JPH04275285A - クロマン誘導体及びこれを有効成分とするｐｇｅ２産生抑制剤並びにｎｇｆ産生誘導剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ハリタケ科（Ｈｙｄｎ
ａｃｅａｅ）、サンゴハリタケ属（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ）
のキノコであるヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ　ｅｒ
ｉｎａｃｅｕｍ）の子実体中に存在するクロマン誘導体
及びこれを有効成分とするＰＧＥ２（プロスタグランジ
ンＥ２）産生抑制剤並びにＮＧＦ（神経成長因子）産生
誘導剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、キノコに含まれる化合物及びその
薬剤効果について複数の報告がある。例えばサルノコシ
カケ科のキノコであるカワラタケ（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ
　ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）にはエルゴステロール誘導体
が含まれており、該エルゴステロール誘導体には肝臓癌
細胞に対する殺細胞効果のあることがテトラヘドロン（
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）　３９，２７７９〜２７８５
（１９８３）に報告されている。

【０００３】またハラタケ科のキノコであるヒメマツタ
ケ（Ａｇａｒｉｃｕｓｂｌａｚｅｉ）にもエルゴステロ
ール誘導体が含まれており、該エルゴステロール誘導体
には子宮頸癌細胞に対する殺細胞効果のあることがフィ
トケミストリ（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　２７
、２７７７〜２７８９（１９８８）に報告されている。

【０００４】同様のことは特公昭４８−６７６６号公報
、特開昭５５−７１７０２号公報、特開昭５８−６２１
１８号公報等にも報告されている。

【０００５】更にハリタケ科のキノコであるヤマブシタ
ケにはフタリド誘導体及びイソインドリノン誘導体が含
まれており、該フタリド誘導体及び該イソインドリノン
誘導体には子宮頸癌細胞に対する殺細胞効果のあること
がテトラヘドロン（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）　３，３
７３〜３７６（１９９０）に報告されている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかし、ヤマブシタケ
に含まれる他の化合物及びその薬剤効果については報告
がない。

【０００７】

【課題を解決するための手段】しかして本発明者らは、
叙上の如き実情に鑑み、ヤマブシタケに含まれる他の化
合物及びその薬剤効果について鋭意研究した結果、ヤマ
ブシタケには特定の化学構造から成る新規のクロマン誘
導体が含まれており、該クロマン誘導体にはＰＧＥ２産
生抑制効果及びＮＧＦ産生誘導効果のあることを見出し
た。

【０００８】すなわち本発明は、下記の式１で示される
クロマン誘導体、及び該クロマン誘導体を有効成分とす
るＰＧＥ２産生抑制剤並びにＮＧＦ産生誘導剤に係る。

【０００９】

【式１】 ［但し、Ｒはカルボキシル基を除いた、パルミチン酸残
基、ステアリン酸残基又はリノール酸残基］

【００１０
】式１で示されるクロマン誘導体はヤマブシタケの子実
体を次のように処理することによって得られる。先ず、
ヤマブシタケの生或いは乾燥子実体を水及び有機溶媒の
均一系で抽出処理し、濾過や遠心分離等で固液分離した
その抽出液から有機溶媒を蒸発して水相を得る。この場
合、水及び有機溶媒の均一系としては、８０〜８５％メ
タノールやエタノール、８５％アセトン等がある。抽出
は通常室温で行なうが、加熱還流してもよく、抽出時間
は通常１〜７２時間である。例えば、８５％エタノール
中にヤマブシタケの生子実体を加え、ホモジナイズ処理
し、これを室温で一昼夜放置した後、濾過して抽出液を
得、該抽出液を減圧下に４０〜４５℃で加熱してエタノ
ールを蒸発することにより水相を得るのである。

【００１１】次に、該水相を水及び有機溶媒の混合系で
液液分配抽出処理して有機溶媒層を分取し、該有機溶媒
層から有機溶媒を蒸発して乾固物を得る。この場合、有
機溶媒としては、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチル
エーテル等があるが、収率の点でクロロホルムが好まし
い。例えば、上記水相にクロロホルムを加え、振盪後、
放置して分層したクロロホルム層を分取し、該クロロホ
ルム層を減圧下に４０〜４５℃で加熱してクロロホルム
を蒸発することにより乾固物を得るのである。

【００１２】上記乾固物はそれ自体がＰＧＥ２産生抑制
剤及びＮＧＦ産生誘導剤として有効なものであるが、該
乾固物から不純物を除去してそのＰＧＥ２産生抑制効果
及びＮＧＦ産生誘導効果を高めるために、該乾固物をク
ロマト分画処理するのが好ましく、クロマト分画処理し
たものを更に再分画処理して単離するのがより好ましい
。この場合、詳しくは実施例で後述するように、ヘキサ
ン、クロロホルム、クロロホルム／アセトン等を展開溶
媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィー或いは薄
層クロマトグラフィーを用いてクロマト分画処理するこ
とができ、またＯＤＳカラムを用いた高速液体クロマト
グラフィーで再分画処理することができる。

【００１３】かくして再分画処理することにより単離さ
れる化合物の物理化学的性質及び構造解析結果は下記の
通りである。

【００１４】式１のＲがカルボキシル基を除いたパルミ
チン酸残基である場合の化合物（以下、これを化合物Ａ
という）。 （１）　分子量：５７０ （２）　赤外線吸収スペクトル：１７４０，１６７５，
１６６５ｃｍ−１（３）　核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ
−ＮＭＲ）：０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６０），　１．２
５〜１．３９（ｍ），１．４４（ｓ），　１．６９（ｍ
），　１．８６（ｓ），　１．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝１３
．９３，６．６１，６．６１），２．００（ｄｄｄ，Ｊ
＝１３．９３，６．６１，６．６１），　２．１４（ｓ
），　２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３３），２．６３（ｄｄ
，Ｊ＝６．６１，６．６１），　２．６６（ｄ，Ｊ＝１
３．９４），　２．８２（ｄ，Ｊ＝１３．９４），　３
．８８（ｓ），５．５１（ｓ），　６．０６（ｓ），　
６．５５（ｓ），　１０．４１（ｓ）（４）　溶媒に対
する溶解性：酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶、メタノール、エタノールにやや可溶、水に不溶 （５）　塩基性、中性、酸性の区別：酸性物質（６）　
色及び形状：白色油状

【００１５】式１のＲがカルボキシル基を除いたステア
リン酸残基である場合の化合物（以下、これを化合物Ｂ
という）。 （１）　分子量：５９８ （２）　赤外線吸収スペクトル：化合物Ａの場合と同じ
（３）　核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ−ＮＭＲ）：０．
８８（ｔ，Ｊ＝６．５９），　１．２５〜１．３８（ｍ
），１．４４（ｓ），　１．６９（ｍ），　１．８６（
ｓ），　１．９０（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．９２，６．９６
，６．９６），２．００（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．９３，６
．６０，６．６０），　２．１４（ｓ），　２．４１（
ｔ，Ｊ＝７．３３），２．６３（ｄｄ，Ｊ＝６．９６，
６．６０），　２．６６（ｄ，Ｊ＝１４．９２），　２
．７７（ｄｄ，Ｊ＝６．６１，６．６０），２．８２（
ｄ，Ｊ＝１４．９２），　３．８８（ｓ），　５．５１
（ｓ），　６．０６（ｓ），　６．５４（ｓ），　１０
．４１（ｓ）（４）〜（６）の溶媒に対する溶解性〜色
及び形状：化合物Ａの場合と同じ

【００１６】式１のＲがカルボキシル基を除いたリノー
ル酸残基である場合の化合物（以下、これを化合物Ｃと
いう）。 （１）　分子量：５９４ （２）　赤外線吸収スペクトル：化合物Ａの場合と同じ
（３）　核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ−ＮＭＲ）：０．
８８（ｔ，Ｊ＝６．６０），　１．２５〜１．３８（ｍ
），１．４４（ｓ），　１．６９（ｍ），　１．８６（
ｓ），　１．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．００，７．３４
，７．３４），　２．０２（ｍ），２．１５（ｓ），　
２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３３），　２．６３（ｄｄ，Ｊ
＝７．３４，６．６０），２．６６（ｄ，Ｊ＝１３．９
４），２．８２（ｄ，Ｊ＝１３．９４），　３．８８（
ｓ），　５．５１（ｓ），　５．３５（ｍ），　６．０
６（ｓ），６．５４（ｓ），　１０．４２（ｓ） （４）〜（５）の溶媒に対する溶解性〜塩基性、中性、
酸性の区別：化合物Ａの場合と同じ （６）　色及び形状：無色結晶（融点５６〜５８℃）

【
００１７】上記の物理化学的性質及び構造解析結果から
、単離される化合物は式１で示されるクロマン誘導体で
あり、このうち化合物Ａは８−ホルミル−５−メトキシ
−２−メチル−２−（４’−メチル−２’−オキソ−３
’−ペンテニル）−７−クロマニルメチルパルミテート
、また化合物Ｂは８−ホルミル−５−メトキシ−２−メ
チル−２−（４’−メチル−２’−オキソ−３’−ペン
テニル）−７−クロマニルメチルステアレート、そして
化合物Ｃは８−ホルミル−５−メトキシ−２−メチル−
２−（４’−メチル−２’−オキソ−３’−ペンテニル
）−７−クロマニルメチルリノレートであることが決定
された。

【００１８】詳しくは実施例で後述するように、化合物
Ａ〜ＣにはＰＧＥ２産生抑制効果及びＮＧＦ産生誘導効
果があり、また実施例を省略するが、化合物Ａにはアラ
キドン酸遊離抑制効果がある。ＰＧＥ２産生抑制効果を
有する化合物は抗炎症剤及び鎮痛剤としての利用が注目
されており、またＮＧＦ産生誘導効果を有する化合物は
老人性痴呆症治療剤としての利用が注目されている。

【００１９】

【実施例】化合物Ａ〜Ｃの抽出及び単離：８５％エタノ
ール６リットルにヤマブシタケの生子実体７．３Ｋｇを
加え、ホモジナイズ処理し、これを室温で一昼夜放置し
た後、濾過して抽出液を得た。残渣に８５％エタノール
４リットルを加え、同様に抽出処理を行なって抽出液を
得、これを１回目の抽出液と合わせた。そして合わせた
抽出液を減圧下に４０〜４５℃で加熱してエタノールを
蒸発することにより水相を得た。

【００２０】上記水相にクロロホルム１リットルを加え
、振盪後、放置して分層したクロロホルム層を分取した
。残渣にクロロホルム１リットルを加え、同様に液液分
配抽出処理を行なってクロロホルム層を分取し、１回目
のクロロホルム層と合わせた。合わせたクロロホルム層
を減圧下に４０〜４５℃で加熱してクロロホルムを蒸発
し、更にデシケータで乾燥して、乾固物４．９９ｇを得
た。

【００２１】上記乾固物をヘキサンで溶解し、ワコーゲ
ルＣ−２００（和光純薬社製）を用いてカラムクロマト
グラフィーを行なった。この際、展開溶媒として、順次
極性が大きくなるように、ヘキサン→クロロホルム→ク
ロロホルム／アセトン（８／２）を各６０ｍｌ用い、１
０ｍｌの画分を合計１８画分得た。このうちの第３及び
４画分をＯＤＳカラムを用いた高速液体クロマトグラフ
ィーに供した後、メタノール／水（９５／５）で再分画
処理を行ない、この際の溶出時間のズレにより合計６グ
ループを得、このうちの第４グループから化合物Ｃを１
０．０ｍｇ、また第５グループから化合物Ａを５３．０
ｍｇ、そして第６グループから化合物Ｂを１０．０ｍｇ
単離した。

【００２２】化合物Ａ〜ＣのＰＧＥ２産生抑制効果：１
）ラット腹腔内マクロファージの調製、２）化合物Ａ〜
Ｃを含むメディウム中での培養（２０時間）、３）ＴＰ
Ａを含むメディウム中でのマクロファージの培養（４時
間後にサンプリング）を大内らの方法（　Ｂｉｏｃｈｉ
ｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ，１０１３，　８６
〜９１，　１９８９　）にしたがい行った後、マクロフ
ァージが産生したＰＧＥ２について二抗体法によるラジ
オイムノアッセイ（ＲＩＡ）を行った。そして化合物を
投与しないで培養した対照群のＰＧＥ２産生量と化合物
Ａ、化合物Ｂ、又は化合物Ｃを各２５μｇ／ｍｌの濃度
となるように投与したメディウム中で培養した群のＰＧ
Ｅ２産生量との間でｔ検定を行った。その結果、対照群
に対して化合物Ａ、化合物Ｂ、又は化合物Ｃを投与した
各群はいずれも０．１％の危険率でＰＧＥ２産生を有意
に抑制した。尚、上記大内らの方法では３）の培養時に
薬物をＴＰＡと同時に投与しているが、この実施例では
２）の培養時に薬物投与を行った。

【００２３】化合物Ａ〜ＣのＮＧＦ産生誘導効果：古川
らの方法（　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ　１３６，５７〜６３，　１９８６　）
にしたがい、胎生後期（１９日令）ラット皮質初代アス
トログリア細胞を培養器に１０％牛胎仔血清を含むダル
ベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）で培養（１〜２週
間、３日毎に培地を交換）し、コンフルエントに達した
ところで、０．５％牛血清アルブミンを含むＤＭＥＭに
変えて数日培養した。 ここへ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した
化合物Ａ、化合物Ｂ又は化合物Ｃを所定濃度となるよう
、０．５％牛血清アルブミンを含むＤＭＥＭ中にて調整
し、投与した。２４時間の培養後、培養液を集め、古川
らの方法（　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＮｅｕｒｏｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙ，　４０，　７３４〜７４４，　１９８３　
）によるエンザイムイムノアッセイ法でＮＧＦ濃度を測
定した。薬物を投与しないで培養した対照群と化合物Ａ
、化合物Ｂ又は化合物Ｃを各１５μｇ／ｍｌ投与して培
養した群との間でｔ検定を行った。その結果、投与した
各群はいずれも１％の危険率で有効と有意検定された。

【００２４】

【発明の効果】既に明らかなように、以上説明した本発
明に係る新規のクロマン誘導体にはＰＧＥ２産生抑制剤
及びＮＧＦ産生誘導剤として有効という効果がある。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】　　下記の式１で示されるクロマン誘導体
   。 【式１】 ［但し、Ｒはカルボキシル基を除いた、パルミチン酸残
   基、ステアリン酸残基又はリノール酸残基］【請求項２
   】　　請求項１記載のクロマン誘導体を有効成分とする
   ＰＧＥ２産生抑制剤。 【請求項３】　　請求項１記載のクロマン誘導体を有効
   成分とするＮＧＦ産生誘導剤。