JPH04370761A

JPH04370761A - 臨床検査用標準液

Info

Publication number: JPH04370761A
Application number: JP17319891A
Authority: JP
Inventors: Kumiko Hata; 畑　久美子; Toshiro Hanada; 寿郎花田
Original assignee: Wako Pure Chemical Industries Ltd
Current assignee: Fujifilm Wako Pure Chemical Corp
Priority date: 1991-06-18
Filing date: 1991-06-18
Publication date: 1992-12-24
Anticipated expiration: 2010-11-13
Also published as: JPH07104344B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】　　本発明は、血清中成分の測定
に於いて用いられる臨床検査用標準液又は検量係数設定
用反応指示物質溶液に関する。

【０００２】

【従来技術及びその問題点】　　臨床検査用標準液は、
例えばカルシウム、マグネシウム等の無機物或は例えば
尿酸、クレアチニン等の含窒素成分等の測定時の標準と
して用いられるものであり、具体的には例えば、カルシ
ウム，マグネシウム，クレアチニン，尿素，尿酸，グル
コース等を所定濃度含有させた水溶液である。

【０００３】また、検量係数設定用反応指示物質溶液は
、例えばグルコース，４−ニトロフェノール，４−ニト
ロアニリン，２−クロル−４−ニトロフェノール，５−
アミノ−２−ニトロ安息香酸等の反応指示物質を所定濃
度含有させた水溶液であり、臨床検査に使用される自動
分析装置等の測定機器の検量係数（単位換算係数、装置
定数、Ｋファクターとも呼ぶ。）を決定するために用い
られるものである。これを用いて求められた検量係数は
、単位時間当りの吸光度の変化率に基づいて測定値を求
める、例えばアルカリホスファダーゼ（ＡＬＰ），ロイ
シンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ），γ−グルタミルト
ランスペプチダーゼ（γ−ＧＴＰ）等の酵素活性測定に
於いて、測定値と真値とのずれを是正するための係数と
して利用される。

【０００４】近年、自動分析装置の発達に伴い、臨床検
査は自動分析装置により行われるのが一般的となりつつ
ある。この自動分析装置は検体や測定用試液の採取量が
少ないため経済的であるという利点を有しているが、該
採取量が少ないが故の問題点も有している。即ち、臨床
検査に於ける主たる検体である血清と、前記臨床検査用
標準液や検量係数設定用反応指示物質溶液とで採取量精
度が異なるという問題点がそれである。これは、血清と
これら溶液とでその性状（特に比重と粘度）が異なって
いるために生じるものであり、これによる影響は、検体
採取量が数μｌ程度と少ない自動分析装置による臨床検
査に於て特に大きく、該検査に於いてこれらを用いて得
られる値に基づいて算出される測定値の真値とのずれが
大きくなる可能性は高い。

【０００５】この問題を解決する方法として、例えばグ
リセリンやポリビニルアルコール（以下、ＰＶＡと略記
する。）をこれら溶液中に添加することが提案されてい
る（検査と技術，ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．２，１９０−１
９３，１９８９、第１７回日本臨床検査自動化学会　演
題，１７８，１９８５等）。しかしながら、これらの方
法によってもこれら溶液の比重及び粘度の双方を同時に
血清に於けるそれらと同等とすることは不可能なので、
採取量精度を血清のそれと同等ならしめることは期待し
難い。また、グリセリンを添加する方法は、グリセリン
がトリグリセライド測定に於ける誤差原因物質でもある
ため、クロスコンタミによる測定値への影響の面からも
好ましい方法とは言い難い。従って、血清と同等の比重
及び粘度を有する臨床検査用標準液や検量係数設定用反
応指示物質溶液の開発が望まれている現状にある。

【０００６】

【発明の目的】　　本発明は上記した如き状況に鑑みな
されたもので、特に自動分析装置を用いて行う血清中成
分の測定に於いて、正確な測定値を得るために使用され
る、血清と同等の粘度及び比重を有する臨床検査用標準
液及び検量係数設定用反応指示物質溶液を提供すること
を目的とする。

【０００７】

【発明の構成】　　本発明は、ポリエチレングリコール
（以下、ＰＥＧと略記する。）により、粘度及び比重を
調整したことを特徴とする臨床検査用標準液又は検量係
数設定用反応指示物質溶液の発明である。

【０００８】即ち、本発明者らは、臨床検査用標準液又
は検量係数設定用反応指示物質溶液（以下、「臨床検査
用標準液等」と略記する。）に血清と同等の粘度及び比
重を付与し得ることが可能で、且つ臨床検査の反応系に
影響を与えない不活性な物質を見出すべく鋭意研究を行
ったところ、ＰＥＧがその目的に最も適した物質である
ことを見出し本発明を完成するに到った。

【０００９】本発明に用いられるＰＥＧとしては、平均
分子量として２００〜４００程度のものが好ましく挙げ
られる。また、その使用濃度は臨床検査用標準液等に含
まれる他の成分の種類により変動するが、臨床検査用標
準液等に於ける濃度として通常ＰＥＧ２００で１２〜１
７（ｖ／ｖ）％、ＰＥＧ３００で１２〜１６（ｖ／ｖ）
％、ＰＥＧ４００で１２〜１４（ｖ／ｖ）％程度の範囲
である。

【００１０】本発明に於て、ＰＥＧは上記した如き平均
分子量範囲内の特定平均分子量のものを単独で用いても
、２種以上適宜混合して使用しても良い。また、本発明
の臨床検査用標準液等中には、標準物質や反応指示物質
以外に通常これら溶液中に含まれている緩衝剤、防腐剤
、安定剤等が含まれていても良いことは言うまでもない
。また、これらＰＥＧ以外の成分の臨床検査用標準液等
中の濃度は通常この分野で使用される濃度範囲から適宜
選択すれば足りる。

【００１１】本発明の臨床検査用標準液等を調製するに
は、例えば以下の如くして行えば良い。即ち、上記した
如き平均分子量を持つＰＥＧの中から適宜選択された１
種又は２種以上を、例えばカルシウム，マグネシウム，
クレアチニン，尿素，尿酸，グルコース等の臨床検査用
標準液物質や、例えばグルコース，４−ニトロフェノー
ル，４−ニトロアニリン，２−クロル−４−ニトロフェ
ノール，５−アミノ−２−ニトロ安息香酸等の検量係数
設定用反応指示物質、更に要すれば緩衝剤、防腐剤、安
定剤等を含む溶液に適宜添加溶解して粘度及び比重が血
清と同等となるように調整することにより、容易に調製
することができる。

【００１２】本発明の臨床検査用標準液等は、血清試料
と同等の粘度及び比重を有しているので、採取量精度が
血清試料を用いて行う場合と同等となる。従って、これ
らを用いて血清中成分の測定を行うことにより、より正
確な測定が可能となる。

【００１３】臨床検査の分野に於いては、ＰＥＧは種々
の用途、例えば免疫比濁反応における反応促進剤やＨＤ
Ｌ−コレステロール測定における分画剤等として用いら
れている。しかし、これを臨床検査用標準液や検量係数
設定用反応指示物質溶液の粘度及び比重の調整剤として
用いると、これら溶液に血清と同等の比重及び粘度を付
与し得るということは全く意想外のことであった。

【００１４】尚、牛血清アルブミン（以下、ＢＳＡと略
記する。）や人血清アルブミン等の市販のアルブミンを
添加溶解することによっても、血清と同等の比重及び粘
度を有する臨床検査用標準液等を調製することは可能で
あるが、これらアルブミンには測定対象の酵素類や含窒
素成分が含まれていることが多く、本発明の目的に使用
するには問題が多い。以下に実施例等により本発明を更
に具体的に説明するが本発明はこれらにより何ら限定さ
れるものではない。

【００１５】

【実施例】実験例１．各種増粘剤水溶液の粘度及び比重
の測定イオン交換水に平均分子量が２００，３００，４００，
６００，１０００，６０００又は２００００のＰＥＧ、
グリセリン、ＢＳＡ、ＰＶＡ５００、ポリビニルピロリ
ドン（以下、ＰＶＰと略記する。）Ｋ３０を夫々１〜２
０％添加した水溶液を調製し、粘度及び比重を測定した
。尚、粘度はＢ型（Ｂ８Ｌ型）粘度計（東京計器製）に
より、比重は標準比重計（ＪＩＳ　Ｂ−７５−２５）に
より２５℃に於ける値を測定した。結果を表１に示す。尚、表中、ＰＥＧ２００，３００，４００，６００及び
グリセリンの濃度はｖ／ｖ％でその他はｗ／ｖ％で、ま
た、比重はｇ／ｃｍ３で、粘度はセンチポイズ（ＣＰ）
で夫々表わしてある。また、同じ条件で測定したプール
人血清の粘度及び比重は粘度：１．７１、比重：１．０
２４であった。

【００１６】

【表１】

【００１７】表１より明らかな如く、ＰＥＧ２００，３
００及び４００を用いることにより粘度及び比重の双方
が人血清と同等の溶液が得られることが判る。尚、ＢＳ
Ａを用いた場合にも人血清と同等の粘度と比重を有する
溶液が得られてはいるが、ＢＳＡ中にはコンタミ酵素等
が含まれている場合が多く、本発明の目的のために使用
するには問題がある。また、ＰＶＡ　５００やＰＶＰ　
Ｋ３０を添加した溶液に於いては粘度及び比重が共に人
血清と同等となる場合はなかった。

【００１８】実施例１．検量係数設定用反応指示物質溶
液の調製ＰＥＧ２００を１５％含み且つ４−ニトロフェ
ノールの濃度が１．３ｍＭ、３．２ｍＭ又は６．５ｍＭ
である溶液■、■及び■を調製し、本発明の検量係数設
定用反応指示物質溶液とした。これら溶液について実験
例１．と同様の方法で粘度及び比重を求めた。結果を表
２に示す。

【００１９】比較例１．ＰＥＧを除いた以外は実施例１
と同様にして１．３ｍＭ、３．２ｍＭ及び６．５ｍＭの
４−ニトロフェノール溶液■、■及び■を調製し、これ
らについて実験例１．と同様の方法で粘度及び比重を求
めた。結果を表２に併せて示す。

【００２０】

【表２】

【００２１】表２より明らかな如く、ＰＥＧ２００を適
当量添加することにより粘度及び比重が人血清のそれら
と同等の検量係数設定用反応指示物質溶液が得られるこ
とが判る。

【００２２】実施例２．ＰＥＧ２００を１５％及びグル
コースを１５０ｍｇ／ｄｌ含む溶液を調製し臨床検査用
標準液とした。この粘度及び比重を実施例１．と同様に
して測定したところ、得られた値は人血清のそれらと同
等であった。参考例１．自動分析装置によるサンプリン
グ精度（検体）　　実施例１．で調製した検量係数測定
用反応指示物質溶液■、■及び■並びに比較例１．で調
製した４−ニトロフェノール溶液■、■及び■を検体と
した。（試液）　　アルカリホスファターゼＩＩ−ＨＡテスト
ワコー（和光純薬工業株式会社製）の第一試液及び第二
試液を用いた。（操作法）東芝自動分析装置ＴＢＡ−３０Ｒにおいて、
検体５μｌに第一試液３００μｌ及び第二試液７５μｌ
を加え、主波長４０４ｎｍ、副波長５００ｎｍで吸光度
を測定する操作を１０回繰り返し得られた吸光度の最大
値（Ｍａｘ）、最小値（Ｍｉｎ）、標準偏差（ＳＤ）及
び変動係数（ＣＶ％）を求めた。但し、ＣＶ（％）＝Ｓ
Ｄ／平均値×１００で表わした。結果を表３に示す。

【００２３】

【表３】

【００２４】表３より明らかな如く、本発明の検量係数
設定用反応指示物質溶液を用いることにより変動係数が
顕著に小さくなること、即ち、検体採取量精度が良好と
なることが判る。尚、実施例２．で得られた本発明の臨
床検査用標準液と、単にグルコースを１５０ｍｇ／ｄｌ
含む水溶液について検体採取量精度の検討を上記方法に
基づいて行ったところ、本発明の臨床検査用標準液を用
いた方が、変動係数の明らかに小さくなること、即ち、
検体採取量精度が良好となることが判った。

【００２５】

【発明の効果】以上述べた如く、本発明は、従来の方法
では得られなかった血清と同等の比重及び粘度を有する
臨床検査用標準液及び検量係数設定用反応指示物質溶液
を提供するものであり、これらを使用して自動分析装置
による測定を行えば、より正確な測定値を得ることがで
きるので、斯業に貢献するところ大なる発明である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　ポリエチレングリコールにより、粘度
及び比重を調整したことを特徴とする臨床検査用標準液
又は検量係数設定用反応指示物質溶液。
【請求項２】　　ポリエチレングリコールの平均分子量
が２００〜４００である請求項１に記載の臨床検査用標
準液又は検量係数設定用反応指示物質溶液。