JPH0424998B2 - - Google Patents
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- JPH0424998B2 JPH0424998B2 JP13834483A JP13834483A JPH0424998B2 JP H0424998 B2 JPH0424998 B2 JP H0424998B2 JP 13834483 A JP13834483 A JP 13834483A JP 13834483 A JP13834483 A JP 13834483A JP H0424998 B2 JPH0424998 B2 JP H0424998B2
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Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
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Description
本発明はα−アミラーゼアイソザイムの新規な
測定法に関する。 詳しくは、修飾基質を使用し、α−アミラーゼ
の各アイソザイム即ち膵由来α−アミラーゼ及び
唾液腺由来α−アミラーゼによる糖転位反応及び
続いて起る加水分解反応で生じる生成物量の差を
検知することを特徴とするα−アミラーゼアイソ
ザイムの測定法に関する。 生体試料など被検試料、特にヒトの唾液、膵
液、血液、尿中のα−アミラーゼ活性は医学上の
診断において重要である。例えば、膵炎、膵臓
癌、耳下腺炎においては、血液や尿中のα−アミ
ラーゼ活性は通常の値に比べて著しい上昇を示
す。 更に、例えば血中α−アミラーゼ活性をアイソ
ザイムに分離して測定することは高アミラーゼ血
症の解析や病態の解明に重要であり、日常臨床検
査にも応用されている。 α−アミラーゼアイソザイムの分離法は現在ま
で多岐にわたつており、(1)荷電の差による分離、
(2)ゲル濾過法、(3)アフイニテイクロマトグラフイ
ーによる方法、(4)免疫学的方法、(5)α−アミラー
ゼインヒビターによる方法、などがある。 これらの内、現在のところ臨床検査に応用し得
るものとしては、公知文献（臨床病理、臨時増刊
第43号、Isoenzymeの分析とその意義、17頁
（1981））にも記載があるように、(1)の荷電の差に
よる分離を電気泳動法によつて行うもと、最近多
く実施されるようになつてきている(5)のアミラー
ゼインヒビターによる方法がある。 電気泳動法に於て、臨床検査として適している
のはセルロースアセテート膜、薄層ポリアクリル
アミドゲルを用いる電気泳動法などがあるが、い
ずれも測定操作が煩雑で、しかも測定に長時間を
要する欠点がある。 一方、α−アミラーゼインヒビターを用いる方
法は、小麦由来のアミラーゼインヒビターが膵由
来α−アミラーゼよりも唾液腺由来α−アミラー
ゼをより強く阻害することを利用して両者の割合
を算出するものであるが、現在のところ、膵ある
いは唾液腺由来のα−アミラーゼのいずれかを特
異的に完全に阻害するインヒビターが見出されて
いない為、検体中の膵及び唾液腺由来のα−アミ
ラーゼの活性比率を既知の酵素標準液を用いて作
成した検量線から読みとる方法がとられている
が、比較的操作も簡便な為、最近多く使用される
ようになつてきている。 しかしながら、この方法で膵由来α−アミラー
ゼと唾液腺由来α−アミラーゼの活性比率を求め
るには、阻害剤を入れた場合と入れない場合の２
回の測定が必要であり、操作が煩雑である。 本発明者らは、α−アミラーゼアイソザイムの
分別測定法について別の観点より鋭意研究を重ね
た結果、オリゴ糖誘導体の反応性がα−アミラー
ゼアイソザイムによつて異なり、従つて生成物の
比率がアイソザイムによつて異なることを見出
し、これを利用したα−アミラーゼアイソザイム
の分別測定法について更に研究を重ね、ある種の
修飾基即ち蛍光性を有する修飾基或いはUV吸収
を有する修飾基を基質に導入することにより、生
成物が高速液体クロマトグラフイーによつて容易
に分別測定することができることを見出し本発明
を完成するに到つた。 即ち、本発明は下記一般式（）で示されるオ
リゴ糖誘導体と一般式（）で示されるオリゴ糖
誘導体とを組合せてなる基質にα−アミラーゼが
作用して起る糖転位反応により生成するオリゴ糖
誘導体に、更にα−アミラーゼが作用して生ずる
加水分解生成物を測定することを特徴とする、ヒ
ト膵由来α−アミラーゼとヒト唾液腺由来α−ア
ミラーゼの分別測定方法である。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアニリノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアニリノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ また、本発明は、基質に下記一般式（）で示
されるオリゴ糖誘導体を用い、α−アミラーゼの
加水分解作用を受けて該基質から生じる分解生成
物を測定することによりヒト膵由来α−アミラー
ゼとヒト唾液腺由来α−アミラーゼの分別測定を
行なうことを特徴とするα−アミラーゼアイソザ
イムの分別測定方法である。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアニリノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアニリノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ 本発明の目的はα−アミラーゼアイソザイム、
特にヒト膵由来α−アミラーゼとヒト唾液腺由来
α−アミラーゼを分離測定せんとするものであ
り、本発明の方法によれば極めて微量の検体を用
いて、高感度の測定が可能となる。又、本発明の
方法では、１回の測定で検体中の膵及び唾液腺由
来のα−アミラーゼの活性比率を求めることがで
きる。 本発明の第一の方法はα−アミラーゼの糖転位
反応と加水分解反応を併せて利用するものであ
り、その要旨は次の如くである。 即ち、ブドウ糖がそれぞれ５個及び３個よりな
る２種類のオリゴ糖誘導体にα−アミラーゼを作
用させると次のような糖転位反応が起る。 （R1，R2……置換基、Ｇ……グルコース単位） かかる糖転位反応が起るという事実はこれまで
に全く知られておらず、本発明者等が始めて見出
したものである。 糖転位反応によつてできたオリゴ糖誘導体は引
き続いてα−アミラーゼの加水分解作用を受け、
次式のような反応が起る。 上記反応例に於ては、糖転位反動ではＧが６個
のオリゴ糖が出来、加水分解反応ではＧが４個と
２個に切断される例を示したが、一般には糖転位
反応ではＧが６個以外のオリゴ糖誘導体が当然生
じるし、加水分解反応ではＧが３個と３個に切断
される場合もあり、その分解反応率はアイソザイ
ムの種類によつて定まつている。従つて、膵由来
α−アミラーゼと唾液腺由来α−アミラーゼとで
反応の最も異なる条件を選ぶことにより、両者の
分別測定が可能となるわけである。 第１反応基質として用いた２種類のオリゴ糖誘
導体は次のように合成したが、合成方法は特にこ
れに限定されるものではない。 合成例 １ （5Gオリゴ糖誘導体の合成）
測定法に関する。 詳しくは、修飾基質を使用し、α−アミラーゼ
の各アイソザイム即ち膵由来α−アミラーゼ及び
唾液腺由来α−アミラーゼによる糖転位反応及び
続いて起る加水分解反応で生じる生成物量の差を
検知することを特徴とするα−アミラーゼアイソ
ザイムの測定法に関する。 生体試料など被検試料、特にヒトの唾液、膵
液、血液、尿中のα−アミラーゼ活性は医学上の
診断において重要である。例えば、膵炎、膵臓
癌、耳下腺炎においては、血液や尿中のα−アミ
ラーゼ活性は通常の値に比べて著しい上昇を示
す。 更に、例えば血中α−アミラーゼ活性をアイソ
ザイムに分離して測定することは高アミラーゼ血
症の解析や病態の解明に重要であり、日常臨床検
査にも応用されている。 α−アミラーゼアイソザイムの分離法は現在ま
で多岐にわたつており、(1)荷電の差による分離、
(2)ゲル濾過法、(3)アフイニテイクロマトグラフイ
ーによる方法、(4)免疫学的方法、(5)α−アミラー
ゼインヒビターによる方法、などがある。 これらの内、現在のところ臨床検査に応用し得
るものとしては、公知文献（臨床病理、臨時増刊
第43号、Isoenzymeの分析とその意義、17頁
（1981））にも記載があるように、(1)の荷電の差に
よる分離を電気泳動法によつて行うもと、最近多
く実施されるようになつてきている(5)のアミラー
ゼインヒビターによる方法がある。 電気泳動法に於て、臨床検査として適している
のはセルロースアセテート膜、薄層ポリアクリル
アミドゲルを用いる電気泳動法などがあるが、い
ずれも測定操作が煩雑で、しかも測定に長時間を
要する欠点がある。 一方、α−アミラーゼインヒビターを用いる方
法は、小麦由来のアミラーゼインヒビターが膵由
来α−アミラーゼよりも唾液腺由来α−アミラー
ゼをより強く阻害することを利用して両者の割合
を算出するものであるが、現在のところ、膵ある
いは唾液腺由来のα−アミラーゼのいずれかを特
異的に完全に阻害するインヒビターが見出されて
いない為、検体中の膵及び唾液腺由来のα−アミ
ラーゼの活性比率を既知の酵素標準液を用いて作
成した検量線から読みとる方法がとられている
が、比較的操作も簡便な為、最近多く使用される
ようになつてきている。 しかしながら、この方法で膵由来α−アミラー
ゼと唾液腺由来α−アミラーゼの活性比率を求め
るには、阻害剤を入れた場合と入れない場合の２
回の測定が必要であり、操作が煩雑である。 本発明者らは、α−アミラーゼアイソザイムの
分別測定法について別の観点より鋭意研究を重ね
た結果、オリゴ糖誘導体の反応性がα−アミラー
ゼアイソザイムによつて異なり、従つて生成物の
比率がアイソザイムによつて異なることを見出
し、これを利用したα−アミラーゼアイソザイム
の分別測定法について更に研究を重ね、ある種の
修飾基即ち蛍光性を有する修飾基或いはUV吸収
を有する修飾基を基質に導入することにより、生
成物が高速液体クロマトグラフイーによつて容易
に分別測定することができることを見出し本発明
を完成するに到つた。 即ち、本発明は下記一般式（）で示されるオ
リゴ糖誘導体と一般式（）で示されるオリゴ糖
誘導体とを組合せてなる基質にα−アミラーゼが
作用して起る糖転位反応により生成するオリゴ糖
誘導体に、更にα−アミラーゼが作用して生ずる
加水分解生成物を測定することを特徴とする、ヒ
ト膵由来α−アミラーゼとヒト唾液腺由来α−ア
ミラーゼの分別測定方法である。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアニリノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアニリノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ また、本発明は、基質に下記一般式（）で示
されるオリゴ糖誘導体を用い、α−アミラーゼの
加水分解作用を受けて該基質から生じる分解生成
物を測定することによりヒト膵由来α−アミラー
ゼとヒト唾液腺由来α−アミラーゼの分別測定を
行なうことを特徴とするα−アミラーゼアイソザ
イムの分別測定方法である。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアニリノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアニリノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ 本発明の目的はα−アミラーゼアイソザイム、
特にヒト膵由来α−アミラーゼとヒト唾液腺由来
α−アミラーゼを分離測定せんとするものであ
り、本発明の方法によれば極めて微量の検体を用
いて、高感度の測定が可能となる。又、本発明の
方法では、１回の測定で検体中の膵及び唾液腺由
来のα−アミラーゼの活性比率を求めることがで
きる。 本発明の第一の方法はα−アミラーゼの糖転位
反応と加水分解反応を併せて利用するものであ
り、その要旨は次の如くである。 即ち、ブドウ糖がそれぞれ５個及び３個よりな
る２種類のオリゴ糖誘導体にα−アミラーゼを作
用させると次のような糖転位反応が起る。 （R1，R2……置換基、Ｇ……グルコース単位） かかる糖転位反応が起るという事実はこれまで
に全く知られておらず、本発明者等が始めて見出
したものである。 糖転位反応によつてできたオリゴ糖誘導体は引
き続いてα−アミラーゼの加水分解作用を受け、
次式のような反応が起る。 上記反応例に於ては、糖転位反動ではＧが６個
のオリゴ糖が出来、加水分解反応ではＧが４個と
２個に切断される例を示したが、一般には糖転位
反応ではＧが６個以外のオリゴ糖誘導体が当然生
じるし、加水分解反応ではＧが３個と３個に切断
される場合もあり、その分解反応率はアイソザイ
ムの種類によつて定まつている。従つて、膵由来
α−アミラーゼと唾液腺由来α−アミラーゼとで
反応の最も異なる条件を選ぶことにより、両者の
分別測定が可能となるわけである。 第１反応基質として用いた２種類のオリゴ糖誘
導体は次のように合成したが、合成方法は特にこ
れに限定されるものではない。 合成例 １ （5Gオリゴ糖誘導体の合成）
グルコースが５個からなる直鎖状オリゴ糖の
非還元末端グルコースの６位の一級アルコール
が２−ピリジルアミノ基で置換されたオリゴ糖
誘導体〔下記構造式(1)〕2.7mgとグルコースが
３個からなる直鎖状オリゴ糖の還元末端の１位
の二級アルコールが２−ピリジルアミノ基で置
換されたオリゴ糖誘導体〔下記構造式(2)〕32mg
と塩化ナトリウム23.4mgを20ｍＭ酢酸カルシウ
ム緩衝液（PH5.5）10mlで溶解する。 (ロ) 標準液の調製 ヒト唾液から精製した唾液腺由来α−アミラ
ーゼ100Uを1mM塩化カルシウム水溶液100ml
で溶解した液を調製する。ヒト膵液から精製し
た膵由来α−アミラーゼ100Uを1mM塩化カル
シウム水溶液100mlで溶解した液を調製する。
試験管を３本用意し各々にNo.1.2.3.を付け、下
記の様に唾液腺由来と膵由来のα−アミラーゼ
を混合する。
非還元末端グルコースの６位の一級アルコール
が２−ピリジルアミノ基で置換されたオリゴ糖
誘導体〔下記構造式(1)〕2.7mgとグルコースが
３個からなる直鎖状オリゴ糖の還元末端の１位
の二級アルコールが２−ピリジルアミノ基で置
換されたオリゴ糖誘導体〔下記構造式(2)〕32mg
と塩化ナトリウム23.4mgを20ｍＭ酢酸カルシウ
ム緩衝液（PH5.5）10mlで溶解する。 (ロ) 標準液の調製 ヒト唾液から精製した唾液腺由来α−アミラ
ーゼ100Uを1mM塩化カルシウム水溶液100ml
で溶解した液を調製する。ヒト膵液から精製し
た膵由来α−アミラーゼ100Uを1mM塩化カル
シウム水溶液100mlで溶解した液を調製する。
試験管を３本用意し各々にNo.1.2.3.を付け、下
記の様に唾液腺由来と膵由来のα−アミラーゼ
を混合する。
グルコースが６個からなる直鎖状オリゴ糖の
非還元末端グルコースの６位の一級アルコール
が２−ピリジルアミノ基で置換され、さらに還
元末端グルコースの１位の二級アルコールが２
−ピリジルアミノ基で置換されたオリゴ誘導体
〔下記構造式(4)〕2.2mgと塩化カルシウム30mgを
20mM酢酸カルシウム緩衝液（PH5.5）20mlで
溶解する。 構造式(4) (ロ) 標準液の調製 ヒト唾液から精製した唾液線由来α−アミラ
ーゼ100Uを1mM塩化カルシウム水溶液100ml
で溶解した液を調製する。ヒト膵液から精製し
た膵由来α−アミラーゼ100Uを1mM塩化カル
シウム水溶液100mlで溶解した液を調製する。
試験管を３本用意し各々にNo.1.2.3を付け、下
記の様に唾液線由来と膵由来のα−アミラーゼ
を混合する。
非還元末端グルコースの６位の一級アルコール
が２−ピリジルアミノ基で置換され、さらに還
元末端グルコースの１位の二級アルコールが２
−ピリジルアミノ基で置換されたオリゴ誘導体
〔下記構造式(4)〕2.2mgと塩化カルシウム30mgを
20mM酢酸カルシウム緩衝液（PH5.5）20mlで
溶解する。 構造式(4) (ロ) 標準液の調製 ヒト唾液から精製した唾液線由来α−アミラ
ーゼ100Uを1mM塩化カルシウム水溶液100ml
で溶解した液を調製する。ヒト膵液から精製し
た膵由来α−アミラーゼ100Uを1mM塩化カル
シウム水溶液100mlで溶解した液を調製する。
試験管を３本用意し各々にNo.1.2.3を付け、下
記の様に唾液線由来と膵由来のα−アミラーゼ
を混合する。
【表】
(ハ) 測定操作法
(1) アミラーゼ反応
調製した各標準液又は血清50μに測定試
液50μを試験管にとり、よく混合後、37℃
で３時間反応させる。 (2) 高速液体クロマトグラフイー 上記反応液10μをとり高速液体クロマト
グラフイーにかけ、還元末端グルコースに２
−ピリジルアミノ基が導入されたマルトース
誘導体〔下記構造式(5)〕の生成量をピーク面
積から求める。 高速液体クロマトグラフイーの測定条件は
下記の通りである。 カラム及び充填剤：オクタデシルシランを結
合させた逆相型ゲル（商品名、TSKゲル、
LS−410，5μｍ Toyosoda Co.）を充填
したカラム（４×300mm）。 溶出液：0.015％ｎ−ブタノールを含む0.1M
酢酸アンモニウム緩衝液（PH3.3）。 流 速：1.7ml／分 検 出：蛍光検出器 励起波長320nｍ、蛍光波長400nｍ 膵由来α−アミラーゼの比率とマルトース誘
導体〔構造式(5)〕の生成量との関係から、検量
線を得、標準と同様に操作した血清のマルトー
ス誘導体生成量から、この検量線を用いて膵由
来α−アミラーゼの比率を求める。 この検量線の例を図２に示す。血清中の膵由
来α−アミラーゼの比率が求まると、通常用い
られているα−アミラーゼ活性測定法による総
α−アミラーゼ活性測定値より膵由来及び唾液
線由来α−アミラーゼ活性値を算出することが
できる。 構造式(5)
液50μを試験管にとり、よく混合後、37℃
で３時間反応させる。 (2) 高速液体クロマトグラフイー 上記反応液10μをとり高速液体クロマト
グラフイーにかけ、還元末端グルコースに２
−ピリジルアミノ基が導入されたマルトース
誘導体〔下記構造式(5)〕の生成量をピーク面
積から求める。 高速液体クロマトグラフイーの測定条件は
下記の通りである。 カラム及び充填剤：オクタデシルシランを結
合させた逆相型ゲル（商品名、TSKゲル、
LS−410，5μｍ Toyosoda Co.）を充填
したカラム（４×300mm）。 溶出液：0.015％ｎ−ブタノールを含む0.1M
酢酸アンモニウム緩衝液（PH3.3）。 流 速：1.7ml／分 検 出：蛍光検出器 励起波長320nｍ、蛍光波長400nｍ 膵由来α−アミラーゼの比率とマルトース誘
導体〔構造式(5)〕の生成量との関係から、検量
線を得、標準と同様に操作した血清のマルトー
ス誘導体生成量から、この検量線を用いて膵由
来α−アミラーゼの比率を求める。 この検量線の例を図２に示す。血清中の膵由
来α−アミラーゼの比率が求まると、通常用い
られているα−アミラーゼ活性測定法による総
α−アミラーゼ活性測定値より膵由来及び唾液
線由来α−アミラーゼ活性値を算出することが
できる。 構造式(5)
図１は、実施例１において各標準液について、
HPLC（高速液体クロマトグラフイー）により求
めたマルトース誘導体の生成量（縦軸）と総α−
アミラーゼ活性に対する膵由来α−アミラーゼ活
性の百分率（横軸）との関係をプロツトしたもの
である。 図２は実施例２において、各標準液について、
HPLCにより求めたマルトース誘導体の生成量
（縦軸）と総α−アミラーゼ活性に対する膵由来
α−アミラーゼ活性の百分率（横軸）との関係を
プロツトしたものである。
HPLC（高速液体クロマトグラフイー）により求
めたマルトース誘導体の生成量（縦軸）と総α−
アミラーゼ活性に対する膵由来α−アミラーゼ活
性の百分率（横軸）との関係をプロツトしたもの
である。 図２は実施例２において、各標準液について、
HPLCにより求めたマルトース誘導体の生成量
（縦軸）と総α−アミラーゼ活性に対する膵由来
α−アミラーゼ活性の百分率（横軸）との関係を
プロツトしたものである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記一般式（）で示されるオリゴ糖誘導体
と一般式（）で示されるオリゴ糖誘導体とを組
合せてなる基質にα−アミラーゼが作用して起る
糖転位反応により生成するオリゴ糖誘導体に、更
にα−アミラーゼが作用して生ずる加水分解生成
物を測定することを特徴とする、ヒト膵由来α−
アミラーゼとヒト唾液腺由来α−アミラーゼの分
別測定方法。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアニリノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアニリノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ ２ 糖転位反応により生成するオリゴ糖誘導体が
下記一般式（） ［式中R1、R2は、前記と同じ。］ で示される化合物である特許請求の範囲第１項記
載の分別測定方法。 ３ 加水分解生成物の分別測定に高速液体クロマ
トグラフイーを用いる特許請求の範囲第１項又は
第２項に記載の分別測定方法。 ４ 加水分解生成物の分別測定に高速液体クロマ
トグラフイーを用い、基質に導入したピリジルア
ミノ基の蛍光性を利用して検出を行なう特許請求
の範囲第１項、第２項又は第３項に記載の分別測
定方法。 ５ 加水分解生成物の分別測定に高速液体クロマ
トグラフイーを用い、基質に導入したアニリノ
基、メチルアニリノ基、ヒドロキシアニリノ基、
カルボキシフエニルアミノ基等のUV吸収を利用
して検出を行なう特許請求の範囲第１項、第２項
又は第３項に記載の分別測定方法。 ６ 基質に下記一般式（）で示されるオリゴ糖
誘導体を用い、α−アミラーゼの加水分解作用を
受けて該基質から生じる分解生成物を測定するこ
とによりヒト膵由来α−アミラーゼとヒト唾液腺
由来α−アミラーゼの分別測定を行なうことを特
徴とするαアミラーゼアイソザイムの分別測定方
法。 ［式中R1、R2は２−ピリジルアミノ基、３−ピ
リジルアミノ基の如く蛍光性を有する置換基、若
しくはアリニノ基、メチルアリニノ基、ヒドロキ
シアリニノ基、カルボキシフエニルアミノ基の如
くUV吸収を有する置換基を表わす。］ ７ α−アミラーゼの加水分解作用を受けて生じ
る分解生成物の分別測定に高速液体クロマトグラ
フイーを用いる特許請求の範囲第６項記載の分別
測定方法。 ８ α−アミラーゼの加水分解作用を受けて生じ
る分解生成物の分別測定に高速液体クロマトグラ
フイーを用い、基質に導入したピリジルアミノ基
の蛍光性を利用して検出を行なう特許請求の範囲
第６項又は第７項に記載の分別測定方法。 ９ α−アミラーゼの加水分解作用を受けて生じ
る分解生成物の分別測定に高速液体クロマトグラ
フイーを用い、基質に導入したアニリノ基、メチ
ルアニリノ基、ヒドロキシアリニノ基、カルボキ
シフエニルアミノ基等のUV吸収を利用して検出
を行なう特許請求の範囲第６項又は第７項に記載
の分別測定方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13834483A JPS6030698A (ja) | 1983-07-28 | 1983-07-28 | α−アミラ−ゼアイソザイムの新規な分別測定法 |
| AT83305378T ATE28650T1 (de) | 1982-09-16 | 1983-09-14 | Modifizierte oligosaccharide als substrate zur messung der alpha-amylaseaktivitaet. |
| DE8383305378T DE3372774D1 (en) | 1982-09-16 | 1983-09-14 | Modified oligosaccharides used as substrate for measuring alpha-amylase activity |
| US06/532,099 US4622295A (en) | 1982-09-16 | 1983-09-14 | Modified oligosaccharides used as substrate for measuring α-amylase activity |
| EP83305378A EP0104047B1 (en) | 1982-09-16 | 1983-09-14 | Modified oligosaccharides used as substrate for measuring alpha-amylase activity |
| US06/907,358 US4697006A (en) | 1982-09-16 | 1986-09-15 | Modified oligosaccharides used as substrate for measuring α-amylase activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13834483A JPS6030698A (ja) | 1983-07-28 | 1983-07-28 | α−アミラ−ゼアイソザイムの新規な分別測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6030698A JPS6030698A (ja) | 1985-02-16 |
| JPH0424998B2 true JPH0424998B2 (ja) | 1992-04-28 |
Family
ID=15219721
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13834483A Granted JPS6030698A (ja) | 1982-09-16 | 1983-07-28 | α−アミラ−ゼアイソザイムの新規な分別測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6030698A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0728756B2 (ja) * | 1988-02-19 | 1995-04-05 | 昭和電工株式会社 | 酵素活性測定用充填剤、それを充填したカラムおよびそれを用いる酵素活性測定方法 |
| AU4356893A (en) * | 1992-06-23 | 1994-01-24 | Nippon Shinyaku Co. Ltd. | Specific adsorbent |
-
1983
- 1983-07-28 JP JP13834483A patent/JPS6030698A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6030698A (ja) | 1985-02-16 |
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