JPH0475583A - ハイブリドーマ系細胞とその細胞により産生されるモノクローナル抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ヒトヘルペスウィルス−６（以下ＨＨＶ−６
と略す）及びＨＨＶ−６感染細胞を同定する技術に関す
る。

〔従来の技術、発明が解決しようとする課題〕ヒトヘル
ペスウィルス−６（ＨＨＶ−６）は最近６人の白血病患
者及びエイズ患者の末梢白血球から発見された新しいヘ
ルペスウィルスである（１４）。

単離された６つのウィルスは全て二重鎖ＤＮＡを有し、
直径２００ｍｍのエンベロープ粒子中に２０面体のカプ
シドを封入している形態を有することか電子顕微鏡によ
り確かめられたことから、ヘルペスウィルス族に属して
いることが同定された。

複数のヘルペスウィルスがウガンダ、ガンビア、コート
ディボアール、ザイールのエイズ患者、幼児のエクサン
テームスービタム及び慢性疲労症候群の患者等からその
後に単離されている。これら単離されたものは全て原型
種ＧＳ由来（７）９ｋｂＤＮＡプローブ（ｐＺＶＨ１４
）ニ対する雑種形成（ハイブリダイゼーション）により
ＨＨＶ−６と関連があるものとして同定された。ヒトＴ
細胞、Ｂ細胞及び神経膠細胞はウガンダ及びガンビア由
来のウィルス株の成長を種々の効果を持って支持した（
９．１５）。

コートディボアールのＨＨＶ−６型はＨＴＬＶ−ｔとＨ
ＩＶ−２の両方が感染した患者から単離され、ＣＤ４と
ＣＤ８陽性の末梢血Ｔ細胞中で成長した。

Ｔ細胞起源の交感神経血液のリンパ球に感染したザイー
ル単離ウィルス（Ｘ２９）はこれまでに成功していない
他の細胞中で成長させようと試みられている（１２）。

ＨＨＶ−６の生物学的知識はその伝染性や風疹以外のヒ
トの病気に対する役割を含めてほとんどなく、血清学的
研究からＨＨＶ−６の感染は一生のうち初期の段階で起
こることが示唆されている（２）。ＨＨＶ−６のＤＮＡ
は１７０　Ｘ１０３個の塩基を有し、このことから少く
とも７０の蛋白質がコードされていると見積もられてい
る。ＨＨＶ−６特異的蛋白質の分析はＨＨＶ−６の正確
な生物学的理解、そのウィルスのヒトの病気に対する役
割及び診断の目的のための基礎である。

〔課題を解決するための手段、作用及び効果〕これら目
的を達成するための第一段階として本発明者らは感染細
胞に対するウサギのポリクローナル抗体及びモノクロー
ナル抗体を開発した。これらの反応剤とヒト血清とがＨ
ＨＶ−６感染細胞に特異的な蛋白質の初期特徴付けのた
めに用いられた。

その結果は以下に示す通りである。

本発明に用いられるＨＨＶ−６原型種ＧＳ（ＨＢＬＶ）
はアメリカのＮＣＩとＮＩＨのアール・シー・ガロ博士
（Ｒ，Ｃ，Ｇａｌ　ｌｏ）、デイ−・ブイ・アブラシ博
士（Ｄ、　Ｖ、　Ａｂ　１ａｓｈ　ｉ　）、ニス・ゼッ
ト・サララフジン博士（Ｓ、Ｚ、　５ａｌａｎｈｕｄｄ
ｉｎ）から贈られたものである。

抗生物質と１０％熱不活性化血清が添加されたアールビ
ーエムアイ（ＲＰＭＩ）メディウム中で生長したヒトＴ
細胞ラインＨ８Ｂ−２（ニーティーシーシー（ＡＴＣＣ
）、シーシーエル（ＣＣＬ）１２０．１．　　シーシー
アールエフ（ＣＣＲＦ）−ＨＳ　Ｂ　−２）の懸濁培養
液がウィルスの繁殖と種々の試験のための抗原を調整す
るのに用いられた。感染実験のためウィルス未感染Ｈ８
Ｂ−２細胞を遠心分離し、その細胞を５％ＣＰＳＲ−１
溶液１＋ｎｌ中に１０６個存在する状態で懸濁させる。

これら未感染細胞１０に対し、無傷のＨＨＶ−６感染細
胞又は凍結後解凍したＨＨＶ−６感染細胞ｌの割合で混
合する。感染したことは特徴的な凝集と、感染細胞の感
染後４〜６日後の肥大化によりわかる。

感染細胞の薄切片を電子顕微鏡で調べると、感染細胞の
核内での大量のウィルス構成成分及びそれと同程度の原
型質空胞及び細胞外におけるエンベロープが形成された
完全な粒子が見られる（データは示さない）。感染価は
文献記載の手順に従って求めた（１．２．１４）。主に
、新鮮なＨ３Ｂ−２細胞（１０６）は感染細胞の溶解物
又は上澄液で希釈して感染させた。５日後に、感染及び
未感染の細胞をリン酸等張緩衝液（以下、ＰＢＳと略す
）で洗浄し、冷アセトンでカバースライド上に固定し、
ウィルス抗原の存在を患者血清Ｎ６２０の標準希釈液を
用いた間接免疫螢光検査法で調べた。感染６日後の細胞
溶解物には１ｍＡ当たり１０’　−１０′１個の感染ウ
ィルス（５０％組織組織感染用量）が生じ、上澄液のウ
ィルス量は通常上記溶解物の１７１０〜１／１００程度
である。ウィルス抗原が感染細胞の９０％以上の割合で
検出された時点で二十日ネズミ及びウサギの免疫化のた
めに集めた。

ラベル化実験のために、未感染Ｈ８Ｂ−２細胞とＨＨＶ
−６感染細胞（感染６日後）とを上記ＰＢＳで１度洗浄
し、１０′個の細胞を不完全ＤＭＥＭ　（ジグ？）１ｍ
ｌ当たり２５μＣ１の「３５Ｓ」メチオニン（特異活性
は１０７２ｃｉ／ｍｍｏｌ。

ネン　デュポン（ＮＥＮ　Ｄｕ　ｐｏｎｔ））又は不完
全ＤＭＥＭ（ジグ７）ｉｎｎ当たり５０μＣ１の［３Ｈ
１グルコサミン（特異活性２５Ｃｉ／ｍｍｏ　Ｉ　：ア
メリカンラジオラベルド　ケミカルズ　インク　セント
ルイス（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ
　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　Ｉｎｃ。

Ｓｔ、　　１ｏｕｉｓ）で２０時間ラベル化を行った。

前述のようにリパ（ＲＩＰＡ）緩衝液（４，５，６，７
）で細胞を可溶化し、コントロールの沈澱物と同量のト
リクロル酢酸と、抗体及びプロティン−Ａアガロースビ
ーズ（ゲンザイム　コープ　ボストン　マス（Ｇｅｎｚ
ｙｍｅ　ｃｏｒｐ、、　Ｂｏｓｔｏｎ、　Ｍａｓｓ）を
有するウィルス感染溶解物とを混合して免疫沈降反応を
行った。沈降物を洗浄し、サンプルバッファー中に加熱
溶解させ、０．２８％Ｎ、　Ｎ’　−ジアリルタルタル
ジアミド（ＤＡＴＤ）と架橋した９％アクリルアミド上
で５ＤＳ−ＰＡＧＥを行い、次に蛍光間接撮影法で分析
した（４、５．６．７）。ＨＨＶ−６感染細胞及び未感
染細胞由来の同量の蛋白質を用いてウェスタンプロット
分析を行った（６）。

〔実施例１〕 ＨＨＶ−６感染細胞に特異的な蛋白質の初期特徴付けを
未感染及び感染Ｈ３Ｂ−２細胞からの［３５Ｓ］メチオ
ニン及び［３Ｈ］グルコサミンでラベルされた全抽出物
の５ＤＳ−ＰＡＧＥ分析を行った（Ｆｉｇ　ｌ、　　レ
ーン１〜４）。数個の蛋白質は感染細胞でも未感染細胞
でも見られ、このことは、分析時における細胞中の４０
％だけがウィルス抗原性を示すということを表わしてい
るらしい。さらに、上記事実はウィルスによる細胞性蛋
白質合成の遮断が起こらなかったか、又は／及び、ウィ
ルスによる細胞性蛋白質合成の誘導が起こったことを示
しているらしい。

本実験においてはＨＨＶ−６感染及び未感染の細胞の開
の放射線計数は等しくなかったが（Ｆｉｇ　ｌ　　レー
ン１，２）、本発明者らはウィルス感染細胞に特異的な
約２０のメチオニンラベルされたポリペプチドを同定し
た。それらポリペプチドの分子量は明らかに３１に〜１
８０にの範囲に入っていた（Ｔａｂｌｅ　１）　。これ
らのうちで、１８０Ｋ。

１３０に、１１０に、１０５に、　９０に、　８２ｋ及
び４１にのポリペプチドが比較的量の多いものであった
。

（Ｆｉｇ　１　　レーン２）そして、１３５　ｋプロテ
ィンはコマフシ−ブルー着色ゲル中でさえ検出された（
データは示さない）。

グルコサミンでラベルされた抽出物からは８つの糖蛋白
（ｇｐ１３５ｋ　、　ｇｐ１２０ｋ　、　ｇｐＨ６ｋ　
、　ｇｐ１０５ｋ　。

ｇｐ９５に、　ｇｐ９０に、　ｇｐ８２ｋ及びｇｐ、５
４　ｋ　）がウィルス感染細胞に特異的なものとして同
定された（Ｆｉｇ　１．　　レーン３及び４）。細胞性
蛋白質との干渉によって明確に区別されているとはいい
難いが、上記データはウィルス感染細胞に特異的な蛋白
及び糖蛋白の存在を示している。

〔実施例２〕 ＨＨＶ−６蛋白質の同定のため、フロインドアジュバン
トで乳化した１×１０Ｂ個のＨＨＶ６感染細胞の溶解物
をウサギに注射して、感染細胞に対するウサギのポリク
ローナル抗体を作成した。

ＩｇＧは、抗ＨＨＶ−６抗体をプロティンＡ−アガロー
スカラム上を通して精製した（６）。

免疫前の血清はいかなる未感染及び感染細胞の蛋白質と
も反応しなかった（Ｆｉｇ　１　　レーン５，６）。

これに対し、いくつかの未感染又はＨＨＶ−６感染細胞
はポリクロナールＨＨＶ−６抗血清により免疫沈降反応
を起こした（Ｆｉｇ　１　　レーン７゜８）。

免疫抗原は細胞性蛋白をも含んでいるので、未感染細胞
との反応性を示したことは驚くべきことではない。しか
し、数種のウィルス感染細胞に特異的な蛋白質をも認識
していることは明らかである（Ｆｊｇ、１　　レーン８
）。細胞性蛋白質に対する抗体を除去するために、精製
ＩｇＧの５００ｋｍ部分標本をｌＸｌ０”個の新鮮未感
染Ｈ８Ｂ−２細胞と混合し、４℃で一夜インキユベート
した。この混合物を１２０００ｇ、３０分遠心分離し、
上清をＨ３Ｂ−２の未感染細胞溶解物、Ｗｌ−３８（ヒ
ト線維芽細胞）ＲＡＪＩ（ＥＢウィルス遺伝子陽性ヒ）
Ｂ細胞）、乳児／Ｓムスターの腎臓（ＢＨＫ−２１）細
胞及びウシ血清アルブミン（Ｂ　Ｓ　Ａ）と混合した０
、５ｍｎのセファ０−ス４Ｂカラムを通した。除去精製
後のウサキ抗ＨＨ〜”−６抗体は未感染細胞とわずかに
反応しただけであった（Ｆｉｇ、１　　レーン９）。実
際、分子量約１８０にのポリペプチドのようなＨＨＶ−
６感染細胞に特異的ないくつかのポリペプチドは、精製
後は分解能が向上し、約３３個のＨＨＶ−６感染細胞特
異的なポリペプチドが同定された。それらポリペプチド
のうち、分子量約１８０に、　１３５に、１２５に、１
２０に、１１６に、１０５に、　８２に、７７に、　７
２に、　６８に、　６４に、　５０に、　４１ｋ及び３
３にの１４種のポリペプチドはより容易に認識でき、他
のものは、より長時間オートラジオグラフィーを行った
後に同定された（テーブル１．）。ウィルス感染細胞に
対する特異的反応性は感染細胞との反応により完全に消
失した。

〔実施例３〕 感染細胞中の蛋白質のＨＨＶ−６特異性をより厳密に同
定するため、本発明者らは次に患者の血清Ｎ６２０を用
いた（１４）。その血清は未感染細胞に対し、免疫沈降
反応及びウェスタンプロットアッセイに対し全く反応性
を示さないものであル（Ｆｉｇ、　２　　Ｌ／　−ンｌ
、　３．５）。３０以上の［ｌｉｓコメチオニンでラベ
ルされたウィルス感染細胞に特異的なポリペプチドが前
記患者血清により免疫沈降反応を起こし、ポリペプチド
のうち分子量が１８０に、１３５に、１２０に、１１６
に、１０５に、　１０２ｋ。

９５に、９０に、８２に、７４に、６４に、５４に、４
１ｋ。

３８ｋ及び３３にのものは極めて容易に検出された。

［’Ｈ］　グルコサミンでラベルされたＨＨＶ−６感染
細胞由来の７種の糖蛋白（ｇｐ１３５に、ｇｐＨ６に、
ｇｐ１０５に、　ｇｐ９５に、　ｇｐ８２に、　ｇｐ６
４ｋ及びｇｐ５４　ｋ　）も、免疫沈降反応を起こした
（Ｆｉｇ、２レーン４）。長時間のオートラジオグラフ
ィーを行うと、もう一つの糖蛋白（ｇｐ３８ｋ）が同定
された。これらの実験によりＨＨＶ−６感染細胞に特異
的な蛋白質をより良く同定できた。

そして、その結果、ＨＨＶ−６は他のヘルペスウィルス
と同様に数種の糖蛋白をコードしているのがわかった。

患者の血清にはＨＨＶ−６感染細胞由来の２０以上のウ
ェスタンプロットで確認し得る蛋白質が含まれていた（
Ｆｉｇ、２　　レーン６）。１２０ｋから１５０にの領
域における蛋白質の強い反応性は、これらの蛋白質のう
ちに主要な免疫決定因子が含まれていることを示してい
る。

いくつかの他の蛋白質（分子量１０５ｋ　、　１０２ｋ
　。

９５に、　９０に、　８２に、　７７に、　７４に、　
６４に、　６０ｋ。

５８に、　５４に、　５０に、　４８ｋ及び３８ｋ）も
認められるが、１３５にの蛋白質は免疫沈降反応が非常
に強いので明確に同定できる。ウェスタンプロットの低
い反応性は患者血清に高い希釈条件（１：５００）を使
用しているためであり、同時にこの低い反応性において
も認定可能な蛋白質はＨＨＶ−６感染細胞に特異性が強
いことを示すものである。

患者の血清はまた他のヒトヘルペスウィルス（１４）に
対する抗体も含んでおり、その他ウェスタンプロットで
反応するＨ８Ｖ−１、Ｈ８Ｖ−２、ＣＭＶ及びＥＢＶ感
染細胞由来のいくつかの蛋白も認められる。（データは
示さない）。

これら４つのウィルスの間では抗原決定基において交叉
反応を起こすことが知られており、ＨＨＶ−６感染細胞
との反応性も抗体の交叉反応の結果であるという可能性
も存在する。患者の血清の量が限られているために他の
ヒトヘルペスウィルスに感染した細胞との反応は行われ
なかった。二者択一の方法として、本発明者らは他のヒ
トヘルペスウィルスに対する抗体の力価が同等以上の正
常人の血清の試験を行った。

血清ＮＢとＬＨＦはＣＭＶに対する抗体の力価が高＜　
（１：１０２４０）　、血清ＬＲとＪＪは高いＨ８Ｖ−
１とＨ８Ｖ−２力価（＞ｌ：１０２４０）を有すると共
にＥＢＶに対する抗体価は（＞１：１６０）である。Ｈ
ＨＶ−６感染細胞との蛍光抗体アッセイにおいて、４つ
の血清は全て１：ｌＯの希釈度においてさえ比較的低い
値の蛍光しか示さない。

これらの血清は全て未感染細胞とは反応せず、それらの
うちの１つの反応性はＦｉｇｌのレーン７に示される。

患者の血清と比較して、全ての正常人の血清はＨＨＶ−
６感染細胞由来の分子量１３５にのポリペプチドと免疫
沈降反応を起こしくＦｉｇ、２　　レーン８−１１）、
長時間のオートラジオグラフィーによりわずかにラベル
された９５にと８２にのポリペプチドが検出された。本
発明者らのウェスタンプロットの実験条件下では、これ
ら血清は１３５に蛋白が非常に大きなスポットなる５０
倍希釈条件下でさえＨＨＶ−６特異的蛋白質を何−つ示
さなかった（データは示さない）。　１３５に蛋白との
強い反応性はＨＨＶ−６の過去の感染によるか、又は他
のヘルペスウィルスの抗原決定因子との交叉反応による
ものかもしれない。

正常人の血清はＨＨＶ−６蛋白との反応性は限られてい
るので、患者の血清中に見出されるＨＨＶ−６に対する
特異的反応性は特異的抗体によるものと考えられる。そ
のデータはまた、ＨＨＶ−６と他のヘルペスウィルスの
間の抗原の交叉反応は少ないことも示唆している。

〔実施例４〕 ウィルス感染細胞に対して特異的な個々の蛋白質を同定
するためにモノクローナル抗体を調整した。生後４〜６
週目のＢ　Ａ　Ｌ　Ｂ／Ｃ二十日ネズミに３Ｘ１０’個
の感染細胞を３週ごとに腹腔内投与して免疫化させる。

免疫前の血清は全ての蛋白と反応しなかった（Ｆｉｇ、
３　　レーン１と２）一方、免疫後のマウス由来の血清
は未感染細胞及びＨＨＶ−６感染細胞由来の数種のポリ
ペプチドと免疫沈降反応を起こした（Ｆｉｇ、３　　レ
ーン３，４）。分子量の明らかな１０種の蛋白（１８０
ｋ。

１３５に、１１６に、１１０に、１０５に、１０２に、
　９５に、　９０ｋ。

８２ｋ及び４１ｋ）はＨＨＶ−６感染細胞に対して特異
的であり、この反応性は未感染細胞由来の血清中の抗体
を除去した後でさえ消失しない（データは示さない）。

このマウスの牌臓は文献記載の方法（４，７）によりＳ
ｐ２１０Ａｇ、　１４骨髄腫細胞と融合した。

ＨＨＶ−６特異的抗体を産生ずるいくつかの融合細胞は
、酵素免疫法（ＥＬＩＳＡ）と免疫蛍光法（ＩＦＡ）で
それらのＨＨＶ−６感染細胞に対する特異的反応性に基
いて最初に選択された。

これらのクローン由来の培養液上清は次に［３５Ｓ］メ
チオニンでラベルされた未感染並びに感染細胞及び融合
細胞クローンとの免疫沈降反応とに使用され、ＨＨＶ−
６特異的ペプチドは再度クローン化され、再び選別され
た。

本発明のモノクローナル抗体はいずれも未感染細胞由来
のポリペプチドとは検出可能な沈澱反応を起こさなかっ
た（Ｆｉｇ、３　　レーン５．７．９．１２゜１３）。

しかし、各抗体はｌ又は２以上の［３５ｓ　］メチオニ
ンでラベルされたＨＨＶ−６感染細胞由来のポリペプチ
ドと沈澱を形成した（Ｆｉｇ、３　　レーン６、８．１
０．１１．１４）。これら抗体は明らかに異なる免疫沈
降様式を与えることから、各抗体は異なるものであるこ
とがわかる。幅広く泳動する分子量８２にと、拡散した
１０５にの２つのポリペプチドはいずれもモノクローナ
ル抗体２Ｄ６と免疫沈降反応を起こす。オートラジオグ
ラフィーをより長時間行うと分子量約１１６に、　７２
ｋ。

３８に、　３６ｋ及び３１にの５つのラベルされたポリ
ペプチドがかすかに現れる。

モノクローナル抗体７Ａ２は１０２にの主要なポリペプ
チド及びかすかにラベルされた７４にのポリペプチドと
反応する（Ｆｉｇ、３　　レーン８）。

分子量的１１６に、　６４ｋ及び５４にの３つの強力に
ラベルされたポリペプチド及び数種のかすかにラベルさ
れたポリペプチド（１０５に、　６０ｋ及び４５ｋ）は
いずれもモノクローナル抗体６Ａ５Ｈ７と免疫沈降反応
を起こす。（Ｆｉｇ、３　　レーン１０）。

モノクローナル抗体９Ａ５Ｄ１２は１１０ｋ及び４１に
のポリペプチドと免疫沈降反応を起こす一方、抗体１２
Ｂ　３　Ｇ　４は分子量約１３５にの単一のポリペプチ
ドを認識する（Ｆｉｇ、３　　レーン１４）。交叉沈降
実験によると認識された蛋白は抗原的に区別されており
、これらすべてのモノクローナル抗体は蛍光免疫法によ
るウィルス感染細胞との反応性の点で極めて特異的であ
った。

ＨＨＶ−６特異的抗体のハイブリドーマ化作業を２度行
っているので、複数のペプチドとの沈澱がポリクローリ
ナル抗体としての性質に起因しているとは考え難く、む
しろ前駆体としての関係又は抗原決定基を共通としてい
ること及び／又は蛋白質複合体が沈澱しているためであ
る可能性が大きい。　［３Ｈ］グルコサミンでラベルさ
れた抽出物をテストすると、モノクローナル抗体は数種
の糖蛋白と免疫沈降反応しくＦｉｇ。

４、レーン１〜７）未感染細胞と反応する抗体はなかっ
た（データは示さない）。抗体２Ｄ６゜１３Ｄ６及び２
Ｄ４は２つの幅広く泳動する糖蛋白（ｇｐ１０５ｋ及び
ｇｐ８５ｋ）と反応する（Ｆｉｇ　４、　　レーン１．
３及び４）。さらに、これら抗体はかすかにラベルされ
た４種の糖蛋白（ｇｐＨ６ｋ、　ｇｐ３８に、　ｇｐ３
６ｋ及びｇｐ３１ｋ）と免疫沈降反応を起こす。（Ｆｉ
ｇ４の矢印）、それら糖蛋白は前駆体又は分断生成物で
あることを示していると考えられる。

抗体６Ａ５Ｇ７．６Ａ５Ｇ３及び１４Ｂ３は３種の糖蛋
白（ｇｐＨ６に、　ｇｐ６４に、　ｇｐ５４ｋ）と免疫
沈降反応を起こす（Ｆｉｇ、４、　　レーン２，５及び
６）。

七ツクローナル抗体７Ａ２はｇｐ１０２ｋ及び分子量７
２１１０５にの範囲にあるかすかにラベルされた糖蛋白
と免疫沈降反応する。抗体９Ａ５Ｄ１２及び１２８３　
Ｇ　４はＨＨＶ−６感染細胞由来のいかなる糖蛋白とも
反応しない。

これらの結果、ＨＨＶ−６感染細胞に３種類の異なる特
異性を持つ糖蛋白か存在することを示しており、プロセ
ッシング及びこれらの蛋白合成に関する研究の進展によ
りピリオン会合の決定及びこれら抗体の中和能力が現在
進展しつつある。

ＨＨＶ−６蛋白の同定、単離、生化学的、機能的特徴付
けは診断の目的及びＨＨＶ−６の合理的な生物学的分析
の基礎となる。本明細書はＨＨＶ−６感染細胞に特異的
な蛋白及び糖蛋白の同定を報告した最初のものである。

これらの蛋白のいくつかはウィルスで誘導された細胞性
蛋白質であるため、本発明者らは、前述の同定した蛋白
をＨＨＶ−６感染細胞特異的なものと称した。患者血清
の反応性は同定された蛋白のＨＨＶ−６特異性を強く示
唆するものである。

又、ウィルス染色体上の前記蛋白質をコードする遺伝子
のマツピングにより前記蛋白が実際にウィルスにコード
されているという明確な証拠が得られるであろう。ＨＨ
Ｖ−６の１７０Ｘ１０”塩基（１７０ｋｂ）を持つ染色
体には少くとも７０の蛋白がコードされているはずであ
り、本明細書の中で同定された蛋白質数はＨＨＶ−６に
コードされているはずのものより少ないものである。

本発明者らによるＨＨＶ−６蛋白合成速度の決定に対す
る試みは　ａ）ＨＨＶ−６の生長速度が遅いこと　ｂ）
同時に感染しないこと　Ｃ）未感染細胞の複製、及び　
ｄ）豊富なＨＨＶ−６感染を補助する能力がある単層細
胞の欠如等の理由により成功というには程遠いものであ
る。

ＨＨＶ−６がどのようにしてそれ程長い間同定から逃れ
ていたかは興味のあるところであるが、それは、それは
ＨＨＶ−６のリンパ趨向性、潜在性、活性化の頻度及び
使用される検出システムに関連しているかもしれない。

エイズやリンパ増殖障害の患者からのウィルスの単離は
、潜伏中のウィルスの活性化によるか、又はウィルスと
特異的な病気との関連性が明らかにされるかしたときの
どちらかの場合である。同様に、ＨＨＶ−６の生体内で
の潜伏部位や活性化のための条件が研究されている。

これらの研究は本発明者らが作成したモノクローナル抗
体のような特異的プローブにより促進されるだろう。本
明細書に示されたデータはＨＨＶ−６感染細胞に特異的
な蛋白及び糖蛋白の同定を行った最初の報告であり、よ
り詳しい特徴付けは現在行われているところである。予
備的な研究では、別々に単離されたＨＨＶ−６の雑多な
性質はインビトロにおける親和性と制限酵素切断部位の
違いにも現れている（１１）。これらの単離物群がＨＨ
Ｖ−６内の異なる菌株を示すのか、ＨＨｌ−１及びＨＨ
Ｖ−２に示されるような密接に関連する異なるウィルス
に属するのかはもうすぐ決められるだろう。本発明者ら
が調製した原型株ＧＳに対するモノクローナル抗体は、
入手できる単離ウィルスの属及び型の相違と、それら相
互の生物学的特徴の関連を調べるのに理想的な試薬であ
る。

これらのモノクローナル抗体はまた、新しくウィルスを
単離する際、インビトロにおける感染を監視するため及
び様々な病理的状態や潜伏時におけるウィルス抗原の存
在を決定するのに価値があり、これらは全てＨＨＶ−６
の完全な病理学的理解に必要なものである。

アール・シー・ガｏ　（Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ）　、デイ
−・ブイ・アブラシ（Ｄ、　Ｖ、　Ａｂ　１ａｓｈ　ｉ
）及びニス、ゼット、サラフジン（Ｓ、　Ｚ、　Ｓａｌ
　Ｉａｈｕｄｄｉｎ）がＨＨＶ−６原型株ＧＳと患者の
血清を提供した。モノクローナル抗体のうち２Ｄ６．２
Ｄ５．２Ｄ４及び６Ａ５Ｇ３はＩｇＧ２ｂに分類される
。また、モノクローナル抗体７Ａ２と１２Ｂ　３　Ｇ　
４はＩｇＧ１に分類され、モノクロ−チル抗体９Ａ５Ｄ
１２はＩｇＧ２ａに分類される。

全てのハイブリドーマ細胞系はユニバーシティ　オブ　
カンザス　メディカル　センター（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ　　ｏｆ　　Ｋａｎｓａｓ　　Ｍｅｄｉｃａｌ　　Ｃ
ｅｎｔｅｒ）　　、　スクール　オブ　メディスン（Ｓ
ｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、デパートメン
ト　オブ　マイクロバイオロジーモレキュラー　ジュネ
ティクス　アンド　イムノロジー（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎ
ｔ　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、　Ｍｏ１ｅｃｕ
ｌａｒ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏ
ｇｙ）　、サーティナインス　アンド　レインボー　ブ
ルーバード（３９ｔｈ　ａｎｄ　Ｒａｉｎｂｏｗ　Ｂｌ
ｖｄ、　）、カンザス　シティ（Ｋａｎｓａｓ　Ｃ１ｔ
ｙ）　、カンザス（Ｋａｎｓａｓ　）６６１０３に預け
られている。

下記の２Ｄ６．７Ａ２．６Ａ５Ｇ３．９Ａ５Ｄ１２及び
１２８３　Ｇ　４と命名されたハイブリドーマ細胞系列
はアメリカン　タイプ　ティシュ−カルチ＋−（Ａｍｅ
ｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ
（ＡＴＣＣ））１２３０１パークローンドライブ（Ｐａ
ｒｋｌａｗｎＤｒｉｖｅ）　０ツクビル、メリーランド
（Ｒｏｃｋｖ　ｉ　１１ｅ。

Ｍａｒｙ　１ａｎｄ　）２０８５２に１９８９年５月４
日から寄託しである。

本発明のモノクローナル抗体は、ヒトヘルペスウィルス
−６（聞■−６）の構造蛋白並びに非構造蛋白及びＨＨ
Ｖ−６感染細胞に特異的な蛋白質を同定し、免疫学的特
徴を解明するのに宵月である。

又、当業者には周知の免疫化学的手法を用いることで、
モノクローナル抗体は、臨床標本から新規なＨＨＶ−６
を同定するのにも使用されるだけでなくヒトの組織及び
体液からＨＨＶ６抗原の存在を決定及び同定するのにも
使用できる。

蛋白質をコードしているウィルス遺伝子はラムダｇｔ１
１表現系又はＨＨＶ−６ＤＮＡ　（遺伝子ライブラリー
）又はＨＨＶ−６感染細胞（ＣＤＮＡライブラリー）か
らの断片を含む他の表現系のモノクローナル抗体で試験
を行うことで容易に同定できる。−度同定できればその
遺伝子の配列と発現型は決まり、それにより大量のウィ
ルス蛋白が製造できる。

その蛋白質はワクチンの製造やヒト血清の抗原力価の測
定に利用される。

これらのモノクローナル抗体は、ヒト血漿中の抗体力価
の決定のための抗原捕捉試験に利用され、又、逆にヒト
血漿の抗原力価の決定に使用するアフィニティ精製蛋白
としても使用できる。

これら抗体はインビトロにおける感染のモニターとして
も使用できる。例えばこのウィルスはバラ疹を起こすこ
とで知られている。また、慢性疲労症候群と関連がある
かも知れない。

上記及び他の使用は当業者には容易に行える。

上記実施例その他の記載は単なる例示であり、本発明は
それらに限定されるものではない。

他の実施例、使用例は当業者には容易に思いつくもので
あろう。

〔引用文献〕

１、　アブラシ、デイ−、ブイ（Ａｂｌａｓｈｉ、　Ｄ
、Ｖ、）、ニス、ゼット　サラツブイン（Ｓ、　２．５
ａｌａｈｕｄｄｉｎ）、ニス、エフ、ジョゼフス（Ｓ、
　Ｆ、　Ｊｏｓｅｐｈｓ）、エフ、イマム（Ｆ、　Ｉｍ
ａｍ）、ピー、ルソ（Ｐ、　Ｌｕ５ｓｏ）、アール、シ
ー、ガｏ　（Ｒ，Ｃ，Ｇａｌ　Ｉｏ）　、シー、エル、
ハング（Ｃ，Ｌ、　Ｈｕｎｇ）、ジェイ、レンプ（Ｊ。

Ｌｅｍｐ）　、アンド　ピー、デイ−、マーカム（ａｎ
ｄ　Ｐ、Ｄ、Ｍａｒｋｈａｍ）、　１９８７．　　ヒト
細胞中のＨＢＬＶ　（又はＨＨＶ−６）　　ネイチャー
（ロンドン）（Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ））３２９
．２０７゜２、　アブラシ、デイ−、ブイ（Ａｂｌａｓ
ｈｉ、　　Ｄ、Ｖ、）、ニス、エフ、ジョゼフ（Ｓ、　
Ｆ、　Ｊｏｓｅｐｈｓ）、エイ。

ブーツバインダー（Ａ、　Ｂｕｃｈｂｉｎｄｅｒ）、ケ
イ、ヘルマン（Ｋ、Ｈｅｌｌｍａｎ）　、ニス、ナカム
ラ（Ｓ、　Ｎａｋａｍｕｒａ）、ピー、ルソ（Ｐ、Ｌｕ
５ｓｏ）　、エム、カブラン（Ｍ、　Ｋａｐ　ｔａｎ　
）、ジエイ、ダールベルグ（Ｊ。

Ｄａｈｌｂｅｒｇ）　、ニス、メモン（Ｓ、　Ｍｅｍｏ
ｎ　）。

３、　アグト、エイチ、（Ａｇｕｔ、　Ｈ，）、デイ−
、グエタード（Ｄ、Ｇｕｅｔｑｒｄ）　、エイチ、コラ
ンドル（Ｈ。

Ｃａｌ　１ａｎｄｒｅ）、シー、ダオゲット（Ｃ，Ｄａ
ｎｇｕｅ　ｔ　）、エル、モニタグニエ（Ｌ、　Ｍｏｎ
　ｔａｇｎ　ｉｅｒ　）、　　ンエイ。

エム、ミクレア（Ｊ、　Ｍ、　Ｍｉｃｌｅａ）、エイチ
、バウマン（Ｈ，Ｂａｕｒｍａｎｎ　）、アンド　エイ
、ゲサイン（ａｎｄ　Ａ、Ｇｅ５ｓａｉｎ）　。１９８
８ヒトヘルペスウィルス−６、ＨＴＬＶ−１及び旧Ｖ〜
２の合併感染、ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）１１．　７
１２゜４、　パラカントラン、エフ、（Ｂａｌａｃｈａ
ｎｄｒａｎ、　Ｎ、）、デイ−、バーニッシュ（Ｄ、Ｈ
ａｒｎｉｓｈ）　、ダブリュー、イー、ロールズ（Ｗ、
Ｅ、Ｒａｗｌｓ）　、アンドニス、バシェッティ（ａｎ
ｄ　Ｓ、　Ｂａｃｃｈｅｔｔｉ）。

１９８２、モノクローナル抗体により決定され単純ヘル
ペスウィルス　タイプ２の糖蛋白。シェイ、パイロル（
ＪＪｉｒｏｌ、）　　４４：３４４−３５５゜５、　パ
ラカントラン、エフ、（Ｂａｌａｃｈａｎｄｒａｎ、　
Ｎ、）、アンド　エル、エム、フットーフレッチャ−（
Ｈｕｔｔ−Ｆｌｅｔｃｈｅｒ）１９８５．　　単純ヘル
ペスウィルス　タイプ２の糖蛋白１ｇＧの合成及びプロ
セッシング、ジェイ、パイロル（Ｊ、　Ｖｉｒｏｌ、　
）５４　：　８２５−８３２゜ ６、　パラカントラン、エフ、（Ｂａｌａｃｈａｎｄｒ
ａｎ、　Ｎ、）、デイ−、イー、オーバ（Ｄ、Ｅ、０ｂ
ａ）　、アンドエル、エム、フットフレッチャ−（ａｎ
ｄ　Ｌ、Ｍ。

Ｈｕｔｔ−Ｆｌｅｔｃｈｅｒ）１９８７．単純ヘルペス
ウィルスタイプｌ及びタイプ２、ニブシュタインパール
（ＥＢ）ウィルス及びサイドメガロスウィルスの間の抗
原交叉反応、ジェイ、パイロル（Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、）　
　６１：１１２５−１１３５゜７、　パラカントラン、
エフ、（Ｂａｌａｃｈａｎｄｒａｎ、　Ｎ、）、ジェイ
、ピタリ（Ｊ、Ｐｉｔｔｑｒｉ）　、アンド　エル。

エム、フットーフレッチ−？−（ａｎｄ　Ｌ、Ｍ、　Ｈ
ｕｔｔＦｌｅｔｃｈｅｒ）、　１９８６．　　ニブシュ
タイン−バール（ＥＢ）ウィルスにより誘導される初期
膜蛋白のモノクローナル抗体による検出、ジェイ、パイ
ロル（Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、）　　６０：３６９−３７５８
、　ビベルフェルド、ピー（Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ、　Ｐ
、）、ビー、クラマルスキー（Ｂ、Ｋｒａｍａｒｓｋｙ
）　、ニス。

セット、サララブイン（Ｓ、　Ｚ、　５ａｌａｈｕｄｄ
ｉｎ）、アンド　アール、シー、ガｏ　（ａｎｄ　Ｒｏ
Ｃ，Ｇａ１ｌｏ）１９８７　１．１ンパ増殖症患者から
単離された新しいＢ−リンパ球栄養性ＤＮＡウィルス（
ＨＢＬＶ）の超構造特性、ジエイ、ナト、カン、インス
ト（Ｊ、　Ｎａｔ、　Ｃａｎ、　Ｉｎ５ｔ、　）　７９
：９３３−９４１９、　ダウニング、アール、シー（Ｄ
ｏｗｎｉｎｇ、　Ｒ，Ｃ，）、エフ、スウェンカムボ（
Ｎ、Ｓｗｅａｎ　Ｋａｍｂｏ）　、デイ−、セルワダ（
Ｄ、　Ｓｅｒｗａｄｄａ）、アール、ホネス（Ｒ，Ｈｏ
ｎｅｓｓ　）、デイ−、クララフォード（Ｄ、Ｃｒａｗ
ｆｏｒｄ）、アール、ジャレット（Ｒ，ジャレット）、
アンド　ビー、グリフイン（ａｎｄ　Ｂ、Ｇｒｉｆｆｉ
ｎ）、　　１９８７．　　ウガンダ由来のヒトリンパ栄
養性ヘルペスウィルスの単離、ランセット（Ｌａｎｃｅ
ｔ　）　ＩＩ　、　３９０゜１０、ジョゼフ、ニス、エ
フ、（Ｊｏｓｅｐｈｓ、　　Ｓ、Ｆ、）、ニス、ゼット
、サララブイン（Ｓ、　Ｚ、　５ａｌａｈｕｄｄ　ｉｎ
）、デイ−、ブイ、アブラン（Ｄ、　Ｖ、　Ａｂｌａｓ
ｈｉ）、エフ、シャヒタ−（Ｆ、５ｃｈａｃｈｔｅｒ）
　、ｙ−フ、ワンゲスドール（Ｆ、　Ｗａｎｇ−ｓｔａ
ａｌ　）、アンド　アール、シー、ガｏ（ａｎｄ　Ｒ，
Ｃ，Ｇａ１ｌｏ）　１９８６　　ヒトＢリンパ栄養性ウ
ィルスの染色体分析。サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　
２３４　：６０１−６０３゜１１、　　ジョセフ、ニス
、エフ、（Ｊｏｓｅｐｈｓ、　Ｓ、Ｆ、）、デイ−、ブ
イ、アブラン（Ｄ、Ｖ、　Ａｂｌａｓｈｉ）、ニス、セ
ット、サララブイン（Ｓ、　Ｚ、　５ａｌａｈｕｄｄｉ
ｎ）、ビー、クラマルスキー（Ｂ−Ｋｒａｍａｒｓｋｙ
）　、アール、ビー、フレンザ（Ｒ，Ｂ、　Ｆｒｅｎｚ
ａ）、ビー、ペレット（Ｐ、Ｐｅ１ｌｅｔ）、エイ、ブ
ーツバインダー（Ａ、　Ｂｕｃｈｂｉｎｄｅｒ）、ニス
、メモン（Ｓ、　Ｍｅｍｏｎ　）、エフ、ウォングース
トール、（Ｆ、　Ｗｏｎｇ−ｓｔａｌｌ）、アンド　ア
ール、シー、ガｏ　（ａｎｄ　Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ）Ｈ
ＨＶ−６の分子的研究、　　ジェイ、ビロロジカルメソ
ッズ（Ｊ、Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ）
２１：１７９−１９０ １２、　　ロペツ、シー、ビー（Ｌｏｐｅｚ、　Ｃ，Ｐ
、）　、ジェイ、ペレット（Ｊ、Ｐｅ１ｌｅｔｔ）　、
シー、ステワード（Ｃ，Ｓｔｅｗａｒｔ）　、シー、ゴ
ールドスミス（Ｃ。

Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ）、ケイ、サンデルリン（Ｋ、　５
ａｎｄｅｒｌｉｎ）、ジェイ、ブラック（Ｊ、Ｂｌａｃ
ｋ）　、デイ−ワーフイールド（Ｄ、Ｗａｒｆｉｅｌｄ
）、アンド　ピーフェオリノ（ａｎｄ　Ｐ、Ｆｅｏｒｉ
ｎｏ）１９８８ヒトヘルペスウィルス−６の特徴　ジェ
イ、インフェクト、ディス（Ｊ、　Ｉｎｆｅｃｔ、　Ｄ
ｉｓ、　）　　１５７　　：１２７１−１２７３゜１３
、ロイツマン、ビー、　（Ｒｏｉｚｍａｎ、　Ｂ、　）
アンドダブリュー、バターラン（ａｎｄ　Ｗ、Ｂａｔｔ
ｅｒｓｏｎ）１９８５　　ヘルペスウィルスとその複製
、ｐ、　４９７５２６イ２　ビー、エフ、フィールズ　
エトオル（ニド）　　（Ｉｎ　Ｂ、Ｎ、Ｆｉｅｌｄｓ　
ｅｔ　ａｌ、（ｅｄ））、ピロロジー（Ｖｉｒｏｌｏｇ
ｙ）　　ラーベンプレ人ニューヨーク（Ｒａｖｅｎ　Ｐ
ｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）。

１４、　　サラフディン、ニス、セット（Ｓａｌａｈｕ
ｄｄｉｎ。

Ｓ、２．）、デイ−、ブ仁アブラシ（Ｄ、　Ｖ、　Ａｂ
　１ａｓｈｉ）、ビー、デイ−、マーカム（Ｐ、　Ｄ、
　Ｍａｒｋｈａｍ）、ニス、エフ、ジョセフ（Ｓ、　Ｆ
、　Ｊｏｓｅｐｈｓ）、ニス。

シュツルゼネガー（Ｓ、　Ｓｔｕｒｚｅｎｅｇｇｅｒ）
、エム。

カブラン（Ｍ、　Ｋａｐ　ｌ　ａｎ　）、ジー、ハリガ
ン（Ｇ、　Ｈａｌｌｉｇａｎ）、ビー、ビバーフェルド
（Ｐ、　Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ）、エフ、ウォングストー
ル（Ｆ、　Ｗｏｎｇ−ｓｔａａｌ）、ビクラマルスキ−
（Ｂ、Ｋｒａｍａｒｓｋｙ）　、アンドアール、シー、
ガ０（ａｎｄ　Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ）　１９８６リンパ
球栄養障害患者中の新しいウィルスＨＢＬＶの単離　サ
イエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　２３４　５９６−６０１
゜ １５．テダー、アール、ニス、（Ｔｅｄｄｅｒ、　Ｒ，
Ｓ、）、エム、ブリックス（Ｍ、　Ｂｒ　１ｇｇ５　）
、シー、エイチ。

カメロン（Ｃ，Ｈ，Ｃａｍｅｒｏｎ）　、アール、ホネ
ス（Ｒ。

Ｈｏｎｅｓｓ）　、デイ−、ロノく一トラン（Ｄ、　Ｒ
ｏｂｅｒｔｓｏｎ）アンド　エイチ、ホワイトル（ａ口
ｄＨ，Ｗｈｉｔｔｌｅ）、　　１９８７新規なリンノ（
球栄養性ヘルペスウィルス。

ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）　　ｉｉ　：３９０−３９
２゜１６、ヤマニシ、ケイ、　（Ｙａｍａｎｉｓｈｉ、
　ｋ、　）、テイーオクノ（Ｔ、　０ｋｕｎｏ）、ケイ
、シラキ（Ｋ、　５ｈｉｒａｋｉ）、エム、タカハシ（
Ｍ、Ｔａｋａｈａｓｈｉ）　、ティー、コンドウ（Ｔ、
Ｋｏｎｄｏ）　、ワイ、アサノ（Ｙ、　Ａｓａｎｏ）ア
ンド　ティー、クラツ（ａｎｄ　Ｔ、Ｋｕｒａｔａ）。

１９８８　　発疹の原因物質としてのヒトヘルペスウィ
ルス−６の同定 ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）　　ｉ　：１０６５−１０
６７表Ｉ　　ＨＨＶ−６ｉ染細胞に特異的な蛋白質＊　
第１図−第４図のＨＨＶ’−６感染細胞特異的蛋白＃　
患者血漿により免疫沈降反応をしたものは括弧で囲っで
ある。

【図面の簡単な説明】

第１図はＨＨＶ−６感染細胞に特異的な蛋白質の５ＤＳ
−ＰＡＧＥ分析を示す。未感染Ｈ８Ｂ−２細胞とＨＨＶ
−６感染細胞（感染６日後）は［”Ｓ］メチオニンで２
０時鼎ラベルされたもの（レーン１．２及び５〜１０）
又は［３Ｈ］グルコサミンで２０時間ラベルされたもの
がある。 全細胞及び免疫沈降蛋白の５ＤＳ−ＰＡＧＥ分析は９％
アクリルアミドとＮ、Ｎ’　　−ジアリルタルタラジア
ミドの架橋物で行われた。標準分子量のマーカーは平行
なレーンに含まれている。レーン１．２はＨＨＶ−６感
染細胞及び未感染細胞を［３５Ｓ］メチオニンでラベル
したもの；レーン３及びレーン４は未感染及びＨＨＶ６
感染細胞を［３Ｈ］グルコサミンでラベルしたもの、レ
ーン５及びレーン６は免疫前血清と未感染及びＨＨＶ−
６感染細胞との免疫沈降物・レーン７及びレーン８はウ
サギの未除去抗ＨＨＶ−６抗体と未感染及びＨＨＶ−６
感染細胞との免疫沈降物。 レーン９及び１０は除去ウサキ抗ＨＨＶ−６抗体と未感
染及び感染細胞との免疫沈降物。 矢印と数字はＨＨＶ−６感染細胞に特異的な蛋白質とし
て同定された蛋白及び糖蛋白の概略分子量を示す。 第２図はヒト血清によるＨＨＶ−６感染細胞に特異的な
蛋白質の同定を示す。未感染細胞とＨＨＶ−６感染細胞
は［３ＳＳ］メチオニン又は［３Ｈ］クルコサミンでラ
ベルされた。　［３ｓＳ３メチオニンでラベルされた未
感染及び感染細胞と患者血清（Ｎ６２０）との反応性は
レーン１及び２で示され、［３Ｈ］グルコサミンでラベ
ルされた未感染及び感染細胞と患者血清との反応はレー
ン３及び４に示される。未感染細胞及びＨＨＶ−６感染
細胞の全細胞抽出物のウェスタンプロットと患者血清と
の反応性はレーン５及びレーン６に示される。レーン７
〜１０は［３５Ｓ］メチオニンでラベルされたＨＨＶ−
６感染細胞と他のヒトヘルペスウィルスに対し高い力価
を持つ各患者抗体との反応を示す。レーン７及び８は未
感染及び感染細胞のＮＢ血清、レーン９〜１１はＨＨＶ
−６感染細胞のＬＨＦ、ＬＲ及びＪＪ血清矢印はＨＨＶ
−６感染細胞に特異的蛋白質の概略分子量を示す。 第３図はモノクローナル抗体によるＨＨＶ−６感染細胞
特異的蛋白質の同定を示す。免疫沈降反応は［”Ｓ］メ
チオニンでラベルされたＨＨＶ−６感染Ｈ８Ｂ−２細胞
と未感染細胞を用いてなされた。 レーン１及び２は未感染及び感染細胞の正常マウス血清
、レーン３及びレーン４は未感染及び感染細胞の免疫マ
ウス血清を示す。 矢印はＨＨＶ−６感染細胞に特異的な細胞を示す。モノ
クローナル抗体と未感染（レーン５゜７、９．１２及び
１３）及びＨＨＶ−６感染（レーン６゜８、１０．１１
及び１４）細胞との反応性も夫々示され第４図モノクロ
ーナル抗体によるＨＨＶ−６感染細胞に特異的な糖蛋白
の同定。［３Ｈ］グルコサミンでラベルされたＨＨＶ−
６感染細胞と各モノクローナル抗体との反応は以下に示
す５：Ｍａｂ　　６Ａ５Ｇ３．　　レーン６：１４Ｂ３
゜レーン７：Ｍａｂ　　７Ａ２゜ 矢印はＭａｂｓ　　２Ｄ６．１３Ｄ６及び２Ｄ４で免疫
沈降反応するかすかにラベルされた付随的糖蛋白（ｇｐ
Ｈ６に、　ｇｐ３８に、　ｇｐ３６に、　ｇｐ３１ｋ）
を示す。 −ン１３及び１４゜ 図面の浄書（内容に変更なし） 一− １〜 ｇ１３１０５Ｔｈ ｇｐａｚ＞ １、事件の表示 平成２年特許願第１１８５１９号 ２、発明の名称 ３、補正をする者 事件との関係

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ＨＨＶ−６感染細胞、ＨＨＶ−６蛋白若しくはポリ
   ペプチド、又はＨＨＶ−６糖蛋白に特異的なモノクロー
   ナル抗体の産生能を有するハイブリドーマ系細胞。 ２、分子量約８２０００、１０５０００、１１６０００
   、７２０００、３８０００、３６０００、及び３１００
   ０の糖蛋白群から選択された、ＨＨＶ−６感染細胞のグ
   リコシル化されたポリペプチドに特異的なモノクローナ
   ル抗体産生能を有するハイブリドーマ系細胞。 ３、産生される前記モノクローナル抗体が２Ｄ６、１３
   Ｄ６及び２Ｄ４である請求項２記載のハイブリドーマ系
   細胞。 ４、分子量１０２０００及び７４０００のＨＨＶ−６感
   染細胞のポリペプチドと、分子量７２０００及び１０５
   ０００のＨＨＶ−６糖蛋白の全てに特異性を有するモノ
   クローナル抗体産生能を有するハイブリドーマ系細胞。 ５、産生される前記モノクローナル抗体が７Ａ２である
   請求項４記載のハイブリドーマ系細胞。 ６、分子量１１６０００、６４０００、５４０００、１
   ０５０００、６００００及び４５０００のグループから
   選択されたＨＨＶ−６感染細胞のポリペプチド及び分子
   量１１６０００、６４０００、５４０００の３種のＨＨ
   Ｖ−６の糖蛋白に特異的なモノクローナル抗体産生能を
   有するハイブリドーマ系細胞。 ７、産生される前記モノクローナル抗体が６Ａ５Ｈ７及
   び６Ａ５Ｇ３である請求項６記載のハイブリドーマ系細
   胞。 ８、分子量１１００００及び４１０００のＨＨＶ−６感
   染細胞のポリペプチドに特異的なモノクローナル抗体産
   生能を有するハイブリドーマ系細胞。 ９、産生される前記モノクローナル抗体が９Ａ５Ｄ１２
   である請求項８記載のハイブリドーマ系細胞。 １０、分子量が１３５０００のＨＨＶ−６感染細胞のポ
   リペプチドに特異的なモノクローナル抗体産生能を有す
   るハイブリドーマ系細胞。 １１、産生される前記モノクローナル抗体が１２Ｂ３Ｇ
   ４である請求項１０記載のハイブリドーマ系細胞。 １２、ＨＨＶ−６感染細胞、ＨＨＶ−６蛋白若しくはポ
   リペプチド、又はＨＨＶ−６糖蛋白との反応性を有する
   モノクローナル抗体。 １３、前記モノクローナル抗体が２Ｄ６、７Ａ２、６Ａ
   ５Ｇ３、６Ａ５Ｈ７、９Ａ５Ｄ１２、１３Ｂ３Ｇ４、１
   ３Ｄ６又は２Ｄ４の中から選択される請求項１２記載の
   モノクローナル抗体。 １４、２Ｄ６、７Ａ２、６Ａ５Ｇ３、６Ａ５Ｈ７、９Ａ
   ５Ｄ１２、１３Ｂ３Ｇ４、１３Ｄ６又は２Ｄ４から成る
   グループから選択された物質を含む蛋白又はＨＨＶ−６
   感染細胞に特異的なモノクローナル抗体。 １５、前記モノクローナル抗体が分子量３１０００〜１
   ３５０００の範囲から選択されたＨＨＶ−６感染細胞の
   蛋白に特異的である請求項１４記載のモノクローナル抗
   体。 １６、前記モノクローナル抗体が分子量１１６０００、
   １１００００、１０５０００、１０２０００、８２００
   ０、７４０００、７２０００、６４０００、６００００
   、５４０００、４５０００、４１０００、３８０００、
   ３６０００及び３１０００のグループから選択されたＨ
   ＨＶ−６感染細胞蛋白に特異的である請求項１４記載の
   モノクローナル抗体。