JPH04368324A - マグノロール及び／またはホウノキオールを有効成分とする血管攣縮抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、従来良く使用されたホ
ウノキ（厚朴）（ｍａｇｎｏｌｉａ　ｂａｒｋ）　の成
分を有効成分として含有する血液循環改善剤に関する。 血液循環改善剤は、具体的には、血小板凝集抑制剤、血
栓症予防及び治療剤、血管拡張剤、血管攣縮抑制剤、血
液循環改善剤等がある。

【０００２】

【従来技術】血栓の形成は一般の血管壁と血液成分、特
に血小板、血液凝固因子との相互作用の積み重ねが重要
な役割を果たすとされていること。すなわち、血管壁が
コレステロール、トリグリセリドなどの脂肪類物質を受
けると露出した血管内皮下組織に血清中の血小板が接触
し、その際、血小板は血管内皮下層にあるもの、とくに
コラーゲンに粘着し、血小板相互の凝集を促進する因子
を細胞外に遊離し、この物質の作用によって血清中の血
小板が凝集し陸続的に、その血管壁の障害部位に凝塊を
形成し、甚にこの血小板凝塊はフィブリン　（ｆｉｂｒ
ｉｎ）　の作用によって血栓へと発展していくとされて
いる。この様な血栓はしばしば末梢動脈、冠動脈等に生
じ、これが心筋梗塞、脳血栓等の各種の血栓症を引き起
こすことが近年成人病の中で大きな役割を占めることが
判明している。現在まで、ニフェジピン（ｎｉｆｅｄｉ
ｐｉｎ）　やベラパミル（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）　等の
新薬を用いて細胞外のＣａ＋＋が細胞内へ向くことが抑
制できる、それから血管攣縮の症状を緩解されることが
あったが、しかし臨床的にみて必ずしも満足すべき抗血
栓剤はなかった。従って、血栓症の予防や心血管循環の
改善、治療としては上記の過程を阻害する血小板凝集抑
制剤の開発が強く望まれている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】動脈血栓などの血栓症
に対して血小板が遊離し、凝集する二つの作用は血栓の
形成の必要因子として知られている。即ち、ホスホイノ
シチドの代謝、トロンボキサンと血小板活性因子（ｐｌ
ａｔｅｌｅｔ−ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ，
　ＰＡＦ）の形成、またはアデノシン二リン酸とフィブ
リノーゲン等物質の遊離を含みあわせた複雑な生化学変
化過程があり、従来少数の血液凝固阻止薬、例えばアス
ピリン、ジピリダモール等がシクロオキシゲナーゼ（ｃ
ｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ）　の活性を抑制して、ト
ロンボキサン　（ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ）の形成量を
減少させ、アデノシン二リン酸　（ＡＤＰ）、セロトニ
ン　（ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ）、フィブリノーゲン　（ｆ
ｉｂｒｉｎｏｇｅｎ）　の遊離を抑制することができ、
これに基づいて血栓の生成を抑制することができる。本
発明者らは上記述べたことに鑑み、優れた血栓症の予防
、治療剤を提供すべく鋭意検討した結果、モクレン科植
物コウボク　（厚朴）　に含有されるマグノロール　（
Ｍａｇｎｏｌｏｌ）　とホウノキオール　（ｈｏｎｏｋ
ｉｏｌ）　成分が血栓に対して生物活性を示すことを見
い出し、これに基づいてさらに研究を進めて、本発明を
完成した。

【０００４】

【課題を解決するための手段】コウボク　（厚朴）　は
従来漢方の一種として鎮痙、鎮痛薬や収斂、利尿等の目
的に用いられている。厚朴花の水性エキスをねこ、うさ
ぎに静注、筋注して、その結果、血圧降下と心拍数増加
などを誘発し　（Ｃｈａｎｇ，　Ｈ．　Ｍ．　ａｎｄ　
Ｂｕｔ，　Ｐ．　Ｐ．　Ｈ．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇ
ｙ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｈｉ
ｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａｌ　Ｍｅｄｉｃａ，　Ｐ．　
６０９−６３５，　Ｗｏｒｌｄ　Ｓｃｉ．　Ｐ．　Ｐｈ
ｉｌａｄｅｌｉｐｈｉａ　１９８６　参照）　、また更
に、抗菌、抗カビまたは中枢神経抑制などの整理活性が
つぎつぎに見出されている　（Ｃｈｅｍ，　Ｐｈａｒｍ
．　Ｂｕｌｌ．　２０，　Ｐ．２１２−２１３，　１９
７２；　３０，　Ｐ．　３３４７−３３５３，　１９８
２；　Ｊａｐ．　Ｊ．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．　２５，
　Ｐ．　６０５，　１９７５　参照）　。

【０００５】１９７２年モクレン科植物に化１に示すマ
グノロールと化２に示すホウノキオールとの二つ異性体
が分離され、さらにその１０年後にこれらの二つ異性体
が厚朴からも分離されている。

【０００６】本発明の厚朴の成分について、ウサギの血
小板で生理活性を調べたところ、ホウノキオールはアラ
キドン酸　（ａｒｓｃｈｉｄｏｎｉｃ　ａｃｉｄ）　で
ウサギ血小板の凝集作用に対して、強く抑制作用を示す
ことから、ホウノキオールは血栓症の予防に活性を持つ
ことも明らかにした。 さらに同様のウサギ血小板の凝集惹起剤であるコラーゲ
ンも一緒に調べたところ同様の効果があることが判明し
た。一方ホウノキオールの異性体のマグノロールについ
ては抑制作用は弱くなっているが、ホウノキオールとマ
グノロールの血小板凝集の抑制機構はアスピリンのよう
な非ステロイド性抗炎症薬　（ＮＳＡＩＤ）と同様で、
即ちトロンボキサン　（ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ）の生
合成を阻害する。５０μＭインドメタシンの存在下、コ
ラーゲンやトロンビン　（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）　による
Ｃａ＋＋の細胞内への移動することがホウノキオールと
マグノロールに阻害されるから、この厚朴の二つ成分は
Ｃａ＋＋の固定化を低下する活性を有している。

【０００７】マグノロールとホウノキオールの生理活性
は上述の血小板凝集を抑制するが、血管攣縮現象を現わ
すことはない。ラット胸動脈環標本を高濃度のカルシウ
ム液に浸漬するとあるいはカルシウム液を添加すると胸
動脈血管が攣縮現象を現し、また用量に関する用量−反
応曲線　（ｄｏｓｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｃｕｒｖｅ）
に示すように用量依存的にこの現象が発生する。同様な
現象がカルシウム液に浸漬した場合にも見られる。３μ
Ｍノルエピネフリン　（ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ
）　が存在すると動脈環が一過性の痙縮　（ｐｈａｓｉ
ｃ）　と持続性　（ｔｏｎｉｃ）の反応を現すことが知
られている。しかし厚朴のマグノロールとホウノキオー
ルを添加するとこの二つ現象が現われない事を示す　（
図５参照）。すなわち、図５に示すように、１．９ｍＭ
のカルシウムイオン存在下にて、一過性の痙縮あるいは
持続性の血管収縮に対するマグノロールの抑制作用は、
いずれもその用量に依存する。カルシウムイオンが除か
れ、且つ２ｍＭ　　ＥＤＴＡが存在した場合、上述の一
過性の痙縮及び持続性の血管収縮作用でもマグノロール
に抑制される。もしカルシウムをＥＤＴＡに変更しても
マグノロール、ホウノキオールが同様な抑制作用を示す
。それからマグノロールは細胞外カルシウムイオンが細
胞内へ向く内流作用を抑制でき、その上細胞内カルシウ
ムイオンの移動に影響を与えることができることを明ら
かにした。ラット胸動脈環標本を３μＭノルエピネフリ
ンで前処理して、また３０μｇ／ｍｌマグノロールを添
加し、動物環が一過性の痙縮と持続性の反応を現わす。 しかしこのマグノロールの作用は内皮細胞誘導体緩和因
子　（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｒｅ
ｌａｘａｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ，　ＥＤＲＦ）　と結合
しているヘモグロビン　（ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）　や
グアニル酸シクラーゼ　（ｇｕａｎｙｌａｔｅ　ｃｙｃ
ｌａｓｅ）と対抗できるメチレンブル　（ｍｅｔｈｙｌ
ｅｎｅ　ｂｌｕｅ）　を抑制できる（図６参照）。すな
わち、図６に示すように、ノルエピネフリン（ＮＥ）に
よって起る血管収縮に対しては、マグノロールが双相性
の放鬆作用を示す。ヘモグロビン（Ｈｂ）の前処理では
、マグノロールの快速放鬆作用を抑制することができ、
しかし、緩慢放鬆作用に対しては完全に影響がなかった
。 グアニル酸シクラーゼ（Ｇｎａｍｙｌａｔｅ　ｃｙｃｌ
ａｓｅ）　の阻害剤であるメチレンブルー（ＭＢ）は、
マグノロールの快速放鬆作用を抑制するが、緩慢放鬆作
用に対しては完全に影響がなかった。メチレンブルー（
ＭＢ）をＮＥの後に加えたとしても、マグノロールの快
速放鬆作用を抑制することができ、これは後者がｅｎｄ
ｏｔｈｅｌｉｕｍ−ｄｅｒｉｖｅｄ　ｒｅｌａｘｉｎｇ
　ｆａｃｔｏｒ（ＥＤＲＦ）の釈放と関係あることを示
す。または内皮を除去したラット胸動脈環標本でその一
過性の痙縮と持続性反応の一部分が保留され、即ちカル
シウムイオンを拮抗して血管を攣縮できる作用がまだ残
留している。

【０００８】マグノロールとホウノキオールの消炎作用
については、１０μｇ／ｐａｗ　ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　
を大鼠後肢の足蹠皮下に注射し、その足浮腫状況により
、マグノロールはインドメタシン　（ｉｎｄｏｍｅｔｈ
ａｃｉｎ）、イブプロフェン　（Ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ）
の対照薬に比較して、同様の抗炎作用を示す、またラッ
トにより抗高血圧の実験を行なうと、マグノロールは低
用量で血圧が降下作用を示す、その上腹腔投薬よりも筋
注が降圧効果が強くなる。本発明では通常有効量のマグ
ノロール、ホウノキオールと製薬上の常套の医薬、添加
剤　（担体、賦形剤、希釈剤など）　とを混合して、錠
剤、顆粒、散剤、カプセル剤、注射剤などの型態で処置
を要する患者に安全に投与することができる。 また、貼布剤、坐剤等として用いることもできる。投与
量は患者の症状、体重、年齢などにより変更することが
できるが、通常成人一日当たり１０〜５００ｍｇの範囲
が好ましい。本発明で用いられた厚朴の成分は価値ある
薬理作用を有する。これらは特に血栓症の予防に興味あ
る活性を示し、その上血小板の凝集を阻害する作用、抗
炎作用、抗高血圧作用、または血管拡張、血管攣縮を予
防あるいは治療する作用を有する。

【０００９】

【実施例】以下に実施例を示す、本発明を具体的に説明
するが、本発明はこれらに限定されるものではない。 実施例１ １．本実施例では、マグノロール及びホウノキオールの
血小板凝集抑制作用を示す。 （１）ウサギ血小板の調製− ウサギの耳静脈から採血したウサギ血液に、エチレンジ
アミン四酢酸を６ｍＭ濃度まで調整し、室温下９０ｘｇ
、１０分間遠心分離し、上層を多血小板血漿　（ｐａｌ
ａｔｅｌｅｔ−ｒｉｃｈｐｌａｓｍａ，　ＰＲＰ）とし
た。下層を５００ｘｇ　　１０分間遠心分離し、または
Ｔｙｒｏｄｅ’ｓ液で洗う、それを繰り返すことにより
、下層を乏小板血漿（ＰＰＰ）とした。上記の多血小板
血漿をエチレンジアミン四酢酸を用いてから血球計数器
（ＺＭ型）で４．５×１０８　血小板／ｍｌまで測定し
た。

【００１０】（２）血小板凝集試験−Ｏ’Ｂｒｉｅｎ　
らの方法　（Ｊ．Ｃｌｉｎ．　Ｐａｔｈ，　１５，　４
５２−４５６，　１９６２）　に準じ、凝集惹起剤とし
てある、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）　、コラーゲン
、アラキドン酸、ＰＡＦ　を添加し血小板凝集によって
生じるＰＲＰ　の吸光度の変化を記録した。凝集作用率
は血小板がＴｙｒｏｄｅ’ｓ液に存在の吸光度が１００
％として、以下の公式で求める。

【００１１】

【数１】

【００１２】それで血小板凝集に対する被検体の抑制作
用は、対照溶媒０．５％ＤＭＳＯ添加時の最大凝集に対
する被検体添加時の最大凝集の比率から被検体の抑制率
を求めた。この結果を図１に示す。すなわち、アラキド
ン酸１００μＭを用いて実験を行ったところ、厚朴の両
成分とも、その用量に依存して、ウサギの血小板凝集作
用を抑制することができ、両者の濃度が１００μｇ／ｍ
ｌの時に、完全抑制作用を示す。厚朴成分の抑制活性は
マグノロールのＩＣ５０−１０μｇ／ｍｌ、ホウノキオ
ールのＩＣ５０−０．５μｇ／ｍｌを示した。図２に示
すように、コラーゲンを１０μｇ／ｍｌ用いて、実験を
行ったところ厚朴の両成分とも、その用量に依存して、
ウサギの血小板凝集を抑制する。この抑制作用はアラキ
ドン酸のそれより若干低い。ホウノキオールのＩＣ５０
は１０μｇ／ｍｌ、マグノロールのＩＣ５０は１００μ
ｇ／ｍｌを示し、ホウノキオールの抑制活性はマグノロ
ールの活性より１０倍も高い値を示した。

【００１３】実施例２ １．本実施例ではラット胸動脈環標本の血管攣縮作用を
示す。ラットから胸動脈環標本を調製し、６０μＭカリ
ウム溶液に浸漬して、０．０３ｍＭ、０．１ｍＭ、０．
３ｍＭ、１ｍＭ、３ｍＭのカルシウム溶液を別々に添加
して、胸動脈血管の攣縮現象がマグノロールあるいはホ
ウノキオールを予め添加した場合に生じるかどうかを検
討した。マグノロールあるいはホウノキオールを予め添
加しておくとその用量に依存して胸動脈血管の攣縮を抑
制する。すなわち、図３及び図４にカルシウム溶液によ
る胸動脈血管の攣縮現象を抑制するマグノロールの濃度
及びホウノキオールの濃度を示す。厚朴の両成分とも、
その用量に依存して、異なるカルシウムイオン濃度によ
って起った血管収縮作用を抑制する。１ｍＭのカルシウ
ムイオンに対して、約３０μｇ／ｍｌのマグノロールあ
るいはホウノキオールが完全抑制作用し、そのＩＣ５０
はそれぞれが１及び２μｇ／ｍｌであった。血小板凝集
抑制作用の結果と異なるのは、両者の血管放鬆活性がほ
ぼ同じだからである。

【００１４】実施例３ （１）マグノロールまたはホウノキオール５０ｍｇをシ
リカゲル０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム５ｍｇ
、微結晶セルロース２７５ｍｇ、コーンスターチ１１ｍ
ｇ及び乳糖９８．８ｍｇと混合し、加圧成形して錠剤と
した。 （２）マグノロールまたはホウノキオール５０ｇを殺菌
生理食塩水１ｌに溶解し、これを１ｍｌのアンプルに充
填し、筋肉注射剤を調製した。

【図面の簡単な説明】

【図１】アラキドン酸の血小板凝集作用に対するマグノ
ロールとホウノキオールの抑制作用

【図２】コラーゲンの血小板凝集作用に対するマグノロ
ールとホウノキオールの抑制作用

【図３】カルシウム液が胸動脈血管の攣縮現象を抑制す
るマグノロールの濃度

【図４】カルシウム液が胸動脈血管の攣縮現象を抑制す
るホウノキオールの濃度

【図５】３μＭノルエピネフリンのラット胸動脈環作用
に対するマグノロールの影響

【図６】ラット胸動脈環の一過性の痙攣と持続性反応に
対するマグノロールの抑制作用

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】　　厚朴の成分を有効成分とする血液循環
   改善剤 【請求項２】　　厚朴の成分が化１で示されるマグノロ
   ール（ｍａｇｎｏｌｏｌ）及び／または化２で示される
   ホウノキオール　（ｈｏｎｏｋｉｏｌ）　である血液循
   環改善剤【化１】 【化２】 【請求項３】　　血液循環改善が血小板凝集抑制である
   請求項２記載の血小板凝集抑制剤 【請求項４】　　血液循環改善が血栓症の予防及び治療
   である請求項２記載の血栓症予防及び治療剤【請求項５
   】　　血液循環改善が血管拡張である請求項２記載の血
   管拡張剤 【請求項６】　　血液循環改善が血管攣縮抑制である請
   求項２記載の血管攣縮抑制剤 【請求項７】　　血液循環改善が細胞内カルシウムイオ
   ンの濃度を抑制し、ＥＤＲＦを遊離させる薬理作用を示
   すものである請求項２記載の血液循環改善剤