JPH05286974A - 抗ウイルス性化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 式IIの化合物及びその製造方法。 【化１】 ［式中（ｉ）Ｒ^１，Ｒ^２の少くとも一方は−ＣＯ−Ｒ^３
で他方はＨ、且つＲ^８は−ＣＯ−Ｒ^３である；（ii）Ｒ
^１，Ｒ^２の少くとも一方が−ＰＯ（ＯＲ^４）（ＯＲ^５）
で他方はＨ，−ＣＯ−Ｒ^３または−ＰＯ（ＯＲ^４）（Ｏ
Ｒ^５）であり且つＲ^８はＨ、または−ＣＯ−Ｒ^３であ
る；（iii）ＯＲ^１とＯＲ^２が一緒になって となり、Ｒ^８はＨまたは−ＣＯ−Ｒ^３である。こゝでＲ
^３はＨ，Ｃ_１〜２０のアルキル、アラルキル、アリール
等である；Ｒ^４，Ｒ^５はＨ、カチオン等である］ 【効果】 ヘルペスウイルス、抗マイコプラズマ作用を
有し、感染症に対して有効である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】抗ウイルス性化合物としてプリン誘導体の
使用は知られている。例えば米国特許第４，０２７，０
２５号は抗ウイルス性化合物として９−（２−ヒドロキ
シエトキシメチル）−８−アザグアニンおよび９−（２
−ベンゾイルオキシエトキシメチル）−８−アザグアニ
ンのような８−アザプリン誘導体を開示している。米国
特許第４，１４６，７１５号は２−アミド−９−（２−
アシロキシエトキシメチル）ヒポキサンチンを開示して
いる。米国特許第４，１９９，５７４号は特定の６−お
よび２，６−置換プリンの９−（２−ヒドロキシエトキ
シメチル）および関連誘導体が抗ウイルス作用を有する
ことを開示している。ヨーロツパ特許出願公告第００４
９０７２号は９−〔〔２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキ
シメチル）エトキシ〕メチル〕グアニンが抗ウイルス作
用を有することを開示している。

【０００２】本発明のの目的は新規な抗ウイルス性化合
物を提供するものである。本発明の他の目的は公知の抗
ウイルス性化合物に比べて増大した抗ウイルス作用を有
する新規な化合物を提供するものである。さらに他の目
的はヘルペスウイルスに対して有効な抗ウイルス作用を
有する化合物を提供するものである。さらにその上他の
目的は抗マイコプラズマ作用を有する化合物を提供する
ものである。さらに本発明の目的は本発明の新規な化合
物の有効な投与のための医薬処方を提供するものであ
る。さらに他の目的は本発明の新規な化合物の製造方法
を提供するものである。本発明のこれらのおよび他の目
的は次の説明から明白となる。９−（１，３−ジヒドロ
キシ−２−プロポキシメチル）グアニンおよび９−
（２、３−ジヒドロキシ−１−プロポキシメチル）グア
ニンが有効な抗ウイルス作用を有することを見出した。
これらの化合物、それらのアシル誘導体、それらのホス
フエート誘導体およびそれらの医薬的に使用し得る塩、
これらの化合物を含有する医薬処方、これらの化合物で
のウイルス性感染の治療、これらの化合物の製造方法お
よびそれらの製造に有用な新規な中間体をすべて開示す
る。さらにアシル誘導体は抗マイコプラズマ作用を有す
る。

【０００３】本発明の化合物は適当なアセトキシメチル
エーテルをジアセチルグアニンと反応させ、次に脱保護
することによつて製造することができる。アセトキシメ
チルエーテルは触媒の存在下グリセロルホルマルを酢酸
無水物と反応させることによつて得ることができる。

【０００４】本発明は抗ウイルス性化合物に関するもの
であり、さらに詳細には式Ｉの９−（２，３−ジヒドロ
キシ−１−プロポキシメチル）グアニンおよび式ＩＩの
９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニンに関するものである。

【化３０】

【０００５】式ＩおよびＩＩの化合物においてヒドロキ
シル基の水素原子を式−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_３（式中Ｒ_３は飽
和またはモノ−またはポリ不飽和であることができる１
〜２０個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル
基、アリール、置換アリール、ヘテロシクリル、アラル
キル、アルキシアルキルまたはアリールオキシアルキル
である）を有するアシル基に置き換えることができるか
またはヒドロキシル基の水素原子を式

【化３１】 （式中Ｒ^４およびＲ^５は各々Ｈ，医薬的に使用し得るカ
チオン、１〜８個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖
アルキル、アリール、アラルキル、ホスフエートまたは
ピロホスフエートである）を有するホスフエート基に置
換することができる。好適にはアルキル基は１〜１０個
の炭素原子であり、アリール基は所望によりハロゲンま
たはＣ_１−４を有するアルキルで置換されたフエニルで
あり、ヘテロシクリル基はピリジル、ピペリジル、フリ
ル、イミダゾリル、テトラヒドロフリルまたはチエニル
であり、アラルキル基はＣ_１−４で置換されたフエニル
であり、アルコキシアルキル基のアルコキシおよびアル
キル基は両方とも１〜４個の炭素原子を含有し、アリー
ルオキシアルキル基はＣ_１−４で置換されたフエノキシ
であり、医薬的に使用し得るカテオンはナトリウム、カ
リウム、アンモニウム、アルキル（Ｃ_１−４）置換アン
モニウム、マグネシウム／２、カルシウム／２またはア
ルミニウム／３である。

【０００６】式ＩおよびＩＩの化合物はグリセロルホル
マル、式ＩＩＩの化合物が通常優勢な化合物である式

【化３２】 （式中ＲはＨである。）を有する１，３−ジオキサン−
５−オールおよび式

【化３３】 （式中ＲはＨである。）を有する１，３−ジオキソラン
−４−メタノールの混合物から出発して製造することが
できる。グリセロルホルマル中式ＩＩＩおよびＩＶの比
はＨ，チベルト、フレセニウズ Ｚ．Ａｎａｌ．Ｃｈｅ
ｍ 第２６５巻、第３２８頁（１９７３年）によつて５
７：４３であることが定量されている。しかしながらこ
の比はグリセロルホルマルの異なる製造法に対して変わ
ることができる。種々の比の式ＩＩＩおよびＩＶの化合
物を含有する混合物が本発明に従つて使用することがで
きることは理解されるべきである。

【０００７】グリセロルホルマル（式ＩＩＩおよびＩＶ
の化合物の混合物）は好適には式ＩＩＩおよびＩＶの個
々の化合物を分解せずに、ピリジンの存在下酢酸無水物
のようなアシル化剤と反応きせることによつてアシル化
してＲがアシルである対応するアシルオキシ誘導体を生
成する。この混合物は例えば高性能液体クロマトグラフ
イ（ＨＰＬＣ）によつて分離される。触媒例えばＺｎＣ
ｌ_２の存在下ＲがＡｃ（アセチル）である式ＩＩＩを有
する化合物を酢酸無水物で処理して式

【化３４】 を有するアセトキシメチル２，３−ジアトキシ−１−プ
ロピルエーテルを生成する。この反応は発熱であり、好
適には不活性雰囲気例えはＮ_２中包囲温度で起る。次に
式Ｖの化合物を精製しそしてニートまたはトリグリムの
ような不活性溶媒中イシド等、 Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．
Ｓｏｃ．日本第３７巻、第１３８９年（１９６４年）で
記載されるように酸性触媒例えばエタンスルホン酸の存
在下、真空下上昇温度で調製した式

【化３５】 を有するジアセチルグアニンと反応させて粘性油として
式

【化３６】 を有する２−アセタアミド−９−（２，３−ジアセトキ
シ−１−プロポキシメチル）ヒポキサンチンＶＩＩＩを
生成する。次にＶＩＩＩの化合物を例えば還流下好適に
は不活性雰囲気例えばＮ_２中水性メチルアミンで加熱す
ることによつて脱アセチル化し、次いで冷却して式Ｉの
化合物を含有する溶液を生成し、所望により木炭で処理
して▲ろ▼過する。▲ろ▼液を濃縮して固体を生成し、
Ｈ_２Ｏで再結晶して結晶性生成物を生成する。

【０００８】式ＩＩの化合物はＲがＡｃである式ＩＶを
有する化合物を触媒例えばＺｎＣｌ_２の存在下酢酸無水
物と反応させることによつて同様の方法で得ることがで
き、式

【化３７】 を有するアセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−
プロピルエーテルを生成することができる。この反応は
ＲがＡｃである化合物ＩＩＩから化合物Ｖを生成するた
めに用いた同様の条件下で起る。次に式ＶＩの化合物を
精製しそして式Ｖの化合物をジアセチルグアニンと反応
させるために用いたのと同様の条件下で式ＶＩＩのジア
セチルグアニンと反応させて式ＩＸの２−アセタミド−
９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチル）
ヒポキサンチンを粘性油として生成し、式ＶＩＩＩの化
合物に使用したのと同様の操作によつて結晶化する。

【化３８】 次に式ＶＩＩＩの化合物を式Ｉに転化するために使用し
たのと同様の処理によつて式ＩＸの化合物を式ＩＩの結
晶性生成物に転化する。また所望によりグリセロルホル
マルを式ＩＩＩおよびＩＶ（式中各場合のＲはＨであ
る）を有する成分化合物に分離し、次に上記で記載した
ように各分離化合物を処理することが可能である。

【０００９】同様に式ＶおよびＶＩの化合物の混合物を
グリセロルホルマルから触媒例えばＺｎＣｌ_２の存在下
酢酸無水物で直接後者を処理することによつて生成する
ことが可能である。生成混合物はＨＰＬＣによつてクロ
マトグラフイ処理することができる。分析ＨＰＬＣによ
つて式Ｖの化合物だけを示している留分を高真空下で濃
縮し、次に上記で記載したように式ＶＩＩのジアセチル
グアニンと反応させて式ＶＩＩＩの化合物を生成し、順
次上記で記載したように式Ｉの化合物を生成する。

【００１０】他方、式ＶおよびＶＩのアセチル中間体を
各別々にまたは混合物として、非極性溶媒中ハロゲン化
水素で（ジクロロメタン中塩化水素が好ましい）処理し
てさらに反応性のハロゲン誘導体に転化することがで
き、末端ＡｃＯＣＨ_２Ｏ−作用性をＸＣＨ_２Ｏ−〔式中
Ｘはハロゲン（塩素、臭素またはヨウ素）である〕に転
換することができる。これらのハロゲン化合物はベンゼ
ン、トルエン、アセトニトリルまたはジメチルホルムア
ミドのような非極性または二極性溶媒中例えば米国特許
第４，１９９，５７４号の文献に記載されているような
トリエチルアミンまた粉末炭酸カルシウムの存在下また
は不在下で保護グアニン〔パー（トリメチルシリル）グ
アニンまたはジアセチルグアニンが二つの好ましい誘導
体である〕とともにアルキル化反応で用いることができ
る。主として式ＶＩの化合物を含有するクロマトグラフ
イ留分をＨＰＬＣで再クロマトグラフイ処理し、十分な
純度の留分を混合し、高真空下で濃縮し、次に上記で記
載したような式ＶＩＩのジアセチルグアニンと反応させ
て式ＩＸの化合物を生成し、順次上記で記載したように
式ＩＩの化合物に転化する。

【００１１】前述の方法の説明はアシル基がアセチルで
ある化合物に特に好適であつたが、一方アシル基が同様
に飽和またはモノ−またはポリ不飽和および所望により
アリール、置換アリール、ヘテロシクリル、アラルキ
ル、アルコキシアルキルまたはアリールオキシアルキル
基で置換することができる約２０個以下の炭素原子を有
する直鎖または分枝鎖アルカノイル基であることができ
ることは理解されるべきである。

【００１２】アシル誘導体は好適には例えばピリジン−
ジメチルホルムアミドのような適当な併用溶媒の存在下
ＩまたはＩＩの化合物を適当なアシルハライド、酸無水
物または他の活性化アシル化合物と反応させることによ
つて製造する。４−ジメチルアミノピリジンが有効な触
媒である。他の活性化アシル化合物は酸を例えば１，
１′カルボニルジイミダゾール、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘ
キシルカルボジイミドのような適当な活性化剤と反応さ
せてあるいは公知の方法によるＮ−ヒドロキシスクシン
イミドまたは１−ヒドロキシベンゾトリアゾールのアシ
ル化によつて製造することができる。

【００１３】アシクログアノシン、９−（２−ヒドロキ
シメチル）グアニンに比べて本発明の化合物はさらに溶
解性であり、ウイルス性酵素によつてさらに容易にホス
フオリル化しそしてアシクログアノシンより生体内で実
質的に活性が高い。本発明の化合物は抗ヘルペスウイル
ス作用を与えるのに有効な用量レベルで個々にまたは組
合わせて哺乳類または鳥類に高ウイルス性化合物として
使用することができる。典型的にはかかるレベルは約
０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ／日である。本発明の化合
物は経口的に、局所的にまたは注射４による投与に対し
て受け入れられた医薬実施に従つて処方することができ
る。適当な経口用量形態は錠剤、カプセル剤、エリキシ
ル剤または散剤であり、一方例えばリン酸緩衝食塩水ま
たは水中の液剤または懸濁液剤が注射に適当である。適
当な局方処方の具体例はゲル、軟膏、液剤または懸濁液
剤である。

【００１４】本発明の化合物のアシル誘導体（Ｃ
_１−２０）は抗マイコプラズマ作用を有し、豚および鶏
のこの疾病の治療または予防に有用である。

【００１５】次の実施例は本発明を具体的に説明するも
のであるが、それらに限定されるものではない。温度は
すべて℃で表わす。

【００１６】実施例１ ９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プロポキシメチル）
グアニン Ａ． アセトキシメチル２，３−ジアセトキシ−１−プ
ロピルエーテル 式ＩＩＩおょび式ＩＶの化合物の混合物を含有するグリ
セロルホルマル１７．１ｍｌ（２０．８ｇ、２００ミリ
モル）の攪拌混合液に酢酸無水物６０ｍｌ，氷酢酸６，
７ｍｌおよび無水ＺｎＣｌ_２２．０ｇを添加した。混合
液をＮ_２雰囲気下包囲温度で攪拌した。すぐにＺｎＣｌ
_２が溶解し、２．３分で溶液の色が薄黄色に変化しなが
ら強い発熱反応があつた。１時間後発熱反応が軽減し、
薄層クロマトグラフイ（ＴＬＣ）（１：１および２：１
ヘキサン−エチルアセテート）が明白に完全なそしてき
れいな反応を示した。４．５時間後、溶液を高真空で濃
縮した。残留油をジエチルエーテル７００ｍｌに取り飽
和ＮａＨＣＯ_３溶液２×１００ｍｌ次にＨ_２Ｏ１００ｍ
ｌで洗浄した。エーテル溶液をＭｇＳＯ_４で乾燥し、木
炭で脱色し▲ろ▼過する。▲ろ▼液を高真空で濃縮して
無色の残留物４５．８ｇ（９２％）を生成する。分析Ｈ
ＰＬＣ（７：３ヘキサン−エチルアセテート）は式Ｖお
よびＶＩの二つの生成物異性体だけを示した。この生成
物異性体の塊（４４．５ｇ）を各１１〜１１．５ｇの４
つのバツチでＨＰＬＣに委ねた。作業はすべてシリカゲ
ル（二つのＷａｔｅｒｓ Ｐｒｅｐ−５００パック）、
再循環（３サイクル）させながら７：３ヘキサン−酢酸
エチル（１分当り２５０ｍｌ流動速度）および再留分指
数検出を用いる同一条件下で行なつた。留分を各作業に
対して同一場所でカツトし、種々の作業からの留分を収
集しながら混合した。ピークの澄明な分離は再留分指数
痕跡量に観察されなかつた。式Ｖの純粋な化合物として
分析ＨＰＬＣによつて同定された留分（さらに短い保持
時間）を集め高真空で濃縮してＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）が
アセトキシメチル２，３−ジアセトキ−１−プロピルエ
ーテルに一致する無色の残留油１７．０ｇを生成した。 Ｂ．２−アセタシド−９−（２，３−ジアセトキシ−１
−プロポキシメチル）ヒポキサンチン ジアセチルグアニン（ＶＩＩ）２．６１ｇ（１１．１ミ
リモル）、上記段階Ａからのアセトキシ−１−プロピル
−エーテル５．５０ｇ（２２．２ミリモル）およびエタ
ンスルホン酸５５ｍｇを低真空下油浴中１５５〜１６０
゜で蒸留アダプターを備えたフラスコ中で加熱した。混
合液を漸次磁気攪拌させるのに十分に希釈して蒸留物を
収集した。混合液は約４５分後均質になり７５分後冷却
した。粘性油を酢酸エチル約１００ｍｌに取り、ほとん
ど白色の結晶の収量１．２３ｇ（２９％）、ｍ．ｐ．１
６２．５〜１６５゜で結晶化するために誘導した。薄層
クロマトグラフイ（ＴＬＣ）（９：１ＣＨＣｌ_３−ＣＨ
_３ＯＨ）はシングルスポツトを示した。 Ｃ． ９−（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシメ
チル）グアニン 上記段階Ｂからの２−アセタミド−９−（２，３−ジア
セトキシ−１−プロポキシメチル）ヒポキサンチン（Ｖ
ＩＩＩ）１．１４ｇ（３．０ミリモル）の溶液をＮ_２下
攪拌しながら４０％水性メチルアミン中還流で１時間加
熱し次いで冷却した。ＴＬＣ（８０：２０：２ＣＨＣｌ
_３−ＣＨ_３ＯＨ−Ｈ_２Ｏ）はタイトルの化合物（Ｉ）へ
完全な軟化を示した。薄橙色溶液を木炭で処理しスーパ
ーセルで▲ろ▼過した。▲ろ▼液を濃縮して固体を生成
し、Ｈ_２Ｏ（２．３滴のＣＨ_３ＣＯＯＨで約ｐＨ６に調
節した）で再結晶してクリーム色の結晶、ｍｐ２４６〜
２４７゜分解、６８７ｍｇを生成した。

【００１７】実施例２ ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン Ａ．アセトキシメチル１，３−ジアセトキ−２−プロピ
ルエーテル 高真空下で乾燥した後、式ＶＩ（さらに長い保持時間）
の含有量の高い実施例の１の段階Ａからの留分を混合し
て残留油９．７１ｇを生成し上記で記載したのと同一条
件下でＨＰＬＣに委ねた。分析ＨＰＬＣで定量された十
分な純度の式ＶＩの化合物を含有する留分を混合し高真
空下で濃縮してほとんど無色の残留油５．１０ｇを生成
した。分析ＨＰＬＣは式Ｖの化合物に対する式ＶＩの化
合物の比ピークの高さに基づいて約１５：１を示した。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）はこの異性体比と一致し、アセト
キシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエーテ
ルとしてこの化合物の固定と一致した。 Ｂ．Ａ−アセタミド−９−（１，３−ジアセトキシ−２
−プロポキシメチル）ヒポキサチン 蒸留アダプターを備えたフラスコ中ジアセチルグアニン
（ＶＩＩ）３．７６ｇ（１６ミリモル）、アセトキシメ
チル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエーテル（Ｖ
Ｉ）４．９６ｇ（２０ミリモル）、エタンスルホン酸４
０ｍｇおよびトリグリム１５ｍｌの混合液を油浴中低真
空下１５５〜１６０゜で加熱した。混合液を漸次攪拌す
るのに十分希釈し、澄明な蒸留液を徐々に収集した。反
応混合液は約７５分後澄明な溶液になつた。３時間後溶
液を冷却し、生成物を結晶化に誘導した。放置した後、
濃厚な混合液を少量の１，２−ジメトキシエタンで希釈
した。固体を▲ろ▼過で集め少量の１，２−ジメトキシ
エタンで次に酢酸エチルで洗浄してＴＬＣ（９：１ Ｃ
ＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ）で定量された９および７−アルキ
ル化異性体の混合物からなるクリーム色の結晶３．２７
ｇを生成した。（９−異性体はこの系で７−異性体より
さらに緩慢に作業する。）母液はさらに０．６５ｇの物
質を生成した。混合した生成物（３．９２ｇをシリカゲ
ルカラムで２回クロマトグラフイ処理（９７：３および
次に９６：４ＣＨ_２Ｃｌ_２ＭｅＯＨで溶離）した。ほと
んど純粋な９−アルキル化異性体を含有する留分を混合
し、濃縮した。最少量の１，２−ジメトキシエタンで残
渣を結晶化して第一生成物６６５ｍｇ（白色結晶、ｍｐ
１７１．５〜１７２．５゜）および第二生成物１８９ｍ
ｇ（ｍｐ１７３〜１７３．５゜）を生成した。初期のバ
ツチと比較してＴＬＣで定量される純粋な９−アルキル
化生成物からなる生成物は両方ともＮＭＲおよび元素分
析で十分に特徴付けられた。 Ｃ．９−（１，３−ジヒドロキシ−２．プロポキシメチ
ル）グアニン ４０％メチルアミン（水性）８．５ｍｌ中２−アセタミ
ド−９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチ
ル）ヒポキサンチン８３８ｍｇ（２．２ミリモル）溶液
をＮ_２下緩かな還流で１時間攪拌した。次いで溶液を冷
却し、濃縮乾固した。残渣の白色固体を酢酸２滴を含有
する最少量Ｈ_２Ｏで再結晶した。冷蔵庫に放置した後、
生成物を▲ろ▼過器で集め少量のＨ_２Ｏ，次にアセトン
で洗浄した。材料を高真空下７５゜で３時間乾燥して白
色結晶５２９ｍｇ（０．７５Ｈ_２Ｏとの水和に基づいて
９０％）ｍｐ ２４９〜２５０゜分解を生成した。物質
はＴＬＣ（８０：２０：２（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ−Ｈ
_２Ｏ）により均質であり、構造はＮＭＲによつて確認さ
れた。

【００１８】実施例３ アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピル
エーテル Ａ．１，３−ジオキサン−５−イルアセテートおよび
１，３−ジオキソラン−４−メチルアセテート グリセロルホルマル１０．０ｇ（９６ミリモル）、ピリ
ジン８．３５ｇ（１０５ミリモル）および酢酸無水物２
０ｍｌを湿気から保護した包囲温度で攪拌した。２，３
分から５日の後、溶液を真空下で分別蒸留した。最初の
留分は主としてピリジン、酢酸および酢酸無水物からな
る。生成物塊を５６〜５７゜（１．１ｍｍ）で蒸留し
た。生成物留分（１０．８ｇ）を再循環させながら３：
１ヘキサン−酢酸エチル中シリカゲルで分取用ＨＰＬＣ
によつて５−および６−員環異性体に分離した。留分を
同定し、分析ＨＰＬＣによつて純度をチエツクした。全
体で１，３−ジオキソラン−４−酢酸メテル（より短い
保持時間）３．１９ｇ（２３％）および１，３−ジオキ
サン−５−イルアセテート（より長い保持時間）５．２
３ｇ（３７％）を得た。構造はＮＭＲで確認した。 Ｂ．アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロ
ピルエーテル 酢酸無水物１２ｍｌおよび氷酢酸１．４ｍｌの混合液中
１，３−ジオキソラン−４−メチルアセテート６．０ｇ
（４１ミリモル）および塩化亜鉛０．４ｇの溶液をＮ_２
下包囲温度で攪拌した。発熱が起り、１時間後ＴＬＣ
（２：１ヘキサン−酢酸エチル）は完全な反応を示し
た。溶液を高真空下濃縮した。生成した液体をエーテル
に溶解し、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液で次にＨ_２Ｏで十分に
洗浄した。エーテル層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、▲ろ▼過
しそして濃縮して式ＶＩの化合物（多重の）および式Ｖ
の化合物（少量の）の混合物からなる残留油８．６８ｇ
を生成した。この物質を同一バツチからの３．５０ｇと
混和した。粗生成物１２．１８ｇの全部を再循環しなが
らヘキサン−酢酸エチル７：３中シリカゲルで分取用Ｈ
ＰＬＣによつて精製した。留分を分析ＨＰＬＣで純度を
チエツクした。良好な留分を混和し濃縮して構造ＶＩを
有する化合物５．８４ｇ（≧９０％純度）を生成した。
構造および純度をＮＭＲで確認した。

【００１９】実施例４ ブロモメテル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエー
テル アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピル
エーテル（２５０ｍｇ，１ミリモル）を臭化水素ガスで
前飽和させたジクロロメタンにＯ゜で溶解させた。混合
液を湿気から防ぎ、０℃で２時間攪拌し次いで過剰の臭
化水素を減らしながら包囲温度に暖めておいた。３時間
後溶媒をアスピレーター真空下除去した。蒸発残渣をジ
クロロメタンの２×１０ｍｌ定分部で連続して処理し、
アスピレーター真空下蒸発させた。最後に残留油を臭化
水素の強い臭気がもはや明白でなくなるまで高真空下で
乾燥した。生成した物質を直接アルキル化反応に用いる
ことができた。ＣＤＣｌ_３溶液のプロトン磁気共鳴スペ
クトルはＡｃＯＣＨ_２からＢｒＣＨ_２Ｏまでの変化を表
わす適当な低磁場（ｄｏｗｎｆｉｅｌｄ）シフトを示し
た。

【００２０】実施例５ クロロメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエー
テル 塩化メチレン４５ｍｌ中アセトキシメチル１，３−ジア
セトキシ−２−プロピルエーテル４．３４ｇ（１７．５
ミリモル）溶液を室温でＨＣｌの緩かな流れが通過する
ように攪拌した。２時間後ＨＣｌ流れを除去した。フラ
スコに栓をし、室温で一晩攪拌しておいた。次にフラス
コを２５〜３０゜で水浴中に置き、溶液をＮ_２の流れで
パージし、過剰のＨＣｌのほとんどを除去した。残存す
る溶液を回転蒸発によつて濃縮した。ＨＣｌの痕跡量を
除去するために残留油をトルエンに取り、高真空下室温
で濃縮した。この方法を３回以上繰り返した。室温で真
空乾燥後無色の残留油の収量は３．８３ｇ（９７％）で
あつた。ＮＭＲスペクトルは生成物に完全に転化したこ
とを示した。

【００２１】実施例６ ２−アセタミド−９−（１，３−ジアセトキシ−２−プ
ロポキシメチル）ピオキサンチン グアニン２．５７ｇ（１８ミリモル）、硫酸アンモニウ
ム１．８ｇおよびヘキサメチルジシラザン１２６ｍｌの
混合液をＮ_２下還で攪拌した。固体を徐々に溶解した。
２日後溶液を冷却し、高真空下で濃縮した。粘性の残留
油を乾燥トルエン約２８ｍｌに溶解し、Ｎ_２下で維持し
て乾燥トルエン１２ｍｌ中クロロメチル−１，３−ジア
セトキシ−２−プロピルエーテル５ｇ（２２．３ミリモ
ル）溶液を添加した。成溶液をＮ_２下還流で１．５時間
加熱した。次いで冷却し、濃縮し、真空下で乾燥した。
粘性の橙色残留油を水３０ｍｌおよび重炭酸ナトリウム
飽和溶液３０ｍｌで処理した。混合液を蒸気浴上で５分
間暖めながら振盪し、その間に残渣が凝固した。冷却後
固体をフイルターで収集し、少量の水で洗浄した。この
クリーム色の固体（４．６ｇ）はＴＬＣ（８０：２０：
２ ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ−Ｈ_２Ｏ）でシングルスポツ
トを示したが、ＮＭＲは７−アルキル化異性体１０〜１
５％さらに所望の９−異性体を含有することを示した。
物質を他の作業からの同様の物質０．６ｇと混和し、酢
酸無水物１８４ｍｌに懸濁させた。混合液を９７。゜で
１８時間加熱し、その時間によつて固体のほとんどすべ
てが溶解し、そしてＴＬＣが完全なアセチル化を示し
た。反応を冷却し、真空下で濃縮した。塩化メチレン２
００ｍｌで残渣を処理して固体を生成し、▲ろ▼過によ
つて分離し、塩化メチレンで１回洗浄した。塩化メチレ
ンで再結晶して純粋な９−異性体０．５５ｇを生成し
た。▲ろ▼液をシリカゲル４０ｇを含有するカラムを通
過させた。ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨで溶離して部分精製
した生成物４．５ｇを生成した。塩化メチレン（約４５
ｍｌ）で再結晶させて純粋な９−異性体３．０ｇを得
た。

【００２２】実施例７ ９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン グアニン５０．０ｇ（０．３３モル）、硫酸アンモニウ
ム３３ｇおよびヘキサメチルジシラザン２．２ｌの混合
液をＮ_２下還流で３日間攪拌し、その間に固体の全部が
溶解した。次いで溶媒を減圧下蒸留で除去した。極めて
粘性の橙色の残留油をＮ_２下アセトキシメチル１，３−
ジアセトキシ−２−プロピルエーテル８４ｇ（０．３４
モル）を添加し、フラスコの底に第二液相を生成した。
フラスコは蒸留アダプターを備えており、混合液を低真
空下油浴中で１３５゜に加熱した。数分続く誘導期間の
後沸騰が始まり、まもなくかなり激しくなる。トリメチ
ルシリルアセテート（あらゆる残渣のヘキサメチルジシ
ラザンとともに）の蒸留は最初急速に進行するが３０分
後におそくなつた。２時間後混合液を９０％ ＥｔＯＨ
１．３ｌに添加した。混合液を沸騰するまで加熱し、分
離したゴム様物質が扱いやすい固体に変形するまで維持
した。固体（ほとんど独占的にグアニンからなる８．２
ｇ）を熱しながら▲ろ▼過によつて除去した。▲ろ▼液
を一晩放置し、橙褐色ゴムを分離した。上澄をゴムから
傾瀉し、▲ろ▼過し次に少量に濃縮した。濃縮時に分離
した固体をフイルターに集め、Ｈ_２Ｏで次にＥｔＯＨ
で洗浄してクリーム色の結晶１５．４ｇを生成した。Ｔ
ＬＣは部分側鎖脱アセチル化を示したがＮＭＲによつて
この物質は単独で９−アルキル化異性体であつた。物質
はさらに精製せずに脱保護に適当であつた。母液および
傾瀉によつて除去したゴムをさらに処理してさらに９−
および７−アルキル化異性体（部分的に脱アセチル化さ
れた）の変化比からなる生成物を生成した。これらの純
度の低い生成物はクロマトグラフイ精製（シリカゲル．
ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨで溶離）に先立つて十分にアセ
チル誘導体（０，０′，Ｎ^２−トリアセチル）に転化す
ることが好ましい。典型的なアセチル化条件は粗グアニ
ン誘導体１０ｇおよび酔酸無水物４００ｍｌの混合液を
９５〜１００゜で一晩攪拌することからなり、次に濃縮
およびクロマトグラフイ処理した。

【００２３】実施例８ ９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン１水和物２０５ｍｇ（０．７５ミリモル）酢酸
無水物１．５ｍｌ、乾燥ジメチルホルムアミド６ｍｌお
よび乾燥ピリジン１．５ｍｌの混合液を室温下乾燥管で
４日間攪拌した。次に混合液を Ｅｔ_２Ｏ １５ｍｌで
希釈した。固体をフイルターで集め、Ｅｔ_２Ｏで洗浄し
た。２−メトキシエタノールで再結晶した後、無色の結
晶＝１４９ｍｇ（５９％）ｍ．ｐ．２３９〜２４０゜を
生成した。物質はＴＬＣ（９：１ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯ
Ｈ）で均質であり、ＮＭＲは指定した構造を確認した。 分析（Ｃ_１３Ｈ_１７Ｎ_５Ｏ_６） 計算値：Ｃ４６．０１， Ｈ５．０５， Ｎ２０．６４ 測定値：Ｃ４５．７１， Ｈ５．０４， Ｎ２０．３６

【００２４】実施例９ ９−（１，３−ジプロピオニルオキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン１水和物２０５ｍｇ（０．７５ミリモル）、プ
ロピオン酸無水物１．５ｍｌ、乾燥ジメチルホルムアミ
ド６ｍｌおよび乾燥ピリジン１．５ｍｌの混合液を室温
において乾燥管で攪拌した。４日後混合液をエーテル２
５ｍｌで希釈した。固体をフイルターで集め、エーテル
で洗浄した。イソプロパノールで再結晶して白色結晶、
ｍ．ｐ．１９６〜１９７．５゜１３６ｍｇ（５０％）を
生成した。物質はＴＬＣ（９：１ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯ
Ｈ）でシングルスポツトとして進行し構造をＮＭＲによ
つて確認した。 分析（Ｃ_１５Ｈ_２１Ｎ_５Ｏ_６） 計算値：Ｃ４９．０４， Ｈ５．７６， Ｎ１９．０７ 測定値：Ｃ４８．９６， Ｈ５．８３， Ｎ１９．２６

【００２５】実施例１０ ９−（１−ヒドロキシ−３−オクタノイルオキシ−２−
プロポキシメチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド６ｍｌおよび乾燥ピリジン
１．５ｍ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン１水和物４１０ｍｇ（１．５ミリモ
ル）の懸濁液を氷浴中で冷却しながら乾燥管で攪拌し、
ジメチルホルムアミド１．５ｍｌ中オクタノイルクロラ
イド４８９ｍｇ（３．０ミリモル）溶液を約５分にわた
つて注射器で滴加した。混合液を室温に徐々に暖めてお
き、２４時間後高真空下で濃縮した。残留油を９枚の１
０００−μシルカゲルプレート（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ
５：１で展開）で分取用ＴＬＣによつて精製した。生
成物バンドを分離し、混合し、ジメチルホルムアミドで
抽出した。高真空下で抽出液を濃縮し、ゴム様残渣を生
成した。イソプロパノールで結晶化して物質を生成し、
再びフイルターでゴム様にした。しかしながらエーテル
で十分研和して微薄黄色結晶１０５ｍｇ（１８％）、
ｍ．ｐ．２０１．５〜２０３．５゜生成した。

【００２６】実施例１１ ９−（１，３−ジオクタノイルオキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド２．８ｍｌおよび乾燥ピリジ
ン０．７ｍｌ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン（水和物１３７ｍｇ（０．５モ
ル）の懸濁液を室温で攪拌し、オクタノイルクロライド
２４４ｍｇ（１．５ミリモル）を添加した。添加を緩か
な発熱によつて達成し、澄明溶液を得た。オクタノイル
クロライドをさらに８２ｍｇ（０．５ミリモル）を３．
５時間後添加した。最後に２１時間後、溶液を高真空下
で濃縮した。残渣を塩化メチレン５ｍｌおよび水５ｍｌ
に分配した。塩化メチレン相を硫酸マグネシウムで乾燥
し、▲ろ▼過し、濃縮して薄黄色の残留油を生成し、放
置の際凝固した。この物質を５枚の２０００−μシリカ
ゲルプレート（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ １２：１で展
開）で分取用ＴＬＣで精製した。生成物バンドを分離
し、メタノールで抽出した。抽出液を濃縮して得た残渣
をエーテル中に取り▲ろ▼過した。▲ろ▼液を蒸発して
次に高真空で乾燥して薄黄橙色の光沢のある残渣１６２
ｍｇ（６４％）を生成した。純度および構造をＴＬＣ
（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ １２：１）、ＮＭＲおよび質
量スペクトルで確認した。この化合物は用量レベル８７
５μｇ／１羽で全身に投与した場合鶏のひなのマイコプ
ラズマ増殖を７５％阻害した。実施例１２ ナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン環状モノホスフエート 無水トリエチルホスフエート６０ｍｌ中オキシ塩化リン
３．６ｇ（２．２ｍｌ、２３．６ミリモル）溶液中無水
９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン５．９１ｇ（２３．２ミリモル）懸濁液を室温
で５時間攪拌した。非常に清澄化した混合液を▲ろ▼過
し、▲ろ▼液を攪拌ヘキサン６００ｍｌに注入した。約
５分後上澄ヘキサンを沈殿生成物から傾瀉し、残渣をヘ
キサンの第二６００ｍｌ部と加熱した。上澄ヘキサンを
傾瀉し、残渣を真空内で乾燥した後、固体生成物１５．
９ｇを得た。固体を脱イオン水８００ｍｌに十分に溶解
し、濁つた混合液を５Ｎ水酸化カリウム、次に１Ｎ水酸
化カリウムでｐＨ７に滴定した。中和した混合液を▲ろ
▼過し、▲ろ▼液を凍結乾燥して生成物９．２５ｇを生
成した。凍結乾燥残渣の試料を０．０５ＭｐＨ６．６リ
ン酸塩緩衝液溶離を有するホワツトマンパーテイシル
^ＴＭＰＸＳ １０／２５ＳＡＸイオン交換カラムを用い
て高性能液体クロマトグラフイによつて分析した。生成
物は約４分、７分および９分の保持時間で３本のピーク
を示した。ナトリウムおよびカリウム９−（１，３−ジ
ヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式およ
び非環式モノホスフエートの確実な試料を本特許出願の
このおよび他の実施例で開示したように分離し上記の系
の高性能液体クロマトグラフイに委ねた後、環式モノホ
スフエートを約４分の保持時間でそして非環式ホスフエ
ートを約７分の保持時間で結合した。カリウム塩の凍結
乾燥混合液を脱イオン水１ｌに溶解し、ひだ付の▲ろ▼
紙で▲ろ▼過した。▲ろ▼液を重炭酸塩循環で２００〜
４００メツシユバイオラドＡＧ１−Ｘ８アニオン交換樹
脂４６０ｍｌの４〜５ｃｍ直径カラムに徐々に通過させ
た。次に０．０５Ｍおよび０．５Ｍ重炭酸カリウム２ｌ
を含有する勾配溶離容器から０．０５〜０．５Ｍ重炭酸
カリウムの勾配にカラムを通して注入し、留分約２０ｍ
ｌを８分間隔で収集した。留分１９ｌで溶離剤を０．５
Ｍ重炭酸カリウムに変え、試料２０〜２５ｍｌを６．８
分間隔で収集した。溶離パターンを２５２ｎｍにおける
紫外線吸収によつて監視し、種々の溶離ピークの特定の
成分留分をさらに０．０５ＭｐＨ６．６リン酸塩溶離を
用いるホワツトマンパーテイシル^ＴＭ ＰＸＳ１０／２
５ ＳＡＸイオン交換カラムの高性能液体クロマトグラ
フイによつて特徴付けた。これらのデータに基づいて特
定の留分を混和し、次の通り生成した。上記の高性能液
体クロマトグラフイ系において保持時間約５分でシング
ルピークによつて特徴付けられる留分４５０〜５４０
（１６８０ｍｌ）を混和し、酸循環で２００〜４００メ
ツシユバイオラドＡＧ５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂６
００ｍｌ（１０２０ミリ当量）で処理した。攪拌混合液
を適度の真空下保持して▲ろ▼過する前に二酸化炭素を
除去した。混合液を▲ろ▼過し樹脂を少量の脱イオン水
で洗浄した。混和した▲ろ▼液を真空内で約３５゜で１
５ｍｌに濃縮し、沈殿生成物を遊離の酸の形で▲ろ▼過
によつて分離し、真空内で乾燥して９−（１，３−ジヒ
ドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環状モノホ
スフエート４４５ｍｇを生成した。生成物は偏光の顕微
鏡により結晶性であり、２５２ｎｍ（ １０６００，０．
１Ｍ ｐＨ７リン酸塩中）で最大紫外線吸収を示し、放
出された構造に従つて十分に核磁気共鳴スペクトルを示
した。母液を濃縮して遊離酸形態の生成物をさらに４６
ｍｇを生成した。母液をｐＨ７に滴定し次に凍結乾燥し
てナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン環状モノホスフエート１９６ｍｇ
を生成した。後者の化合物は時々少量の水溶性無機塩で
汚染され、排除クロマトグラフイによつてまたはギ酸塩
サイクルでバイオラドＡＧ１−Ｘ８アニオン交換樹脂の
イオン交換クロマトグラフイによつて精製することがで
きる。純粋なナトリウム塩もまた次の通り結晶性遊離酸
の滴定によつて得ることができる。結晶性９−（１，３
−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式
モノホスフエート２１３ｍｇの懸濁液を１Ｎ水酸化ナト
リウムでｐＨ７に滴定し、凍結乾燥してナトリウム９−
（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グア
ニン環式モノホスフエート２２７ｍｇを生成した。この
生成物の乾燥した試料は２５２ｎｍで（０．１Ｍ ｐＨ
７ホスフエート中１１８００）紫外線吸収最大を有し
た。Ｄ_２Ｏ中環状生成物の２００ＭＨｚＮＭＲスペクト
ルはモノホスフオリル化で低磁場へシフトした２当量メ
チレンからのシグナルによつて特徴付けられる。スペク
トルを次のケミカルシフトによつて特徴付けられる。 δ３．９４ Ｏ−ＣＨ（−Ｃ）_２ ｍ １Ｈ
（ＪＨ，Ｈ ｇｅｍ１２．５Ｈｚ） δ４．２５ Ｐ−Ｏ−ＣＨ ｅｑ ｄ，ｄ，ｄ ２
Ｈ（ＪＰ−ＯＣＨ ｅｑ１９．５Ｈｚ）（ＪＨ，Ｈ ｖ
ｉｃｅｑ ２．２Ｈｚ）（ＪＨ，Ｈ ｇｅｍ １２．５
Ｈｚ） δ４．３９ Ｐ−ＯＣＨ_ａｘ ｄ，ｄ，ｄ ２Ｈ
（ＪＰ−ＯＣＨ ａｘ５．０Ｈｚ）（ＪＨ，Ｈ ｖｉｃ
ａｘ １．８ Ｈｚ） δ５．６４ Ｎ−ＣＨ_２Ｏ ｓ ２
Ｈ δ７．９９ Ｃ_８−Ｈ ｓ １
Ｈ さらに構造の確認はシフトの予測したパターンが ＯＣＨ（−Ｃ）_２ プロトン の照射でＰ−Ｏ−ＣＨ_２基に実現する時得られる。１０
〜１０００ｍＭ非緩衝ＫＨ_２ＰＯ_４の勾配を用いるヴア
リアンＡＸ−１０高性能液体クロマトグラフイアニオン
交換カラムにおいて環状生成物は保持時間４．３分を有
するが、酵素的に誘導された非環式モノホスフエートは
保持時間４．８分を有する。二つの混合物が上記の系の
ＨＰＬＣに委ねられる時非環式酵系性誘導モノホスフエ
ートから合成環式モノホスフエートをはつきりと分離す
ることができる。他方、環式モノホスフエートのナトリ
ウムまたはカリウム塩を結晶性遊離酸の分離をせずにバ
イオライドＡＧ１−Ｘ８重炭酸塩溶出留分から分離する
ことができる。０．５ＭＫＨＣＯ_３約８００ｍｌに達す
る留分の組合わせを酸循環の２００〜４００メツシユＡ
Ｇ５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂３２５ｍｌ（５５２ミ
リモル）で処理した。攪拌混合液を適度の真空下１５分
間維持して二酸化炭素を除去しそして▲ろ▼過した。▲
ろ▼液を約１００ｍｌ容量に濃縮し、次に１Ｎ水酸化ナ
トリウムでｐＨ７に滴定した。生成溶液を凍結乾燥して
少量の水溶性無機塩で汚染された環状リン酸塩のナトリ
ウム塩５２９ｍｇを生成した。生成物を脱塩するためナ
トリウム塩２００ｍｇを脱イオン水１．５ｍｌに溶解
し、ギ酸塩循環でバイオラド２００〜４００メツシユＡ
Ｇ１−Ｘ８アニオン交換樹脂６ｍｌの１．５ｃｍ直径カ
ラム装填した。脱イオン水約３５ｍｌをカラムに通過さ
せた後２Ｎギ酸アンモニウム溶液で溶離を開始した。
３．５ｍｌ容量の留分を３分間隔で集め、各留分の２５
０ｍｍにおける紫外線吸収を測定して管番号に対してプ
ロツトした。上記のプロツトで得られた曲線の形に基づ
いて留分１３〜２８を混和し、２００〜４００メツシユ
バイオライドＡＧ５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂１２０
ｍｌ（２０４ミリ当量）の２〜３ｃｍ直径カラムに装填
した。カラムを水で溶離し、留分１３．５ｍｌを４．５
分間隔で収集した。溶離パターンを紫外線吸収によつて
２５２ｎｍで監視し、プロツトに基づいて留分２２〜４
０を混和し、濃縮乾固した。残渣を脱イオン水１０ｍｌ
に取り、０．１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ７に滴定した。中和
した溶液を凍結乾燥してナトリウム９−（１，３−ジヒ
ドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式モノホ
スフエート１０６ｍｇを生成した。

【００２８】実施例１３ ニナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン非環式モノホスフエート 製造１ 対応する環式モノホスフエートを生成するためにオキシ
塩化リンでの９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニンのホスフオリル化において粗縮合
生成物をバイオライドＡＧ１−Ｘ８（ＣＯ_３ ^＝）のイオ
ン交換クロマトグラフイによつて精製した。環状モノホ
スフエートの製造の実施例で記載したように０．５Ｍ重
炭酸カリウムで溶離する過程で留分２４５〜２４８から
なる別のピークを分離し、対応する非環式化合物二カリ
ウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチ
ル）グアニン非環式モノホスフエートを含有することを
見出した。パーテイシル^ＴＭＰＸＳ１０／２５ＳＡＸ高
性能液体クロマトグラフイカラムおよび０．０５Ｍ ｐ
Ｈ６．６リン酸塩緩衝液での溶離を用いてこのピークは
保持時間約５および８分を有する物質を含有した。確実
な非環式モノホスフエートを同一系の保持時間７〜８分
と結合した。１０〜４００ｍＭ非緩衝ＫＨ_２ＰＯ_４で勾
配溶離を用いるヴアリアンＡｘ−１０高性能液体クロマ
トグラフイアニオン交換カラムでのこの混和留分の分析
は物質の約４０％が二カリウム９−（１，３−ジヒドロ
キシ−２−プロポキシメチル）グアニン非環式モノホス
フエートであることを示した。製造２ ５Ｎ水酸化ナトリウム４ｍｌ中ナトリウム９−（１，３
−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式
モノホスフエート４４．５ｍｇ溶液を５５〜６０℃で窒
素下で８時間加熱した。反応混合液を脱イオン水で１２
ｍｌ容量に希釈し、スルホン酸循環のパイオライドＡＧ
５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂の３０ｍｌ（直径２ｃｍ
×長さ１２ｃｍ）カラムにゆつくりと通過させた。カラ
ムを脱イオン水で溶離し、留分５ｍｌを４分間隔で収集
した。留分６０を収集した後、留分１２ｍｌを４分毎に
集めた。種々の留分を２５２ｎｍにおける紫外線吸収に
よつておよび０．０５ＭｐＨ６．６リン酸塩緩衝溶離を
用いるパーテイシヤル^ＴＭＰＸＳ１０／２５ＳＡＸアニ
オン交換カラムの高性能液体クロマトグラフイによつて
も評価した。独占的に約７．５分の保持時間を有する物
質からなる留分４５〜６４を混和し、０．１Ｎ水酸化ナ
トリウムでｐＨ７に滴定し、次に凍結乾燥してニナトリ
ウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチ
ル）グアニン非環式モノホスフエート３０ｍｇを生成し
た。酸化デユーテリウム中生成物の２００ＭＨｚ核磁気
スペクトルは非環式モノホスフエート構造と完全に一致
する。 分析Ｃ_９Ｈ_１２Ｎ_５Ｏ_７ＰＮａ_２（３７９．１９）に対
する計算値，Ｎ１８．４７， Ｃ２８．５１， Ｈ３．
１９， Ｐ８．１７， Ｎａ１２．１３．測定値，Ｎ１
８．０７， Ｃ２８．６７， Ｈ３．３６， Ｐ８．５
１，Ｎａ１１．９０．（原子吸収による）．λ ｍａｘ
２５２ｎｍ， ε９６００（０．１ＭｐＨ７リン酸
塩）

【００２９】実施例１４ ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン
１．４ｍｌ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン１水和物２７３ｍｇ（１．０ミリ
モル）の懸濁液を氷浴で冷却しながら窒素下で攪拌し、
ジメチルホルムアミド１．６ｍｌ中フエノキシアセチル
クロライド５５２μｌ（６８２ｍｇ，４ミリモル）溶液
を１０分間にわたつて隔膜を通して注射器で滴加した。
氷が融解した後混合液を室温に徐々に暖めておいた。薄
黄色溶液を得た。１５時間後溶液を高真空下緩かに暖め
ながら濃縮した。金色の残留油をシリカゲルカラム（勾
配溶離ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ ９８：２〜ＣＨ_２Ｃｌ
_２−ＭｅＯＨ９２：８）でクロマトグラフイ処理した。
ほとんど純粋な生成物を含有する留分を混和し、濃縮し
て油を生成し、エーテル−アセトンで研和した際凝固し
た。少量のアセトニトリルで再結晶して白色結晶１１４
ｍｇ，ｍ．ｐ．１１４〜１１６゜を生成した。構造およ
び純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ）
によつて確認した。第二生成物６６ｍｇを母液から得
た。 分析（Ｃ_２５Ｈ_２５Ｎ_５Ｏ_８）Ｃ_２５Ｈ_２５Ｎ_５Ｏ_８・
Ｈ_２Ｏ９３．５％＋無機６．５％に対する 計算値： Ｃ５１．８４， Ｈ４．７０， Ｎ１２．０
９ 測定値： Ｃ５１．９４， Ｈ４．７４， Ｎ１１．９
９

【００３０】実施例１５ ９−（２，３−ジベンゾイルオキシ−１−プロポキシメ
チル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン
１．４ｍｌ中水化９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プ
ロポキシメチル）グアニン（１ミリモル）の懸濁液を窒
素下氷浴で攪拌し、ジメチルホルムアミド１．６ｍｌ中
塩化ベンゾイル（４ミリモル）溶液を滴加した。混合液
を室温に徐々に暖めておいた。一晩攪拌した後溶液を高
真空で濃縮した。残渣をシリカゲル（ＣＨ_２Ｃｌ_２−Ｍ
ｅＯＨで溶離）でクロマトグラフイ処理して生成物を得
た。構造および純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３
−ＭｅＯＨ ９：１）で確認した。

【００３１】実施例１６ ９−（１，３−ジイソバレリルオキシ−２−プロポキジ
メチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン
１．４ｍｌ中水化９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プ
ロポキシメチル）グアニン（１ミリモル）の懸濁液を氷
浴で窒累下攪拌し、ジメチルホルムアミド１．６ｍｌ中
イソパレリルクロライド（４ミリモル）浴液を滴加し
た。室温に徐々に暖めた後混合液を一晩攪拌した。生成
溶液を緩かに暖めながら高真空下で蒸発させた。シリカ
ゲル（ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨで溶離）で残渣をクロマ
トグラフイ処理して生成物を生成した。構造および純度
をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ ９：
１）で確認した。

【００３２】実施例１７ ９−〔１，３−ビス（フエニルアセトキシ）−２−プロ
ポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン（実施例１４）に用いた操作
に従つて９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン（１ミリモル）をフエニルアセチルク
ロライド（４ミリモル）と反応させて化合物を製造し
た。クロマトグラフイ処理した後ＮＭＲおよびＴＬＣ
（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ ９：１）によつて生成物を特
徴付けた。

【００３３】実施例１８ ９−〔１，３−ビス（１０−ウンデセノイルオキシ）−
２−プロポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン（実施例１４）に用いた方法
に従つて水化９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン（１ミリモル）を１０−ウンデセ
ノイルクロライド（４ミリモル）と反応させて化合物を
製造した。クロマトグラフイ処理後生成物を得た。構造
および純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯ
Ｈ ９：１）によつて確認した。

【００３４】実施例１９ ９−〔１，３−ビス（メトキシアセトキシ）−２−プロ
ポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン（実施例（１４）に用いた方
法に従つて水化９−（１．５−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン（１ミリモル）をメトキシアセ
チルクロライド（４ミリモル）と反応させて、クロマト
グラフイ処理後所望の生成物を生成した。構造および純
度の確認をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ
９：１）によつて得た。

【００３５】実施例２０ ９−〔１，３−ビス（イミダゾール−１−イルカルボニ
ルオキシ）−２−プロポキシメチル〕−グアニン ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン１水和物５５ｍｇ（０．２ミリモル）、１，
１′−カルボニルジイミダゾール１３０ｍｇ（０．８ミ
リモル）および乾燥ジメチルホルムアミド２ｍｌを窒素
下９５〜１００゜で１．５時間攪拌し、その時に澄明溶
液を得次に生成物を沈殿させた。冷却後沈殿をフイルタ
ーで集め、ジメチルホルムアミドで次にアセトンで洗浄
して白色結晶、ｍ．ｐ．２５２〜２５３゜分解、３７ｍ
ｇを生成した。ＮＭＲスペクトルは指定された構造と一
致した。 分析（Ｃ_１７Ｈ_１７Ｎ_９Ｏ_６） 計算値： Ｃ４６．０５， Ｈ３．８７， Ｎ２８．４
３ 測定値： Ｃ４５．６８， Ｈ３．９０， Ｎ２８．１
８

【００３６】実施例２１ ２５℃におけるｐＨ７．２緩衝液の比較溶解度 約０．１５モルリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．２）中に過剰
量の化合物を懸濁させ水浴に２５℃で一晩振盪させて飽
和溶液を生成することによつて溶解度を定量した。▲ろ
▼過した溶液中の化合物濃度を分光測光測定即ち飽和溶
液に対するλｍａｘ における紫外線吸光度と公知の化
合物濃度に対して観察された吸光度値との比較に基づい
て計算した。結果は次の通り要約された。

【００３７】実施例２２ ヘルペスウイルス誘発チミジンキナーゼによる式Ｉおよ
び式ＩＩの化合物およびアシクログアノシンのホスフオ
リル化 ５０％ジメチルスルホキサイド（ＤＭＳＯ）３）μｇに
溶解した式Ｉの化合物３０μｇを５０ｍＭトリス−ＨＣ
ｌ緩衝液、ｐＨ７．５，２．５ｍＭアデノシントリホス
フエート、２．５ｍＭ塩化マグネシウム、７．５ｍＭホ
スフオクレアチン、クレアテンキナーゼ２単位、２ｍＭ
ジチオスレイトール、２．５ｍＭフツ化ナトリウム、牛
の血清アルブミンおよびチミジンキナーゼ０．００１４
単位と最終容量１５０μｌで３時間培養し、ＣＨＥＮＧ
＆ ＯＳＴＲＮＤＥＲの方法（ジヤーナルオブパイオ
ロジカルケミストリ，１９７６年、第２５１巻、第２６
０５頁）によつて感染後８時間取り入れた重複度１０
（１細胞につき１０ウイルス粒子）でウイルス感染Ｈｅ
Ｌａ細胞（ＨＳＶ１ ウイルス）から分離した。両方と
も５０％ＤＭＳＯ中の一つが式ＩＩの化合物３０μｇお
よび他がアシクログアノシン３０μｇを含有する二つの
類似の混合液を同様に処理した。５０％ＤＭＳＯ３０μ
ｌだけを含有し坑ウイルス化合物のないほかは上記と類
似の４番目の混合液もまたコントロールとして同様に処
理した。３時間の培養期間の終りに各混合液の１０μｌ
試料をＡｘ−１０カラムおよびリン酸カリウム（ＫＨ_２
ＰＯ_４）勾配溶離（０．０１〜１．０Ｍ）を用いるＨＲ
ＬＣによつて分析した。各抗ウイルス化合物のモノホス
フエート誘導体の量を各クロマトグラフイピークの面積
の総和によつて評価した。結果はアシクログアノシン１
６％がモノホスフエート誘導体に転化する一方式Ｉの化
合物９０％および式ＩＩの化合物９５％が同一条件下で
各モノホスフエートに転化することを示した。そこで培
養混合液の残りにグアノシンモノホスフエートキナーゼ
０．０４単位およびＨＳＶ１−感染ＨｅＬａ細胞の抽出
物２０ｌ〔細胞は重複度１０でウイルスに感染し８時間
後に取り入れた。それらを０．３５Ｍ ＫＨ_２ＰＯ_４，
ｐＨ７．５，０．５ｍＭ ジチオスレイトール０．２％
ポリオキシエチレン（９）オクチルフエノール（ノニデ
ツトＰ−４０），１４％グリセロール５０ｍｇ／ｍｌ溶
液に懸濁させ４゜で３０分後１００，０００ｇで遠心分
離した。上澄液は粗生成物であつた。〕を添加した。培
養を３０゜で４時間以上続け、その後ＨＰＬＣで分析
し、各化合物のトリホスフエート誘導体量を各々クロマ
トグラフイピークの面積の総和によつて定量した。結果
は式Ｉの化合物５５％および式ＩＩの化合物９３％が各
々トリホスフエート誘導体に転化するのに比較されるよ
うにアシクログアノシン３０％がこれらの条件下でトリ
ホスフエートに転化したことを示した。ホスフオリル化
がこれらの化合物の抗ウイルス作用に対する前要件であ
ると推定されることから式Ｉおよび式ＩＩの化合物のモ
ノホスフエートおよびトリホスフエート誘導体へのホス
フオリル化のより高い割合がアシクログアノシンにまさ
るかなりの改良を示す。

【００３８】実施例２３ 式ＩＩの化合物の非環式モノホスフエートの酵素調製 式ＩＩの化合物（２５ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリ
ン酸カリウム緩衝液、牛の血清アルブミン、１ｍｇ／ｍ
ｌ、アデノシントリホスフエート、５ｍＭ、塩化マグネ
シウム、５ｍＭ，ジチオスレイトール、１ｍＭ，ホスフ
オクレアチン、１ｍＭ，クレアチンキナーゼ、１２．５
単位／ｍｌ、フツ化ナトリウム、２．５ｍＭおよび精製
ＨＳＶ１−誘導チミジンキナーゼ５００単位を全容量１
０ｍｌで含有する混合液で３７゜で培養した。反応の進
行を高性能液体クロマトグラフイ（ＨＰＬＣ）によつて
監視した。化合物ＩＩの３５％がモノホスフエートに転
化した時、反応を終結した。生成物を分取用アニオン交
換カラム（ＡＸ−１０，ウアリアン）のＨＰＬＣクロマ
トグラフイで精製し、溶離溶媒としてトリエチルアンモ
ニウムカーボネツトｐＨ７．６を有するジエチルアミノ
エチルセルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフイによ
つて脱塩した。生成物を含有するプールした留分から溶
媒を凍結乾燥して式ＩＩモノホスフエートの化合物８ｍ
ｇを生成し、その純度を分析ＨＰＬＣによつて確認し
た。

【００３９】実施例２４ 式ＩＩの化合物のジホスフエートの酵素調製 式ＩＩの化合物（２０ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリ
ン酸塩緩衝液、牛の血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌ、アデ
ノシンホスフエート５ｍＭ，塩化マグネシウム５ｍＭ，
ジチオスレイトール１ｍＭ，ホスフオクレアチン１ｍ
Ｍ，クレアチンキナーゼ１２．５単位／ｍｌ，フツ化ナ
トリウム２．５ｍＭ，精製ＨＳＶ１誘導チミジンキナー
ゼ５００単位および豚の脳からのグアノシンモノホスフ
エートキナーゼ１００μｇを含有する１０ｍｌ混合液中
３７°で培養した。反応の進行を高性能液体クロマトグ
ラフイ（ＨＰＬＣ）で監視した。培養を３７°で４時間
および３７゜で２０時間続けた。ピロホスフエート生成
物を分取用アニオン交換カラム（ＡＸ−１０ヴアリア
ン）のＨＰＬＣクロマトグラフイで精製し、溶離剤とし
てトリエチルアンモニウムカーボネツトｐＨ７．６を有
するジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）のク
ロマトグラフイによつて脱塩した。生成物を含有するプ
ールした留分から凍結乾燥して式ＩＩジオスフエート化
合物１０ｍｇを生成し、その純度を分析ＨＰＬＣによつ
て確認した。

【００４０】実施例２５ 式ＩＩの化合物のジオスフエートの線状トリホスフエー
トへの酵素転化 実施例２３でのように調製した式ＩＩの化合物のジホス
フエート（５ｍｇ）をトリス−アセテート緩衝液、ｐＨ
７．６，５０ｍＭ，塩化マグネシウム，３ｍＭ，エチレ
ンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）１ｍＭ，リン酸カリウム
ｐＨ７．５，３０ｍＭ，ビルベート５ｍＭ，グリセラル
デヒドホスフエート，３０ｍＭ，乳酸脱水素酵素１５０
μｇ，グリセラルデヒドホスフエート脱水素酵素，１５
０μｇ，３−ホスフオグリセレートキナーゼ、１５０μ
ｇおよびニコチンアミドアデニンジスクレオチド（ＮＡ
Ｄ^＋）１５ｍＭを含有する５ｍｌ混合液中３７°で培養
した。反応の進行を高性能液体クロマトグラフイ（ＨＰ
ＬＣ）によつて監視した。培養を３７゜で４時間および
３０゜で２０時間続けた。生成物をアニオン交換カラム
（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬＣクロマトグラフ
イで分離し溶離溶媒としてトリエチルアンモニウムカー
ボネートｐＨ７．６を有するジエチルアミノエチルセル
ロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフイによつて脱塩し
た。生成物を含有するプールした留分を凍結乾燥して式
ＩＩの化合物のトリホスフエート４ｍｇを生成し、その
純度を分析ＨＰＬＣによつて確認した。

【００４１】実施例２６ 式ＩＩの化合物のトリホスフエートの酵素調製 式ＩＩの化合物（２０ｍｇ）をトリス−ＨＣｌ，ｐＨ
７．５，５０ｍＭ，塩化マグネシウム２．５ｍＭ，アデ
ノシン−５′−トリホスフエート，２．５ｍＭ，牛の血
清アルブミン５００ｍｇ／ｍｌ，ジチオスレイトール２
ｍＭ，ホスフオクレアチン７ｍＭ，クレアチンキナーゼ
１２．５単位／ｍｌ，フツ化ナトリウム２．５ｍＭ，Ｈ
ＳＶ１−誘導チミジンキナーゼ、４００単位およびグア
ノシンモノホスフエートキナーゼ８０μｇを含有する１
０ｍｌ混合液中３７゜で培養した。培養を３７゜で４時
間および３０゜で２０時間続けた。反応の進行を分析高
性能液体クロマトグラフイによつて監視した。生成物を
分取用アニオン交換カラム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）
のＨＰＬＣクロマトグラフイによつて分離し次に分析カ
ラム（ゾルバツクス−ＮＨ_２）で再クロマトグラフイ処
理して汚染ＡＴＰを除去した。生成物を溶離剤としてト
リエチルアンモニウムカーボネツトｐＨ７．６を有する
ジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）でクロマ
トグラフイ処理することによつて脱塩した。生成物を含
有するプールした留分を凍結乾燥して式ＩＩの化合物の
トリホスフエート誘導体１５ｍｇを生成し、その純度を
分析ＨＰＬＣによつて確認した。

【００４２】実施例２７ ウイルス・誘発チミジンキナーゼによるホスフオリル化
に対するチミジンおよびアシクログアノシンまたは式Ｉ
Ｉの化合物間の競争 （１） ５０％ＤＭＳＯ２０μｌに溶解したアシクログ
アノシン２０μｇを８０ｍＭトリス−ＨＣｌ，ｐＨ７．
５，４ｍＭアデノシントリホスフエート，４ｍＭ塩化マ
グネシウム，１．７ｍＭジチオスレイトール、１２．５
ｍＭホスフオクレアチン，５．０ｍＭフツ化ナトリウ
ム，１００μｇ牛の血清アルブミン、クレアチンキナー
ゼ２．５単位およびＨＳＶ１−感染ＨｅＬａ細胞から分
離した（実施例２２のように）チミジンキナーゼ０．０
０６単位を有する全量１２０μｌ（０．７５ｍＭ）で培
養した。培養を３７゜で２時間案施し、次に３０゜で１
８時間続けた。 （２） Ｎｏ．１の混合液と同一の成分と２．５ｍＭチ
ミジンを含有する第２混合液を同様の方法で培養した。 （３） アシクログアノシンを式ＩＩの化合物２０μｇ
で置き換えたほかはＮｏ．１の混合液と同一の成分を含
有する第３混合液を同様の方法で培養した。 （４） Ｎｏ．３の混合液と同一の成分と２．５ｍＭチ
ミジンを含有する第４混合液を同様の方法で培養した。 培養の終りに対応するモノホスフエート誘導体に転化し
た各抗ウイルス化合物量をＨＰＬＣ分析後クロマトグラ
フイピークの面積の総和によつて定量した（実施例２２
でのようなカラムおよび溶離条件）。４種の混合液での
培養の終りに存在するモノホスフエートの％は次の通り
である。 結果は式ＩＩの化合物がかなり過剰のケミジンの存在下
でさえウイルスチミジンキナーゼによつてオフフオリル
化されるがアシクログアノシンは同一条件下で全くホス
フオリル化されなかつたことを示した。オフフオリル化
がこれらの化合物の抗ウイルス作用に前要件であり、チ
ミジンが細胞の正常な成分であることから式ＩＩの化合
物はアシクログアノシンにまさる有効な改良を表わす。

【００４３】実施例２８ アシクログアノシンおよび式ＩＩの化合物と精製ウイル
スチミジンキナーゼとの比較 ｐＨ６．５の２２μモルＫＰＯ_４緩衝液、０．３μモル
ＭｇＣｌ_２，アデノシントリホスフエート０．５μモ
ル、牛の血清アルブミン１００μｇ，ＨＳＶ１−誘導チ
ミジンキナーゼ２０単位および式ＩＩの化合物またはグ
アニン環の８位に放射性炭素（１４Ｃ）で標示されたア
シクログアノシンの変化量の全量１００μｌに含有する
一連の混合液を３７゜で１５分間培養した。この時間の
終りに各管からの８０μｌ試料をジエチルアミノエチル
セルロース（ホワツトマンＤＥ８１）の円形▲ろ▼紙
（直径２．５ｃｍ）に塗布した。５分後水の入つたビー
カーに入れ水で１回、０．５ｍＭグアノシンを含有する
５０％エタノールで２回そして無水エタノールで１回連
続的に洗浄した。次にシンチレーシヨンヴアイアルに置
き、空気の流れで乾燥しシンチレーシヨン混合液（アク
アゾル２，ニユーイングランドスクレア）を添加した後
シンチレーシヨンカウンターで数えた。この操作によつ
てホスフオリル化化合物を洗い流し、ＤＥ８１フイルタ
ーにホスフオリル化誘導体だけが密着した。従つてカウ
ントされた放射能は基質、式ＩＩの化合物またはアシク
ログアノシンのウイルスチミジンキナーゼの作用による
ホスフオリル化誘導体への転化の程度であつた。背景放
射能に対する適当なコントロールは検定に包含され、結
果を訂正するために用いた。培養時間の終りに各検定管
に存在するホスフオリル化誘導体のモル数を各フイルタ
ーおよび検定混合液の各基質の特異活性（１モルにつき
１分当りの数）に対して測定した放射能のカウント数か
ら計算した。データを基質濃度に対する反応速度のグラ
フにプロツトした。第１図は実際の実験データに良好に
適合するコンピユーター発生理論曲線のグラフである。
基質としてチミジンでの同様の実験で得た曲線を比較の
ため第１図に包含する。二つの基質に対する運動パラメ
ーターを同一データから計算した。上記で記載したよう
に３種の別の実験を平均することによつて得た値は次の
通りであつた。 Ｖｍａｘ／Ｋｍ比は基質効率を比較するために最も普通
に用いられる規準であるがＨＳＶ１−誘発チミジンキナ
ーゼに対する基質として式ＩＩの化合物およびアシクロ
グアノシンの相対効率は４．２５〜０．１４または３０
〜１である。

【００４４】実施例２９ アシクログアノシンおよび式ＩＩの化合物と精製グアノ
シンモノホスフエートキナーゼとの運動パラメーターの
比較 ｐＨ７．６のトリス−アセテート緩衝液７０μモル、Ｋ
Ｃｌ ７０μモル，ＭｇＣｌ_２ ７μモル、ＡＴＰ２．
８μモル、ホスフオエノールピルベート１．０５μモ
ル、牛の血清アルブミン１７５μｇ，還元ニコチンアミ
ド−アデニンジスクレオチド（ＮＡＤＨ）０．１５μモ
ル、乳酸脱水素酵素３単位、ピルベートキナーゼ１．５
単位およびアシクログアノシンモノホスフエートまたは
式ＩＩの化合物のモノホスフエートの変化量を全量で７
００μｌを含有する一連の混合液を豚の脳（ポーエリン
カーマンハイム）からのグアノシンモノホスフエートキ
ナーゼとともに３４０ｎｍで酸光度を記録するカリイ分
光光度計のセルで２５゜において培養した。この結合し
た分光測光検定においてモノホスフエート基質の対応す
るジオスフエートのホスフオイル化の割合をＮＡＯＨの
３４０ｎｍにおける吸光度の減少から計算した。アシク
ログアノシンモノホスフエートは式ＩＩモノホスフエー
トの化合物よりキナーゼがかなり乏しい基質であるた
め、式ＩＩモノホスフエートの化合物の場合（０．００
５６単位）よりもアシクログアノシンモノホスフエート
の場合（０．２８単位）に多くの酵素を使用した。上記
の実験で得た開始速度を次の表で示される二つの基質の
運動パラメーターを計算するために用いた。デオキシグ
アノシンモノホスフエートに対して同様の実験で得たパ
ラメーターを比較のため包含した。 各ジオスフエートへ転化する酵素の基質として式ＩＩモ
ノホスフエートの化合物およびアシクログアノシンモノ
ホスフエートの相対効率は０．３２／０．０００６５ま
たは４９２〜１であつた。

【００４５】実施例３０ 式Ｉの化合物の非環式モノホスフエートの酵素調製 式Ｉの化合物（１ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸
カリウム緩衝液、牛の血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌ，ア
デノシントリホスフエート５ｍＭ、塩化マグネシウム５
ｍＭ，ジチオスレイトール１ｍＭ，ホスフオクレアチン
１ｍＭ，クレアチンキナーゼ１２．５単位／ｍｌ，フツ
化ナトリウム２．５ｍＭおよび精製ＨＳＶ１−誘発チミ
ジンキナーゼを含有する全量０．５ｍｌの混合液３７°
で培養した。反応の進行を高性能液体クロマトグラフイ
（ＨＰＬＣ）で監視した。式Ｉの化合物がモノホスフエ
ートに転化した時、反応が終結した。生成物を分取用ア
ニオン交換カラム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬ
Ｃクロマトグラフイで精製し、溶離溶媒としてトリエチ
ルアンモニウムカーボネートｐＨ７．６を有するジエチ
ルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラ
フイによつて脱塩した。生成物を含有するプールした留
分からの溶媒を凍結乾燥して化合物Ｉモノホスフエート
５００μｇを生成し、その純度を分析ＲＰＬＣで確認し
た。

【００４６】実施例３１ 試験管内細胞培養におけるウイルス感染の処理 数種の異なるウイルス感染を防御するのに有効な式Ｉ，
式ＩＩの化合物またはアシクログアニジンの最小濃度を
定量するために種々の細胞培養系において検定を行なつ
た。 ａ． 単純ヘルペスウイルス１および２型：ウイルスの
１０組織培養感染服用量（ＴＣＩＤ_５０）に感染したウ
サギの腎臓細胞単層の５０％のウイルス細胞変性の展開
を全体に抑制するために必要とされる式Ｉ式ＩＩまたは
アシログアノシンの化合物を添付の表に示す。３種の化
合物すべてが匹敵する活性を示した。 ｂ． 水痘−帯状疱疹ウイルス：式ＩＩの化合物および
アシクログアノシンの両方ともヒトの胎児の二倍体肺細
胞，ＭＲＣ−５の単層を用いるプラク減少検定によつて
定量したようにこのヘルペスウイルスに対して同様に活
性であつた。結果を添付の表に示す。 ｃ． エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）：ＥＢＶ
−感染臍帯細胞（Ｂリンパ球）を感染時から式ＩＩの化
合物１〜５μｇ／ｍｌで連続処理して正常リンパ球の連
続増殖リンパ球細胞への転換阻害を生じた。反対に同様
の活性を示すためにアシクログアノシン１０〜１００μ
ｇ／ｍｌを必要とした。 ｄ． サイトメガロウイルス：式ＩＩの化合物０．１〜
０．６μｇ／ｍｌを用いるＭＲＣ−５細胞単層のサイト
メガロウイルスプラク生成を抑制するのに有効であつ
た。アシクログアノシンを用いて等価プラク抑制（５０
％）を得るために２，２〜１７．７μｇ／ｍｌを必要と
した。アシクログアノシン（９５％（Ｉ）に対する式Ｉ
Ｉの化合物の計算された平均相対効力は２８．６であつ
た。結果を添付の表に示す。 ＮＤ−未実施 ａ −初代ウサギの腎臓細胞培養の管希釈検定 ｂ −ヒトのＭＲＣ−５細胞単層のプラク減少検定 ｃ −ヒトの臍帯リンパ球転換検定 ｄ −ヒトのＭＲＣ−５細胞単層のプラク減少検定

【００４７】実施例３ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染治療 ２０ｇＩＣＲ／Ｈａマウスに単純ヘルペスウイルスＩ型
（ＨＳＶ−１）スクーラー菌株の保存製剤１０^−５希釈
０．５ｍｌを腹腔内（ｉｐ）に注射した。このウイルス
攻撃を約１００ＬＤ_５０で各動物に感染させた。ウイル
ス感染後直ちに開始し毎日２回４日間続け各動物にアシ
クログアノシン５００μｇ，１２５μｇまたは３１μ
ｇ，式Ｉの化合物５００μｇ，１２５μｇ，または３１
μｇ，式ＩＩの化合物５００μｇ，１２μｇまたは３１
μｇまたはプラセボー（生理食塩水，ｐＨ１１．５）を
１５のグループに皮下注射した。プラセボーグループは
４５匹の動物から構成された。化合物はすべて生理食塩
水ｐＨ１１．５に溶解した。マウスを１５日間毎日同じ
時間に観察し、死亡の日を各動物に対して記録した。 統計的分析（参照：リデル，Ｆ．Ｄ．Ｋ．１９７８年，
Ｅｖａｌｕｔｉｏｎｏｆ Ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ Ｃ
ｈａｌｌｅｎｇｅ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．第４２巻，第２３７〜２４９頁）
を負の指数転換によつて転換される生存時間によつて行
なつた。 ｆ_（ｔ）＝１−（０．１）^ｔ／Ｔ 式中ｔ＝動物が生存した日数 Ｔ＝試験期間（１５日）
連続補正を毎日の観察を説明するために用いた。 ｆｃ（ｔ）＝１／２〔ｆ（ｔ）＋ｆ（ｔ−１）〕 各グループの中で試験期間を通じて生存するマウスを
０．９および１．０の数値を同様に指定して試験の停止
を調節した。１グループ当り平均生存時間を次の通り平
均補正転換生存時間〔ｆｃ（ｔ））から計算した。 ｔ平均＝〔Ｔ／ｌｏｇ（０．１）〕．〔ｌｏｇ（１−ｆ
ｃ（ｔ）〕 要約した結果を次の表に示す。 ＊ １５日目に定量した ＊＊ プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない
数値（Ｐ＜０．０５）

【００４８】実施例３３ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療 各動物にアシクログアノシン１０００μｇ，５００μｇ
または１２５μｇ，式Ｉの化合物５００μｇ，１２５μ
ｇまたは３１μｇ，式ＩＩの化合物５００μｇ，１２５
μｇ，３１μｇ，８μｇまたは２μｇまたはプラセボー
を１５のグループに毎日２回皮下注射した以外は実施例
３２に記載した実験を繰り返した。１０００μｇ服用量
アシクログアノシン治療グループおよび式ＩＩの化合物
の５００μｇ服用量治療グループは各１０匹の動物で構
成された。要約した結果を次の表に示す。 ＊ １５日目に定量した ＊＊プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない数
値（Ｐ＜０．０５） 実施例３２および３３からの組合わせた結果を用いて式
Ｉの化合物および式ＩＩの化合物のアシクログアノシン
（９５％ＣＩ）に対する計算平均相対効力は各々９．２
および２８７．０であつた。

【００４９】実施例３４ 次は単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ１）および２型
（ＨＳＶ２）に対するカリウム９−（１，３−ジヒドロ
キシ−２−プロポキシメチル）グアニン環状モノホスフ
エートの試験管内および生体内抗ウイルス作用の概要で
ある。試験管内検定 ：方法 ： ウサギの腎臓の初代細胞培養の融合単層を試験
化合物の系列希釈を含有する細胞維持培養液で再供給
し、３７゜で一晩培養した。各希釈において４培養を約
１０ ＴＣＩＤ_５０ＨＳＶ１で攻撃し、４培養を約１０
ＴＣＩＤ_５０ＨＳＶ２で攻撃しそして２培養を毒性コ
ントロールとして残した。培養を３７°で再培養し５日
および７日目にウイルス誘発細胞変性を観察した。結果 ： 生体内検定：方法 ： ２０ｇＩＣＲ／Ｈａマウスに腹腔内経路でＨ３
Ｖ１（スクーラー菌株）の約１００致死量（１００ＬＤ
_５０）を感染させた。１０匹の感染した動物のグループ
にカリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン環状モノホスフエートの最終日用量
５０，１２．５，３．１，０．８，０．２，０．０５お
よび０．０１２５ｍｇ／ｋｇで皮下注射することによつ
て感染後直ちに始めて４日間毎日２回治療した。マウス
を１５日間同じ時間に毎日観察し、死亡の日を各動物に
対して記録した。平均生存時間（日）および１５日間に
おける生存％を添付の表に示す。 ＊ プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない数
値（Ｐ＜０．０５）生存時間に対して計算した。 結論：カリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン環式モノホスフエートは試験管
内および生体内で単純ヘルペスウイルスに対して有効な
抗ウイルス作用を示した。

【００５０】実施例３５ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療 ：単純ペルペス１型腹腔内感染、経口治療 ＩＣＲ／Ｈａマウスを実施例３２で記載した通り感染さ
せた。１０匹の感染動物のグループを感染後直ちに始め
るアシクログアノジン１００，５０，１２，５，３，１
または０．８ｍｇ／ｋｇまたは式ＩＩの化合物５０，１
２．５，３，１，０．８または０．２ｍｇ／ｋｇの最終
日用量の経口摂食によつて７日間毎日２回治療した。さ
らに５匹の非感染動物の２グループを最終日用量５０ｍ
ｇ／ｋｇの経口摂食によつて７日間毎日２回アシクログ
アノシンまたは式ＩＩの化合物で治療した。これらの動
物を毒性コントロールとして扱つた。要約した結果を次
の表に示す。マウスの単純ヘルペスウイルスＩ型腹腔内
感染の経口治療 ＊ １３日目に定量した。 ＊＊プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない数
値（Ｐ＜０．０５）、生存時間に対してのみ計算した。 式ＩＩの化合物での治療は５０，１２．５，３，１およ
び０．８ｍｇ／ｋｇ日用量でプラセボー処理動物に比較
して統計的に有効な生存時間の延長を生じる。アシクロ
グアノシン治療は１００および５０ｍｇ／ｋｇ日用量だ
けでプラセボー処理動物に比較して統計的に有効な生存
時間の延長を生じる。式ＩＩの化合物５０ｍｇ／ｋｇで
治療した動物全部が試験に残つた。５０および１２．５
ｍｇ／ｋｇ治療グループの生存はプラセボー処理クルー
プより統計的に有効な長さであつた。反対にアシクログ
アノシン治療グループはいずれも生存の延長を示さなか
つた。アシクログアニジンに対する式ＩＩの化合物の相
対効力は５０．３であり統計的に有効であつた。試験動
物の最終重量によつて測定されるようにアシクログアノ
シンまたは式ＩＩ化合物治療グループに明白な毒性は見
られなかつた。

【００５１】実施例３６ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染治療：単純ヘ
ルペスウイルス２型膣感染、経口治療 ３０ｇＩＣＲ／Ｈａ雌のマウスに膣内経路によつて単純
ヘルペスウイルス２型（カーチス菌株）１０ＬＤ_５０以
上を感染させた。１０匹の動物のグループを感染後直ち
に始めて５０，１２．５，３，１，０．８または０．２
ｍｇ／ｋｇの最終日用量のアシクログアノシンまたは式
ＩＩの化合物を用いて経口摂食で１０日間毎日２回治療
した。感染までの平均日数および生存平均日数を各グル
ープに対して定量し感染したプラセボー治療グループと
比較した。要約した結果を次の表に示す。マウスの単純ヘルペスウイルスＩＩ型膣感染の経口的治
療 ＊ １９日目に定量した。 ＊＊プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない数
値（Ｐ＜０．０５），生存時間に対してのみ計算した。 ５０ｍｇまたは１２．５ｍｇ／ｋｇの式ＩＩの化合物で
治療した全動物がテストに生き残り、５０，１２．５お
よび３．１ｍｇ／ｋｇ式ＩＩの化合物の治療グループの
生存率がプラセボー治療グループに比較して統計的に有
効に増加した。反対に５０ｍｇ／ｋｇアシクログアノシ
ン治療グループだけが統計的に有効な増加した生存を示
した。５０，１２．５，３，１および０．８ｍｇ／ｋｇ
の式ＩＩの化合物がプラセボー治療感染動物に比較して
生存時間に統計的に有効な増大を生じた。５０および１
２．５ｍｇ／ｋｇのアシクログアノシンが同様に有効で
あつた。生存によつて測定されるようにアシクログアノ
シンに対する式ＩＩの化合物の相対効力は２８．１であ
り、統計的に有効であつた。５０ｍｇ／ｋｇの式ＩＩの
化合物で治療した動物はすべてテスト期間中庖疹性感染
の徴候がないままであつた。５０ｍｇ／ｋｇおよび１
２．５ｍｇ／ｋｇ両方の式ＩＩの化合物およびアシクロ
グアノシンはプラセボー治療動物に比較して感染までの
（膣病巣および／または麻痺の進行）日数に統計的に有
効な増加を生じた。感染までの時間で測定される式ＩＩ
の化合物のアシクログアノシンに対する相対効力は４．
１４であり、統計的に有効であつた。

【００５２】実施例３７ マウスにおける単純ヘルペスウイルスの治療：単純ヘル
ペスウイルス１型口・顔面（Ｏｒｏｆａｃｉａｌ）感
染、経口治療 ２０ｇのＨＲＳ（無毛）マウスに単純ヘルペスウイルス
１型（Ｓ菌株）をすりむいた口・顔面範囲に感染させ
た。各々１０匹の感染した動物からなるグループをアシ
クログアノシンに対して５０，１２．５，３，１および
０．８ｍｇ／ｋｇおよび式ＩＩの化合物に対して５０，
１２．５，３，１，０．８および０．２ｍｇ／ｋｇの最
終日用量を用いて感染後３時間から始めて７日間毎日２
回経口摂食によつて治療した。感染開始７日後に口・顔
面範囲の病変進行の程度を０（病変なし）から４（完全
な鼻より大きい病変）の度合で測定した。病変の頻度お
よび平均病変の評点を添付の表および第２図に示す。式
ＩＩの化合物の治療は病変進行の程度によつて測定され
る場合、プラセボー治療感染動物に比較して使用した全
濃度において統計的に有効な防御を生じた。アシクログ
アノシン治療は５０および１２．５ｍｇ／ｋｇ服用量だ
け統計的に有効な防御を生じた。式ＩＩの化合物の治療
は病変の頻度によつて測定される場合プラセボー治療感
染動物の頻度に比較して５０および１２．５ｍｇ／ｋｇ
で統計的に有効な防御を生じた。反対にアシクログアノ
シン治療は５０ｍｇ／ｋｇでだけ統計的に有効な防御を
生じた。アシクログアノシンに対する式ＩＩの化合物の
相対効力は６．９であり、統計的に有効であつた。 ａ 病変頻度を０（病変なし）から４（完全な顔面積よ
り大きい変変）までの度合でこの表に示される平均病変
評点で測定した。 ＊＊ 治療した動物のそれと統計的に異ならない数値
（Ｐ＜０．０５）病変頻度および重さを顔面感染後７日
間定量した。

【００５３】実施例３８ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療：単純
ヘルペスウイルス１型口・顔面感染経口治療 ２０ＨＲＳ（無毛）マウスに単純ヘルペスウイルス１型
（Ｓ菌株）をすりむいた口・顔面範囲に感染させた。 ａ． １０匹の感染した動物のグループを感染後３，
８，１２，２４，４８，７２または９６時間に始めて１
２．５ｍｇ／ｋｇ／日の式ＩＩの化合物で７日までの間
に経口摂食で毎日２回治療した。 ｂ． 第二実験ではアシクログアノシンの治療効能を同
様の方法で評価した。１０匹の感染した動物のグループ
を感染後３，８，１２，２４，４８，７２または９６時
間で開始して１２．５ｍｇ／ｋｇ／日のアシクログアノ
シンで７日までの間に経口摂食で毎日２回治療した。感
染開始後７日において口・顔面範囲の病変進行の程度を
０（病変なし）から４（完全な鼻より重い病変）の度合
で測定した。平均病変評点を添付の表に示す。ＨＳＶ−
１で感染後７２時間ほど遅く始めて式ＩＩの化合物を受
ける感染マウスはプラセボーを受けるマウスよりも統計
的に有効な低い病変評点を示した。反対にアシクログア
ノシン治療に対して感染３時間後に始める治療を受ける
マウスだけがプラセボーグループより病変評点が統計的
に異なつた。さらに感染８，１２および２４時間後に始
める式ＩＩの化合物を受ける感染マウスはプラセボーを
受けるマウスより統計的に有効な低い頻度の病変進行を
有した。アシクログアノシン治療グループはいずれも各
プラセボー治療動物より有効な低い頻度の病変を有しな
かつた。マウスの単純ヘルペスウイルスＩ型口・顔面感染の経口
的治療 ａ 経口的治療を感染開始後指示された時間に始め、７
日間毎日２回吸用し続けた。病変頻度および重さは口・
顔面感染後７日間定量した。 ｂ 病変の重さを０（病変なし）から４（完全な口・顔
面範囲より大きい病変）の度合でこの表に示される平均
病変評点で測定した。 ＊＊プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならない数
値（Ｐ＜０．０５）

【００５４】式ＩおよびＩＩの化合物のホスフエート誘
導体の製造方法 式ＩおよびＩＩの化合物のモノおよびポリホスフエート
はトリエチルホスフエートのような適当な非プロトン性
溶媒中式ＩまたはＩＩの化合物をホスフオリルクロライ
ドのようなホスフオリル化剤と反応させ、生成した中間
体を水または塩基で処理することによつて化学的に製造
することができる。この反応の多量の生成物は式Ｉまた
はＩＩの環式ホスフエートであるが、非環式モノおよび
ジホスフエートもまた製造される。生成物比は作用物質
の量または治療の長さおよび温度の変化によつて変える
ことができる。炭化水素非極性溶媒で沈殿し、アルコー
ルで急冷することによつてホスフオリル化中間体を分離
することも都合がよい。この反応の生成物は塩基性水性
処理が使用されるかされないかに依存してアルキルホス
フオトリエステルまたはアルキルホスフオジエステルで
あることができる。式ＩおよびＩＩの化合物のホスフオ
リル化誘導体〔即ちモノ−線状シ−（ピロホスフエー
ト）または線状トリホスフエート〕もまた式ＩまたはＩ
Ｉの化合物をＨＳＶ１チミジンキナーゼ（モノホスフエ
ートを製造するために）で、さらにグアノシンモノホス
フエートキナーゼ（ピロホスフエートを製造するため
に）で、そしてさらに３−ホスフオグリセレートキナー
ゼ（トリホスフエートを製造するために）で処理するこ
とによつて酸素的に製造することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は濃度に対するホスフオリル化反応速度曲線を示
すものである。第２図はＨＳＶ−１感染マウスをアシク
ログアノシンまたは式ＩＩの化合物で治療する結果を示
す棒グラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ａ６１Ｋ 31/52 ＡＤＹ 7252−4Ｃ 31/675 8314−4Ｃ (72)発明者 ジョン デー．カーカス アメリカ合衆国．10027 ニューヨーク. ニューヨーク．ウエスト ワンハンドレッ ドシックスティーンス ストリート 404 (72)発明者 アーサー ケー．フィールド アメリカ合衆国．19454 ペンシルヴァニ ア．ノース ウエールズ．メドウブルック ロード 376 (72)発明者 リチャード エル．トルマン アメリカ合衆国．07060 ニュージャーシ ィ．ウォーレン．アッパー ウォーレン ウェイ 29

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式： 【化１】 （式中、（ｉ）Ｒ^１またはＲ^２の少なくとも一方が−Ｃ
   （Ｏ）Ｒ^３であり、かつ他方はＨ、でありそしてＲ^８は
   −Ｃ（Ｏ）Ｒ^３であり、または（ｉｉ）Ｒ^１またはＲ^２
   の少なくとも一方が 【化２】 であり他方がＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^３また 【化３】 であるか、またはＯＲ^１及びＯＲ^２が一緒になって 【化４】 であり、そしてＲ^８はＨまたは−Ｃ（Ｏ）Ｒ^３である。
   ただしＲ^１がＨであり、かつＲ^２−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であ
   り、かつＲ^８が−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であるときを除く。Ｒ
   ^３はＨ、直鎖または分枝鎖、飽和またはモノ−またはポ
   リ不飽和であることができる１〜２０個の炭素原子を有
   するアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクリ
   ル、アラルキル、アルコキシアルキルまたはアリールオ
   キシアルキルである。Ｒ^４およびＲ^５は各々Ｈ、医薬的
   に使用し得るカチオン、直鎖又は分枝鎖であることがで
   きる１〜８個の炭素原子を有するアルキル、アリール、
   アラルキル、ホスフェートまたはビロホスフェートであ
   る。）を有する化合物。
2. 【請求項２】ＯＲ^１およびＯＲ^２が一緒になって 【化５】 である特許請求の範囲第１ 項記載の化合物。
3. 【請求項３】式： 【化６】 （式中Ｒ^６は−ＣＨ_２ＯＨまたは−ＣＨ_２ＯＣ（＝Ｏ）
   Ｒ^３でありＲ^７は−ＣＨ_２ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^３でありおよ
   びＲ^８はＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３である。）を有する特許
   請求の範囲第１ 項記載の化合物。
4. 【請求項４】式 【化７】 （式中、Ｒ^６がＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^７がＣ
   Ｈ_２ＯＣ（Ｏ）Ｒ^３である場合、Ｒ^８は−Ｃ（Ｏ）Ｒ^３
   であり、Ｒ^３３は直鎖又は分枝鎖、飽和又はモノ−又は
   ポリ不飽和であることができる１〜２０個の炭素原子を
   有するアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシク
   リル、アラルキル、アルコキシアルキル又はアリールオ
   キシアルキルである。）の化合物を脱アシル化すること
   を特徴とする式ＩＩ： 【化８】 （式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^８は各々Ｈである。）の化
   合物の製造方法。
5. 【請求項５】式ＩＩ： 【化９】 （式中 Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^８は各々Ｈである）の化合
   物をホスフォリル化剤と反応させ、生成した中間体を水
   または１〜８個の炭素原子を有するアルカノールで処理
   することを特徴とする式ＩＩ： 【化１０】 （式中Ｒ^１およびＲ^２の一方が 【化１１】 で他方が、Ｈであるか、又はＲ^１およびＲ^２が 【化１２】 であるかまたはＯＲ^１およびＯＲ^２が一緒になって 【化１３】 であり、（Ｒ^４およびＲ^５は各々Ｈ、医薬的に使用し得
   るカチオン、直鎖又は分枝鎖であることができる１〜８
   個の炭素原子を有するアルキル、アリール、アラルキ
   ル、ホスフェート又はビロフォスフェートである）、Ｒ
   ^８がＨである）の化合物の製造方法。
6. 【請求項６】ホスフォリル化剤がＰＯＸ_３（式中Ｘはハ
   ロゲンである）である特許請求の範囲第５項記載の方
   法。
7. 【請求項７】ＨＳＶ１チミジンキナーゼおよびアデノシ
   ントリホスフェートの存在下で式ＩＩ： 【化１４】 （式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^８は各々Ｈである）の化合
   物を培養することを特徴とする式ＩＩ： 【化１５】 （式中Ｒ^１またはＲ^２の一つは 【化１６】 であり他はＨであるかまたはＯＲ^１およびＯＲ^２が一緒
   になって 【化１７】 であり（Ｒ^４およびＲ^５５は各々Ｈ、医薬的に使用し得
   るカチオン、直鎖又は分枝鎖であることができる１〜８
   個の炭素原子を有するアルキル、アリール、アラルキル
   である。）、Ｒ^８がＨである）の化合物の製造方法。
8. 【請求項８】ＨＳＶ１チミジンキナーセおよびアデノシ
   ントリホスフェートおよびグアノシンモノホスフェート
   キナーゼの存在下で式ＩＩ： 【化１８】 （式中、 Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^８は各々Ｈである）の化
   合物を培養することを特徴とする式ＩＩ： 【化１９】 （式中Ｒ^１およびＲ^２２の少なくとも１つが 【化２０】 であり残りはＨであるかまたはＯＲ^１およびＯＲ^２が一
   緒になって 【化２１】 であり、Ｒ^４またはＲ^５の一つはホスフェートであり他
   はＨ、医薬的に使用し得るカチオン、直鎖又は分枝鎖で
   あることができる１〜８個の炭素原子を有するアルキ
   ル、アリール、アラルキルまたはホスフェートであ
   る）、Ｒ^８がＨである）の化合物の製造方法。
9. 【請求項９】ＨＳＶ１チミジンキナーゼ、アデノシント
   リホスフェート、グアノシンモノホスフェートキナーゼ
   およびＨＳＶ１−感染細胞の抽出液の存在下で式ＩＩ： 【化２２】 （式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^８は各々Ｈである）の化合
   物を培養することを特徴とする式ＩＩ： 【化２３】 （式中Ｒ^１またはＲ^２の一つは 【化２４】 であり他はＨである、またはＯＲ^１およびＯＲ^２が一緒
   になって 【化２５】 であり（Ｒ^４またはＲ^５の一つはピロホスフェートであ
   り他方はＨ、医薬的に使用し得るカチオン、直鎖又は分
   枝鎖であることができる１〜８個の炭素原子を有するア
   ルキル、アリール、アラルキルである。）、Ｒ^８がＨで
   ある）の化合物の製造方法。
10. 【請求項１０】３′−ホスフォグリセレートキナーゼ、
    ３−ホスフォグリセリルアルデヒド脱水素酵素および３
    −ホスフォグリセリルアルデヒドと式ＩＩ： 【化２６】 （式中Ｒ^１１またはＲ^２の一つは 【化２７】 であり他方はＨであり、そしてＲ^４はホスフェートであ
    り、そしてＲ^８はＨである（Ｒ^５はＨ、医薬的に使用し
    得るカチオン、直鎖又は分枝鎖であることができる１〜
    ８個の炭素原子を有するアルキル、アリール、アラルキ
    ルである。））の化合物を培養することを特徴とする式
    ＩＩ： 【化２８】 （式中Ｒ^１またはＲ^２の一つは 【化２９】 であり、Ｒ^８はＨであり、（Ｒ^５はＨ、医薬的に使用し
    得るカチオン、直鎖又は分枝鎖であることができる１〜
    ８個の炭素原子を有するアルキル、アリール、アラルキ
    ルである。）他はＨである、そしてＲ^４はピロホスフェ
    ートである）の化合物の製造方法。