JPH04217988A - 抗生物質ｇｅ２２７０因子ｂ１、ｂ２、ｃ１、ｃ２、ｄ１、ｄ２、ｅおよびｔ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１
、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴと命名す
る新規な抗生物質、それらの付加塩、その製剤学的組成
物および、とくにそれらに対して感受性の微生物を包含
する感染症の処理における、薬物としてのそれらの使用
に関する。

【０００２】本発明の組成物は、また、動物、例えば、
家禽、ブタ、反芻動物などにおける成長促進剤として活
性である。

【０００３】本発明の化合物は、プラノビスポラ・ロセ
ア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣ
Ｃ５３７７３またはその抗生物質ＧＥ２２７０産生変異
型または突然変異の培養物から分離される。とくに、そ
れらは菌糸体およびまた培養した微生物の発酵ブロス中
に見いだされる。

【０００４】プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉ
ｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３は土の
試料から分離され、そしてブダベスト条約の規定に従い
１９８８年６月１４日にアメリカン・タイプ・カルチャ
ー・コレクション（ｔｈｅ　　Ａｍｅｒｉｃａｎ　　Ｔ
ｙｐｅ　　Ｃｕｌｔｕｒｅ　　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）
（ＡＴＣＣ）、米国マリイランド州２０８５２ロックビ
レ、パークダウン１２３０１に受託された。

【０００５】この菌株は受け入れ番号ＡＴＣＣ５３７７
３を与えられた。

【０００６】この菌株は、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ
と命名された新規な抗生物質と関連して欧州特許出願公
開第３５９０６２号（対応する米国特許出願第４０１，
２７８）号に既に記載された。

【０００７】本発明の化合物は、前述の微生物の菌株を
，常態で最も豊富な分画である、抗生物質ＧＥ２２７０
因子Ａと一緒に産生される。

【０００８】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ
１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴの産生は、それを産
生することができるプラノビスポラ（Ｐｌａｎｏｂｉｓ
ｐｏｒａ）菌株、すなわち、プラノビスポラ・ロセア（
Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５
３７７３またはその抗生物質ＧＥ２２７０産生変異型ま
たは突然変異を、好気性条件下に、炭素、窒素、および
無機塩類の同化可能な源を含有する水性栄養培地中で培
養することによって達成される。発酵分野において通常
使用する栄養培地の多数を使用できるが、ある種の培地
は好ましい。好ましい炭素源はグルコース、マンノース
、ガラクトース、澱粉、コーンミールなどである。好ま
しい窒素源はアンモニア、硝酸塩、ダイズミール、ペプ
トン、肉エキス、酵母エキス、トリプトン、アミノ酸な
どである。培地中に添加することができる無機塩類の例
は、ナトリウム、カリウム、鉄、亜鉛、コバルト、マグ
ネシウム、カルシウム、アモニウム、塩化物、炭酸塩、
硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩などを生成することができる
普通の可溶性塩類である。

【０００９】通常、抗生物質産生菌株は震盪フラスコ中
で前培養し、次いでこの培養物を使用して、実質的な量
の抗生物質の産生のためのジャー発酵槽を植え継ぎする
。前培養に使用する培地はより大きい発酵に使用するも
のと同一であることができるが、他の培地をまた使用す
ることができる。抗生物質ＧＥ２２７０を産生する菌株
は、２０〜４０℃、好ましくは２４〜３５℃の温度にお
いて成長させることができる。

【００１０】発酵の間、抗生物質の産生はブロスまたは
菌糸体の抽出物の試料を抗生物質の活性について、例え
ば、バイオアッセイまたはＴＬＣまたはＨＰＬＣの手順
により監視することができる。

【００１１】抗生物質ＧＥ２２７０に対して感受性の有
機体、例えば、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　　ｓｕｂｔ
ｉｌｉｓ）および黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）
を試験有機体として使用することができる。バイオアッ
セイは、便利には、寒天平板上の寒天拡散法により実施
される。抗生活性の最大の産生は、一般に、発酵の第２
日と第８日との間において起こる。

【００１２】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ
１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴは、菌株プラノビス
ポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅ
ａ）ＡＴＣＣ５３７７３、あるいはそのＧＥ２２７０産
生突然変異または変異型を培養することによって産生さ
れ、そしてある量の産生物が発酵ブロスから分離するこ
とができる場合でさえ、主として菌糸体中に見いだされ
る。

【００１３】プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉ
ｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の形態
学的特徴プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐ
ｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３はほとんど
の培地上でよく成長する。栄養菌糸体は、長いおよび不
規則に枝分かれするフィラメント（０．５〜１．０マイ
クロメートル）を形成し、これらのフィルムは寒天を浸
透し、そしてその表面上で成長する緻密な成長を形成す
る。菌糸体は、液体または固体の培地中で成長するかど
うかにかかわらず、断片化しない状態に止まる。その色
は試験した培地の大部分の上で薄いさんご色ないしピン
クのさんご色の範囲である。気性菌糸体はわずかの横の
枝をもつ、長い、波状の、細長い菌糸から形成され、そ
して空気中で寒天表面に対して本質的に平行に成長する
。

【００１４】気性菌糸体は、存在するとき、白色−ピン
クの色を有する。胞子嚢は気性菌糸体に沿って単一にま
たは群で形成され、そして約６．０〜８．０ミクロンの
長さおよび約１．０〜１．２ミクロンの幅である。それ
らは短い胞子嚢柄（１．０〜２．０マイクロメートルの
長さ）により菌糸に結合している。紡錘形の直線状の胞
子（３．０〜３．５×１．０×１．２マイクロメートル
）の縦方向の対が各胞子嚢中に形成されている。胞子嚢
において、胞子は横方向の隔膜により分離されている。 胞子嚢のエンベロープからの解放後、胞子は用毛目の鞭
毛により運動性となる。

【００１５】プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉ
ｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の培養
特性培養の特性の検査のために、プラノビスポラ・ロセ
ア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣ
Ｃ５３７７３は、シャーリング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）お
よびゴットリーブ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）［シャーリング
（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）Ｅ．Ｂ．およびゴットリーブ（Ｇ
ｏｔｔｌｉｅｂ）Ｄ．１９６６−ストレプトミセス属の
種の特性決定の方法（Ｍｅｔｈｏｄ　　ｆｏｒ　　ｃｈ
ａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ　　ｓｐｅｃｉｅｓ）−Ｉｎｔ．Ｓｙｓ
ｔ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１６、３１３−３４０］によ
り示唆されるの種の種々の標準の培地上で、ワクスマン
（Ｗａｋｓｍａｎ、Ｓ．Ａ．１９６１−アクチノミセテ
ス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）−ザ・ウィリアムス
・アンド・ウィリキンソウンス・カンパニー（Ｔｈｅ　
　Ｗｉｌｌｉａｍｓ　　ａｎｄ　　Ｗｉｌｋｉｎｓ　　
Ｃｏ．）バルチモア；Ｖｏｌ．２、３２８−３３４］に
より推奨されるいくつかの培地を添加して培養した。

【００１６】色の決定は、必要に応じて、メルズ（Ｍａ
ｅｒｚ）Ａ．およびＭ．レア・ポール（Ｒｅａ　　Ｐａ
ｕｌ）、１９５０、色の辞書（Ａ　　Ｄｉｃｔｉｏｎａ
ｒｙ　　ｏｆ　　Ｃｏｌｏｒ）−第２版、マク・グロー
・ヒル・ブック・カナパニー・インコーポレーテッド（
ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ　　Ｂｏｏｋ　　Ｃｏｍｐａｎ
ｙ　　Ｉｎｃ．）、ニューヨーク］の方法により実施し
た。

【００１７】有機体が異なる炭素源を利用する能力は、
シャーリング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）およびゴットリーブ
（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）によりに記載されている方法によ
り研究した。

【００１８】培養および生理学的特性および炭素源の利
用は、表Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩに報告する。

【００１９】表Ｉにおける読みは、２８℃において２週
のインキュベーション後に取った。

【００２０】

【表６】

【００２１】

【表７】

【００２２】

【表８】

【００２３】

【表９】 この試験のために、培地Ｎｏ．８を使用し、そして２８
〜３０℃において２週のインキュベーション後、結果を
評価する。

【００２４】温度に対する感受性 最適な成長温度は２８℃〜３７℃の範囲である。１５℃
および５０℃において成長は観測されず、そして２０℃
において中程度の成長が観測される。

【００２５】化学分類学的特性 細胞壁の分析 細胞壁中に存在するアミノ酸の分析は、ベッカー（Ｂｅ
ｃｋｅｒ）らが記載する方法により実施した［「全細胞
の加水分解物のペイパークロマトグラフィーによるノカ
ルジア属およびストレプトミセス属の間の急速分化（Ｒ
ａｐｄ　　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　　ｂｅｔ
ｗｅｅｎ　　Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ａｎｄ　　Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｂｙ　　ｐａｐｅｒ　　ｃｈｒｏ
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　　ｏｆｗｈｏｌｅ　　ｃｅｌｌ
　　ｈｙｄｒｙｚａｔｅｓ）、アプライド・マイクロバ
イオロジー（Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．）、１２
、４２１−４２３、１９６４］。

【００２６】全細胞の加水分解物の分析は、メソ−ジア
ミノピメリン酸の存在を明らかにした。

【００２７】次の文献による方法に従い、純粋な細胞壁
の調製物を分析すると、グリシンは存在しなかった：カ
ワモト，Ｉ、Ｏ．テツオ、およびＮ．タカシ、「ミクロ
モノスポラ・オリバソテロスポラ、ミクロモノスポラ・
サガミエンシスおよび関係する有機体の細胞壁の組成（
Ｃｅｌｌ　　ｗａｌｌ　　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　　
ｏｆＭｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　　ｏｌｉｖａｓｔｒ
ｏｓｐｏｒａ，Ｍｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　　ｓａｇ
ａｍｉｅｎｓｉｓ　　ａｎｄ　　ｒｅｌａｔｅｄ　　ｏ
ｒｇａｎｉｓｍｓ）、ジャーナル・オブ・バクテリオロ
ジー（Ｊ．Ｂａｃｔｒｉｏｌｏｇｙ）、１４６、５２７
−５３４、１９８１。

【００２８】全細胞の糖のパターン 全細胞の加水分解物中の糖含量の分析は、レチェバリア
ー（ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）Ｍ．Ｐ．［「臨床的な重
要性をもつ好気性アクチノミセテスの同定（Ｉｄｅｎｔ
ｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　ａｅｒｏｂｅ　　ａｃ
ｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓｏｆ　　ｃｌｉｎｉｃａｌ　　
ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ）」、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍ
ｅｄ．７１、９３４−９４４、１９６８］に記載されて
いる方法により、スタネク（Ｓｔａｎｅｃｋ）Ｊ．Ｌ．
およびＧ．Ｄ．ロバーツ［「薄層クロマトグラフィーに
よる好気性アクチノミセテスの同定に対して簡素化した
アプローチ（Ｓｉｍｌｉｆｉｅｄ　　ａｐｐｒｏａｃｈ
　　ｔｏ　　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　
　ａｅｒｏｂｉｃ　　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　　
ｂｙ　　ｔｈｉｎ　　ｌａｙｅｒ　　ｃｈｒｏｍａｔｏ
ｇｒａｐｈｙ）」、アプライド・マイクロバイオロジー
（Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．）、２８、２２６−
２３１、１９７４］に記載されている薄層クロマトグラ
フィーのセルロースシートを使用して、次の溶媒系：酢
酸エチル−ピリジン−水（１００：３５：２５　　ｖ／
ｖ）を実施した。

【００２９】得られた結果は、マズロース（３−Ｏ−メ
チル−Ｄ−ガラクトース）の存在およびアラビノースお
よびガラクトースの不存在を示した。

【００３０】菌株プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏ
ｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の
同一性この菌株は、属プラノビスポラ（Ｐｌａｎｏｂｉ
ｓｐｏｒａ）に割り当て、そして次の形態学および化学
的特性のためにプラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂ
ｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）として分類した：ａ）細
胞壁中のメソ−ジアミノピペリン酸の存在およびグリシ
ンの不存在（細胞壁の化学型ＩＩＩ）ｂ）細胞壁の加水
分解物中のマズロースの存在（全細胞の糖のパターンＢ
） ｃ）１対の移動性胞子を含有する長い円形の胞子嚢の気
性菌糸体上の形成 ｄ）栄養菌糸体のピンク色 上に報告したプラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉ
ｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の形態
学的特性は、次の文献に記載されているプラノビスポラ
・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）
の菌株のそれらと実質的に異ならない：Ｊ．Ｅ．チーマ
ン（Ｔｈｉｅｍａｎｎ）ら、「ジ・アクチノミセタレス
（Ｔｈｅ　　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）」、Ｔ
ｈｅ　　ＪｅｎａＩｎｔｅｒｎ．Ｓｙｍｐ．ｏｎ　　Ｔ
ａｘｏｎ．、１９６８年９月、Ｈ．プラウサー（Ｐｒａ
ｕｓｅｒ）編、イエナ。それはアメリカン・タイプ・カ
ルチャー・コレクション（ｔｈｅ　　Ａｍｅｒｉｃａｎ
　　Ｔｙｐｅ　　Ｃｕｌｔｕｒｅ　　Ｃｏｌｌｅｃｔｉ
ｏｎ）に受託され、ここで受け入れ番号２３８６６を与
えられた。この菌株について、抗生物質の産生は記載さ
れなかった。

【００３１】他の微生物の場合のように、ＧＥ２２７０
を産生する菌株の特性は変動を受ける。例えば、この菌
株の人工的変異型および突然変異を種々の既知の突然変
異原、例えば、紫外線、Ｘ線、高い周波数の波、放射能
、および化学物質、例えば、亜硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ’
−ニトロ−Ｎ−ニトロソキナジジン、および多数の他の
もので処理することによって得ることができる。プラノ
ビスポラ属（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ）の種に属しそ
して抗生物質ＧＥ２２７０を産生するすべての自然およ
び人工の変異型は、本発明の目的に対して菌株プラノビ
スポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓ
ｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３に等しいと認められる。

【００３２】前述したように、抗生物質ＧＥ２２７０因
子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴは
、一般に、産生菌株の菌糸体中に主として見いだされる
が、少量の物質はまた発酵ブロス中に見いだされる。

【００３３】本発明の抗生物質の回収および分離菌糸体
または産生微生物の発酵ブロスからの抗生物質ＧＥ２２
７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅおよ
びＴの回収は、それ自体既知の認識に従い、例えば、溶
媒を使用する抽出、非溶媒の添加による沈澱または溶液
のｐＨの変化、分配クロマトグラフィー、吸着クロマト
グラフィー、逆相分配クロマトグラフィー、イオン交換
クロマトグラフィー、分子排除クロマトグラフィーなど
により実施する。

【００３４】菌糸体から本発明の抗生物質を回収する好
ましい手順は、濾過または遠心した菌糸体を水混和性有
機溶媒で抽出し、抽出物を濃縮し、そして粗製抗生物質
を、必要に応じて沈澱剤を添加して、沈澱により、水性
残留物を水不混和性有機溶媒で抽出することによるか、
あるいは吸着クロマトグラフィーおよび引き続いて所望
の産生物を吸着マトリックスから溶離することによって
回収することを包含する。

【００３５】発酵ブロスから本発明の抗生物質を回収す
る好ましい手順は、水不混和性有機溶媒を使用する抽出
、引き続く濃縮した抽出物からの、必要に応じて沈澱剤
の添加後の、沈澱、あるいはその水性残留物水不混和性
溶媒によりそれ以上の抽出を包含する。あるいは、発酵
ブロスは吸着マトリックスと接触させ、次いで極性溶離
混合物を使用する溶離により実施することができる。 このクロマトグラフィーの手順は、また、発酵ブロスそ
れ自体への代わりに発酵ブロスから得られた濃縮した抽
出物に適用することができる。

【００３６】用語「水混和性溶媒」は、ここで使用する
とき、現在この分野においてこの用語に与えられた意味
を有することを意図し、そして、使用条件下に、合理的
に広い濃縮範囲において水と混和性である溶媒を呼ぶ。

【００３７】菌糸体物質からの本発明の抗生物質の抽出
において使用することができる水混和性有機溶媒の例は
、次の通りである：（Ｃ１−Ｃ３）アルカノール、例え
ば、メタノール、エタノールおよびプロパノール；フェ
ニル（Ｃ１−Ｃ３）アルカノール、例えば、ベンジルア
ルカノール；低級ケトン、例えば、（Ｃ３−Ｃ４）ケト
ン、例えば、アセトンおよびエチルメチルケトン；環状
エーテル、例えば、ジオキサンおよびテトラヒドロフラ
ン；グリコールおよびそれらの部分的エーテル化生成物
、例えば、エチレングリコール、例えば、プロピレング
リコールおよびエチレングリコールモノメチルエーテル
；低級アミド、例えば、ジメチルホルムアミド、ジエチ
ルホルムアミド；およびジメチルスルホキシド。

【００３８】用語「水不混和性溶媒」は、ここで使用す
るとき、現在この分野においてこの用語に与えられた意
味を有することを意図し、そして、使用条件下に、意図
する用途に適する、合理的に広い濃縮範囲において水と
わずかに混和性であるか、あるいは事実上不混和性であ
る溶媒を呼ぶ。

【００３９】発酵ブロスからの本発明の抗生物質の抽出
において使用することができる不水混和性有機溶媒の例
は、次の通りである：線状、分枝鎖状または環状である
ことができる通常の炭化水素、例えば、ヘキサンまたは
シクロヘキサン；ハロゲン化炭化水素、例えば、クロロ
ホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、フルオロブロモ
エタン、ジブロモエタン、トリクロロプロパン、クロロ
トリフルオロオクタンなど；芳香族炭化水素、例えば、
トルエン、キシレンなど；少なくとも４個の炭素原子の
エステル、例えば、酢酸エチル、酢酸プロピル、酪酸エ
チルなど；線状、分枝鎖状または環状であることができ
る少なくとも４個の炭素原子のアルカノール、例えば、
ブタノール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３
−ペンタノール、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール
、３−ヘキサノール、３，３−ジメチル−１−ブタノー
ル、４−メチル−１−ペンタノール；３−メチル−１−
ペンタノール、２，２−ジメチル−３−ペンタノール、
２，４−ジメチル−３−ペンタノール、４，４−ジメチ
ル−２−ペンタノール、５−メチル−２−ヘキサノール
、１−ヘプタノール、２−ヘプタノール、５−メチル−
１−ヘキサノール、２−エチル−１−ヘキサノール、２
−メチル−３−ヘキサノール、１−オクタノール、２−
オクタノール、シクロペンタノール、２−シクロペンチ
ルエタノール、３−シクロペンチル−１−プロパノール
、シクロヘキサノール、シクロペンタノール、シクロオ
クタノール、２，３−ジメチルシクロヘキサノール、４
−エチルシクロヘキサノール、シクロオクチルメタノー
ル、６−メチル−５−ヘプテン−２−オール、１−ノナ
ノール、２−ノナノール、１−デカノール、２−デカノ
ールおよび３−デカノール；直鎖状または分枝鎖状のア
ルキルエーテルおよびそれらの混合物、例えば、エチル
エーテル、プロピルエーテル、ブチルエーテルなど；お
よびそれらの混合物または官能性誘導体。

【００４０】この分野において知られているように、産
生物の抽出は塩化によるか、あるいは抽出溶媒中に可溶
性の抗生物質とイオン対を形成する適切な有機塩を添加
することによって改良することができる。

【００４１】抽出後、実質的な量の有機溶媒を含有する
水性相を回収されるとき、それから水を共沸蒸留するこ
とは便利であることがある。一般に、これは水と最小の
共沸混合物を形成することができる溶媒を添加し、次い
で必要に応じて沈澱剤を添加して、所望の産生物を沈澱
させることを必要とする。水と最小の共沸混合物を形成
することができる溶媒の代表的な例は、次の通りである
：ｎ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ブチルエーテ
ル、四塩化炭素、クロロホルム、シクロヘキサン、２，
５−ジメチルフラン、ヘキサンおよびｍ−キシレン；好
ましい溶媒はｎ−ブタノールである。

【００４２】沈澱剤の例は、次の通りである：石油エー
テル、低級アルキルエーテル、例えば、エチルエーテル
、プロピルエーテルおよびブチルエーテル、および低級
アルキルケトン、例えば、アセトン。

【００４３】前述の粗製塩化メチレンの回収後、本発明
の単一の抗生物質の分離前に、この混合物をそれ以上の
精製／濃縮工程にかけることが必要であることがある。 クロマトグラフィーの手順が、この場合において、第１
の選択である。

【００４４】前述したように、本発明の抗生物質は通常
抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａと同時産生され、そしてそ
れに比較して小さい分画を表す。したがって、因子Ａを
残留する抗微生物的に活性な分画から分離すること、お
よびこれらの「小さい」分画を分離前に濃縮して、本発
明の単一の抗生物質を適当な量で回収することが必要で
ある。

【００４５】前述の工程において便利に使用することが
できるクロマトグラフィー系の例は、次の通りである：
ポリスチレンまたは混合したポリスチレン−ジビニルベ
ンゼン樹脂、例えば、アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉ
ｔｅ）ＸＡＤ２またはＸＡＤ４［ローム・アンド・ハー
ス（Ｒｏｈｍ　　ａｎｄ　　Ｈａａｓ）、ドウウェクス
（Ｄｏｗｅｘ）Ｓ１１２［ダウ・ケミカル・カンパニー
（Ｄｏｗ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　　Ｃｏ．）］およびダ
イアイオン（Ｄｉａｉｏｎ）ＨＰ２０（ミツビシ）；ア
クリル樹脂、例えば、ＸＡＤ７またはＸＡＤ８（ローム
・アンド・ハース）；ポリアミド、例えば、ポリカプロ
ラクタム、ナイロンおよび架橋したピリビニルピロリド
ン、一般に、１〜５の範囲の孔体積（ｍｌ／ｇ）、１〜
１００の範囲の表面積（ｍ２／ｇ）、０．１５〜０．５
０の範囲の見掛けの密度、１００〜３０００の範囲の平
均孔直径（オングストローム単位）および粒子大きさの
少なくとも４０％が３００マイクロメートル以下である
粒子大きさ分布を有する、例えば、ポリアミド−ＣＣ６
、ポリアミド−ＳＣ６、ポリアミド−ＣＣ６．６、ポリ
アミド−ＣＣ６ＡＣおよびポリアミド−ＳＣ６ＡＣ［マ
チェレイ−ネイゲル・アンド・カンパニー（Ｍａｃｈｅ
ｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ　　＆　　Ｃｏ．）、西ドイツ］、
ポリビニルピロリドン樹脂ＰＶＰ−ＣＬ［アルドリッヒ
・ヘミー社（Ａｌｄｒｉｃｈ　　Ｃｈｅｍｉｅ　　Ｇｍ
ｂＨ　　＆　　Ｃｏ．）、西ドイツ］、ポリアミド樹脂
ＰＡ４００［Ｍ．ボエルム社（Ｍ．Ｗｏｅｌｍ　　ＡＧ
）、西ドイツ］；および炭素。ポリスチレンおよびアク
リル樹脂の場合において、好ましい溶離剤は水混和性溶
媒、例えば、前述のものである；とくに、ポリアミドの
場合において、溶離剤は好ましくは水混和性溶媒、例え
ば、前述のものの水性混合物であるが、炭素について、
好ましい溶離剤は低級ケトン、例えば、アセトンまたは
低級アルコール、例えば、メタノールである。

【００４６】前述の工程において便利に使用することが
できるそれ以上のクロマトグラフィーの手順は、また、
次のものを包含する：静止相のクロマトグラフィー、例
えば、シリカゲル、アルミナ、ケイ藻土など、溶媒から
作られる有機溶離相は次のものを包含する：ハロゲン化
炭化水素、低級アルカノール、エーテル、および既に上
に述べたタイプの高級ケトンおよびそれらの混合物。

【００４７】便利には、また、いわゆる立体排除クロマ
トグラフィーを使用してすぐれた結果を得ることができ
る。とくに、ヒドロキシル基の大部分がアルキル化され
ている、制御された孔の架橋デキストラン、例えば、セ
ファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０［ファー
マシア・ファイン・ケミカルス（ＦａｒｍａｃｉａＦｉ
ｎｅ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）Ａｂ］はこの場合におい
て使用するのに有用である。

【００４８】前述の通常の手順に従い、本発明の化合物
のほかに、なを少量の抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａを含
有することができる、精製された混合物が通常得られる
。

【００４９】精製された混合物からの抗生物質ＧＥ２２
７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅおよ
びＴの分離は、この分野において知られている方法によ
り実施することができる。

【００５０】クロマトグラフィーの技術、例えば、前述
のものは分離の目的にとくに好ましいが、逆相クロマト
グラフィーは好ましい分離技術であると思われる。普通
の逆相クロマトグラフィーに加えて、また、逆相カラム
を使用する調製用ＨＰＬＣは通常使用される。

【００５１】このクロマトグラフィー技術における静止
相は、種々の機能的誘導体を有しそして前述の種類の水
混和性溶媒の水性混合物で溶離する、通常使用されるも
のの１つ、例えば、シラン化シリカゲルであることがで
きる。

【００５２】官能化シラン化シリカゲルの例は、（Ｃ８
−Ｃ２２）アルキル基を有するもの、例えば、官能性は
、例えば、オクタデシルシランまたはオクチルシランの
部分、またはシクロヘキサン、フェニル、および同様な
官能基により表されるものである。これらの樹脂は商業
的に入手可能であり、そして本発明のにおいて通常使用
できる同様なまたはなお改良された性質を有する新しい
添加は正式に登録されている。

【００５３】ことに好ましい調製用ＨＰＬＣ技術は、オ
クタデシル官能化シリカゲルおよびアセトニトリル、テ
トラヒドロフランおよび水性アモニウムホルメートを含
有する溶離混合物を使用して。

【００５４】ことに好ましい溶離の方法は約２５：７５
の相Ａおよび相Ｂの混合物を使用する溶離により代表さ
れ、ここで相Ａはアセトニトリル：テトラヒドロフラン
：４０ミリモルのアモニウムホルメート、４０：４０：
２０であり、そして相Ｂは同一成分であるが、比率１０
：１０：８０の混合物である。

【００５５】分画はそれらの含量に従い、例えば、普通
の紫外線検出器を２５４ｎｍにおいて使用する溶離のプ
ロフィルに従い収集し、次いで溶媒をそれ自体既知の技
術（例えば、減圧下の蒸発、凍結乾燥など）に従い除去
して、本発明の純粋な抗生物質の因子を分離し、この因
子を、必要に応じて、低級アルコール、例えば、メタノ
ール、エタノール、プロパノールおよびイソプロパノー
ルから結晶化することができる。

【００５６】この分野において通常のように、産生なら
びに回収および精製の工程は、種々の分析手順、例えば
、感受性の微生物についてのバイオアッセイ、例えば、
ペイパーのディスクまたは寒天拡散アッセイ、ＴＬＣま
たはＨＰＬＣ、例えば、ＵＶまたは微生物の検出工程を
包含する。

【００５７】好ましいＨＰＬＣ分析技術は、逆相ＨＰＬ
Ｃにより代表され、これはシラン化シリカゲルの多孔質
の球形粒子、例えば、Ｃ−８アルキル基で官能化され、
均一な直径を有するシリカゲル［例えば、５マイクロメ
ートルのベイカーボンド（ＢａｋｅｒｂｏｎｄＲ）Ｃ８
、ベイカー・リサーチ・プロダクツ（Ｂａｋｅｒ　　Ｒ
ｅｓｅａｒｃｈ　　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、米国］のカラ
ム、および極性水混和性溶媒、例えば、前述のものの直
線の勾配混合物である溶離剤を極性の増加する勾配で使
用する。

【００５８】この場合において、好ましい溶離混合物は
次の通りである： 相Ａ：ＣＨ３ＮＨ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４、４０：４０：４０ 相Ｂ：ＣＨ３ＮＨ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４、１０：１０：８０ 好ましい溶離の方法は約２０分で相Ｂ中の２０％〜３０
％の相Ａの直線の勾配により代表されるが、流速は約１
．８ｍｌ／分でありそして紫外線の検出は２５４ｎｍに
おいてである。

【００５９】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ
１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴの物理化学的特性Ａ
）パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ　　Ｅｌｍｅｒ）
３２０型を使用して記録した紫外線吸収スペクトルは次
の吸収最大を示す： 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ
１、Ｄ２およびＥ：

【００６０】

【表１０】 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔ：

【００６１】

【表１１】 Ｂ）次の吸収最大ν（ｃｍ−１）を示すヌジョール法に
おける赤外吸収スペクトル（抗生物質ＧＥ２２７０因子
Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）：

【００６２】

【表１２】 Ｃ）内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）［δ、ｐ
ｐｍ、ｍ］を使用するＤＭＳＯ−ｄ６（ヘキサジューテ
ロジメチルスルホキシド）中の次のシグナルの群を示す
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｓ＝一重線、ｂｒ　　ｓ＝広
い一重線、ｄ＝二重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｔ＝三
重線、ｍ＝多重線、Ｐｙ＝ピリジン、Ｔｚ＝チアゾール
）因子Ｄ１（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．８
８、ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．５
７、ｓ、８．５０、ｓ、８．２５、ｓ、８．２１、ｓお
よび７．３５、ｓ、（５チアゾールのＣＨ）；８．４０
、ｍ、（グリシンのＮＨ）；８．２８−８．２１、ｍ、
（ピリジンのＣＨ）；７．３２−７．２０、ｍ、（芳香
族のＣＨおよび第一アミドのＮＨ）；７．００、ｓ、６
．６４、ｓ、６．５３、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；５
．９５、ｄ、（ＯＨ）；５．２９−５．１５、ｍ、（α
ＣＨ）；５．０４、ｍ、（フェニルセリンのβＣＨ）；
４．８１、ｍおよび４．５６、ｍ、（オキサゾリンのＣ
Ｈ２）；４．３０−３．８０、ｍ、（グリシンのＣＨ２
およびプロリンアミドのＣＨ）；２．７２、ｍ、および
１．４３、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．６０、
ｓ、（ＣＨ３）；２．２１−１．９１、（ｍ）、（イソ
プロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ）；０．９
０（ｄ）および０．８６（ｄ）、（バリンのＣＨ３） 因子Ｄ２（５００ＭＨｚにおいて記録した）：９．００
、ｄ、（ＮＨ）；８．６９、ｂｒ　　ｓ（２ＮＨ）；８
．５９、ｓ、８．５３、ｓ、８．２９、ｓおよび７．３
５、ｓ、（チアゾールのＣＨ）；８．３８、ｍ、（グリ
シンのＮＨ）；８．４０および８．２６（ｍ）、（Ｐｙ
のＣＨ）；７．３７−７．１８、ｍ、（芳香族のＣＨ、
第一アミドのＮＨ）；６．９７、ｓ、（第一アミドのＮ
Ｈ）；６．０３、ｄおよびｔ、（２ＯＨ）；５．２８−
５．１６、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）
；４．９７、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．７９および
４．５５、ｍ、（オキサゾリンのＣＨ２）；３．９７−
３．７６、ｍ、（グリシンのＣＨ２およびプロリンアミ
ドのＣＨ）；２．７１、ｍおよび１．２８、ｍ、（Ｎ−
メチルアスパラギンのＣＨ２）；２．１８−１．８９、
ｍ、（イソプロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ
２）；０．８８、ｄおよび０．８４、ｄ、（バリンのＣ
Ｈ３） 因子Ｅ（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
ｄ、（ＮＨ）；８．７３、ｄ、（ＮＨ）；８．６０、ｓ
、（ＴｚのＣＨ）；８．５７、ｄ、（ＮＨ）；８．５３
、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；８．４２、ｍ、（ＰｙのＣＨ）
；８．３１、ｍ、（ＮＨ）；８．２８、ｍ、（ＰｙのＣ
Ｈ）；８．２４、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；７．３３、ｓ、
（ＴｚのＣＨ）；７．３１−７．２０、ｍ、（芳香族の
ＣＨ、第一アミドのＮＨ）；６．９８、ｓ、６．９１、
ｓ、６．６２、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；６．０４、
ｄ、（ＯＨ）；５．９５、ｔ、（ＯＨ）；５．２８−５
．１４、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）；
４．９９、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．８１、ｄｄお
よび４．５７、ｄｄ、（オキサゾリンのＣＨ２）；４．
２６（ｍ）および３．７９（ｍ）、（グリシンのＣＨ２
）；４．２５、ｍ、３．９８、ｍ、３．８２、ｍ、（プ
ロリンアミドのＣＨ）；２．７７、ｍ、および１．２５
、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．２０、ｍ、およ
び１．８９、ｍ、（バリンのβＣＨおよびプロリンアミ
ドのＣＨ２）；０．９０、ｄ、０．８４、ｄ、（バリン
のＣＨ３） 因子Ｔ（２５０ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．６６、
ｓ、８．６５、ｓ、８．６０、８．３０、ｓおよび７．
３８、ｓ、（４チアゾールおよび１オキサゾールのＣＨ
）；７．３５−７．２４、ｍ、（芳香族のＣＨおよび第
一アミドのＮＨ）；６．６８（第一アミドのＮＨ）；５
．９６、ｄ、（ＯＨ）；５．３４−５．１８、ｍ、（α
ＣＨ）；５．０５、ｍ、（βＣＨ）；５．０３、ｓ、［
ＣＨ２（ＯＣＨ３）］；４．３２、ｍおよび３．８２、
ｍ、（グリシンのＣＨ２）；４．４８、ｍ、４．０４、
ｍおよび３．６３、ｍ、（プロリンアミドのＣＨ）；３
．４０、ｓ、（ＯＣＨ３）；２．７３、ｍおよび１．４
１、ｍ、（Ｎ−メチルアスパラギンのＣＨ）；２．６０
、ｓ、（ＣＨ３）；２．４９、ｄ、（Ｎ−メチルアスパ
ラギンのＣＨ３）；２．２７−１．８８、ｍ、（イソプ
ロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ２）；０．８
９、ｄ、（バリンのＣＨ３）図１および図２は、それぞ
れ、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅおよび因子Ｔの１Ｈ−
ＮＭＲスペクトルを示す。

【００６３】Ｄ）次の逆相ＨＰＬＣ系における保持時間
（Ｒｔ）（抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１
、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）： カラム：ベイカーボンド（ＢａｋｅｒｂｏｎｄＲ）Ｃ８
（５μｍ）４．６×２５０ｍｍ［Ｂａｋｅｒｂｏｎｄは
Ｊ．Ｔ．ベイカー・リサーチ・プロダクト（Ｂａｋｅｒ
　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　　Ｐｒｏｄｕｃｔ）、米国ニュ
ージャージイ州０８８６５フィリスバーグ、により供給
される逆相オクチルシリルシリカゲルのＨＰＬＣカラム
の商品名である］ 流速：１．８ｍｌ／分 相Ａ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４４０：４０：２０ 相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４１０：１０：８０ 溶離：２０分における相Ａの２０％〜３０％の直線の勾
配 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 結果は次の通りである：

【００６４】

【表１３】 Ｅ）質量ＦＡＢ−ＭＳピーク［クレイトス（Ｋｒａｔｏ
ｓ）ＭＳ−５０二重収束質量分析計で得た、６ｋＶの電
圧および１ｍＡの電流において８ｋＶの加速電圧および
Ｘｅガス（ソースイオンゲージ上に示される２×１０−
５トルの圧力）のサドルフィールド（ｓａｄｄｌｅ　　
ｆｉｅｌｄ）の原子ガンを使用する、試料は０．１モル
の酢酸を含有するチオグリコールのマトリックスと混合
する］は、次の通りである。値はプロトン化した分子イ
オンの最低のアイソトープにほとんどが相当するようで
ある。

【００６５】

【表１４】 上に報告した物理化学的データに基づいて、次の構造式
を抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴに
試験的に割り当てることができる：因子Ｄ１

【００６６
】

【化１】 因子Ｄ２

【００６７】

【化２】 因子Ｅ

【００６８】

【化３】 因子Ｔ

【００６９】

【化４】 本発明の化合物の抗微生物活性は、１系列の標準の生体
外の試験により実証することができる。

【００７０】最小阻止濃度（ＭＩＣ）をマイクロブロス
の希釈法により決定した。接種は１０４〜１０５ＣＦＵ
／ｍｌであった。すべての微生物は３７℃において培養
した。ＭＩＣは１８〜２４時間において読んだが、ただ
し淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈａｅａｅ）
、バクテリオイデス・フラギリス（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉ
ｓ）、およびプロピオンバクテリウム・アクネ（Ｐ．ａ
ｃｎｅ）は４８時間であった。淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉ
ａ　　ｇｏｎｏｒｒｈａｅａｅ）は５％のＣＯ２の雰囲
気中でインキュベーションした；嫌気性菌は嫌気性ガス
混合物中でインキュベーションした。培地は次の通りで
あった：連鎖球菌属、エンテココッカス・フェカリス（
Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　　ｆａｅｃａｌｉｓ）、大
腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　　ｃｏｌｉ）、プロテ
ウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ　　ｖｕｌｇａｒｉ
ｓ）、および緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　　ａｅ
ｒｕｇｉｎｏｓａ）についてオキソイド（Ｏｘｏｉｄ）
のアイソ−センチテスト（Ｉｓｏ−Ｓｅｎｓｉｔｅｓｔ
）のブロス；淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ　　ｇｏｎｏｒ
ｒｈａｅａｅ）について１％のＢＢＬアイソビタレック
ス（ＩｓｏＶｉｔａｌｅｘ）を補充したディフコ（Ｄｉ
ｆｃｏ）のＧＣベースのブロス；プロピオンバクテリウ
ム・アクネ（Ｐ．ａｃｎｅ）およびバクテリオイデス・
フラギリス（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）（１０５ＣＦＵ／
ｍｌ）についてディフコ−ウィルキンス−チャグレン（
Ｄｉｆｃｏ−Ｗｉｌｋｉｎｓ−Ｃｈａｌｇｒｅｎ）ブロ
ス。

【００７１】

【表１５】

【００７２】

【表１６】 それらの性質にかんがみて、本発明の化合物はヒトまた
は動物についての薬物の調製において活性成分として使
用することができる。

【００７３】とくに、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、
Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴは主として
グラム陽性バクテリアおよびグラム陽性ならびにグラム
陰性の嫌気性菌に対して活性である。それは、また、メ
チシリン、アミノグルコシドまたはグリコペプチドの抗
生物質と交差抵抗性をもたない、連鎖球菌の心内膜炎に
おいて非常に活性であるように思われる。

【００７４】こうして、本発明の抗生物質の主な治療学
的適応は、それに対して感受性の微生物の存在に関する
感染の処置においてである。

【００７５】用語「処置」は、また、予防、治療および
治癒を包含することを意図する。

【００７６】この処置を受ける患者は、霊長類を包含す
る、必要な動物、例えば、ヒト、および他の動物、例え
ば、ウマ、ウシ、ブタおよびヒツジ、および一般に家禽
およびペットである。

【００７７】本発明の化合物は、そのままであるいは製
剤学的に許容されうる担体と混合して投与することがで
きそして、また、他の抗微生物剤、例えば、ペニシリン
、セファロスポリン、アミノグルコシドおよびグリコペ
プチドと一緒に投与することができる。こうして、結合
の治療は、最初に投与したものの治療学的効果が、引き
続いて投与したとき、完全に消滅しないような方法にお
いて、活性化合物の順次の、同時のおよび分離した投与
を包含する。

【００７８】好ましい製剤学的配合物は、完全なまたは
損傷を受けた皮膚または粘膜への局所的適用に適当な配
合物により代表される。このような配合物の例は、粉末
、軟膏、クリームおよびローションである。これらの配
合物における賦形剤は、次の通りである：通常の製剤学
的に許容されうる賦形剤、例えば、油を含む軟膏基剤（
例えば、セチルエステルろう、オレイン酸、オリーブ油
、パラフィン、鯨ろう、スターチグリセライト）；吸収
性軟膏基剤（例えば、無水ラノリン、親水性ペトロラタ
ム）；乳化軟膏基剤（例えば、セチルアルコール、グリ
セリルモノステアレート、ラノリン、ステアリン酸）；
水溶性軟膏基剤（例えば、グリコールエーテルおよびそ
れらの誘導体、例えば、ポリエチレングリコール、ポリ
（オキシ−１，２−エタンジイル）−アルファ−ヒドロ
−オメガ−ヒドロキシ−オクタデカノエート、ポリソル
ベート、およびポリエチレングリコールモノ−ステアレ
ート。

【００７９】これらの配合物は、他の既知の賦形剤、例
えば、防腐剤を含有することができ、そしてこの分野に
おいて知られているように調製され、そして参考文献、
例えば、次の参考文献に報告されている：レミントンの
製剤の科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　　Ｐｈａｒｍａ
ｃｅｕｔｉｃａｌ　　Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第７版、１９
８５、マック・パブリシング・カンパニー（Ｍａｃｋ　
　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　　Ｃｏ．）。

【００８０】本発明の化合物は、また、それ自体既知の
方法に従う非経口的投与に適当な配合物に配合すること
ができ、そして参考文献、例えば、前述の参考文献に報
告されている。

【００８１】例えば、本発明の化合物は、安定剤、例え
ば、ポリプロピレングリコールまたはジメチルアセトア
ミドおよび表面活性剤、例えば、ポリオキシエチレンソ
ルビタンモノ−オレエートまたはポリエトキシル化ヒマ
シ油を使用して注射用の無菌の水中で配合する。

【００８２】非経口的投与のための典型的な配合物の例
は、最終調製物について１０ｍｇの抗生物質ＧＥ２２７
０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅおよび
Ｔ、１０〜２０％の表面活性剤、例えば、ポリオキシエ
チレンソルビタン脂肪酸、ポリオキシエチレンヒマシ油
誘導体またはポリオキシエチレン水素化ヒマシ油誘導体
および０〜２０％、好ましくは１０〜２０％の可溶化剤
、例えば、ポリエチレングリコール、ジメチルアセタミ
ド、ジメチルホルムアミド、ｔ−ブチル−Ｎ−ヒドロキ
シカルバメート、１，２−、１，３−または１，４−ブ
タンジオール、エチルオレエート、テトラヒドロフルフ
リル−ポリエチレン−グリコール２００、ジメチルイソ
ソウバイド、ベンジルアルコールなどを含有する。好ま
しい安定剤はプロピレングリコールである。

【００８３】ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エス
テルは、商業的に入手可能である、そしてそれらのある
ものは商品名「ツイーン」で販売されている。それらは
、また、「ポリソルベート」の非登録名で知られている
。それらの例は、ポリソルベート２０、２１、４０、６
０、６１、６５、８０、８１および８５である。ポリソ
ルベート８０（ソルビタン−モノ−９−オクタデカノエ
ート、ポリ（オキシ−−１，２−エタンジイル）誘導体
）は本発明の配合物における使用に好ましい。ポリオキ
シエチレンヒマシ油およびポリオキシエチレン水素化ヒ
マシ油は、また、商業的に入手可能である。それらのあ
るものは、「クレモフォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）」
で販売されている。このような化合物の例は、クレモフ
ォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）ＥＬ（ポリエトキシル化
ヒマシ油）、クレモフォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）Ｒ
Ｈ４０（ポリエトキシル化水素化ヒマシ油）、クレモフ
ォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）ＲＨ６０（ＰＥＧ６０水
素化ヒマシ油）またはエマクフォール（Ｅｍｕｌｐｈｏ
ｒ）ＥＬー７１９（ポリオキシエチル化水素化ヒマシ油
である。

【００８４】好ましくは、注射のための配合物は７±０
．５の範囲のｐＨを有する。必要に応じて、適当な緩衝
化剤で調製物のｐＨを調節することは好ましいことがあ
る。便利には、トリス（すなわち、トリヒドロキシメチ
ルアミノメタン）またはホスフェートを緩衝化剤として
使用することができる。

【００８５】非経口的投与のために好ましい配合物は、
次の通りである：クレモフォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ
Ｒ）ＥＬ（ポリオキシル３５ヒマシ油ＵＳＰ／ＮＦ）２
０％、ポリエチレングリコール５〜２０％、好ましくは
１０〜２０％である。

【００８６】一般に、これらの配合物は、活性成分を有
機溶媒中に溶解し、次いで表面活性剤成分を添加し、そ
して最後に注射用の無菌の水で所望の体積に希釈するこ
とによって調製することができる。

【００８７】他の賦形剤、例えば、防腐剤または安定剤
をこの分野において知られているように添加することが
できる。

【００８８】非経口的配合物の例は次の通りである：　
　抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　１０ｍｇ　　ＰＥＧ４０ヒマシ
油（ＣｒｅｍｏｐｈｏｒＥＬ）　　　　　　０．２ｍｌ
　　ポリエチレングリコール　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　０．２ｍｌ　　メチ
ルパラヒドロキシベンゾエート　　　　　　　　　　　
　　　　　　　０．５ｍｇ　　プロピルパラヒドロキシ
ベンゾエート　　　　　　　　　　　　　　　　０．０
５ｍｇ　　注射用の水、十分量　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１ｍｌ上
の配合物において、１０ｍｇの抗生物質ＧＥ２２７０因
子Ｔ代わりに、１０ｍｇの抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ
１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、またはＥを使用す
ることができる。

【００８９】あるいは、活性成分は使用前の再構成のた
めの凍結乾燥した粉末として調製することができる。

【００９０】凍結乾燥した物質は活性成分および界面活
性剤、例えば、ポリエチレングリコール６０水素化ヒマ
シ油を含有する混合物から出発する場合、それは便利に
は水性媒質単独で、有機溶媒の添加なしに、再構成する
ことができる。

【００９１】必要に応じて、普通に凍結乾燥助剤を添加
して、粉末の形態の凍結乾燥した物質を得ることができ
る。

【００９２】好ましくは、すべてのこれらの配合物は、
本発明の抗生物質に対して感受性の微生物を包含する感
染の処置において静脈内に投与するために使用する。

【００９３】胃腸において嫌気性菌に起因する偽膜性全
腸炎または他の病気の処置において、本発明の化合物の
有効量を適当な製剤学的形態、例えば、カプセル剤、錠
剤または水性懸濁液の形態で投与することができる。

【００９４】活性成分の投与量は、多数の因子、例えば
、患者のタイプ、年令および状態、特定の活性成分およ
び投与のために選択した配合物、投与のスケジュールな
どに依存する。

【００９５】一般に、有効な抗微生物の投与量は単一の
単位投与の形態当たりに使用する。反復した適用／投与
、例えば、２〜６回／日は一般に好ましい。有効な投与
量は、一般に、０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲
である。

【００９６】好ましい局所的調製物は、１〜１０％の本
発明の化合物を含有する軟膏である。

【００９７】いずれにしても、医師は所定の場合におけ
る所定の患者に最適な投与量を決定することができるで
あろう。

【００９８】ヒトおよび獣医学において薬物として使用
するほかに、本発明の化合物は、また、動物の成長促進
剤として使用することができる。

【００９９】この目的に、本発明の化合物は適当な飼料
で経口的投与される。正確な使用する濃度は、正常の量
の飼料を消費するとき、成長促進的に有効な量で活性剤
を提供するために要求される濃度である。

【０１００】本発明の活性化合物の動物の飼料への添加
は、好ましくは、活性化合物を有効量で含有する適当な
飼料プレミックスを調製し、そしてこのプレミックスを
完全な規定食に混入することによって達成される。

【０１０１】あるいは、活性成分を含有する中間の濃縮
物または飼料補助剤を飼料中に配合することができる。 このような飼料を予備混合し、そして完全な規定食を調
製し、そして投与する方法は、例えば、次の参考文献に
記載されている：Ｅ．Ｗ．クランプトン（Ｃｒａｍｐｔ
ｏｎ）ら、「アプライド・アニマル・ニュートリション
（Ａｐｌｌｅｉｄ　　Ａｎｉｍａｌ　　Ｎｕｔｒｉｔｉ
ｏｎ）」、Ｗ．Ｈ．フリードマン・アンド・カンパニー
（Ｆｒｅｅｄｍａｎ　　ａｎｄ　　Ｃｏ．）、米国サン
フランシスコ、１９８９またはＤ．Ｃ．チャーチ（Ｃｈ
ｕｒｃｈ）、「ライブストック・フィーズ・アンド・フ
ィーデイング（Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ　　Ｆｅｅｄｓａｎ
ｄ　　Ｆｅｅｄｉｎｇ）」、オー・アンド・ビー・ブッ
クス（Ｏ　　ａｎｄＢ　　ｂｏｏｋｓ）、米国オレゴン
州、１９７７。

【０１０２】次の実施例によって、本発明をさらに説明
する。

【０１０３】

【実施例】実施例１ 抗生物質ＧＥ２２７０の産生 プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　
　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の培養物を、オート
ミールの傾斜培地上で２８〜３０℃において２週間成長
させ、次いで次の組成の１００ｍｌの種培地を含有する
５００ｍｌのフラスコに接種するために使用する：でん
ぷん　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　２０ｇ／ｌポリペプトン　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５ｇ／ｌ
酵母エキス　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　３ｇ／ｌビーフエキス　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２ｇ
／ｌダイズミール　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　２ｇ／ｌ炭酸カルシウム　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１ｇ
／ｌ蒸留水、十分量　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　１００ｍｌ（ｐＨを滅菌前に７．０に
調節する） フラスコを回転震盪器（２００ｒｐｍ）で２８〜３０℃
において９２時間インキュベーションする。次いで、得
られた培養物を使用して、同一培地を含有する４ｌのジ
ャー発酵槽を植え継ぎし、そして培養物を２８〜３０℃
において４８時間撹拌しながら（約９００ｒｐｍ）およ
び通気しながら（約標準１リットルの空気／分）インキ
ュベーションする。

【０１０４】得られたブロスを、５０ｌの次の産生培地
を含有する発酵槽に移す： そして、２８〜３０℃において約７２時間インキュベー
ションする。

【０１０５】抗生物質の産生を、ペイパーディスクのア
ッセイにより最小デイビス培地上で成長した枯草菌（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ　　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ６６３
３を使用して監視する。阻害ゾーンを３５℃において一
夜インキュベーション後評価する。

【０１０６】実施例２ ａ）粗製抗生物質ＧＥ２２７０の回収 前述の得られた発酵塊（５０ｌ）を収穫し、そして濾過
助剤（Ｃｌａｒｃｅｌｌ）上で濾過する。

【０１０７】菌糸体を２０ｌのメタノールで２回抽出し
、そしてプールした抽出物を減圧下に濃縮して水性残留
物が得られ、これを酢酸エチルで２回抽出する。粗製抗
生物質ＧＥ２２７０（６．０６ｇ）を濃縮した有機相へ
の石油エーテルの添加により沈澱させる。

【０１０８】ｂ）抗生物質ＧＥ２２７０因子の粗製混合
物の分離 前述の手順に従い菌糸体から得られた粗製物を、テトラ
ヒドロフラン中に溶解し、そしてシリカゲル（２３０〜
４００メッシュ）の存在下に減圧下に濃縮する。得られ
た固体の残留物を集め、そして塩化メチレン（ＣＨ２Ｃ
ｌ２）中で調製した３００ｇのシリカゲル（２３０〜４
００メッシュ）を含有するクロマトグラフィーのカラム
に適用する。カラムをまず塩化メチレン（２ｌ）で展開
し、そして次の比の塩化メチレンおよびメタノールの１
．５ｌの混合物で順次に展開する：９８／２；９６／４
；９２／８；９０／１０および８８／１２（ｖ／ｖ）。

【０１０９】分画を集め、ＴＬＣ、ＨＰＬＣによるか、
あるいは枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）
に対する微生物学的に分析し、そしてそれらの抗生物質
の含量に従いプールする。

【０１１０】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ
１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２およびＥに富み、そしてまたある
量の抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａを含有するプールした
分画を減圧下に濃縮して油状残留物が得られ、これから
前述の抗生物質因子の混合物（１．１５ｇ）を石油エー
テルで沈澱させる。

【０１１１】ｃ）抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２
、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２およびＥの分離および単離抗
生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１
、Ｄ２およびＥを分離し、そして調製用ＨＰＬＣにより
２５０×２０ｍｍのヌクレオシル（Ｎｕｃｒｅｏｓｉｌ
Ｒ）Ｃ１８（オクタデシルシラン基で官能化したシリカ
ゲル）（５μｍ）を使用して上で得られた粗製混合物か
ら精製し、そして相Ａ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラ
ン：４０ミリモルのＮａＢＨ４（４０：４０：２０）；
相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＮａＢＨ４（１０：１０：８０）の混合物で溶離した
。抗生物質の混合物（６ｍｇ）を３ｍｌの相Ｂおよび１
ｍｌの相Ａ中に可溶化し、そしてＨＰＬＣ中に注入し、
これを１４ｍｌ／分の流速で相Ａおよび相Ｂの２６：７
４混合物で溶離した。溶離した分画を２５４ｎｍの紫外
線の吸収プロフィルに従い集めた。均質な含量を有する
引き続くクロマトグラフィーの溶離液の分画をプールし
、そして減圧下に濃縮してＣＨ３ＣＮを排除した。残留
する溶液は、ペイパーディスクのアッセイにより黄色ブ
ドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　　ａｕｒｅ
ｕｓ）Ｔｏｕｒ　　Ｌ１６５に対する抗生活性を示した
。これらの溶液を少なくとも３回凍結乾燥して、ＨＰＬ
Ｃ相からＨＣＯＯＮＨ４緩衝液残留物を完全に除去した
。

【０１１２】収率は次の通りであった：抗生物質ＧＥ２
２７０Ｅ、１１ｍｇ；抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、
１２ｍｇ；抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ２、１０ｍｇ；
抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ１、２ｍｇ；抗生物質ＧＥ
２２７０因子Ｃ２、３ｍｇ；抗生物質ＧＥ２２７０因子
Ｂ１、２ｍｇ；抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ２、２ｍｇ
。

【０１１３】実施例３ 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔの産生 ａ）菌株の発酵 寒天傾斜培地上で成長させたプラノビスポラ・ロセア（
Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５
３７７３の培養物を、１００ｍｌの種培地（澱粉２％、
ポリペプトン０．５％、酵母エキス０．３％、ビーフエ
キス０．２％、ダイズミール０．２％、炭酸カルシウム
０．１％、滅菌前にｐＨ７．０とした）を含有する２つ
の５００ｍｌのエルレンマイヤーフラスコ中に接種た。 種培地のこれらの５００ｍｌのエルレンマイヤーフラス
コを、２８℃において９６時間回転震盪器（２００ｒｐ
ｍ）でインキュベーションした培養物で接種する（５％
の接種物）。

【０１１４】培養物を２８℃において回転震盪器（２０
０ｒｐｍ）で７２時間インキュベーションし、次いで６
ｌの種培地を含有する１０ｌのジャー発酵槽中に植え継
ぎした。１ｌ／Ｖ／分の空気流れを使用しおよび９００
ｒｐｍで撹拌しながら２８℃において７２時間インキュ
ベーションした後、培養物を２００ｍｌの産生培地（澱
粉２％、ペプトン０．２５％、水素化カゼイン０．２５
％、酵母エキス０．３％、ビーフエキス０．２％、ダイ
ズミール０．２％、炭酸カルシウム０．１％、滅菌前に
ｐＨ７．４とした）を含有するジャー発酵槽中に植え継
ぎした。

【０１１５】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔの分離１２６
時間の発酵後、ブロスを収穫し、そして菌糸体をヒフロ
（Ｈｙｆｌｏ）濾過助剤により集めた。菌糸体のケーク
を６０および２０ｌのアセトンで順次に抽出し、そして
プールした抽出物を減圧下に濃縮した。粗製の抗生物質
の複合体を水の残留物から液体−固体セパレーター中で
遠心することによって分離した。湿潤した物質を２−プ
ロパノール中に可溶化し、そしてこの溶液を減圧下に濃
縮して水を除去した。粗製の抗生物質の複合体（５０ｇ
）を濃縮した残留物から沈澱させた。この粗製の複合体
は主要な量の抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａを抗生物質Ｇ
Ｅ２２７０因子Ｔおよび前述の他の少量の因子とともに
含有する。

【０１１６】前記の粗製複合体の他の成分からの因子Ｔ
の分離のために、６回の反復発酵からの調製物をプール
し、そして１２ｌの塩化メチレン：メタノール（９３：
７）中に可溶化した。不溶性物質を濾過により除去し、
そして抗生物質の複合体を含有する溶液を塩化メチレン
：メタノール（９３：７）中で平衡化した１３ｋｇ（２
３０〜４００メッシュ）のシリカゲルのカラムに適用し
た。抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔをカラムから塩化メチ
レン：メタノール（９３：７）で溶離することによって
溶離した。それを含有する分画（ＨＰＬＣ分析）をプー
ルし、減圧下に濃縮し、そして乾燥すると、８ｇの抗生
物質ＧＥ２２７０因子Ｔが少量の不純物と一緒に得られ
た。

【０１１７】１５ｍｇのこの粗製物質を０．２ｍｌのジ
メチルホルムアミド：ＣＨ３ＣＮ：水（５０：２５：２
５）中に可溶化し、そしてリクロソーブ（Ｌｉｃｈｒｏ
ｓｏｒｂＲ）Ｃ１８（オキタデシルシラン化シリカゲル
）（７μｍ）を詰めたハイバー（Ｈｉｂｅｒ）［Ｅ．Ｍ
ｅｒｃｋ：ドイツ国ダーマシュタット］２５０×１０カ
ラム中に注入し、そして４．５ｍｌ／分の流速において
ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ（６０：４０）で溶離した。抗生物
質ＧＥ２２７０因子Ｔを含有する分画（紫外線の検出、
２５４ｎｍ）を次いで集めた。

【０１１８】１５の引き続くクロマトグラフィーの溶離
液からのこのタイプの分画をプールし、減圧下に濃縮し
、そして乾燥すると、１５０ｍｇの精製された抗生物質
ＧＥ２２７０因子Ｔが得られた。

【０１１９】分析用ＨＰＬＣ化合物の調製ａ）抗生物質
ＧＥ２２７０の産生 プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　
　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の培養物を実施例１
に記載するように成長させた。

【０１２０】ｂ）抗生物質ＧＥ２２７０の回収上で得ら
れた発酵塊（５０ｌ）を収穫し、そして濾過助剤（Ｃｌ
ａｒｃｅｌｌ）の存在下に濾過する。

【０１２１】抗生物質ＧＥ２２７０は、ある量のそれを
また濾液から回収することができる場合でさえ、主とし
て菌糸体中に見いだされる。

【０１２２】ａ）濾液を約ｐＨ７．０に調節し、そして
酢酸エチル（５０ｌ）で抽出する。有機相を遠心により
分離し、そして小さい請求の範囲に減圧下に濃縮する。 次いで、得られた残留物を石油エーテルで処理して粗製
の抗生物質ＧＥ２２７０を沈澱させ、これを濾過により
集め、そして乾燥する。４１５ｍｇの粗製抗生物質ＧＥ
２２７０複合体が得られる。

【０１２３】ｂ）菌糸体を２０ｌのメタノールで抽出し
、そしてプールした抽出物を減圧下に濃縮すると、水性
残留物が得られ、これを酢酸エチルで抽出する。粗製抗
生物質ＧＥ２２７０（６．０６ｇ）を濃縮有機相から石
油エーテルの添加により沈澱させる。

【０１２４】ｃ）抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａの精製前
述の手順に従い菌糸体から得られた粗製物質（３ｇ）を
テトラヒドロフラン中に溶解し、そしてシリカゲル（２
３０〜４００メッシュ）の存在下に減圧下に濃縮する。 得られた固体の残留物を集め、そして塩化メチレン中で
調製した３００ｇのシリカゲル（２３０〜４００メッシ
ュ）を含有するクロマトグラフィーのカラムに適用する
。カラムをまず塩化メチレン（２ｌ）で展開し、次いで
順次に次の比の塩化メチレンおよびメタノールの１．５
ｌの混合物で溶離する：９８／２；９６／４；９４／６
９２／８；９０／１０および８８／１２（ｖ／ｖ）。

【０１２５】分画を集め、ＴＬＣ、ＨＰＬＣによるか、
あるいは枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）
に対して微生物学的に分析し、そしてそれらの抗生物質
の含量に従いプールする。

【０１２６】純粋な抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ（ＨＰ
ＬＣの保持時間、１４．９分、参照、物理化学的データ
、点Ｅ、下）を含有するプールした分画を減圧下に濃縮
すると、油状残留物が得られ、これをテトラヒドロフラ
ンで可溶化する。この溶液から、抗生物質ＧＥ２２７０
因子Ａ（６００ｍｇ）を石油エーテルの添加により沈澱
させる。

【０１２７】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａの他の収穫物
を、前述のクロマトグラフィー合成により分離されるが
、それを不純物の形態でを含有する他の分画から得られ
る。また、これらの分画をプールし、濃縮し、そして処
理すると、前述の固体が得られる。この粗製の抗生物質
ＧＥ２２７０因子Ａの調製物を、次の手順に従いＨＰＬ
Ｃにより精製する：この沈澱の一部分（６ｍｇ）をアセ
トニトリル：水、１：１（ｖ／ｖ）中に溶解し、そして
リクロソーブ（ＬｉｃｈｒｏｓｏｒｂＲ）ＲＰ８（シラ
ン化シリカゲル、７マイクロメートル）［Ｅ．Ｍｅｒｃ
ｋ：ドイツ国ダーマシュタット］２５０×１０ｍｍのカ
ラムのＨＰＬＣクロマトグラフィー系中に注入する。

【０１２８】溶離は溶液ＡおよびＢの混合物のＢ中のＡ
の５０％〜８５％の直線の勾配で２０分で、約４ｍｌ／
分の流速で実施する。溶液Ａはアセトニトリルおよび１
８ミリモルのリン酸ナトリウム緩衝液の混合物７０／３
０（ｖ／ｖ）、ｐＨ６、であるが、溶液Ｂはアセトニト
リルおよび１８ミリモルのリン酸ナトリウム緩衝液の混
合物１０／９０（ｖ／ｖ）、ｐＨ６、である。

【０１２９】カラムをパーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉ
ｎ　　Ｅｌｍｅｒ）ＬＣ８５紫外線検出器に３３０栄養
培地において接続する。均質な含量を有する１１の引き
続くクロマトグラフィーの溶離液の分画をプールし、そ
して減圧下に濃縮してアセトニトリルを除去し、こうし
て抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａを含有する分離された残
留溶液が得られる。これらの溶液を等しい体積の酢酸エ
チルで２回抽出し、そして抗生物質の産生物を濃縮した
有機相から石油エーテルの添加により沈澱させることに
よって得る。濾過により回収しそして乾燥すると、２７
ｍｇの抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａが得られる。

【０１３０】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａの物理化学的
特性： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル：

【０１
３１】

【表１７】 Ｂ）次の吸収最大（ｃｍ−１）を示すヌジョール法にお
ける赤外吸収スペクトル：

【０１３２】

【表１８】 このスペクトルの主要な機能的赤外吸収バンドは、次の
ように割り当てられる：

【０１３３】

【表１９】 Ｃ）内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）を使用す
るＤＭＳＯ−ｄ６（ヘキサジューテロジメチルスルホキ
シド）中の次のシグナル（ｐｐｍ）の次の群を示す１Ｈ
−ＮＭＲスペクトル；各シグナルについてのプロトンの
数はカッコ内に報告する：

【０１３４】

【表２０】 Ｄ）内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）を使用す
るＤＭＳＯ−ｄ６中の１２５ＭＨｚにおける次のシグナ
ル（ｐｐｍ）の次の群を示す１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル
、Ｑは第四級炭素原子またはＣ＝Ｏ基を意味する：

【０
１３５】

【表２１】 Ｅ）次の条件下の逆相ＨＰＬＣ系により分析するとき、
保持時間（Ｒｔ）は１４．９分である：カラム：ウルト
ラスフェアー（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ）ＯＤＳ（逆相
シラン化シリカゲル；５マイクロメートル）アルテック
ス（Ａｌｔｅｘ）［ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）］４
．６ｍｍ（内径）×２５０ｍｍ 前カラム：ブラウンリー・ラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ　
　Ｌａｂｓ）ＲＰ１８（オクタデシルシランシリカゲル
；５マイクロメートル） 溶離液Ａ：アセトニトリル：１８ミリモルのリン酸ナト
リウム７０：３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ７．０に調節した溶
離液Ｂ：アセトニトリル：１８ミリモルのリン酸ナトリ
ウム１０：９０（ｖ／ｖ）、ｐＨ７．０に調節した溶離
のモード：４５％〜７０％の溶離剤Ｂ中の溶離剤Ａの直
線の勾配、２０分 流速：１．８ｍｌ／分 紫外線検出器：２５４ｎｍ 内部標準：クロランフェニコール（Ｒｔ＝３．７分）保
持時間を本発明の化合物の特性決定について上の節Ｄ）
において記載した条件下にに測定するとき、その値は１
６．６分である。

【０１３６】Ｆ）試料を前以て約１４０℃に不活性雰囲
気下に乾燥した後、元素分析は次の組成を示す：炭素、
水素、窒素、硫黄； Ｇ）Ｒｆ値は次のクロマトグラフィー系において０．３
７である：ジクロロメタン：メタノール、９：１（ｖ／
ｖ）、シリカゲルの板（シリカゲル６０Ｆ２５４、Ｍｅ
ｒｃｋ　　Ｃｏ．）可視化：紫外線、２５４ｎｍ、黄色
スポット、ヨウ素蒸気、あるいは最小デイビス培地上で
枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ
６６３３を使用するバイオオートグラフィー；内部標準
：クロランフェニコール（Ｒｆ０．５６） Ｈ）ＦＡＢ−ＭＳ分析はｍ／ｚ１２９０．３±０．１ダ
ルトンにおいてプロトン化分子イオンの最低の分子量の
アイソトープを示す。スペクトルにおいて８００ｍ／ｚ
分子量単位より上のすべてのピーク（アイソトープのピ
ークを数えない）は、クレイトス（Ｋｒａｔｏｓ）ＭＳ
−５０二重収束質量分析計を次の実験条件下に使用して
分析すると、分子の２０％より低かった：６ｋＶの電圧
におけるＸｅの急速原子の衝突；グリセロールのマトリ
ックス；陽性のイオン化モードＩ）塩酸の加水分解物の
アミノ酸の分析は、次の自然のアミノ酸の存在を示す：
グリシン、（Ｌ）プロリンおよび（Ｌ）セリン、次の実
験条件下に：試料を１０５℃において１％のフェノール
を含有する６Ｎ　　ＨＣｌの存在下に２０時間加水分解
し、次いで次のようにして２工程で誘導化する：ａ）無
水プロパノール中の２モルのＨＣｌでカルボン酸官能基
のｎ−プロピルエステルの形成（９０℃、１時間）、お
よび引き続く窒素下の乾燥；ｂ）遊離のアミノ基をアミ
ドに、ペンタフルオロプロピオン酸無水物／無水ジクロ
ロメタン、１／９（ｖ／ｖ）で室温において１時間転化
し、次いで窒素下に乾燥する；そのようにして得られた
誘導化された残留物をジクロロメタン中に溶解し、そし
てＧＣ−ＮＳにより次の条件下にＨＰ５９８５Ｂ系を使
用して分析する：カラム：キラルｎ−プロピオニル−Ｌ
−バリンｔ−ブチルアミドポリシロキサン被覆溶融シリ
カの毛管カラム（２５ｃｍ×０．２ｍｍの内径；Ｃ．Ｇ
．Ｃ．ＡＮＡＬＹＴＩＣ）；温度のプログラム：８０℃
４分、次いで４℃／分；Ｌ）イオン化の研究はメチルセ
ロソルブ／水中の０．１Ｎ　　ＨＣｌおよび０．１Ｎ　
　ＮａＯＨを使用する滴定によりイオン化性官能基を示
さない；弱塩基性官能基は非水性媒質（酢酸）中の０．
１ＨＣｌＯ４を使用する滴定により明らかになる；Ｍ）
比旋光度［α］２０Ｄは±１４０．８である；無水エタ
ノール中で約５ｇ／ｌの濃度で測定した。

【０１３７】本発明の主な特徴および態様は、次の通り
である。

【０１３８】１、次の特徴を有する、抗生物質ＧＥ２２
７０因子Ｂ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ２、抗生物
質ＧＥ２２７０因子Ｃ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ
２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、抗生物質ＧＥ２２
７０因子Ｄ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅ、抗生物質
ＧＥ２２７０因子Ｔから選択される化合物：Ａ）次の吸
収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ
１、Ｄ２およびＥ：

【０１３９】

【表２２】 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔ：

【０１４０】

【表２３】 Ｂ）次の吸収最大ν（ｃｍ−１）を示すヌジョール法に
おける赤外吸収スペクトル（抗生物質ＧＥ２２７０因子
Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）：

【０１４１】

【表２４】 Ｃ）内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）［δ、ｐ
ｐｍ、ｍ］を使用するＤＭＳＯ−ｄ６（ヘキサジューテ
ロジメチルスルホキシド）中の次のシグナルの群を示す
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｓ＝一重線、ｂｒ　　ｓ＝広
い一重線、ｄ＝二重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｔ＝三
重線、ｍ＝多重線、Ｐｙ＝ピリジン、Ｔｚ＝チアゾール
）因子Ｄ１（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．８
８、ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．５
７、ｓ、８．５０、ｓ、８．２５、ｓ、８．２１、ｓお
よび７．３５、ｓ、（５チアゾールのＣＨ）；８．４０
、ｍ、（グリシンのＮＨ）；８．２８−８．２１、ｍ、
（ピリジンのＣＨ）；７．３２−７．２０、ｍ、（芳香
族のＣＨおよび第一アミドのＮＨ）；７．００、ｓ、６
．６４、ｓ、６．５３、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；５
．９５、ｄ、（ＯＨ）；５．２９−５．１５、ｍ、（α
ＣＨ）；５．０４、ｍ、（フェニルセリンのβＣＨ）；
４．８１、ｍおよび４．５６、ｍ、（オキサゾリンのＣ
Ｈ２）；４．３０−３．８０、ｍ、（グリシンのＣＨ２
およびプロリンアミドのＣＨ）；２．７２、ｍ、および
１．４３、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．６０、
ｓ、（ＣＨ３）；２．２１−１．９１、（ｍ）、（イソ
プロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ）；０．９
０（ｄ）および０．８６（ｄ）、（バリンのＣＨ３） 因子Ｄ２（５００ＭＨｚにおいて記録した）：９．００
、ｄ、（ＮＨ）；８．６９、ｂｒ　　ｓ（２ＮＨ）；８
．５９、ｓ、８．５３、ｓ、８．２９、ｓおよび７．３
５、ｓ、（チアゾールのＣＨ）；８．３８、ｍ、（グリ
シンのＮＨ）；８．４０および８．２６（ｍ）、（Ｐｙ
のＣＨ）；７．３７−７．１８、ｍ、（芳香族のＣＨ、
第一アミドのＮＨ）；６．９７、ｓ、（第一アミドのＮ
Ｈ）；６．０３、ｄおよびｔ、（２ＯＨ）；５．２８−
５．１６、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）
；４．９７、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．７９および
４．５５、ｍ、（オキサゾリンのＣＨ２）；３．９７−
３．７６、ｍ、（グリシンのＣＨ２およびプロリンアミ
ドのＣＨ）；２．７１、ｍおよび１．２８、ｍ、（Ｎ−
メチルアスパラギンのＣＨ２）；２．１８−１．８９、
ｍ、（イソプロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ
２）；０．８８、ｄおよび０．８４、ｄ、（バリンのＣ
Ｈ３） 因子Ｅ（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
ｄ、（ＮＨ）；８．７３、ｄ、（ＮＨ）；８．６０、ｓ
、（ＴｚのＣＨ）；８．５７、ｄ、（ＮＨ）；８．５３
、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；８．４２、ｍ、（ＰｙのＣＨ）
；８．３１、ｍ、（ＮＨ）；８．２８、ｍ、（ＰｙのＣ
Ｈ）；８．２４、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；７．３３、ｓ、
（ＴｚのＣＨ）；７．３１−７．２０、ｍ、（芳香族の
ＣＨ、第一アミドのＮＨ）；６．９８、ｓ、６．９１、
ｓ、６．６２、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；６．０４、
ｄ、（ＯＨ）；５．９５、ｔ、（ＯＨ）；５．２８−５
．１４、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）；
４．９９、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．８１、ｄｄお
よび４．５７、ｄｄ、（オキサゾリンのＣＨ２）；４．
２６（ｍ）および３．７９（ｍ）、（グリシンのＣＨ２
）；４．２５、ｍ、３．９８、ｍ、３．８２、ｍ、（プ
ロリンアミドのＣＨ）；２．７７、ｍ、および１．２５
、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．２０、ｍ、およ
び１．８９、ｍ、（バリンのβＣＨおよびプロリンアミ
ドのＣＨ２）；０．９０、ｄ、０．８４、ｄ、（バリン
のＣＨ３） 因子Ｔ（２５０ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．６６、
ｓ、８．６５、ｓ、８．６０、８．３０、ｓおよび７．
３８、ｓ、（４チアゾールおよび１オキサゾールのＣＨ
）；７．３５−７．２４、ｍ、（芳香族のＣＨおよび第
一アミドのＮＨ）；６．６８（第一アミドのＮＨ）；５
．９６、ｄ、（ＯＨ）；５．３４−５．１８、ｍ、（α
ＣＨ）；５．０５、ｍ、（βＣＨ）；５．０３、ｓ、［
ＣＨ２（ＯＣＨ３）］；４．３２、ｍおよび３．８２、
ｍ、（グリシンのＣＨ２）；４．４８、ｍ、４．０４、
ｍおよび３．６３、ｍ、（プロリンアミドのＣＨ）；３
．４０、ｓ、（ＯＣＨ３）；２．７３、ｍおよび１．４
１、ｍ、（Ｎ−メチルアスパラギンのＣＨ）；２．６０
、ｓ、（ＣＨ３）；２．４９、ｄ、（Ｎ−メチルアスパ
ラギンのＣＨ３）；２．２７−１．８８、ｍ、（イソプ
ロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ２）；０．８
９、ｄ、（バリンのＣＨ３）Ｄ）次の逆相ＨＰＬＣ系に
おける保持時間（Ｒｔ）（抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ
１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）： カラム：ベイカーボンド（ＢａｋｅｒｂｏｎｄＲ）Ｃ８
（５μｍ）４．６×２５０ｍｍ［Ｂａｋｅｒｂｏｎｄは
Ｊ．Ｔ．ベイカー・リサーチ・プロダクト（Ｂａｋｅｒ
　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　　Ｐｒｏｄｕｃｔ）、米国ニュ
ージャージイ州０８８６５フィリスバーグ、により供給
される逆相オクチルシリルシリカゲルのＨＰＬＣカラム
の商品名である］ 流速：１．８ｍｌ／分 相Ａ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４４０：４０：２０ 相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
のＨＣＯＯＮＨ４１０：１０：８０ 溶離：２０分における相Ａの２０％〜３０％の直線の勾
配 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 結果は次の通りである：

【０１４２】

【表２５】 Ｅ）質量ＦＡＢ−ＭＳピーク［クレイトス（Ｋｒａｔｏ
ｓ）ＭＳ−５０二重収束質量分析計で得た、６ｋＶの電
圧および１ｍＡの電流において８ｋＶの加速電圧および
Ｘｅガス（ソースイオンゲージ上に示される２×１０−
５トルの圧力）のサドルフィールド（ｓａｄｄｌｅ　　
ｆｉｅｌｄ）の原子ガンを使用する、試料は０．１モル
の酢酸を含有するチオグリコールのマトリックスと混合
する］は、次の通りである：

【０１４３】

【表２６】 ２、次の式を有する抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１であ
る上記第１項記載の組成物：

【０１４４】

【化５】 ３、次の式を有する抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ２であ
る上記第１項記載の組成物：

【０１４５】

【化６】 ４、次の式を有する抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅである
上記第１項記載の組成物：

【０１４６】

【化７】 ５、次の式を有する抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔである
上記第１項記載の組成物：

【０１４７】

【化８】 ６、プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒ
ａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３またはそのＧＥ
２２７０産生突然変異または変異型を深部好気性条件下
に発酵して得られた抗生物質の混合物をクロマトグラフ
ィー技術により分離することからなる、抗生物質ＧＥ２
２７０因子Ｂ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ２、抗生
物質ＧＥ２２７０因子Ｃ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子
Ｃ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、抗生物質ＧＥ２
２７０因子Ｄ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅ、抗生物
質ＧＥ２２７０因子Ｔから選択される化合物を調製する
方法。

【０１４８】７、分離は逆相クロマトグラフィーにより
実施する、上記第６項記載の方法。 ８、分離はＨＰＬＣ逆相クロマトグラフィーにより実施
する、上記第６項記載の方法。

【０１４９】９、逆相クロマトグラフィーの静止相はＣ
８−Ｃ２２アルキル官能基またはシクロヘキシルまたは
フェニル官能基により表される、上記第７または８項記
載の方法。

【０１５０】１０、分離工程にかけるプラノビスポラ・
ロセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａｒｏｓｅａ）ＡＴＣ
Ｃ５３７７３またはそのＧＥ２２７０産生突然変異また
は変異型を深部好気性条件下に発酵して得られた抗生物
質の混合物を、菌糸体から、水混和性溶媒で抽出し、次
いで濃縮した水性抽出物から、必要に応じて、水不混和
性有機溶媒を使用する抽出により、回収する、上記第６
〜９項のいずれかに記載の方法。

【０１５１】１１、製剤学的に許容されうる担体と混合
して上記第１〜５項のいずれかに記載の化合物を含有す
る製剤学的組成物。

【０１５２】１２、薬物として使用するのための上記第
１〜５項のいずれかに記載の化合物。

【０１５３】１３、抗微生物的に使用する薬物を調製す
るための上記第１〜５項のいずれかに記載の化合物の使
用。

【０１５４】１４、動物の成長促進剤として上記第１〜
５項のいずれかに記載の化合物の使用。

【図面の簡単な説明】

【図１】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅおよび因子Ｔの１
Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。

【図２】抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅおよび因子Ｔの１
Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　次の特徴を有する、抗生物質ＧＥ２２
   ７０因子Ｂ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ２、抗生物
   質ＧＥ２２７０因子Ｃ１、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ
   ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、抗生物質ＧＥ２２
   ７０因子Ｄ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅ、抗生物質
   ＧＥ２２７０因子Ｔから選択される化合物：Ａ）次の吸
   収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ
   １、Ｄ２およびＥ： 【表１】 抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔ： 【表２】 Ｂ）次の吸収最大ν（ｃｍ−１）を示すヌジョール法に
   おける赤外吸収スペクトル（抗生物質ＧＥ２２７０因子
   Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）： 【表３】 Ｃ）内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）［δ、ｐ
   ｐｍ、ｍ］を使用するＤＭＳＯ−ｄ６（ヘキサジューテ
   ロジメチルスルホキシド）中の次のシグナルの群を示す
   １Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｓ＝一重線、ｂｒ　　ｓ＝広
   い一重線、ｄ＝二重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｔ＝三
   重線、ｍ＝多重線、Ｐｙ＝ピリジン、Ｔｚ＝チアゾール
   ）因子Ｄ１（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．８
   ８、ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．５
   ７、ｓ、８．５０、ｓ、８．２５、ｓ、８．２１、ｓお
   よび７．３５、ｓ、（５チアゾールのＣＨ）；８．４０
   、ｍ、（グリシンのＮＨ）；８．２８−８．２１、ｍ、
   （ピリジンのＣＨ）；７．３２−７．２０、ｍ、（芳香
   族のＣＨおよび第一アミドのＮＨ）；７．００、ｓ、６
   ．６４、ｓ、６．５３、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；５
   ．９５、ｄ、（ＯＨ）；５．２９−５．１５、ｍ、（α
   ＣＨ）；５．０４、ｍ、（フェニルセリンのβＣＨ）；
   ４．８１、ｍおよび４．５６、ｍ、（オキサゾリンのＣ
   Ｈ２）；４．３０−３．８０、ｍ、（グリシンのＣＨ２
   およびプロリンアミドのＣＨ）；２．７２、ｍ、および
   １．４３、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．６０、
   ｓ、（ＣＨ３）；２．２１−１．９１、（ｍ）、（イソ
   プロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ）；０．９
   ０（ｄ）および０．８６（ｄ）、（バリンのＣＨ３） 因子Ｄ２（５００ＭＨｚにおいて記録した）：９．００
   、ｄ、（ＮＨ）；８．６９、ｂｒ　　ｓ（２ＮＨ）；８
   ．５９、ｓ、８．５３、ｓ、８．２９、ｓおよび７．３
   ５、ｓ、（チアゾールのＣＨ）；８．３８、ｍ、（グリ
   シンのＮＨ）；８．４０および８．２６（ｍ）、（Ｐｙ
   のＣＨ）；７．３７−７．１８、ｍ、（芳香族のＣＨ、
   第一アミドのＮＨ）；６．９７、ｓ、（第一アミドのＮ
   Ｈ）；６．０３、ｄおよびｔ、（２ＯＨ）；５．２８−
   ５．１６、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）
   ；４．９７、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．７９および
   ４．５５、ｍ、（オキサゾリンのＣＨ２）；３．９７−
   ３．７６、ｍ、（グリシンのＣＨ２およびプロリンアミ
   ドのＣＨ）；２．７１、ｍおよび１．２８、ｍ、（Ｎ−
   メチルアスパラギンのＣＨ２）；２．１８−１．８９、
   ｍ、（イソプロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ
   ２）；０．８８、ｄおよび０．８４、ｄ、（バリンのＣ
   Ｈ３） 因子Ｅ（５００ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
   ｄ、（ＮＨ）；８．７３、ｄ、（ＮＨ）；８．６０、ｓ
   、（ＴｚのＣＨ）；８．５７、ｄ、（ＮＨ）；８．５３
   、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；８．４２、ｍ、（ＰｙのＣＨ）
   ；８．３１、ｍ、（ＮＨ）；８．２８、ｍ、（ＰｙのＣ
   Ｈ）；８．２４、ｓ、（ＴｚのＣＨ）；７．３３、ｓ、
   （ＴｚのＣＨ）；７．３１−７．２０、ｍ、（芳香族の
   ＣＨ、第一アミドのＮＨ）；６．９８、ｓ、６．９１、
   ｓ、６．６２、ｓ、（第一アミドのＮＨ）；６．０４、
   ｄ、（ＯＨ）；５．９５、ｔ、（ＯＨ）；５．２８−５
   ．１４、ｍ、（αＣＨ）；５．０３、ｍ、（βＣＨ）；
   ４．９９、ｍ、［ＣＨ２（ＯＨ）］；４．８１、ｄｄお
   よび４．５７、ｄｄ、（オキサゾリンのＣＨ２）；４．
   ２６（ｍ）および３．７９（ｍ）、（グリシンのＣＨ２
   ）；４．２５、ｍ、３．９８、ｍ、３．８２、ｍ、（プ
   ロリンアミドのＣＨ）；２．７７、ｍ、および１．２５
   、ｍ、（アスパラギンのＣＨ２）；２．２０、ｍ、およ
   び１．８９、ｍ、（バリンのβＣＨおよびプロリンアミ
   ドのＣＨ２）；０．９０、ｄ、０．８４、ｄ、（バリン
   のＣＨ３） 因子Ｔ（２５０ＭＨｚにおいて記録した）：８．９５、
   ｄ、（ＮＨ）；８．７０、ｄ、（２ＮＨ）；８．６６、
   ｓ、８．６５、ｓ、８．６０、８．３０、ｓおよび７．
   ３８、ｓ、（４チアゾールおよび１オキサゾールのＣＨ
   ）；７．３５−７．２４、ｍ、（芳香族のＣＨおよび第
   一アミドのＮＨ）；６．６８（第一アミドのＮＨ）；５
   ．９６、ｄ、（ＯＨ）；５．３４−５．１８、ｍ、（α
   ＣＨ）；５．０５、ｍ、（βＣＨ）；５．０３、ｓ、［
   ＣＨ２（ＯＣＨ３）］；４．３２、ｍおよび３．８２、
   ｍ、（グリシンのＣＨ２）；４．４８、ｍ、４．０４、
   ｍおよび３．６３、ｍ、（プロリンアミドのＣＨ）；３
   ．４０、ｓ、（ＯＣＨ３）；２．７３、ｍおよび１．４
   １、ｍ、（Ｎ−メチルアスパラギンのＣＨ）；２．６０
   、ｓ、（ＣＨ３）；２．４９、ｄ、（Ｎ−メチルアスパ
   ラギンのＣＨ３）；２．２７−１．８８、ｍ、（イソプ
   ロピルのＣＨおよびプロリンアミドのＣＨ２）；０．８
   ９、ｄ、（バリンのＣＨ３）Ｄ）次の逆相ＨＰＬＣ系に
   おける保持時間（Ｒｔ）（抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ
   １、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、ＥおよびＴ）： カラム：ベイカーボンド（ＢａｋｅｒｂｏｎｄＲ）Ｃ８
   （５μｍ）４．６×２５０ｍｍ［Ｂａｋｅｒｂｏｎｄは
   Ｊ．Ｔ．ベイカー・リサーチ・プロダクト（Ｂａｋｅｒ
   　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　　Ｐｒｏｄｕｃｔ）、米国ニュ
   ージャージイ州０８８６５フィリスバーグ、により供給
   される逆相オクチルシリルシリカゲルのＨＰＬＣカラム
   の商品名である］ 流速：１．８ｍｌ／分 相Ａ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
   のＨＣＯＯＮＨ４４０：４ ０：２０ 相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン：４０ミリモル
   のＨＣＯＯＮＨ４１０：１０：８０ 溶離：２０分における相Ａの２０％〜３０％の直線の勾
   配 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 結果は次の通りである： 【表４】 Ｅ）質量ＦＡＢ−ＭＳピーク［クレイトス（Ｋｒａｔｏ
   ｓ）ＭＳ−５０二重収束質量分析計で得た、６ｋＶの電
   圧および１ｍＡの電流において８ｋＶの加速電圧および
   Ｘｅガス（ソースイオンゲージ上に示される２×１０−
   ５トルの圧力）のサドルフィールド（ｓａｄｄｌｅ　　
   ｆｉｅｌｄ）の原子ガンを使用する、試料は０．１モル
   の酢酸を含有するチオグリコールのマトリックスと混合
   する］は、次の通りである： 【表５】
2. 【請求項２】　　プラノビスポラ・ロセア（Ｐｌａｎｏ
   ｂｉｓｐｏｒａ　　ｒｏｓｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３ま
   たはそのＧＥ２２７０産生突然変異または変異型を深部
   好気性条件下に発酵して得られた抗生物質の混合物をク
   ロマトグラフィー技術により分離することからなる、抗
   生物質ＧＥ２２７０因子Ｂ１、抗生物質ＧＥ２２７０因
   子Ｂ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ１、抗生物質ＧＥ
   ２２７０因子Ｃ２、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、抗
   生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ２、抗生物質ＧＥ２２７０因
   子Ｅ、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｔから選択される化合
   物を調製する方法。
3. 【請求項３】　　製剤学的に許容されうる担体と混合し
   て請求項１の化合物を含有する製剤学的組成物。
4. 【請求項４】　　薬物として使用するのための請求項１
   の化合物。
5. 【請求項５】　　抗微生物的に使用する薬物を調製する
   ための請求項１の化合物の使用。
6. 【請求項６】　　動物の成長促進剤として請求項１の化
   合物の使用。