JPH04232463A - コラゲナーゼ含有緩衝液、その調製およびヒト血清希釈用としての使用 - Google Patents

コラゲナーゼ含有緩衝液、その調製およびヒト血清希釈用としての使用

Info

Publication number
JPH04232463A
JPH04232463A JP3166201A JP16620191A JPH04232463A JP H04232463 A JPH04232463 A JP H04232463A JP 3166201 A JP3166201 A JP 3166201A JP 16620191 A JP16620191 A JP 16620191A JP H04232463 A JPH04232463 A JP H04232463A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
collagenase
buffer
sodium
type
igm
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP3166201A
Other languages
English (en)
Inventor
Paolo Fabrizi
パオロ　ファブリッツィ
Francesco Donnini
フランチェスコ　ドッニーニ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sclavo SpA
Original Assignee
Sclavo SpA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sclavo SpA filed Critical Sclavo SpA
Publication of JPH04232463A publication Critical patent/JPH04232463A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/5306—Improving reaction conditions, e.g. reduction of non-specific binding, promotion of specific binding
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Rehabilitation Therapy (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、コラゲナーゼ含有ｐＨ
　７．０−７．５の緩衝液およびクラス特異的抗体探索
のためのＥＬＩＳＡ（エリザ）補捉方法におけるそれら
の使用に関し、それらの方法は、酵素がグルタールアル
デヒドによって抗体に結合されている酵素結合体類の使
用に基づいている。
【０００２】
【従来の技術】ヒト血清中に存在するＣ１ｑ補体因子は
、ＩｇＧ類およびＩｇＭ類に存在する特定部位に対する
認識要素に相当する６個のクラビフォルムフィラメント
類を有していることが公知である（Ｓｈｅｌｔｏｎ　Ｅ
．等、プロシーディングズ・オブ・ナショナルアカデミ
ー・オブ・サイエンシィズ（Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　
Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ，　１９７２，６９：６
５））。Ｃ１ｑのアフィニティは、ＩｇＭ類に対するよ
りも単量体ＩｇＧ類に対して低く、そして、抗原に結合
したかまたは変性したかのいずれかの抗体類（ＩｇＧお
よびＩｇＭ）を凝集する（Ｓｌｅｄｇｅ　Ｃ．Ｒ．およ
びＢｉｎｇ　Ｄ．Ｈ．，ジャーナル・オブ・ケミストリ
（Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．）、１９７３、２４８
：２８１８））｝。
【０００３】
【発明が解決する課題および手段】我々は、血清中にお
けるＣ１ｑおよびＩｇＭ抗体からなる高分子複合体の存
在がグルタールアルデヒドによってアルカリホスファタ
ーゼ（ＡＬＰ）と結合した検出抗体類を用いるＥＬＩＳ
Ａ抗体捕捉アッセイによる特異的ＩｇＭ類検出における
誤陽性結果に関与していると見なしており、この理論は
、クラス特異的抗体類の捕捉に基づく全てのＥＬＩＳＡ
アッセイに一般的に該当する。
【０００４】抗ヒトＩｇＭ抗体類をコーティングしたマ
イクロプレート壁によって表わされる固相と血清を接触
させることによって、これらのＩｇＭ−Ｃ１ｑ複合体は
捕捉される。その後、ＩｇＭ類が求めている抗原類と先
に混合し、ＡＬＰに結合した抗体をこのウェルに添加す
ると、これがＣ１ｑに結合し、そしてＡＬＰ特異的基質
に接触させると、特異性が増強された（ａｓｐｅｃｉｆ
ｉｃ）シグナルを出す。
【０００５】対照的に、本発明の緩衝液が血清の希釈に
使用されるならば、その中に含まれるコラゲナーゼ酵素
はＣ１ｑのアミノ酸配列類に作用して、ＩｇＭ類を結合
することができるそれらのフィラメント類をそれから分
離する。
【０００６】本発明の緩衝液は； 無水二リン酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　１．
０９　ｇ／ｌ一リン酸ナトリウム１水和物　　　　　　
　　０．３７　ｇ／ｌ塩化ナトリウム　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　８．５　ｇ／ｌウシ血清アル
ブミン　　　　　　　　　　　　　　　１０　ｇ／ｌＢ
ｒｉｊ−３５　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　０．５　ｇ／ｌヒトＩｇＧ凝集物　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．５　ｇ／ｌコラゲナーゼＩＶ型
　　　　　　　　　　　　１０００−３０００　Ｕ／ｌ
アジ化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１．００　ｇ／ｌからなり、かつ７．０−７．５のｐ
Ｈを有している。
【０００７】緩衝液調製法 無水二硫酸ナトリウム１．０９　ｇ、一リン酸ナトリウ
ム一水和物０．３７　ｇおよび塩化ナトリウム８．５　
ｇを滅菌精製水９００ｍｌに溶解し、この溶液を次に０
．１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ　７．２に調製し、さら
に、ウシ血清アルブミンをそれに添加して約３０分間ゆ
っくりと撹拌し溶解する。下記の試薬類を、次に得られ
た溶液に順次添加する： Ｂｒｉｊ−３５　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．５０　ｇヒトＩｇＧ凝集物　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．５０　ｌコラゲナーゼＩＶ型　
　　　　　　　　　　　　　　１５００．００　Ｕ．Ｉ
．アジ化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１．００　ｇ終了時滅菌精製水で最終容量を１００
０ｍｌに調製後、フィルター膜を介して滅菌条件下で本
溶液をろ過する。 溶液を調製しかつ保存するために必要な容器は、先に滅
菌しておく。
【０００８】
【実施例】本発明の目的および利点をよりよく明示する
ためにいくつか実施例を挙げるが、それらに限定されな
い。
【０００９】（実施例１）コラゲナーゼを添加したもの
と血清希釈緩衝液自体を比較するためのパネル上におけ
る誤陽性血清のＥＬＩＳＡが添加された。
【００１０】ＩＦＡ標準法によって陰性と証明された混
合郡（血液提供者および妊婦）に関連する約１００の血
清試料を、ＡＬＰと結合し、種々の微生物（トキソプラ
ズマ・ゴンジ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ　ｇｏｎｄｉｉ）
、ルベラウィールス（Ｒｕｂｅｌｌａ　ｖｉｒｕｓ）、
サイトメガロウィルス（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏ　ｖｉｒ
ｕｓ）およびトレポネマ・パリズム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍ
ａ　ｐａｌｌｉｄｕｍ））の抽出抗原と、予備混合した
抗体からなる検出系に基づくＩｇＭ捕捉ＥＬＩＳＡによ
って測定した。本測定は、下記の結果を生じた：陰性血
清９４および誤陽性血清６。
【００１１】誤陽性血清６のすべてから一定量を、前記
（無水二リン酸ナトリウム１．０９　ｇ／ｌ、一リン酸
ナトリウム１水和物０．３７　ｇ／ｌ、塩化ナトリウム
８．５　ｇ／ｌ、ウシ血清アルブミン１０　ｇ／ｌ、Ｂ
ｒｉｊ−３５　０．５　ｇ／ｌ、ヒトＩｇＧ凝集物０．
５　ｇ／ｌ、アジ化ナトリウム１．００　ｇ／ｌ）およ
びそれにコラゲナーゼを１５００Ｉ．Ｕ．の酵素活性に
等しい０．０１　ｇ／ｌの濃度で添加したものの双方の
希釈緩衝液で希釈し、さらに、それらの選択のために先
に使用されたＩｇＭ捕捉ＥＬＩＳＡによって二重に測定
した。これらの測定は下記の段階からなる。
【００１２】段階１ マイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ−ＭＢＣ、デンマ
ーク）のウェル壁を、ｐＨ９．８の０．１Ｍ　　Ｎａ２
　ＣＯ３　緩衝液中で２０μｇ／ｍｌの抗ヒトＩｇＭ抗
体（μ鎖）の０．１００　ｍｌ／ウェルと一晩室温（２
０−２５℃）で湿式チェンバーでインキュベートするこ
とによって物理吸着によって飽和した。
【００１３】段階２ ０．０５％ツウィーン（Ｔｗｅｅｎ）２０含有精製水で
３回洗浄後、陰性および陽性対照血清および０．０５％
Ｂｒｉｊ−３５および０．１％ウシ血清アルブミン（Ｂ
ＳＡ）含有ｐＨ７．２緩衝生理溶液で１：１０１に希釈
した検査血清の０．１００　ｍｌ／ウェルをプレートに
添加した。
【００１４】コラゲナーゼ（ＩＶ型、比活性１５０　Ｕ
／ｍｇ、ワーシントン（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ））濃
度１．５　Ｕ／ｍｌを数回の実験で上記の血清希釈緩衝
液に添加した。
【００１５】プレートは、３７℃で１時間インキュベー
トした。
【００１６】段階３ ０．０５％Ｂｒｉｊ−３５含有緩衝生理溶液で５回洗浄
後、０．０５％Ｂｒｉｊ−３５および０．１％ＢＡＳ含
有緩衝生理溶液中の最適希釈度（Ａｇ：１０−２０　μ
ｇ／ｍｌ；Ａｂ−ＡＬＰ：５−１０　μｇ／ｍｌ）のト
キソプラズマ・ゴンジ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ　ｇｏｎ
ｄｉｉ；Ｔｏｘｏ）、ルベラウィルス（ｒｕｂｅｌｌａ
　ｖｉｒｕｓ；Ｒｕｂｅｌｌａ）、サイトメガロウィル
ス（Ｃｙｔｏｍｅｇａｒｏ　ｖｉｒｕｓ；ＣＭＶ）また
はトレポネマ・パリズム（Ｔｏｒｅｐｏｎｅｍａ　ｐａ
ｌｌｉｄｕｍ；シフィリド（Ｓｉｆｉｌｉｄｅ））の抽
出性抗原（Ａｇ）と結合し、かつＡＬＰ結合抗体（Ａｂ
−ＡＬＰ）からなる複合体０．１００　ｍｌ／ウェルを
プレートに添加した。
【００１７】プレートを３７℃で１時間インキュベート
した。
【００１８】段階４ ０．０５％Ｂｒｉｊ−３５含有緩衝生理溶液で５回洗浄
後、０．６　ｍＭ　　ＭｇＣｌ２　含有ｐＨ　９．８の
１．１　Ｍジエタノールアミン緩衝溶液中ｐ−ニトロフ
ェニルリン酸（ＡＬＰ特異的発色性基質）１　ｍｇ／ｍ
ｌの溶液０．１００　ｍｌ／ウエル。本プレートを３７
℃で正確に３０分間インキュベートし、その後、３Ｍ　
　ＮａＯＨの０．０２５　ｍｌ／ウエルを酵素反応ブロ
ックのために添加した。
【００１９】ウエル中における本溶液の吸光度を、大気
に対してゼロ補正した４０５ｎｍにおける垂直読みとり
値付けマイクロプレート光度計で求めた。
【００２０】陰性を陽性と識別する吸光度しきい値（カ
ットオフ）を下記の式にしたがって計算した。
【００２１】カットオフ＝（陰性対照の平均吸光度＋陽
性対照の平均吸光度）×０．５ カットオフ値未満の吸光度を示す血清は陰性となみし、
この値よりも大きいかまたは等しいものは陽性と見なし
た。
【００２２】得られた結果を表１に示し、そして、血清
希釈緩衝液にコラゲナーゼ（１．５　Ｕ／ｍｌ）を添加
することによって陰性（平均吸光度＜カットオフ値）と
して全ての誤陽性血清が表示されることを示している。
【００２３】実施例２ ＥＬＩＳＡ：上記血清希釈緩衝液とコラゲナーゼ添加の
ものとの陽性血清パネルアッセイによる比較。
【００２４】標準法（ＩＦＡ）を用いて、ＩｇＭ抗トキ
ソプラズマ・ゴンジ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ　ｇｏｎｄ
ｉｉ）、抗ルベラウィルス（Ｒｕｂｅｌｌａ　ｖｉｒｕ
ｓ）、抗ＣＭＶおよび抗トレポネマ・パリズム（Ｔｏｒ
ｅｐｏｎｅｍａ　ｐａｌｌｉｄｕｍ）中においてそれぞ
れ陽性と証明された５血清の４群に血清２０を分類し、
上記の希釈緩衝液（無水二リン酸ナトリウム１．０９ｇ
／ｌ、一リン酸ナトリウム一水和物０．３７　ｇ／ｌ、
塩化ナトリウム８．５　ｇ／ｌ、ウシ血清アルブミン１
０　ｇ／ｌ、Ｂｒｉｊ−３５　０．５　ｇ／ｌ、ヒトＩ
ｇＧ凝集物０．５　ｇ／ｌ、アジ化ナトリウム１．００
　ｇ／ｌ）およびそれに対してＩＶ型コラゲナーゼ（１
５００　Ｕ／ｌ）を添加したものの双方で希釈し、そし
て、実施例１に記載のＥＬＩＳＡアッセイを用いて分析
した。得られた結果を表２に示し、これは、血清希釈緩
衝液にコラゲナーゼを添加することは真の陽性血清にお
いていかなる吸光度変化も起こさないことを実証し、こ
のことは診断面から重要である。 表１ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４０５
ｎｍにおける平均吸光度誤陽性血清　　　　アッセイＡ
　　　　　　アッセイＢ　　　　アッセイＣ　　　　　
　アッセイＤ緩衝液　　　　　　　　１　　　　　　２
　　　　　　１　　　　２　　　　　　１　　　　　　
２　　　　　　１　　　　２１　　　　　　　　　　　
０．９３５　　０．２１５　　　０．８９７　　０．２
８５　　　０．９７２　　０．２２１　　　１．５２２
　　０．２２１２　　　　　　　　　　　１．１２０　
　０．３１０　　　０．９０２　　０．１９５　　　０
．８５３　　０．１５７　　　１．６３８　　０．１５
７３　　　　　　　　　　　１．０１５　　０．２２５
　　　０．９５６　　０．２３６　　　０．９１０　　
０．２５６　　　１．３０５　　０．２１９４　　　　
　　　　　　　１．４５３　　０．２８９　　　１．２
３７　　０．２７２　　　０．７９０　　０．１９２　
　　１．６０２　　０．２５６５　　　　　　　　　　
　０．８７２　　０．２３８　　　０．８７２　　０．
２４４　　　０．６５６　　０．２７３　　　０．９０
７　　０．１９２６　　　　　　　　　　　０．６４９
　　０．２０１　　　０．８５４　　０．１７６　　　
０．５６７　　０．２２０　　　０．８５３　　０．２
７３カットオフ　　　０．５３６　　０．５４５　　　
０．３９２　　０．２９５　　　０．４９３　　０．４
６３　　　０．３７７　　０．３０６緩衝液１：生理緩
衝＋Ｂｒｉｇ−３５（０．０５％）＋ＢＳＡ（０．１％
）； 緩衝液２：緩衝液１＋コラゲナーゼ（１．５　Ｕ／ｍｌ
）アッセイＡ：ＥＬＩＳＡトキソ（Ｔｏｘｏ）ＩｇＭ；
アッセイＢ：ＥＬＩＳＡルベラ（Ｒｕｂｅｌｌａ）Ｉｇ
Ｍ；アッセイＣ：ＥＬＩＳＡ　　ＣＭＶ　　ＩｇＭ；ア
ッセイＤ：ＥＬＩＳＡシフィリド（Ｓｉｆｉｌｉｄｅ）
ＩｇＭ表２ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４０５
ｎｍにおける平均吸光度誤陽性血清　　　　アッセイＡ
　　　　　　アッセイＢ　　　　アッセイＣ　　　　　
　アッセイＤ緩衝液　　　　　　　　１　　　　　　２
　　　　　　１　　　　２　　　　　　１　　　　　　
２　　　　　　１　　　　２１　　　　　　　　　　　
１．２５８　　１．２１０　　　０．９９０　　０．９
８５　　　０．９１３　　０．８５７　　　０．７３０
　　０．７５６２　　　　　　　　　　　０．９０１　
　０．８２０　　　１．９３５　　１．７８７　　　１
．２６７　　１．２１８　　　１．３１０　　１．２３
０３　　　　　　　　　　　０．８８７　　０．９１５
　　　１．１３０　　１．１０２　　　０．７２３　　
０．７３８　　　０．９０７　　０．８３５４　　　　
　　　　　　　１．５１０　　１．４５７　　　０．６
８０　　０．６７３　　　０．９７２　　０．９４８　
　　１．１２２　　０．９７２５　　　　　　　　　　
　０．７３７　　０．６９７　　　１．３５２　　１．
３２１　　　１．５７０　　１．４５１　　　１．４７
８　　１．５２８カットオフ　　　０．５５０　　０．
５２５　　　０．４０５　　０．３６５　　　０．４８
５　　０．４９６　　　０．３４５　　０．３３０　　
緩衝液１：生理緩衝＋Ｂｒｉｇ−３５（０．０５％）＋
ＢＳＡ（０．１％）；

Claims (8)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】　　コラゲナーゼを含有するｐＨ　７．０
    −７．４の緩衝液。
  2. 【請求項２】　　前記コラゲナーゼがＩＶ型コラゲナー
    ゼである請求項１記載の緩衝液。
  3. 【請求項３】　　前記ＩＶ型コラゲナーゼが１０００−
    ３０００　Ｕ／ｌの濃度で存在する請求項２記載の緩衝
    液。
  4. 【請求項４】　　前記ＩＶ型コラゲナーゼが１５００　
    Ｕ／ｌの濃度で存在する請求項３記載の緩衝液。
  5. 【請求項５】　　無水二リン酸ナトリウム１．０９　ｇ
    ／ｌ、一リン酸ナトリウム一水和物０．３７　ｇ／ｌ、
    塩化ナトリウム８．５　ｇ／ｌ、ウシ血清アルブミン１
    ０　ｇ／ｌ、Ｂｒｉｊ−３５　０．５　ｇ／ｌ、凝集ヒ
    トＩｇＧ　０．５　ｇ／ｌ、コラゲナーゼＩＶ型１５０
    ０　Ｕ／ｌおよびアジ化ナトリウム１．００　ｇ／１か
    らなる請求項４記載の緩衝液。
  6. 【請求項６】　　ＥＬＩＳＡアッセイにおいてヒト血清
    を希釈するための請求項１から５に記載の緩衝液の用途
    。
  7. 【請求項７】　　ＥＬＩＳＡが、グルタールアルデヒド
    によってアルカリホスファターゼに結合した抗体を追跡
    することを使用して、特異的ＩｇＭ類の識別のために行
    われる請求項６記載の緩衝液の用途。
  8. 【請求項８】　　アルカリホスファターゼと結合した追
    跡抗体類が微生物抽出抗原と予備混合される請求項７記
    載の用途。
JP3166201A 1990-06-13 1991-06-12 コラゲナーゼ含有緩衝液、その調製およびヒト血清希釈用としての使用 Pending JPH04232463A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT02063090A IT1248838B (it) 1990-06-13 1990-06-13 Soluzioni tampone contenenti collagenasi, loro preparazione ed uso perla diluizione di sieri umani
IT20630A/90 1990-06-13

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH04232463A true JPH04232463A (ja) 1992-08-20

Family

ID=11169791

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP3166201A Pending JPH04232463A (ja) 1990-06-13 1991-06-12 コラゲナーゼ含有緩衝液、その調製およびヒト血清希釈用としての使用

Country Status (4)

Country Link
US (1) US5300427A (ja)
EP (1) EP0468180A3 (ja)
JP (1) JPH04232463A (ja)
IT (1) IT1248838B (ja)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994024273A1 (en) * 1993-04-16 1994-10-27 Baxter International Inc. Stable collagenase compositions and methods for their preparation
AU1917300A (en) * 1998-12-01 2000-06-19 Viral Antigens, Inc. Improved specificity in the detection of anti-rubella igm antibodies
CN111398580B (zh) * 2017-11-03 2023-06-13 科美诊断技术股份有限公司 一种检测样本中目标IgM抗体的方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816400A (en) * 1983-05-19 1989-03-28 Karl Tryggvason Basement membrane collagen degrading enzyme and method of purifying same
US4985542A (en) * 1984-06-08 1991-01-15 The Rockefeller University Kit for the determination and diagnosis of non-goodpasture glomerulonephritis
US4931385A (en) * 1985-06-24 1990-06-05 Hygeia Sciences, Incorporated Enzyme immunoassays and immunologic reagents
US4944941A (en) * 1987-08-07 1990-07-31 Genentech, Inc. Methods and compositions for the treatment of lung conditions

Also Published As

Publication number Publication date
IT9020630A1 (it) 1991-12-13
IT9020630A0 (ja) 1990-06-13
US5300427A (en) 1994-04-05
EP0468180A2 (en) 1992-01-29
IT1248838B (it) 1995-01-30
EP0468180A3 (en) 1993-05-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6489129B1 (en) Antigen-specific IgM detection
JPH01150856A (ja) 抗原および抗体の同時免疫定量法
US5989806A (en) Immunodissociation for improving the immunochemical determination of an analyte
AU674353B2 (en) Base dissociation assay
JP3363166B2 (ja) 相互に対する極めて高い特異的親和性を有するペプチド対をイン・ビトロ診断分野に使用する方法
WO2004088311A1 (ja) ノロウイルス又はサポウイルス検体用希釈液及びウイルス検出方法
US5681695A (en) Method for increasing specificity in competitive immunoassays
US6030770A (en) Increasing the sensitivity in the immunochemical determination of an analyte
CA2246896C (en) Immunoassay utilizing two incubations with labelled antigen
JPH07108230B2 (ja) 単純ヘルペスウイルス抗原の抽出または測定のための抽出組成物、抽出方法および診断試験キット
JP3327488B2 (ja) 被検体の免疫化学的測定方法
JPH04232463A (ja) コラゲナーゼ含有緩衝液、その調製およびヒト血清希釈用としての使用
JPH0743384B2 (ja) アッセイ用水性洗浄液、診断試験キット及び単純ヘルペスウイルスの測定方法
US5534414A (en) Process for preparing conjugates consisting of a specific binding partner and a carbohydrate-containing protein
CA2193344C (en) Immunological determination method
US20070254322A1 (en) Complement-based analyte assay
JPH0792455B2 (ja) 免疫学的試験用水性溶媒
JP3398189B2 (ja) 被検物質検出のための免疫化学的方法
WO1995034812A1 (fr) Procede de dosage d'un anticorps d'une immunoglobuline m specifique et reactif approprie
RU2112245C1 (ru) Способ и набор для обнаружения антител к вирусу лихорадки долины рифт в сыворотках животных
WO1990002336A1 (en) Immunoassay for determining a chlamydial antigen comprising pretreatment of the sample with a chelating agent
EP0569086A2 (en) Method and kit for attaching compounds to carboxylated substrates using uronium salt
SU1497577A1 (ru) Способ определени тестостерона в биологической жидкости
WO1995002186A1 (en) New diagnostic assay for detection of syphilis
MXPA96006583A (en) Immunological method of determinac