JPH05502873A - 病原性腸内細菌をコントロールするための医薬製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 病原性腸内細菌をコントロールするための医薬製剤本発明は下痢及び他の胃腸障 害を予防及び／又は治療する上でヒト及び動物において病原性腸内細菌をコント ロールするための医薬製剤に関する。

発明の背景 病原微生物で生じる下痢及び他の胃腸障害は、特に外国旅行者、抗生物質又は放 射線使用癌療法をうけた人々及び託児所で働く人々に影響を与える広範な健康問 題である。下痢をおこすこのような病原性腸内細菌としてはサルモネラ（Ｓａｌ ｍｏｎｅｌｌｘ）、シゲラ（ＳｈｉＨＩＩａ）、エルシニア（Ｙｃｒｓｉｎｉａ ）、大腸菌（Ｅ−ｃｏｌｉ）、シュードモナス（Ｐｓｅｏｄｏｍｏｎａｓ）　、 クロストリジウム・ジフィシル（Ｃ１０口ｒｉｄｉｏｍ　ｄｉｆｉｃｉｌｅ）及 びソープリ（ｓｏ＋ｄｅｌｌｉ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈ７ｔｏｃｏｃｃ ｏｓ　ａｕ＋ｅｕｓ）並びにカンビロバクタス（Ｃａｍｐ７１ｏｂａｃｔｕ＋） がある。これらの病原微生物は腸の粘膜に付着して揚機能をくるわせ、それによ り下痢をおこす。

微生物が互いの増殖を促進又は抑制することで互いに肯定的に又は否定的に影響 し合うことは周知である。この干渉現象は特にヒトの皮膚、咽頭及び腸の叢で研 究された。根本的な理由はよく知られていないが、正常細菌叢は病原菌に対する 防御上著しく重要であることがわかった。正常叢の細菌は多くの異なる方法で、 例えばバクテリオシンと称される抗生物質様物質を産生ずることで侵襲細菌を阻 害する。抗生物質とは異なり、バクテリオシンは大部分が残留細菌叢に影響を与 えることなく特定群の細菌で非常に選択的な効果を有する。特異的効果のこのよ うな無害細菌による感染患者の治療は議論されてきただけでなく、ある程度まで 試みられたきた。当然ながら、供給された細菌はそれらが自らの効果を生じるべ き腸内領域に定住できなければならない。これは腸内束が乱れた患者及び抗生物 質治療後に重度の下痢に苦しむ患者にサワー（酸敗した）ミルクを与えることを 支持する１つの考えである。しかしながら、何が腸内束で現実に生じているかに ついての科学的追跡はなく、おそらく細菌コロニー形成が腸内で生じないか又は 供給された細菌が下痢誘導細菌に影響を与える能力に欠くことから効果はたとえ あるにしてもほとんどが不確実であった。鼻粘膜、皮膚及び咽頭に存在する細菌 叢を無害微生物に換える努力も行われ、いわゆる再コロニー形成は可能であって かつ有効かもしれないことが示された。

前記のように、病原微生物で生じる異なる病気にかかった患者に細菌を供給する ことは、明らかにコロニー形成及び干渉をおこす上で最も適した細菌株が何であ るかについて不十分な知識のために、はとんど結論に達していない。

所定条件下で研究することにより、異なる微生物間の相互作用をコントロールす るメカニズムに関して重要な原理を確立しかつこの相互作用を試験する方法も開 発することが近年可能になった。このため、有意かつ再現的にこの干渉に関与す ることが可能になったが、これは感染を治療する場合に治療的に／予防的に用い られる。

発明の要旨 本発明は下痢及び他の胃腸障害を予防及び／又は治療する上でヒト及び動物にお いて病原微生物をコントロールするための製剤に関するが、その製剤は乳連鎖球 菌（Ｓｔ「！ｐｔｏｃｏｃｃｕａ　１ａｃｔｉｃＪ株Ｌ［！の形の生存微生物株 をその微生物がその生存力を留める少なくとも１種の薬学上許容されるキャリア 媒体中に含有していることで特徴付けられる。更に、本発明の特徴は下記テキス ト及び添付された請求の範囲から明らかである。

異なる細菌間の相互作用を研究する場合に、我々は病原細菌の増殖を妨げるある 乳酸細菌の能力に関して集中した。実験室規模において、乳連鎖球菌の培養物が 試験され、異なる生物学的性質を有する多数のクローンがそこから単離された。

これらのうち一部は黄色ブドウ球菌、様々な種のサルモネラ、シゲラ、シュード モナス、クレブシェラ−エンテロ（Ｋｌｅｂｓｉ！１ｌａ−Ｅｎｔｅｒｏ）及び カンピロバクタスのようなヒトにおける感染誘導細菌のほとんどで顕著な阻害効 果を有することがわかった。

乳連鎖球菌株の有効性に関して重要な理由は、これらのうち一部が一部の侵襲微 生物に特異的な殺効果を有するバクテリオシンを分泌することである。

本医薬製剤は直ちに使用できる最終製剤中１０６−１０　、好ましくは１０　１ ０　微生物／ｌｌ１ｌの微生物株含有率を有する。

好ましい態様において、微生物株用のキャリアはサワーミルク、ロビー（ｒｏｐ ｙ）ミルク、ヨーグルト、ケフィール等のような酸味又は醗酵乳製品である。微 生物株はこのような乳製品を製造する場合に開始培養物として用いてもよく、そ れにより有利な株の増加含有率の酸味又は醗酵乳製品が得られる。勿論、完全な 乳製品に細菌を加えることも可能であり、それにより望ましい細菌の媒体中でよ り高い含有率を得る。この態様は得られる製剤が健康によくかつ人気のある食品 であることから著しく重要である。このような製剤は幼児によく影響を与える下 痢及び他の腸内感染に対する予防及び治療目的で投与してもよい。更に、それは 抗生物質又は放射線使用癌療法をうけた人々及び細菌叢がよく自国の場合と異な る外国への旅行者に投与してもよい。

製剤は例えばカプセル、錠剤又は散剤のような経口投与用の乾燥形でもよい。こ のケースで用いられるキャリア媒体は慣用的タイプでかつ当業者に周知である。

カプセルは耐胃液性でもよく、その結果細菌はそこから保護されて腸内のみで放 出される。同じ理由から、錠剤も耐胃液性の公知コーティングで施してよい。更 に、散剤は水、ミルク及びフルーツジュースのような水性液体中で使用前に攪拌 してもよい。

製剤は“旅行者下痢”のような胃腸障害をおこす様々な病原性腸内細菌に対して 高度に有効な予防であることがわかった。

有利なことに、製剤はサルモネラ感染ヒト及び動物を治療するために用いてもよ い。

更に、製剤は動物治療用に適合させてもよく、その場合にキャリアは適切な動物 飼料である。

微生物は好ましくは暗く乾燥した場所でスキムミルク中に凍結乾燥状態で保たれ るか又は約−７０℃の温度で凍結されるべきである。

本製剤の所要用量は患者の年齢及び全身状態並びに病気のタイプ及び重篤度のよ うなファクターに応じて決定される。当業者であれば適切な用量を決定するため に必要な適格を有している。本発明のもう１つの利点は大過量の医薬製剤が患者 にほとんどいかなるリスクも与えな本医薬製剤の微生物株形成部分は下記のよう に単離された。天然乳連鎖球菌株はムシトリスミレから単離され、病原性腸内細 菌に対するその阻害効果に関して試験された。７つのクローンが試験され、Ｌｌ ａと称される１つが最良の結果を示した。

本製剤で用いられるこの微生物株は１９８９年にザ・ナショナル・コレクション ・オン・インダストリアル−アンド−７リン・バクテリア（Ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏ ｎａｌ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎａｔ　ＩｎｄｕＮ＋ｉａｌ　ａｎｄ　Ｍａｒｉｎ ｅ　Ｂａｃｔｅｒｉａ）　（Ｎ　ＣＩ　Ｍ　Ｂ）　。

トリー・リサーチ・ステーション（Ｔｏｒｒｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＳｔａｔｉｏ ｎ）、Ｐ、Ｏ，ボックス３１，１３５アビ−ロード。

アバディーンＡＢ９　８ＤＧ、イギリス（Ｐ、０．Ｂｏｗ　３１゜１３５　Ａｂ ｂｅｙ　Ｒｏａｄ、＾ｂｅ＋ｄｅｅｎ　ＡＢ９８ＤＧ、Ｇｒｅａｔ　Ｂｒ１ｔａ ｉｎ）に寄託された。そのＮＣＩＭＢ受託番号は４０１５７である。

微生物株はＡＰＩ２０システムに従い類別又は分類されるＣＡＰＩシステム（Ａ ＰＩ　Ｓｙｓｔｅｍ）、　ラ・バルム・レス・グロツテス、３８３９０モンタリ ュー、バーシュー、フランス（Ｌａ　［ｌａｌｍｅ　ｌｅ＋　Ｇｒｏ＋＋ｅｓ、 ３８３ＨＭｏｎＮ１１ｅｕ。

Ｖ！＋ｃｉｅｕ、Ｆ＋ａｎｃｅ）　）。

各２０の連鎖球菌　類　別　表 ＶＰ　ピルビン酸　アセトンの形成　無色　浅紅／赤２ＹＭ　Ａ＋２ＹＭ　Ｂ／ １０ｍ１ｎ　（１）必要であれば強い光で脱色 ピロリドニル−２ピロリドニルアリール　無色又は　橙ＰＹＲＡ　−ナフチルア ミド　アミダーゼ　非常に淡い橙６−ブｏ％−２１−７チ″　α−ガラクトシダ ーゼ　無色　紫ａＧＡＬ　−α−Ｄ−ガラクトピラノシドナフトール−ＭＳ−Ｂ ＋− βＧＵＲ−β−Ｄ−り１．、り。、酸　β−グル知ユニダーゼ　無色　青無色又 は　紫 ２−＋７４′１β−〇−β−ガラクトンダーゼ　非常１：淡い紫βＧＡＬ　ガラ クトピラノシド ＰＡＬ　２−ナフチルリン酸　アルカリホスファターゼ　無色又は強淡紫　紫し 一ロイシンー２−　ロインンアリール　無色種ＩＡＰ　ナフチルアミド　アミダ ーゼ （ｌｊ２４時間のインキュベート後における２回目の読取りで、反応剤２ＹＭ　 Ａ及びｚＹＭ　Ｂが加えられである管内で沈降がみられることがある。これは正 常な現象であって、無視できる。

（２）デンプンの酸味化は他の糖の場合よりも普通弱い。

ＲＡＦ　− ＡＭＤ　− βＨＥＭ　− 株は弱いα−溶血をおこす。

それは２０−３７℃でよく増殖し、３９℃で比較的よく増殖する。

適切なブイヨンはＭ１７である。レシピ参照株はランスフィールドＮ群に属する 。

サワーミルク製造 本発明の一態様において、製剤用に薬学上許容されるキャリア媒体はサワーミル クである。

この態様を実施する場合、本発明による微生物Ｌｌａをミルク中で２−２０時間 、好ましくは４時間増殖させる。

次いで残りのサワーミルク培養物を加え、温度が開始時に高かった場合には２１ ℃の低い温度で更に増殖させる。

残りのサワーミルク培養物を加えるとき、Ｌｌａの含有６、１０１゜ 率は１０　１０　ｃｊｕ／ｍｌ、好ましくは１０８−　９ｅｔａ／ｍｌであるべ きである。次いでサワーミルクを２０−２４時間、好ましくは２０時間おき、し かる後それを冷却し、容器内に入れる。

朝及び晩にこのサワーミルク２６０ｍ１を摂取した後、本発明の乳連鎖球菌株は ３−５日後であっても腸内でみることができる。

要　約　書 ヒト及び動物において下痢及び他の胃腸障害をおこす病原微生物をコントロール するための医薬製剤は乳連鎖球菌株Ｌｌａをその微生物がその生存力を留める少 なくとも１種の薬学上許容されるキャリア媒体中に含有してＩＩＸる。ヒト及び 動物において下痢及び他の胃腸感染をおこす病原微生物をコントロールする製剤 の用法も記載されている。

国際調査報告 １．１．、＋１＝。−８，Ａ−１１，。６．−−０．　ＰＣＴ／ＳＥ　９０１０ ０８５０

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. １．下痢及び他の胃腸障害を予防及び／又は治療する上でヒト及び動物において 病原微生物をコントロールするための医薬製剤であって、 ＮＣＩＭＢ受託番号４０１５７の乳連鎖球菌株Ｌｌａの形の生存微生物株をその 微生物がその生存力を留める少なくとも１種の薬学上許容されるキャリア媒体中 に含有している医薬製剤。
2. ２．微生物株含有率が直ちに使用できる最終製剤中１０６−１０１０微生物／ｍ ｌである、請求項１に記載の医薬製剤。
3. ３．微生物株含有率が直ちに使用できる最終製剤中１０８−１０９微生物／ｍｌ である、請求項２に記載の医薬製剤。
4. ４．薬学上許容されるキャリア媒体がサワーミルク、ロビーミルク、ヨーグルト 、ケフィール等のような酸味又は醗酵乳製品である、請求項１に記載の医薬製剤 。
5. ５．薬学上許容されるキャリア媒体が製剤が動物に投与される場合に適した動物 飼料である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
6. ６．微生物株が開始培養物の形でキャリア媒体に加えられ及び／又は最終製品に 加えられた、請求項１に記載の医薬製剤。
7. ７．薬学上許容されるキャリア媒体と一緒の乾燥形、例えばカプセル、錠剤及び 散剤である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
8. ８．ヒト及び動物において下痢及び他の胃腸障害をおこす病原微生物をコントロ ールするためＮＣＩＭＢ受託番号４０１５７の生存乳連鎖球菌株Ｌｌａをその微 生物がその生存力を留める少なくとも１種の薬学上許容されるキャリア媒体中に 含有した医薬製剤の用法。