JPH05501263A - グルタチオンのエーロゾル製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 グルタチオンのエーロゾル製剤及び肺におけるグルタチオン濃度を増加する方法 技術の分野 本発明は一般に、肺の障害の管理および治療に関する。

特に、本発明は、吸入によるグルタチオンの直接エーロゾル投与による下部の気 道組織中の還元されたグルタチオン（ＧＳＨ）濃度を増加することにより、肺の 機能不全、障害または疾病を治療することに関する。

発明の背景 肺において、ＧＳＨは下部の気道の上皮内液（ＥＬＦ）中、高濃度で存在し、ヒ トＥＬＦ中の標準濃度は血漿中の標準濃度より４０倍以上も高い。ＥＬＦ　ＧＳ Ｈは、炎症性細胞により放出されたオキシダント、並びに吸入されたオキシダン トから肺の上皮を保護する酸化防止スクリーンの主成分である。さらに、ＥＬＦ 　ＧＳＨは、肺上皮の宿主防御システムの免疫成分の標準機能を維持する手助け をする。しかし、突発性繊維症、及びＡＩＤＳ患者のようなある条件において、 実質的なＥＬＦ　ＧＳＨ欠乏症であることが見い出された。

肺のＧＳＨ濃度の増加における問題は、ＧＳＨの経口投与が肺でのＧＳＨ濃度の 有為な高さに届かず、ＧＳＨの静注投与が分子の非常に短い血漿半減期と関連す ることである。

それゆえ、本発明の目的は、肺にＧＳＨを届ける新規で効きめのある方法を提供 することである。

本発明の他の目的は、ヒトの肺に直接投与するためのＧＳＨの実質的に無毒のエ ーロゾル組成物を提供することである。

本発明のその他の目的は、肺へエーロゾルＧＳＨを直接投与することにより、増 加されたＧＳＨａ１度が有益であると考えられる肺の機能不全、障害または疾病 を治療する方法を提供することである。

本発明の種々の他の目的および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるだろ う。

図面の簡単な説明 これらの目的、特徴、および本発明の付随する利点の多くは、添付の図面と関連 させて考える時、以下の詳細な説明を読んでより良（理解されるだろう。

第１図は、羊の基準グルタチオン濃度を示す。静脈血漿、肺リンパ液、上皮内液 、及び尿中の還元されたグルタチオン（ＧＳＨ）の濃度が示されている。データ は２３匹の羊の二重の値の平均を示す。

第２Ａ図から第２Ｄ図は、６００■のＧＳＨを静注で投与した後の、羊における 還元されたグルタチオン（ＧＳＨ）濃度を示す。静脈血漿、肺リンパ液、上皮内 液（ＥＬＦ）　、及び尿中のＧＳＨ濃度は、静注でのＧＳＨ投与の前、および後 のある間隔で評価された。各データ点は１１匹の羊での二重測定の平均値を表わ す。

第３図は、グルタチオンのエーロゾル化の効果を評価したものである。エーロゾ ル発生器の発生物は、リン酸エステル緩衝塩水中に集められた。エーロゾル前の グルタチオン（″前″）及び部屋の空気で発生されたエーロゾル（”後”）のた めの還元形態の全グルタチオンの比率が示されている。各データ点は三重測定の 平均値を表わす。

第４Ａ図から第４Ｄ図は、６００■のＧＳＨをエーロゾル投与した後の、羊にお ける還元されたグルタチオン（ＧＳＨ）濃度を示す。肺上皮内液（ＥＬＦ）　、 肺リンパ液、静脈血漿、及び尿中のＧＳＨ濃度は、エーロゾルでのＧＳＨ投与の 前、および後のある間隔で評価された。

各データ点は１２匹の羊での二重測定の平均値を表わす。

第５図は、ＧＳＨ投与前、及び３日間毎日２回エーロゾルにより６００■のＧＳ Ｈを投与した１時間後に、２人のＨＩＶ感染した、徴候のない患者の肺における ＧＳＨ濃度を示す。

発明の詳細な説明 本発明の上記の種々の目的および利点は、吸入によりヒトの肺へ直接投与するの に適当なＧＳＨの無毒なエーロゾル組成物により達成される。ＧＳＨのエーロゾ ル組成物は、吸入により肺へ安全に投与するのに適するエーロゾルの形態で、薬 剤的に許容可能な担体中に有効量のＧＳＨを含む。

別な方法で定義されなければ、ここで使用された技術的および科学的な用語のす べては、本発明の属する分野の当業者により一般に理解されるのと同じ意味を有 する。

ここで記載されたものと類似または等しいいずれの方法および材料が、本発明の 実施または試験で使用されうるにもかかわらず、好ましい方法および材料を記載 している。以下に記載された全刊行物は参照文献としてここに導入される。別な 方法で記載されなければ、ここで使用され、または行われた技術は、この分野の 当業者によりよく知られた標準の方法論である。材料、方法および実施例は例証 であるだけで、制限するものではない。

ここで使用される用語”エーロジノじは、空気中に懸濁化された液体の小滴を意 味する。小滴の大きさは、ＧＳＨを含むエーロゾルが使用されるべき臨床条件に 必要と考えられる上部の、及び下部の気道におけるエーロゾルの沈着に適当であ ると理解される。

材料および方法 グルタチオン製剤 グルタチオンの還元形態は遊離酸（組織培養段階；Ｓｉｇｍａ）として得られ、 ４℃で貯蔵された。各実験前の、この製剤中の還元されたグルタチオンのパーセ ントは常に〉９６％である（以下を見よ）。

静注チオベンタールナトリウムで麻酔された。静注カテーテルは頚静脈中、及び 後ろ足の静脈中に設置され、カテーテルは膀胱に挿入された。気管は、正圧ベン チレーターに取り付けられた、折り返し付きの気管内チューブで挿管された。動 物は１６／分の速度におけるＨ２Ｏ正の最終呼気圧５ｃｍを有する体重１２ｍ１ ’／ｋｇの一回換気量で換気された。

心電図および吸気圧は研究の間モニターされた。麻酔は１．０−１．５％のフル オツン及び５０％の酸素で継続された。肺リンパ液は、ヘパリン処理されたシラ スティックなカテーテルでカニユーレ挿入された尾部の輸出性リンパ管から、Ｓ 　ｔａｕｂ等の技術（１９７５゜Ｊ、　Ｓｕｒｇ、　Ｒｅｓ、　１９，３１５− ３２０）　、肺の間隙を排液する肺リンパ液の選択的サンプリングを可能にする 方法により集められた。

下部の気道ＥＬＦは、０．９％のＮａＣｌ１の単一な５０一部分を使用し、光フ ァイバーの気管支鏡（長さ：１ｍ、外径：　５　、　３　ｉｎ　；　Ｍａｃｈｉ ｄａ）を通して気管支の肺胞の洗浄により得られた。血液試料は頚静脈中のカテ ーテルから得られ、そして尿試料は膀胱カテーテルから得られた。静脈血漿、肺 リンパ液、ＥＬＦ及び尿は、ＧＳＨ投与の前、そして６００■のＧＳＨの静注ま たはエーロゾル投与の後１８０分までの間で、得られた。

２３匹の羊の全てが評価された。各実験セットで使用された羊の数は、データで 示される。全ての静注およびエーロゾルの研究は、閉じられた胸およびうつ伏せ 状態の動物で行われた。基準の気管支肺胞の洗浄液、血液、肺リンパ液、及び尿 の試料が得られた後、４Ｔｎ１の塩水に溶解された６００■のグルタチオンは、 後ろ足の静脈中への静注によるか、または２５分間かけて換気回路の吸息性脚へ のエーロゾルによるどちらかで投与された。

その後、気管支肺胞の洗浄液、血液、リンパ液、及び尿の試料は３時間かけて種 々の間隔で得られた。異なる時点の洗浄試料は、異なる部位で得られた。全ての 測定は全く同一に行われた。リンパ液、血液および尿の値は、分析された液体容 量に関係する。下部の気道の値は、尿素法により評価されながら、回収された上 皮内液の容量に関係する（　Ｒｅｎｎａｒｄ等著、１９８６゜Ｊ、　Ａｐｐｌ、 　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　６０．５３２−５３８）。

全データは、平均値の平均上標準誤差として表され、全ての統計的な比較は、学 生用の両側を検定を使用して行われた。

エーロゾル発生系 還元型グルタチオンを、肺胞領域における沈着のために適当な大きさのエーロゾ ル小滴の発生可能な噴霧器（Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ　、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ 社）を使用して、下方気道への到達が可能な形態にする〔バーバードら（Ｈｕｂ ｂａｒｄ　ｅｔ　ａｌ）、１９８９．Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓ ｃｉ、　ＵＳＡ　、　８６，６８０−６８４〕。還元型グルタチオンを含む二一 口ゾルを発生させるため、０．９％ＮａＣ１中１５０ｍｇ／ｍｌ濃度のＧＳＨ溶 液溶液４奢ｌ霧器のレザーバーに入れ、そして噴霧器を圧縮空気を使用して４０ ｐｓｉで運転する。レーザー粒子径分析により測定されたエーロゾル小滴の寸法 分布は、１．３μｍの幾何学標準偏差を有する２、８μｍの小滴のマスメディア ンエアロダイナミック径（ｍａｓｓｍｅｄｉａｎ　ａｅｒｏｄｙｎａｍｉｃ　ｄ ｉａｍｅｔｅｒ）を示す。還元型のままのＧＳＨ製剤の相対的割合は、既に示さ れている（バーバードら、上記）ようにｐＨ７，４のリン酸緩衝された生理食塩 水中にエーロゾル化された小滴を収集することによって評価される。

グルタチオン濃度および形態 静脈プラズマ、肺リンパ、気管支肺胞洗浄液および尿におけるグルタチオン濃度 は標準的な方法の僅かな改良により定量される〔キャンティンら（Ｃａｎｔｉｎ 　ｅｔ　ａｌ）、１９４５−４５１　、マーテンソンら（Ｍａｒｔｅｎｓｓｏｎ 　ｅｔ　ａｌ）１９８９．　Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、８６．５２９６−５３００　）　 、手短にいえば、総グルタチオン濃度〔即ち、還元型グルタチオン＋グルタチオ ンジスルフィド（ＧＳＳＧ））を測定するため、それぞれ溶液を等量の１７．５ ｍＭのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有するｐＨ７，５のＯ，１Ｍリ ン酸カリウム中の１０ｍＭ５．５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴ ＮＢ）と混合する。試料を遠心分離しく２０００ｇ、１０分間）、および上滑の 一部分（５０μｍ）を５ｍＭ　ＥＤＴＡを含有するｐＨ７，５の０゜１Ｍリン酸 カリウム中の、０．５Ｕ　Ｇ５５Ｇリダクターゼの入っているキュベツトに加え る。２５°Ｃ１１分間のインキュベーションの後検定反応を、最終的に１ｍｌに なるように、５ｍＭ　ＥＤＴＡを含有する、ｐＨ７゜５の０．１Ｍリン酸カリウ ム中の２２０ｎＭ還元型β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（Ｎ ＡＤＰＨ）を加えて、開始する。ＤＴＮＢの減少割合を４１２ｎｍの波長におけ る分光光度計（Ｂｅｃｋｍａｎ社製、ＤＵ−７０型分光光度計）を使用して記録 する。総グルタチオン濃度の測定はｐＨ７，４、リン酸緩衝生理食塩水中の既知 の濃度のＧ５５Ｇ　（０，１２５ないし４μＭ）から作成した標準曲線に基づく 。

グルタチオンジスルフィドを定量するために、それぞれの溶液を回収後直ちに、 等量の１７．５ｍＭ　ＥＤＴＡを含有するｐＨ６，５の０，１Ｍリン酸カリウム 中の１０ｍＭＮ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）と混合する。

試料を次に遠心分離しく２０００ｇ、１０分間）、そして上清２５０μｍを、メ タノール３ｍｌ、続いて蒸留水３ｍｌで洗浄した５ＥＰ−ＰＡＫ　Ｃ１８カート リッジ（Ｗａｔｅｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ製）を通過させ、そして流出分を 集める。Ｇ５５Ｇは５ｍＭ　ＥＤＴＡを含有する、ｐＨ７，５の０．１Ｍリン酸 カリウム１ｍｌでカラムから溶離される。集められた流出分および溶離分の一部 分（７５０μｍ）を５ｍＭ　ＥＤＴＡを含有する０、１Ｍリン酸カリウム、ｐＨ ７，５，２５０μｍと混合する。８００μＭ　ＤＴＮＢ、２　Ｕ／ｍ　１グルタ チオンレダクターゼおよび１ｍＭ　ＮＡＤＰＨ，およびＤＴＭＢの減少割合を４ １２ｎｍで分光光度計で記録する。標準曲線を１０ｍＭ　ＮＥＭと混合し、そし て上記に示した様に５ＥＰ−ＰＡＫ　Ｃ１８カートリッジでクロマトグラフ化し た既知の濃度のＧ５５Ｇ　（０，１２５ないし４μＭ）の希釈液から得る。標準 曲線の範囲より上の値が見出された場合は、０．９％ＮａＣ１で希釈した試料の 平行実施（Ｐａｒａｌｌｅｌ　ｒｕｎ）を行う。ＧＳＨの量は総グルタチオン濃 度からＧ５５Ｇ量を差し引（ことによって得られる。

総グルタチオンおよびＧ５５Ｇ分析の両方に対して、それぞれの溶液から生じた 標準曲線は平行であり、即ち、全ての溶液からの値は類似している。

葭玉 羊におけるベースライングルタチオン濃度＃脈プラズマおよび肺リンパにおける 還元型グルタチオン濃度は、プラズマ濃度が僅かに高い（ｐ＞０．１゜図１）が 、同様の範囲である。尿濃度は非常に低い。著しくは、ヒトにおけるように〔キ ャンティンら（Ｃａｎｔｉｎｅｔ　ａｌ）、既出：プールら（Ｂｕｈｌ　ｅｔ　 ａｌ）、１９８９．Ｌａｎｃｅｔ　ＩＩ。

８６７５　；キャンティンら（Ｃａｎｔｉｎ　ｅｔ　ａｌ）、Ａｍ、Ｒｅｖ、　 Ｒｅ５ｐｉｒ。

Ｄｉｓ、、１３９，３７０−３７２）　、肺上皮内液（ＥＬＦ）ＧＳＨ！１度は これらのプラズマまたは肺リンパ濃度より数倍高い。

プラズマおよび肺リンパ両方においては、ＧＳＨは総グルタチオン〉９５％（プ ラズマ９７±２％還元型；リンパ９５±３％還元型）の割合を占める。ＥＬＦに おいてはベースライン総グルタチオンの７５±４％は還元型であるが、尿におい ては５９±６％が還元型である。

グルタチオンの静脈内投薬 肺上皮内液のＧＳＨ濃度を増加させる可能な方法としての静脈内経路を評価する ために、６００ｍｇＧＳＨの各投与量を羊に静脈内投与する。プラズマにおける ＧＳＨ濃度は注射によって増加するが、４５分でベースラインに戻る（ｐ＜０． ０５、ベースライン１５分間と比較、他の値のすべてｐ＞０．１；図２Ａから２ Ｆ）。ＧＳＨの幾らかは肺に分散し、一時的に肺リンパ濃度を高める（ｐｒｏ、 ０５．１５分間、ベースラインと比較）が、プラズマＧＳＨのように３０分で値 がベースラインになる（ｐ＞０．１．１５分以外の全ての時間）。しかし、肺上 皮内液値の平均は多様であるがこれは観測期間に顕著な変化がない（ｐ＞０．１ 、全てベースラインに比較）。予期された通り、尿排泄物は１５分には迅速に高 濫度を示す（ｐ＜Ｑ、０２．ベースラインと比較）。これはまたその後はベース ライン値になる一時的なものである（ｐ＞０．１）。プラズマ、リンパ、ＥＬＦ および尿中の総グルタチオン濃度の評価は還元型グルタチオンのパターンに類似 のパターンを示す（データは示さない。

）。全体として、これら結果は静脈内経路が肺の上皮面へのＧＳＨ配達に有効な 方法でないことを示している。

ＧＳＨにおけるエーロゾル投与の効果 下方気道へのＧＳＨを配達するためのエーロゾル投与する使用のためには、少な くとも３つの主な規準が満たされなければならない。第一にＧＳＨの溶液は肺胞 表面上への沈着に最適な寸法の小滴からなるエーロゾル中になければならない。

この必要条件はこれらの研究で使用されたＵｌｔｒａｖｅｎｔ噴霧器で満たされ るが、他の噴霧器または通常の当業者によく知られているような同様の特性を持 つ二一口ゾルを作るものによって行うことができる。

第二に、エーロゾルはＧＳＨを変化させるべきではな（、即ち還元されたおよび それゆえ機能的なままでなければに適当であるように、非毒性であるべきである 。体外でのエーロゾル化されたＧＳＨの評価はエーロゾル化方法自体グルタチオ ン分子の構造を変えないことを示した。

これに関しては、総グルタチオンのエーロモ弗化前製剤は９８．２±０．１％還 元型グルタチオンを含み、一方、集められたエーロゾル化後の製剤は９７．０± ０．６％の還元型である（Ｐ＞０．１）。全体として、これらの結果はエーロゾ ルが肺の肺胞領域に達するのに最適な寸法の小滴内にある充分機能する還元型グ ルタチオンからなることを示している。

グルタチオンのエーロゾル投薬 エーロゾルにより２５分かけて羊（ｎ＝１２）に投与された０、９％ＮａＣ１４ ｍｌ中の還元型グルタチオン６００ｍｇの各投与量は３０分内に下方気道の上皮 内液中のＧＳＨ濃度を７倍を越えて増加させる（ｐ＜０゜００１、エーロゾル化 ３０分後に対して比較したエーロゾル化前；図４）。ＥＬＦのＧＳＨ濃度は２時 間まではベースラインよりも大きい状態のままである（ｐ　＜　０゜０１、エー ロゾル化６０分および９０分後、両方についてベースラインと比較）。肺リンパ の濃度は３０分においてのみ一時的に増加するが、ベースラインとの著しい違い はなく　（ｐ＞０．１）、そして静脈プラズマおよび尿の濃度はエーロゾル化に より著しく変化しない（ｐ＞０．１、全てベースラインと比較）。対照として、 生理食塩水のみをエーロゾル化した。ＥＬＦのＧＳＨ濃度は３時間にわたりベー スラインから変化していないままである（ｐｒｏ、１、全て比較）。

ＥＬＦのＧＳＨ濃度が著しくベースラインより上になる各々の時点では、ＥＬＦ における総グルタチオン濃度は還元型グルタチオンよりも高い濃度を示す。例え ば３０分においてＥＬＦにおける還元型グルタチオン濃度は総グルタチオン濃度 の６５±７％である（ｐｒｏ、００１）。全体にわたり、６０．９０．１２０分 において還元型グルタチオン濃度は、総グルタチオン濃度の６２ないし６５％で ある（ｐ＜０．００５全て比較）。エーロゾル化工程はそれ自体はＧＳＨの相対 的割合をエーロモ弗化前製剤におけるそれからから変化させないし、（図３）、 回収されたＧＳＨの割合も減少しないので、多分羊肺の上皮表面上に衝突した時 、ＧＳＨは酸化剤負荷と遭遇したものと思われる。しかし、この観察とは別に、 ＧＳＨのエーロゾル化がＥＬＦのＧＳＨ濃度の顕著な増大を起こすことは疑念を 越えて明らかである（１１４Ａないし４Ｄ）。

全体として、これらのデータはグルタチオンのエーロゾル投与が実行可能であり および下方気道のＥＬＦへの還元型グルタチオンを目的とするための有効な方法 であることを示している。療法の安全に関しては、平均およびピークの吸気圧は 手順の間中安定のままである。ＧＳＨのエーロゾル投与は、気道の粘膜の視覚検 査により判断されるように、気道下部の炎症を引き起こさない。さらに、エーロ ゾル化前および後の気管支洗浄液のＥＬＦ容積の測定により決定されるように、 上皮関門の明らかなｒ漏れ１はない（ｐ＞０．１、全てベースラインに対する比 較）。

ヒトにおけるエーロゾル化されたグルタチオンの研究例えば特発性疾患性肺繊維 症（ＩＰＦ）であるような患者において、ＥＬＦグルタチオン濃度は約４倍低（ 、ＩＰＦに見られる増加したオキシダント負荷の状況において肺表面における著 しい酸化剤−抗酸化剤欠乏のあることを示している（キャンティンら、既出）。

同様に、ＧＳＨ欠乏がＨＩＶ−漿液陽性（ＨＩＶ−ｓｅｒｏ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ）の患者で見られている。ＩＰＦの患者のおよびＨＩＶ−漿液陽性の患者の下方 気道の上皮表面の欠乏性抗酸化剤スクリーンと共に炎症性の細胞から誘導された 増加された酸化剤負荷がある。全体として、これらの作用はこれらの患者におい てみられる上皮損傷の役割をしているようである。肺におけるＧＳＨの増加した 濃度を投薬する他の状態は望ましくは嚢胞性の繊維症、急性のおよび慢性の気管 支炎、成人呼吸困難症候群、細菌性ならびにウィルス性肺炎、日和見性感染、マ イコプラズマ、レジオネラ、マイコバクテリアおよび真菌性感染を含む肺感染の 全ての形態等を包含するものと考えることができる。

本研究は以下の主な目的に従って行われる。

１、特発性疾患性肺繊維症またはＨＩＶウィルスによる漿液陽性患者の患者への エーロゾル化したＧＳＨの増加する量の投与の安全性を示すため、病歴ならびに 身体検査、化学的作用、血漿学的および凝固プロフィールおよび肺機能を監視し 、ならびに肺における全ての異常な炎症性反応を評価するため気管支肺胞洗浄を 使用すること。

２、これらの疾患に対し臨床的に効果的であるらしいグルタチオンの投与量を決 定すること、それはエーロゾルによる肺への安全な投薬および次に気管支肺胞洗 浄を利用した下方気道のＧＳＨのバイオアベイラビリティ−を評価できる。

Ａ、パート１．ＧＳＨの増加する投与量の評価。各々の患者は４回の連続的な（ 受は入れ難い毒性のない）投与量濃度で、４回の連続的な投与に対して２４時間 ごとに還元型グルタチオンの各エーロゾルを受ける。

投与量管理の表を以下に示す： ３　２００ｍｇ ４　６００ｍｇ 注目すべきは、しかし、投与量は患者にとって実質的に薬害反応のない耐許容性 のあるＧＳＨのいずれの濃度にも調整できることである。このため２．５００ｍ ｇまでまたはより高い投与量はこのような高い濃度が患者に好ましい結果を生む かどうか内科医師により検討され得る。

すべての患者は１０ｍｇでの処置から始め、もし段階ＩＩ毒性または段階ＩＩＩ 毒性を伴わない場合は各々連続的な処置において投与量を拡大できる。２人の患 者までが同時に処置できる。いずれかの患者において毒性が起こった場合、次の 投与量の拡大が生じ得る前の投与濃度において、４人の追加の患者が処置される 。毒性が第二の患者に起こった場合は、投与量の拡大は毒性源が決定および除か れるまで行われない。

Ｂ、パートＩＩ−ＧＳＨのバイオアベイラビリティ−の評価 各々の患者は６００ｍｇまたは最大許容投与量を１２時間、６回の投与量に分け て受ける。

Ｃ，ＧＳＨの投薬 各々の患者は特別な投与量におけるエーロゾル化したＧＳＨを受ける。エーロゾ ル投薬中、すべての薬害反応を管理するため内科医が付き添う。

エーロゾル化したグルタチオンの投薬の使用方法。

人、希釈賦形剤 希釈賦形剤は滅菌０．９％塩化ナトリウムである。

Ｂ、投薬説明 バイアルを使用直前に再溶解しそして過剰公金ては廃棄する。分けたグルタチオ ンのバイアルを患者の投与量毎に配分する。各々の事例における望ましい投与量 は以下に示すように再溶解溶液４ｍｌである。

１０ｍｇ　：　２０［Ｄｌで再溶解した５０ｍｇ　／）くイアル５０＋ｎｇ　： 　４ｍｌで再溶解した５０ｍｇ　／　／クイアル２００ｍｇ　：　１２ｍ１で再 溶解した６００ｍｇ　／　ノ＜イアル６００ｍｇ　：　４ｍｌで再溶解した６０ ０ｍｇ　／ノくイアル再溶解に従って、溶液４　ｍ　ｌを空気エーロゾル発生器 （Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ　；Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ社製）のレザーノ（−にし Ａれる。噴霧器を圧縮空気を使用して４“Ｏｐｓ　ｉで運転し、１０リットル／ 分のエーロゾルを発生させる。一方向）くルブ、鼻クリップおよびマウスピース の一連を使用して系を閉鎖する；系は吸いこまれまたは吐き出されたすべてエー ロゾル化されたＧＳＨを含む気体であり、フィルターを通して全て吐き出された 薬を回収する。

板製 図５はＨＩＶウィルスに対して漿液陽性の２患者〔しかしながら無症候性、即ち 、かれらは【ブレーエイズ（ｐｒｅ−ＡＩＤＳ）　Ｊである〕に対し、グルタチ オンのエーロゾル投与をおこなった結果を示している。図５に示されるように、 これら２患者はグルタチオンエーロゾル６００ｍｇを日に２回、３日間、計６投 与量受けた。肺上皮内液はいずれも療法以前、次に６回目の投与後に本明細書に 上述した方法に従って、気管支肺胞の洗浄により評価される。両患者は通常の範 囲以下の肺液内のグルタチオン濃度で開始したが、療法により著しく増加し、即 ち「正常な１欠乏状態になった。副作用または毒性作用は処置した患者には見ら れなかった。

要約すれば、動物およびヒトの両方の研究から、ＧＳＨのエーロゾル化した投薬 により肺のＥＬＦ　ＧＳＨ濃度は著しく増大されたことは明らかである。ここで 記述された実施例および具体例は説明の目的のためだけであり、ここでの見解に おける多様な改良または変法が当業者から提案されるであろうしおよびこの発明 の精神および範囲ならびに付加した請求項の範囲内に含まれるものと理解すべき である。

静脈　肺りンパ　ＥＬＦ　尿 血漿　液 エーロゾル化 ６００　ｍｇのＧＳＨをエーロゾル １Ｂ　２８　３９　４ｉｌｌ’ ＨＩＶ感染士徴候のない個人 補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成４年５月２５ＢＥ

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. １．吸入により肺へ安全に投与するのに適するエーロゾルの形態で、薬剤的に許 容可能な担体中に有効量の還元されたグルタチオンを含む、還元されたグルタチ オン（ＧＳＨ）のエーロゾル。
2. ２．　無菌のＧＳＨを約１０ｍｇないし約２，　５００ｍｇ、塩化ナトリウム溶 液を約０．９％〔容量に対する重量の比〕を含み、無菌空気のエーロゾル発生貯 蔵器中に入れられ、そのため、該ＧＳＨのエーロゾルが約３０−５０ｐｓｉの圧 縮空気において約８−１２リットル／分の速度で作られる請求の範囲第１項記載 のエーロゾル。
3. ３．約４０ｐｓｉの圧縮空気において約１０リットル／分で作られる請求の範囲 第２項記載のエーロゾル。
4. ４．肺への吸入により請求の範囲第１項記載のエーロゾルを投与することからな る、肺における還元されたグルタチオン濃度を増加する方法。
5. ５．肺への吸入により請求の範囲第１項記載のエーロゾルを、肺中のＧＳＨ濃度 を増加させるのに十分な量で投与することからなる、ＧＳＨの増加された濃度が 望ましいと考えられる肺の機能不全、障害または疾病を治療する方法。
6. ６．肺の機能不全、障害または疾病を治療するため、肺中のＧＳＨ濃度を増加さ せるのに十分な量の請求の範囲第１項記載のエーロゾルを使用する方法。