JPH05276949A - ヒトｖｎｔｒ配列およびその用途 - Google Patents
ヒトｖｎｔｒ配列およびその用途Info
- Publication number
- JPH05276949A JPH05276949A JP35948291A JP35948291A JPH05276949A JP H05276949 A JPH05276949 A JP H05276949A JP 35948291 A JP35948291 A JP 35948291A JP 35948291 A JP35948291 A JP 35948291A JP H05276949 A JPH05276949 A JP H05276949A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alleles
- human
- present
- rsai
- psti
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 制限断片長多型を示す新規なＶＮＴＲ配列を
提供すること。 【構成】 ヒト６番染色体のｐ２１．３の位置に存在
し、ＰｓｔＩ及びＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＰｓｔＩにおいて３．５ｋｂから２．８ｋｂの間に
少なくとも７個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおい
て１．８ｋｂから１．２ｋｂの間に少なくとも６個の対
立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列を含む８種類の新
規なヒトＶＮＴＲ配列及びプローブを提供した。
提供すること。 【構成】 ヒト６番染色体のｐ２１．３の位置に存在
し、ＰｓｔＩ及びＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＰｓｔＩにおいて３．５ｋｂから２．８ｋｂの間に
少なくとも７個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおい
て１．８ｋｂから１．２ｋｂの間に少なくとも６個の対
立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列を含む８種類の新
規なヒトＶＮＴＲ配列及びプローブを提供した。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ヒトＶＮＴＲ配列及び
その用途に関する。本発明のヒトＶＮＴＲ配列は、親子
鑑定や犯罪捜査等における個人識別に利用することがで
きる。
その用途に関する。本発明のヒトＶＮＴＲ配列は、親子
鑑定や犯罪捜査等における個人識別に利用することがで
きる。
【０００２】
【従来の技術】染色体ＤＮＡは生物種ごとに固有の塩基
配列を持つが、詳細に見ると同一種内でも固体間でわず
かに違いが見られる。これはＤＮＡ多型と呼ばれるが、
この多型が制限酵素の認識部位に出現した場合には制限
酵素による切断断片の大きさ（長さ）の違いとしてサザ
ンブロット法等により容易に検出することができるの
で、特に制限断片長多型（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆ
ｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉ
ｓｍ、ＲＦＬＰ）と呼ばれる。従って、この制限断片長
多型を利用して、個人の識別が可能であり、親子鑑定や
犯罪捜査における個人識別に利用されている。動物ＤＮ
Ａのタンパク質非コード領域中には、繰り返し頻度が変
化し易い直列型繰り返し配列が存在する。この配列を含
む制限断片は繰り返し配列の反復回数の違いにより、制
限断片長の多型を示す。この型のものはＶＮＴＲ（ｖａ
ｒｉａｂｌｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔａｎｄｅｍ ｒ
ｅｐｅａｔ）と呼ばれ（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５，１６
１６（１９８７））、個人識別などのＤＮＡ診断におい
て有力なマーカーとなっている。従来よりマーカーとし
て利用できる制限断片長多型を示すＶＮＴＲは多数知ら
れているが、同時利用できるマーカーの数が増えれば、
それだけ検査の精度は高まるので有効である。
配列を持つが、詳細に見ると同一種内でも固体間でわず
かに違いが見られる。これはＤＮＡ多型と呼ばれるが、
この多型が制限酵素の認識部位に出現した場合には制限
酵素による切断断片の大きさ（長さ）の違いとしてサザ
ンブロット法等により容易に検出することができるの
で、特に制限断片長多型（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆ
ｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉ
ｓｍ、ＲＦＬＰ）と呼ばれる。従って、この制限断片長
多型を利用して、個人の識別が可能であり、親子鑑定や
犯罪捜査における個人識別に利用されている。動物ＤＮ
Ａのタンパク質非コード領域中には、繰り返し頻度が変
化し易い直列型繰り返し配列が存在する。この配列を含
む制限断片は繰り返し配列の反復回数の違いにより、制
限断片長の多型を示す。この型のものはＶＮＴＲ（ｖａ
ｒｉａｂｌｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔａｎｄｅｍ ｒ
ｅｐｅａｔ）と呼ばれ（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５，１６
１６（１９８７））、個人識別などのＤＮＡ診断におい
て有力なマーカーとなっている。従来よりマーカーとし
て利用できる制限断片長多型を示すＶＮＴＲは多数知ら
れているが、同時利用できるマーカーの数が増えれば、
それだけ検査の精度は高まるので有効である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、制限断片長多型を示す新規なＶＮＴＲ配列を提供す
ることである。
は、制限断片長多型を示す新規なＶＮＴＲ配列を提供す
ることである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意研
究の結果、ヒトの第６染色体中にＲＦＬＰを示す新規な
ＶＮＴＲ配列を見出し、本発明を完成した。
究の結果、ヒトの第６染色体中にＲＦＬＰを示す新規な
ＶＮＴＲ配列を見出し、本発明を完成した。
【０００５】すなわち本発明は、ヒト６番染色体のｐ２
１．３の位置に存在し、ＰｓｔＩ、及びＰｖｕIIにより
制限断片長多型を示し、ＰｓｔＩにおいて３．５ｋｂか
ら、２．８ｋｂの間に少なくとも７個の対立遺伝子が存
在し、ＰｖｕIIにおいて１．８ｋｂから１．２ｋｂの間
に少くとも６個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配
列（以下、ｃＣＩ６−７と呼ぶことがある）を提供す
る。
１．３の位置に存在し、ＰｓｔＩ、及びＰｖｕIIにより
制限断片長多型を示し、ＰｓｔＩにおいて３．５ｋｂか
ら、２．８ｋｂの間に少なくとも７個の対立遺伝子が存
在し、ＰｖｕIIにおいて１．８ｋｂから１．２ｋｂの間
に少くとも６個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配
列（以下、ｃＣＩ６−７と呼ぶことがある）を提供す
る。
【０００６】また本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７の
位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＴａｑＩ、ＰｓｔＩ、Ｐｖｕ
IIにより制限断片長多型を示し、ＭｓｐＩにおいて、
１．４ｋｂから０．６ｋｂの間に少くとも７個の対立遺
伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて２．３ｋｂから２．１
ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子が存在し、Ｐｓｔ
Ｉにおいて２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも７
個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおいて２．０ｋｂ
から１．３ｋｂの間に少くとも８個の対立遺伝子が存在
するヒトＶＮＴＲ配列（以下、ｃＣＩ６−１３と呼ぶこ
とがある）を提供する。
位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＴａｑＩ、ＰｓｔＩ、Ｐｖｕ
IIにより制限断片長多型を示し、ＭｓｐＩにおいて、
１．４ｋｂから０．６ｋｂの間に少くとも７個の対立遺
伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて２．３ｋｂから２．１
ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子が存在し、Ｐｓｔ
Ｉにおいて２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも７
個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおいて２．０ｋｂ
から１．３ｋｂの間に少くとも８個の対立遺伝子が存在
するヒトＶＮＴＲ配列（以下、ｃＣＩ６−１３と呼ぶこ
とがある）を提供する。
【０００７】また、本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７
の位置に存在し、ＴａｑＩ、ＲｓａＩ、ＰｓｔＩ、Ｐｖ
ｕIIにより制限断片長多型を示しＴａｑＩにおいて２．
１ｋｂから１．６ｋｂの間に少なくとも３個の対立遺伝
子が存在し、ＲｓａＩにおいて３．１ｋｂから２．４ｋ
ｂの間に少なくとも４個の対立遺伝子が存在し、Ｐｓｔ
Ｉにおいて２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも３
個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおいて１．５ｋｂ
から０．８ｋｂの間に少くとも３個の対立遺伝子が存在
するヒトＶＮＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−２４と呼ぶこと
がある）を提供する。
の位置に存在し、ＴａｑＩ、ＲｓａＩ、ＰｓｔＩ、Ｐｖ
ｕIIにより制限断片長多型を示しＴａｑＩにおいて２．
１ｋｂから１．６ｋｂの間に少なくとも３個の対立遺伝
子が存在し、ＲｓａＩにおいて３．１ｋｂから２．４ｋ
ｂの間に少なくとも４個の対立遺伝子が存在し、Ｐｓｔ
Ｉにおいて２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも３
個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおいて１．５ｋｂ
から０．８ｋｂの間に少くとも３個の対立遺伝子が存在
するヒトＶＮＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−２４と呼ぶこと
がある）を提供する。
【０００８】また、本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｂｇ
ｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＭｓｐＩにおいて４．４ｋｂから２．６ｋｂの間に
少くとも６個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて
５．２ｋｂから３．０ｋｂの間に少くとも６個の対立遺
伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて５．０ｋｂから３．０
ｋｂの間に少くとも７個の対立遺伝子が存在し、Ｂｇｌ
IIにおいて１０ｋｂから３．０ｋｂの間に少くとも４個
の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて、６．０ｋｂ
から３．０ｋｂの間に少くとも８個の対立遺伝子が存在
し、ＰｖｕIIにおいて５．０ｋｂから３．３ｋｂの間に
少くとも５個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列
（以下ｃＣＩ６−４９と呼ぶことがある）を提供する。
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｂｇ
ｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＭｓｐＩにおいて４．４ｋｂから２．６ｋｂの間に
少くとも６個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて
５．２ｋｂから３．０ｋｂの間に少くとも６個の対立遺
伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて５．０ｋｂから３．０
ｋｂの間に少くとも７個の対立遺伝子が存在し、Ｂｇｌ
IIにおいて１０ｋｂから３．０ｋｂの間に少くとも４個
の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて、６．０ｋｂ
から３．０ｋｂの間に少くとも８個の対立遺伝子が存在
し、ＰｖｕIIにおいて５．０ｋｂから３．３ｋｂの間に
少くとも５個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列
（以下ｃＣＩ６−４９と呼ぶことがある）を提供する。
【０００９】また、本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｐｓ
ｔＩにより制限断片長多型を示しＭｓｐＩにおいて４．
２ｋｂから２．３ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子
が存在し、ＲｓａＩにおいて３．０ｋｂから２．２ｋｂ
の間に少くとも４個の対立遺伝子が存在し、ＴａｑＩに
おいて１０ｋｂから６．０ｋｂの間に少くとも５個の対
立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて６．０ｋｂから
４．３ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子が存在する
ヒトＮＶＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−７８と呼ぶことがあ
る）を提供する。
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｐｓ
ｔＩにより制限断片長多型を示しＭｓｐＩにおいて４．
２ｋｂから２．３ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子
が存在し、ＲｓａＩにおいて３．０ｋｂから２．２ｋｂ
の間に少くとも４個の対立遺伝子が存在し、ＴａｑＩに
おいて１０ｋｂから６．０ｋｂの間に少くとも５個の対
立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて６．０ｋｂから
４．３ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子が存在する
ヒトＮＶＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−７８と呼ぶことがあ
る）を提供する。
【００１０】また本発明は、ヒト６番染色体のｑ２６の
位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｐｓｔ
Ｉにより制限断片長多型を示しＭｓｐＩにおいて２．５
ｋｂから１．８ｋｂの間に少くとも５個の対立遺伝子が
存在し、ＲｓａＩにおいて、１．５ｋｂから１．３ｋｂ
の間に少くとも３個の対立遺伝子が存在し、ＴａｑＩに
おいて１．８ｋｂから１．３ｋｂの間に少くとも５個の
対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて１．５ｋｂから
１．１ｋｂの間に少くとも７個の対立遺伝子が存在する
ヒトＶＮＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−９１と呼ぶことがあ
る）を提供する。
位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｐｓｔ
Ｉにより制限断片長多型を示しＭｓｐＩにおいて２．５
ｋｂから１．８ｋｂの間に少くとも５個の対立遺伝子が
存在し、ＲｓａＩにおいて、１．５ｋｂから１．３ｋｂ
の間に少くとも３個の対立遺伝子が存在し、ＴａｑＩに
おいて１．８ｋｂから１．３ｋｂの間に少くとも５個の
対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて１．５ｋｂから
１．１ｋｂの間に少くとも７個の対立遺伝子が存在する
ヒトＶＮＴＲ配列（以下ｃＣＩ６−９１と呼ぶことがあ
る）を提供する。
【００１１】また、本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７
の位置に存在しＭｓｐＩ、ＲｓａＩにおいて制限断片長
多型を示しＭｓｐＩにより１０ｋｂから４．０ｋｂの間
に少くとも６個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおい
て７．０ｋｂから５．５ｋｂの間に少くとも４個の対立
遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列（以下、ｃＣＩ６−
１０７と呼ぶことがある）を提供する。
の位置に存在しＭｓｐＩ、ＲｓａＩにおいて制限断片長
多型を示しＭｓｐＩにより１０ｋｂから４．０ｋｂの間
に少くとも６個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおい
て７．０ｋｂから５．５ｋｂの間に少くとも４個の対立
遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列（以下、ｃＣＩ６−
１０７と呼ぶことがある）を提供する。
【００１２】また、本発明は、ヒト６番染色体のｑ２７
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｂｇ
ｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＭｓｐＩにより４．４ｋｂから１．８ｋｂの間に少
くとも９個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて
５．５ｋｂから１．７ｋｂの間に少くとも１１個の対立
遺伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて８．５ｋｂから２．
６ｋｂの間に少くとも１２個の対立遺伝子が存在し、Ｂ
ｇｌIIにおいて１０ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも
１２個の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて５．２
ｋｂから０．５ｋｂの間に少くとも１１個の対立遺伝子
が存在し、ＰｖｕIIにおいて１０ｋｂから２．３ｋｂの
間に少くとも１０個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴ
Ｒ配列（以下、ｃＣＩ６−１１１と呼ぶことがある）を
提供する。
の位置に存在し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、Ｂｇ
ｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＭｓｐＩにより４．４ｋｂから１．８ｋｂの間に少
くとも９個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて
５．５ｋｂから１．７ｋｂの間に少くとも１１個の対立
遺伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて８．５ｋｂから２．
６ｋｂの間に少くとも１２個の対立遺伝子が存在し、Ｂ
ｇｌIIにおいて１０ｋｂから２．１ｋｂの間に少くとも
１２個の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて５．２
ｋｂから０．５ｋｂの間に少くとも１１個の対立遺伝子
が存在し、ＰｖｕIIにおいて１０ｋｂから２．３ｋｂの
間に少くとも１０個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴ
Ｒ配列（以下、ｃＣＩ６−１１１と呼ぶことがある）を
提供する。
【００１３】さらに、本発明は、上記本発明のヒトＶＮ
ＴＲ配列を有するプローブを提供する。
ＴＲ配列を有するプローブを提供する。
【００１４】上述のように、本発明は、上記した各特徴
を有するｃＣＩ６−７、ｃＣＩ６−１３、ｃＣＩ６−２
４、ｃＣＩ６−４９、ｃＣＩ６−７８、ｃＣＩ６−９
１、ｃＣＩ６−１０７及びｃＣＩ６−１１１の８種類の
ヒトＶＮＴＲ配列を提供したものである。
を有するｃＣＩ６−７、ｃＣＩ６−１３、ｃＣＩ６−２
４、ｃＣＩ６−４９、ｃＣＩ６−７８、ｃＣＩ６−９
１、ｃＣＩ６−１０７及びｃＣＩ６−１１１の８種類の
ヒトＶＮＴＲ配列を提供したものである。
【００１５】上記８種類のヒトＶＮＴＲ配列は、後述の
実施例において示すように、公知の方法（Ａｍ．Ｊ．Ｈ
ｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４８，２５８（１９９１）； Ｇｅ
ｎｏｍｉｃｓ ９，５３６（１９９１））により、ヒト
６番染色体を分析し、発見されたＶＮＴＲマーカーをク
ローニングして得られたものである。
実施例において示すように、公知の方法（Ａｍ．Ｊ．Ｈ
ｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４８，２５８（１９９１）； Ｇｅ
ｎｏｍｉｃｓ ９，５３６（１９９１））により、ヒト
６番染色体を分析し、発見されたＶＮＴＲマーカーをク
ローニングして得られたものである。
【００１６】本発明のヒトＶＮＴＲ配列は、そのＤＮＡ
鎖をプローブとして利用することにより固体識別等に用
いることができる。その利用方法は従来法と全く同様で
あり、該ＤＮＡ鎖に周知の方法により標識を付すことに
より、サザンブロット法におけるプローブとして利用で
きる。また試料を予め遺伝子増幅法により増幅し、この
ようにして増幅したＤＮＡを検出するプローブとしても
利用できる。
鎖をプローブとして利用することにより固体識別等に用
いることができる。その利用方法は従来法と全く同様で
あり、該ＤＮＡ鎖に周知の方法により標識を付すことに
より、サザンブロット法におけるプローブとして利用で
きる。また試料を予め遺伝子増幅法により増幅し、この
ようにして増幅したＤＮＡを検出するプローブとしても
利用できる。
【００１７】
【発明の効果】本発明により新規なヒトＶＮＴＲ配列が
提供された。本発明は、これをプローブとして使用する
ことにより、固体識別等を従来よりも高精度に行なうこ
とに寄与する。
提供された。本発明は、これをプローブとして使用する
ことにより、固体識別等を従来よりも高精度に行なうこ
とに寄与する。
【００１８】
【実施例】ヒト第６染色体のみを含むヒト×マウス雑種
細胞Ａ９（ｎｅｏ６／ｔ）よりＤＮＡを抽出し、制限酵
素Ｓａｕ３ＡＩにて部分的に切断した後、ショ糖密度勾
配遠心を行ない、３５−４２ｋｂ分画を分取した。３５
−４２ｋｂＤＮＡ断片は、Ｋｌｅｎｏｗ酵素を用い、ｄ
ＣＴＰ、ｄＴＴＰにて部分的に挿入した。
細胞Ａ９（ｎｅｏ６／ｔ）よりＤＮＡを抽出し、制限酵
素Ｓａｕ３ＡＩにて部分的に切断した後、ショ糖密度勾
配遠心を行ない、３５−４２ｋｂ分画を分取した。３５
−４２ｋｂＤＮＡ断片は、Ｋｌｅｎｏｗ酵素を用い、ｄ
ＣＴＰ、ｄＴＴＰにて部分的に挿入した。
【００１９】コスミドベクターはｐＷＥＸ１５を用い
た。これはｐＷＥ１５（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４，２１６０（１９８７））の
ＢａｍＨＩ部位をＫｌｅｎｏｗ酵素を用いて挿入した
後、リンカー（５´−ＣＣＴＣＧＣＧＡＧＧ−３´）を
用いて制限酵素ＸｈｏＩの認識部位に変換したものであ
る。ｐＷＥＸ１５は制限酵素ＸｈｏＩにて切断した後、
Ｋｌｅｎｏｗ酵素を用い、ｄＣＴＰ、ｄＴＴＰにて部分
的に挿入した。
た。これはｐＷＥ１５（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４，２１６０（１９８７））の
ＢａｍＨＩ部位をＫｌｅｎｏｗ酵素を用いて挿入した
後、リンカー（５´−ＣＣＴＣＧＣＧＡＧＧ−３´）を
用いて制限酵素ＸｈｏＩの認識部位に変換したものであ
る。ｐＷＥＸ１５は制限酵素ＸｈｏＩにて切断した後、
Ｋｌｅｎｏｗ酵素を用い、ｄＣＴＰ、ｄＴＴＰにて部分
的に挿入した。
【００２０】３５−４２ｋｂＤＮＡ断片とベクターＤＮ
Ａ（ｐＷＥＸ１５）を６６ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐ
Ｈ７．５）、６．６ｍＭ ＭｇＣｌ2 、０．１ｍＭ Ａ
ＴＰ、１０ｍＭ ＤＴＴ、Ｔ４ＤＮＡリガーゼ存在下１
６℃で１晩ライゲーションを行ないｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｔｓ （Ｇｉｇａｐ
ａｃｋ Ｇｏｌｄ）を用い、パッケージングを行なっ
た。
Ａ（ｐＷＥＸ１５）を６６ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐ
Ｈ７．５）、６．６ｍＭ ＭｇＣｌ2 、０．１ｍＭ Ａ
ＴＰ、１０ｍＭ ＤＴＴ、Ｔ４ＤＮＡリガーゼ存在下１
６℃で１晩ライゲーションを行ないｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｔｓ （Ｇｉｇａｐ
ａｃｋ Ｇｏｌｄ）を用い、パッケージングを行なっ
た。
【００２１】コスミドクローンを５０μｇ／ｍｌアンピ
シリンを含むＬＢアガープレート上に、１０−１５コロ
ニー／ｃｍ2 の密度になるように合計１６０，０００個
まいた。32Ｐ標識したヒトＤＮＡをプローブとしてコロ
ニーハイブリダイゼーションを行ない、ヒトＤＮＡを含
んでいるコロニーを選択し、９６穴マイクロプレートに
保存した。
シリンを含むＬＢアガープレート上に、１０−１５コロ
ニー／ｃｍ2 の密度になるように合計１６０，０００個
まいた。32Ｐ標識したヒトＤＮＡをプローブとしてコロ
ニーハイブリダイゼーションを行ない、ヒトＤＮＡを含
んでいるコロニーを選択し、９６穴マイクロプレートに
保存した。
【００２２】各々のコスミドクローンから自動プラスミ
ド抽出システム（ＰＩ−１００）を用いてＤＮＡ抽出し
た。このＤＮＡをｒａｎｄｏｍ ｈｅｘａｎｕｃｌｅｏ
ｔｉｄｅ−ｐｒｉｍｉｎｇ法（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．１３７，２６６（１９８４））にて32Ｐ標識し、プ
ローブとした。
ド抽出システム（ＰＩ−１００）を用いてＤＮＡ抽出し
た。このＤＮＡをｒａｎｄｏｍ ｈｅｘａｎｕｃｌｅｏ
ｔｉｄｅ−ｐｒｉｍｉｎｇ法（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．１３７，２６６（１９８４））にて32Ｐ標識し、プ
ローブとした。
【００２３】互いに無関係な６人のヒトより抽出したＤ
ＮＡを各々制限酵素ＭｓｐＩ、ＴａｑＩ、ＲｓａＩ、Ｂ
ｇｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにて切断し、サザンブロッ
トした。
ＮＡを各々制限酵素ＭｓｐＩ、ＴａｑＩ、ＲｓａＩ、Ｂ
ｇｌII、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにて切断し、サザンブロッ
トした。
【００２４】プレハイブリダイゼーションは１０％ＳＤ
Ｓ−７％ポリエチレングリコール（８０００）、２００
μｇ／ｍｌヒト胎盤ＤＮＡを含む溶液にて６５℃１晩行
なった。ハイブリダイゼーションは32Ｐ標識したＤＮＡ
プローブにて６５℃１６〜２４ｈｒ行なった。ハイブリ
ダイゼーション後、フィルターを０．１×ＳＳＣ−０．
１％ＳＤＳ溶液で６５℃２回洗浄後、Ｋｏｄａｋ ＸＡ
Ｒフィルムを用い、オートラジオグラフィーを行なっ
た。
Ｓ−７％ポリエチレングリコール（８０００）、２００
μｇ／ｍｌヒト胎盤ＤＮＡを含む溶液にて６５℃１晩行
なった。ハイブリダイゼーションは32Ｐ標識したＤＮＡ
プローブにて６５℃１６〜２４ｈｒ行なった。ハイブリ
ダイゼーション後、フィルターを０．１×ＳＳＣ−０．
１％ＳＤＳ溶液で６５℃２回洗浄後、Ｋｏｄａｋ ＸＡ
Ｒフィルムを用い、オートラジオグラフィーを行なっ
た。
【００２５】ＲＦＬＰを示したコスミドクローンについ
ては、ビオチン標識プローブによる蛍光ｉｎ ｓｉｔｕ
ハイブリダイゼーションを行ない、染色体上の位置を決
定した。染色体標本は７０％ホルムアミド−２×ＳＳＣ
溶液中で７０℃２分間処理した後、７０％エタノール中
に入れ５分間、さらに１００％エタノール中に入れ５分
間静置し脱水した。
ては、ビオチン標識プローブによる蛍光ｉｎ ｓｉｔｕ
ハイブリダイゼーションを行ない、染色体上の位置を決
定した。染色体標本は７０％ホルムアミド−２×ＳＳＣ
溶液中で７０℃２分間処理した後、７０％エタノール中
に入れ５分間、さらに１００％エタノール中に入れ５分
間静置し脱水した。
【００２６】コスミドＤＮＡは、ニックトランスレーシ
ョンにより、ビオチン１６−ｄＵＴＰ標識した。超音波
処理したニシン精子ＤＮＡ、Ｅ．ｃｏｌｉ ｔＲＮＡを
各々２０μｇ加え、エタノール沈殿した後、ホルムアミ
ド溶液に溶解し、５−１０倍量のヒト胎盤ＤＮＡを加え
７５℃、１０分間変性した。ビオチン標識したプローブ
を染色体標本上に滴下し、３７℃で１晩ハイブリダイゼ
ーションを行なった。
ョンにより、ビオチン１６−ｄＵＴＰ標識した。超音波
処理したニシン精子ＤＮＡ、Ｅ．ｃｏｌｉ ｔＲＮＡを
各々２０μｇ加え、エタノール沈殿した後、ホルムアミ
ド溶液に溶解し、５−１０倍量のヒト胎盤ＤＮＡを加え
７５℃、１０分間変性した。ビオチン標識したプローブ
を染色体標本上に滴下し、３７℃で１晩ハイブリダイゼ
ーションを行なった。
【００２７】標本は５０％ホルムアミド−１×ＳＳＣ、
２×ＳＳＣで各々３７℃１回洗浄した後、１×ＳＳＣで
室温で１５分間洗浄した。４×ＳＳＣ、１５μｇＦＩＴ
Ｃ−アビジン／ｍｌ、１％ＢＳＡ溶液下、３７℃で４５
分間処理し、４×ＳＳＣ、４×ＳＳＣ−０．１％Ｔｒｉ
ｔｏｎＸ、４×ＳＳＣで各々１０分間室温で洗浄した。
２×ＳＳＣで各々３７℃１回洗浄した後、１×ＳＳＣで
室温で１５分間洗浄した。４×ＳＳＣ、１５μｇＦＩＴ
Ｃ−アビジン／ｍｌ、１％ＢＳＡ溶液下、３７℃で４５
分間処理し、４×ＳＳＣ、４×ＳＳＣ−０．１％Ｔｒｉ
ｔｏｎＸ、４×ＳＳＣで各々１０分間室温で洗浄した。
【００２８】標本はｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅ
処理した後、顕微鏡にて観察した。
処理した後、顕微鏡にて観察した。
【００２９】ＶＮＴＲを示したコスミドについては、Ｔ
７ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｐｈａｒｍａｃｉ
ａ）を用い、塩基配列の決定を行なった。
７ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｐｈａｒｍａｃｉ
ａ）を用い、塩基配列の決定を行なった。
【００３０】結果 ｃＣＩ６−７をプローブとしてハイブリダイズした時の
結果を図１に示した。ＰｓｔＩにおいては、３．５ｋｂ
から２．８ｋｂの間に７個の対立遺伝子が存在し、６例
中４例で異型接合性を示した。ＰｖｕIIにおいては１．
８ｋｂから１．２ｋｂの間に６個の対立遺伝子が存在
し、６例中５例で異型接合性を示した。
結果を図１に示した。ＰｓｔＩにおいては、３．５ｋｂ
から２．８ｋｂの間に７個の対立遺伝子が存在し、６例
中４例で異型接合性を示した。ＰｖｕIIにおいては１．
８ｋｂから１．２ｋｂの間に６個の対立遺伝子が存在
し、６例中５例で異型接合性を示した。
【００３１】ｃＣＩ６−１３をプローブとしてハイブリ
ダイズした時の結果を図２に示した。ＭｓｐＩにおいて
は１．４ｋｂから０．６ｋｂの間に７個の対立遺伝子が
存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＴａｑＩに
おいては２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に６個の対立遺
伝子が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。Ｐｓ
ｔＩにおては、２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に７個の
対立遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示し
た。ＰｖｕIIにおいては、２．０ｋｂから１．３ｋｂの
間に８個の対立遺伝子が存在し、６例中４例で異型接合
性を示した。
ダイズした時の結果を図２に示した。ＭｓｐＩにおいて
は１．４ｋｂから０．６ｋｂの間に７個の対立遺伝子が
存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＴａｑＩに
おいては２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に６個の対立遺
伝子が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。Ｐｓ
ｔＩにおては、２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に７個の
対立遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示し
た。ＰｖｕIIにおいては、２．０ｋｂから１．３ｋｂの
間に８個の対立遺伝子が存在し、６例中４例で異型接合
性を示した。
【００３２】ｃＣＩ６−２４をプローブとしてハイブリ
ダイズした時の結果を図３に示した。ＴａｑＩにおいて
は２．１ｋｂから１．６ｋｂの間に３個の対立遺伝子が
存在し、６例中３例で異型接合性を示した。ＲｓａＩに
おいては、３．１ｋｂから２．４ｋｂの間に４個の対立
遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示した。Ｐ
ｓｔＩにおいては、２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に３
個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示
した。ＰｖｕIIにおいては、１．５ｋｂから０．８ｋｂ
の間に３個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接
合性を示した。
ダイズした時の結果を図３に示した。ＴａｑＩにおいて
は２．１ｋｂから１．６ｋｂの間に３個の対立遺伝子が
存在し、６例中３例で異型接合性を示した。ＲｓａＩに
おいては、３．１ｋｂから２．４ｋｂの間に４個の対立
遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示した。Ｐ
ｓｔＩにおいては、２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に３
個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示
した。ＰｖｕIIにおいては、１．５ｋｂから０．８ｋｂ
の間に３個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接
合性を示した。
【００３３】ｃＣＩ６−４９をプローブとしてハイブリ
ダイズした時の結果を図４に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、４．４ｋｂから２．６ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては、５．２ｋｂから３．０ｋｂの間に６個の対
立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示した。
ＴａｑＩにおいては５．０ｋｂから３．０ｋｂの間に７
個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示
した。ＢｇｌIIにおいては、１０ｋｂから３．０ｋｂの
間に４個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合
性を示した。ＰｓｔＩにおいては、６．０ｋｂから３．
０ｋｂの間に８個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で
異型接合性を示した。ＲｖｕIIにおいては、５．０ｋｂ
から３．３ｋｂの間に、５個の対立遺伝子が存在し、６
例中６例で異型接合性を示した。
ダイズした時の結果を図４に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、４．４ｋｂから２．６ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては、５．２ｋｂから３．０ｋｂの間に６個の対
立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示した。
ＴａｑＩにおいては５．０ｋｂから３．０ｋｂの間に７
個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示
した。ＢｇｌIIにおいては、１０ｋｂから３．０ｋｂの
間に４個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合
性を示した。ＰｓｔＩにおいては、６．０ｋｂから３．
０ｋｂの間に８個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で
異型接合性を示した。ＲｖｕIIにおいては、５．０ｋｂ
から３．３ｋｂの間に、５個の対立遺伝子が存在し、６
例中６例で異型接合性を示した。
【００３４】ｃＣＩ６−７８をプローブとしてハイブリ
ダイズした時の結果を図５に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、４．２ｋｂから２．３ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては、３．０ｋｂから２．２ｋｂの間に４個の対
立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示した。
ＴａｑＩにおいては、１０ｋｂから６．０ｋｂの間に５
個の対立遺伝子が存在し６例中５例で異型接合性を示し
た。ＰｓｔＩにおいては、６．０ｋｂから４．３ｋｂの
間に６個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合
性を示した。
ダイズした時の結果を図５に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、４．２ｋｂから２．３ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては、３．０ｋｂから２．２ｋｂの間に４個の対
立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合性を示した。
ＴａｑＩにおいては、１０ｋｂから６．０ｋｂの間に５
個の対立遺伝子が存在し６例中５例で異型接合性を示し
た。ＰｓｔＩにおいては、６．０ｋｂから４．３ｋｂの
間に６個の対立遺伝子が存在し、６例中５例で異型接合
性を示した。
【００３５】ｃＣＩ６−９１をプローブとしてハイブリ
ダイズした時の結果を図６に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、２．５ｋｂから１．８ｋｂの間に５個の対立遺伝子
が存在し、６例中２例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては１．５ｋｂから１．３ｋｂの間に３個の対立
遺伝子が存在し、６例中１例で異型接合性を示した。Ｔ
ａｑＩにおいては１．８ｋｂから１．３ｋｂの間に５個
の対立遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示し
た。ＰｓｔＩにおいては、１．５ｋｂから１．１ｋｂの
間に７個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合
性を示した。
ダイズした時の結果を図６に示した。ＭｓｐＩにおいて
は、２．５ｋｂから１．８ｋｂの間に５個の対立遺伝子
が存在し、６例中２例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては１．５ｋｂから１．３ｋｂの間に３個の対立
遺伝子が存在し、６例中１例で異型接合性を示した。Ｔ
ａｑＩにおいては１．８ｋｂから１．３ｋｂの間に５個
の対立遺伝子が存在し、６例中３例で異型接合性を示し
た。ＰｓｔＩにおいては、１．５ｋｂから１．１ｋｂの
間に７個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合
性を示した。
【００３６】ｃＣＩ６−１０７をプローブとしてハイブ
リダイズした時の結果を図７に示した。ＭｓｐＩにおい
ては、１０ｋｂから４．０ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては７．０ｋｂから５．５ｋｂの間に４個の対立
遺伝子が存在し、６例中２例で異型接合性を示した。
リダイズした時の結果を図７に示した。ＭｓｐＩにおい
ては、１０ｋｂから４．０ｋｂの間に６個の対立遺伝子
が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては７．０ｋｂから５．５ｋｂの間に４個の対立
遺伝子が存在し、６例中２例で異型接合性を示した。
【００３７】ｃＣＩ６−１１１をプローブとしてハイブ
リダイズした時の結果を図８に示した。ＭｓｐＩにおい
ては４．４ｋｂから１．８ｋｂの間に９個の対立遺伝子
が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては５．５ｋｂ１．７ｋｂの間に１１個の対立遺
伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。Ｔａ
ｑＩにおいては８．５ｋｂから２．６ｋｂの間に１２個
の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示し
た。ＢｇｌIIにおいては１０ｋｂから２．１ｋｂの間に
１２個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性
を示した。ＰｓｔＩにおいては、５．２ｋｂから０．５
ｋｂの間に１１個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で
異型接合性を示した。ＰｖｕIIにおいては、１０ｋｂか
ら２．３ｋｂの間に１０個の対立遺伝子が存在し、６例
中６例で異型接合性を示した。
リダイズした時の結果を図８に示した。ＭｓｐＩにおい
ては４．４ｋｂから１．８ｋｂの間に９個の対立遺伝子
が存在し、６例中４例で異型接合性を示した。ＲｓａＩ
においては５．５ｋｂ１．７ｋｂの間に１１個の対立遺
伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示した。Ｔａ
ｑＩにおいては８．５ｋｂから２．６ｋｂの間に１２個
の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性を示し
た。ＢｇｌIIにおいては１０ｋｂから２．１ｋｂの間に
１２個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で異型接合性
を示した。ＰｓｔＩにおいては、５．２ｋｂから０．５
ｋｂの間に１１個の対立遺伝子が存在し、６例中６例で
異型接合性を示した。ＰｖｕIIにおいては、１０ｋｂか
ら２．３ｋｂの間に１０個の対立遺伝子が存在し、６例
中６例で異型接合性を示した。
【００３８】ｃＣＩ６−７については、シーケンシング
を行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図
９）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
を行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図
９）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
【化１】
【００３９】ｃＣＩ６−２４についてはシーケンシング
を行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
０）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
を行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
０）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
【化２】
【００４０】ｃＣＩ６−４９については、シーケンシン
グを行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
１）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
グを行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
１）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
【化３】
【００４１】ｃＣＩ６−１１１についてはシーケンシン
グを行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
２）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
グを行ない、繰り返し領域の塩基配列を決定した（図１
２）。繰り返し領域の共通配列は下記に示した。
【化４】
【図１】ｃＣＩ６−７をプローブとしてハイブリダイズ
した時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
した時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図２】ｃＣＩ６−１３をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図３】ｃＣＩ６−２４をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図４】ｃＣＩ６−４９をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図５】ｃＣＩ６−７８をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図６】ｃＣＩ６−９１をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図７】ｃＣＩ６−９１をプローブとしてハイブリダイ
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
ズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図８】ｃＣＩ６−１０７をプローブとしてハイブリダ
イズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
イズした時の結果を示すオートラジオグラムの模式図。
【図９】ｃＣＩ６−７の繰り返し領域の塩基配列を示す
図。
図。
【図１０】ｃＣＩ６−２４の繰り返し領域の塩基配列を
示す図。
示す図。
【図１１】ｃＣＩ６−４９の繰り返し領域の塩基配列を
示す図。
示す図。
【図１２】ｃＣＩ６−１１１の繰り返し領域の塩基配列
を示す図。
を示す図。
Claims (9)
- 【請求項１】 ヒト６番染色体のｐ２１．３の位置に存
在し、ＰｓｔＩ及びＰｖｕIIにより制限断片長多型を示
し、ＰｓｔＩにおいて３．５ｋｂから２．８ｋｂの間に
少なくとも７個の対立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおい
て１．８ｋｂから１．２ｋｂの間に少なくとも６個の対
立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列。 - 【請求項２】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在し
ＭｓｐＩ、ＴａｑＩ、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制限断
片長多型を示し、ＭｓｐＩにおいて１．４ｋｂから０．
６ｋｂの間に少なくとも７個の対立遺伝子が存在し、Ｔ
ａｑＩにおいて２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少なく
とも６個の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて２．
３ｋｂから２．１ｋｂの間に少なくとも７個の対立遺伝
子が存在し、ＰｖｕIIにおいて２．０ｋｂから１．３ｋ
ｂの間に少なくとも８個の対立遺伝子が存在するヒトＶ
ＮＴＲ配列。 - 【請求項３】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在
し、ＴａｑＩ、ＲｓａＩ、ＰｓｔＩ、ＰｖｕIIにより制
限断片長多型を示し、ＴａｑＩにおいて２．１ｋｂから
１．６ｋｂの間に少なくとも３個の対立遺伝子が存在
し、ＲｓａＩにおいて３．１ｋｂから２．４ｋｂの間に
少なくとも４個の対立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおい
て２．３ｋｂから２．１ｋｂの間に少なくとも３個の対
立遺伝子が存在し、ＰｖｕIIにおいて１．５ｋｂから
０．８ｋｂの間に少なくとも３個の対立遺伝子が存在す
るヒトＶＮＴＲ配列。 - 【請求項４】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在
し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、ＢｇｌII、Ｐｓｔ
Ｉ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示し、ＭｓｐＩに
おいて４．４ｋｂから２．６ｋｂの間に少なくとも６個
の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて５．２ｋｂか
ら３．０ｋｂの間に少なくとも６個の対立遺伝子が存在
し、ＴａｑＩにおいて５．０ｋｂから３．０ｋｂの間に
少なくとも７個の対立遺伝子が存在し、ＢｇｌIIにおい
て１０ｋｂから３．０ｋｂの間に少なくとも４個の対立
遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて６．０ｋｂから３．
０ｋｂの間に少なくとも８個の対立遺伝子が存在し、Ｐ
ｖｕIIにおいて５．０ｋｂから３．３ｋｂの間に少なく
とも５個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列。 - 【請求項５】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在
し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、ＰｓｔＩにより制
限断片長多型を示し、ＭｓｐＩにおいて４．２ｋｂから
２．３ｋｂの間に少くとも６個の対立遺伝子が存在し、
ＲｓａＩにおいて３．０ｋｂから２．２ｋｂの間に少く
とも４個の対立遺伝子が存在しＴａｑＩにおいて１０ｋ
ｂから６．０ｋｂの間に少くとも５個の対立遺伝子が存
在し、ＰｓｔＩにおいて６．０ｋｂから４．３ｋｂの間
に少くとも６個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配
列。 - 【請求項６】 ヒト６番染色体のｑ２６の位置に存在
し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、ＰｓｔＩにより制
限断片長多型を示し、ＭｓｐＩにおいて２．５ｋｂから
１．８ｋｂの間に少くとも５個の対立遺伝子が存在し、
ＲｓａＩにおいて１．５ｋｂから１．３ｋｂの間に少く
とも３個の対立遺伝子が存在し、ＴａｑＩにおいて１．
８ｋｂから１．３ｋｂの間に少くとも５個の対立遺伝子
が存在し、ＰｓｔＩにおいて１．５ｋｂから１．１ｋｂ
の間に少くとも７個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴ
Ｒ配列。 - 【請求項７】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在
し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩにおいて制限断片長多型を示
し、ＭｓｐＩにおいて１０ｋｂから４．０ｋｂの間に少
くとも６個の対立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて
７．０ｋｂから５．５ｋｂの間に少くとも４個の対立遺
伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配列。 - 【請求項８】 ヒト６番染色体のｑ２７の位置に存在
し、ＭｓｐＩ、ＲｓａＩ、ＴａｑＩ、ＢｇｌII、Ｐｓｔ
Ｉ、ＰｖｕIIにより制限断片長多型を示し、ＭｓｐＩに
より４．４ｋｂから１．８ｋｂの間に少くとも９個の対
立遺伝子が存在し、ＲｓａＩにおいて５．５ｋｂから
１．７ｋｂの間に少くとも１１個の対立遺伝子が存在
し、ＴａｑＩにおいて８．５ｋｂから２．６ｋｂの間に
少くとも１２個の対立遺伝子が存在し、ＢｇｌIIにおい
て１０ｋｂから２．１ｋｂの間に少なくとも１２個の対
立遺伝子が存在し、ＰｓｔＩにおいて５．２ｋｂから
０．５ｋｂの間に少くとも１１個の対立遺伝子が存在
し、ＰｖｕIIにおいて１０ｋｂから２．３ｋｂの間に少
くとも１０個の対立遺伝子が存在するヒトＶＮＴＲ配
列。 - 【請求項９】 請求項１ないし８に記載のヒトＶＮＴＲ
配列を有するプローブ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35948291A JP2534597B2 (ja) | 1991-12-27 | 1991-12-27 | プロ―ブ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35948291A JP2534597B2 (ja) | 1991-12-27 | 1991-12-27 | プロ―ブ |
Related Child Applications (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7189877A Division JPH089998A (ja) | 1995-07-03 | 1995-07-03 | プローブ |
| JP7337731A Division JP2810887B2 (ja) | 1995-12-01 | 1995-12-01 | プローブ |
| JP7337988A Division JP2810888B2 (ja) | 1995-12-01 | 1995-12-01 | プローブ |
| JP7337729A Division JP2810886B2 (ja) | 1995-12-01 | 1995-12-01 | プローブ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05276949A true JPH05276949A (ja) | 1993-10-26 |
| JP2534597B2 JP2534597B2 (ja) | 1996-09-18 |
Family
ID=18464730
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35948291A Expired - Fee Related JP2534597B2 (ja) | 1991-12-27 | 1991-12-27 | プロ―ブ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2534597B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8597877B2 (en) | 1998-12-08 | 2013-12-03 | Seattle Children's Hospital | Polymorphic loci that differentiate Escherichia coli O157:H7 from other strains |
-
1991
- 1991-12-27 JP JP35948291A patent/JP2534597B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8597877B2 (en) | 1998-12-08 | 2013-12-03 | Seattle Children's Hospital | Polymorphic loci that differentiate Escherichia coli O157:H7 from other strains |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2534597B2 (ja) | 1996-09-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bej et al. | Amplification of nucleic acids by polymerase chain reaction (PCR) and other methods and their applications | |
| Chang et al. | FISH mapping and molecular organization of the major repetitive sequences of tomato | |
| He et al. | Interstitial telomeric repeats are enriched in the centromeres of chromosomes in Solanum species | |
| Karafiátová et al. | Mapping nonrecombining regions in barley using multicolor FISH | |
| Tang et al. | Cross-species bacterial artificial chromosome–fluorescence in situ hybridization painting of the tomato and potato chromosome 6 reveals undescribed chromosomal rearrangements | |
| Koo et al. | Molecular cytogenetic mapping of Cucumis sativus and C. melo using highly repetitive DNA sequences | |
| Lou et al. | Single‐copy gene‐based chromosome painting in cucumber and its application for chromosome rearrangement analysis in C ucumis | |
| Budiman et al. | Localization of jointless-2 gene in the centromeric region of tomato chromosome 12 based on high resolution genetic and physical mapping | |
| Wlodzimierz et al. | Cycles of satellite and transposon evolution in Arabidopsis centromeres | |
| CN107385024B (zh) | 水稻育性恢复基因辅助育种分子标记及其应用 | |
| EP0402400B1 (en) | Genetic identification employing dna probes of variable number tandem repeat loci | |
| Desel et al. | High-resolution mapping of YACs and the single-copy gene Hs1pro− 1 on Beta vulgaris chromosomes by multi-colour fluorescence in situ hybridization | |
| Backx et al. | Array painting using microdissected chromosomes to map chromosomal breakpoints | |
| CN101165193B (zh) | 一种黑麦1rs染色体特异的est-sts标记引物1、筛选方法及用途 | |
| Koo et al. | Integration of cytogenetic and genetic linkage maps unveils the physical architecture of tomato chromosome 2 | |
| Koo et al. | Super‐stretched pachytene chromosomes for fluorescence in situ hybridization mapping and immunodetection of DNA methylation | |
| CN104928355A (zh) | 检测braf基因突变的方法及其试剂盒 | |
| CN1179794A (zh) | 检测dna损伤、测定dna修复速度和监测dna修复酶活性 | |
| Li et al. | A novel approach to prepare extended DNA fibers in plants | |
| Sanz et al. | Use of tyramide-fluorescence in situ hybridization and chromosome microdissection for ascertaining homology relationships and chromosome linkage group associations in oats | |
| JP2534597B2 (ja) | プロ―ブ | |
| JPH089998A (ja) | プローブ | |
| CN108396026A (zh) | 十倍体长穂偃麦草蓝粒性状专化分子标记和荧光原位杂交探针的开发及应用 | |
| JP2810887B2 (ja) | プローブ | |
| JP2810886B2 (ja) | プローブ |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |