JPH04502149A

JPH04502149A - ２―アミノカルボン酸およびそれらの誘導体、それらの調製方法およびそれらの医薬としての使用

Info

Publication number: JPH04502149A
Application number: JP1511644A
Authority: JP
Inventors: トロストマン、ウーベ; ハルテンシュタイン、ヨハネス; ルドルフ、クラウス; シェヒテレ、クリストフ; オスバルト、ハルトムート; バインハイマー、ギュンター
Original assignee: ゲデッケ・アクチェンゲゼルシャフト
Priority date: 1988-10-31
Filing date: 1989-10-30
Publication date: 1992-04-16
Also published as: HU896587D0; DK65691D0; WO1990005130A1; EP0367205A1; PT92155B; PT92155A; DE58906571D1; DK65691A; US5401875A; ES2060722T3; ZA898274B; AU4514389A; KR900701735A; DD289520A5; CN1042347A; DE3836987A1; ATE99282T1; AU635908B2; EP0367205B1; EP0440731A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】２−アミノカルボン酸およびそれらの誘導体、それらの調製方法およびそれらの医薬としての使用説明この発明は、下記の一般構造Ｉで表わされる新規２−アミノカルボン酸および誘導体、並びにそれらの薬理学的に許容し得る塩に関する。

（ここで、Ｒ１は２０個までの炭素原子を有する、ｔｉｔ鎖もしくは分岐の、飽和もしくは不飽和アルキル基を表わし、Ｒ２およびＲ３は同じであっても異なっていてもよく、水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐のアルキル基を表わし、Ｒ４は水素、ベンジル、ヒドロキシベンジル、カルボキシル基、ヒドロキシアルキルもしくはアルコキシカルボニル基であって、各々４個までの炭素原子を有し、およびＲ５は水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐アルキル基）好ましいものは、Ｒ１がオクチル−もしくはオクタデシル基を表わし、ＲおよびＲ３は同じであっても異なっていてもよく、水素もしくはメチル基であり、Ｒ４が水素、メチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ベンジル、ヒドロキシエチルもしくはエトキシカルボニル基であり、Ｒ５が水素もしくは１−４Ｃ原子を有する低級アルキル基である、−殻構造ｌで表わされる２−アミノカルボン酸および誘導体である。

さらに、この発明は、−殻構造Ｉで表わされる２−アミノカルボン酸および誘導体の調製方法に関し、それは、ａ）下記一般式１１（ここで、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は上述の意味を有する）で表わされるアミノ化合物を、下記一般式ｌ１１（ここで、Ｒ４およびＲ５は上述の意味を有し、Ｚは、例えばトシル基もしくはハロゲン原子のような容易に除去し得る基を表わす）で表わされる化合物と反応させて一般式ｌで表わされる化合物を得るか、または、ｂ）下記一般式＋Ｖで表わされるエポキサイド（ここで、Ｒ１は前述の意味を有する）を下記一般式Ｖで表わされる化合物（ここで、Ｒ３およびＲ５は前述の意味を有し、Ｒ６は水素、メチル、ベンジルもしくはカルボキシル基または下記一般式ｖ１もしくはＶｉａで表わされる、Ｒ７が、例えばベンジル、クロロベンジル、２．６−ジクロロベンジルもしくは１Ｃｒｌ−ブチルのような容易に分離する保護基である化学基−ＣＨ，−０−Ｒ７（ＶＩ）と反応させて下記一般式Ｖ＋＋（ここで、Ｒ１，Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は前述の意味を有する）で表わされる化合物を得、その後、Ｒ２が水素ではない場合、この化合物を公知の方法に従ってアルキル化して下記一般式（ここで、Ｒ１，Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は上述の意味を有する）で表わされる化合物を得、続いて、前述の保護基の水素化分解もしくは酸分能により、これらの一般式Ｖｌ１１で表わされる化合物を一般式ｌで表わされる化合物に変換することを特徴とする。

出発化合物として働く、下記一般式１１て表わされるアミノエステル（ここで、Ｒ、ＲおよびＲ３は上述の意味を有し、かつＲ２は水素ではない）は、１）Ｒ２がメチルもしくはエチルを表わす場合、下記一般式（ここで、Ｒ１およびＲ３は上述の意味を有する）を、トリアルコキソニウム・テトラフルオロボレートと反応させるか、または、２）下記一般式Ｘで表わされる化合物（ここで、ＲおよびＲは上述の意味を有し、かつＲ３はベンジル基であってもよい）をナトリウムアルコラードに変換し、さらにこれらを下記一般式ｘ１で表わされる化合物Ｙ−Ｒ２ＣＸＩ）（ここで、Ｒ２は上述の意味を有し、かつＹは、例えばトシル基もしくはハロゲン原子のような容易に除去し得る基を表と反応させて下記一般式Ｘ１１で表わされる化合物（ここで、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は上述の意味を有する）を得、続いて、一般式ＩＩ！で表わされる化合物を、パラジウムの存在下で水素を用いて、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３が上述の意味を有する一般式１１で表わされる化合物に変換するか、のいずれかにおいて調製される。

一般式１ｘで表わされる化合物の調製は、特許出願ＥＰ　０２５５１２６に開示されており、この出願の主題ではない。この方法に用いられる、一般式Ｖで表わされるアミノカルボン酸エステルの誘導体は、市販されているものを利用するか、もしくは一般に公知の方法（Ｈｏｕｂ＊ｎ−Ｗｅｙｌ　Ｖｏｌ、ＸＩ／２．３０８頁以降）に従って調製することができる。

Ｒ１が１８個までの炭素原子を有する直鎖アルキル基を表わし、Ｒが水素、Ｒ３およびＲ４が水素もしくは低級アルキル基およびＲ５が水素である、−膜構造Ｉで表わされる化合物は公知であり、それらの特性に基づいて、皮膚科学的および化粧用調製品（ＤＥ−Ａ　１５１８３２６）並びに表面活性化合物（ＤＤ−６０３８２；　ＦｃＨｅ、　５ｔｉｆｚｎ、　Ａ＋＋ｓｊｒｉｃｂｍｉｊｌｅｌ　６８．９６４　（１９６’６））に適切である。プロティンキナーゼＣに対する作用は、これまで開示されていない。

一般式ＩＸで表わされるアミノアルコールと一般式１！で表わされるアミノエステルとの反応は、例えばテトラヒドロフランもしくはエーテルのような、好ましくはジクロロメタンである非プロトン性溶媒中において、０ないし２５℃の温度、好ましくは対応する溶媒の沸点で、アミノアルコールＩＸの塩酸塩をトリアルキルオキソニウムテトラフルオロボレートの過剰量と反応させるか、または、テトラヒドロフランもしくはジエチルエーテルのような、好ましくはＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミドである非プロトン性溶媒中において、１０ないし５０℃の温度、好ましくは室温で、一般式Ｘで表わされるアミノアルコールを水素化ナトリウムと反応させ、次いで、同じ溶媒中においで、２０ないし５０℃の温度、好ましくは溶媒の沸点で、一般式Ｘ＋で表わされる化合物と反応させることのいずれかにより行なうことができる。反応生成物は、結晶化および／またはクロマトグラフィのような公知の分離方法を用いて、単離および精製することができる。

一般式Ｘｌｌで表わされるＮ−ベンジルもしくはＮ、Ｎ−ジベンジル化合物の、ことによると必要な触媒水素添加は、対応遊離体をメタノールもしくはエタノールのような極性溶媒に溶解し、好ましくは大気圧および室温で、触媒としてのＰｄ／Ｃの存在下において、水素で飽和させることにより行なう。一般式ＩＩで表わされる生成物の取得は、対応する塩、好ましくは塩酸塩の結晶化により行なう。

一般式ＩＩで表わされる化合物と一般式ＩＩ＋で表わされる化合物との反応は、イソプロパツール、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドもしくはトルエンであるが好ましくはエタノールであるような極性溶媒において、２０ないし８０℃の温度、好ましくは前記溶媒の沸点で、例えば炭酸ナトリウム、ピペリジンもしくはピリジンであるが好ましくは炭酸カリウムであるような無機もしくは有機塩基の存在下において、出発物質を反応させることにより行なうことができる。一般に、反応時間は１ないし２４時間であるが、好ましくは１０時間である。一般式Ｉで表わされる生成物の精製は、結晶化および／またはクロマトグラフィにより行なう。

一般式Ｖｌ＋で表わされる化合物の調製は、有機溶媒および／または水であるが好ましくはエタノール中において、２０ないし１００℃の温度であるが好ましくは５０℃で、公知の方法（Ｃトロ３８６４９　；　５ｅｉｌｅｎ　５ＦＣＨｃ、　Ａｎｓｊｒｉｃｂｍｉｆｌ＊ｌ　６８．９６４　（１９６６）　）により、一般式！■で表わされるエポキシドをＲがＣｌ−４アルキル基を表わす一般式Ｖで表わされるアミノカルボン酸誘導体と反応させることにより行なう。この反応に対し、て、−膜構造Ｖ　（Ｒ５−Ｈ）であるアミノカルボン酸が使用される場合には、無機塩基、好ましくは水酸化ナトリウムの存在が必要となる。

一般式ｖ１１で表わされる化合物は、これらの化合物をナトリウムアルコラードに変換し、その後、テトラヒドロフランもしくはＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミドのような同様の溶媒中において、２５ないし１００℃の温度であるが好ましくは前記溶媒の沸点で、一般式ｘ１で表わされるアルキル化合物と反応させることにより、０−アルキル化する。

Ｒ６が一般式ｖ１で表わされる化学基を示す一般式ｖ１１１で表わされる化合物からの、ことによると必要な保護基Ｒ７の分離は、ａ）メタノール、エタノール、酢酸もしくは水のような、しかし好ましくはメタノール／酢酸／水９：１：１の混合液である極性溶媒中における、触媒としてのＰｄ／Ｃの存在下で水素を用いた、一般式Ｖｌｌ＋で表わされる０−ベンジル化合物の触媒水素添加によるか、またはｂ）エタノール、水、酢酸、ジクロロメタンのような溶媒中において、もしくは溶媒としての試薬中において、口ないし５０℃の温度で、しかし好ましくは室温で、−膜構造Ｖｌｌ＋で表わされる０−ｊｅｒｌ、−ブチル化合物を、臭化水素酸もしくは塩酸のような、し、かし好ましくはトリフルオロ酢酸である強酸と反応させることにより行なう。生成物の取１）は、クロマトグラフィおよび／または結晶化により行なう。一般式Ｉで表わされる化合物はキラル中心を有しているため、それらはジアステレオマー混合物、ラセミ混合物もしくはエナンチオマーの形態のいずれがとして存在する。

精製のために、かつ本草医学的な理由から、式Ｉで表わされる化合物は、好ましくは、結晶性で薬理学的に許容し得る塩に変換される。この塩は、対応する無機もしくは有機酸を用いる塩基の中和による通常の方法で得られる。酸としては、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、リンゴ酸、サリチル酸、アスコルビン酸、マロン酸、フマル酸、シュウ酸もしくはコハク酸が問題になる。常法として、酸付加塩は、それ自体公知の方法において、遊離塩基またはそれらの水もしくは有機溶媒、例えば、メタノール、エタノールもしくはプロパン−２−オールのような低級アルコール、あるいはアセトンもしくはブタン−２−オンのような低級ケトン、あるいはジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフランもしくはジオキサンのようなエーテルの溶液を混合することにより得られる。

この発明による、一般式Ｉで表わされる化合物は、興味深い薬理学的特性を示す。それらは、プロティンキナーゼＣを疎外する物質の一群を表わす。特許出願ＥＰ　０２５５１２６　（表１の例６）およびＵＳ　４１７３６４１　（例７）に開示された化合物との比較において、これらの化合物の利点は、それらが、ｃＡＭＰ依存性キナーゼ、ｅａＧＭＰ依存性キナーゼおよびミオシン軽鎖キナーゼへの影響が非常に小さいのに対して、より高い能力でプロティンキナーゼＣを疎外することにある（表１参照）。

プロティンキナーゼＣは、細胞内信号導入に対して重要な鍵の役割を果たし、収縮、分泌および増殖過程の調節に密接に関係する（Ｙ、　Ｎ１５ｈｉｘｕｋａ、　Ｎａｔｕｒｅ、　３０８．６９３−６９８／　１９８４）。これらの特性に基づいて、この発明による化合物は、血栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血管疾患の予防および／または治療、炎症過程、アレルギー、癌、ウィルス性疾患および中枢神経系の変性損傷の治療および予防に用いることができる。

この発明による、一般式ｌで表わされる化合物は、液状もしくは固体状で、経口的にもしくは非経口的に投与することが可能である。注射溶液としては、安定化剤、溶解剤もしくは緩衝剤のような、注射溶液の通常の添加物を含有する水か好ましく用いられる。

そのような添加物には、粘度調節のための高分子重合体（例えば、液体ポリエチレンオキサイド）の他に、例えば、酒石酸およびクエン酸緩衝液、エタノール、錯体形成剤（ｃｏｍｐｌｅｘ　ｆｏｒｍｅｒｓ　：例えば、エチレンジアミン四酢酸およびその非毒性塩）がある。固体担体物質には、例えば、デンプン、乳糖、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高分散無水ケイ酸、高分子脂肪酸（例えば、ステアリン酸）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物および野菜油、固体高分子重合体（例えば、ポリエチレングリコール）があり。経口投与に適した組成物は、所望であれば、さらに香料および／または甘味料を含有することができる。

以下の例は、この発明をさらに説明する。

例　１２−　［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］−］アミノー３−ヒドロキシプロピオン酸塩酸塩±）−３−メチルアミノ−１ −オクタデシロキシ−２−プロパツール２．０ｇ　（５，１ミリモル）および２ −ブロモ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルエステル０．９３ｇ　（５，１ミリモル）の混合物を、無水エタノール６０ｍ　！中の炭酸カリウム２．１ｇｃ１５．＞ミリモル）と−緒に、還流下で４時間加熱する。その後、ブロモヒドリン０．９ｇ　（５，１ミリモル）および炭酸カリウム２１ｇ　（１５，３ミリモル）を再び添加し、還流下でさらに時間加熱する。続いて、室温に冷却してろ過し、減圧下で溶媒を留去する。残渣をジクロロメタン１００ｍ　ｌに取り、完全な溶液になるまでメタノールを添加する。続いて、２Ｎ塩酸３０ｍ１を添加して１５分間激しく撹拌し、その後、有機相を分離して硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去する。残渣をジエチルエーテルから結晶化する。融点１００−１０４℃。

類似の方法において、２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−オクチロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］−］アミノー３−ヒドロキシプロピオン酸１．１）（融点１７７℃（分解））が得られる。

例２２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］ −アミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルエステル（±）−３−メチルアミノ−１−オクタデシロキシ−２−プロパツール３００ｍｇ　（０，７ミリモル）および２−ブロモ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルエステル１８０ｍｇ　（０，７ミリモル）の反応混合物を、炭酸カリウム２１０ｍｇ　（１，４ミリモル）と−緒に、無水エタノール１０ｍ　ｌにおいて、還流下で３時間加熱する。冷却した反応溶液をろ過して減圧下で溶媒フリーとし、ジクロロメタン５０ｍ　ｌに取る。不溶物をろ過し、カラムクロマトグラフィ　（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール１８：１　）を用いて生成混合物を分離する。第１分画と共に生成物を単離する。融点５４−５８℃（ペンタンから）。

例３（±）　−２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ酢酸塩酸塩エタノール］Ｏｍ１に（±）−１−オクタデシロキシ−２，３−エポキシプロパン６６０ｍｇ（２ミリモル）を溶解した溶液に、グリシン６１０ｍｇ　（８，ｌミリモル）を室温で添加し、続いて、水１０ｍ　ｌに溶解した水酸化ナトリウム１２０ｍｇ　（３ミリモル）を添加する。この反応混合物を８０℃で１時間加熱し、室温に冷却して２Ｎ塩酸２０ｍ１およびジクロロメタン１００ｍ　ｌを添加し、激しく撹拌し、有機相を分離して硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧下で溶媒を留去した後、残渣をエーテルから再結晶する。溶液をろ過し、減圧下において結晶を乾燥させた後、生成物を単離する。融点６５−７２℃。

類似の方法において、下記物質が得られる：２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ− ２−ヒドロキシプロピル）アミノ−３−フェニルプロピオン酸（３，ａ）；融点４７−５０℃；２−Ｎ−Ｄ−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）アミノ−３−（４−ヒドロキシ）フェニルプロピオン酸塩酸塩（３，ａ）；融点１８２−１８３℃；ジエチル−２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）アミノマロネートオリザレー）Ｄ、ｃ）；融点１３０２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ −２−ヒドロキシプロピル）−アミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸塩酸塩トリフルオロ酢酸１５ｍ　ｌ中の２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ−３−ｔ！目、−ブチロキシプロピオン酸塩酸塩６４０ｍｇ　（１，２ミリモル）を室温で１時間撹拌する。その後、減圧下で試薬を留去して残渣をジクロロメタン５０ｍ１に取り、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液２０ｍ１を添加して室温で１５分間撹拌する。得られた沈殿を吸引ろ過してそれをメタノールに溶解し、２Ｎ塩酸２０ｍ　ｌを添加して、５分間撹拌した後溶媒を留去する。母液から有機相を分離し、２Ｎ塩酸で酸性にし、得られた沈殿をメタノールを添加することにより溶解し、有機相を分離して水相をジクロロメタンで再び抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去した後、上で分離した沈殿と一緒に、エーテルから生成物を得た。吸引ろ過の後、純粋な生成物を単離する。融点６２−６７℃。

前駆体として用いられる２−Ｎ−Ｄ−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ−３−１！ｒｔ、−ブチロキシプロピオン酸塩酸塩は、以下のように調製される。

エタノール２０ｍ　ｌに水酸化ナトリウム１２５ｍ　ｌ　（３，ｌミリモル）を溶解した溶液に、Ｌ−０−ｊ＜ｒｌ、−ブチルセリン０．５ｇ（３，１ミリモル）を溶解し、続いて（±）−１−オクタデシロキシ−２，３−エポキシプロパンを添加して溶解する。水１０ｍ１を添加した後、この反応混合液を８１）’Ｃで４時間加熱する。次いで、水５０ｍ１およびジクロロメタン１００ｍ　ｌを添加し、２Ｎ塩酸を用いて混合物を酸性にする。有機相を分離し、各々ジクロロメタン３０ｍ１を用いて水相をさらに３回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去した後、カラムクロマトグラフィ　（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール９：ｌ）で残渣を分離する。生成物は第４の分画と共に単離される。

例５２−Ｎ−Ｄ−オクタデシロキシ−２−メトキシプロピル）−アミノプロピオン酸エチルエステルロキザレート（±）−３〜アミノ−２−メトキシ−１−オクタデシロキシプロパン３９０ｍｇ　（１ミリモル）、２−ブロモプロピオン酸エチルエステル１ｇ（１ｍｇ　（］ミリモル）および炭酸カリウム３００ｍｇ（２，２ミリモル）の反応混合物を、還流下で３時間加熱する。次いで、２−ブロモプロピオン酸エチルエステル５４０ｍ　ｇ（２ミリモル）および炭酸カリウム６００ｍｇ　（４，４ミリモル）を再び添加し、還流下で４時間さらに加熱する。その後、冷却した溶液をろ過して減圧下で溶媒を留去し、残渣をカラムクロマトグラフィ　（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール　３６：１）で分離した。生成物は、第１の分画と共に単離される。次に、エーテルｌＯｍ　ｌ中で、このアミノ酸エステルを修酸３６ｍ　ｇと混合し、減圧下で溶媒を留去して、残渣をエーテル／シクロヘキサンから結晶化させる。融点？？−８０℃。

前駆体として用いられる（±）−３−アミノ−２−メトキシ−ｌ−オクタデシロキシプロパン塩酸塩は、以下のようにして調製される。

（±）−３−アミノ−１−オクタデシロキシ−２−プロパツール塩酸塩１．６ｇ（４ミリモル）を、ジクロロメタン５０ｍ１中のトリメチロキソニウムテトラフルオロボレート３．１２ｇ　（２（１，０ミリモル）と−緒に、還流下で２４時間にわたって加熱する。

冷却した反応溶液をジクロロメタン１５０ｍ　ｌを用いて希釈し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液２０ｍ　ｌと注意深く混合する。激しく撹拌し、有機相を分離し、それを２Ｎ塩酸３０ｍ　ｌと混合して再び激しく撹拌する。有機相を分離した後、硫酸ナトリウムで乾燥させて溶媒を留去し、生成物を単離する。

類似の方法において、以下の物質が得られる：２−Ｎ−０−オクタデシロキシ− ２−メトキシプロピル）−アミノ−３−ヒドロキシ酪酸（５，ａ）；融点４８− ６０℃。

例６２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メトキシプロピル−３−オクタデシロキシ）］］アミノー３−ヒドロキシプロピオン酸塩酸塩無水エタノール３０ｍ１の、１−メチルアミノ−２−メトキシ−３−オクタデシロキシプロパン塩酸塩０．４］ｇ　（１ミリモル）、エチル−２−ブロモ−３−ヒドロキシプロピオネ−）０．２０ｇ　（１ミリモル）および炭酸カリウム０．４１ｇ　（３ミリモル）の混合物を、還流下で４時間沸騰させる。さらに、ブロモヒドリン０゜２ｇ（１ミリモル）および炭酸カリウム０．２７ｇ　（２ミリモル）を添加する。この混合物を再び６時間沸騰させ、次いで熱い状態でろ過する。ろ液を蒸発させ、少量のメタノールを含有するジクロロメタンで希釈し、２Ｎ塩酸３０ｍ１を添加して周囲温度で１５分間撹拌する。有機相を分離し、水相をジクロロメタンで３回抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去する。残渣をエーテル、次いで温アセトンで処理する。融点６３−６５℃。

出発物質として用いられる（±）−１−メチルアミノ−２−メトキシ−３−オクタデシロキシプロパン塩酸塩は、以下のとおりに調製される。

ジクロロメタン６０ｍ　ｌ中の、ｌ−メチルアミノ−３−オクタデシロキシプロパン−２−オール３．４９ｇ　（８，８６ミリモル）およびトリメチロキソニウムテトラフルオロボレート６．５ｇ　（４４，６ミリモル）の反応混合物を、還流下で２４時間加熱する。次いで、ジクロロメタン１００ｍ　ｌで希釈し、２Ｎ水酸化ナトリウム２０ｍ１を注意深く添加し、有機相を分離し、これに２Ｎ塩酸５０ｍ１を添加し、１０分間激しく撹拌して有機相を分離する。

乾燥させ、減圧下で溶媒を留去した後、残渣をｎ−ペンタンから撹拌して出す。

以下の比較実験は、一般式Ｉで表わされる、この発明による化合物の薬理学的効果を示すものである。

１、Ｃ−キナーゼこの酵素は、ラット脳または平滑筋にワトリ胃）から精製される。その活性は、リン−３２標識リン酸塩のヒストンへの取り込みにより決定される。２００μｌの反応バッチには、以下の成分が含まれている：４０μｇ４０ｇンＨ−１の他に、５０ジルセリン、　０４２μｇ１，２−ジオレイン。このバッチを３０℃で４分間ブレインキュベートした後、５ｎＭ　ＰＫＣを添加することにより反応を開始させた。３０℃で５分間インキュベートした後、１０％ＴＣＡで反応を停止させ、試料をろ別した。

シンチレーションカウンターにおけるチェレンコフ計数により、リン酸塩取り込みを測定する。

２、　Ａ−キナーゼ活性の測定は、市販されている酵素の触媒性サブユニットを用いて行なう。それにより、リン−３２標識リン酸塩のヒストンへの取り込みを測定する。２００μ ｌの反応バッチには、以下の成分が含まれている＝５０μｇ５０ｇンーＨ−２Ｂの他に、５０ｍＭ　ＰＩＰＥＳ−ＮａＯＢ　、　ｐＢ　７．５．１０ｍＭ　ＭｇＣｌ　、１ｍＭ　ＤＴＴ、４０ｇＭ　ＡＴＰｏこの試験の実施は、Ｃ−キナーゼの場合と同様に行なう。

３、　Ｇ−キナーゼこの酵素はウシ肺から精製したものであり、その活性はリン３２−標識リン酸塩のヒストンへの取り込みにより決定した。

この試験バッチには、以下の成分が含まれる：ｌＯμｇヒストンＩＬＡの他に、２０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ　、ｐＢ　７．４．５ｍＭＭｇＣＡ２．１ｍＭ　ＤＴＴ、　１０ｇＭ　ＡＴＰ、　ＩＱμＭ　ｃＧＭＰ、４０ｇｇ　ＢＳＡ、２％グリセロール。２．５ｎＭ　Ｇ−キナーゼを添加することにより反応を開始させる。他の点については、Ｃ−キナーゼの場合と同様にして試験を行なう。

４、ＭＬＣ−キナーゼ酵素だけではなく、基質（ＭＬＣ）もまたニワトリ胃から精製する。活性測定も、リン−３２標識リン酸塩の取り込みにより行なう。２００μｍの反応バッチには、以下の成分が含まれている：２５μＭ　ＭＬＣの他に、５０ｍ　ＭＭＯＰＳ −ｈＯＥ。

ｐＨ７，２、５ｍＭ　ＭｇＣｌ　、１００８Ｍ　ＣｌＣｌ　、ｌｏＯｎＭカルモジュリン、　］ｍＭ　ＤＴＴ、２５０μＭ　ＡＴＰ０約１ｎＭのＭＬＣキナーゼを添加することにより反応を開始させる。

他の点については、Ｃ−キナーゼの場合と同様にして試験を行なう。

比較実験の結果を第１表に示す。

第１表補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成３年４月３０日五

Claims

【特許請求の範囲】

１．ＤＥ−Ａ１５１８３６２に開示された化合物を除く、一般式Ｉで表わされる２−アミノカルボン酸および誘導体、並びにそれらの薬理学的に許容し得る塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）（ここで、Ｒ１は２０個までの炭素原子を有する、直鎖もしくは分岐の、飽和もしくは不飽和アルキル基を表わし、Ｒ２およびＲ３は同じであっても異なっていてもよく、水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐のアルキル基を表わし、Ｒ４は水素、ベンジル、ヒドロキシベンジル、カルボキシル基、ヒドロキシアルキルもしくはアルコキシカルボニル基であって各々４個までの炭素原子を有し、およびＲ５水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐アルキル基）
２．Ｒ１がオクチルもしくはオクタデシル基を表わし、Ｒ２およびＲ３が同じであっても異なっていてもよく、かつ水素もしくはメチル基を表わし、Ｒ４水素、メチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ベンジル、ヒドロキシベンジルもしくはエトキシカルボニル、およびＲ５水素もしくはエチル基である請求の範囲第１項記載の一般式Ｉで表わされる化合物。
３．請求の範囲第１項記載の一般式Ｉで表わされる化合物、すなわち、２−［Ｎ −メチル−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］−アミノ −３−ヒドロキシプロピオン酸塩酸塩；２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−オクチロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］−アミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸；２ −［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）］− アミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸エチルエステル；（±）−２−Ｎ−（３− オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ酢酸塩酸塩；２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸塩酸塩；２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−メトキシプロピル） −アミノプロピオン酸エチルエステルオキザレート；２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−メトキシプロピル）−アミノ−３−ヒドロキシ酪酸；２−Ｎ−（オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ−２−マロン酸ジエチルエステル；２−Ｎ−（３−オクタデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−アミノ −３−フェニル−プロピオン酸。
４．請求の範囲第１項記載の一般式Ｉで表わされる化合物の調製方法であって、ａ）下記一般式ＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（ここで、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は上述の意味を有する）で表わされるアミノ化合物を、下記一般式ＩＩＩ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）（ここで、Ｒ４およびＲ５は上述の意味を有し、Ｚは、例えばトシル基もしくはハロゲン原子のような容易に除去し得る基を表わす）で表わされる化合物と反応させて一般式Ｉで表わされる化合物を得るか、または、ｂ）下記一般式ＩＶで表わされるエポキサイド▲数式、化学式、表等があります ▼（ＩＶ）（ここで、Ｒ１は前述の意味を有する）を下記一般式Ｖで表わされる化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）（ここで、Ｒ３およびＲ５は前述の意味を有し、Ｒ６は水素、メチル、ベンジルもしくはカルボキシル基または下記一般式ＶＩもしくはＶＩａで表わされる、Ｒ７が、例えばベンジル、クロロベンジル、２，６−ジクロロベンジルもしくはｌｅｒｔ−ブチルのような容易に分離する保護基である化学基−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ７（ＶＩ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩａ）と反応させて下記一般式ＶＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩ）（ここで、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は前述の意味を有する）で表わされる化合物を得、その後、Ｒ２が水素ではない場合、この化合物を公知の方法に従ってアルキル化して下記一般式ＶＩＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩＩ）（ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は上述の意味を有する）で表わされる化合物を得、続いて、前述の保護基の水素化分解もしくは酸分離により、これらの一般式ＶＩＩＩで表わされる化合物を一般式Ｉで表わされる化合物に変換することを特徴とする調製方法。
５．下記一般構造Ｉで表わされる２−アミノカルボン酸および誘導体 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）（ここで、Ｒ１は２０個までの炭素原子を有する、直鎖もしくは分岐の、飽和もしくは不飽和アルキル基を表わし、Ｒ２およびＲ３は同じであっても異なっていてもよく、水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐のアルキル基を表わし、Ｒ４は水素、ベンジル、ヒドロキシベンジル、カルボキシル基、ヒドロキシアルキルもしくはアルコキシカルボニル基であって、各々４個までの炭素原子を有し、およびＲ５は水素、または４個までの炭素原子を有する直鎖もしくは分岐アルキル基）並びにそれらの薬理学的に許容し得る塩のプロテインキナーゼＣの阻害への、およびそれによる収縮、分泌および増殖過程の調節への使用。
６．血栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血管疾患の予防および／または治療、炎症過程、アレルギー、癌、ウィルス性疾患および中枢神経系の変性損傷の予防および／または治療への請求の範囲第５項記載の一般式Ｉで表わされる化合物の使用。
７．血栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血管疾患の予防および／または治療、炎症過程、アレルギー、癌、ウィルス性疾患および中枢神経系の変性損傷の予防および／または治療のための薬剤の製造への請求の範囲第５項記載の一般式Ｉで表わされる化合物の使用。
８．通常の補助物質および添加物質の他に、請求の範囲第１項記載の一般式Ｉで表わされる化合物を含有する医薬。