区には基礎飼料
にＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットおよ
び約４ｍｍ径のエクスパンジョンペレットにそれぞれ成
型したのち、ＰＧの投写量が１日に魚体重１ｋｇ当たり
０．０４ｍｇになるように試験飼料を給与した。なお、
対照区には、ＰＧ無添加飼料を給与した。
ョン加工の影響） 試験方法： 平均体重約２０ｇのニジマスを表８に示す
試験区分に従い、各区１６０尾ずつを２つの水槽に分け
て試験に供試した。供試魚は紫外線殺菌装置のある循環
式の１．５ｔのＦＲＰ水槽にて４週間飼育した。飼育期
間中の水温は１７℃に調節した。本発明区には基礎飼料
にＰＧを外割りで添加し、３．２ｍｍ径のペレットおよ
び約４ｍｍ径のエクスパンジョンペレットにそれぞれ成
型したのち、ＰＧの投写量が１日に魚体重１ｋｇ当たり
０．０４ｍｇになるように試験飼料を給与した。なお、
対照区には、ＰＧ無添加飼料を給与した。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３８】表８に示すとおり、エクスパンジョンペレ
ットにおいても、通常のペレットと遜色ないＰＧ添加に
よるＡＣＨ５０値の上昇が確認された。エクスパンジョ
ンペレットは、飼料原料中のでんぷん質をα化させるこ
とにより、通常のペレットよりエネルギーの利用性が高
められることから、発育が優れることが知られている。
また、飼料の粉化が少なく、飼料が水に溶けにくいこと
から、養殖用水の汚染が著しく低減される。また、従
来、ペレットを食さないとされていた、ブリ等の海水魚
やウナギなどに給与することも可能である。以上の理由
から、近年普及しつつある新しい形態の飼料と言われて
いる。しかしながら、一般に、飼料をエクストルージョ
ン加工する際、１０気圧程度の高い圧力と１００℃以上
の高い温度等の過酷な物理的条件が加わるため、原料の
変成が問題となる。本試験により、ＰＧがこのようなエ
クストルージョン加工の過酷な物理的条件の影響を受け
ず、魚類の生体防御機能を向上させ得ることを明らかに
した。このことは、ＰＧが通常のペレットやマッシュ飼
料のみでなく、エクスパンジョンペレットにも使用が可
能であり、したがって、対象生物により様々な飼料形態
が要求される甲殻類および魚類用料科において、ＰＧが
より幅広く利用可能であることを示している。
ットにおいても、通常のペレットと遜色ないＰＧ添加に
よるＡＣＨ５０値の上昇が確認された。エクスパンジョ
ンペレットは、飼料原料中のでんぷん質をα化させるこ
とにより、通常のペレットよりエネルギーの利用性が高
められることから、発育が優れることが知られている。
また、飼料の粉化が少なく、飼料が水に溶けにくいこと
から、養殖用水の汚染が著しく低減される。また、従
来、ペレットを食さないとされていた、ブリ等の海水魚
やウナギなどに給与することも可能である。以上の理由
から、近年普及しつつある新しい形態の飼料と言われて
いる。しかしながら、一般に、飼料をエクストルージョ
ン加工する際、１０気圧程度の高い圧力と１００℃以上
の高い温度等の過酷な物理的条件が加わるため、原料の
変成が問題となる。本試験により、ＰＧがこのようなエ
クストルージョン加工の過酷な物理的条件の影響を受け
ず、魚類の生体防御機能を向上させ得ることを明らかに
した。このことは、ＰＧが通常のペレットやマッシュ飼
料のみでなく、エクスパンジョンペレットにも使用が可
能であり、したがって、対象生物により様々な飼料形態
が要求される甲殻類および魚類用料科において、ＰＧが
より幅広く利用可能であることを示している。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正内容】
【００４０】また、本発明の給餌方法によれば魚類の生
体機能並びに免疫機能を適確な目安によって達成するこ
とができると共に、その経済的効果も高いとする実操業
上のメリットをも奏する。
体機能並びに免疫機能を適確な目安によって達成するこ
とができると共に、その経済的効果も高いとする実操業
上のメリットをも奏する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 35/74 Ｂ 7431−4Ｃ 37/02 8314−4Ｃ
Claims (2)
- 【請求項１】 グラム陽性菌，酵母類，真菌類由来のペ
プチドグリカンを添加したことを特徴とする甲殻類，魚
類用飼料。 - 【請求項２】 魚類に対するペプチドグリカンの一日当
りの投与量とその適正投与期間の関係を予備試験により
設定し、ペプチドグリカン含有飼料を前記投与量に相当
する割合で前記適正投与期間連日投与することを特徴と
する魚類用飼料の給飼方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5063361A JP2547371B2 (ja) | 1992-03-03 | 1993-02-26 | 甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料の給餌方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-82625 | 1992-03-03 | ||
| JP8262592 | 1992-03-03 | ||
| JP5063361A JP2547371B2 (ja) | 1992-03-03 | 1993-02-26 | 甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料の給餌方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0622705A true JPH0622705A (ja) | 1994-02-01 |
| JP2547371B2 JP2547371B2 (ja) | 1996-10-23 |
Family
ID=26404471
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5063361A Expired - Lifetime JP2547371B2 (ja) | 1992-03-03 | 1993-02-26 | 甲殻類、魚類用飼料、及び魚類用飼料の給餌方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2547371B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5997064A (en) * | 1996-12-06 | 1999-12-07 | Tsubakimoto Chain Co. | Article gripping apparatus |
| JP2011518559A (ja) * | 2008-04-24 | 2011-06-30 | エウォス、イノベーション、アクティーゼルスカブ | 機能性飼料組成物 |
-
1993
- 1993-02-26 JP JP5063361A patent/JP2547371B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5997064A (en) * | 1996-12-06 | 1999-12-07 | Tsubakimoto Chain Co. | Article gripping apparatus |
| JP2011518559A (ja) * | 2008-04-24 | 2011-06-30 | エウォス、イノベーション、アクティーゼルスカブ | 機能性飼料組成物 |
| JP2015027299A (ja) * | 2008-04-24 | 2015-02-12 | エウォス、イノベーション、アクティーゼルスカブＥｗｏｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ａｓ | 機能性飼料組成物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2547371B2 (ja) | 1996-10-23 |
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