JPH0412881B2 - - Google Patents

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JPH0412881B2
JPH0412881B2 JP60246279A JP24627985A JPH0412881B2 JP H0412881 B2 JPH0412881 B2 JP H0412881B2 JP 60246279 A JP60246279 A JP 60246279A JP 24627985 A JP24627985 A JP 24627985A JP H0412881 B2 JPH0412881 B2 JP H0412881B2
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JP
Japan
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cyclodextrin
water
diglucosyl
manufactured
chromatography
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JP60246279A
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Yoshuki Sakano
Takanori Shiraishi
Hirosuke Niwa
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Nikken Chemicals Co Ltd
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Nikken Chemicals Co Ltd
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、新規な分岐サイクロデキストリンお
よびその製造方法に関し、更に詳細には、ジグル
コシル−β−サイクロデキストリンおよびその製
造方法に関する。
従来の技術 サイクロデキストリンはグルコース残基がβ−
１，４−結合により環状に結合したオリゴ糖であ
つて、グルコース残基６個からなるα−サイクロ
デキストリン、７個からなるβ−サイクロデキス
トリン、８個からなるγ−サイクロデキストリン
などが一般に知られている。
サイクロデキストリンは、その構造から内部に
空隙があり、この空隙内部は親油性領域となつて
いるので各種の油性物質を取り込むことができ
る。そのため、このような性質を利用して 不
安定物質の安定化 揮発性物質の保持 異臭
のマスキング 難・不溶性物質の可溶化など、
種々の用途が考えられているが、これらサイクロ
デキストリンは一般的に高価であり、このことが
サイクロデキストリンの利用拡大を妨げている大
きな要因ともなつている。もつとも、これらの中
でもβ−サイクロデキストリンは、他のサイクロ
デキストリンに比べれば比較的安価であり、包接
作用も最も強力なことから、利用面において有望
視されているものであるが、低温域（室温以下）
での水に対する液解度が極めて低い（1.55％；20
℃）という欠点があり、この点における改良が待
たれていた。
発明が解決しようとする問題点 本発明者らは、先にβ−サイクロデキストリン
の溶解性の向上を目的として、β−サイクロデキ
ストリンとマルトースとをプルラナーゼの存在下
に反応させることにより、マルトシル残基を分枝
に有する分岐β−サイクロデキストリンを得るこ
とに成功したが（特願昭60−37694号（特開昭61
−197602号）、同60−77598号（特開昭61−236802
号））、更に検討を重ねたところ、これら分岐β−
サイクロデキストリン、就中ジマルトシル−β−
サイクロデキストリンにグルコアミラーゼを作用
させることにより、ジグルコシル−β−サイクロ
デキストリンが生成することを見出し、本発明を
完成するに至つた。
問題点を解決するための手段 本発明は、ジマルトシル−β−サイクロデキス
トリンにグルコアミラーゼを作用させて、ジグル
コシル−β−サイクロデキストリンを生成させる
ことから成るジグルコシルβ−サイクロデキスト
リンの製造方法およびかくして得られるジグルコ
シル−β−サイクロデキストリンに関する。
本発明により得られるジグルコシル−β−サイ
クロデキストリンは、下記の理化学的性質を有す
る新規化合物である。
１ 分子式 C54H90O45 ２ 分子量 1459 質量分析測定法（Secondary Ion Mass
Spectrometry；SIMS法）により測定。（第１図
参照） ３ 融 点 277.5℃（非結晶；分解） ４ 比旋光度 ［α］20 D＋169.3（Ｃ＝0.2；H2O） ５ ペーパークロマトグラフイー １−ブタノール：１−プロパノール：水＝３：
５：４の展開溶媒を使用してペーパー上に展開し
た後、ヨウ素溶液を用いる発色および粗グルコア
ミラーゼで前処理した後硝酸銀を用いる発色によ
り呈色させるとき、それぞれ１スポツトを示す。
６ 薄層クロマトグラフイー イソプロパノール：エタノール：水＝５：
５：２１−ブタノール：ピリジン：水＝６：
４：３もしくは１−ブタノール：エタノール：
水＝５：５：２の各展開溶媒を使用して薄層板
（DC−Fertigplatten Kieselgel60（メルク社製））
上に展開した後、ヨウ素溶液を用いる発色および
リンモリブデン酸／硫酸を用いる発色により呈色
させるとき、それぞれ１スポツト（Rf値は、そ
れぞれ0.410.540.25）を示す。
７ 高速液体クロマトグラフイー （条件１） カラムサイズ：6φ×50mm 担体：Nucleosil−5NH2（ナーゲル社製） 溶媒：アセトニトリル：水＝70：30 流速：2.0ml／min 検出器：示差屈折計ERC7520型（エルマ光
学株式会社製） （条件２） カラムサイズ：6φ×150mm 担体：Spherisorb ODS−（フエ−ズセツ
プ社製） 溶媒：メタノール：水＝８：92 流速、検出器は条件１と同じ。
本品は、上記各条件でそれぞれ１ピークを示
す。
８ 溶解性 水に易溶、エタノールに難溶。
９ 性 状 粉末は白色であり、水溶液は無色。
10 赤外線吸収スペクトル（第２図参照） ν＝3400cm-1、2930cm-1、1150cm-1、1030cm-1
に吸収を認める。
11 13C核磁気共鳴スペクトル（第３図参照） δ （D2O） 68.2（１−６結合のC6） 100.6（１−６結合のC1） 12 メチル化分析 箱守法にしたがいメチル化した後、メチル化物
の加水分解を行い、生成した加水分解物を還元、
アセチル化してアルデイトールアセテートに誘導
しガスクロマトグラフイーにより同定すると、
２，３，４，６−テトラ−０−メチルグルコー
ス、２，３，６−トリ−０−メチルグルコース、
２，３−ジ−０−メチルグルコースのモル比は、
1.9：5.0：1.9を示す。
なお、上記理化学的性質を有するジグルコシル
−β−サイクロデキストリンは、β−サイクロデ
キストリンを構成する環状のグルコース残基（６
位）にグルコシル基が２個、それぞれ別々の位置
にα−１，６−結合した構造から成るものである
ことが、メチル化分析および分子量（質量分析）
により示された。
本発明によれば、斯かるジグルコシル−β−サ
イクロデキストリンは次の如くして製造される。
即ち、ジマルトシル−β−サイクロデキストリ
ンを固形分濃度（基質濃度）５〜35％溶液に調製
した後、グルコアミラーゼを所定量加え、液の温
度、PHなどを酵素の好適作用範囲に維持し、１乃
至24時間反応を行いジグルコシル−β−サイクロ
デキストリンを生成させ、次いで、所望によりク
ロマトグラフイーなどの方法によつて反応液から
分離、採取することにより製造される。
本発明において使用されるグルコアミラーゼと
しては、リゾプス・ニベアス（Rhizopus
niveus）、リゾプス・デレマー（Rhizopus
delemar）などの微生物由来の市販製品が挙げら
れ、これら酵素の使用量は基質の品質あるいは反
応の実施形式などにより多少の違いはあるが、通
常の場合、ジマルトシル−β−サイクロデキスト
リン１ｇ当り５単位以上用いられる。
また、本発明の原料として使用されるジマルト
シル−β−サイクロデキストリンは、新規な物質
であり、例えば、β−サイクロデキストリンとマ
ルトースとをプルラナーゼの存在下に反応させ、
該反応液中から分離、採取することにより取得す
ることができる。
本発明の反応は、基本的にはジマルトシル−β
−サイクロデキストリンにグルコアミラーゼを作
用させることにより実施されるが、場合により、
β−サイクロデキストリンとマルトースとをプル
ラナーゼの存在下に反応させ、生成するジマルト
シル−β−サイクロデキストリンを単離すること
なく、引き続きこの反応液に直接グルコアミラー
ゼを作用させて、ジグルコシル−β−サイクロデ
キストリンを生成させることも可能である。
本発明の方法によれば、反応はグルコアミラー
ゼの作用条件に適合させて実施され、反応温度、
反応PHなどは使用される酵素の種類（起源）によ
つて多少の差はあるが、一般に30〜60℃、PH3.5
〜6.5の範囲内で行われることが望ましい。
生成したジグルコシル−β−サイクロデキスト
リンを反応液から分離するには、例えば、トヨパ
ールHW−40Sを用いたカラムクロマトグラフイ
ーあるいはワツトマン17クロムによるペーパーク
ロマトグラフイーなどを用いることにより容易に
行うことができるが、工業的には特にコスト上の
理由からイオン交換樹脂クロマトグラフイー、大
量ゲルろ過分離法などを用いるのが有利である。
発明の効果 本発明により得られる新規な分岐サイクロデキ
ストリンは、公知のβ−サイクロデキストリンと
同程度の強い抱接力を有し、かつ、その溶解性に
おいて格段に優れているので、医薬品、食品、化
粧品その他一般の化学工業分野でのサイクロデキ
ストリンの用途開発に寄与するところが大きい。
実施例 次に参考例及び実施例を示し、本発明を更に詳
細かつ具体的に説明する。
参考例 （ジマルトシル−β−サイクロデキスト
リンの製造） マルトース（日本澱粉工業KK製、純度99％）
2.00ｇとβ−−サイクロデキストリン（日本食品
化工KK製、純度98％）0.40ｇに、PH5.0、50mM
酢酸ナトリウム緩衝液0.63mlを加え沸騰浴中加熱
溶解する。冷却後、これにバシラス・sp
（Bacillus sp）の耐熱性プルラナーゼ（ノボ・イ
ンダストリージヤパン社製、200単位／ｇ）400mg
を加え、60℃で72時間反応させる。
終了後、この反応液をトヨパールHW−40Sを
充填したカラム（4.5×100cm：２本）によりゲル
ろ過クロマトグラフイーにかけて分離精製を行
う。試料負荷後13〜14時間後に溶出されてくるフ
ラクシヨンを集め、ロータリーエバポレーターで
濃縮乾燥して、ジマルトシル−β−サイクロデキ
ストリンの白色粉末134mgを得る。
実施例 １ ジマルトシル−β−サイクロデキストリン粉末
5.0ｇを、PH5.0、50mM酢酸ナトリウム緩衝液100
mlに溶解し、これにリゾプス・ニベアス
（Rhizopus niveus）のグルコアミラーゼ（生化
学工業KK製33.6単位／mg）25単位加え、40℃で
24時間反応させた後、加熱を行い酵素反応を停止
する。
反応液を冷却した後、メンブランフイルター
（東洋ろ紙KK製、セルロースニトレイトTM−
２、0.45μメツシユ）を用いてろ過し、さらに濃
度を10％に調整し、この溶液10mlをトヨパール
HW−40Sを充填したカラム（4.5×100cm：２本）
によりゲルろ過クロマトグラフイーにかけて分離
精製を行い、ジグルコシル−β−サイクロデキス
トリンを740mg得る。
このものの元素分析値並びに質量分析値は、次
の通りであつた。
元素分析値（C54H90O45） 計算値 Ｃ＝44.45％ Ｈ＝6.22％ Ｏ＝
49.34％ 実測値 Ｃ＝44.51％ Ｈ＝6.24％ 質量分析値（SIMS法） 分子量1459.2924 質量1458.4748 ｍ／ｚ 1459に（Ｍ＋Ｈ）+イオンを検出し
た。
また、このものは277.5℃で分解した。
実施例 ２ ジマルトシル−β−サイクロデキストリン粉末
20ｇを、PH5.0、50mM酢酸ナトリウム緩衝液100
mlに溶解し、これにリゾプス・ニベアス
（Rhizopus niveus）のグルコアミラーゼ（生化
学工業KK製33.6単位／mg）200単位加え、40℃で
10時間反応させた後、加熱を行い酵素反応を停止
する。
反応液を冷却した後、メンブランフイルター
（東洋ろ紙KK製、セルロースニトレイトTM−
２、0.45μメツシユ）を用いてろ過し、さらに濃
度を10％に調整し、この溶液10mlをトヨパール
HW−40Sを充填したカラム（4.5×100cm：２本）
によりゲルろ過クロマトグラフイーにかけて分離
精製を行い、ジグルコシル−β−サイクロデキス
トリンを710mg得る。
実施例 ３ ジマルトシル−β−サイクロデキストリン粉末
10ｇを、PH5.0、50mM酢酸ナトリウム緩衝液100
mlに溶解し、これにリゾプス・ニベアス
（Rhizopus niveus）のグルコアミラーゼ（生化
学工業KK製33.6単位／mg）200単位加え、50℃で
５時間反応させた後、加熱を行い酵素反応を停止
する。
反応液を冷却した後、メンブランフイルター
（東洋ろ紙KK製、セルロースニトレイトTM−
２、0.45μメツシユ）を用いてろ過し、ろ液10ml
をトヨパールHW−40Sを充填したカラム（4.5×
100cm：２本）にによりゲルろ過クロマトグラフ
イーにかけて分離精製を行い、ジグルコシル−β
−サイクロデキストリンを720mg得る。
【図面の簡単な説明】
第１図は、ジグルコシル−β−サイクロデキス
トリンの質量スペクトルを示し、第２図は、ジグ
ルコシル−β−サイクロデキストリンの赤外線吸
収スペクトルを示し、第３図は、ジグルコシル−
β−サイクロデキストリンの13C核磁気共鳴スペ
クトルを示す。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 下記の理化学的性質を有するジグルコシル−
    β−サイクロデキストリン。 １ 分子式 C54H90O45 ２ 分子量 1459 質量分析測定法（Secondary Ion Mass
    Spectrometry；SIMS法）により測定。（第１図
    参照） ３ 融 点 277.5℃（非結晶；分解） ４ 比旋光度 ［α］20 D＋169.3（Ｃ＝0.2；H2O） ５ ペーパークロマトグラフイー １−ブタノール：１−プロパノール：水＝３：
    ５：４の展開溶媒を使用してペーパー上に展開し
    た後、ヨウ素溶液を用いる発色および粗グルコア
    ミラーゼで前処理した後硝酸銀を用いる発色によ
    り呈色させるとき、それぞれ１スポツトを示す。 ６ 薄層クロマトグラフイー イソプロパノール：エタノール：水＝５：
    ５：２１−ブタノール：ピリジン：水＝６：
    ４：３もしくは１−ブタノール：エタノール：
    水＝５：５：２の各展開溶媒を使用して薄層板
    （DC−Fertigplatten Kieselgel60（メルク社製））
    上に展開した後、ヨウ素溶液を用いる発色および
    リンモリブデン酸／硫酸を用いる発色により呈色
    させるとき、それぞれ１スポツト（Rf値は、そ
    れぞれ0.410.540.25）を示す。 ７ 高速液体クロマトグラフイー （条件１） カラムサイズ：6φ×50mm 担体：Nucleosil−5NH2（ナーゲル社製） 溶媒：アセトニトリル：水＝70：30 流速：2.0ml／min 検出器：示差屈折計ERC7520型（エルマ光
    学株式会社製） （条件２） カラムサイズ：6φ×150mm 担体：Spherisorb ODS−（フエ−ズセツ
    プ社製） 溶媒：メタノール：水＝８：92 流速、検出器は条件１と同じ。 本品は、上記各条件でそれぞれ１ピークを
    示す。 ８ 溶解性 水に易溶、エタノールに難溶。 ９ 性 状 粉末は白色であり、水溶液は無色。 10 赤外線吸収スペクトル（第２図参照） ν＝3400cm-1、2930cm-1、1150cm-1、1030cm-1
    に吸収を認める。 11 13C核磁気共鳴スペクトル（第３図参照） δ （D2O） 68.2（１−６結合のC6） 100.6（１−６結合のC1） 12 メチル化分析 箱守法にしたがいメチル化した後、メチル化物
    の加水分解を行い、生成した加水分解物を還元、
    アセチル化してアルデイトールーアセテートに誘
    導しガスクロマトグラフイーにより同定すると、
    ２，３，４，６−テトラ−０−メチルグルコー
    ス、２，３，６−トリー０−メチルグルコース、
    ２，３−ジ−０−メチルグルコースのモル比は、
    1.9：5.0：1.9を示す。 ２ ジマルトシル−β−サイクロデキストリンに
    グルコアミラーゼを作用させて、ジグルコシル−
    β−サイクロデキストリンを生成させることを特
    徴とするジグルコシル−β−サイクロデキストリ
    ンの製造方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JPS6327440A (ja) * 1986-07-18 1988-02-05 Sanraku Inc グルコシル化分岐シクロデキストリン含有組成物
US5002935A (en) * 1987-12-30 1991-03-26 University Of Florida Improvements in redox systems for brain-targeted drug delivery
US5017566A (en) * 1987-12-30 1991-05-21 University Of Florida Redox systems for brain-targeted drug delivery
JPH0698012B2 (ja) * 1988-05-13 1994-12-07 農林水産省食品総合研究所長 複分岐グルコシルーサイクロデキストリンの製法
US5997856A (en) * 1988-10-05 1999-12-07 Chiron Corporation Method and compositions for solubilization and stabilization of polypeptides, especially proteins
US5124154A (en) * 1990-06-12 1992-06-23 Insite Vision Incorporated Aminosteroids for ophthalmic use

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