JPH06172202A - アシル−補酵素ａ：コレステロールアシル転移酵素阻害 剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】ジペプチドを有効成分として含有するアシル−
補酵素Ａ：コレステロールアシル転移酵素阻害剤を提供
する。 【構成】保護されていてもよいジペプチド、保護されて
いてもよい環状ジペプチドおよび環中の窒素原子に置換
されていてもよいアルアルキル基が結合している保護さ
れていてもよいジペプチドを有効成分として含有するア
シル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転移酵素阻害
剤。 【効果】本発明のアシル−補酵素Ａ：コレステロールア
シル転移酵素阻害剤は、動脈硬化症の関連する諸疾患の
予防、治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、保護されていてもよい
ジペプチド、保護されていてもよい環状ジペプチドまた
は環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル
基が結合している保護されていてもよい環状ジペプチド
から選ばれる一種以上を有効成分として含有するアシル
−補酵素Ａ：コレステロールアシル転移酵素（ＡＣＡ
Ｔ）阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】アシル−補酵素Ａ：コレステロールアシ
ル転位酵素を阻害することにより、食事由来のコレステ
ロールおよび肝臓から排泄されたコレステロールの腸管
からの吸収および再吸収を抑制し、血中コレステロール
を低下させることができ、また、マクロファージの泡沫
化を抑制し、動脈壁におけるコレステロールエステルの
蓄積および貯蔵を減少させ、アテローム性動脈硬化病変
の形成あるいは進展を抑制することができる。したがっ
て、アシル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転位酵素
を阻害する物質は、脂質低下作用と同時に動脈硬化症の
関連する諸疾患、たとえば、一過性虚血発作、狭心症、
心筋梗塞、末梢性血栓および閉塞などの予防、治療に有
用であるとの考えからアシル−補酵素Ａ：コレステロー
ルアシル転位酵素の阻害剤の研究が行われている［ザ・
リピッド（The Lipid）、第2巻、第1号、第43-54頁（19
91年）など］。一方、保護されていてもよいジペプチ
ド、保護されていてもよい環状ジペプチドまたは環中の
窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル基が結合
している保護されていてもよい環状ジペプチドが、アシ
ル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転位酵素の阻害作
用を発揮することは知られていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
で有用なアシル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転位
酵素の阻害剤を提供することである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】かかる状況下、本発明者
らは鋭意研究の結果、意外にも、保護されていてもよい
ジペプチド、保護されていてもよい環状ジペプチドまた
は環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル
基が結合している保護されていてもよい環状ジペプチド
が、顕著なアシル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転
位酵素の阻害作用を発揮することを見出し、本発明を完
成させた。

【０００５】つぎに、本発明を詳細に説明する。本発明
の保護されていてもよいジペプチド、保護されていても
よい環状ジペプチドまたは環中の窒素原子に置換されて
いてもよいアルアルキル基が結合している保護されてい
てもよい環状ジペプチドとしては、２個の構成アミノ酸
がペプチド結合したものであればいずれも含まれるが、
その構成アミノ酸としては、具体的には、フェニルアラ
ニン（Ｐｈｅ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン
（Ｔｒｐ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌ
ｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、リジン（Ｌｙｓ）、グルタ
ミン酸（Ｇｌｕ）またはアスパラギン酸（Ａｓｐ）など
の天然または化学合成により得られるアミノ酸が挙げら
れる。保護基としてはペプチド分野で通常知られた保護
基が挙げられる。置換されていてもよいアルアルキル基
としては、たとえば、ニトロ基；メチル、エチル、ｎ−
プロピルおよびｎ−ブチルなどの低級アルキル基；フッ
素原子、塩素原子および臭素原子などのハロゲン原子；
低級アルキル基で置換されたアミノ基のような置換基で
置換されていてもよいベンジルおよびフェネチルなどの
アルアルキル基が挙げられる。

【０００６】保護されていてもよいジペプチドとして
は、たとえば、アミノ酸の一方が保護基を有していても
よいフェニルアラニン（Ｐｈｅ）、チロシン（Ｔｙｒ）
またはトリプトファン（Ｔｒｐ）であり、他方が、保護
基を有していてもよいロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシ
ン（Ｉｌｅ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン
（Ｐｒｏ）、リジン（Ｌｙｓ）、グルタミン酸（Ｇｌ
ｕ）またはアスパラギン酸（Ａｓｐ）であるジペプチ
ド、さらに具体的には、たとえば、Ｐｈｅ−Ｌｅｕ、Ｐ
ｈｅ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ−Ｇｌｕ、Ｐｈｅ−Ｐｈｅ、Ｔｙ
ｒ−Ｌｅｕ、Ｔｒｐ−Ｌｅｕ、Ｐｒｏ−Ｐｈｅ、Ｌｙｓ
−ＰｈｅまたはＡｓｐ−Ｐｈｅなどが；保護されたジペ
プチドとしては、ジペプチドのＮ末端、Ｃ末端または側
鎖の原子団が、たとえば、ベンジルオキシカルボニル
（Ｚ）基、t-ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基、アセチ
ル（Ａｃ）基、ベンゾイル（Ｂｚ）基、ニトロ（ＮＯ₂
−）もしくはジメチルアミノ（ｄｉＭｅＮ−）基で置換
されていてもよいベンジル（Ｂｚｌ）基、ベンジルオキ
シ（ＯＢｚｌ）基、メトキシ（ＯＭｅ）基またはt-ブト
キシ（ＯＢｕ^t）などの通常知られた保護基で修飾され
たＺ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−ＯＭｅ、Ｚ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−
ＯＭｅ、Ｚ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ＯＭｅ）−ＯＭｅ、Ｚ−
Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ、Ｚ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＭ
ｅ、Ｚ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＯＭｅ、Ｚ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−ＯＭｅ、Ｚ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｐｈｅ−ＯＭｅまたはＡ
ｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＭｅなどが挙げられる。

【０００７】保護されていてもよい環状ジペプチドとし
ては、上記のジペプチドから誘導される環状ジペプチド
が、さらに具体的には、たとえば、cyclo（−Ｐｈｅ−
Ｌｅｕ−）、cyclo（−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−）、cyclo（−
Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−）、cyclo（−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−）、c
yclo（−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−）、cyclo（−Ｐｈｅ−Ｇｌ
ｕ−）またはcyclo（−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−）などが；保
護された環状ジペプチドとしては、たとえば、cyclo
（−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ（ＯＭｅ）−）などが挙げられる。

【０００８】環中の窒素原子に結合している水素のうち
の一方が、置換されていてもよいアルアルキル基で置換
されている環状ジペプチドとしては、cyclo（−Ｂｚｌ
（ＮＯ₂）−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−）、cyclo（−Ｐｈｅ−Ｂ
ｚｌ（ＮＯ₂）−Ｌｅｕ−）、cyclo（−Ｂｚｌ（ＮＭｅ
₂）−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−）またはcyclo（−Ｐｈｅ−Ｂｚ
ｌ（ＮＭｅ₂）−Ｌｅｕ−）などが挙げられる。

【０００９】本発明の保護されていてもよいジペプチ
ド、保護されていてもよい環状ジペプチドまたは環中の
窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル基が結合
している保護されていてもよい環状ジペプチドは、天然
から得られるものおよび化学合成で得られるものいずれ
でもよく、構成アミノ酸は、Ｄ体、Ｌ体およびＤＬ体の
いずれでもよい。さらに、本発明の保護されていてもよ
いジペプチド、保護されていてもよい環状ジペプチドま
たは環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアルキ
ル基が結合している保護されていてもよい環状ジペプチ
ドは、塩を含む。塩としては、たとえば、塩酸もしくは
硫酸などの鉱酸との塩；ギ酸、クエン酸もしくはトリク
ロロ酢酸などの有機カルボン酸との塩；メタンスルホン
酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、メシ
チレンスルホン酸もしくはナフタレンスルホン酸などの
スルホン酸類との塩；またはアルカリ金属、たとえばナ
トリウムもしくはカリウムとの塩が挙げられる。

【００１０】本発明の保護されていてもよいジペプチ
ド、保護されていてもよい環状ジペプチドまたは環中の
窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル基が結合
している保護されていてもよい環状ジペプチドは、公知
方法、たとえば、生化学実験講座１ タンパク質の化学
IV、第207-400頁（東京化学同人、1977年）、アグリカ
ルチャル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（Ag
ric. Biol.Chem.)第36巻、第８号、第1423〜1431頁(197
2年)に記載の方法およびザ・ジャーナル・オブ・オーガ
ニック・ケミストリー（J.Org.Chem.）第33巻、第２
号、第864〜866頁（1968年）に記載の方法またはそれに
準じた方法で製造することができる。

【００１１】また、環中の窒素原子が置換されていても
よいアルアルキルで置換された環状ペプチドは、たとえ
ば、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）アミノ酸と混合酸
無水物法あるいはＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド（ＤＣＣ）を用いたＤＣＣ法によりアミノ酸のメ
チルエステルを縮合させ、接触還元により保護基である
ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）基を除いた後、窒素原
子に導入しようとする置換基を有していてもよいアルア
ルキル基に対応するアルデヒド、たとえば、ベンズアル
デヒドを反応させシッフ塩基とし、ついで還元剤、たと
えば、水素化ホウ素ナトリウムで還元した後、溶媒中で
の加熱、たとえば、トルエン中で還流すれば、製造する
ことができる。

【００１２】本発明の保護されていてもよいジペプチ
ド、保護されていてもよい環状ジペプチドまたは環中の
窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル基が結合
している保護されていてもよい環状ジペプチドから選ば
れる一種以上を有効成分として含有するアシル−補酵素
Ａ：コレステロールアシル転位酵素の阻害剤は、医薬品
または食品の形態で提供される。

【００１３】医薬品の形態としては、通常知られた剤
形、たとえば、経口投与用には、錠剤、散剤、顆粒剤、
糖衣錠、カプセル剤および液剤など、非経口投与用に
は、懸濁液、液剤、乳剤、アンプルおよび注射剤などが
挙げられ、これらを組み合わせた形態でもよい。

【００１４】医薬品製剤とするには、有効成分に、必要
に応じて、乳糖、無水乳糖、マンニトール、コーンスタ
ーチおよび結晶セルロースなどの賦形剤；ヒドロキシプ
ロピルセルロース、ポリビニルピロリドンおよびメチル
セルロースなどの結合剤；カルボキシメチルセルロー
ス、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度
ヒドロキシプロピルセルロースおよび部分α化デンプン
などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン
酸カルシウムおよびステアリン酸などの滑沢剤；ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース、メタアクリル酸アクリ
ル酸コポリマーおよびヒドロキシプロピルメチルセルロ
ースフタレートなどのコーティング剤；マンニトールの
ような等張化剤；パラオキシ安息香酸メチルのような保
存剤；およびベンジルアルコールのような無痛化剤など
を用いて、当業者が通常行う方法で行えばよい。また、
医薬品として投与する場合、投与方法、投与量および投
与回数は、患者の年齢、体重および症状によって適宜選
択できるが、保護されていてもよいジペプチド、保護さ
れていてもよい環状ジペプチドまたは環中の窒素原子に
置換されていてもよいアルアルキル基が結合している保
護されていてもよい環状ジペプチドとして0.1-100mg/kg
でよい。

【００１５】食品の形態としては、たとえば、調味料、
菓子類、シロップ類、果実加工品、野菜加工品、畜肉加
工品、魚肉製品、珍味類、缶詰・瓶詰類、清涼飲料およ
び即席食品類などの通常知られた飲食物への添加物が挙
げられる。保護されていてもよいジペプチド、保護され
ていてもよい環状ジペプチドまたは環中の窒素原子に置
換されていてもよいアルアルキル基が結合している保護
されていてもよい環状ジペプチドの食品への配合は常法
に従えばよい。配合量は、１日の摂取量が0.5-6.0gでよ
い。

【００１６】

【実施例】つぎに、本発明の化合物の薬理作用について
述べる。なお、以下に用いるアミノ酸は、特に断わらな
い限り、Ｌ−アミノ酸を示す。また、化合物No.は、製
造例の番号を示す。

【００１７】［保護されていてもよいジペプチド、保護
されていてもよい環状ジペプチドまたは環中の窒素原子
に置換されていてもよいアルアルキル基が結合している
保護されていてもよい環状ジペプチドのアシル−補酵素
Ａ：コレステロールアシル転位酵素の阻害作用］グッド
マン(Goodman)の方法［ザ・ジャーナル・オブ・バイオ
ロジカル・ケミストリー（J.Biol.Chem）第239巻、第5
号、第1335-1345頁（1964年)］に準じて行った。

【００１８】(1)アシル−補酵素Ａ：コレステロールア
シル転位酵素の調製 ラット肝臓20gをシュクロース緩衝液［0.2Mシュクロー
ス、0.05M塩化カリウム、0.1Mリン酸カリウム緩衝液(pH
7.4）］で洗浄した後、ラット肝臓をハサミで細切れに
し、シュクロース緩衝液50ml加え、ポッター−エルベー
ジェム（Potter-Elvehjem）ホモジナイザーでホモジナ
イズ（テフロンペストルで10往復）する。得られたホモ
ジネート液をガーゼ（６重折り）で濾過し、濾液を得
る。濾液を10,000×gで20分間遠心分離し、上清をさら
に105,000×gで45分間超遠心分離し、沈澱物を得る。沈
澱物にシュクロース緩衝液20ml加え、再びホモジナイズ
したホモジネート液をラット肝ミクロソーム分画（以下
酵素標品と称する。）とする。

【００１９】(2)アシル−補酵素Ａ：コレステロールア
シル転位酵素阻害活性の測定 0.1Mリン酸カリウム緩衝液（pH7.4）（以下緩衝液と称
する。）1.59mlに検体を溶解させ、脂肪酸フリーの牛血
清アルブミン（700mg/100ml緩衝液）1.5ml、コレステロ
ール（7.2mg/mlアセトン）50μl、オレイル−ＣｏＡ
（2.6mg／ml緩衝液）360μlおよび酵素標品1.5mlを加え
総量5.0mlで30℃、2時間反応させる。対照として検体を
含まないものを同様に反応させる。反応混合物にクロロ
ホルム:メタノール＝2:1(v/v)5mlを加え、反応を停止さ
せる。さらにクロロホルム:メタノール＝2:1を24ml加
え、よく攪拌後、3000rpmで5分間遠心分離し、下層を20
ml抜き取り減圧乾固する。これにn-ヘキサン10mlを加
え、セップ−パック カートリッジ（sep-pak cartridg
e,ウォーターズ社製）に吸着させる。n-ヘキサン10mlで
一度洗浄後、n-ヘキサン:ジエチルエーテル＝75:25(v/
v)10mlで溶出し、減圧下に溶媒を留去後、アセトニトリ
ル:イソプロピルアルコール＝1:1(v/v)100μlを加え、2
0μlを高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で、オ
レイルコレステロールを定量する。これより検体濃度30
μg／mlでの阻害率を算出した。その結果を表１に示
す。 （以下余白）

【００２０】 ^*1：Phe-Phe^*2 ：Asp-Phe-OMe（アスパルテーム）

【００２１】つぎに、（ａ）保護されていてもよいジペ
プチド、（ｂ）保護されていてもよい環状ジペプチドま
たは（ｃ）環中の窒素原子に置換されていてもよいアル
アルキル基が結合している保護されていてもよい環状ジ
ペプチドの製造例を説明する。なお、カラムクロマトグ
ラフィーにおける担体は、シリカゲル60、No.7734（メ
ルク社製）を用いた。また、溶離液における混合比は、
すべて容量比である。

【００２２】製造例１ （１）ロイシン10.0gをメタノール200mlに溶解させ、こ
の溶液に、氷冷下、塩化水素ガスを吹き込み飽和させ
る。室温で３日間放置後、減圧下に溶媒を濃縮乾固す
る。水および酢酸エチルを加え、炭酸ナトリウムでpH8.
5に調整し、酢酸エチル150mlで３回抽出する。抽出液に
濃塩酸を7.7ml加え、減圧下に溶媒を留去する。アセト
ン−ジエチルエーテルで結晶化を行い、ロイシンメチル
エステル塩酸塩8.9gを得る。

【００２３】（２）Ｎ−ベンゾオキシカルボニル−フェ
ニルアラニン6.7gを無水ジクロロメタン65mlに溶解後、
-15℃で撹拌し、この溶液に、トリエチルアミン6.3mlを
加え、クロロ炭酸エチル2.1mlを滴下する。-15℃で５分
間撹拌後、ロイシンメチルエステルの塩酸塩4.5gを徐々
に加え、同温度で約20分間撹拌後、徐々に温度を室温ま
で上げる。終夜４℃で放置後、反応混合物に水60mlを加
え、1N塩酸でpH1.5に調整し、有機層を分取する。分取
した有機層に再び水50mlを加え、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液でpH7.5に調整し、有機層を分取する。分取し
た有機層を水および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸
ナトリウムで乾燥させる。減圧下に溶媒を留去し、ジエ
チルエーテルで結晶化を行い、Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニル−フェニルアラニル-ロイシンメチルエステル
（化合物No.1）の無色結晶6.2gを得る。 IR(KBr)cm^-1:3291,2958,1749,1694,1652,1548,1440,126
5,1224,1153,1057,736,701

【００２４】製造例２〜７ 製造例１と同様にして、表２の化合物を得る。 （以下余白）

【００２５】 以下に表２の化合物の物性を、それぞれ示す。 No.2,IR(KBr)cm^-1:3273,3065,2965,1750,1704,1660,155
1,1454,1382,1273,1202,1055,736,700 No.3,IR(KBr)cm^-1:3318,2953,1745,1694,1528,1417,135
7,1212,1118,747,700 No.4,IR(KBr)cm^-1:3312,1737,1690,1662,1534,1289,103
8,751,700 No.5,IR(KBr)cm^-1:3323,2956,1752,1706,1662,1540,145
7,1437,1231,742,700 No.6,IR(KBr)cm^-1:3311,2945,1740,1694,1652,1538,145
5,1265,1028,740,698 No.7,IR(KBr)cm^-1:3309,1754,1731,1694,1652,1540,143
8,1386,1264,1217,1167,1048,743,700

【００２６】製造例８ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−チロシンのジシクロヘ
キシルアミン塩9.0gおよびロイシンメチルエステル塩酸
塩3.3gを酢酸エチル 100ml中で氷冷下撹拌し、Ｎ，Ｎ’
−ジシクロカルボジイミド3.7gを加え氷冷下１時間撹拌
後、さらに室温で4.5時間撹拌し、４℃で一夜放置す
る。ジシクロヘキシル尿素を濾去後、飽和食塩水100ml
を加え、酢酸エチル150mlで３回抽出する。有機層を1N
塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水
で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に
溶媒を留去する。ついで石油エーテルで結晶化を行い、
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−チロシル−ロイシンメ
チルエステル（化合物No.8）の結晶7.8gを得る。 IR(KBr)cm^-1:3318,2959,1710,1690,1659,1538,1436,130
5,1260,1217,1043,1021,735,699

【００２７】製造例９ （１）Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−フェニルアラニ
ル−ロイシンメチルエステル6.0gをメタノール50mlに溶
解後、この溶液に濃塩酸1.6mlおよび5%パラジウム−炭
素350mgを加え、常温常圧下で水素添加を行う。パラジ
ウム−炭素を濾去後、減圧下に溶媒を留去する。ついで
石油エ−テルで結晶化を行い、無色のフェニルアラニル
ロイシンメチルエステル塩酸塩4.6g得る。

【００２８】（２）フェニルアラニルロイシンメチルエ
ステル塩酸塩 2.7gを酢酸1.6mlの存在下、トルエン370m
lに懸濁させ、12時間還流する。減圧下に溶媒を留去
し、得られた残留物にクロロホルムおよび水を加え、1N
塩酸でpH 1.5に調整し、有機層を分取する。分取した有
機層に水および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、
pH7.5に調整し、有機層を分取する。分取した有機層を
水および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥させる。減圧下に溶媒を留去した後、得られた残
留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液；クロロホル
ム:メタノール=100:1）で精製する。減圧下に溶媒を留
去し、シクロ−フェニルアラニル−ロイシン（化合物N
o.9）の無色結晶199mgを得る。 IR(KBr)cm^-1:3195,3061,2958,1668,1463,1324,1096,84
4,753,702

【００２９】製造例１０〜１１ 製造例９と同様にして、表３の化合物を得る。 （以下余白）

【００３０】 以下に表３の化合物の物性を、それぞれ示す。 No.10,IR(KBr)cm^-1:3191,3060,2963,1667,1451,1334,85
8,702 No.11,IR(KBr)cm^-1:3267,2982,2881,1709,1691,1662,16
45,1455,1426,1412,750,702

【００３１】製造例１２ フェニルアラニルロイシンメチルエステル塩酸塩3.54g
を飽和アンモニア−メタノール溶液360mlに溶解させ、
一夜室温で放置する。析出物を濾取し、水、メタノール
およびジエチルエーテルで順次洗浄し、シクロ−フェニ
ルアラニル−ロイシンの無色結晶2.8gを得る。 IR(KBr)cm^-1:3195,3061,2958,1668,1463,1324,1096,84
4,753,702

【００３２】製造例１３〜１７ 製造例１２と同様にして、表４の化合物を得る。 （以下余白）

【００３３】 以下に表４の化合物の物性を、それぞれ示す。 No.13,IR(KBr)cm^-1:3204,3055,2927,1660,1462,1338,10
92,806,757 No.14,IR(KBr)cm^-1:3196,2957,1668,1464,1328,1093,74
5 No.15,IR(KBr)cm^-1:3054,1674,1463,1335,1324,1102,91
4,848,708 No.16,IR(KBr)cm^-1:3436,3316,3212,2957,1668,1471,13
35,1243,817 No.17,IR(KBr)cm^-1:3191,3054,2978,2898,1738,1668,14
62,1342,1254,1171,864,703

【００３４】製造例１８ シクロ−フェニルアラニル−グルタミン酸メチルエステ
ル153mgをメタノール2ml中、氷冷下で攪拌しながら1N水
酸化ナトリウム水溶液0.63mlを加える、氷冷下で１時間
攪拌後、室温で1.5時間攪拌し、４℃で一夜放置する。
アンバーライトIR-120(H⁺)（製造元：米国ローム・アン
ド・ハース社、東京有機化学工業株式会社）で中和後、
これを濾去し、温熱メタノールでよく洗浄し、濾液およ
び洗液を合わせて、減圧下に溶媒を留去し、シクロ−フ
ェニルアラニル−グルタミン酸（化合物No.18）の結晶1
10mgを得る。 IR(KBr)cm^-1:3028,1733,1674,1454,1336,1260,1177,703

【００３５】製造例１９ （１）Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−ロイシル- フェ
ニルアラニンメチルエステル5.5gをメタノール70mlに溶
解させ、この溶液に5%パラジウム−炭素270mgを加え、
常温常圧下で水素添加を行なう。パラジウム−炭素を濾
去後、減圧下に溶媒を留去し、ロイシル−フェニルアラ
ニンメチルエステル3.8gを得る。ついで、ロイシル−フ
ェニルアラニンメチルエステル943mgをメタノール50ml
に溶解させ、この溶液に氷冷下で撹拌しながらベンズア
ルデヒド1.3mlを加え、室温で２時間撹拌する。さらに
氷冷下で撹拌しながら水素化ホウ素ナトリウム366mgを
加え、室温で２時間撹拌後、減圧下に溶媒を留去する。
得られた残留物に飽和食塩水100ml加え、酢酸エチル100
mlで３回抽出し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ
る。減圧下に溶媒を留去後、得られた残留物をカラムク
ロマトグラフィー（溶離液；ベンゼン:酢酸エチル=10:
1）で精製すれば、Ｎ−ベンジル−ロイシル−フェニル
アラニンメチルエステル404mgを得る。

【００３６】（２）Ｎ−ベンジル−ロイシル−フェニル
アラニンメチルエステル404mgを室温でエタノール5mlお
よび濃塩酸0.12mlに加え、減圧下に溶媒を留去し、Ｎ−
ベンジル−ロイシル−フェニルアラニンメチルエステル
の塩酸塩を得る。

【００３７】（３）Ｎ−ベンジル−ロイシル−フェニル
アラニンメチルエステル塩酸塩350mgをトルエン36mgに
懸濁させ、これに酢酸0.18mlを加え、27時間還流する。
ついで、減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物をカラ
ムクロマトグラフィー（溶離液；ベンゼン:酢酸エチル=
3:1）で精製すれば、Ｎ−ベンジル−シクロ−ロイシル
−フェニルアラニン（化合物No.19）140mgを得る。 IR(KBr)cm^-1:3254,2958,1685,1654,1635,1453,1342,74
5,702

【００３８】製造例２０〜２４ 製造例１９と同様にして、表５の化合物を得る。

【００３９】

【表５】 以下に表５の化合物の物性を、それぞれ示す。 No.20,IR(KBr)cm^-1:3064,2957,1682,1452,1325,1148,73
3,700 No.21,IR(KBr)cm^-1:3200,3065,2957,1680,1523,1456,13
46,735,701 No.22,IR(KBr)cm^-1:3447,2957,1676,1458,1324,1149,70
4 No.23,IR(KBr)cm^-1:3228,2958,1684,1522,1456,1345,11
09,753,701 No.24,IR(KBr)cm^-1:3448,2958,1654,1466,1343,1321,11
31,754,703

【００４０】

【発明の効果】本発明の、保護されていてもよいジペプ
チド、保護されていてもよい環状ジペプチドまたは環中
の窒素原子に置換されていてもよいアルアルキル基が結
合している保護されていてもよい環状ジペプチドは、ア
シル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転位酵素の阻害
作用を発揮するため、動脈硬化症の関連する諸疾患の予
防、治療に有用である。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】（ａ）保護されていてもよいジペプチド、
   （ｂ）保護されていてもよい環状ジペプチドまたは
   （ｃ）環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアル
   キル基が結合している保護されていてもよい環状ジペプ
   チドから選ばれる一種以上を有効成分として含有するア
   シル−補酵素Ａ：コレステロールアシル転移酵素阻害
   剤。
2. 【請求項２】（ａ）保護されていてもよいジペプチド、
   （ｂ）保護されていてもよい環状ジペプチドまたは
   （ｃ）環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアル
   キル基が結合している保護されいてもよい環状ジペプチ
   ドを構成するアミノ酸の一方がフェニルアラニン、チロ
   シンまたはトリプトファンである請求項１記載のアシル
   −補酵素Ａ：コレステロールアシル転移酵素阻害剤。
3. 【請求項３】（ａ）保護されていてもよいジペプチド、
   （ｂ）保護されていてもよい環状ジペプチドまたは
   （ｃ）環中の窒素原子に置換されていてもよいアルアル
   キル基が結合している保護されていてもよい環状ジペプ
   チドを構成するアミノ酸の一方がフェニルアラニン、チ
   ロシンまたはトリプトファンであり、他方が、ロイシ
   ン、イソロイシン、フェニルアラニン、プロリン、リジ
   ン、グルタミン酸またはアスパラギン酸である請求項１
   または２記載のアシル−補酵素Ａ：コレステロールアシ
   ル転移酵素阻害剤。