JPH05148249A - ベンゾオキサジノン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】抗炎症活性、プロテアーゼ阻害活性を有する新
規ベンゾオキサジノン誘導体の提供。 【構成】一般式 〔式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³は、水素原子又は低級アルキル
基；Ａは（ハロゲン置換）フェニル基、ピリジン等のヘ
テロ環又はアダマンチル基；Ｂは水素原子、（ハロゲン
置換）フェニル基又はピリジン等のヘテロ環；Ｕは＝Ｃ
Ｈ−、＝Ｃ＝又は＝Ｎ−；Ｖは−Ｏ−、−ＣＨ₂−、＝
Ｎ−、−ＮＨ−、−ＣＨ＝又は単結合；Ｘは−Ｏ−、＝
ＣＨ−、−ＣＨ₂−又は単結合；Ｙは−ＣＨ₂−、−ＮＨ
−、−Ｏ−又は単結合；Ｚは−ＣＯ−又は−ＣＨ₂−；
を夫々示し、ｌは０乃至３の整数である〕で示されるベ
ンゾオキサジノン誘導体又は薬学的に許容されるそれら
の酸付加塩、該化合物を有効成分として含有する抗炎症
剤及び抗中球浸潤抑制剤並びにセリンプロテアーゼ阻害
剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は抗炎症作用又は好中球浸
潤抑制作用若しくはセリンプロテアーゼ阻害作用を有す
るベンゾオキサジノン誘導体に関するものであり、医薬
の分野で利用される。

【０００２】

【従来の技術】炎症の基本的病態を特徴づける免疫細
胞、特に好中球の血液中から組織への浸潤は、それにひ
きつづく血液成分の漏出による浮腫の形成、さらには組
織の破壊を伴って炎症症状の進行に深く関与している。
このような炎症症状の進行に免疫異常が関わっていると
思われる疾患には、慢性関節リウマチ、慢性気道感染症
に基づく気管支炎、成人呼吸窮迫症候群、及びII型喘息
として分類される細気管支閉塞型喘息などの呼吸器系の
疾患、さらには腸疾患の一つクーロン病や皮膚病の一つ
乾癬などの非特異性炎症疾患等が挙げられる。好中球の
浸潤と浮腫形成、組織破壊を伴う炎症症状の誘起との因
果関係については、好中球の産生する各種炎症性サイト
カイン、ケミカルメディエーター類の他に、高等動物の
肺、軟骨、血管壁、皮膚等の生体内結合組織の間質を構
成する線維蛋白質であるエラスチン及びコラーゲンを分
解し、さらには細胞障害作用を有しているプロテアー
ゼ、なかでもエラスターゼが重要な役割を果していると
考えられている。したがって、エラスターゼによる組織
破壊及びに劣化並びに細胞障害に起因する上記疾患、さ
らには膵炎、腎炎、動脈硬化等の多臓器の疾患及び敗血
症等の各種疾患の予防及び治療剤として、エラスターゼ
阻害剤が有効であると考えられるに到っている。既に、
エラスターゼ阻害剤等のセリンプロテアーゼ阻害剤とし
ては、ペプチド性、非ペプチド性のいくつかの化合物が
報告されており、非ペプチド性阻害剤としては、例え
ば、ジャーナル・オブ・ザ・バイオケミストリー（Jour
nal of theBiochemistry）２５７巻、５０８５〜５０９
１頁（１９８２年）、ジャーナル・オブ・ザ・メディシ
ナルケミストリ−（Journal of the Medicinal Chemist
ry）３０巻、１０１７〜１０２３頁（１９８７年）、同
３１巻、１０５２〜１０６１頁（１９８８年）、同３３
巻、４６４〜４７９頁（１９９０年）、特開平１−３０
８２２７号公報、再公表公報ＷＯ８８／９７９０号公
報、ＥＰ０３３７５４９号公報等が知られている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかし一方、炎症局所
においてはプロテアーゼと共に内在性のプロテアーゼ阻
害物質も多量に存在している。すなわち、炎症の発症及
び進行を予防、或は抑制するためには、プロテアーゼ阻
害活性のみでは不十分であると考えられる。例えば慢性
関節リュウマチにおけるロウワー（Lower）らの仮説
〔ジャーナル・オブ・リューマトール（Journal of Rhe
umatol）１４巻、４９頁（１９８７年）〕のように、活
性化された好中球がひとたび軟骨等に浸潤すれば、プロ
テアーゼ阻害剤の作用をうけることなしに軟骨等の組織
破壊を惹起すると考えられる。したがって、好中球の炎
症部位への定着、遊走による浸潤を阻止し、更に浸潤し
た好中球のエラスターゼによる組織破壊をも阻害する薬
剤の開発が、好中球機能に対して抑制的に作用する抗炎
症剤として望まれる。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、広く炎症
発症の各過程に作用し、組織破壊を抑制する作用を有す
る薬剤の開発という上記目的を達成するために鋭意研究
を重ねた結果、セリンプロテアーゼの中でも特にエラス
ターゼに対して優れた阻害作用を有し、かつ細菌由来の
化学誘引物質に対するヒト末梢血好中球の走化性を抑制
し、また動物炎症モデルにおいて好中球浸潤抑制活性を
も合わせもつ一般式〔Ｉ〕で示されるベンゾオキサジノ
ン誘導体を見い出し、本発明を完成するに到った。

【０００５】即ち、本発明は下記一般式〔Ｉ〕

【化４】 〔式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ²
は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ³は水素原子
又は低級アルキル基であり；Ａはハロゲン原子で置換さ
れてもよいフェニル基、ヘテロ環又はアダマンチル基で
あり；Ｂは水素原子、ハロゲン原子で置換されてもよい
フェニル基又はヘテロ環であり；Ｕは

【化５】 であり；Ｖは−Ｏ−、−ＣＨ₂−、＝Ｎ−、−ＮＨ−、
−ＣＨ＝又は単結合であり；Ｘは−Ｏ−、＝ＣＨ−、−
ＣＨ₂−又は単結合であり；Ｙは−ＣＨ₂−、−ＮＨ−、
−Ｏ−又は単結合であり；Ｚは−ＣＯ−又は−ＣＨ₂−
であり；

【化６】 は二重結合又は一重結合であり；ｌは０乃至３の整数で
ある〕で示されるベンゾオキサジノン誘導体又は薬学的
に許容されるそれらの酸付加塩を提供することを目的と
するものであり、また本発明の他の目的は上記ベンゾオ
キサジノン誘導体〔Ｉ〕を有効成分として含有する抗炎
症剤及び好中球浸潤抑制剤並びにセリンプロテアーゼ阻
害剤を提供することである。

【０００６】なお、この明細書の記載において言及され
る用語の定義及び具体例は、以下に説明する通りであ
る。 「低級アルキル基」とは、直鎖又は分枝鎖状の炭素数１
乃至５個のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エ
チル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソ
ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペ
ンチル基、イソペンチル基等が挙げらる。 「ハロゲン原子」とは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等
が挙げられる。 「ハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基」とは、
１乃至３個の上記のごときハロゲン原子で置換されても
よいフェニル基であり、複数のハロゲン原子で置換され
る場合はそれらハロゲン原子は同一であっても、異なっ
ていてもよい。具体的には、４−フルオロフェニル、３
−フルオロフェニル、２−フルオロフェニル、４−クロ
ロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニ
ル、４−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、２−ブ
ロモフェニル、４−ヨードフェニル、３−ヨードフェニ
ル、２−ヨードフェニル、２，４−ジフルオロフェニ
ル、２，４−ジクロロフェニル、２，４−ジブロモフェ
ニル、２，４−ジヨードフェニル２，４，６−トリフル
オロフェニル、２，４，６−トリクロロフェニル、２，
４，６−トリブロモフェニル、２，４，６−トリヨード
フェニル等を挙げることができる。 「ヘテロ環」とは、１個又は複数個のヘテロ原子を含む
４乃至７員環を示し、具体的にはピロール、フラン、チ
オフェン、ピラゾール、イソキサゾール、イミダゾー
ル、オキサゾール、チアゾール、ピリジン、ピリミジ
ン、ピラジン、アゼチジン、ピロリジン、テトラヒドロ
フラン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ホモピ
ペリジン等が挙げられ、ヘテロ環のどの位置で結合して
もよい。

【０００７】本発明によれば、一般式〔Ｉ〕で示される
ベンゾオキサジノン誘導体は、例えば下記の方法により
製造することができるが、目的化合物〔Ｉ〕の製造は下
記製造方法にのみに限定されるものではない。

【化７】

【化８】

【化９】

【０００８】〔上記反応式において、Ａ、Ｂ、Ｕ、Ｖ、
Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、及びｌは前記と同じ意味
を表し、Ｌ¹は水素原子又はペプチド合成で通常用いら
れるカルボキシル保護基、例えば、エチル基、ベンジル
基等を意味し、Ｌ²はペプチド合成で通常用いられるア
ミノ保護基、例えば、ベンジルオキシカルボニル基、ｔ
ｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基を意味する〕 ここに示した反応（ａ）乃至（ｄ）及び（ｇ）の各工程
の反応はいずれも基本的にはペプチド合成におけるペプ
チド結合生成反応であり、公知の方法を適宜選択して使
用することができる（例えば、「ペプチド合成の基礎と
実験」泉屋信夫等著、丸善（株）出版）。また、反応
（ｅ）は公知の脱水剤を用いた閉環反応を、反応（ｆ）
及び（ｈ）は公知の還元的アルキル化反応を、反応
（ｉ）は公知のアルキル化反応を用いてそれぞれ実施さ
れる。

【０００９】以下、上記反応式における各工程を、順を
追って詳述する。 フロー１．Ｚが−ＣＯ−の場合；反応（ａ）において
は、化合物（Ａ）又は（Ａ’）を必要に応じカルボキシ
ル基を保護したアミノ酸誘導体（Ｂ）と縮合させて化合
物（Ｃ）を得る。この反応における好ましい縮合方法と
しては、例えば次のような方法を挙げることができる。
まず、化合物（Ａ）とイソブチル クロロホルメートな
どの炭酸モノアルキルエステルを、不活性有機溶媒中に
おいて、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなど
の三級アミンの存在下に反応させて混合酸無水物を得
る。次いで、この混合酸無水物を単離することなくアミ
ノ酸誘導体（Ｂ）と縮合させる。あるいは、化合物
（Ａ）とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを、不活性有機
溶媒中、水溶性カルボジイミド塩酸塩（１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸
塩）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドなど
の脱水縮合剤の存在下で反応させてＮ−ヒドロキシスク
シンイミド エステルとする。その後、このエステルと
化合物（Ｂ）とを、水−アセトンなどのような混合溶媒
中において炭酸ナトリウムなどの塩基の存在下で反応さ
せ、化合物（Ｃ）を得る。一方、化合物（Ａ’）を用い
る場合には、化合物（Ａ’）を１，４−ジオキサン、テ
トラヒドロフランなどの適当な溶媒中で、トリエチルア
ミンなどの三級アミンの存在下、−２０℃から室温にお
いて、ホスゲン、トリクロロメチル クロロホルメー
ト、カルボニルジイミダゾールなどと反応し、次いで化
合物（Ｂ）と反応させることにより化合物（Ｃ）を得
る。なお、化合物（Ｃ）は、化合物（Ｂ）のＬ¹がカル
ボキシル保護基である場合には、不活性有機溶媒中で好
適なアディティブ（例えば１−ヒドロキシトリアゾー
ル）の存在又は非存在下、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシル
カルボジイミドなどを用いての縮合反応によっても合成
できる。 反応（ｂ）において、まず、Ｌ¹がカルボ
キシル保護基である場合は、常法により化合物（Ｃ）の
カルボキシル保護基Ｌ¹を除去して遊離カルボキシル基
とする。次いで、この遊離カルボキシル基を有する化合
物とアミノ化合物（Ｄ）とを、反応（ａ）と同様にして
縮合反応を行うことにより化合物（Ｅ）を得る。更に、
化合物（Ｅ）は反応（ｃ）及び（ｄ）を経由しても合成
することができる。即ち、反応（ｃ）に示すように遊離
アミノ基を持つ化合物（Ｄ）と遊離カルボキシル基を有
するアミノ酸誘導体（Ｆ）とから反応（ａ）と同様の縮
合反応により化合物（Ｇ）を合成し、更に反応（ｄ）に
従って、化合物（Ａ）のカルボキシル基を反応（ａ）と
同様にして活性化した後、化合物（Ｇ）のアミノ保護基
Ｌ²を常法により除去して得た遊離アミノ基を有する化
合物と縮合反応を行うことにより化合物（Ｅ）を得る。
また、反応（ｄ）において、化合物（Ａ’）を用いる場
合にも、反応（ａ）において記したと同様にしてホスゲ
ン、トリクロロメチル クロロホルメート、カルボニル
ジイミダゾールなどを用いることにより目的とする化合
物（Ｅ）を得ることができる。反応（ｅ）において、上
記の如くして得られた化合物（Ｅ）を、不活性有機溶媒
中において水溶性カルボジイミド塩酸塩、Ｎ，Ｎ’−ジ
シクロヘキシルカルボジイミドなどの縮合剤を用いて脱
水縮合反応による環化を行う。これにより、目的化合物
である一般式〔Ｉ〕で示される本発明化合物を得ること
ができる。上記では、ベンゾオキサジノン環への閉環反
応を最終ステップ反応（ｅ）の段階で行ったが、予め化
合物（Ｇ）を反応（ｅ）と同様の条件下で閉環反応に付
してベンゾオキサジノン体（Ｎ）とした後に、反応
（ｄ）で述べた方法により化合物（Ａ）又は（Ａ’）と
反応させることによって最終目的化合物〔Ｉ'〕を得て
もよい。

【００１０】フロー２．Ｚが−ＣＨ₂−の場合；反応
（ｆ）においては、アルデヒド（Ｈ）とアミノ酸誘導体
（Ｂ）とを用いて還元的アルキル化反応を行い、化合物
（Ｊ）を得る。この反応における好ましい還元的アルキ
ル化反応としては、例えば次のような方法を挙げること
ができる。化合物（Ｈ）と化合物（Ｂ）とを水、メタノ
ール、１，４−ジオキサン等の単独又は混合溶媒に溶か
し、弱酸性条件下、好ましくはｐＨ５乃至７において、
−３０℃乃至室温、好ましくは０℃乃至室温において反
応させ、生じたイミンをプラチナ触媒存在下での接触還
元、あるいは水素化ホウ素ナトリウム、水素化シアノホ
ウ素ナトリウム等の還元剤を用いて還元を行うことによ
り化合物（Ｊ）を得る。次いで前記反応（ｂ）と全く同
様にして、Ｌ¹がカルボキシル保護基である場合には化
合物（Ｊ）のカルボキシル保護基Ｌ¹を公知の方法によ
り除去し、更にアミノ化合物（Ｄ）と縮合させることに
より化合物（Ｋ）を得る。更に、化合物（Ｋ）は反応
（ｇ）及び（ｈ）を経由しても合成することができる。
即ち、反応（ｇ）に示すように遊離カルボキシル基を有
するアミノ酸誘導体（Ｆ）とアミノ化合物（Ｌ）とを前
記反応（ａ）と同様にして縮合反応させて化合物（Ｍ）
を得る。更に反応（ｈ）に従って化合物（Ｍ）のアミノ
保護基Ｌ²を公知の方法により除去して得られる遊離ア
ミノ基を有する化合物を、前記の反応（ｆ）の場合と全
く同様にしてアルデヒド（Ｈ）と還元的アルキル化反応
を行い、更に得られた化合物のＬ¹がカルボキシル保護
基である場合には、カルボキシル保護基Ｌ¹を公知の方
法を用いて除去することにより、化合物（Ｋ）を得る。
なお化合物（Ｍ）は、化合物（Ｌ）のＬ¹がカルボキシ
ル保護基である場合には、不活性有機溶媒中で好適なア
ディティブ（例えば１−ヒドロキシトリアゾ−ル、Ｎ−
ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボン酸
イミド）の添加又は非添加の条件下でＮ，Ｎ’−ジシク
ロヘキシルカルボジイミドなどを縮合剤として用い縮合
反応することにより合成することもできる。上記のごと
くして得られた化合物（Ｋ）を前記の反応（ｅ）と全く
同様にして脱水縮合反応に付することにより目的化合物
である一般式〔Ｉ''〕で示される本発明の化合物を得る
ことができる。

【００１１】フロー３．Ｚが−ＣＯ−でＹが−ＣＨ₂−
又は単結合の場合；フロー１で得られる化合物（Ｇ）の
アミノ保護基Ｌ²を公知の方法により除去して得られる
遊離アミノ基を有する化合物を、前期反応（ａ）で述べ
た方法を用いて、化合物（Ｏ）と縮合することにより化
合物（Ｐ）を得る。次に化合物（Ｐ）を前期反応（ｅ）
と同様にして処理することにより化合物（Ｑ）を得る。
次いで化合物（Ｑ）と化合物（Ｒ）を不活性有機溶媒
中、水素化ナトリウムなどの塩基の存在下、−２０℃乃
至室温において反応することにより目的化合物である式
〔Ｉ'''〕で示される本発明化合物を得ることができ
る。

【００１２】各反応において使用される不活性有機溶媒
としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テ
トラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、１，２−ジメ
トキシエタン、塩化メチレン、酢酸エチルなどを適宜選
択して使用することができる。反応終了後、目的化合物
を反応混合物中から単離、精製するには、通常当該分野
において公知の手段、例えば溶媒抽出、カラムクロマト
グラフィ−、再結晶化等を適宜選択して用いることによ
り行うことができる。また、出発原料として使用される
式（Ａ）、（Ａ’）、（Ｂ）、（Ｄ）、（Ｆ）、
（Ｈ）、（Ｌ）、（Ｏ）及び（Ｒ）はいずれもそれ自体
公知物質として入手可能か、又は公知の前駆物質より既
知の方法を用いて容易に誘導、合成することができる。

【００１３】上記方法により製造される本発明の一般式
〔Ｉ〕で示されるベンゾオキサジノン誘導体は、薬理学
的に許容される塩類を生成することができる。これらの
塩類としては、例えば、塩酸、硫酸、燐酸、臭化水素酸
などの無機酸との酸付加塩、酒石酸、マレイン酸、フマ
ル酸、コハク酸、スルホン酸などの有機酸との酸付加塩
等が挙げられ、これらの化合物はいずれも抗炎症剤又は
好中球浸潤抑制剤若しくはセリンプロテア−ゼ阻害剤と
して有用である。また、本発明の一般式〔Ｉ〕で示され
るベンゾオキサジノン誘導体においては、不斉炭素原子
が存在しうるが、この場合これらに基づく立体異性体と
しての鏡像異性体、ジアステレオマ−が存在する。ま
た、幾何異性体としてのシス体及びトランス体も存在し
うる。したがって本発明の範囲には、これらすべての異
性体及びそれらの混合物が包含される。本発明の一般式
〔Ｉ〕で示されるベンゾオキサジノン誘導体又はその塩
類は、医薬製剤の有効成分として用いることができる。
このベンゾオキサジノン誘導体又はその塩類を含有する
医薬製剤は、例えば、免疫異常による炎症性疾患であ
る、慢性関節リウマチ、慢性気道感染症に基づく気管支
炎、成人呼吸窮迫症候群、及びII型喘息として分類され
る細気管支閉塞型喘息等の呼吸器系の疾患、腸疾患の一
つクーロン病や皮膚病の一つである乾癬等の非特異性炎
症性疾患、そのほかにもエラスターゼによる組織破壊並
びに劣化及び細胞障害に起因する膵炎、腎炎、動脈硬化
及び敗血症等の疾患の予防及び治療剤として有用であ
る。本発明の一般式〔Ｉ〕で示されるベンゾオキサジノ
ン誘導体又はその塩類を有効成分として含有する医薬製
剤は、経口あるいは非経口などの適当な投与方法により
投与することが可能である。また、本剤の適応症の特性
から経気道的な投与にすることも可能である。例えば、
経口投与形態としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散
剤、液剤などが、また、非経口投与形態としては、注射
剤、座剤、軟膏剤、液剤などが挙げられる。これらの製
剤化に際しては、賦形剤、結合剤、崩壊剤あるいはその
他添加剤を当該分野における常法にしたがい、適宜選択
して使用することができる。特に、経気道的な投与形態
とする場合には、例えば界面活性剤、噴射剤を適宜選択
して使用し、エアロゾルなどの噴射手段により投与する
ことができる。このようにして得られた一般式〔Ｉ〕で
示されるベンゾオキサジノン誘導体又はその塩類を有効
成分とする医薬製剤を患者に投与する場合には、通常、
成人１日当り一般式〔Ｉ〕で示されるベンゾオキサジノ
ン誘導体１乃至１００ｍｇの投与量が設定される。しか
しながら、その投与量は、患者の年齢、性別、体重及び
症状の程度、更には投与方法に応じて適宜増減されるも
のであり、これに限定されるものではない。

【００１４】

【実施例】以下に、実施例及び試験例を挙げて本発明を
更に具体的に説明するが、本発明の要旨を越えない限
り、これらによって限定されるものではない。 実施例１ ２−［１（Ｓ）−［（２，２−ジフェニルエトキシカル
ボニル）アミノ］−２−メチルプロピル］−５−メチル
−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物
１）の合成

【００１５】（１）２−［（Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−Ｌ−バリル）アミノ］−６−メチル安息香酸 ２−アミノ−６−メチル安息香酸（３.１５ｇ）と炭酸
ナトリウム（２.４５ｇ）の水溶液（１８ｍｌ）にアセ
トン（１８ｍｌ）及びＮ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−バリン Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド エステル
（８.０２ｇ）を加え、室温で５時間攪拌した。１Ｎ塩
酸で酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を１
Ｎ塩酸、飽和食塩水で順次洗浄し無水硫酸ナトリウムで
乾燥後、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ−により精製し、標題化合物（３.７１ｇ）を得
た。

【００１６】（２）６−メチル−２−（Ｌ−バリルアミ
ノ）安息香酸 ２−［（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリル）
アミノ］−６−メチル安息香酸（１.２１ｇ）をメタノ
−ル（９９ｍｌ）、水（１ｍｌ）に溶解し、１０％Ｐｄ
−Ｃ（２００ｍｇ）を加え、水素雰囲気下室温で３時間
攪拌した。Ｐｄ−Ｃを濾去後、濾液を濃縮し、標題化合
物（８３０ｍｇ）を得た。

【００１７】（３）２−｛［Ｎ−（２，２−ジフェニル
エトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］アミノ｝−６−メ
チル安息香酸 トリクロロメチル クロロホルメート（０.２４ｍｌ）
のトルエン溶液（５ｍｌ）に、氷冷下、トリエチルアミ
ン（２８μｌ）と２，２−ジフェニルエタノール（０.
４ｇ）を加え、１０分間攪拌した。さらに５乃至１０℃
で１時間、次いで室温で１時間攪拌した後、トルエンを
減圧下留去した。得られた残渣のテトラヒドロフラン溶
液（６ｍｌ）を、６−メチル−２−（Ｌ−バリルアミ
ノ）安息香酸（２２６ｍｇ）とＮ−メチルモルホリン
（２１２μｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液
（１５ｍｌ）に滴下し、室温で２０時間攪拌した。反応
液を１Ｎ塩酸中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層
を１Ｎ塩酸、飽和食塩水で順次洗浄し無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥後、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー（溶離液：酢酸エチル−ヘキサン−酢
酸）により精製し、標題化合物（４２ｍｇ）を得た。

【００１８】（４）２−｛１（Ｓ）−［（２，２−ジフ
ェニルエトキシカルボニル）アミノ］−２−メチルプロ
ピル｝−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン
−４−オン ２−｛［Ｎ−（２，２−ジフェニルエトキシカルボニ
ル）−Ｌ−バリル］アミノ｝−６−メチル安息香酸（４
２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（２ｍ
ｌ）に、氷冷下、水溶性カルボジイミド塩酸塩（２０ｍ
ｇ）を加え、室温で１５時間攪拌した。反応液を減圧濃
縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（溶離液：塩化メチレン−エーテル）により精製
し、標題化合物（３３ｍｇ）を得た。

【００１９】実施例２ ２−［１（Ｓ）−［［（ジフェニルメトキシ）アセチ
ル］アミノ］−２−メチルプロピル］−５−メチル−４
Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物２）
の合成

【００２０】（１）（ジフェニルメトキシ）酢酸 エチ
ル エステル ジフェニルメタノール（３.６８ｇ）とブロモ酢酸 エ
チル エステル（３ｍｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムア
ミド溶液（３０ｍｌ）に、氷冷下、水素化ナトリウム
（６０％ dispersion in oil，９６０ｍｇ）を加え、２
時間攪拌した。反応液を氷冷塩化アンモニウム中に注
ぎ、エーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄
後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し濃縮した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：塩化メチ
レン−エーテル）により精製し、標題化合物（４.６２
ｇ）を得た。

【００２１】（２）（ジフェニルメトキシ）酢酸 （ジフェニルメトキシ）酢酸 エチル エステル（４.
６２ｇ）のエタノール溶液（８０ｍｌ）に、氷冷下、１
Ｎ水酸化ナトリウム（２２.５ｍｌ）を２０分間かけて
滴下し、室温で８時間攪拌した。反応液を減圧濃縮後、
残渣を水に溶かしエーテルで洗浄した。水層を、氷冷
下、５％塩酸を用いて酸性とした後、エーテルで抽出し
た。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、標
題化合物（３.６０ｇ）を得た。

【００２２】（３）２−［［Ｎ−［（ジフェニルメトキ
シ）アセチル］−Ｌ−バリル］アミノ］−６−メチル安
息香酸 （ジフェニルメトキシ）酢酸（４０７ｍｇ）のテトラヒ
ドロフラン溶液（１５ｍｌ）に、−７８℃で、Ｎ−メチ
ルモルホリン（０.１９ｍｌ）とイソブチルクロロホル
メート（０.２２ｍｌ）を加えた。１.５時間攪拌後、実
施例１の（２）で調製した６−メチル−２−（Ｌ−バリ
ルアミノ）安息香酸（３００ｍｇ）とＮ−メチルモルホ
リン（０.１７ｍｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
溶液（１８ｍｌ）を滴下し３０分間攪拌した。室温で１
７時間攪拌後、反応液を氷冷１Ｎ塩酸中に注ぎ、酢酸エ
チルで抽出した。有機層を１Ｎ塩酸、飽和食塩水で順次
洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢
酸エチル−ヘキサン−酢酸）により精製し、標題化合物
（２８２ｍｇ）を得た。

【００２３】（４）２−［１（Ｓ）−［［（ジフェニル
メトキシ）アセチル］アミノ］−２−メチルプロピル］
−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジンー４ー
オン２−［［Ｎ−［（ジフェニルメトキシ）アセチル］
−Ｌ−バリル］アミノ］−６−メチル安息香酸（５００
ｍｇ）を実施例１の（４）の場合と同様にして脱水閉環
させることにより、標題化合物（３４０ｍｇ）を得た。

【００２４】実施例３ ５−メチル−２−［２−メチル−１（Ｓ）−
［［［（±）−α−（２−ピリジル）ベンジルオキシ］
アセチル］アミノ］プロピル］−４Ｈ−３，１−ベンゾ
オキサジン−４−オン（化合物３）の合成

【００２５】（１）（±）−α−（２−ピリジル）ベン
ジル アルコール ２−ベンゾイルピリジン（５.５０ｇ）のエタノール溶
液（２００ｍｌ）に氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム
（２.２７ｇ）を加え、２．５時間攪拌した。反応液を
濃縮して得られた残渣に水を加え、次いで塩化アンモニ
ウム、食塩を加えた後、エーテルで抽出した。有機層を
無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮した。残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：塩化メチレン
−エーテル）により精製し、標題化合物（５.５０ｇ）
を得た。

【００２６】（２）［（±）−α−（２−ピリジル）ベ
ンジルオキシ］酢酸 ｔｅｒｔ−ブチル エステル （±）−α−（２−ピリジル）ベンジル アルコール
（１.２４ｇ）とブロモ酢酸 ｔｅｒｔ−ブチル エス
テル（０.９７ｍｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
溶液（１５ｍｌ）に、氷冷下、水素化ナトリウム（６０
％ dispersion inoil，２９４ｍｇ）を加え、１.５時間
攪拌した。反応液を５％クエン酸中に注ぎ、エーテルで
抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥し濃縮した。残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（溶離液：塩化メチレン−エーテル）
により精製し、標題化合物（２.０５ｇ）を得た。

【００２７】（３）［（±）−α−（２−ピリジル）ベ
ンジルオキシ］酢酸 塩酸塩 ［（±）−α−（２−ピリジル）ベンジルオキシ］酢酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２.０５ｇ）の塩化メチ
レン溶液（１０ｍｌ）に、氷冷下、トリフルオロ酢酸
（１０ｍｌ）を加え、室温で１４時間攪拌した。反応液
を減圧乾固し、残渣に４Ｎ塩酸−１，４−ジオキサン
（１０ｍｌ）を加え、０.５時間放置後、減圧乾固し、
標題化合物（１.９１ｇ）を得た。

【００２８】（４）２−｛１（Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ］−２−メチルプロピル｝−
５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オ
ン Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド エステルから、実施例
１の（１）の場合と同様にして調製した２−｛［Ｎ−
（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］アミ
ノ｝−６−メチル安息香酸（１.８９ｇ）のＮ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミド溶液（３０ｍｌ）に、氷冷下、水溶
性カルボジイミド塩酸塩（１.３４ｇ）を加えた。室温
で１８時間攪拌後、反応液を減圧濃縮した。残渣をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィ−（溶離液：塩化メチレ
ン−エ−テル）により精製し、標題化合物（１.５２
ｇ）を得た。

【００２９】（５）５−メチル−２−［２−メチル−１
（Ｓ）−［［［（±）−α−（２−ピリジル）ベンジル
オキシ］アセチル］アミノ］プロピル］−４Ｈ−３，１
−ベンゾオキサジン−４−オン ２−｛１（Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）
アミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（３３２ｍｇ）
に、氷冷下、３５％トリフルオロ酢酸−塩化メチレン溶
液（１４ｍｌ）を加え、１.５時間攪拌した。反応液を
減圧乾固し、２−［１（Ｓ）−アミノ−２−メチルプロ
ピル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン
−４−オントリフルオロ酢酸塩を得た。一方、［（±）
−α−（２−ピリジル）ベンジルオキシ］酢酸（３４９
ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液（１０ｍｌ）に、−７
８℃で、Ｎ−メチルモルホリン（０.３ｍｌ）とイソブ
チル クロロホルメート（０.１７ｍｌ）を順次加え、
４０分攪拌した。これにトリエチルアミン（０.１７ｍ
ｌ）を加えた後、上記で調製した２−［１（Ｓ）−アミ
ノ−２−メチルプロピル］−５−メチル−４Ｈ−３，１
−ベンゾオキサジン−４−オン トリフルオロ酢酸塩の
テトラヒドロフラン溶液（１０ｍｌ）を滴下し、０.５
時間攪拌した。室温で１４時間攪拌した後、反応液を減
圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶
離液：塩化メチレン−エーテル）により精製し、標題化
合物（１８３ｍｇ）を得た。

【００３０】実施例４ ２−［１（Ｓ）−［［［（ジ−２−ピリジル）メトキ
シ］アセチル］アミノ］−２−メチルプロピル］−５−
メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン
（化合物４）の合成

【００３１】（１）（ジ−２−ピリジル）メタノール ジ−２−ピリジル ケトン（４.００ｇ）を実施例３の
（１）と同様にして水素化ホウ素ナトリウムで還元し、
標題化合物（３.９２ｇ）を得た。

【００３２】（２）［（ジ−２−ピリジル）メトキシ］
酢酸 ｔｅｒｔ−ブチルエステル （±）−α−（２−ピリジル）ベンジル アルコールの
かわりに（ジ−２−ピリジル）メタノール（２.０５
ｇ）を用い、実施例３の（２）と同様の反応を行うこと
により、標題化合物（１.８４ｇ）を得た。

【００３３】（３）［（ジ−２−ピリジル）メトキシ］
酢酸 塩酸塩 ［（±）−α−（２−ピリジル）ベンジルオキシ］酢酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステルのかわりに［（ジ−２−ピ
リジル）メトキシ］酢酸 ｔｅｒｔ−ブチルエステル
（１.８０ｇ）を用い、実施例３の（３）と同様の反応
を行うことにより、標題化合物（１.９０ｇ）を得た。

【００３４】（４）２−［１（Ｓ）−［［［（ジ−２−
ピリジル）メトキシ］アセチル］アミノ］−２−メチル
プロピル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサ
ジン−４−オン 実施例３の（５）と同様にして、２−｛１（Ｓ）−
［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−メ
チルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオ
キサジン−４−オン（３４０ｍｇ）より調製した、２−
［１（Ｓ）−アミノ−２−メチルプロピル］−５−メチ
ル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン トリ
フルオロ酢酸塩と［（ジ−２−ピリジル）メトキシ］酢
酸 塩酸塩（３４０ｍｇ）の塩化メチレン溶液（１０ｍ
ｌ）に、氷冷下、Ｎ−メチルモルホリン（０.３４ｍ
ｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５１ｍ
ｇ）及び水溶性カルボジイミド塩酸塩（２１２ｍｇ）を
加え、３時間攪拌した。室温で１５時間攪拌した後、反
応液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（溶離液：塩化メチレン−エーテル）により
精製し、標題化合物（１３６ｍｇ）を得た。

【００３５】実施例５ ２−｛１（Ｓ）−［（ベンジルオキシアセチル）アミ
ノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−３，
１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物５）の合成

【００３６】（１）ベンジルオキシ酢酸 エチル エス
テル 水素化ナトリウム（６０％ dispersion in oil，１.３
３ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４５ｍｌ）に
懸濁させ、ベンジルアルコール（３.１０ｍｌ）を加え
た。室温で０.５時間攪拌後、ブロモ酢酸 エチル エ
ステル（３.７０ｍｌ）を滴下し、１時間攪拌した。反
応液を氷水中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を
１Ｎ塩酸、飽和重そう水、飽和食塩水で順次洗浄し、無
水硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮し、標題化合物
（５.２０ｇ）を得た。

【００３７】（２）ベンジルオキシ酢酸 ベンジルオキシ酢酸 エチル エステル（５.２０ｇ）
を実施例２の（２）の場合と同様にして、加水分解する
ことにより、標題化合物（３.６５ｇ）を得た。

【００３８】（３）２−｛［Ｎ−（ベンジルオキシアセ
チル）−Ｌ−バリル］アミノ｝−６−メチル安息香酸 ベンジルオキシ酢酸（８３８ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチル
ホルムアミド（０.０４ｍｌ）と塩化メチレン（２０ｍ
ｌ）に溶かし、塩化オキサリル（０.５６ｍｌ）を加え
た。１時間攪拌後、反応液を減圧濃縮した。実施例１の
（２）で調製した６−メチル−２−（Ｌ−バリルアミ
ノ）安息香酸（１.００ｇ）と炭酸水素ナトリウム（６
０８ｍｇ）の１，４−ジオキサン−水（１：１ ８０ｍ
ｌ）溶液に上記残渣の１，４−ジオキサン溶液（５ｍ
ｌ）を滴下した。室温で２時間攪拌後、反応液を１Ｎ塩
酸−飽和食塩水中へ注ぎ、塩酸酸性とし、酢酸エチルで
抽出した。有機層を１Ｎ塩酸、飽和重そう水、飽和食塩
水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮
し、標題化合物の粗成物（１.７４ｇ）を得た。

【００３９】（４）２−｛１（Ｓ）−［（ベンジルオキ
シアセチル）アミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メ
チル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン ２−｛［Ｎ−（ベンジルオキシアセチル）−Ｌ−バリ
ル］アミノ｝−６−メチル安息香酸（１.７４ｇ）を実
施例１の（４）の場合と同様にして、脱水閉環し、標題
化合物（６０４ｍｇ）を得た。

【００４０】実施例６ ２−［１（Ｓ）−［［（１−アダマンチル）メトキシカ
ルボニル］アミノ］−２−メチルプロピル］−５−メチ
ル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合
物６）の合成

【００４１】（１）２−［［Ｎ−［（１−アダマンチ
ル）メトキシカルボニル］−Ｌ−バリル］アミノ］−６
−メチル安息香酸 トリクロロメチル クロロホルメート（６０μｌ）のテ
トラヒドロフラン溶液（４ｍｌ）に、氷冷下、１−アダ
マンタンメタノール（１６６ｍｇ）とトリエチルアミン
（０.１４ｍｌ）のテトラヒドロフラン溶液（４ｍｌ）
を滴下し、室温で０.５時間攪拌した。反応液を０℃に
冷却後、６−メチル−２−（Ｌ−バリルアミノ）安息香
酸（２４９ｍｇ）とＮ−メチルモルホリン（０.２５ｍ
ｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（１７ｍｌ）
を滴下し、１５分間攪拌した。室温で２０時間攪拌後、
反応液を氷冷５％塩酸中に注ぎ、酢酸エチルで抽出し
た。有機層を１Ｎ塩酸と飽和食塩水で順次洗浄し、無水
硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮した。残渣をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル−ヘ
キサン−酢酸）により精製し、標題化合物（８５ｍｇ）
を得た。

【００４２】（２）２−［１（Ｓ）−［［（１−アダマ
ンチル）メトキシカルボニル］アミノ］−２−メチルプ
ロピル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジ
ン−４−オン ２−［［Ｎ−［（１−アダマンチル）メトキシカルボニ
ル］−Ｌ−バリル］アミノ］−６−メチル安息香酸（７
５ｍｇ）を実施例１の（４）の場合と同様にして脱水閉
環し、標題化合物（７０ｍｇ）を得た。

【００４３】実施例７ ２−｛１（Ｓ）−［（Ｎ，Ｎ−ジフェニルグリシル）ア
ミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物７）の合
成 （１）Ｎ，Ｎ−ジフェニルグリシン ジフェニルアミン（２．９９ｇ）とブロモ酢酸 ｔｅｒ
ｔ−ブチル エステル（２．６ｍｌ）のＮ，Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド溶液（３０ｍｌ）に、氷冷下、水素化ナ
トリウム（６０％ dispersion in oil、０．７７ｇ）を
加え、１時間攪拌した。室温で１時間攪拌後、６０℃で
１８時間攪拌した。反応液を氷冷１０％クエン酸中に注
ぎ酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後
無水硫酸マグネシウムで乾燥し減圧濃縮した。残渣の塩
化メチレン溶液（２０ｍｌ）に、氷冷下、トリフルオロ
酢酸（２０ｍｌ）を加え室温で１５時間攪拌した。反応
液を氷冷１Ｎ水酸化ナトリウム中に注ぎ、アルカリ性条
件下、エーテルで洗浄後、水層を塩酸酸性とし酢酸エチ
ルで抽出した。酢酸エチル層を飽和食塩水で洗浄後無水
硫酸マグネシウムで乾燥し濃縮した。残渣をシルカゲル
カラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル−ヘキ
サン−酢酸）により精製し標題化合物（５１２ｍｇ）を
得た。

【００４４】（２）２−｛１（Ｓ）−［（Ｎ，Ｎ−ジフ
ェニルグリシル）アミノ］−２−メチルプロピル｝−５
−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン Ｎ，Ｎ−ジフェニルグリシン（２６５ｍｇ）とＮ−メチ
ルモルホリン（０．１３ｍｌ）のテトラヒドロフラン溶
液（１０ｍｌ）に−２０℃で、イソブチル クロロホル
メート（０．１５ｍｌ）を滴下し、０．５時間攪拌し
た。トリエチルアミン（０．１６ｍｌ）を加えた後、２
−｛１（Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ア
ミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（３４２ｍｇ）よ
り調製した２−［１（Ｓ）−アミノ−２−メチルプロピ
ル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−
４−オントリフルオロ酢酸塩のテトラヒドロフラン溶液
（１０ｍｌ）を滴下し０．５時間攪拌した。室温で２時
間攪拌後、析出した塩を吸引濾去し濾液を濃縮した。残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：塩
化メチレン−エ−テル）により精製し標題化合物（１７
５ｍｇ）を得た。

【００４５】実施例８ ２−｛１（Ｓ）−［（４，４−ジフェニルブチリル）ア
ミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物８）の合
成 （１）４，４−ジフェニルクロトン酸 メチル エステ
ル （カルボメトキシメチレン）トリフェニルホスホラン
（１０．２２ｇ）をテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）に
懸濁させ室温でジフェニルアセトアルデヒド（５．０
ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（３０ｍｌ）を滴下し５
日間攪拌した。さらに３．５時間加熱還流した後、反応
液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（溶離液：塩化メチレン−ヘキサン）により精製し
標題化合物（６．５６ｇ）を得た。

【００４６】（２）４，４−ジフェニル酪酸 ４，４−ジフェニルクロトン酸 メチル エステル
（２．００ｇ）のエタノール溶液（８０ｍｌ）に１０％
Ｐｄ−Ｃ（２００ｍｇ）を加え、水素雰囲気下室温で４
０時間攪拌した。触媒を吸引濾去後、濾液を濃縮した。
残渣をエタノール（８０ｍｌ）に溶かし、氷冷下、１Ｎ
水酸化ナトリウム（１０．５ｍｌ）を滴下し４日間攪拌
した。反応液を減圧濃縮して得られた残渣を水に溶かし
エーテルで洗浄した。水層を氷冷下塩酸酸性にして析出
した結晶を濾取し、エーテル−ヘキサンより再結晶する
ことにより標題化合物（１．５３ｇ）を得た。

【００４７】（３）２−｛１（Ｓ）−［（４，４−ジフ
ェニルブチリル）アミノ］−２−メチルプロピル｝−５
−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン ２−｛１（Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）
アミノ］−２−メチルプロピル｝−５−メチル−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（３３３ｍｇ）よ
り調製した２−［１（Ｓ）−アミノ−２−メチルプロピ
ル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−
４−オン トリフルオロ酢酸塩と４，４−ジフェニル酪
酸（２４１ｍｇ）の塩化メチレン溶液（１５ｍｌ）に、
氷冷下、Ｎ−メチルモルホリン（０．１３ｍｌ）と１−
ヒドロキシベンゾトリアゾール（１８４ｍｇ）を加え
た。５分間攪拌後、水溶性カルボジイミド塩酸塩（２３
０ｍｇ）を加え室温で２日間攪拌した。反応液を濃縮乾
固して得た残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
（溶離液：塩化メチレン−エーテル）により精製し標題
化合物（３３ｍｇ）を得た。

【００４８】実施例９ ５−メチル−２−［２−メチル−１（Ｓ）−
［［［［［フェニル（２−ピリジル）メチレン］アミ
ノ］オキシ］アセチル］アミノ］プロピル］−４Ｈ−
３，１−ベンゾオキサジン−４−オン（化合物９）の合
成 （１）［［［フェニル（２−ピリジル）メチレン］アミ
ノ］オキシ］酢酸 エチル エステル フェニル ２−ピリジル ケトキシム（１．００ｇ）、
ブロモ酢酸 エチルエステル（０．６４ｍｌ）と水素化
ナトリウム（６０％ dispersion in oil，２２２ｍ
ｇ）を用い、実施例２の（１）の場合と同様にして標題
化合物（７２２ｍｇ）を得た。

【００４９】（２）［［［フェニル（２−ピリジル）メ
チレン］アミノ］オキシ］酢酸 ［［［フェニル（２−ピリジル）メチレン］アミノ］オ
キシ］酢酸 エチルエステル（７００ｍｇ）のエタノー
ル溶液（５０ｍｌ）に、氷冷下、１Ｎ水酸化ナトリウム
（３ｍｌ）を加え室温で１６時間攪拌した。反応液を減
圧濃縮して得られた残渣を水に溶かしエーテルで洗浄し
た。水層を塩酸酸性にして析出した結晶を濾取し標題化
合物（５６６ｍｇ）を得た。

【００５０】（３）５−メチル−２−［２−メチル−１
（Ｓ）−［［［［［フェニル（２−ピリジル）メチレ
ン］アミノ］オキシ］アセチル］アミノ］プロピル］−
４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−４−オン ［［［フェニル（２−ピリジル）メチレン］アミノ］オ
キシ］酢酸（２５６ｍｇ）を実施例３の（５）の場合と
同様にして２−［１（Ｓ）−アミノ−２−メチルプロピ
ル］−５−メチル−４Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−
４−オン トリフルオロ酢酸塩と縮合させることにより
標題化合物（２８６ｍｇ）を得た。本明細書中で、具体
的に上記に述べた実施例に係わる化合物の構造式及び物
理的性状を表１、表２及び表３に示した。

【表１】

【表２】

【表３】

【００５１】また本発明は、これらの実施例に限られる
ものではないことは勿論であり、例えば表４に示した化
合物も本発明に属するものである。

【表４】

【００５２】次に本発明に係わる前記一般式〔Ｉ〕で示
されるベンゾオキサジノン誘導体のプロテアーゼ阻害活
性、好中球走化抑制活性及びカラゲニン誘導空気のうへ
の好中球浸潤抑制作用について行った試験結果を示す。 試験例１ 本発明化合物のセリンプロテア−ゼ阻害活性 本発明に係わるベンゾオキサジノン誘導体のヒト好中球
エラスターゼ（HumanLeukocyte Elastase:ＨＬＥ）、ヒ
ト膿性痰エラスターゼ（Human Sputum Elastase:ＨＳ
Ｅ）、ヒト好中球カテプシンＧ（Human Cathepsin G:Ｈ
ＣＧ）、ウシ膵臓α−キモトリプシン（Bovine Pancrea
tic α-Chymotrypsin:ＣＹＴ）及びウシ膵臓トリプシン
（Bovine Pancreatic Trypsin:ＴＲＹ）を下記の方法で
測定した。

【００５３】１）ＨＬＥ阻害活性の測定 ａ）酵素入手法 ヒト静脈血を遠心分離し、バフィーコートを得、これに
蒸留水を加えて低張処理することにより赤血球を破砕し
た。残りの血球成分に３３．４％コンレイ４００溶液／
９％フィコール溶液（１０：２４）を加え密度勾配遠心
により好中球を取得した。好中球画分はハンクス緩衝液
（Hanks buffer）で３回洗浄して細胞を回収し、使用す
るまで−８０℃で凍結保存した。凍結保存してある細胞
を３７℃の温水で解凍し、９倍量の細胞溶解用緩衝液
（Lysis buffer（0.1M Tris-HCl pH7.5、1M MgCl₂ 0.1%
Brij 35)）に懸濁して、氷冷しながらポロトロンで細胞
を破砕した。１００，０００ｇ、１時間の遠心で沈澱を
除き、上澄に２倍量のトリス塩酸緩衝液（５ｍＭ Ｔｒ
ｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、１Ｍ ＮａＣｌ、１．１％
Ｂｒｉｊ ３５）を加え、粗抽出酵素液とした。次
に、アプロチニンアフィニティカラムに粗抽出酵素液を
吸着させ、５０ｍｌのグリシン塩酸緩衝液（Ｇｌｙｃｉ
ｎｅ−ＨＣｌ ｐＨ３．３、１Ｍ ＮａＣｌ、０．１％
Ｂｒｉｊ ３５）で溶出した活性画分を、ＭＯＮＯ
Ｓイオン交換カラムにかけ、２Ｍの塩化ナトリウムのリ
ニアグラジエントで溶出した活性画分を２５ｍＭ Ｔｒ
ｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．６で透析したのち凍結乾燥し、
酵素標品とした。 ｂ）酵素阻害活性評価法 被検物質をＤＭＳＯ（蛍光分析用）に溶解し、種々の濃
度溶液を作成し、各々２倍量の０．２Ｍ Ｔｒｉｓ−Ｈ
Ｃｌ ｐＨ８．６を加え、被検物質溶液とした。合成基
質（フナコシＬ−１３３５）をＤＭＳＯに溶解し、２倍
量の０．２ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．６を加え、基
質溶液とした。反応は９６穴マイクロプレート（ヌン
ク）を用い、被検物質１濃度に対して６反復の反応を行
った。マイクロプレート１ウエル当り酵素溶液（0.2M T
ris-HCl pH8.6）１４０μｌ、被検物質溶液３０μｌ、
基質溶液３０μｌをそれぞれ３７℃、１０分間プレイン
キュベートしておく。酵素溶液と被検物質溶液を混合
し、１０分間インキュベートしたのち、基質溶液を加え
酵素反応を行った。基質の分解は遊離してくるｐＮＡの
吸光度（４０５ｎｍ）をマイクロプレートリーダー（MT
P-100;コロナ）で測定し、６反復の平均値として算出し
た。被検物質を加えていないときの基質の分解量に対す
る被検物質の阻害濃度をＩＣ₅₀値として求めた。反応液
中のＨＬＥ，合成基質の最終濃度はそれぞれ５．６３ｎ
Ｍ、０．２６２５ｍＭである。

【００５４】２）ＨＳＥ阻害活性の測定 ａ）酵素入手法 ＨＳＥはシグマ社より購入した。 ｂ）酵素阻害活性評価法 ＨＬＥ阻害活性の測定に記述した測定方法と同様である
が、ｐＨ７．０の緩衝液を用いた。反応液中のＨＳＥ、
合成基質（フナコシＬ−１３３５）の最終濃度はそれぞ
れ１０ｎＭ、０．２５ｍＭである。

【００５５】３）ＨＣＧ阻害活性の測定 ａ）酵素入手法 ＨＣＧはコスモバイオ社より購入した。 ｂ）酵素阻害活性評価法 ＨＬＥ阻害活性の測定に記述した測定方法と同様である
が、ｐＨ７．５の緩衝液を用いた。反応液中のＨＣＧ、
合成基質（フナコシＬ−１０１０）の最終濃度はそれぞ
れ５０ｎＭ、０．５ｍＭである。

【００５６】４）ＣＹＴ阻害活性の測定 ａ）酵素入手法 ＣＹＴはシグマ社より購入した。 ｂ）酵素阻害活性評価法 ＨＬＥ阻害活性の測定に記述した測定方法と同様である
が、ｐＨ８．０の緩衝液を用いた。反応液中のＣＹＴ、
合成基質（フナコシＬ−１０１０）の最終濃度はそれぞ
れ３．４ｎＭ、０．２７３ｍＭである。

【００５７】５）ＴＲＹ阻害活性の測定 ａ）酵素入手法 ＴＲＹはシグマ社より購入した。 ｂ）酵素阻害活性評価法 ＨＬＥ阻害活性の測定に記述した測定方法と同様である
が、ｐＨ７．５の緩衝液を用いた。反応液中のＴＲＹ、
合成基質（Z-Arg-pNA;フナコシ）の最終濃度はそれぞれ
２５ｎＭ、１．０ｍＭである。

【００５８】６）結果 １）〜５）の結果を表５に示す。

【表５】 表５から明かなように、本発明に係わる前記一般式
〔Ｉ〕で示される化合物には、セリンプロテアーゼのう
ち特にヒト好中球エラスターゼに対して強い選択的な阻
害活性を有することが認められた。

【００５９】試験例２ 本発明化合物のヒト好中球走化抑制活性 ヒト末梢血から好中球画分をパ−コ−ル密度勾配遠心
（２３００ ｒｐｍ、２０分）で取得（６０％パ−コ−
ル画分、好中球の純度９０％以上）した。あらかじめ、
ケモタキシスチャンバ−（クラボウ）の各ウェル内に好
中球走化因子であるｆＭＬＰ（ホルミルメチオニルロイ
シルフェニルアラニン）を１０^-7Ｍ含有する１３００μ
ｌの培地を加えておき、これに、８×１０⁵個の上記好
中球と各濃度に調整した本発明化合物を含むインタ−セ
ル（５μｍ径ポア）を静置した。５％炭酸ガスを含む培
養器内で３７℃１時間培養したのち、インタ−セル側か
らチャンバ−側のインタ−セル膜面に遊走した細胞数を
以下の方法で計数した。即ち、チャンバ−側のインタ−
セル膜面をＰＢＳで４回洗浄し、メタノ−ルで固定後、
ヘマトキシリン−エオジン液で細胞を染色した。次にイ
ンタ−セルから膜をとりはずしスライドガラスに乗せ、
風乾し、カナダバルサムで封入した。これを顕微下５視
野中の細胞数を計数し、平均値を算出し、遊走細胞数と
した。本発明化合物を加えなかった実験における遊走細
胞数からｆＭＬＰを加えていない対照実験における遊走
細胞数を減じた値を１００とし、本発明化合物による走
化性抑制作用を次式により求めた。

【００６０】

【数１】

【００６１】結果を表６に示す。

【表６】 表６から明かなように、本発明に係わる前記一般式
〔Ｉ〕で示される化合物には、顕著なヒト好中球走化抑
制作用が認められた。

【００６２】試験例３ 本発明化合物のカラゲニン誘導空気のうへの好中球浸潤
抑制作用 ＳＤ系雌性ラット（５週齢１１０−１３０ｇ）を用い、
１群を５匹とした。はじめにエ−テル麻酔下、空気８ｍ
ｌを背部皮下に注入して空気のうを作成した。２４時間
後、空気のうに、１％カラゲニン（和光製）含有生理食
塩水を５ｍｌ注入した。被験薬物（本発明化合物）は、
２００μｌＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に溶解し
カラゲニン注入後すみやかに背部空気のう内に投与し
た。５時間後にラットを卜殺放血し、空気のう内にＥＤ
ＴＡ（エチレンジアミンテトラアセテ−ト：１０ｍＭ）
を含むＰＢＳを５ｍｌ注入した。空気のう内への浸出物
を洗浄・回収し、その一定量をコ−ルタ−カウンタ−で
測定して浸出細胞数を計数した。薬物を投与しなかった
対照群での細胞浸潤数からカラゲニンを投与しなかった
実験の細胞数を減じた値を１００とし、被験薬物のカラ
ゲニン炎症における細胞浸潤に対する作用を次式により
求めた。

【００６３】

【数２】

【００６４】結果を表７に示す。

【表７】 表７から明かなように、本発明に係わる前記一般式
〔Ｉ〕で示される化合物には、カラゲニン誘導空気のう
への好中球浸潤抑制作用が認められた。

【００６５】

【発明の効果】本発明に係わるベンゾオキサジノン誘導
体は新規化合物であり、広く炎症発症の各過程に作用
し、組織破壊を抑制する。特にエラスターゼに対して優
れた阻害作用を有し、かつ細菌由来の化学誘引物質に対
するヒト末梢血抗中球の走化性を抑制し、また動物炎症
モデルにおいて好中球浸潤抑制活性をも合わせもつ。こ
のことから、本発明物質は抗炎症剤又は好中球浸潤抑制
剤若しくはセリンプロテアーゼ阻害剤として有用であ
り、医薬品として使用することが可能である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 早川 和秀 神奈川県横浜市緑区梅が丘６番地２ 日本 たばこ産業株式会社医薬研究所内 (72)発明者 内田 逸郎 神奈川県横浜市緑区梅が丘６番地２ 日本 たばこ産業株式会社医薬研究所内

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式〔Ｉ〕 【化１】 〔式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ²
   は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ³は水素原子
   又は低級アルキル基であり；Ａはハロゲン原子で置換さ
   れてもよいフェニル基、ヘテロ環又はアダマンチル基で
   あり；Ｂは水素原子、ハロゲン原子で置換されてもよい
   フェニル基又はヘテロ環であり；Ｕは 【化２】 であり；Ｖは−Ｏ−、−ＣＨ₂−、＝Ｎ−、−ＮＨ−、
   −ＣＨ＝又は単結合であり；Ｘは−Ｏ−、＝ＣＨ−、−
   ＣＨ₂−又は単結合であり；Ｙは−ＣＨ₂−、−ＮＨ−、
   −Ｏ−又は単結合であり；Ｚは−ＣＯ−又は−ＣＨ₂−
   であり； 【化３】 は二重結合又は一重結合であり；ｌは０乃至３の整数で
   ある〕で示されるベンゾオキサジノン誘導体又は薬学的
   に許容されるそれらの酸付加塩。
2. 【請求項２】医薬として適当な担体及び抗炎症作用有効
   量の請求項１記載の化合物を含んでなる抗炎症剤。
3. 【請求項３】医薬として適当な担体及び好中球浸潤抑制
   作用有効量の請求項１記載の化合物を含んでなる好中球
   浸潤抑制剤。
4. 【請求項４】医薬として適当な担体及びセリンプロテア
   ーゼ阻害作用有効量の請求項１記載の化合物を含んでな
   るセリンプロテアーゼ阻害剤。