JPH0363567A - クロマトグラフの転写方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）やペーパーク
ロマトグラフィにおいて、８１Ｍクロマトグラフィのプ
レートやペーパークロマトグラフィのペーパー（これら
を総称して薄層プレートという）に展開された試料スポ
ットを赤外分光分析法により分析するのに好都合な媒体
に転写する方法に関するものである。

（従来の技術） 薄層クロマトグラフィーで用いるプレートとしては、一
般にガラス基板やアルミニウムシート上にシリカゲルを
塗布したものが用いられている。

ペーパークロマトグラフィーでは濾紙が用いられる。試
料は溶離液によってシリカゲル層や濾紙の面内方向に展
開され、試料スポットを形成する。

薄層プレートに展開された成分をフーリエ変換赤外分光
分析法（ＦＴＩＲ）によって分析する試みもなされてい
る。ＦＴＩＲで分析するには、展開した試料スポットに
そのまま赤外線を絞って照射し、拡散反射スペクトルを
測定する方法（Ａｎａｌ。

Ｃｈｅｍ、１９８９，６１，６１５−６１８参照）、分
画部分をかき取って抽出した後、ＫＢｒやＫＣＱの粉末
ペレット上に滴下し、乾燥させた後にＦＴＩＲで測定す
る方法（Ａｎａｌ、Ｃｈｅｍ、　１９８７，５９，４１
５−４１８参照）、薄層プレートの端部に赤外非吸収物
質の粉末を置いて薄層プレートからその粉末へガラスフ
ァイバを経てスポット成分を転写させる方法（Ａｎａｌ
、Ｃｈｅｍ、　１９廷、５８，２７０８−２７１４参照
）などが試みられている。

（発明が解決しようとする課題） ＦＴＩＲ測定のために、薄層プレートに赤外線を直接当
てる方法は、薄層プレートの固定相のシリカゲルやペー
パーでの赤外吸収が大きいため、実用性に乏しい。

試料スポットをかき取って抽出し、ＫＢｒやＫＣＱの粉
末ペレット上に滴下してＦＴＩＲ測定する方法は、試料
が損失したり、分解したり、汚染されるなど不正確であ
る上に、手間がかかって面倒である。

薄層プレートの端部でガラスファイバを用いて分画成分
を転写する方法では、端部に設けられるガラスファイバ
のピッチによって展開方向の分解能が決まるうえ、−次
元に展開された薄層プレートにしか適用することができ
ない。

本発明は、試料スポットの赤外分光分析を行なう際に、
試料スポットのかき取りを行なわず、薄層プレートに展
開されたスポットを赤外非吸収物質に転写することによ
り、正確な赤外分光分析を行なうことができるようにす
ることを目的とするものである。

（課題を解決するための手段） 本発明の転写方法では、試料スポットをもち支持材を用
いない薄層プレートを多孔質物質板上に置き、試料スポ
ットの大きさに対応する孔又は試料スポットの大きさに
対応する幅で複数個の試料スポットを含む長さのスリッ
トをもつ枠体の前記孔又はスリットに赤外非吸収物質を
充填したものを前ｙ２薄暦プレート上に置いて薄層プレ
ートと赤外非吸収物質とを密着させ、溶離液を多孔質物
質板から薄層プレートを経て赤外非吸収物質方向へ毛管
現象で上昇させ、赤外非吸収物質表面から揮散させて薄
層プレート中の試料を赤外非吸収物質に転写させる。

（作用） 試料が展開分離された薄層プレートの一方の面に赤外非
吸収物質を密着させておき、薄層プレートの他方の側か
ら溶離液を毛管現象で赤外非吸収物質のある側へ移動さ
せると、分離成分が赤外非吸収物質の方向へ移動して転
写される。

赤外非吸収物質が枠体のスリットに充填されているとき
は、展開方向に沿って並んだ複数個の試料スポットを同
時に赤外非吸収物質に転写することができ、その転写後
の赤外非吸収物質を試料として拡散反射法でＦＴＩＲ／
３１１１定を行なえば、クロマトグラムを得ることがで
きる。このとき、スリットの幅が試料スポットの大きさ
に対応した太きさであるので、転写の際に試料がスリッ
ト幅方向に広がることが防止される。

赤外非吸収物質が枠体の孔に充填されたものであるとき
は、試料スポットごとに赤外非吸収物質に転写して赤外
分光分析を行なうことができる。

このときは、試料スポットの転写部分が孔によって規制
され、広がることが防止される。

（実施例） 第１図及び第２図は本発明の転写方法の一実施例を表わ
す。第１図は断面図、第２図は平面図であり、第２図で
は容器は省略されている。第１図は第２図のＡ−Ａ　’
線位置で切断して拡大した状態を表わしている。

容器２内に置かれた多孔質物質板４上には試料が展開さ
れた薄層プレート６が置かれている。薄層プレート６は
薄膜クロマトグラフィーのプレートであって、支持材を
用いないプレートである。

そのような薄層プレートとしてはＥｍｐｏｒｅ　Ｔ　Ｌ
　Ｃシート（＾ｎａｌｙｔｉｃｈｅｍ　Ｉｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌ、Ｉｎｃ、社の商品）や、ガラス焼結プレ
ートを用いることができる。

ｇＲプレート６は又、ペーパークロマトグラフィー用ペ
ーパーであってもよい。′ＯＲ，層プレ層外レート６料
がすでに展開されてスポットａ、ｂが存在している。多
孔質物質板４としては例えばセラミック基板、高分子材
料、ペーパー又は布のような溶液浸透性のある材質のも
のを用いる。

スｑ、層プレート６上には赤外非吸収物質８を高密度に
、かつ均一に充填した転写枠１０を載せる一０転写枠１
０には幅が試料スポットａ、ｂの大きさよりも少し小さ
めの幅をもち、長さが複数個の試料スポットａ、ｂを含
むスリット１２が形成されている。試料スポットａ、ｂ
の大きさは５〜１０ｍｍ程度であるので、スリット１２
の幅は数ｍｍ程度が適当である。スリット上２に充填さ
れた赤外非吸収物質８が薄層プレート６の表面と密着す
るように転写枠１０を薄層プレート６上に載せる。

赤外非吸収物質としてはＫＢｒやＫＣＱなどの粉末状の
ものを用いる。

容器２には多孔質物質板４の一部が浸る位置まで？８離
液１４を入れる。溶離液１４としては種々の溶媒を用い
ることができるが、溶出力が強く、低沸点のものが好ま
しい。そのような溶離液としては例えばクロロホルムを
用いることができる。

この状態において、溶離液１４が多孔質物質板４を通り
、薄層プレート６中を上昇して赤外非吸収物質８に至り
、赤外非吸収物質８の表面から揮散する。このとき、薄
層プレート６中の試料成分は溶離液１４の移動に伴って
上方に移動し、赤外非吸収物質８に転写される。第↓図
に示されるように、赤外非吸収物質８が充填されている
スリットの幅が試料スポットａ、ｂのサイズよりも小さ
く設定されているので、溶離液は矢印で示されるように
移動し、スリット幅方向に対しては試料の転写と同時に
濃縮も行なわれる。

転写の際、赤外非吸収物質８の表面に温風を吹き付ける
と赤外非吸収物質８の表面からの溶離液の揮散を促進す
ることができる。

薄層プレート６から赤外非吸収物質８への転写を終了し
た後、赤外非吸収物質８を乾燥させ、拡散反射法により
ＦＴＩＲで赤外スペクトルを測定することができる。こ
のとき、スリット長さ方向に走査しながら連続的に赤外
スペクトルを測定すれば、第３図に示されるように赤外
クロマトグラムも得ることができる。第３図で（Ａ）は
赤外非吸収物質８と転写枠１０をスリット長さ方向に切
断した状態を表わしており、ａ′、ｂ′、ａ′はそれぞ
れ転写された試料スポットであり、（Ｂ）は赤外クロマ
トグラムを表わしている。

この実施例において、転写枠１０のスリット幅を試料ス
ポットａ、ｂ、・・・・・・のサイズより小さくしてお
けば、スリット幅方向に対する溶離液の移動方向を規制
することができて試料スポットが拡散することを防止す
ることができる。さらに拡散を防止し、有効に濃縮転写
を行なうために、第４図に示されるようにスリットの幅
方向の断面形状をテーパ状にするのが好ましい。１２ａ
はスリット幅方向の断面がテーパ状をしているスリット
であり、下側の幅を試料スポットに対応しｈ大きさ。

にし、上側の幅をＦＴＩＲの拡散反射装置の光束幅と同
程度にすることにより、赤外吸収スペクトルによる定量
が可能になる。

第２図に示される転写枠１０においては、スリットの長
手方向に対しては転写の際に試料スポットが広がる。そ
こで、第５図に示されるように転写枠１０にスリットの
長手方向に沿って多数の仕切板１６を設けると、試料プ
レートから赤外非吸収物質に試料スポットが転写される
際、スリット幅方向だけではなく、スリット長さ方向に
も試料スポットが広がるのを防止することができる。

第６図及び第７図は他の実施例で用いる転写枠を表わし
ている。

２０は１個の試料スポットを転写する孔２２をもつ転写
枠であり、孔２２にはＫＢｒやＫＣＲなどの赤外非吸収
物質８が高密度に、かつ均一に充填されている。孔２２
の断面形状はテーパ状であり、下側の広がった孔のサイ
ズＬＬは試料スボッ１−サイズの大きさであり、上側の
小さくなった孔のサイＸＬ２は拡散反射装置の光束幅の
大きさとする。

この転写枠を用いるときは、第８図に示されるように、
多孔質物質板４上に試料がＲ開された薄層プレート６を
置き、Ａ層プレート６上に転写枠２ｏを載せ、その孔に
充填された赤外非吸収物質８と薄層プレート６が密着す
るように置く。容器に溶離液上４を入れて多孔質物質Ｆ
ｉ４から薄層プレート６を経て赤外非吸収物質８に溶離
液を移動させる。図で矢印で示されるように、溶離液の
移動方向は転写枠２０によってＭ制され、薄層プレート
６の試料スポットは溶離液の移動に伴って赤外非吸収物
質８に移動し、赤外非吸収物質８の上層部に転写される
。このとき、孔２２の上部のサイズは試料スポットのサ
イズより小さいので、転写に伴って試料が濃縮されてい
く。この場合も、赤外非吸収物質８の表面に温風を吹き
付けると、溶離液の揮散が促進され転写速度が速められ
る。

転写枠２０の孔の上部の直径が拡散反射装置の光束の幅
に合わせて設定されており、下部のサイズが試料スポッ
トの大きさに合わせて設定されているときは、試料スポ
ットの全成分が赤外非吸収物質８に転写され、その上部
に濃縮されるため。

転写後にＦＴＩＲの拡散反射装置で赤外分光分析を行な
えば、赤外吸収スペクトルによる定性と定量を行なうこ
とができる。

転写枠１０におけるスリットや転写枠２０における孔の
サイズは、実施例に示されたものに限らない。

（発明の効果） 本発明では支持材をもたない薄層プレートに転写枠によ
り溶離液の移動方法が規制される赤外非吸収物質を密着
させておき、溶離液を薄層プレートの下側から赤外非吸
収物質方向に移動させることにより、薄層プレート中に
展開された試料成分を赤外非吸収物質に転写するように
したので、薄層プレートに含まれる固定相などの不純物
の影響を受けることなく、拡散反射法によって赤外吸収
スペクトルを測定することができる。

本発明による転写操作は簡単である。

転写枠のスリット幅又は孔のサイズを試料スポットのサ
イズより小さくすれば、転写と同時に濃縮も行なうこと
ができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は一実施例を示す断面図、第２図はその平面図で
あり、第１図は第２図のＡ−Ａ’線位置での断面図を容
器とともに示したものである。第３図は転写後の状態と
得られる赤外吸収スペクトルを表わす図、第４図は他の
実施例における転写枠と赤外非吸収物質をスリット幅方
向に切断した状態の断面図、第５図はさらに他の実施例
における転写枠と赤外非吸収物質をスリット長さ方向に
切断した状態の断面図である。第６図はさらに他の実施
例で用いる転写枠と赤外非吸収物質を示す断面図、第７
図はその平面図、第８図はその転写枠と赤外非吸収物質
を用いる実施例を示す断面図である。 ４・・・・・・多孔質物質板、６・・・・・・′Ｒ層プ
レート、８・・・・・・赤外非吸収物質、１０．２０・
・・・・・転写枠、１２．１２ａ・・・・・・スリット
、２２・・・・・・孔。 第２図

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）試料スポットをもち支持材を用いない薄層プレー
   トを多孔質物質板上に置き、試料スポットの大きさに対
   応する幅で複数個の試料スポットを含む長さのスリット
   をもつ枠体の前記スリットに赤外非吸収物質を充填した
   ものを前記薄層プレート上に置いて薄層プレートと赤外
   非吸収物質とを密着させ、溶離液を多孔質物質板から薄
   層プレートを経て赤外非吸収物質方向へ毛管現象で上昇
   させ、赤外非吸収物質表面から揮散させて薄層プレート
   中の試料を赤外非吸収物質に転写させる転写方法。
2. （２）試料スポットをもち支持材を用いない薄層プレー
   トを多孔質物質板上に置き、試料スポットの大きさに対
   応する孔をもつ枠体の前記孔に赤外非吸収物質を充填し
   たものを前記薄層プレート上に置いて薄層プレートと赤
   外非吸収物質とを密着させ、溶離液を多孔質物質板から
   薄層プレートを経て赤外非吸収物質方向へ毛管現象で上
   昇させ、赤外非吸収物質表面から揮散させて薄層プレー
   ト中の試料を赤外非吸収物質に転写させる転写方法。