JPH05507719A - 薬学的治療 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 薬学的治療 本発明は、ヒトおよび動物におけるＨＩＶ−１感染症の治療方法、並びにかかる 感染症の治療用医薬を調製する際の化合物の使用に関する。

ＥＰ−、Ａ−１４１９２７（ビーチャムグループ）はペンシクロビル（ｐｅｎｃ ｉｃｌｏｖｉｒ）、つまり式（Ａ）： の化合物、その塩、リン酸エステルおよびアシル誘導体を抗ウィルス剤として開 示している。ペンシクロビルのナトリウム塩水和物はＥＰ−Ａ−２１６４５９（ ビーチャムグループ）に記載されている。また、英国マンチェスターで１９８６ 年９月７−１３日に開催された「第１４回国際微生物学会のアブストラクト（Ａ ｂｓｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　１４ｔｈＩｎｔ、　Ｃｏｎｇｒｅｓｓ　ｏｆ　Ｍｉｃ ｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）」のアブストラクトＰ、Ｖ１１−５．１９３頁（Ｂｏｙｄ ら）には、ペンシクロビルとその抗ウィルス活性が開示されている。

式（Ａ）の化合物のプロドラッグ（薬物前駆体）は式（Ｂ）：３、　ヘルペスウ ィルスとＨＴＶの二重感染は表現型混合および“偽型式（Ａ）で定義した通りの 誘導体である。Ｘが０１−、アルコキシまたはＮＨ，である式（Ｂ）の化合物は ＥＰ−Ａ−１４１９２７に記載されており、ＥＰ−Ａ−１８２０２４（ビーチャ ムグループ）に記載された、Ｘか水素である式ＣＢ）の化合物は好適なプロドラ ッグである。式（Ｂ）の化合物の特に好適な例は、ＥＰ−Ａ−１８２０２４の実 施例２に記載された、Ｘか水素で、２個のＯＨ基がアセチル誘導体の形をしたも のであり、この化合物を以後ファムシクロビル（ｆａｍｃｉｃｌｏｖｉｒ）と呼 ぶことにする。

式（Ａ）および（Ｂ）の化合物、それらの塩並びに誘導体は、単純庖疹ウィルス １型、単純庖疹ウィルス２蟹、水痘−帯状庖疹ウィルス、エプスタイン−バーウ ィルスといったヘルペスウィルスによって起こる感染症の治療に有効であると記 載されている。

今回、これらの化合物は、ヘルペスウィルスに感染した患者において、ヒト免疫 不全ウィルス（ＨＩＶ−１）に対する活性を有し、それ故にかかる患者のＨＩＶ 感染症の治療に使用し得ることか見いだされた。

この発見は、ヒト免疫不全ウィルスｌ型（ＨＩＶ−１）のＲＮＡ依存性ＤＮＡポ リメラーゼ（逆転写酵素）活性を阻害するペンシクロビルのトリホスフェート誘 導体の能力に関係している。ＨＩＶ−１の逆転写酵素はゲノムＲＮＡのプロウィ ルスｄｓ−ＤＮＡへの変換に不可欠なウィルス−コード化酵素であり、従って抗 ウイルス化学療法にとってまたとない分子標的である。

すでにヘルペスウィルスに感染した細胞に侵入するＨＩＶの能力は知られている （例えば、ＥＢＶに感染したＢリンパ球Ｉ）。同一細胞中にヘルペスウィルスと ヒト免疫不全ウィルスの両方が存在することは特別な結果をもたらす。

■、　ペンシクロビルは高レベルのペンシクロビルトリホスフェートへ導くヘル ペスウィルス−コード化チミジンキナーゼによりリン酸化されるだろう２゜形成 されたトリホスフェートはヘルペスＤＮＡポリメラーゼの阻害剤であるばかりで なく、それはＨＩＶ逆転写酵素をも阻害することが本研究から分かる。

２、ＨＩＶの複製はヘルペスウィルスのトランス作用因子により増強され得る。

ＨＳＶの生産物であるＴＣＰ−４（感染細胞タンパク質）はＨＩＶ転写の開始を 促進することができる。

（ｐｓｅｕｄｏｔｙｐｅ）”ＨＩＶ粒子（ヘルペスウィルスのエンベロープ糖タ ンパク質を有する）の生産をもたらす３゜ＨＳＶキャプシドタンパク質によるＨ ＩＶゲノムＲＮＡのパッケージングも起こると考えられる。いずれの状況も、そ れまではＨＴＶウィルスの侵入を受けにくいＣＤ４−陰性ヘルペスウィルス許容 細胞のＨＩＶによる感染へ導くだろう。これもまた二重感染細胞をもたらす。

従って、本発明は、ヘルペスウィルスに感染しているヒトを含めた哺乳動物に存 効量の式（Ａ） の化合物またはプロドラッグ、もしくは前記化合物のいずれかの薬学的に許容し つる塩、リン酸エステルおよび／またはアシル誘導体を投与することからなる、 かかる哺乳動物におけるＨＴＶ−１感染症の治療方法を提供する。

本明細書中で用いる“アシル誘導体″なる用語は１個以上のアシル基が存在する 式（Ａ）の化合物の誘導体を含むものである。このような誘導体には、それ自体 が生物学的に活性な誘導体のほかに、式（Ａ）の化合物のプロドラッグが含まれ る。

プロドラッグ、薬学的に許容しつる塩および誘導体の例は前記のヨーロッパ特許 文献に記載される通りであり、それらの主題は参照によりここに引用されるもの とする。

興味のある特定のプロドラッグは９−（４−アセトキシ−３−アセトキシメチル ブト−１−イル）−２−アミノプリンであり、これはファムシクロビルとして知 られている。

式（Ａ）の化合物はまたＥＰ−Ａ−２１６４５９（ビーチャムグループ）に記載 された形態の１つであり得る。

式（Ａ）の化合物、プロドラッグ、塩および誘導体は前記のヨーロッパ特許文献 に記載される通りに製造することができる。

化合物、特にファムシクロビルは経口的にヒトに投与され、シロップ剤、錠剤ま たはカプセル剤の形に製剤化することができる。錠剤の形である場合は、このよ うな固体組成物を調合するのに適した製剤学的担体が使用され、例えばステアリ ン酸マグネシウム、デンプン、ラクトース、グルコース、米粉、小麦粉、白亜な どが使用される。化合物はまたそれを含む摂取可能なカプセル剤（例えば、ゼラ チンカプセル）の形、あるいはシロップ剤、溶液剤または懸濁剤の形であっても よい。適当な液体の製剤学的担体にはエチルアルコール、グリセリン、食塩水お よび水が含まれ、これらにはシロップ剤を調合するだめの香味剤や着色剤を添加 することができる。

非経口投与のためには、化合物と無菌ビヒクルを含む液体の単位投与形態を調製 する。ビヒクルと濃度に応じて化合物を懸濁あるいは溶解する。通常、化合物を ビヒクルに溶解し、濾過滅菌し、その後適当なバイアルまたはアンプルに充填し て密封することにより、非経口溶液剤を調製する。有利には、局所麻酔剤、防腐 剤、緩衝剤のような補助剤もビヒクル中に溶解する。安定性を向上させるために 、バイアルに充填した後で組成物を凍結し、真空下で水を除去する。

非経口懸濁剤は実質的に同じ方法で調製されるが、化合物をビヒクルに溶解する 代わりに懸濁し、そして無菌ビヒクル中に懸濁させる前に酸化エチレンにさらし て滅菌する。有利には、界面活性剤や湿潤剤を組成物に配合して、本発明化合物 が均質に分布するようにする。

好適な非経口組成物としては、滅菌水または生理食塩水を使用した、約ｐｉ（７ ，４またはそれ以上の、特にペンシクロビルナトリウム塩水和物を含む、水性組 成物かある。

一般的な慣習であるように、関係した医療処置のための手書きの又は印刷した使 用説明書を組成物に添付する。

ウィルス感染症を治療するのに効果的な量は感染症の性質、その重症度および哺 乳動物の体重に左右される。

適当な投与単位は５０ｍｇ−１ｇの活性成分、例えば１００−５００ｍｇを含む だろう。かかる用量は１日に１−４回、通常１日に２または３回投与される。化 合物の有効量は、一般に０．２−４０ｍｇ／ｋｇ（体重）７日、好ましくは１０ −２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であるだろう。

本発明はまた、ヘルペスウィルスに感染している哺乳動物（ヒトを含む）におけ るＨＩＶ−１感染症の治療用医薬を調製する際の、式（Ａ）の化合物またはプロ ドラッグ、もしくは前記化合物のいずれかの薬学的に許容しつる塩、リン酸エス テルおよび／またはアシル誘導体の使用を提供する。かかる治療は上述した方法 で実施することができる。

本発明はさらに、有効量の式（Ａ）の化合物またはプロドラッグ、もしくは前記 化合物のいずれかの薬学的に許容しうる塩、リン酸エステルおよび／またはアシ ル誘導体、並びに製剤学的に許容しうる担体を含有する、ヘルペスウィルスに感 染している哺乳動物（ヒトを含む）におけるＨＩＶ−１感染症の治療に使用する ための医薬組成物を提供する。かかる組成物は上述した方法で調製することがで きる。

式（Ａ）の化合物およびそのプロドラッグはインターフェロンと共同して相乗的 抗ウィルス作用を示す。従って、これらの２つの成分を含む組合せ製品を同一の または異なる経路で逐次または同時投与する治療法も本発明の範囲内である。か かる製品はεＰ−Ａ−２７１２７０（ビーチャムグループ）に記載されている。

ヘルペスウィルスに感染した患者の治療はヘルペスウィルスの偶発的攻撃の予防 （抑制療法）を含むことが理解されよう。Ｈ３Ｖ惑染症のみを有する患者では、 多分、頻繁に再発を繰り返す患者にだけ抑制療法が与えられるだろう。これに対 して、ＨＩＶ−１に関する前記発見は、たとえ再発がめったに起こらないとして も、ヘルペスウィルスの再発、特にＨＳＶ−１，ＨＳＶ−２および■Ｚｖの再発 を伴う全てのＨＩＶ−１感染患者に対するペンシクロビルによる連続抑制療法の 必要性を示している。

以下の生化学的データは本発明を例示するためのものである。

生化学的データ Ａｍｅｒｓｈａｍ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌから購入した。鋳型プライマー のポリ（ｒＣ）、１）（ｄＧ）　１２−＋＊　（１：　１．　ｒ　Ｃ：　ｄＧ比 ）および２’　、　３’−ジデオキシグアノシン−５−トリホスフェート（ｄｄ ＧＴＰ）は英国ミルトンキーネスのｐｈａｒｍａｃｉａ社から入手した。ペンシ クロビルトリホスフェート（ＰＣＶ−ＴＰ）は英国グレートバーブのＳ＋ｎ１ｔ ｈＫｌｉｎｅ　Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓの研究所にお いて製造した。

逆転写酵素　Ｅ、ｃｏｌｉにより発現された、精製ＨＩＶ−１逆転写酵素（ＲＴ ）は米国アッパーメリオンのＳｍｊｔｈＫｌｊｎｅ　Ｂｅｅｃｈａｍ　Ｐｈａｒ ｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓのタンパク質生化学部により供給された。この酵素は５ ０ｍＡｌトリス−ＨＣｌ　（ｐＨ８，０）　、ｌ０ｍＭヘベス、１１０ｍＭ　Ｎ ａＣ！、５．７ｍＭ　ＤＴＴ、　０．３ｍＭ　ＥＤＴＡ、０．０６％　トリトン Ｘ−１００，５０％グリセロールを含む緩衝液中に貯蔵し、この緩衝液で希釈し た。

逆転写酵素活性の検定法　ＨＩＶ−Ｉ　ＲＴ検定のための反応混合物は、１２０ μｌの容量中に、３３ｍＭ　）リス−ＨＣｌ　（ｐＨ８，０）　、１００ｍＭ　 ＫＣＩ　、３．３ｍ１Ｊ　ＭｇＣ１ｔ　、３．３ｍＭジチオトレイトール、０． ２ｍ１Ｊグルタチオン、０．３３ｍＭ　ＥＧＴＡ　（エチレングリコール−ビス −（β−アミノエチルエーテル）Ｎ、Ｎ−四酢酸）　、０．０３３％トリトンＸ −１００，１，０２μＭ　Ｃ２Ｈ）ｄＧＴＰ、０−１２．３９　ｄ阻害剤ｄｄＧ ＴＰ、ＰＣＶ−ＴＰ。

０．３　Ａｔｔｏ単位／ｍｌポリ（ｒＣ）、、ｐ　（ｄＧ）＋２−＋＊および１ ６７　ｎｇ／ｍｌ　ＲＴ　（ｐ　６６およびｐ５１ポリペプチドの等モル混合物 では２．８５ｎＭに等しい）を含んでいた。

ＲＴを含まない反応混合物を９６−ウェルプレートのマイクロウェルに調製し、 ３７°Ｃでブレインキュベートし、その後２０μｌの酵素溶液を添加して反応を 開始させた。続いて、プレートを３７°Ｃで６５分間インキュベートした。阻害 されない対照反応では、この間の取込み率は直線状であった。４０μｌのＥＤＴ Ａ溶液（０，２Ｍ。

ｐＨ７，０）を加えて反応を停止させた。個々の反応混合物は、セルハーベスタ −（１２９５−００１，ＬＫＢ　Ｗａｌｌａｃ）を使って、０．３Ｍ　ＮａＣ１ １０，０３Ｍクエン酸Ｎａで湿潤させたＤＥＡＥフィルターマット（＋２０５− ４０５、フィンランド、ＬＫＢ　Ｗａｌｌａｃ）に移した。

このフィルターマットをＮａＣ１／クエン酸Ｎａ緩衝液で３回、次に９５％エタ ノールで１回洗った。乾燥したフィルターにシンチレーション液（Ｂｅｔａ　Ｐ ｌａｔｅ　５ａｉｎｔ、ＬＫＢ　Ｗａｌｌａｃ）を加え、ＬＫＢ　１２０５　Ｂ ｅｔａ　Ｐｌａｔｅ液体シンチレーションカウンターで放射性ｄＧＭＰの取込み について反応混合物を検定した。

結果 阻害されない対照反応混合物、ある濃度範囲のｄｄＧＴＰおよびＰＣＶ−ＴＰを 用いた場合に得られた１分間あたりのカウント数をそれぞれ表１および２に示す 。阻害剤の濃度に対する阻害％のプロットから、次のようなおおよそのＩＣｓ。

値を得た： ｄｄＧＴＰ：　２５ｎＭ （Ｒ／５）ＰＣＶ−ＴＰ：　４．３ａＭ結論 これらの結果は、ＨＩＶ−１逆転写酵素の５０％阻害を与えるのに必要とされる ペンシクロピルトリホスフェートの濃度が約４μＭであることを示している。Ｐ ＣＶ−ＴＰのこのレベルはヘルペス感染細胞において得られるはずである！。

ｄｄＧＴＰの濃度　ｄＧＭＰの取込み　阻害％（ｎＭ）　（ｃ、　Ｐ、　ｍ、　 ） １０　８９９４９　２３．７ ２５　５８７０３　５０・２ ５０　３５０９１　７０．２ ７５　２６１３２　７７．２ １００　２２＋６１　８１．２ ＰＣＶ−ＴＰの濃度　ｄＧＭＰの取込み　阻害％（μＭ）　（ｃ、　ｐ、　ｍ、 　） ０．１２４　８５３１３　４．０ １．２４　７００６１　２１．２ ３．１０　５１８６６　４１．７ ６．１９　３２９２１　６３．０ ９・２９　２６４３６　７０．３ １２．３９　２３８４４　７３．２ 客獣 １、　補体受容体２はエプスタイン−バーウィルス担持Ｂ細胞中のヒト免疫不全 ウィルスの増殖を仲介する。

Ｔｒｅｍｂｌａｙ　ｅｔ　ａｔ、、　Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１７１．１７ ９１　（１９９０）２、ＭＲＣ−５細胞中の単純庖疹ウィルスに対する９−（４ −ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチルブドー１−イル）グアニン（ＢＲＬ　３９ １２３）の作用機構。

Ｖｅｒｅ　Ｈｏｄｇｅ　ａｎｄ　Ｐｅｒｋｉｎｓ、　Ａ、Ａ、Ｃ，、３３，２２ ３（１９８９）３、ヒト免疫不全ウィルスと水痘性口内炎ウィルスまたは単純庖 疹ウィルスとの表現型混合。

用。

国際調査報告 Ｐｗｍ　ＰＣＴ／＋ｊμ／２１１１　ｊ鈎−一山１−＋　ｆｉｌｌｌ＋Ｉｌｌ　 １２１１−Ｍ４１２８　輪を国際調査報告

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．ヘルペスウイルスに感染している哺乳動物におけるＨＩＶ−１感染症を治療 する方法であって、かかる治療を必要とする哺乳動物に、有効量の式（Ａ）：▲ 数式、化学式、表等があります▼（Ａ）の化合物またはプロドラッグ、もしくは 前記化合物のいずれかの薬学的に許容しうる塩、リン酸エステルおよび／または アシル誘導体を投与することから成る方法。
2. ２．ヘルペスウイルスに感染している哺乳動物におけるＨＩＶ−１感染症の治療 用医薬を調製する際の、式（Ａ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ａ）の化合物またはプロドラッグ、もしく は前記化合物のいずれかの薬学的に許容しうる塩、リン酸エステルおよび／また はアシル誘導体の使用。
3. ３．式（Ａ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ａ）の化合物またはプロドラッグ、もしく は前記化合物のいずれかの薬学的に許容しうる塩、リン酸エステルおよび／また はアシル誘導体、並びに製剤学的に許容しうる担体を含有する、ヘルペスウイル スに感染している哺乳動物におけるＨＩＶ−１感染症の治療に使用するための医 薬組成物。
4. ４．化合物が式（Ａ）で表されるペンシクロビルである、請求項１、２または３ 記載の方法、使用または組成物。
5. ５．化合物が式（Ａ）の化合物のナトリウム塩水和物である、請求項１、２また は３記載の方法、使用または組成物。
6. ６．医薬が非経口投与に適した水性処方物である、請求項５記載の方法、使用ま たは組成物。
7. ７．化合物が式（Ｂ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｂ）〔式中、ＸはＣ１−６アルコキシ、Ｎ Ｈ２または水素である〕で表される式（Ａ）の化合物のプロドラッグまたは請求 項１で式（Ａ）について定義した通りのその塩もしくは誘導体である、請求項１ 、２または３記載の方法、使用または組成物。
8. ８．式（Ｂ）のプロドラッグ化合物はＸが水素であるもの、または請求項１で式 （Ａ）について定義した通りのその誘導体である、請求項７記載の方法、使用ま たは組成物。
9. ９．式（Ｂ）のプロドラッグ化合物はＸが水素で、２個のＯＨ基がアセチル誘導 体の形をしているファムシクロビルである、請求項８記載の方法、使用または組 成物。
10. １０．医薬が経口投与に適している、請求項９記載の方法、使用または組成物。
11. １１．投与される化合物が５０ｍｇ−１ｇの単位用量である、請求項１、２また は３記載の方法、使用または組成物。
12. １２．ＨＳＶまたはＶＺＶ再発を伴うＨＩＶ患者の連続抑制療法において使用す るためのペンシクロビルまたはそのためのプロドラッグ。