JPH0477420A

JPH0477420A - アリスモール関連化合物を有効成分とする肝臓疾患治療薬

Info

Publication number: JPH0477420A
Application number: JP19042290A
Authority: JP
Inventors: Hiromi Kimura; 木村　宏實; Toru Ogata; 小形　徹; Yoshitaka Sato; 芳隆佐藤
Original assignee: Tokyo Tanabe Co Ltd
Current assignee: Tokyo Tanabe Co Ltd
Priority date: 1990-07-20
Filing date: 1990-07-20
Publication date: 1992-03-11
Anticipated expiration: 2014-07-28
Also published as: JP2925677B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、生薬澤瀉から得られるアリスモール又は１０
−ヒドロキシアリスモールを有効成分とすノ′ソスｔ−
ルＩυ 〔ｒロ千ン／”ノスｔ−ル［従来の技術］澤瀉はオモダカ科（Ａ　ｌ　ｉ　ｓｍａｔａｃｅａｅ）
に属するサジオモダカ（ＡｌｉＳｍａ　ｐｌａｎｔａｇ
ｏ−ａｑａｔｉｃａ　Ｌｉｎｎ６　Ｖａｒ。

ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｓａｍｕｅｌｓｓｏｎ　）の根茎
から調製される生薬で古来漢方の薬物療法において利尿
、１喝などの効用か有るとされ、いくつかの処方に配合
される重要生薬である。澤瀉には澱粉、有機酸、カリウ
ム塩、ビタミン類、揮発油の他、プロトスタン型のトリ
テルペンであるアリソール関連化合物及びセスキテルペ
ンのアリスモールなどが含まれ、有効成分としてはコリ
ン、アリソールＡ１アリソールＡ２４−アセテート、ア
リソール１３２３−アセテート、アリソールＣ２３−ア
セテート（以上抗脂肪肝作用）、アリソールＢ（利尿作
用）、１６−メドキシアリソールＢ２３−アセテート、
１６−ヒトロキシアリソールＢ２３−アセテート（以上
冠動脈拡張作用）、アワスモール（降圧作用）等かそれ
ぞれ報告されているが、いまだ肝臓疾患治療作用につい
ては知られていない。

１発明が解決しようとする課題１本発明者らは、肝臓疾患治療薬探索を目的として生薬中
に含まれる有効成分に関して検討を行なってきたところ
、澤瀉の抽出物がラット初代培養肝細胞のＤ−カラクト
サミン障害による＋ｎ　ＶｉｔｒＯの系及びＤ−ガラク
トサミン肝障害ラットを用いた１ｎｖｉｖｏの系それぞ
れにおいて効果を示すことを発見し、その活性成分がア
リスモール又は１０−ヒドロキシアリスモールであるこ
とを究明し、本発明に到達した。

「課題を解決するための手段］本発明によれば、アリスモール又は１０−ヒドロキシア
リスモールを有効成分とする肝臓疾患治療剤か提供され
る。

本発明に使用するアリスモール又は１０−ヒドロキシア
リスモールは、澤瀉をクロロホルム又は６０％エタノー
ルで抽出し、これらの抽出物を適当な混合液を溶出液と
する段階的溶出法によるシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー、ＯＤＳカラムクロマトグラフィー又はＯＤＳ分
取高性能液体クロマトグラフィー（以下）ＩＰＬＣとい
う）等に付し、精製することにより製造することかでき
る。溶出液はヘキサン、ベンセン、クロロホルム若しく
は酢酸エチル等の疎水性有機溶媒、アセトン、ｎ−ブタ
ノール、エタノール若しくはメタノール等の親水性有機
溶媒、又は水から選択し適当な割合で混合する。

なあ、本発明において、その他の生薬から抽出され又は
化学合成されるアリスモール又は１０−ヒドロキシアリ
スモールも使用することかできることは言うまでもない
。

［作用及び発明の効果１アリスモール又は１０−ヒドロキシアリスモールの肝臓
疾患治療作用を以下に詳述する。

−ｉｎ　ＶｉｔｒＯ−の系ラット初代培養肝細胞のＤ−ガラクトサミン障害モデルラット肝細胞を分離し、Ｄ−ガラクトサミン１１１１）
１存在下、被験化合物と共に００２インキユベーター中
で３７℃、４２時間培養した。培養終了後、培養液中に
遊離してきたＧＯＴ活性をセントリフイケム６６０自動
分析機（ベーカー社製）で測定した。

肝細胞障害抑制率を以下の式で求め、その結果を表１に
示した。

［＋ｃｏｎｔｌＧＯＴ−［５ｌＧＯＴ抑制率（χ）＝　　　　　　　　　　　Ｘ　１００［＋
ｃｏｎｔｌＧＯＴ−［−ｃｏｎｔｌＧＯＴ［＋ｃｏｎｔ
ｌＧＯＴ　：　Ｄ−力ラクトサミン１ｍＭ添加コントロ
ール系のＧＯＴ［−ｃｏｎｔｌＧＯＴ　：　Ｄ−ガラクトサミン１ｍＭ
無添加コントロール系のＧＯＴ［Ｓ］ＧＯＴ：Ｄ−ガラクトサミン１ｍＨ＋試料添加系
のＧＯＴｎ　ｖｉｖｏ−の系り一カラクトサミン肝障害ラット２４時時間音させたーｉ　５ｔａｒ系雄性ラツト（７適
齢、日本タレア社製）に生理食塩水に溶解させたＤ−力
ラクトサミン（１）Ｈ７）を４００ｍｙ　／　Ｋ’Ｊの
割合て腹腔的投与した。引き続き２４時時間音させた後
、エーテル麻酔上心臓採血し、得られた血清（３０００
ｒｐｍで２０分間遠心分離）について、ＧＯＴ及びＧＰ
Ｔ活性をセントリフイケム６００自動分析装＠（ベーカ
ー社製）で測定した。なお、被験化合物は、〇一方力ラ
クトサミン投与２時間前３０ＩＩＰＪ／Ｋｇの割合で腹
腔的投与した。結果を表２に示す。

表１ −急性毒性試験動物はＩＣＲ雌性マウス（５〜６週齢、日本チャールス
・リバー社製）を使用し、アリスモール２００η／に’
Ｊ、１０−ヒドロキシアリスモール３００１Ｆｌ　、／
　Ｋ！ｌを、それぞれ腹腔的投与した。被験試料は１％
ＴＷｅｅｎ８０．／　０．５％ＣＭＣ混和液に投与液量
が２０ｄ／υとなるように調製した。投与後、３日間に
わたって一般症状の観察及び体重変化の測定を行った。

最小致死量（ＭＬＤ）　ｉｔｉは、アリスモール２００
Ｒｇ／Ｋｇ以上、１０−ヒドロキシアリスモール３００
＃１ｇ／Ｎ＃以上でめった。

上述の各試験結果を考慮すれば、アリスモール又は１０
−ヒドロキシアリスモールを有効成分とする薬剤は優れ
た肝臓疾患治療剤であるということがでζる。患者への
用量は、年齢、症状等により異なるが、一般に成人に対
し、１日あたり経口で１〜１０００■、好ましくは、１
０〜６００ｍｇ、これを１〜６回、好ましくは、１〜３
回に分けて用いるのが望ましい。

本発明においては、アリスモール又は１０−ヒドロキシ
アリスモールに通常の製剤担体を配合することにより、
錠剤、ハード若しくはソフトカプセル剤、顆粒剤、散剤
、細粒剤若しくは半開等の固形製剤又は注射剤、シロッ
プ剤、水剤、懸濁剤若しくは乳剤等の液剤に調製するこ
とかできる。固形製剤にあっては、腸溶性製剤又は徐放
性製剤等転調製してもよい。配合する製剤担体としては
、所望の剤型に応じ例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、
滑沢剤、被覆剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁剤、界面活
性剤、吸収助剤、安定化剤又は溶剤等を適宜選択して使
用すればよい。具体的な製剤担体としては、澱粉類、デ
キストリン類、α、β若しくはγ−シクロデキストリン
、ブドウ糖、乳糖、ショ糖、マンニット、ソルビトール
、部分α化澱粉、メチルセルロース、エチルセルロース
、ヒドロキシエチルセルロ−スス架橋カルホキジメチルセルロースナトリウム、結晶セル
ロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ステ
アリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、アル
ギン酸ナトリウム、ケイ酸マグネシウム、リン酸水素カ
ルシウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、メタケ
イ酸アルミン酸マグネシウム、ウィテプゾールＷ３５、
ウィテプゾールＥ８５、ウイテプゾールＨ１５、ポリビ
ニルアルコール、無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム
、酸化チタン、タルク、ワックス類、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、
ヒドロキシエチルメチルセルロース、カルホキジメチル
エチルセルロースロースアセテートフタレート、セルロ
ースアセテートマレエート、ヒドロキシプロピルメチル
セルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセル
ロースアセテートサクシネート、ポリビニルアルコール
フタレート、スチレン無水マレイン酸共重合体、ポリビ
ニルアセタルジエチルアミンアセテート、メタアクリル
酸・メタアクリル酸メチルコポリマー、メタアクリル酸
・アクリル酸エチルコポリマー、メタアクリル酸メタア
クリル酸ブチル及びメタアクリル酸ジメチルアミノエチ
ルコポリマー、アクリル酸エチル・メタアクリル酸メチ
ル及びメタアクリル酸塩化トリメチルアンモニウムエチ
ルコポリマー、ゼラチン、グリセリン、プロピレングリ
コール、ラウリルｉｊ［ナトリウム、中鎖脂肪酸トリグ
リセライド、レシチン、ソルビタンモノオレエート、ン
ルビタンセスキオレエート、ポリオキシエチレンソルビ
タンモノオレエート、グリセリルモノステアレート、グ
リセリルモノオレエート、ポリオキシエチレンセチルエ
ーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ショ糖脂肪
酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキ
シエチレン・ポリオキシプロピレンブロック重合体、ポ
リエチレングリコール、ポリヒニルピロリドン、架橋ポ
リビニルピロリドン又はカカオ脂、ラウリン脂、グリセ
ロゼラチン等の油脂類等が挙げられる。

アリスモール及び１０−ヒドロキシアリスモールの製造
例及び具体的製剤例をもって本発明を更に説明する。

［製造例］浮筒（紀伊国屋漢薬局　Ｌｏｔ　ＩＨ９４０９０５Ｙ及
びＩＨ２８２８２６Ｙ　）　　１．５に’Ｊを１回につ
き７Ｊ！のクロロホルムで６０’Ｃて６０分間、計２回
抽出し、クロロホルム抽出液を調製した。その後濃縮乾
固し、クロロホルム抽出画分（以下Ｃ画分という。）５
４ｇを得た。残渣を更に計１４Ｊ！の６０％エタノール
でクロロホルムによる抽出と同様に処理し６０％エタノ
ール抽出液を調製した。６０％エタノール抽出液は十分
濃縮し、水を加えて約２１とし、ｎ−ブタノールと溶媒
分画（ＩＪ！Ｘ３回）を行なった。処理後のｎ−ブタノ
ール部と水相部を各々濃縮乾固あるいは凍結乾燥し、ｎ
−ブタノール画分として４５ｇ、水相両分として１２９
ｇを得た。ｎ−ブタノール画分はざらに、酢酸エチルで
２００ｒｒｉｌＸａ回抽出し、酢酸エチル可溶部（以下
ＥＡ画分という。）１６ｇを得た。

Ｃ画分５４ｇを更に一次シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、ベンゼン（２Ｊ）及びベンゼン／アセト
ン（容量比１０．１〜５．１）の混合液から順次溶出し
、粗物質５，３９を得た。これをＯＤＳカラムクロマト
グラフィーにイ寸し、７０〜１００％メタノールで順次
溶出し、粗物質０．５ｇを得た。これを二次シリカゲル
カラムクロマトグラフィーに付し、ヘキサン／酢酸エチ
ル（容量比１０１１〜１．１）の混合液から順次溶出し
、粗物質１９０ＩＩｔｇを得た。

これを００Ｓ分取ＨＰＬＣに付しく展開溶媒；７０％メ
タノール）、無色油状物としてアリスモール１１０ｍｙ
を得た。

赤外線吸収スペクトル（にＢｒ、ｃｊｌ）：３３７８、
３０８２．２９５８．２９３０，２８６９．１６３９．
１４６２１３８０、１１３２．９５１．８８６゜１日−
核磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣｌ３．　ｐｐｍ）　：０
．９９（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８）　、　　１．００（３
Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８）　。

１．２４（３Ｈ，Ｓ）、　　２．５０（ＩＨ，ｍ）、　
　４．７０（１Ｍ、　ｂｒｓ　）４．７６（ＩＨ，ｂｒ
ｓ）　、　　５．５６（ＩＨ，ｂｒｓ）　。

１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（Ｃ（）ＤＩ３．　Ｏｐ
ｍ）　：２１．２２（Ｑ）、　２１．４１（Ｑ）、　２
３．９９（Ｑ）、　２４．６９（ｔ）。

２９．８７（ｔ）、　３６．９９（ｔ）、　３７．３５
（ｄ）、　４０．１０（ｔ）。

４７．１４（ｄ）、　５４．８４（ｄ）、　８０．５３
（ｓ）、　　１０６．４２（ｔ）　、　　１２１．３３
（ｄ）、　　１４９．５１（Ｓ）、　　１５３．８０（
Ｓ）。

ＥＡ画分１６ｇを一次シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（担体量４５０ｍ、展開溶媒；クロロホルム／メタ
ノール／水＝■４００：２０：１〜■２０：１０：１　
）に付し、最初の溶出液■で溶出されるフラクション７
．５９を引き続き一次ＯＤＳカラムクロマトグラフィー
（担体量３５０ｒＩＪ１．５０〜１００％メタノール）
により精製し、５０％メタノール溶出画分３．８９を得
た。次いで二次シリカゲルカラムクロマトグラフィー（
担体量２７０ｒＩＪＩｌ、展開溶媒；ベンゼン／酢酸エ
チル＝３．１　＞　、更にＯＤＳ分取ＨＰＬＣ＜Ｂ開溶
媒；６０％メタノール）で精製し、１０−ヒドロキシア
リスモール５０ｔｒｔｙ）を得た。一部をアセトンから
再結晶して融点１４２．７〜１４３．３℃の無色柱状結
晶として得た。

赤外線吸収スペクトル（にＢｒ、７）：３３２２．２９
６１．１６３６．１４６１．１３７５．１３００．１２
１３．１１９４１１３１．１０８８，９７９，９５７，
９３２，９０６，８５７．８２６゜１日−核磁気共鳴ス
ペクトル（ＣＤＣｌ３．　ＤＩ）ｍ）　：０．９７（３
Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．８）　、　　０．９８（３Ｈ，ｄ、Ｊ
＝６．８）　。

１．２１（３）１．Ｓ）　、　　５．５０（Ｉｌｌ、ｄ
、Ｊ＝２．９＞　。

１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（ＣＯＣｌ３．　Ｏｐｍ
）　：２１．１３（Ｑ）、　２１．３１（Ｑ）、　２１
．３８（Ｑ）、　２１．４８（ｔ）。

２２．４７（Ｑ）、　２５．０２（ｔ）、　３７．２３
（ｄ）、　４０．４０（ｔ）。

４２．５４（ｔ）、　５０．２３（ｄ）、　５０．６１
（ｄ）、　７５．２４（ｓ）。

８０．１５（Ｓ）、　　１２１．２９（ｄ）、　　１４
９．５５［ｓ）。

［製剤例１］　（錠剤）重量（％）アリスモール　　　　　　　　　４０．０乳糖　　　　
　　　　　　　　　２５．０トウモロコシ澱粉　　　　
　　　１５．０結晶セルロース　　　　　　　　１５．
０ヒドロキシプロピルセルロース　３．０ステアリン酸
マグネシウム　　　ｌ、Ｑポリオキシエチレン（４０）
モノステアレート１．０１００、Ｏ上述の（１）〜（５）を混合し、（７）を溶解した水を
添加して造粒し、ついで乾燥した。得られた顆粒を整粒
したのち、（６）を加えて混合し、これらを圧縮成形し
て１錠２５０ＩｒＩ！Ｊの錠剤を調製した。

［製剤例２１　（ハードカプセル剤）重量（％）１、アリスモール　　　　　　　　　３３，０２　乳糖
　　　　　　　　　　　　　４１．５３　トウモロコシ
澱粉　　　　　　　２０．０４　ヒドロキシプロピルセ
ルロース　３．０５　合成ケイ酸アルミニウム　　　　
１．０６　ステアリン酸マグネシウム　　　１．０７　
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート
　　　　　　　　０．５１００．０常法に従って、上述の（１）〜（４）を混合し、これに
（７）を溶解したエタノールを加えて混和したのち乾燥
し顆粒とした。この顆粒に（５）及び（６）を添加混合
し、ついてハードカプセルに充填し、１個３００ＩＩｔ
！ｊのハードカプセル剤を調製した。

［製剤例３］　（顆粒剤）重量（％）（１）　　１０−ヒドロキシアリスモール　　ｉｏ、　
。

（２）乳糖　　　　　　　　　　　　　７３．０（３）
低置換ヒドロキシプロピルセルロース１０．０（４）ポリビニルピロリドン　　　　　　５．０（５）
ラウリルｉｔ酸ナトリウム　　　　２．０１００．０上述の（１）〜（５）を混合し、水を加えて練合したの
ち押出造粒機を用いて円柱顆粒を調製した。

［製剤例４］　（ソフトカプセル剤）（１）　　１０−ヒドロキシアリスモール（２）ポリエ
チレングリコール４００（３）ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレ
エート（４）精製水重量（％）２５．０６７．０５．０３．０上述の１００．０（１）〜（４）を加熱下に良く混合し、）ｑられた分散
液を常法によりソフトカプセルに充填し、１個４００ｍ
ｇのソフトカプセル剤を調製した。

［製剤例５］　（半開）重量（％）（ｉ）　　ｉｏ−ヒドロキシアリスモール　　５．０（
２）ウィテプゾールＨ１５８５，０（３）ラウリン酸トリグリセライド　　　９．０（４）
レシチン　　　　　　　　　　　　１．０ｉｏｏ、。

上述の（１）〜（４）を加熱下に良く混合し、ついて冷
却、固化した。これを５０〜６０’Ｃで熔融し、３２〜
３５℃にまで冷却したのち半開型に注入し、放冷、固化
し、１個２ｇの半開を調製した。

特許出願人　　東京田辺製薬株式会社

Claims

【特許請求の範囲】

（１）生薬澤瀉から１０−ヒドロキシアリスモールを得
ることを特徴とする１０−ヒドロキシアリスモールの製
造方法
（２）アリスモール又は１０−ヒドロキシアリスモール
を有効成分とする肝臓疾患治療薬