AT405235B - Probiotisch wirksame formulierung - Google Patents

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Description

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AT 405 235 B
Die Erfindung betrifft probiotisch wirksame Formulierungen.
Der allgemeine Begriff "Milchsäurebakterien" umfaßt eine Kategorie von Mikroorganismen, die in den letzten Jahren, bedingt durch ihre humanspezifischen und lebensmitteltechnologischen Eigenschaften, in den Mittelpunkt des wissenschaftlichen Interesses gerückt ist. Der Begriff "Probiotika" als Wachstumsförde-5 rer ursprünglich auf den Bereich der Futtermittel beschränkt, bezeichnet lebende Mikroorganismen, die als Nahrungszusat2 das Gleichgewicht der Verdauungsorganismen günstig beeinflussen. Heute sind Probiotika jedoch generell für ein weites Feld von vorwiegend milchsäurehältigen Präparaten, Substraten, Lebens- und Futtermitteln relevant und werden sowohl im human- als auch veterinärmedizinischen Bereich sowie bei der Tierernährung eingesetzt. Taxonomisch beinhaltet das Spektrum der Milchsäurebakterien derzeit im we-ro sentlichen die Gattungen Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Enterococcus, Bifidobac-terium, Carnobacterium und Sporolactobacillus (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, IX. Aufl ). Einige dieser Vertreter (Lactobacillus, Bifidobacterium und Enterococcus) gelten als natürliche und nützliche Darmbewohner des Menschen (und auch der Tiere) und treten dort - in Abhängigkeit vom Darmabschnitt, Lebensalter und Ernährungsgewohnheiten - in unterschiedlich hohen Keimzahlen auf. Allgemein wird die 75 Wirkung der Milchsäurebakterien in vier Haupteffekte unterteilt: 1. Biochemische (u.a. Verbesserung der Nährstoffverwertung) 2. Physiologische (v.a. Stimulierung der Darmperistaltik) 3. Antimikrobielle (z.B. Wachstumshemmung pathogener Keime) 4. Kompetitive (z.B. Inaktivierung von Enterotoxinen). 20 Die Applikation bestimmter Milchsäurebakterien, entweder über den Nahrungsmittelweg oder über die Einnahme spezieller pharmazeutischer Präparate, erscheint daher aus den oben genannten Gründen als zielführend. Im Vordergrund stehen heute diätetische, prophylaktische und therapeutische Indikationen, wie u.a. bei Reisediarrhoe, regulierende Funktion bei Stress-Situationen, Krebstherapie, Behandlung von Obstipationen, Zahnfleischentzündungen, Vaginitis, bei diversen Diätformen, etc.. 25 Für eine effiziente Wirkung milchsäurehältiger Präparate ist es unbedingt notwendig, daß hohe Konzentrationen der Mikroorganismen in den Darm gelangen. Dadurch sind herkömmliche Lebensmittel mit lebenden Mikroorganismen nicht in allen Fällen anwendbar, da sie die Mikroorganismen oft in relativ niedriger Konzentration enthalten und die Gesamtmenge, die dann zugeführt werden müßte, zu groß ist (Laulund, "Commercial Aspects of Formulation, Production and Marketing of Probiotic Products" in "Human 30 Health: The Contribution of Microorganisms", S.A.W. Gibson Ed. (1994), Springer Verlag, Seite 160).
Lebende Mikroorganismen sind schwer stabilisierbar, weswegen sie in Präparationen meist in getrockneter Form vorliegen; die Darstellung kann durch unterschiedliche Trocknungsprozesse, wie z.B. der Lyophilisation, Sprühtrocknung, etc. erfolgen.
Weiters ist bei der peroralen Verabreichung lebender Mikroorganismen zu beachten, daß je nach 35 Bakterienart bzw. -stamm ein Teil der Bakterien bereits im Magen, der eine natürliche Barriere für Mikroorganismen darstellt, zerstört wird und nur eine geringe Anzahl überlebender Keime in den Darm gelangt (Füller, J.Appl.Bact. 66, 1989, 365-378). Die Verarbeitung zu Tabletten mit magensaftresistenten Filmüberzügen ist insofern problematisch, da die Anzahl der lebensfähigen Mikroorganismen bereits durch den Tablettiervorgang aufgrund der einwirkenden Scherkräfte meist stark reduziert wird. Es ist sogar aus 40 der Literatur bekannt, daß durch den Tablettiervorgang eine beträchtliche Keimzahlreduktion hervorgerufen wird, wodurch eine gewisse Dekontamination erzielt werden kann (Fassihi et al., Zbl. Pharm. 116 (1977), 1267-1271; Plumpton et al., Int.J.Pharmac. 30 (1986), 237-240; Plumpton et al., Int.J.Pharmac. 30 (1986), 241-246). Die Verabreichung in magensaftresistenten Hartgelatinekapseln bleibt aufgrund der speziellen und teuren Technologie auf den pharmazeutischen Bereich beschränkt. Die Verarbeitung von probiotischen 45 Formulierungen mit magensaftresistenten Filmüberzugen wie in der pharmazeutischen Industrie (z.B. mit Überzugsmaterial wie Eudragit®) ist im übrigen auch darum nicht möglich, da diese Stoffe für Lebensmittelprodukte nicht zugelassen sind.
Schließlich ist bei vielen auf dem Markt befindlichen Produkten eine erhebliche Qualitätsschwankung festzustellen, was hauptsächlich darin liegt, daß die großtechnische Herstellung und Verarbeitung von so probiotisch wirksamen Formulierungen aufgrund ihrer biologischen Natur heikel und nur schwer reproduzierbar sind (Brennan et al., J.Food Prot.46 (1983), 887-892).
In der EP 0 471 904 AI und in der WO 91/09608A werden Joghurtprodukte beschrieben, welchen getrocknete Milchsäurebakterien-Kulturen zugesetzt worden sind. Es werden jedoch keine speziellen Maßnahmen zur Magensaftresistenz der Mikroorganismen vorgesehen (ausgenommen eine optionelle 55 magensaftresistente Hülle in der WO 91/09608 A). Die Zugabe einer Lactobacillus acidophilus-Kultur zu Milch ist aus der US 5 032 399 bekannt. Auch hierbei werden keine Maßnahmen zur Magensaftresistenz vorgesehen. 2
AT 405 235 B
Gemäß der EP 0 555 618 A2 werden lyophilisierte Milchsäurebakterien gegebenenfalls mit Exzipienten und Trägerstoffen sowie Adjuvantien und Dispergierungsmitteln gemischt. Spezielle Maßnahmen zur Gewährleistung einer Magensaftresistenz werden jedoch nicht getroffen.
Eine Präparation von Vitaminen, Enzymen, Coenzymen, Mineralstoffen, Spurenelementen und/oder Keimen mit einem funktionsgetrennten Schutzfilm wird in der DE 41 19 306 A1 beschrieben. In diesem Dokument findet sich jedoch keine Offenbarung zu probiotisch wirksamen Mikroorganismen.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht daher darin, eine probiotisch wirksame Formulierung zur Verfügung zu stellen, welche einen hohen Grad an Magensaftresistenz aufweist, einfach als Lebensmittel-Zusatzstoff zu verarbeiten ist und in reproduzierbarer Weise auch großtechnisch hergestellt werden kann.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelost durch eine probiotisch wirksame Formulierung umfassend durch Trocknung stabilisierte Mikroorganismen und magensaftresistente Komponenten, welche Formulierung in trocken granulierter Form vorliegt, wobei die Mikroorganismen in einer Matrix aus den magensaftresistenten Komponenten eingebettet sind.
Die Voraussetzungen für die Wirksamkeit von Bakterien werden erfindungsgemäß dadurch geschaffen, daß Formulierungen hergestellt werden, die aus durch Trocknung haltbar gemachten, lebensfähigen Mikroorganismen sowie aus Matrixkomponenten, die sowohl für die Herstellung der Formulierungen unverzichtbar sind, als auch einen hohen Grad an Magensaftresistenz sicherstellen, bestehen. Erst aufgrund der Einbettung von Mikroorganismen in geeignete magensaftresistente Matrixkomponenten ist es möglich, daß eine ausreichend hohe Anzahl von gewünschten, überlebenden Mikroorganismen in den Darm gelangen können. Der erfindungsgemäße Herstellungsprozeß stellt eine Granulierung von Pulvermassen auf trockenem Weg dar, wobei der Verarbeitungsvorgang selbst nur eine geringe Verminderung der Überlebenskeimzahl verursacht.
Erst die Einbettung in geeignete magensaftresistente Matrixkomponenten ermöglicht, daß eine überraschend hohe Anzahl von lebenden Zellen in den Darm gelangen können. Dabei ist es wichtig, daß die durch Trocknung stabilisierten Mikroorganismen in trocken-granulierter Form vorliegen. Die Trockengranulierung ist ein ausreichend schonendes Verfahren, bei dem ein hoher Prozentsatz der verwendeten Mikroorganismen den Herstellungsprozeß lebensfähig überstehen, und im gegenständlichen Fall überraschenderweise geeignet, auch eine ausreichende Magensaftresistenz zu gewährleisten. Weiters wird durch das Vorliegen der Mikroorganismen in trocken-granulierter Form eine allenfalls angeschlossene weitere Verarbeitung erheblich erleichtert bzw. für die Verwendung als Lebensmittel-Zusatzstoff überhaupt erst ermöglicht (im Gegensatz zu der aus der Pharmaindustrie bekannten magensaftresistenten Lacken wie Eudragit®).
Besonders bevorzugte magensaftresistente Matrixkomponenten sind Alginate (z.B. Natriumalginat), Zellulose bzw. deren Derivate (z.B. Hydroxypropylmethylzellulose (HPMC), HPMC-Acetat-Succinat, HPMC-Phthalat, Methacrylsäurederivate, Schellack, Galactomannane sowie Mischungen dieser Komponenten. Diese Substanzen haben sich in der Pharma- und/oder Lebensmittelindustrie bereits bewährt, gelten als unbedenklich und zeigen auch ausgezeichnete Eigenschaften im Hinblick auf die durch Trocknung stabilisierten Mikroorganismen. Besonders vorteilhafte Beispiele von HPMC bzw. HPMC-Derivaten umfassen HPMC-50SH 4000, HPMCP-HP 55 (gemäß US-Pharmacopeia XXIII, NF18, Nr. 2910 und Nr. 200731), und HPMC-Acetat-Succinat-LF (HPMC-AS-LF) (Firma Shin-Etsu, Japan).
Als Mikroorganismen werden im besonderen Milchsäurebakterien, vorzugsweise aus den Gattungen Streptococcus, Lactobacillus, Enterococcus und Bifidobacterium, aber auch Enterobacteriaceae, vorzugsweise die Gattungen Enterobacter und Escherichia in den erfindungsgemäßen Formulierungen verwendet, wobei die Geni bzw. Species Lactobacillus delbrückii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei subsp. casei, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus lactis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus plantarum, Streptococcus salivarius subsp. thermophilus, Enterococcus faecium, Bifidobacterium bifi-dum, Bifidobakterium infantis, Bifidobakterium longum, etc., physiologische Escherichia coli sowie Mischungen dieser Mikroorganismen besonders bevorzugt sind.
Bei den erwähnten Arten ist ihre probiotische Wirkung schon hinlänglich beschrieben worden; ihre lebensmitteltechnisch und pharmazeutisch große Bedeutung macht sie zu bevorzugten Mikroorganismen im Rahmen der vorliegenden Erfindung.
Die erfindungsgemäße Formulierung umfaßt günstigerweise technisch notwendige Hilfsstoffe, also 2.B. pharmazeutische Trägerstoffe und/oder Formulierungshilfsstoffe, wie Tablettierungsmittel, konsistenzerhöhende Mittel, Stabilisatoren, lebensmitteltechnische Zusatzstoffe, etc..
Die erfindungsgemäße probiotisch wirksame Formulierung umfaßt in der Regel - 10 bis 90 Gew.-% durch Trocknung stabilisierte Mikroorganismen, - 10 bis 90 Gew.-% magensaftresistente Matrixkomponenten und 3 1 -f π fl efl ll nmil
AT 405 235 B - 0 bis 50 Gew.-% technisch notwendige Hilfsstoffkomponten Besonders bevorzugt sind Formulierungen welche 30 bis 70, insbesondere 30 bis 55 Gew.-%, an stabilisierten Mikroorganismen aufweisen. Formulierungen, welche erfindungsgemäß ganz besonders bevorzugt werden, sind solche, die durch s Trocknung stabilisierte Mikroorganismen der Spezies Enterococcus faecium und/oder Lactobacillus acido-philus, sowie Natriumalginat und/oder Hydroxypropylmethylzellulose oder eines ihrer Derivate und Magne-siumstearat umfassen. Bei diesen Formulierungen konnte in vitro die höchste Resistenz gegenüber Magensaft (0,1 N HCl) festgestellt werden. 70 Gemäß einem weiteren Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung die Verwendung der erfindungsgemäßen probiotlsch wirksamen Formulierungen als Zusatzstoffe für Lebensmittel und zur Herstellung von Medikamenten, insbesondere zur Herstellung von Präparationen zur Behandlung von Störungen der Darmflora. Noch ein Aspekt der vorliegenden Erfindung liegt in einem Verfahren zur Herstellung von probiotisch 75 wirksamen Formulierungen, welches die folgenden Schritte umfaßt: - Bereitstellen von durch Trocknen stabilisierten Mikroorganismen, - Mischen der stabilisierten Mikroorganismen mit magensaftresistenten Komponenten, - Trochen-Granulieren der erhaltenen Mischung, sodaß die Mikroorganismen in eine Matrix aus den magensaftresistenten Komponenten eingebettet werden, 20 wobei gemäß einer besonderen Ausführungsform mehr als ein Granulierungsschritt vorgesehen wird. Die Erfindung wird anhand der nachfolgende Biespiele, auf die sie jedoch nicht beschränkt sein soll, noch weiter erläutert.Beispiele: 25 Herstellung von Granulaten (Trockengranulierung): Die Mikroorganismen werden mit den entsprechenden magensaftresistenten Matrixkomponenten und gegebenenfalls mit weiteren, insbesondere zur Kompaktierung notwendigen Hilfsstoffkomponenten gemischt 30 (Kubusmischer, Firma ERWEKA) und mit einer Exzenterpresse (Type EK 0, Firma KORSCH) zu Komprima-ten mit einem Durchmesser von 10 mm verpreßt. Der dabei aufgewendete Preßdruck beträgt 15 kN. Die erhaltenen Preßlinge werden in weiterer Folge mittels eines Trockengranuliergerätes (Gerätetype TG 2/S, Firma ERWEKA) zum Granulat verarbeitet und dieses wird anschließend unter Verwendung eines Siebturms (Firma RETSCH) klassiert. Granulate mit Partikeldurchmessern von 2,0 bis 4,0 mm werden weiteren 35 Untersuchungen, wie z.B. der Bestimmung von Ausgangskeimzahlen, Überlebenskeimzahlen, etc., zugeführt. Da das Einbringen der Granulate in eine 0,9 %-ige NaCI-Lösung eine starke Quellung der Hilfsstoffe bedingt, wird vor der Keimzahlbestimmung mit Glaskügelchen geschüttelt, um eine Zerstörung der gequollenen Hilfsstoffhülle und dadurch die Freisetzung der Bakterien aus den trockenen Granulatkernen zu 40 gewährleisten. Hierfür werden den Bakterien-Suspensionen sterile Glaskügelchen zugesetzt und mehrmals in horizontaler Bewegung geschüttelt. Im Anschluß daran werden die Keimzahlen mittels Koch'schem Plattengußverfahren ermittelt. Bestimmung der Überlebenskeimzahl nach Inkubation in 0,1 N HCl: 45 Zur Simulation einer Magenpassage wird 1,00 g der Probe mit 94,0 ml 0,1 N HCl versetzt und 1 h am Schüttelwasserbad (Firma GFL, Type 1083) bei 37 *C inkubiert. Anschließend wird mit 2 ml 5 N NaOH und 3 ml einer wäßrigen 1 M NajHPOt-Lösung neutralisiert (ca. pH 7) und die Keimzahl nach dem Koch'schen Plattengußverfahren bestimmt. so Bei der Untersuchung von reinen Lyophilisaten hinsichtlich Magensaftresistenz kann folgender Umstand zu verfälschten Ergebnissen führen: Das Lyophilisat kann sich bereits bei der Beschickung der Verdünnungsflaschen an die Glaswandung anlagern, wodurch die Bakterien im trockenen Rim unter einer feuchten Schutzschicht teilweise überleben. Bei Untersuchungen mit reinen Lyophilisaten muß daher die Verdünnungsflasche von Anfang an einer gleichmäßigen Schüttelbewegung unterzogen werden um das Absetzen 55 des Lyophilisats am Boden zu verhindern. 4
AT 405 235 B 1. Verarbeitung von Enterococcus faecium M74-Bakterien
Eine kommerziell erhältliche Präparation des Stammes Enterococcus faecium M74 (Firma Medipharm AB, Schweden) - Lactiferm L-50 - wurde für die vorliegenden Untersuchungen herangezogen und ein erfindungsgemäßes Granulat entsprechend den oben beschriebenen Verfahren mit unterschiedlichen Hilfsstoffkomponenten hergestellt. Die kulturelle Lebendkeimzahlbestimmung wurde für das Ausgangs-Lyophilisat, das Ausgangs-Granulat, sowie für die Präparationen nach Inkubation in 0,1 N HCl ("Überlebenskeim-zahl") vorgenommen. Der Nachweis erfolgte durch Plattierung auf Enterokokken-Selektivagar (Slanetz und Bartley; Milieu: aerob für 48 h bei 37 *C). 1.1. : Granulat mit Natriumalginat Rezeptur der Formulierung: 10.0 g lyophil. Enterococcus faecium M74 10,0g Natriumalginat 1.0 g Magnesiumstearat 10.0 g CaHPO* 1.2. : Granulat mit HPMC-Phthalat Rezeptur der Formulierung: 10.0 g lyophil. Enterococcus faecium M74 10.0 g HPMC-Phthalat 1.0 g Magnesiumstearat 1.3. : Ergebnisse der Prüfung hinsichtlich Magensaftresistenz:
Tabelle 1
Ausgangskeimzahl Überlebenskeimzahl nach Inkubation in 0,1 N HCl Lyophilisat 2,8 x 1010 4,0 x 105 Granulat mit Natriumalginat 9,5 x 109 6,0 x 106 HPMC-Phthalat 1,2 x 1010 3,0 x 107 Angaben in Kolonien bildende Einheiten (colony forming units (CFU)/g
Die Ergebnisse in Tabelle 1 zeigen, daß mit den erfindungsgemäßen Präparationen die Überlebenszahlen der Bakterien deutlich (z.T. um über 2 Zehnerpotenzen) gesteigert werden konnte. 2. Verarbeitung von Enterococcus faecium SF-68-Bakterien
Eine kommerziell von der Firma Chr. Hansen's bio Systems, Horsholm, Dänemark, erhältliche Präparation des Stammes Enterococcus faecium SF-68 (APP 396), wurde für die im folgenden beschriebenen Untersuchungen herangezogen und ein erfindungsgemäßes Granulat gemäß den oben beschriebenen Herstellungsverfahren mit unterschiedlichen Matrixkomponenten hergestellt. Keimzahlbestimmungen erfolgten für das Ausgangs-Lyophilisat, das Ausgangs-Granulat, sowie für die Präparationen nach Inkubation in 0,1 N HCl ("Überlebenskeimzahl"). 2.1.: Granulat mit HPMC-Acetat-Succinat
Die Komponenten für einen ersten Kompaktiervorgang werden gemischt und komprimiert. Anschließend werden die Komprimate zu einem Granulat A als Zwischenprodukt granuliert. Das Granulat A wird erneut 5
AT 405 235 B mit weiteren notwendigen Komponenten (z.B. mit gleichen Masseteilen HMPC-Acetat-Succinat-Granulat) komprimiert und zu einem Endprodukt (Granulat B) granuliert. Durch diese Herstellungstechnologie wird die Einbettung der Mikroorganismen in die stabilisierend wirkende Matrix durch mehrere einfach durchführbare Verfahrensschritte optimiert.
Rezeptur der Formulierung: (Granulat A) 12.0 g Hansen APP 396 (Ent. faec. SF-68)
8.0 g HPMC-Acetat-Succinat-LF 12.0 g Magnesiumstearat
Die gemäß dem oben angegebenen Mischungsverhältnis hergestellte Pulvermischung wurde trocken granuliert, das Granulat anschließend 1:1 mit HPMC-AS-LF-Granulat gleicher durchschnittlicher Korngröße gemischt und nochmals dem Trockengranulierungsprozeß unterzogen. 2.2. : Granulat mit HPMC-Phthalat Rezeptur der Formulierung: 10.0 g Hansen APP 396 (Ent. faec. SF-68) 10.0 g HPMC-Phthalat 1.0 g Magnesiumstearat
2.3. : Granulat mit Natriumalginat und HPMC
Rezeptur der Formulierung: 10,3 g Hansen APP 396 (Ent. faec. SF-68) 12,8g HPMC 60SH-4000 5.1 g Natriumalginat 1,4 g Magnesiumstearat 2.4. : Ergebnisse der Prüfung hinsichtlich Magensaftresistenz:
Tabelle 2
Ausgangskeimzahl Überlebenskeimzahl nach Inkubation in 0,1 N HCl Lyophilisat 1,4 x 1012 8 x 101 2 3 4 5 6 7 Granulat mit HPMC-AS-LF 3,7 x 108 3,2x10® HPMC-Phthalat 1,2 x 10" 1,4 x 107 Natriumalginat +HPMC60SH-4000 2,4 x 10" 1,7 x 108 Angaben in CFU/g 6 1
Verarbeitung von Lactobacillus acidophilus-Keimen 2
Eine kommerziell von der Firma Wiesby erhältliche Präparation des Stammes Lactobacillus acidophilus (Wiesby L. acidophilus Nr.145) wurde für die vorliegenden Untersuchungen herangezogen und ein erfin 3 dungsgemäßes Granulat entsprechend den oben beschriebenen Verfahren mit unterschiedlichen Hilfsstoff 4 komponenten hergestellt. Die kulturelle Lebendkeimzahlbestimmung wurde für das Ausgangs-Lyophilisat, 5 das Ausgangs-Granulat sowie für die Präparationen nach Inkubation in 0,1 N HCl ("Überlebenskeimzahl") 6 vorgenommen. Der Nachweis erfolgte durch Plattierung auf Rogosa-Agar (Milieu: artaerob für 72 h bei 7 37‘C; Lit.: Mitsuoka, Zbl.Bakt.l. Orig., 210 (1969), 32-51); die Bestimmung der Überlebenskeimzahlen 8 erfolgte in gleicher Weise.
AT 405 235 B
3.1.: Granulat mit Natriumalginat und HPMC
Rezeptur der Formulierung: 61,5 g L. acidophilus-Lyophilisat 25,6 g HPMC 60 SH-4000 10,2 g Natriumalginat 2,7 g Magnesiumstearat w 3.2.: Granulat mit HPMC-Acetat-Succinat 75
Rezeptur der Formulierung: 49,5 g L. acidophilus-Lyophilisat 49,5 g HPMC-Acetat-Succinat - LF 1,0 g Magnesiumstearat 20 3.3.: Granulat mit größeren HPMC-Acetat-Succinat-Anteilen ("Granulatgemisch") Herstellung: siehe 2.1. 25
Rezeptur der Formulierung:
20 g Lacidophilus-Lyophilisat 20 g Magnesiumstearat 60 g HPMC-Acetat-Succinat - LF 30 3.4.: Untersuchungen zur Magensaftresistenz:
Granulat- bzw. Lyophilisat-Proben wurden jeweils nach 0, 15, 30, 45 und 60 min Inkubation in 0,1 N HCl gezogen und deren Keimzahl bestimmt. Die Ergebnisse der Untersuchungen sind in Tabelle 3 dargestellt. 35 Zu Vergleichszwecken wurde reines Bakterienlyophilisat und granuliertes Lyophilisat in die Untersuchungen einbezogen.
Tabelle 3
Zeit (min) Keimgehalt Keimgehalt Keimgehalt Keimgehalt Keimgehalt Lyophilisat Na-alg. + HPMC HPMC-AS-LF HPMC-AS-LF Lyophilisat Granulat Granulat Granulat Granulatgemisch 0 5,0 x 107 2,3 x 107 1,0 x 107 4,4 x 108 2,2 x 109 15 1,1 x 106 n.b. n.b. n.b. n.b. 30 4,0 x 105 5,2 x 105 2,3 x 10« n.b. n.b. 45 3,6 x 105 n.b. n.b. n.b. n.b. 60 3.4 x 105 1,1 x 105 1,7 x 10« 0 0 n.b. nicht bestimmt Angaben in CFU/g
Diese Ergebnisse belegen deutlich, daß die erfindungsgemäßen Formulierungen eine umfassende Magensaftresistenz der verabreichten Mikroorganismen gewährleisten, sodaß eine "zufriedenstellende Wirkung im 55 Darmbereich erzielt werden kann. 7

Claims (11)

  1. { AT 405 235 B p II II fl il mrl fl ii M na Patentansprüche 1. Probiotischwirksame Formulierung, umfassend durch Trocknung stabilisierte Mikroorganismen und magensaftresistente Komponenten, dadurch gekennzeichnet, daß die Formulierung in trocken-granu- 5 lierter Form vorliegt, wobei die Mikroorganismen in einer Matrix aus den magensaftresistenten Komponenten eingebettet sind.
  2. 2. Probiotisch wirksame Formulierung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die magensaftresistenten Komponenten ausgewählt sind aus Natriumalginat, Hydroxypropylmethylzellulose und deren 10 Derivaten, Methacrylsäurederivaten und Galactomannanen sowie insbesondere Mischungen dieser Komponenten.
  3. 3. Probiotisch wirksame Formulierung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die durch Trocknung stabilisierten Mikroorganismen ausgewählt sind aus den Familien Lactobacteriaceae, vor- 75 zugsweise aus den Gattungen Streptococcus, Lactobacillus, Enterococcus und/oder Bifidobacterium, und Enterobacteriaceae, vorzugsweise aus den Gattungen Enterobacter und/oder Escherichia.
  4. 4. Probiotisch wirksame Formulierung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die durch Trocknung stabilisierten Mikroorganismen ausgewählt sind aus den Arten Lactobacillus 20 delbrückii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei subsp. casei, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus lactis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus plantarum, Streptococcus salivari-us subsp. thermophilus, Enterococcus faecium, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum und physiologische Escherichia coli sowie Mischungen dieser Mikroorganismen. 25
  5. 5. Probiotisch wirksame Formulierung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß Sie weiters technisch notwendige Hilfsstoffe, wie pharmazeutische Trägerstoffe und/oder Formulierungshilfsstoffe, enthält.
  6. 6. Probiotisch wirksame Formulierung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß 30 sie - 10 bis 90 Gew.-% durch Trocknung stabilisierte Mikroorganismen, - 10 bis 90 Gew.-% magensaftresistente Komponenten und - 0 bis 50 Gew.-% technisch notwendige Hilfsstoffe umfaßt. 35
  7. 7. Probiotisch wirksame Formulierung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet daß sie durch Trocknung stabilisierte Mikroorganismen der Spezies Enterococcus faecium und/oder Lactobacillus acidophilus, Natriumalginat und/oder Hydroxypropylmethylzellulose oder eines ihrer Derivate und Magnesiumstearat umfaßt. 40
  8. 8. Verwendung von probiotisch wirksamen Formulierungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 als Zusatzstoffe für Lebensmittel.
  9. 9. Verwendung von probiotisch wirksamen Formulierungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung eines Medikaments. 45
  10. 10. Verwendung von probiotisch wirksamen Formulierungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung einer Präparation zur Behandlung von Störungen der Darmflora.
  11. 11. Verfahren zur Herstellung von probiotisch wirksamen Formulierungen umfassend die Schritte: so - Bereitstellen von durch Trocknen stabilisierten Mikroorganismen, - Mischen der stabilisierten Mikroorganismen mit magensaftresistenten Komponenten, - Trocken-Granulieren der erhaltenen Mischung, sodaß die Mikroorganismen in einer Matrix aus den magensaftresistenten Komponenten eingebettet werden, wobei vorzugsweise mehr als ein Granulierungsschritt vorgesehen wird. 8
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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5902578A (en) * 1996-03-25 1999-05-11 Abbott Laboratories Method and formula for the prevention of diarrhea
US8563522B2 (en) 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
AT407008B (de) * 1998-08-06 2000-11-27 Viernstein Helmut Dr Formulierungen mit probiotisch wirksamen mikroorganismen
CA2416120A1 (en) * 2000-07-17 2002-01-24 Svend Laulund Methods and formulations with probiotic microorganisms and medicaments
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050152884A1 (en) 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US8894991B2 (en) 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US7785635B1 (en) 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
WO2005060937A1 (en) * 2003-12-23 2005-07-07 Chr. Hansen A/S Compressed tablets comprising viable probiotic microorganisms
WO2006119780A2 (en) 2005-05-11 2006-11-16 Chr. Hansen A/S New antibiotic-sensitive lactic acid bacteria strains
WO2006122965A1 (en) 2005-05-18 2006-11-23 Dsm Ip Assets B.V. Compositions for enteral application of microorganisms
JP4938006B2 (ja) 2005-05-31 2012-05-23 ザ・アイムス・カンパニー ネコ科動物プロバイオティク・ビフィドバクテリア
BRPI0611493B1 (pt) 2005-05-31 2022-04-05 Alimentary Health Ltd. Lactobacilos probióticos felinos
CA2673465A1 (en) 2007-02-01 2008-08-07 The Iams Company Method for decreasing inflammation and stress in a mammal
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
FR2942939B1 (fr) * 2009-03-10 2012-11-02 Lesaffre & Cie Levure probiotique stable a la granulation,compositions probiotiques la comprenant,leur procede de preparation et leurs utilisations
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
SG11201913653RA (en) * 2017-07-31 2020-01-30 Mitsubishi Corporation Life Sciences Ltd Thickening composition for dysphagia patients

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991009608A1 (en) * 1989-12-22 1991-07-11 Grahn Eva E Pharmaceutical preparation for controlling pathogenic intestinal bacteria
US5032399A (en) * 1985-04-17 1991-07-16 Sherwood L. Gorbach L. acidophilus strains
EP0471904A1 (de) * 1990-05-09 1992-02-26 Milpak, Inc. Instant-Joghurt-Zusammensetzung
DE4119306A1 (de) * 1991-06-12 1992-12-17 Wheli Inter Ag Organische rohstoffe, zwischen- und endprodukte fuer die ernaehrung und zur verwendung fuer technische zwecke, die vitalstoffe enthalten
EP0555618A2 (de) * 1992-02-10 1993-08-18 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Lyophilisierte Bakterien enthaltende Diät- oder Arzneimittelnzusammenstellungen, Herstellung und Verwendung derselben

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2612001B2 (ja) * 1987-09-04 1997-05-21 フロイント産業株式会社 腸内有用細菌含有顆粒およびその製造方法
DK686187D0 (da) * 1987-12-23 1987-12-23 Hansens Chr Bio Syst Veterinaert praeparat
IT1265092B1 (it) * 1993-05-31 1996-10-30 Giuliani Spa Preparato per uso come integratore alimentare, o dietetico,a rilascio mirato nel colon
IT1270216B (it) * 1994-06-14 1997-04-29 Recordati Chem Pharm Metodo di stabilizzazione di composti biologicamente attivi mediante microgranuli ricoperti sospendibili in fluidi alimentari

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5032399A (en) * 1985-04-17 1991-07-16 Sherwood L. Gorbach L. acidophilus strains
WO1991009608A1 (en) * 1989-12-22 1991-07-11 Grahn Eva E Pharmaceutical preparation for controlling pathogenic intestinal bacteria
EP0471904A1 (de) * 1990-05-09 1992-02-26 Milpak, Inc. Instant-Joghurt-Zusammensetzung
DE4119306A1 (de) * 1991-06-12 1992-12-17 Wheli Inter Ag Organische rohstoffe, zwischen- und endprodukte fuer die ernaehrung und zur verwendung fuer technische zwecke, die vitalstoffe enthalten
EP0555618A2 (de) * 1992-02-10 1993-08-18 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Lyophilisierte Bakterien enthaltende Diät- oder Arzneimittelnzusammenstellungen, Herstellung und Verwendung derselben

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