JPH04297494A

JPH04297494A - ペプチド誘導体とその用途

Info

Publication number: JPH04297494A
Application number: JP3062147A
Authority: JP
Inventors: Yoshihisa Tsukada; 芳久塚田; Atsushi Ogasa; 織笠　敦
Original assignee: Fuji Photo Film Co Ltd
Current assignee: Fujifilm Holdings Corp
Priority date: 1991-03-26
Filing date: 1991-03-26
Publication date: 1992-10-21

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、グルタミン酸−イソロ
イシン−ロイシン−アスパラギン酸−バリン−プロリン
−セリン−トレオニンのオクタペプチド単位を有する、
リポソームあるいはミセル等の分子集合体を形成するの
に最適なペプチド誘導体またはその塩、およびこれを有
効成分とする動物細胞の接着阻害剤並びに血小板凝集・
粘着抑制剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのアルギニン−グリ
シン−アスパラギン酸（以下、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ
　と略す）　配列を特異的に認識することが明らかにさ
れ、レセプターとの相互作用に重要なものであることが
報告されている（Ｎａｔｕｒｅ，　３０９　、３０（１
９８４））　。以来、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を
有するオリゴあるいはポリペプチドを用いる研究が成さ
れている例えば、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有す
る種々の鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血小
板凝集を阻害する方法（高分子学会予稿集（Ｐｏｌｙｍ
ｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐａｎ）　、３８、
３１４９（１９８９）、特開平２−１７４７９７号）　
、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するペプチドを細
胞移動抑制剤として用いる方法（　特開平２−４７１６
号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を固定化した　ＰＭ
ＭＡ　膜を細胞接着膜として用いる方法（高分子学会予
稿集（Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐ
ａｎ）　、３７、７０５（１９８８年））が報告されて
いる。さらに、ポリマーにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を
必須構成単位とするペプチドを共有結合させ動物細胞培
養基体、生体複合人工臓器用基体として用いる方法（特
開平１−３０９６８２号、特開平１−３０５９６０号）
　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ　配列を有するポ
リペプチドを体外血液用血小板保護剤として用いる方法
が開示されている（特開昭６４−６２１７　号）　。ま
た、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有するオリゴペプチ
ドあるいはその繰り返し構造を有するポリペプチドを用
いて、ガン転移を抑制する方法が知られている（Ｉｎｔ
．　Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｍａｃｒｏｍｏｌ．，　１１　
、２３、（１９８９）、同誌、１１、２２６（１０８６
）　、Ｊｐｎ．　Ｊ．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．，　６
０　、７２２（１９８９））。

【０００３】一方、最近フィブロネクチン分子内にはＡ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列以外の細胞接着配列が存在す
ることも明らかにされ、そのひとつとしてＩＩＩ　ＣＳ
（ｔｙｐｅＩＩＩ　ｈｏｍｏｌｏｇｙｃｏｎｎｅｃｔｉ
ｎｇ　ｓｅｇｍｅｎｔ）領域内に存在するＣＳ１ペプチ
ド（グルタミン酸−イソロイシン−ロイシン−アスパラ
ギン酸−バリン−プロリン−セリン−トレオニン配列を
含む）が注目されている（Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ
．，　２６２　、６８８６（１９８７））　。このペプ
チドは、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　ペプチドと同様にフ
ィブロネクチンレセプターに認識され、フィブロネクチ
ンの接着特異性に寄与していることと考えられている。現在では、その接着活性の最小単位がグルタミン酸−イ
ソロイシン−ロイシン−アスパラギン酸−バリン−プロ
リン−セリン−トレオニン（以下、ＥＩＬＤＶＰＳＴと
略す）配列を有するオクタペプチドであることが明らか
にされている（Ｊ．　ＣｅｌｌＢｉｏｌ．，　１０７、
２１８９（１９８８））　。

【０００４】一方、ＥＩＬＤＶＰＳＴ配列を有するオリ
ゴペプチドあるいはその繰り返し構造を有する、リポソ
ームあるいはミセル等の分子集合体を形成するのに最適
なペプチド誘導体は知られておらず、これらの化合物は
レセプターとの結合能の増強および血液中での安定化が
期待できる。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ＥＩ
ＬＤＶＰＳＴのオクタペプチド単位を有する、ペプチド
誘導体およびその合成法を提供することにある。本発明
の他の目的は、これを有効成分とする動物細胞の接着阻
害剤および血小板凝集・粘着抑制剤を提供することであ
る。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明の化合物は、下記
一般式〔Ｉ〕で規定されるペプチド誘導体であり、分子
内に存在するイオン性基は適当なイオンと塩を形成して
もよい。一般式〔Ｉ〕（Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−
Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−　［Ｇｌｙ　］）ｎ−ＯＣＨ２−ＣＨ
（ＯＲ１）−ＣＨ２ＯＲ２式中、Ｇｌｕ　、Ｉｌｅ　、Ｌｅｕ　、Ａｓｐ　、Ｖａ
ｌ　、Ｐｒｏ　、Ｓｅｒ　、Ｔｈｒ　は、それぞれグル
タミン酸、イソロイシン、ロイシン、アスパラギン酸、
バリン、プロリン、セリン、トレオニン残基を表す。［
Ｇｌｙ　］は存在するかあるいは存在しないグリシン残
基を表す。ｎは１から３までの整数を表し、１または２
が特に好ましい。Ｒ１　およびＲ２　は、水素あるいは
炭素数８〜２４の直鎖または分岐のアシル基またはアル
キル基であり、置換基、不飽和基を有していてもよい。好ましい炭素数は、１２から１８までである。アシル基
としては、ミリストイル基、パルミトイル基、ステアロ
イル基が好ましい例として示される。アルキル基として
は、ミリスチル基、パルミチル基、ステアリル基、３，
７，１１，１５−テトラメチルヘキサデシル基が好まし
い例として示される。Ｒ１　、Ｒ２　は同じであっても
異なっていてもよい。本発明において、アミノ酸残基は
Ｌ−、Ｄ−、ラセミ体のいずれでもよいが、Ｌ−体が好
ましい。また、分子内に存在する不斉炭素に関しては、
ラセミ体でも光学活性体のいずれでもよい。

【０００７】本発明の化合物の好ましい塩の例としては
、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、マグネ
シウム塩、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩が挙げられ
る。以下に、本発明の好ましい化合物例を挙げるが、本
発明はこれらに限られるものではない。

【０００８】

【化１】

【０００９】

【化２】

【００１０】本発明の化合物は、レセプターとの結合能
の増強および血液中での安定化が期待され、ＥＩＬＤＶ
ＰＳＴ部位がガン細胞、血小板、リンパ球等の表面に存
在するフィブロネクチンレセプターと結合できることを
利用して、ガン転移抑制、血小板凝集抑制、リンパ球活
性化の目的に使用することができる。

【００１１】次に本発明の化合物の合成法について説明
する。本発明の化合物は基本的に以下の方法により合成
することができる。 ■　　ジアルキル（ジアシル）グリセロールの合成■　
　保護アミノ酸の逐次延長による保護ペプチドの合成■
　　保護ペプチドとジアルキル（ジアシル）グリセロー
ルの縮合 ■　　保護基の除去および精製以下、各段階について具体的に説明する。■　　ジアル
キル（ジアシル）グリセロールは、公知の方法（例えば
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　２　、３９４（１９６３
））により合成することができ、また市販品を購入する
こともできる。■　　保護アミノ酸を逐次伸長する方法
は、既知の方法、すなわち、泉屋ら著「ペプチド合成の
基礎と実験」（丸善）やＢｏｄａｎｓｚｋｙ　著“ＰＲ
ＩＮＣＩＰＬＥＳ　ＯＦ　ＰＥＰＴＩＤＥ　ＳＹＮＴＨ
ＥＳＩＳ”、”ＴＨＥ　ＰＲＡＣＴＩＣＥ　ＯＦ　ＰＥ
ＰＴＩＤＥ　ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ”（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ
　Ｖｅｒｌａｇ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）に記載されてい
る方法がいずれも有効である。縮合反応の段階では、Ｄ
ＣＣ−ａｄｄｉｔｉｖｅ法、アジド法、混合酸無水物法
、活性エステル法のいずれを採用してもよいが、１−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾールとジシクロヘキシルカルボ
ジイミドを併用するＤＣＣ−ａｄｄｉｔｉｖｅ法が最も
良好な結果を与える。■　　保護ペプチドとジアルキル
（ジアシル）グリセロール誘導体の縮合は、ジアルキル
（ジアシル）グリセロール誘導体、保護ペプチド、およ
びジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤をこれら
が溶解する有機溶媒中で室温で攪拌することにより合成
できる。■　　保護基を脱保護するのに用いられる条件
は、用いた保護基の種類に大きく依存する。通常使用さ
れる脱保護条件は、加水素分解、トリフルオロ酢酸、無
水フッ化水素、トリフルオロメタンスルホン酸−チオア
ニソール混合系、トリフルオロ酢酸−チオアニソール混
合系等であるが、保護基の種類によってはさらに多様な
手段が可能である。また、目的物の精製は、シリカゲル
クロマトグラフィーおよびゲルろ過法等を用いることに
より行う。

【００１２】本発明の化合物を分散して製剤を製造する
には、単独の水媒体中への分散あるいは分散助剤の併用
のどちらで行ってもよい。分散助剤としては、卵黄レシ
チン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジミリス
トイルホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノー
ルアミン、ホスファチジン酸、ホスファチジルイノシト
ール、ホスファチジルグリセロール、スフィンゴミエリ
ン、カルジオリピン等に代表される天然または合成の脂
質、あるいはトリトンＸ−１００、ポリエチレングリコ
ール、ベンジルアルコール、ゼラチンなどの分散助剤と
して認可されている医薬品添加物の中から化合物に応じ
て選択される。なお、これらの医薬品添加物に関しては
、日本薬学会１９８７年発行のファルマシアレビューＮ
ｏ．　２２「医薬品添加物」に詳細に記述されており、
これらの中から選択するのが好ましい。

【００１３】本発明に係る分子集合体の製剤中の一般式
〔Ｉ〕で表される化合物の配合量は特に限定されないが
、好ましくは分散助剤１に対して０．１〜９．０（重量
比）の配合比である。また、ステロール等の添加物（例
えば、コレステロール、β−シトステロール、スチグマ
ステロール、カルベンステロールなど）を混合してもよ
い。

【００１４】一般式〔Ｉ〕で表される化合物とリン脂質
を混合して分子集合体を形成させる方法としては、通常
のリポソーム形成法すなわちボルテクシング法（Ｊ．　
Ｍｏｌ．　Ｂｉｏｌ．，　１３　、２３８（１９６５）
）、ソニケーション法　（Ｂｉｏｃｈｅｍ．，　８　、
３４４（１９６９））、プレベシクル法（Ｎｅｕｒｏｓ
ｃｉ．　Ｒｅｓ．　Ｐｒｏｇ．　Ｂｕｌｌ．，　９　、
２７３（１９７１））、エタノール注入法（Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ，　２９８、１０
１５（１９７３））　、フレンチプレス法（ＦＥＢＳ．
　Ｌｅｔｔ．，９９、２１０（１９７３））、コール酸
除去法（Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．，　２４６　、
５４７７（１９７１））　、トリトンＸ−１００バッチ
法（Ｅｕｒ．　Ｊ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ．，　８５、２５
５（１９７８））、Ｃａ２＋融合法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．
　Ｂｉｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ，　３９４　、４８３（
１９７５））、エーテル注入法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ，　４４３　、６２９（１９
７６））、アニーリング法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ，　４４３、３１３（１９７６）
）、凍結融解融合法（Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．，
　２５２　、７３８４（１９７７））　、Ｗ／Ｏ／Ｗエ
マルジョン法（Ｊ．　Ｃｏｌｌｏｉｄ　Ｉｎｔｅｒｆａ
ｃｅ　Ｓｃｉ．，　６２　、１４９（１９７７））、逆
相蒸発法（Ｐｒｏ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ
．　ＵＳＡ，　７５　、４１９４（１９７８））　など
の方法が知られているが、本発明では上記のいずれの調
製法を用いてもよく、またこれらに限定されるものでは
ない。

【００１５】本発明で用いられるペプチド誘導体の投与
方法は、ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方
法、すなわち非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉
内投与、皮下投与等によって投与するのが好ましい。そ
のような注射用製剤を製造する場合、本発明のペプチド
誘導体を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳ（Ｎａ
Ｈ２ＰＯ４　５ｍＭ，　ＮａＣｌ　７０ｍＭ）　または
生理食塩水に分散して、注射用製剤としてもよく、ある
いは０．１Ｎ程度の酢酸水等に分散した後、凍結乾燥製
剤としてもよい。この際上記の分散助剤を用いてもよい
。このような製剤には、グリシンやアルブミン等の慣用
の安定化剤を添加してもよく、血中半減期を延長させる
等の目的のためコラーゲンやリポソーム等を担体として
もよい。

【００１６】さらに、本発明のペプチド誘導体は、例え
ばリポソーム中に包含したマイクロカプセル剤とすれば
、経口投与することも可能であり、座薬、舌下剤、点鼻
スプレー剤等の形態にすれば、消化管以外からの粘膜か
ら吸収させることも可能である。本発明のペプチド誘導
体は、細胞接着性タンパク質のコア配列（ＥＩＬＤＶＰ
ＳＴ）を有し、該コア配列を介して細胞接着性タンパク
質と同様の機序で細胞に接着する。そのため、細胞接着
性タンパク質のアゴニストまたはアンダゴニストとして
様々の生物活性を示す。その他にも、免疫調整作用、創
傷治癒作用、毛細血管中で起る癌細胞による血小板凝集
の抑制作用、神経疾患治癒作用等の広範な生物活性が認
められる。

【００１７】したがって、本発明のペプチド誘導体は、
その少なくとも１種類を、場合により慣用の担体または
医薬用製剤とともに癌転移抑制剤、創傷治癒剤、免疫抑
制剤、血小板凝集抑制剤または神経疾患治療剤として患
者に投与することが可能である。特に動物細胞接着阻害
剤または血小板凝集・粘着抑制剤としての使用が好まし
い。その投与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋ
ｇの範囲で症状、年齢、体重等に基づいて決定される。

【００１８】以下に本発明の化合物の合成例を示すが、
本発明はこれらに限定されるものではない。なお、アミ
ノ酸、各種保護基および脱保護試薬は通常用いられてい
る略号を使って表した。また、他の化合物例もここに例
示した方法で合成できる。

【００１９】

【実施例】実施例１以下に本発明の化合物１の合成例を示す。また、化合物
２〜７もここに例示した方法で合成できる。ジアルキルグリセロールの合成Ｃ１６Ｈ３３ＯＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２Ｏ
Ｈの合成文献（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，　５０３，（１９
８５））記載の方法により調製した１−ベンジルグリセ
ロール１２．０ｇをトルエン３００ｍｌに溶かし、この
溶液に粉末水酸化カリウム１６．０ｇと１−ブロモヘキ
サデカン８２ｇを加え、反応混合物を８時間加熱還流し
た。反応液を室温になるまで放冷したのちヘキサン４０
０ｍｌで希釈した。水２００ｍｌで２回洗浄後無水硫酸
ナトリウムにて乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過して除
き、ろ液を減圧濃縮して無色油状物を得た。これをシリカゲルクロマトグラフィー（溶出液　　ヘキ
サン／酢酸エチル＝４０：１）で精製し、１，２−ジヘ
キサデシル−３−ベンジルグリセロールを４１．２ｇ（
収率９５．５％）得た。物性値は文献（Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｓｒｒｙ，　２　、３９４（１９６３））記載のそれ
と一致した。

【００２０】得られた１，２−ジヘキサデシル−３−ベ
ンジルグリセロールを酢酸エチル２５０ｍｌに溶解し、
１０％パラジウム−炭素１．５ｇを加えて、反応混合物
を水素雰囲気下８時間反応させた。不溶性物質をセライ
トろ過して除き、セライト層を酢酸エチルで洗浄した。ろ液、洗液をあわせて減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル
から再結晶してジアルキルグリセロールＣ１６Ｈ３３Ｏ
ＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２ＯＨを無色結晶（
３４．４ｇ）として得た。物性値は文献（Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｒｒｙ，　２　、３９４（１９６３））記載のそ
れと一致した。

【００２１】保護ペプチドの合成ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（Ｎ
Ｏ２）の合成ＢｏｃＴｈｒ（Ｂｚｌ）（国産化学（株）
から購入）（１５．５ｇ、５０ｍｍｏｌ）、ジイソプロ
ピルエチルアミン（６．４６ｇ）、ｐ−ニトロベンジル
ブロミド（１０．８ｇ）、酢酸エチル（２００ｍｌ）の
混合物を３時間加熱還流した。反応液を室温になるまで
放冷した後に、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食
塩水各２００ｍｌで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
した。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ液を減圧濃縮
して無色油状物ＢｏｃＴｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ
２）を定量的に得た。これにクロロホルム（１００ｍｌ
）、トリフルオロ酢酸（５０ｍｌ）を加え、室温で３０
分間反応させた。溶媒を減圧留去した後に酢酸エチル（
２５０ｍｌ）を加え、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液、
飽和食塩水２各２００ｍｌで洗浄し、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ液を
減圧濃縮して無色油状物Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（Ｎ
Ｏ２）　を定量的に得た。これにＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ
）（国産化学（株）から購入）（１４．８ｇ、５０ｍｍ
ｏｌ）、ＤＣＣ（１１．４ｇ、５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢ
ｔ（６．９ｇ、４５ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１５０ｍｌ）
を加え、０℃で３０分間、室温で２４時間反応させた。ＤＣＵｒｅａ　を除去した後に溶媒を減圧留去し、クロ
ロホルム１００ｍｌを加え、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水
溶液、飽和食塩水各２００ｍｌで洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ
液を減圧濃縮してシリカゲルクロマトグラフィー（溶出
液　　ヘキサン／酢酸エチル　　４０：１）により精製
し、ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ
（ＮＯ２）を無色油状物（２８．３ｇ）として得た。ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚ
ｌ（ＮＯ２）　の合成ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）（２８．０ｇ、４５ｍｍｏ
ｌ）、ＢｏｃＰｒｏ（国産化学（株）から購入）（９．
６９ｇ、４５ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１０．３ｇ、５０ｍ
ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６．１ｇ、４０ｍｍｏｌ）、ＤＭ
Ｆ（１５０ｍｌ）を加え、０℃で３０分間、室温で２４
時間反応させた。ＤＣＵｒｅａ　を除去した後に溶媒を
減圧留去し、クロロホルム１００ｍｌを加え、１Ｎ炭酸
水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水各２００ｍｌで洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ液を減圧濃縮してシ
リカゲルクロマトグラフィー（溶出液　　クロロホルム
／メタノール　　９９：１）により精製し、ＢｏｃＰｒ
ｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２
）　を無色油状物（２９．８ｇ）として得た。ＢｏｃＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
ＯＢｚｌ（ＮＯ２）の合成ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）（２８．８ｇ、
４０ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＶａｌ（国産化学（株）から購
入）（８．７ｇ、４０ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（９．３ｇ、
４５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．４ｇ、３５ｍｍｏｌ）
、ＤＭＦ（１５０ｍｌ）を加え、ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（
Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　の合成
と同様に行った。ＢｏｃＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）
Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）を無色油状物（２
９．４ｇ）として得た。ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　の合成Ｂｏｃ
ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚ
ｌ（ＮＯ２）（２８．６ｇ、３５ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）（国産化学（株）から購入）（１１．
３ｇ、３５ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（８．３ｇ、４０ｍｍｏ
ｌ）、ＨＯＢｔ（４．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（
１５０ｍｌ）を加え、ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　の合成と同様に行
った。ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（
Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　を無色
油状物（３３．７ｇ）として得た。ＢｏｃＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（
Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）の合成ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）（３２．７ｇ、
３２ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＬｅｕ（国産化学（株）から購
入）（７．４ｇ、３２ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（７．２ｇ、
３５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（４．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）
、ＤＭＦ（１５０ｍｌ）を加え、ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（
Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　の合成
と同様に行った。ＢｏｃＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｖａ
ｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（
ＮＯ２）を無色油状物（３３．５ｇ）として得た。ＢｏｃＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳ
ｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　
の合成ＢｏｃＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（
Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）（３３．
０ｇ、２９ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＩｌｅ（国産化学（株）
から購入）（６．７ｇ、２９ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（６．
８ｇ、３３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３．８ｇ、２５ｍｍ
ｏｌ）、ＤＭＦ（１５０ｍｌ）を加え、ＢｏｃＰｒｏＳ
ｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　
の合成と同様に行った。ＢｏｃＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）　を無色油状物（３４．１ｇ）と
して得た。ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
Ｂｚｌ（ＮＯ２）の合成ＢｏｃＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳ
ｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）（
３３．７ｇ、２７ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ
）（国産化学（株）から購入）（９．１ｇ、２７ｍｍｏ
ｌ）、ＤＣＣ（６．２ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（
３．８ｇ、２５ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１５０ｍｌ）を加
え、ＢｏｃＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
Ｂｚｌ（ＮＯ２）　の合成と同様に行った。ＢｏｃＧｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｖａｌ
ＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（Ｎ
Ｏ２）を無色油状物（３４．１ｇ）として得た。ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）　
の合成ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
Ｂｚｌ（ＮＯ２）（１．４７ｇ、１ｍｍｏｌ）を９０％
酢酸（４０ｍｌ）に溶解し、亜鉛末（０．３２ｇ、５ｍ
ｍｏｌ）を加え、０℃で２時間室温で１時間攪拌した。残存する亜鉛をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、クエン酸を
加えて酸性にし酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウム
で乾燥した後に、減圧濃縮してシリカゲルクロマトグラ
フィー（溶出液　　クロロホルム／メタノール　　９９
：１）により精製し、ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）Ｉｌｅ
ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）　を無色油状物（０．９７ｇ）とし
て得た。

【００２２】保護ペプチドとジアルキルグリセロール誘
導体の縮合ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
ＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２（ＯＣ１６Ｈ３３
）の合成ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ
（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂ
ｚｌ）（０．９３ｇ、０．７ｍｍｏｌ）、Ｃ１６Ｈ３３
ＯＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２ＯＨ（０．３８
ｇ、０．７ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．１７ｇ、０．８ｍ
ｍｏｌ）、クロロホルム（５０ｍｌ）を加え、０℃で３
０分間、室温で２４時間反応させた。ＤＣＵｒｅａ　を
除去した後に溶媒を減圧留去し、クロロホルム１００ｍ
ｌを加え、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水
各２００ｍｌで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した
。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ液を減圧濃縮して
シリカゲルクロマトグラフィー（溶出液　　クロロホル
ム／メタノール　　９９：１）により精製し、ＢｏｃＧ
ｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｖａ
ｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＣＨ２Ｃ
Ｈ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２（ＯＣ１６Ｈ３３）を白色
粉末（１．０４ｇ）として得た。

【００２３】脱保護および精製化合物（１）の合成ＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
ＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）ＣＨ２（ＯＣ１６Ｈ３３
）（１．０４ｇ、０．６ｍｍｏｌ）にクロロホルム（２
０ｍｌ）、トリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）を加え、室温
で３０分間反応させた。溶媒を減圧留去した後にクロロ
ホルム（５０ｍｌ）を加え、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水
溶液、飽和食塩水各５０ｍｌで洗浄し、無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥した。硫酸ナトリウムをろ過して除き、ろ液
を減圧濃縮して白色粉末Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）Ｉｌｅ
ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＣＨ２ＣＨ（ＯＣ１６Ｈ３３）Ｃ
Ｈ２（ＯＣ１６Ｈ３３）　を定量的に得た。これを酢酸
（５０ｍｌ）に溶解し、１０％パラジウム炭素１ｇを加
え、室温で常圧加水素分解を２４時間行った。セライト
を用いて触媒をろ別し、溶媒を減圧留去した。シリカゲ
ルクロマトグラフィー（溶出液　　クロロホルム・メタ
ノール・水　　６５：２５：４）により精製し、化合物
（１）を７３０ｍｇ得た。

【００２４】ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１３９４　　（Ｍ−
Ｈ）アミノ酸分析：Ｇｌｕ（０．９５），　Ｉｌｅ（１
．１１），　Ｌｅｕ（１．０３），　Ａｓｐ（０．９８
），　Ｖａｌ（０．８９），　Ｐｒｏ（０．９９），　
Ｓｅｒ（０．９２），　Ｔｈｒ（０．８９）実施例２以下に化合物（２）の合成例を示す。

【００２５】実施例１記載の方法にしたがい、化合物（
２）を合成した。１−ブロモヘキサデカンを１−ブロモ
オクタデカンに変更してグリセロール誘導体を合成した
。ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１４５０　　（Ｍ−Ｈ）アミノ酸
分析：Ｇｌｕ（１．０４），　Ｉｌｅ（１．０９），　
Ｌｅｕ（１．０９），　Ａｓｐ（０．９１），　Ｖａｌ
（０．９７），　Ｐｒｏ（０．９０），　Ｓｅｒ（０．
８３），　Ｔｈｒ（０．８０）実施例３以下に化合物（３）の合成例を示す。

【００２６】実施例１記載の方法にしたがい、化合物（
３）を合成した。１−ブロモヘキサデカンを１−ヨード
−３，７，１１，１５−テトラメチルヘキサデカンに変
更してグリセロール誘導体を合成した。ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１５０７　　（Ｍ−Ｈ）アミノ酸
分析：Ｇｌｕ（０．９６），　Ｉｌｅ（１．０５），　
Ｌｅｕ（０．９７），　Ａｓｐ（１．００），　Ｖａｌ
（１．１３），　Ｐｒｏ（０．９１），　Ｓｅｒ（０．
８２），　Ｔｈｒ（０．８５）実施例４以下に化合物（４）の合成例を示す。

【００２７】実施例１記載の方法にしたがい、化合物（
４）を合成した。１−ブロモヘキサデカンを１−ブロモ
ドデカンに変更してグリセロール誘導体を合成した。ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１２８２　　（Ｍ−Ｈ）アミノ酸
分析：Ｇｌｕ（１．０７），　Ｉｌｅ（１．０６），　
Ｌｅｕ（１．０８），　Ａｓｐ（１．０３），　Ｖａｌ
（１．０９），　Ｐｒｏ（０．９４），　Ｓｅｒ（０．
７７），　Ｔｈｒ（０．８１）実施例５以下に化合物（５）の合成例を示す。また、化合物（６
）、（７）もここに例示した方法で合成できる。

【００２８】文献（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，　５０３（１
９８５））　記載の方法により調製した１−ベンジルグ
リセロール１８ｇを塩化メチレン１００ｍｌに溶解し、
パルミトイルクロリド５５ｇ、トリエチルアミン２０．
２ｇを加え、室温で１２時間攪拌した。これを１Ｎ炭酸
水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水各１００ｍｌで数回
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウ
ムをろ過して除き、ろ液を減圧濃縮してシリカゲルクロ
マトグラフィー（溶出液　　ヘキサン：酢酸エチル　　
４０：１）により精製した。１，２−ジパルミトイル−
３−ベンジル−グリセロールを無色結晶として６０ｇ得
た。以下、実施例１記載の方法で化合物（５）を合成し
た。

【００２９】ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１４２２　　（Ｍ−
Ｈ）アミノ酸分析：Ｇｌｕ（１．１０），　Ｉｌｅ（０
．９９），　Ｌｅｕ（１．０５），　Ａｓｐ（０．９８
），　Ｖａｌ（１．０１），　Ｐｒｏ（０．９９），　
Ｓｅｒ（０．８８），　Ｔｈｒ（０．８３）実施例６以下に化合物（６）の合成例を示す。

【００３０】実施例５記載の方法にしたがい、化合物（
６）を合成した。保護ペプチドの合成は、ＢｏｃＧｌｕ
（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰ
ｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ
２）をトリフルオロ酢酸で処理してＢｏｃ　基を除去し
たＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚ
ｌ（ＮＯ２）　とＢｏｃＧｌｕ（ＯＢｚｌ）ＩｌｅＬｅ
ｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏＳｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ（ＮＯ２）を亜鉛／酢酸で処理
してｐ−ニトロベンジル基を除去したＢｏｃＧｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）ＩｌｅＬｅｕＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＶａｌＰｒｏ
Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）　をＤＣＣ−ＨＯＢ
ｔ　法によりフラグメント縮合した。

【００３１】ＦＡＢ−ＭＳ　　　　２２７７　　（Ｍ−
Ｈ）アミノ酸分析：Ｇｌｕ（０．９９），　Ｉｌｅ（１
．０８），　Ｌｅｕ（１．０９），　Ａｓｐ（０．９９
），　Ｖａｌ（１．１１），　Ｐｒｏ（０．９４），　
Ｓｅｒ（０．８５），　Ｔｈｒ（０．８０）実施例７以下に化合物（７）の合成例を示す。

【００３２】実施例５記載の方法にしたがい、化合物（
７）を合成した。パルミトイルクロリドをステアロイル
クロリドに変更してグリセロール誘導体を合成した。保護ペプチドの合成は、ＢｏｃＧｌｙＯＢｚｌ（ＮＯ２
）　を出発物質としてＮ端側へ逐次延長した。ＦＡＢ−ＭＳ　　　　１５３５　　（Ｍ−Ｈ）アミノ酸
分析：Ｇｌｙ（１．０５），　Ｇｌｕ（０．９９），　
Ｉｌｅ（１．０８），　Ｌｅｕ（１．０９），　Ａｓｐ
（１．０２），　Ｖａｌ（１．０８），　Ｐｒｏ（０．
９２），　Ｓｅｒ（０．８８），　Ｔｈｒ（０．７９）実施例８以下に本発明の化合物（１）の製剤例を示す。また、化
合物（２）〜（７）もここに例示した方法で製剤化でき
る。

【００３３】本発明の化合物（１）（１０ｍｇ）をクロ
ロホルムに溶解し、溶媒を減圧留去して薄膜を形成させ
た。室温で１時間乾燥させた後に、ＰＢＳ（１０ｍｌ）
を加えてブランソン社製超音波ホモジナイザーモデル２
５０型で２０Ｗ、１５分間分散した。分散液をミリポア
社製マイレクスＧＶによりろ過滅菌して注射用製剤を調
製した。この製剤は、動物細胞用の接着阻害剤および血
小板凝集・粘着抑制剤として使用可能である。実施例９以下に本発明の化合物（５）の製剤例を示す。また、化
合物（１）〜（４）、（６）、（７）もここに例示した
方法で製剤化できる。

【００３４】本発明の化合物（５）（５ｍｇ）、ジパル
ミトイルホスファチジルコリン（５ｍｇ）をクロロホル
ムに溶解し、溶媒を減圧留去して薄膜を形成させた。室
温で１時間乾燥させた後に、生理食塩水（１０ｍｌ）を
加えてブランソン社製超音波ホモジナイザーモデル２５
０型で２０Ｗ、１５分間分散した。分散液をミリポア社
製マイレクスＧＶによりろ過滅菌して注射用製剤を調製
した。この製剤は、動物細胞用の接着阻害剤および血小板凝集
・粘着抑制剤として使用可能である。実施例１０以下に本発明の化合物（３）の製剤例を示す。また、化
合物（１）、（２）、（４）〜（７）もここに例示した
方法で製剤化できる。

【００３５】本発明の化合物（３）（５ｍｇ）、卵黄レ
シチン（５ｍｇ）、コレステロール（５ｍｇ）をクロロ
ホルムに溶解し、溶媒を減圧留去して薄膜を形成させた
。室温で１時間乾燥させた後に、生理食塩水（１０ｍｌ
）を加えてブランソン社製超音波ホモジナイザーモデル
２５０型で２０Ｗ、１５分間分散した。分散液をミリポ
ア社製マイレクスＧＶによりろ過滅菌して注射用製剤を
調製した。この製剤は、動物細胞用の接着阻害剤および
血小板凝集・粘着抑制剤として使用可能である。実施例１１以下に本発明の化合物の試験例（細胞接着阻害活性の測
定）を示す。

【００３６】本発明のペプチド誘導体は、細胞のフィブ
ロネクチンに対する接着を阻害する。その活性測定方法
は、基本的に生化学の分野で広く用いられている競争法
であり、例えば特開平１−３０９６８２号、特開平２−
１７４７９７号、Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏ
ｌｏｇｙ　第８２巻、８０３（１９８１）　に開示され
ている。１）　　吸着プレートの作製市販のヒト由来のフィブロネクチン（コスモバイオ（株
）から購入）をＰＢＳ（リン酸緩衝液）で１０μｇ／ｍ
ｌに溶解し、その溶液５０μｌを９６ｗｅｌｌのポリス
チレンプレートに入れ、４℃で一晩保温してコーティン
グした。次に非特異吸着を防ぐ目的で牛血清アルブミン
（ＢＳＡ１％）を加え、３７℃、１時間保温し、その後
洗浄操作（ＰＢＳ）を行い充分に水切りして吸着プレー
トを作製した。２）　　接着阻害実験Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ
ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ　に分散したペプチド誘導体分散液５
０μｌを上記の方法で作製したプレートに入れ、そこへ
ＮＲＫ４９Ｆ（１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）懸濁液を
５０μｌ加え、３７℃で１時間保温し、細胞を接着させ
た。ＰＢＳで３回洗浄し、未接着の細胞を除去した後、
０．０２５％ＥＤＴＡトリプシン溶液で接着した細胞を
剥離し、０．２％トリパンプルーで染色して細胞数を計
測した。結果を表１に示す。表中、ＥＩＬＤＶＰＳＴは
グルタミン酸−イソロイシン−ロイシン−アスパラギン
酸−バリン−プロリン−セリン−トレオニンのオクタペ
プチドを表す。

【００３７】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　表　　１　　────────────────
─────────────────　　　　　　　　
　　　　　　フィブロネクチンに対する細胞の接着率（
％）　　　　　ペプチド誘導体　　　　　０　　　　　
　０．２５　　　　　０．５　　　　　　１．０　　　
　　２．０（ｍｇ／ｍｌ）　　　　─────────
────────────────────────　
　　　　　ＥＩＬＤＶＰＳＴ　　　　　　　　１００　
　　　　　７０　　　　　　　２５　　　　　　２２　
　　　　　　　　１９　　　　　　　　　化合物１　　
　　　　　　１００　　　　　　６７　　　　　　　３
１　　　　　　２２　　　　　　　　　１１　　　　　
　　　　化合物２　　　　　　　　１００　　　　　　
６５　　　　　　　２６　　　　　　２０　　　　　　
　　　１３　　　　　　　　　化合物３　　　　　　　
　１００　　　　　　６０　　　　　　　２９　　　　
　　２３　　　　　　　　　１３　　　　　　　　　化
合物４　　　　　　　　１００　　　　　　６１　　　
　　　　２５　　　　　　１４　　　　　　　　　１０
　　　　　　　　　化合物５　　　　　　　　１００　
　　　　　６８　　　　　　　２４　　　　　　２０　
　　　　　　　　１１　　　　　　　　　化合物６　　
　　　　　　１００　　　　　　６６　　　　　　　２
５　　　　　　１６　　　　　　　　　１０　　　　　
　　　　化合物７　　　　　　　　１００　　　　　　
６４　　　　　　　２４　　　　　　１６　　　　　　
　　　１１　　　　　───────────────
──────────────────実施例１２以下に本発明の化合物の試験例（血小板凝集阻害活性の
測定）を示す。

【００３８】本発明のペプチド誘導体のＩＮ　　ＶＩＴ
ＲＯ系での血小板凝集抑制作用をヒト多血小板血漿を用
いて検定した。実験方法新鮮なヒト血液に１／９量の３．８％クエン酸ナトリウ
ムを加え、遠心分離（１０００ｒｐｍ　、１０分間）を
して、上層を多血小板血漿として分取した。この血漿２
００μｌにペプチド誘導体２５μｌ（ｍａｘ　１．５ｍ
ｇ／ｍｌ）を加え、３分間３７℃でインキュベートした
後、２０〜５０μＭ　ＡＤＰ（アデノシン２リン酸）溶
液あるいは２００μｌ／ｍｌのコラーゲン溶液を２５μ
ｌ加えて、凝集の程度をアグリゴメーターを用いて透過
度を測定することにより検定した。結果を表２に示す。

【００３９】凝集阻害率（％）　　（１−Ｔ／Ｔ０）×
１００Ｔ０　：ペプチド誘導体非添加時の透過度Ｔ　　
：ペプチド誘導体添加時の透過度

【００４０】

【配列表】

【００４１】配列番号：１配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｎ末端フラグメント配列

【００４２】配列番号：２配列の長さ：１６配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｎ末端フラグメント配列

【００４３】配列番号：３配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｎ末端フラグメント配列

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　下記一般式〔Ｉ〕で表されるペプチド
誘導体またはその塩。一般式〔Ｉ〕（Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−
Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−　［Ｇｌｙ　］）ｎ−ＯＣＨ２−ＣＨ
（ＯＲ１）−ＣＨ２ＯＲ２式中、Ｇｌｕ　、Ｉｌｅ　、Ｌｅｕ　、Ａｓｐ　、Ｖａ
ｌ　、Ｐｒｏ　、Ｓｅｒ　、Ｔｈｒ　は、それぞれグル
タミン酸、イソロイシン、ロイシン、アスパラギン酸、
バリン、プロリン、セリン、トレオニン残基を表す。［
Ｇｌｙ　］は存在するかあるいは存在しないグリシン残
基を表す。ｎは１から３までの整数を表す。Ｒ１　およ
びＲ２　は、水素あるいは炭素数８から２４までの直鎖
または分岐のアシル基またはアルキル基を表し、置換基
、不飽和基を有していてもよい。また、分子内に存在す
る不斉炭素に関しては、ラセミ体でも光学活性体のいず
れでもよい。
【請求項２】　　請求項１記載のペプチド誘導体または
その塩を有効成分とする動物細胞の接着阻害剤。
【請求項３】　　請求項１記載のペプチド誘導体または
その塩を有効成分とする血小板凝集・粘着抑制剤。