JPH03504970A

JPH03504970A - ２′，５′―オリゴアデニレート誘導体の治療的使用

Info

Publication number: JPH03504970A
Application number: JP1506395A
Authority: JP
Inventors: スハドルニク，ロバート　ジェイ; フライデラー，ボルフガング
Original assignee: テンプル　ユニバーシティ　―　オブ　ザ　コモンウェルス　システム　オブ　ハイヤー　エデュケーション
Priority date: 1988-06-09
Filing date: 1989-05-24
Publication date: 1991-10-31
Anticipated expiration: 2014-09-13
Also published as: IL90499A0; WO1989012380A3; DK291390A; JP2947580B2; EP0716856A2; CN1107508C; DK291390D0; DK174025B1; EP0716856B1; IL90499A; DE68929321D1; EP0420872A1; CN1040321A; CA1335356C; ATE141796T1; EP0420872B1; EP0420872A4; EP0716856A3; AU3740389A; ES2016464A6

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】２’　、５’　−オリゴアデニレート誘導体の治療的使用関連出願に関する説明この出願は１９８８年６月９日付は出願の米国特許出願第２０４、６５９号の部分継続出願であり、前記第２０４．６５９号は１９８８年１月１１日付は出願の米国特許出願第１４４．６０２号の部分継続出願であり、前記第１４４．６０号は１９８４年１１月７１日付は出願の米国特許出願第６２９．６５０号（現在放棄されている）の継続出願である。米国特許出願第２０４，６５９号の開示を参考のためここに引用する。

政府認可に関する説明ここに記載する発明は、ナショナル・インステイチュート・サブ・ヘルス・グランドＧＭ−２６１３４号およびナショナル・サイエンスｅファウンデーション・グランドＰＧＭ−８１１１７５２号により支持されている。

発明の技術分野本発明は　２１．ｓ／　　−オリゴアデニレート同族体およびこの種の同族体の医薬組成物の成る種の治療的使用に関するものである。

発明の背景本発明の主題に関する完全名称は極めて長い用語を含む。

これら用語を当業者に周知された方法で略記することが、当業者には慣例である。これら一般的かつ慣用の記号を下記に説明し、本明細書の本文中に用いることができる。

記号：Ａ：アデノシンまたはアデニレートもしくはアデニリル、コルジセピンまたはＣもしくは３’−ｄＡ：３’　−デオキシアデノシン（３′−デオキシアデニレート）、ａｒａ−Ａ：９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン、ＥＨＮＡ　：工、リスロー９−（２−ヒドロキシ−３−ノニル）アデニン、Ａ−３′　−アミノ：３′　−アミノ−３′　−デオキシアデノシン、ツベルシジン：４−アミノ−７（β−Ｄ−リボフラノシル）ピロロ−［２，３− ｄ］ピリミジン、３’　−ｄＡＴＰ　：　３’　−デオキシアデノシン三燐酸、ＡＴＰ：アデノシン三燐酸、 ■＝イノシンまたはイノシネートもしくはイノシニリル、キシロ−Ａもしくはキシロアデノシン：９−β−Ｄ−キシロフラノシルアデニン、ｄＣＦもしくは２′−デオキシアデノシン：　（Ｒ）　−３−（２−デオキシ− β−り一エリスロベントフラノシル）−３，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｄ］［１，３コシアゼピン−８−オール、２−５Ａもしくは２’、５’−オリゴ（Ａ）もしくは２′。

５′−オリゴアデニレート：アデニル酸と２’　、５’　−ホスホジエステル結合および５′−末端におけるトリホスフェートとのオリゴマー、２’、５’−コルジセピン同族体もしくは２’、５’　−オリゴコルジセピン：３′−デオキシアデニル酸と２’、５’一ホスホジエステル結合および５′−末端におけるトリホスフェートとのオリゴマー、２’　、５’　　−Ａ　　もしくはコアオリゴマー：アデニル酸と２’、５’　 −ホスホジエステル結合とのオリゴマー、２’　、５’−Ａ３もしくは２’、５ ’　−アデニレート三量体コア：アデニリル（２’　、　　５’　）アデニリル（２’　、　　５’　）アデノシン、２’　、５’−Ａ４もしくは２’、５’　−アデニレート四量体コア：アデニリル（２’　、　　５’　）アデニリル（２’　、　　５’　）アデニリル（２’ 　、５’　）アデノシン、２’　、５’　−３’　　ｄＡ３または２’　、５’ 　−Ｃ−Ｃ−Ｃもしくは２’　、５’　フルジセビン三量体コア：３′　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’−デオキシアデニリル（２′。

５’　）３’　−デオキシアデノシン、２’　、５’−Ｃ−Ｃ−Ｃ−Ｃもしくは２’、５’　コルジセピン四量体コア＝３′−デオキシアデニリル（２’　、５ ’　）３′−デオキシアデニリル（２’　、　　５’　）　３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデノシン、３’　、５’　−Ａ３：アデニリル（３’　、５’　”）アデニリル（３’　、５’　）アデノシン、２’　、５’　−１３もしくは２’、５’　−イノシン三量体コア：イノシニリル−（２’　、５”）イノシニリル（２′。

５′）イノシン、ＥＢＶ：エプスタイン−パールウィルス、ＥＢＮＡ：ニブスタイリン−バールウィルス結合した初期核抗原、ＨＩＶ：ヒト免疫不全症ウィルスであってＨＩＶ−１、ＨＩ　Ｖ−２および他の全てのＨＩＶ亜種を包含する、ＨＢＬＶ　：ヒトＢ−細胞リンパ趨向性ウィルス、ＨＴＬＶ　：ヒトＴ−細胞白血病ウィルスであってＨＴＬＶ−工、ＨＴＬＶ− ＩＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩＩ、並びに他の全テノＨＴＬＶ亜種を包含する、ＩＦＮα：α−インターフェロン、ｒｌＦＮ−αＡ：組換インターフェロン、ｄｓＲＮＡ：二本鎖リボ核酸、２’　、　　５’　−Ａ−Ａ−Ｔｕ　：アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５’　）ツベルクリン、２’　、５’　−Ｔｕ−Ｔｕ−Ｔｕ　：２ ’　、５’　−ツベルシジリル（２’　、５’　）ツベルシジリル（２’　、５ ’　）ツベルクリン、２’　、５’−Ａ−Ａ−ａｒａ−Ａ：アデニリル（２′。

５′）アデニリル（２’　、５’　）ａｒａ−Ａ。

２’　、５’　−Ｃ−Ｃ−Ａ　：　３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’ 　）３’−デオキシアデニリル（２’　、５”）アデノシン、２’　、　　５’　−Ａ−Ｃ−Ｃ：アデニリル（２’　、５’　＞３’−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ｃ：アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’ 　、５’　）３’　−デオキシアデノシン、２’　、５’　−Ｃ−Ａ−Ｃ：　３ ’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５’　）３ ’　−デオキシアデノシン２’　、５’　−Ｃ−Ｃ−Ａ　：　３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’ 　）３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）アデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ｃ−Ａ：アデニリル（２’　、５’　）３’−デオキシアデニリル（２’　、５’　）アデノシン、２’　、５’−キシロ−Ａ３：キシロアデニリル（２′。

５′）キシロアデニリル（２’　、５’　）キシロアデノシン、２’、５’−キシロ−Ａ４：キシロアデニリル（２′。

５′）キシロアデニリル（２’　、５’　）キシロアデニリル（２’　、５’　）キシロアデノシン、ＭＭＴ　ｒ　：　５’　　−０−ｐ−メトキシトリチル、２’、５’　〜トリチルーＣ３：　５’　−０−り一メトキシトリチルー３′− デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデノシン、２’、５’−１リチルーＡ３：　５’　　−０−１）−メトキシトリチルアデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２ ’　、５’　）アデノシン、２’　、５’　−Ｃ−Ｃ−ｄＣＦ　：　３’　　−デオキシアデニリル（２’　、５”）３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）２′−デオキシアデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−アミノ：アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５’　）３’　−アミノ−３′−デオキシアデノシン、Ｓ　１ＴＢＤ　：　ｔ−ブチルジメチルシリルもしくは一８ｉ−（ＣＨ）　Ｃ（ＣＨ３）３、一ブチルジメチルシリルーアデニリル（２’　、５’　）３’　−２’　、５’ 　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−〇−メチル：アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５’　”）３’　−０−メチルアデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−ベンチル：アデニリル（２’　、５ ’　）アデニリル（２’　、５”）３’　−０−ペンチルアデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−へキシル：アデニリル（２’　、５ ’　）アデニリル（２’　、５’　）３’　−０−へキシルアデノシン、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−ヘプチル：アデニリル（２’　、５ ’　）アデニリル（２’　、５’　）３’　−０−ヘプチルアデノシン、２’　、５’−ＥＨＮＡ−Ａ−Ａ−：エリスロー９−（２−ヒドロキシ−３−ノニル）−アデニリル（２’　、　　５’　）アデニリル（２’　、５”）アデノシン。

アデニリル（Ａ）と３′−デオキシアデニリル（Ｃ）との成分からなる「四量体」化合物の記号ついては以下に例示する：２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ｃ−Ｃ：アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５’　）３’−デオキシアデニリル（２′。

５”）３’　−デオキシアデノシン。

インターフェロンにより誘発される抗ウイルス状態の知識を拡張し、抗ウイルス反応の媒体としての２’、５’　−オリゴアデニレートに関する化学的および酵素的合成、並びに生物学的性質につき注意が向けられている。２’、５’　−オリゴ（Ａ）は、植物および動物における天然かつ広範囲の抗ウイルス防御メカニズムの成分である。２−５Ａ／ＲＮアーゼし経路または抗ウイルス系としても知られる２−５Ａ経路はインターフェロンの抗ウイルスメカニズムに関与することが広く認められ、さらに細胞成長および分化の制御にも関与することができる。

この経路にしたがい、２−５Ａは２′。

５′−オリゴアデニレート合成酵素［ＡＴＰ　：　２’　、５’　−オリゴ（Ａ）アデニルトランスフェラーゼ（Ｅ　Ｃ２，７，７，１９，）コ（以下、ｒ２− ５Ａ−合成酵素」と称する］によりＡＴＰから合成される。この酵素はｄｓＲＮＡにより活性化される。

２−５Ａは、その唯一公知の標的酵素、すなわち独特な２−５Ａ依存性エンドリボヌクレアーゼＲＮアーゼＬに結合してこれを活性化することにより、その生物学的作用を発揮する。

後者は、ウィルスおよび細胞のｍＲＮＡもしくはｒＲＮＡを切断することにより蛋白合成を阻止する。ホバネシアン等、ヨーロピアン・ジャーナル・バイオケミスリー、第９３巻、第５１５〜５２６頁（１９７９）　　；ケール等、プロシーディング・ナショナル・アカデミ−・サイエンス、ＵＳＡ、第７５巻、第２５６〜２６０頁（１９７８）。しかしながら、生物学系ににおける真正２−５Ａ分子の短い半減期は、ウィルス複製の制御において公認の欠点である。

「ヒトＢ−細胞リンパ趨向性ウィルスＪ　　（ＨＢＬＶ）としても知られる「ヒトＢ−リンパ趨向性ウィルス」は大分子量の二本鎖ＤＮＡゲノムを特徴とし、ヘルペスウィルス属のウィルスと形態学的に類似するが、宿主範囲とインビトロの生物学的作用と抗原特徴とゲノムとにより公知のヒトおよび非ヒト霊長類ヘルペスウィルスから容易に区別することができる。サラフジン等、サイエンス、第２３４巻、第５９６〜６０１頁（＋９８６）　　、ジョセフス等、サイエンス、第２３４巻、第６０１〜６０２頁（１９８６）。ウィルスは新たに分離されたヒトＢ−細胞に選択的に感染し、これらを核および細胞質関連物質を伴う大型の屈折性単核もしくは三核細胞まで変換させることが観察されている。ＨＢＬＶは、１年以上も持続する慢性疲労を特徴とする慢性単球増加症候群の原因になると思われる。

ヒトＴ−細胞白血病ウィルスＩ［［（ｒＨＴＬＶ−ｍｌ　）としても知られるヒト免疫不全症ウィルス（ｒＨＩ　ＶＪ　’）　、すなわち後天的免疫不全症候群の病因はタイプＤ型レトロウィルスである。全ゆるレトロウィルスにおけると同様に、Ｈ−ＩＶ複製の主たる特徴はプラス−ストランドＲＮＡゲノムからＤＮＡへの逆転写であり、すなわちＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ、すなわち逆転写酵素を必要とする過程である。この酵素はウィルスコードされると共に、成熟ＨＩＶピリオンにおけるゲノムＲＮＡに結合することが判明している。短い逆転写過程を必要とするレトロウィルスおよびウィルスに対する逆転写酵素の関連性は、逆転写酵素を抗ウィルス（特に抗レトロウィルス）治療の主たる標的にする。

必要とされることは、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とするＨＩＶ、ＨＢＬＶによって生ずる慢性疲労、およびその他の病気状態を真正２−５Ａよりも代謝的に安定かつ活性である本発明によれば、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする障害につき哺乳動物を処置する方法が提供される。この方法は、式：［式中、ｎは１〜８の正の整数であり、ｍは０．１．２もしくは３であり、各Ｒは同一もしくは異なるものであって水素、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ１ｏアルコキシおよび−Ｏ８ｉ　−（ＣＨａ　）　２　Ｃ（ＣＨａ　）　３から選択され、ただし同一化合物において全てのＲ基が水素であってはならないコの少なくとも１種の化合物またはその医薬上許容しうる塩を哺乳動物に投与することからなっている。

好ましくはｎは１〜３、より好ましくは１もしくは２である。特に好ましくは２ ′−末端ヌクレオチドにおけるＲ基は水素以外のものであり、すなわち２′−末端ヌクレオチドはアデノシン以外のものである。

本発明の方法に使用する化合物の例は以下のコア化合物、その対応する５′モノ −、ジーおよびトリーホスフェート、並びにそのいずれかの試薬上許容しうる塩を包含する。

２’　、５’　−Ｃ−Ｃ−Ａおよび２’　、５’　−Ａ−Ｃ−Ａ。

さらにＡおよびＣの各種の「四量体」組合せ物であって限定はしないがなどを包含する。

２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−メチル、２’　、５’　−Ａ−Ａ− Ａ−３’　−０−ペンチル、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−ヘキシル、２’　、５’　−Ａ−Ａ−Ａ−３’　−０−ヘプチル。

Ｒが水素およびアミノから選択される化合物、たとえば：２’　、５’　　−Ａ −Ａ−Ａ−３’　　−アミノ。

凡＃（＊ｉ＃、Ｊ：ｕＯ３ｉ　（ＣＨ３）　２Ｃ（ＣＨ３）３がら選関連発明において、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする障害につき哺乳動物を処置する方法は、２’　、５’−ＥＨＮＡ−Ａ−Ａ、および５．６−ジクロルベンズイミダシリル（２’　、５’　”）５゜６−・ジクロルベンズイミダシリル（２’　、５’　）５．６−ジクロルベンズイミダゾールリボシドもしくはその５′モノ−、ジーおよびトリーホスフェートまたはそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を哺乳動物に投与することからなっている。

さらに本発明は、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする全ゆる障害につき哺乳動物を処置するための医薬組成物に向けられ、この組成物は上記化合物の少なくとも１種と医薬上許容しうるキャリヤとからなっている。

図面の簡単な説明第１図は次の２’、５’　　−オリゴアデニレート同族体によるＨＩＶ−１逆転写酵素阻止の効果を示す：Ｉ）２Ｃ３（黒丸印）；ｐＣ（白丸印）；ｐ３Ｃ３（黒画角印）；ｐＣ３（白画角印）；Ｃａ（黒三角印）；およびＡ−Ｃ−Ａ　（白玉角印）。逆転写酵素反応は雛形プライマーとしてのポリ（Ａ）−（ｄＴ）　　　と酵素としてのトリトンＸ−１００活性化均して１２９．０ＯＯｃｐ■であるのに対し、バックグランド値は平均して１０．０００ｃｐｍであった。

第２Ａ〜２Ｆ図はインビトロにおける次のＨＩＶ−１感染に対する作用を示している：　　（２Ａ）コルジセピン、（２Ｂ）２’　、５’　−Ａ　　　（２Ｃ）２’　、５’　−Ｃ３および（２Ｄ）３ゝ２’　、５’　−ｐ−Ｃ（２Ｅ）（２’　、５’　）−Ａ−Ｃ−Ａおよび（２Ｆ）２’　、５’−ｐ−Ｃ４゜ＭＴ−２細胞には、作用体の存在下および不存在下でＨＴＬＶ−ｍ８を作用させた。実施例９に記載したように致命的な染料吸収により、細胞病理学的効果を定量した。各データ点は３種の数値の平均を示す。標準偏差は平均値の１０％未満であった。

第３図は２’　、５’　−Ｃ３とｒ　Ｉ　ＦＮ−（ＩＥＡ　（３Ａ）もしくは不整合ｄ　ｓ　ＲＮＡ　（３Ｂ）のいずれかとの組合せ抗ＨＩＶ−１作用のプロット図である。組合せ薬剤指数は投与量−作用曲線の傾斜から計算し、かつ保護％値、または感染割合に対しプロットした。濃度は２’　、５’　−Ｃ３につき３、　］　〜１００　ｔ、ｔ　ｇ　／ｍｌとし、ｒＩＮＦ−ａＡにつき９．８〜３１２．５　１．　　Ｕ、　／ｍｌとし、不整合ｄ　５ＲＮＡにつき１．６〜２５２−５Ａの外来性かつ代謝上安定な同族体の投与は、２−５Ａ欠陥を特徴とする障害に対し、特に動物および人間におけるレトロウィルス感染に対し保護を増大させる。ここに用いるｒ２−５　Ａ欠陥」という用語は、真正２−５Ａの生産低下をもたらす２−５Ａ経路の徴候、状態もしくは阻止および／またはＲＮアーゼＬの２−５Ａ依存型活性化の阻止を意味する。２−５Ａ欠陥を特徴とする病気はたとえば次のものを包含するニレトロウィルス感染、特にＨＴ　Ｌ　Ｖ感染、殊にＨＩＶ感染、慢性疲労、および皮膚Ｔ−細胞リンパ腫；慢性骨髄白血病；急性白血病；癌；Ｔ−細胞白血病；アルツハイマー氏病；パーキンソン氏病；多発性硬化症；自己免疫病：並びに手術−および他の外傷−誘発性の免疫機能不全。

欠陥は、たとえば慢性ウィルス感染、免疫細胞欠陥またはその両者によってもたらされる上記障害のような病気で出現する。２−５Ａ経路の欠陥は、特に慢性ウィルス感染および免疫細胞欠陥の両者を特徴とする病気にて顕著である。

３′−ヒドロキシル基などにおける２−５Ａ分子の構造的改変は２′−ホスホジェステラーゼおよび細胞核に対し代謝安定性が顕著に増大した２−５Ａ同族体を与えると共に、ＲＮアーゼＬを活性化させる能力を維持する。同様に、末端ヌクレオチドの置換による天然２−５Ａの改変も、一層安定な分子をもたらす。代謝的に安定な２−５Ａ同族体の持続する細胞内の高濃度は、その安定性増大の結果である。

２−５Ａ同族体に関する長持続性の薬理活性は一層好適な治療比を与える。これは、代謝上不安定である２−５Ａに対し投与の頻度を減少させる。投与頻度の減少は、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする多くの病気の慢性的性質に基づき重要である。

２−５Ａ同族体は、レトロウィルスによりもたらされる感染の処置に特に有用である。レトロウィルス感染に関連した２−５Ａ経路の欠陥は、ｄｓＲＮＡによる２−５Ａ合成酵素の活性化に対するウィルスの干渉によってもたらされる経路の失活からなっている。２−５Ａ合成酵素の活性化が存在しなければ、２−５Ａの生産およびＲＮアーゼＬの活性化が低下する。本発明によれば、外来性の代謝上安定な２−５Ａ同族体を、２−５Ａ経路におけるこのレトロウィルス起因の欠陥に対処すべく投与する。真正２−５Ａと同様に２−５Ａ同族体も、ＲＮアーゼＬを活性化してウィルスＲＮＡを開裂させることができる。

２−５Ａ同族体は、たとえば皮膚Ｔ−細胞リンパ腫をもたＴＬＶ−ＩＶのような各種のヒトＴ−細胞白血病ウィルス（総称してｒＨＴＬＶＪ）による感染に対する保護において特に有用である。ＨＴＬＶウィルスのそれぞれはレトロウィルスである。ｒＨＩＶ−１ｊとしても知られるＨＴＬＶ−ｍは、後天的免疫不全症候群（ｒＡＩＤｓＪ）をもたらす原因である。これら化合物は、さらにＨＩＶ−２（すなわち第２の血清学上具なるＨＩＶ亜種）を処置する際に有用であると思われる。以下、ｒＨＩ　ＶＪ　ハＨＩ　Ｖ−１もしくｌ；！ＨＩＶ−２のいずれか、並びに現在もしくは将来知られる他のＨＩＶ亜種を意味する。

ＨＴＬＶ−感染した患者（特にＨＩＶ−１感染した患者）は、血液単核細胞における異常に低い２−５Ａおよび／またはＲＮＮアーゼ活性のレベルを示すことが知られている。これに対し、健康な個人からの血液単核細胞は平均的に高い２５　Ａレベルを示し、ＲＮアーゼし活性を容易に検出することができる。同様に、慢性疲労に罹患した個人の血液単核細胞は低い２−５Ａレベルを示すと共に、正常な個人からの血液単核細胞で見られる特定の切断生成物とは異なる新規なＲＮＡ切断生成物の出現をもたらす。

プロトタイプのレトロウィルスとして一般的に見られるＨＩＶ−１感染の処置に関し本発明の実施を以下に例示するが、本発明の方法は病因がレトロウィルスからなる任意の病気の処置にも用途を有する。人間に感染する他のレトロウィルスは、たとえば上記した各種の非ＨＩＶ　　ＨＴＬＶ−ウィルスを包含する。

２−５Ａ経路の欠陥、特にレトロウィルス感染、殊にＨＩＶ感染を特徴とする各種の病気は、したがって病気状態に関連した２−５Ａ系の欠陥に対処すべく外来性の代謝上安定な２−５Ａの同族体を投与して処置することができる。

医薬用途には２’、５’　−オリゴアデニレート同族体を医薬上許容しうるキャリヤ中に吸収させることができる。本発明の医薬組成物を製造するためのこの種のキャリヤは、性質において有機もしくは無機の固体もしくは液体とすることができる。適する固体キャリヤはゼラチン、マイクロクリスタリンセルロース、乳糖、澱粉およびステアリン酸マグネシウムを包含する。適する液体キャリヤは水およびアルコール、たとえばエタノール、ベンジルアルコールおよびポリ（エチレングリコール）を包含する。注射用製剤のための好適な液体キャリヤは水、塩水溶液、デキストロース溶液およびグリコール溶液、たとえば水性プロピレングリコールもしくは水性ポリ（エチレングリコール）を包含する。組成物の性質は、たとえば粘度向上剤、表面活性剤、ｐＨ改変剤、保存料、甘味料、安定性向上剤、着色料、懸濁剤、顆粒化剤、被覆材、崩壊改変剤、噴射剤、乳化剤および保湿剤のような性質を有する１種もしくはそれ以上のアジュバントの添加によって向上させることができる。得られる組成物は溶液、懸濁液、錠剤、カプセル、軟膏、エリキシル、注射用組成物などの形態とすることができる。

投与量は感染もしくは疾患の程度、並びに患者の体型および体重に依存する。投与量は疾患の性質、並びに患者の体型および体重に応じて広範囲に変化することができる。１具体例によれば、化合物は水、燐酸塩緩衝塩水または他の適する液体における０、１〜１００ωｇ／ｍｌの溶液として製造され、或いは０．０１〜Ｉｇの活性化合物を含有する錠剤として製造することもできる。

これら化合物は水溶性塩として投与することができる。医薬上許容しうる水溶性塩は、たとえば活性化合物のナトリウム塩、カリウム塩およびアンモニウム塩を包含する。これらは水または塩水溶液に容易に溶解される。組成物は、たとえば砂糖もしくは蛋白質のような物質をさらに含有して浸透圧バランスを維持することができる。

２’、５’−オリゴアデニレート同族体は、２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする各種の症状を有する或いは罹患したと思われる或いは罹患の危険がある動物もしくは人間に対し約０、Ｉｍｇ〜約１ｇの量で投与することができる。１日の全投与量は、たとえば約０．００１ｇ〜約１ｇの範囲で変化しうるが、それより少ないまたは多い量も投与することができる。好適な１日投与量は約０．Ｏ１〜約０暑ｇの活性成分である。これら化合物は限定はしないが静脈注射、腹腔内もしくは筋肉内注射、並びに経口投与を包含する幾つかのルートで投与することができる。この種の投与を行なう技術は慣用であり、医学技術にて公知である。投与は１日当り数回の頻度で或いは毎週のような少ない頻度とすることができる。特にＨＩｖを処置するための静脈注射につき１ｍｌ当り約０．１〜約１．０ｍｇの活性成分を含有する溶液が好適である。

さらに　２Ｚ５／　−オリゴアデニレート同族体は２−５Ａ経路の欠陥を特徴とする病気状態に関連した皮膚の病巣を処置すべく局部投与することもできる。病巣もしくは感染領域を覆うのに十分な量の２’、５’　−オリゴアデニレート同族体の１種もしくはそれ以上を含有する製剤を施すことができる。活性成分の有効濃度は約１０−３〜ＩＯ’Ｍであり、約１０’Ｍが好適である。

慣用のキャリヤと共に投与する他に、２−５Ａ同族体を各種の特殊なオリゴヌクレオチドもしくは核酸供給技術により、たとえばユニラメラリポソームまたは再編成センダイウィルスエンベロブに包封することにより或いはたとえばポリ（Ｌ −リジン）のようなキャリヤ分子に結合させることにより投与することもできる。この種の方法は国際特許出願ＷＯ３９１０３６８３号に対応する本出願人による米国特許出願第１１２．５９１号に開示されており、その全開示を参考のためここに引用する。

２’、５’　−オリゴアデニレート同族体は次のように化学的に合成することができる。６−アミノ位置をベンゾイルで保護し、５′−位置をｐ−メトキシトリチルで保護し、かつ必要に応じ３′−位置をｔ−ブチルジメチルシリルで保護することにより、保護されたアデノシン−２′−ホスホジエステルを作成する。２ ′および３′−位置をアセチル、ベンゾイルももくしはｔ−ブチルジメチルシリルで保護して、保護ヌクレオシドを作成する。適する保護アデノシン−２′−ホスホジエステルの製造は、ｔ−ブチルジメチルシリル基をＮ６−ベンゾイル−５ ’　−０−（４−メトキシトリチル）アデノシンの３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル−異性−３′−ヒドロキシル基に付加して行なわれ、これは後者の化合物をピリジン中のイミダゾールを用いてｔ−プチルジメチルシリルクロライドと縮合させて３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル誘導体を生成させることにより行なわれる。誘導体のホスホリル化は、ピリジン中の２．５−ジクロルフェニル −ホスホロトリアゾリードを用いて適当に保護されたアデノシン−２′　−ホスホジエステルを生成させることにより行なわれる。この製造はＲ，チャルバラ、Ｅ、ウールマンおよびＷ、プファイデラー、リービッヒス・アナーレン・ヘミ− １第２３９２頁（１９８１）　、並びにＲ，チャルバラ、Ｗ、プファイデラー、テトラヘドロン・レタース、第２１巻、第４０７７頁（１９８０）に記載されており、これらを特に参考のためここに引用する。

保護されたアデノシン−２′−ホスホジエステルを縮合剤の存在下に保護ヌクレオシドと縮合させて、燐酸基を保護することにより完全保護されたジヌクレオシド−モノ−ホスホトリエステルを生成させる。

得られた完全保護の縮合物を次いで末端５′−位置にて脱トリチル化剤によりトリチル解除すると共に、他のアデノシン−２′−ホスホジエステルと縮合させ、上記のように保護して完全保護された２’、５’−１リヌクレオシドジホスホジトリエステル、すなわち２’、５’三量体コアを生成させる。完全保護された三量体コアを次いで適当な保護解除試薬で処理して、完全保護解除および２’、５ ’三量体コアへの変換を達成する。

或いは、２−５Ａ合成酵素のだめの基質であるヌクレオチドから形成される２’ 、５’　−オリゴアデニレート同族体は、米国特許出願筒４．４６４．３５９号の方法にしたがい酵素的に製造することもでき、その全開示を参考のためここに引用する。

三量体コア２’　、５’　−Ａ−Ａ−ａｒａ−Ａの製造はＪ。

エングルス、テトラヘドロン・レタース、第２１巻、第４３３９頁（１９８０）に報告されており、これを参考のためここに特に引用する。これによれば、ヌクレオシドＮ６．　２’　−０−。

３’　−０−トリベンゾイルアラビノ−フラノシルアデニンを完全保護されたＮ６，３’　−０−ジベンゾイル−５’　−０−トリチルアデニリル（２’−０− トリブロモエチル−５′）Ｎ”、３’−０−ジベンゾイルアデノシン−２’−０リブロモエチルシアンエチルホスフエート）と縮合させ、その際キノリン−８− スルホニル−３−二トロー１．　２．　４−）リアゾリードをカップリング剤として使用する。得られた三量体トリエステルの最終的保護解除は、三弗化硼素／メタノールでの脱トリチル化に続くトリブロモエチル部分の電気化学的な保護解除（陰極液におけるＣＨ３ＣＮＳＨｇプール、Ｎ　ａ　ＨＣＯ３）によって行なわれる。ジエステルの脱ベンゾイル化は、ブチルアミン／メタノールを用いてアデニリル（２’　、　　５’　）アデニリル（２’　、　　５’　”）　９−β −Ｄ−アラビノフラノシルアデニンを生成させることにより行なわれる。

２’、５’−１３の製造はチャルバラ等、テトラヘドロン・レタース、第２３巻、第４７８９頁（＋９８２）に記載されており、これを特に参考のためここに引用する。

三量体コア２’、５’　−キシロ−Ａ３および四量体コア２’　、５’−キシロＡ４の製造はＧ、グロセリンおよびＪ。

Ｌ、イムバッハ、テトラヘドロン・レタース、第２２巻、第４６９９頁（１９８１）に報告されてあり、これを参考のためここに引用する。これによれば、三量体および四量体コアであるキシロ−Ａ３およびキシロＡ　は、Ｎ６−３’　　− ０−ジベンゾイ弗化キシロフラノースをｔ−ブチルジメチルシリル−クロライドで処理してＮ６−３’　−〇−ジベンゾイル化ギシロフラノースのシリル化誘導体を生成させ、これをナトリウムメトキトで脱ベンゾイル化させて２′−シリル誘導体を生成させることにより合成される。２′−シリル誘導体の第１ヒドロキシルをモノメトキシトリチル基で保護し、得られた５′−トリチル化−２′−シリル誘導体をピリジン中に溶解された当モル量の無水安息香酸と４−ジメチルアミノピリジンの存在下に反応させて、Ｎ６および３−０−ベンゾイル化−５′− トリチル化−２′−シリル化誘導体を生成させる。弗化テトラブチルアンモニウムによるｔ−ブチルジメチルシリル基の除去はＮ６および３−０−ジベンゾイル化−５′−トリチル化誘導体を生成させ、これを順次にベンゾイル化すると共に脱トリチル化してＮ６，２’　、３’　　−０−）リベンゾイルキシロアデノシンを生成させる。

さらに前記Ｎ６および３−０−ジベンゾイル化−５′−トリチル化誘導体をアセトニトリル−ピリジン混合物中にて過剰量のＯ−クロルフェニルーホスホロージ（１，２，４−）・リアゾリード）と反応させ、次いで水性トリエチルアミンと反応させて、２′−ホスホトリエステルを生成させる。このホスホトリエステルを１−メシチレンスルホニル−３−ニトロ−１，２，４−）リアゾールの存在下にＮ６，２’　、３’−ｏ−ｈリベンゾイルキシロアデノシンと縮合させて、完全保護されたジヌクレオシドホスホトリエステルを生成させ、これをクロロホルムおよびメタノールの混液（４：　３）におけるｐ−トルエンスルホン酸で処理して脱トリチル化する。

トリチル解除された生成物とホスホトリエステルとの間の最終的縮合およびシリカゲルクロマトグラフィーによる精製は、完全保護されたトリヌクレオシドジホスホトリエステル（保護三量体コア）を生成する。完全保護解除された三量体コアは、保護三量体コアをテトラメチルグアニジニウム−５ｙｎ−４−二トロペンズアルドキシメートと水性アンモニアと８０％酢酸とでの処理により得られる。

ＥＨＮＡはエバンス等、ジャーナル・アメリカン・ケミカル・ソサエティ、第９２巻、第４７５１頁（１９７０）にしたがって製造される。その後、これを本明細書中に記載した保護、縮合および保護解除の方法にしたがい、適当に保護されたアデノシンと縮合させて２’　、５’　−ＥＨＮＡ−Ａ−Ａを生成させることができる。同様にして、２’　、５’　−Ｃ−Ｃ−ｄｓＦもｄＣＦとアデノシンとから製造される。ｄＣＦの製造方法は米国特許第３．９２３．７８５号およびベーカー等、ジャーナル・アメリカン・ケミカル・ソサエティ、第１０１巻、第６１２７頁（１９７９）に示されており、その両者を参考のためここに引用する。同様に、２−５Ａ同族体、すなわち５，６−シクロルベンズイミダジリルー（２’　、５’　）５．６−シクロルベンズイミダジリルー（２’　、５’　）５．６−ジクロルベンズイミダゾールリボシドは、市販の５，６−ジクロルベンズイミダゾールリボシド（シグマ社、カタログＮ（ＬＤ５８９３）を同様な方法で縮合させることにより製造される。

本発明の実施に用いられる２’　、　　５’　−オリゴアデニレート同族体の製造を、限定はしないが以下の実施例にて例示する。

２’、５’　−アデニレートの各種の構造改変された新規な三量体コア同族体は、一般に次のように製造することができる。

反応体ＣＩ）の一般式を有する適当に保護されたアデノシン−２′−ホスホジエステルの１ミリモルをＲ，チャルバラ、表１化合物化合物芯　　　　　　　　　　　　Ｎ。　　ＲＲＩＮ６−ベンゾイル−３’　− ０−１０ＳｉＴＢＤ　　２−クロルｔ−プチルジメルシリル−５′　　　　　　　　　フェニル−〇−ｐ−メトキシトリチルアデノシン−２−（２−クロルフェニル）−燐酸ピリジニウムＮ６−ペンゾイルー５’−０−２Ｈ２−クロルｐ−メトキシトリチル−３′−フェニルで三弗化硼素／ジエチルエーテルおよび沃化ナトリウムによりＣＨ３ＣＮ中で処理して（０℃、１時間）、３′　−イオドアセチル誘導体を生成させる。

このイオドアセチル誘導体をトルエン中でのトリブチル錫水素化物での処理（８０℃、１時間）およびテトラヒドロフラン中でのテトラブチル弗化アンモニウムでの脱シリル化によって化合物５まで変換させる。

この製造方法はＪ、エングルス、テトラヘドロン・レタース、第２１巻、第４３３９頁（＋９８０）に記載されており、これを参考のためここに引用する。

化合物６および７は、Ｎｏ−ベンゾイルアデノシンをピリジン中にて塩化トリチルで処理し、かつ２時間にわたり還流させて製造される。Ｎｏ−ペンゾイルー５ ′−トリチルアデノシンをクロロホルムでの抽出によって単離する。クロロホルム相からの水を、硫酸ナトリウムでの脱水によって除去する。Ｎｏ−ペンゾイルー２′、５Ｌジーｏ−トリチルアデノシンおよびＮｏ−ペンゾイルー３’、５’ 　−ジー０−トリチルアデノシンは、クロロホルム／エタノールにおける製造用シリカゲル薄層クロマトグラフによって単離される。化合物６および７は、単離された化合物をそれぞれ塩化ｎ−ペンチルおよび塩化ｎ−ヘプチルでベンゼン中の水酸化ナトリウムの懸濁物中における還流下に処理して製造される。酢酸中で還流させることにより溶液を中和し、次いでジエチルエーテルと水とを添加する。反応生成物をクロロホルムで抽出し、次いでクロロホルム：メタノール（４：　１）でシリカゲル板上にて薄層クロマトグラフにかける。酢酸中で１時間還流させ、冷却し、ジエチルエーテルで抽出し、次いで濃縮すると共に冷却してトリチルおよびベンゾイル基を除去することにより、結晶化合物６および７を生成させる。この製造方法はＨ，Ｕ。

ブランク、Ｄ、フランネ、Ａ、マイルスおよびＷ、プファイデラー、ジャスタス・リービッヒスやアナーレン・ヘミ−１第７４２巻、第３４頁（１９，７０）にしたがって行なわれ、これを参考のためここに引用する。

化合物８は次のように製造した。１ミリモルの３′−アミノ−３′−デオキシアデノシンをジメチルホルムアミド中にて１．２　ミリモルの１−メチル−３−ニトロフェニルエトキシカルボキシルイミダゾリウムクロライドと反応させ、次いでヘキサメチルジシラザンを添加して２’、５’および６−アミノ位置を保護した。ピリジン中の塩化ベンゾイル１．１ミリモルを室温で添加して、保護されたＮｏ−ベンゾイル−２′。

５′−ジシリルアデノシンを生成させた。この反応混合物をメタノール−ＮＨ３中に注ぎ入れて２′および５′シリル基を除去した。ピリジン中での塩化ＭＭＴｒとの反応は５′−ＭＭＴｒ誘導体を生成させた。次いで、ピリジンと１−メチルイミダゾールとの混液における塩化ｔ−ブチルジメチルシリルを５’　−ＭＭＴｒ誘導体および５′−説トリチル化誘導体に実施例１におけるように添加して化合物８を生成させた。

反応体（Ｉ）と（ｎ）とを合して、二量体（ｍ）の一般式を有する中間体を次のように製造した。０．９５ミリモルの反応体（ｎ）と縮合試薬２．　４．　６− トリイソプロビルベンゼンスルホニルクロライド（２ミリモル）および１−メチルイミダゾール（６ミリモル）とを合し、かつ室温にて１時間撹拌した。３０ｍ１の水性燐酸塩緩衝液（ｐ　Ｈ，７）を添加して反応を停止させ、かつ１５０ｍ１のクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を５０ｍ１の水で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで約１〜２時間にわたり脱水し、かつ濾過した。クロロホルムを小容量まで蒸発させ、次いでシリカゲルカラム（２０ｘ　２．５ｃｍ　）に施して精製した。クロマトグラフィーは、先ず最初にクロロホルムにより、次いでクロロホルム／メタノール（９９／Ｉ、ｖ　／　ｖ　）により行なって、二量体（ＩＩＩ）の一般式を有する完全保護されたジヌクレオシド−モノホスホトリエステル生成物を溶出させた。蒸発により、化合物１０〜１７（表３）に例示された二量体（ｍ）の固体フオームを得た。

表３化合物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　化合物Ｎｏ、　　ＲＲ”　　　　Ｒ’　　　　　　　　　Ｒ’　　Ｘ　　Ｎｏ−Ｒ且ＭＭＴｒ　　０５ｉＴＢＤ　ＯＢｚ　　　　　　　　　Ｂｚ　　　Ｎ　１３−　Ｈ２４ＭＭＴｒ　　０５ｉＴＢＤ　ＨＡＣＮ　１２　　ＨＱ　　　ＭＭｌｒｒ　　０５ｉＴＢＤ　　０５ｉＴＢＤ　　　　　　　５ｉＴＢＤ　　ＣＨ２ＯＨｎ麗ｒ　　０５ｉＴＢＤ　　０−Ｂ−Ｃ，ＨｌｌＢｚ　　　Ｎ　；Ｊ　　ＨＬＬ　　　ＭＭＴｒ　　０５ｉＴＢＤ　　０−２１−Ｃ，Ｈ，、Ｂｚ　　　Ｎ　　２２　　ＨＱ　　　ＭＩＭＴｒ　　ＨＯＢＺ　　　　　　　　　Ｂｚ　　　Ｎ　　２３　　Ｈ１１／９ルの完全保護された二量体（ＩＩＩ）をジクロルメタン／メタノール（４／１、ｖ　／　ｖ　）における２％ｐ−）ルエンスルホン酸２０ｍ１中で室温にて３０分間撹拌して脱トリチル化した。２０ｍ１の燐酸塩緩衝液（ｐ　Ｈ７）を添加し、次いで２００ｍ１のジクロルメタンで数回抽出した。有機相を水洗し、硫酸ナトリウムで脱水し、小容積まで蒸発させ、次いでシリカゲルカラム（２０ｘ　２．５ｃｍ　）に施して精製した。溶出はクロロホルム（４００ｍｌ　）に続きクロロホルム／メタノール（９８／２、ｖ／ｖ）で行なった。主フラクションの蒸発により脱トリチル化されたジヌクレオシドモノホスホトリエステル（二量生■ルを８０〜９０％収率で得、これは化合物１８〜２５により例示される（表３）。

三量体（ＩＶ）の一般式を有し、かつ化合物２６〜３４（下記表４）により例示される完全保護された２’、５’−１リヌクレオシドジホスホジトリエステルを、次のように５′　−脱トリチル化二量体（Ｉｎ）から製造した：表４化合物Ｎｏ−ＲＲ”　　　　Ｒ’　　　　　　　　　　Ｒ３ｙ。

２２　　　　　　Ｈ０５ｉＴＢＤ　　　　ＨＡｃ　　　　Ｎ２ＪＩ　　　　０５ｉＴＢＤ　　０ＳｉＴＢＤ　　　０ＳｉＴＢＤ　　　　　　　５ｉＴＢＤ　　ＣＨ２；ｌ　　　　０ＳｉＴＢＤ　　０５ｉＴＢＤ　　　Ｏ＋−Ｈ−Ｃ，ＨｌｌＢｚ　　　Ｎ３０　　　０ＳｉＴＢＤ　　０ＳｉＴＢＤ　　　０−ｒｌ−Ｃ，Ｈｌ、　　　　　　　Ｂｚ　　　Ｎ３４　　　０ＳｉＴＢＤ　　０５ｉＴＢＤ　　　ＯＢｚ　　　　　　　　　　Ｂｚ　　　Ｎ１．０５ミリモルの出発アデノシン− ２′−ホスホジエステル（反応体（Ｉ））を１０ｍ１の無水ピリジン中にて１ミリモルの５′−説トリチル化二量体（■）（化合物１８〜２５）と縮合させ、その際３ミリモルの２．　４．　６−１リイソプロピルーベンゼンスルホニルクロライドと９ミリモルの１−メチルイミダゾールとを縮合剤として用いた。後処理は、上記と同様に２時間後に行なった。燐酸塩緩衝液での反応停止に続くジクロルメタンでの抽出およびクロロホルムとクロロホルム／メタノール（９９／１〜９８／２　、ｖ／ｖ）におけるシリカゲルクロマトグラフィーにより、完全保護された三量体（ＴＶ）（化合物２６〜３４）を７０〜９０％収率にてクロマトグラフ上純粋な非晶質粉末として得た。

完全保護された２’、５’−）リヌクレオシドジホスホジトリエステル、すなわち三量体（ＩＶ）を次のように三量体コ１、ｖ／ｖ）における０、　０７３ｇのｐ−ニトロベンズアルドキシムと０．０７ｇのテトロメチルグアニジンとの溶液で室温にて１６時間処理することにより、０−クロルフェニル基を保護解除した。蒸発乾固させ、かつ水と共に４回蒸発させた後、２０ｍ１の濃水酸化アンモニウムを添加し、溶液を室温で２日間撹拌してアシル基を保護解除した。次いで溶液を再び蒸発させ、残留物を２５ω１の水に溶解させ、次いで１０ｍ１のクロロホルムでそれぞれ４回洗浄した。水相を蒸発乾固させると共に、１０ｍ１の無水ピリジンと共にそれぞれ１００回蒸させた。次いで残留物を無水ピリジン中の無水弗化テトラブチルアンモニウムの０．５Ｍ溶液２ｍｌで１６時間処理して、ｔ −ブチルジメチルシリル基を除去した。蒸発の後、５ｍｌの８０％酢酸による室温での６時間にわたる残留物の処理は、ｐ−メトキシトリチル基の除去を与えた。この溶液を再び蒸発させ、残留物を１５ｍ１の水に溶解させ、さらに５ｍｌのクロロホルムでそれぞれ４回抽出した。水層を蒸発させ、次いで酢酸の臭が消失するまで水と共に数回蒸発させた。残留物をｌ０ｍ１の水に溶解し、ＤＥＡＥ− セファデックスＡ−２５カラム（６０ｘ１ｃｍ　）に施して、０．００１〜０，５Ｍの重炭酸トリエチルアンモニウムの濃度勾配によりイオン交換クロマトグラフにかけた。主フラクションを蒸発させ、次いで水と共に数回蒸発させた。三量体コアシトジホスフェートを水溶液の凍結乾燥により単離して、７０〜９０％の非晶質固体を得た。三量体コア（Ｖ）は化合物３５〜４５により例示される（表５）。

実施例　２３’　−０−ｔ−ブチルジメチルシリルアデニリル（２’　、５’　）３’　− ０−ｔ−ブチルジメチルシリルアデニリル（２’　、５’　）アデノシンの製造０．０１ミリモルのＮ６−ペンゾイルー３’−０−ｔ−ブチルジメチルシリル− ５’　−０−ｐ−メトキシトリチルアデニリル（２／−０−クロルフェニル−５ ”）Ｎ６−ベンゾイル−３’　−０−ｔ−ブチルジメチルシリルアデニリル（２ ’　−。

−クロルフェニル−５’　”）Ｎ６，２’−０，３’　−０−ｈリベンゾイルアデノシン（化合物３１、表４）を実施例１の手順により処理したが、ただし弗化テトラブチルアンモニウムでの処理の保護解除工程は省略して２’　、５’　− Ａ　（ｓ　ｉ）Ａ　（Ｓ　ｉ）　Ａ　（化合物４０、表５）を製造した。

実施例　３アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５”）３′−アミノ−３′ −デオキシアデノシンの製造０．０１ミリモルのＮ６−ペンゾイルー３’−０− ｔ−ブチルジメチルシリル−５’　−ｏ−ｐ−メトキシトリチルアデニリル（２ ’−ｏ−クロルフェニル−５′）Ｎ６−ベンゾイル−３’　−０−ｔ−ブチルジメチルシリルアデニリル（２’　−。

−クロルフェニル−５’　）Ｎ６−ベンゾイル−２’　−０−を−ブチルジメチルシリル−３′−ｐ−ニトロフェニルエトキシカルボニルアミノ−３′−デオキシアデノシン（化合物３４、表４）を実施例１の保護解除工程によって処理し、この場合はｐ−ニトロフェニルエトキシカルボニル基をβ−除去工程で弗化テトラブチルアンモニウムによりシリル基と同時に切断した。その後の脱カルボキシル化は２’　、５’　−Ａ−Ａ−３′−アミノ（化合物４３、表５）を与えた。

実施例　４５’−０−ｐ−メトキシトリチルアデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２ ’　、５”）アデノシンの製造Ｒ，チャルバラ、Ｅ、ウールマンおよびＷ、プファイデラー、リービッヒス・アナーレン・ヘミ−１第２３９２頁（１９８１）の方法により製造した０、０１ミリモルのＮ６−ペンゾイルーａ’−ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−５’−０− ｐ−メトキシトリチルアデニリル（２’−ｏ−クロルフェニル−５′）Ｎ６−ベンゾイル−３’　−ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリルアデニリル（２１ｏ−クロルフェニル−５’　）Ｎ６．Ｎ６−２’−０，３’　−０−テトラベンゾイルアデノシンを実施例１の保護解除工程によって処理したが、ただし酢酸処理の最後の工程を省略した。生成物２’、５’　−トリチル−Ａ３（化合物４４、表５）を単離し、ＤＥＡＥ−セファデックスＡ−２５クロマトグラフィーにより精製し、かつ凍結乾燥して非晶質の純粋化合物４４を粉末として８５％収率で得た。

実施例　５５′−〇−ｐ−メトキシトリチルー３′　〜デオキシアデノシン（２’　、　　５”）　３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデノシンの製造Ｒ，チャルバラおよびＷ、プファイデラー、テトラヘドロン・レタース、第２１巻、第４０７７　　頁（１９８０）の方法により製造した０、０１ミリモルのＮ６−ベンゾイル−５’　−ｏ−ｐ−メトキシトリチル−３′−デオキシアデニリル（２’　−ｏ−クロルフェニル−５”）Ｎ６−ペンゾイルー３′ −デオキシアデニリル（２’　−ｏ−クロルフェニル−５’　）Ｎ６．Ｎ６゜２ ’−０−）リベンゾイル−３′　−デオキシアデノシンを実施例１の保護解除工程によって処理したが、ただし弗化テトラブチルアンモニウムと酢酸とによる処理の工程を省略した。

生成物２’、５’−１リチルーＣａ（化合物４５、表５）を単離し、ＤＥＡＥ− セファデックスＡ−２５クロマトグラフィーにより精製し、かつ凍結乾燥して非晶質の純粋化合物を生成させた。

本発明の三量体コア分子の５′−モノホスフェートは、実施例１におけると同様な脱トリチル化に続く塩化ジーｐ−二トロフェニルーエチルホスホリルとの反応により、完全保護された２’、５’−１リヌクレオシドジホスホジトリエステルから製造することができる。実施例１にしたがう抽出、クロマトグラフィーおよび保護解除により、５′−モノホスフェート三量体を単離する。この製造を実施例６の方法で例示５’　−ｏ−ｐ−ホスホリル−３′−デオキシアデニリル（２ ’　、５’　）３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）シトリチル−３ ′　−デオキシアデニリル（２’　−ｏ−クロルフェニル−５′）Ｎ６−ペンゾイルー３′−デオキシアデニリル（２’　−ｏ−クロルフェニル−５’　）Ｎ６．Ｎ６−２’−〇−トリベンゾイルー３′−デオキシアデノシンを、ベンゾイル化と５′　−トシル化と２′−ホスホリル化とにより３′−デオキシアデノシンから製造すると共に、ジヌクレオシドホスホトリエステル、すなわちＮ６−ベンゾイル−（２−〇−クロルフェニルホスホリルー５）３’　−デオキシアデノシンを、トリイソプロビルベンゼンスルホニルｍ＝トロ−１，２，４−トリアゾリードでの反応生成物Ｎ６−ベンゾイル（２−トリエチルアンモニウム−〇−クロルフェニルホスホリルー５）−５’　−トシル−３′−デオキシアデノシンおよび２′−シアノエチルホスホリル−〇−クロルフェニルー３′−デオキシアデノシンの処理によって形成させた。このように生成された完全保護の二量体をＮ” 、２’　−０−ジベンゾイル−３′−デオキシアデノシンと縮合させて三量体を生成させた。Ｒ，チャルバラおよびＷ、プファイデラー、テトラヘドロン・レタース、第２１巻、第４０７７頁（＋９８０）の方法により製造された０、　０］ｍＭのこの三量体をジクロルメタン／メタノール（７／３、ｖ　／　ｖ　）における２％ｐ−トルエノスルホン酸の溶液２ｍｌで室温にて３０分間処理して、ｐ −メトキシトリチル基を除去した。クロロホルム／メタノール（９５１５、Ｖ　／　Ｖ　）を用いた製造用プレートにおけるシリンゲルクロマトグラフィーによる精製は９０％収率の５′−保護解除同族体を与えた。

この生成物を１ｍｌの無水ピリジン中に溶解し、ヒンメルスバッハおよびＷ、プファイデラー、テトラヘドロン・レタース、第２３巻、第４９７３頁（１９８２）に記載されたように０．２７ミリモルの塩化ジニトロフェニル−エチル−ホスホリルで室温にて１時間処理した。１５ｍ１のクロロホルムで希釈した後、反応混合物を燐酸塩緩衝液（ｐ　Ｈ７）で３回抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、蒸発させ、かつ１０ｍ１のトルエン共にそれぞれ３回蒸発させた。残留物をクロロホルム／メタノール（９／　１　、ｖ　／　ｖ　）における製造用プレートでのシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、８１％収率の５′−〇−ジーｐ−ニトロフェニルエチルホスホリル−Ｎ６−ペンゾイルー３ ′−デオキシアデニリル−（２’　−。

−クロルフェニル−５′）−Ｎ６−ペンゾイルー３′−デオキシアデニリル（２ ’　−０−クロロフェニル−５’　）Ｎ６゜Ｎ６，２’　−０−トリベンゾイル −３′　−デオキシアデノシンを非晶質固体として得た。

この物質０．０１ミリモルを実施例１の保護解除工程により０−ニトロペンズアルドシキメートで処理して、０−クロルフェニル保護基を除去した。蒸発乾固させ、かつ無水ピリジントと共に数回蒸発させた後、保護解除された生成物を無水ピリジン中のジアザビシクロ［４，３，０］　ウンデセンの０．５Ｍ溶液１０ｍ１に溶解させ、室温で３６時間撹拌してβ−除去によりｐ−ニトロフェニルエチル基を切断した。この溶液を再び蒸発させ、次いで２０ｍ１の濃水酸化アンモニウムにより室温にて２４時間処理した。主フラクションのＤＥＡＥ−セファ：製および単離を行なった。

本発明の四量体コア分子は、実施例７もしくは８の方法にしたがって製造することができる。

実施例　７アデニリル（２’　、５’　）アデニリル（２’　、５”）３’　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３’　−デオキシアデノシンの製造０．５ミリモルの式（ＶＩ）を有する完全保護された化合物４７と０．４　ミリモルのＮ６−ペンゾイルー３′−デオキシアデニリル（２／　　　、−クロルフェニル−５’　）Ｎ６，２’　　−Ｏ−ジベンゾイル−３′−デオキシアデノシン（化合物２４、表３）とを５ｍｌの無水ピリジン中に溶解させた。

１ミリモルの塩化２，４．６−トリイソプロビルベンゼンスルホニルと３ミリモルの１−メチルイミダシンとを添加した後、混合物を室温にて２時間撹拌した。

溶液を４００ｍ１のクロロホルムで希釈し、４００ｍ１の水で２回洗浄し、次いで有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、かつ蒸発乾固させた。

残留物を５０ｍ１のトルエンと共に２回蒸発させた。先ず最初にクロロホルムにより、次いでクロロホルム／メタノール９９／１〜９８／２　　（ｖ／ｖ）の濃度勾配によりシリカゲルカラム（２０ｘ　２．５ｃｍ　）上でクロマトグラフにかけて精製を行なった。

蒸発させると、主フラクションは化合物４８（表６）を固体フオームとして８０％収率で与えた。化合物４８は、下記四量体コアの一般式（■）にしたがう完全保護された２’、５’−テトラヌクレオシドトリホスホトリトリエステルである。

保護基の保護解除を実施例１の手順により行なって２′。

５’　−Ａ−Ａ−Ｃ−Ｃ（化合物４９、表６）を得た。

ＤＥＡＥ−セファデックスクロマトグラフィーと蒸発と凍結乾燥とは非晶質固体を８０％収率で与えた。

化合物ＮＣＬ　　ＲＲＩ　　　　　Ｒ２Ｒ３４８Ｂｚ　　ＭＭＴｒ　　５ｉＴＢＤ　　２−クロルフェニル４９　　　ＨＨＨ実施例　８３′　−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３′　−デオキシアデニリル（２’　、５”）３′−デオキシアデニリル（２’　、５’　）３′−デオキシアデノシンの製造０．１　ミリモルのＮ６−ベンゾイル−５’　−ｏ−ｐ−メトキシトリチル−３ ′　−デオキシアデニリル（２’　　−ｏ−クロルフェニル−５’　）Ｎ６−ペンゾイルー３′−デオキシアデニリル（２’　　−ｏ−り咀トフェニル−５’　）Ｎ６．Ｎ６，２’−〇−トリベンゾイルー３′−デオキシアデノシン（化合物５０、表７）、すなわち反応体（■）の一般式による完全保護された２’、５’ −）リスク１ノオシドジホスホジトリエステル：表７化合物魔　　　　　Ｒ５０ＭＭＴ　ｒ５１　　　　　　　Ｈを、ジクロルメタン／メタノール（４／Ｌｖ／ｖ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の２％溶液２ｍｌで室温にて３０分間処理した。２０ｍ１の燐酸塩緩衝液（ｐ　Ｈ７）を添加することにより反応を停止させた。この溶液を２００ｍ１のクロロホルムで数回抽出した。有機層を水洗し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、次いで小容積まで蒸発させ、クロロホルム／メタノール（９５１５、ｖ／ｖ）にて製造用シリカゲル板で精製した。

クロロホルム／メタノール（４／Ｌ　ｖ／ｖ）により主バンドを溶出させて、蒸発に際し８０％収率で５′−説トリチル化された化合物５１（表７）を得た。

次いで　０．０５ミリモルの化合物５１（表７）を、０．２ミリモルの塩化２．４．６−１リイソプロピルベンゼンースルホニルと０．６　ミリモルの１−メチルイミダゾールとの存在下に無水ピリジン０．６ｍｌにおける０、１　ミリモルのＮ６−ベンゾイル−５’　−ｏ−ｐ−メトキシトリチル−３′−デオキシアデノシン−２’　−（２−ｏ−クロルフェニル）燐酸ピリジニウム（化合物２、表１）と室温にて２時間にわたり縮合させた。

溶液を１００ｍ１のクロロホルムで希釈し、水で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、次いで小容積まで蒸発させて、クロロホルム／メタノール（９５１５、ｖ／ｖ）における製造用シリカゲル板で分離した。クロロホルムにより主バンドを溶出させて、完全保護された２’、５’　−テトラヌクレオシドトリホスホトリトリエステル化合物５２（下記表８）を蒸発に際し８４％収率で非晶質固体として得た。

実施例１の手順に続＜ＤＥＡＥ−セファデックスクロマトグラフィーおよび凍結乾燥により、化合物５２の保護基を除去した。四量体コア２’　、５’　−Ｃ− Ｃ−Ｃ−Ｃ（化合物５３、表８）が非晶質固体として７０％収率で得られた。化合物５３の構造は、四量体コアの一般式（ＩＸ）を有する。

本発明による四量体コア分子の５′−〇−モノホスフェートは、完全保護された２’、５’　−テトラヌクレオシドトリホスホトリトリエステルから、実施例１におけると同様な５′−説トリチル化に続く塩化ジ−ｐ−ニトロフェニルエチルホスホリルとの反応により製造することができる。実施例１にしたがう抽出とクロマトグラフィーと保護解除とにより、５’−０−モノホスフェート四量体を単離した。この製造は化合物５２　　　　　Ｂｚ　　　　ＭＭＴｒ　　　２−クロルフェニル５３　　　　　ＨＨＨ本発明による三量体および四量体コア分子の５′−ジホスフェートおよび５′− トリホスフェートは、５ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解された０、　５ｍＭのピロ燐酸トリブチルアンモニウムをジメチルホルムアミド１ｍｌにおける無水トリブチルアンモニウム塩としての０．１ｍＭのモノホスホリル化コアおよび０．５ｍＭの１，１′　−カルボニルジイミダゾールに添加して製造することができる。室温にて２０時間の後、これら反応体を５ｍｌのメタノールで処理し、蒸発乾固させ、次いで２×１０ｃｍのＤＥＡＥセルロースカラムでのクロマトグラフにかける。５′−ジーおよびトリーホスフェートを重炭酸トリエチルアンモニウムの直線濃度勾配（ｐＨ７，５における３リツトル中の０〜０．４Ｍ）にしたがって単離する。これはり、　　Ｅ。

フォードおよびり、　　Ｇ、オツド、ジャーナル・アメリカン・ケミカル・ソサエティ、第８７巻、第１７８５〜１７８８頁（１９６５）の方法であり、これを参考のためここに引用する。次いで５′−ジホスフェートと５′−トリホスフェートとをＤＥＡＥ−セファデックスＡ２５およびセファデックスＧ−１０のクロマトグラフィーにより精製することができる。

２′−末端ヌクレオシド、アグリコンおよび／またはリボシル成分における２’ 、５’　−オリゴアデニレート分子の構造改変は、ウィルス複製（特にたとえばＨＩＶのようなレトロウィルスの複製）の有力な阻止剤である分子を与えた。これらの合成分子は、天然に存在する２’、５’　−オリゴアデニレート分子よりも生物学的に活性でありかつ代謝的に一層安定である。

本発明の化合物の抗ウィルス活性を次の実験的方律で示すが、実験はそこでの同族体を、明細書で化合物につき開示した効能を備える本発明のコア化合物又はその５゛モノ−、ジーもしくはトリホスフェートの対応物と置き換えることができる。

実験によれば、２’　、５’　−オリゴアデニレート同族体は、インビトロでＨＩＶ−１逆転写酵素の活性を阻止し、ＨＩ　Ｖ−１感染から目標細胞を保護することが観察された。

実施例　９逆転写酵素活性の阻止細胞およびウィルス高度にＨＩＶ−１を許容性のＴ−細胞ラインＭＴ−２［ミヨシ等、ネイチャー、第２９４巻、第７７０〜７７１頁（１９８１）コの細胞を感染用の標的細胞として使用すると共に、ＨＩＶ−１（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ８）を用いてＨ９細胞を作成した［ボボビック等、サイエンス、第２２４巻、第４９７〜５００頁（１９１１４）］。

保存培養物を増殖させると共に、１２％の熱失活させた胎児牛血清と５０μｇのゲンタマイシン／　ｍ　ｌとを含有するＲＲＭＩ−１６４０中に維持し、３７℃ で培養した。感染の倍率（すなわち感染性ウィルス粒子／細胞）として示されるこの試験でのウィルス測定値は、モンテフィオリ等、ジャーナル・クリニカル・マイクロバイオロジー、第２６巻、第２３１〜２３５頁（１９８７）に記載されたように、ＭＴ−２細胞における終点の微小滴定により得られる５０％組織培養感染投与値から計算した。

逆転写酵素分析ウィルスを、細胞フリー（０，４５μモルー濾過）の状態調節されたＨ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩＢ培養上澄液からベックマンＪＡ−２０型ロータにより２０℃で１８．０００ｒｐｃにて４時間遠心分離することにより濃縮した。５０ｍ１の状態調節された培養液から得られたウィルスペレットを、１７ｍＭのトリス−ＨＣｌ　　（ｐＨ７，８）と３ｍＭのジチオスレイトール（ＤＴＴ）と５５ｍＭのＫＣＩと０．３２％ｗ／ｖのトリトンＸ−１００と３３％のグリセリンとを含有する溶液０５ｍ１に溶解させた。このウィルス溶解物を一２０℃にて貯蔵し、ＨＩＶ −１逆転写酵素の原料として使用した。逆転写酵素反応を、４０ｍＭのトリス− ＨＣＩ（ｐＨｄＴＴＰ　（８０Ｃｉ／ミリモル、ＮＥＮ）とポリ　（Ａ）　　・（ｄＴ）　　　　（２，５μｇ／ｍｌ）の雛型プライマーとを含有する１００μ ｍの反応容積にて、ｊＯμＩの酵素を添加した後に行なった。反応容積が一定となるよう水容量を調節した後に阻止剤を種々の濃度で添加した。反応物を湿潤環境下で３７℃にて１時間培養し、次いで２ｍｌの１０％冷トリクロル酢酸を添加することにより停止させた。沈殿物を０．４５μｍの酢酸セルロース−ミリポアフィルタに集め、次いでこれを１０ｍ１の３ａ７ＯＢ水性シンチラントに溶解させ、ベックマンＬ　８６８００型液体シンチレーション分光光度計により毎分のカウント数を定番化合物の抗ＨＪＶ−１活性をモンテフィオリ（上記）により上記されたようなインビトロのマイクロ滴定感染分析により検出すると共に定量化した。要するに、ＭＴ−２細胞を２倍の一連の作用体希釈物を含有する９６穴の微小希釈プレートにて３反復で添加した。ウィルスを１の感染倍率で添加すると共に、これらプレートを湿潤５％ＣＯ２／空気環境下で３７℃にて４日間にわたり培養した。次いでポリーＬ−リジン付着性細胞の致命的な染料（中性界）吸収により、生存細胞を細胞病理作用の尺度として定量化した。この時点で、ウィルス比較穴（作用体の不存在下における細胞およびウィルス）は９０％より大きい細胞溶解を示した。保護％は、細胞比較穴（ウィルスおよび作用体の不存在下における細胞）とウィルス比較穴との間で生じたＡ　　　測定値の範囲により規定した。

細胞毒性分析細胞毒性は上記の微小希釈板におけるＭＴ〜２細胞を用いて定量化し、ただしウィルスを省略すると共にウィルス比較穴の代わりに空（ブランク）穴を用いた。

細胞比較穴とブランク穴との間で生じたＡ　　　測定値の範囲を用いて、３日間の培養後に試験穴における生存細胞％を計算した。

ＨＩＶ−１逆転写酵素活性に対する２−５Ａの同族体の効果を表９および図１に示す。酵素活性の濃度依存性阻止は、たとえば２’、５’−コルジセピン三量体コア（Ｃ３）、三量体５′モノ−、ジーおよびトリーホスフェ−）（ｐＣａ、ｐ２Ｃ３、ｐｓＣａ）　、２’　、５’　　−コルジセピン四量体５′−モノホスフェート（ｐＣ４）、並びに２’　、５’　−Ａ−Ｃ−Ａで観察された（図１）。２’、５’　−コルジセピン三量体５′−トリホスフェート（ｐ３ｃ３）は最も効果的な阻止剤（６０μモルにて１００％の阻止）であり、次いで５．６−シクロルベンズイミダゾールリボシド　２ｒ、５ｔ　−三量体（２００μモルにて７３％の阻止）、２’、５’　　ｐＣ４（１００μモルにて５８％の阻止）　、２’　、５’　−Ａ−Ａ−ａ　ｒ　ａ−Ａ　（２００ｕモルにて５３％の阻止）および２’、５’−Ａ−Ｃ−Ａ　（２００μモルにて５０％の阻止）の順であった（表９）。

ＨＩＶ−１逆転写酵素活性に対する２−５へ同族体の効果２−５Ａもしくは２’ 、５’　　　　　　濃度　　　　　。

同族体　　　　　　　　　　（μモル）　阻止％（アデノシン）Ａ　　　　　　　　　　　　４００　　　０フルジセピン（Ｃ）　　　　　　　　　　　４００　　　０Ａ−Ｃ−Ｃ２００４２Ａ−Ａ−Ｃ２００１６Ｃ−Ａ−Ｃ２００３６ｂＡ−Ｃ−Ａ　　　　　　　　　　　　　２００　　　５８Ａ−Ａ−Ｃ−Ｃ２００３５ｂＡ−Ａ−Ｃ−Ａ　　　　　　　　　　　２００　　　　７ｐｉ３　　　　　　　　　　　　２００　　　３５Ａ−Ａ−ａｒａ−Ａ　　　　　　　　　　　　２００　　　　５３Ｔｕ−Ｔｕ−Ｔｕ　　　　　　　　　　　　　２００　　　　４１キシロ−Ａ４　　　　　　　　　　２００　　１５Ａ−Ａ−Ａ−３’　−アミノ　　　　　２００　　　４３ＥＨＮＡ−Ａ−Ａ　　　　　　　　　　　　２００　　　　３６５．６−シクロルベンズイミダ　　　２００　　　７３シリル（２’　、　５’　）　−５，６−シクロルベンズイミダジリル（２’　、５’　）　−５，６−シクロルペンズイミダゾールリボシド註ａ：比較反応（すなわち阻止剤が存在しない）の数値は１ｇ０．０００ｃｐｍよりも大であったのに対し、ブランク反応（酵素が存在しない）の数値は１２．０００ｃｐｍ未満であった。

ｂ：２回もしくはそれ以上の実験の平均値。

成る種の２−５Ａ同族体による感染分析の結果を図２に示す。図２を参照して、濃度依存性の抗ＨＩＶ−１活性は２′。

５′−コルジセピン三量体コア（Ｉ）および５′−モノホスフェートにつき８〜２５０μモルの外来性濃度にて観察されまた２’　、　　５’　−Ａ−Ｃ−Ａ　（Ｖ）については１〜８μモルで観察された。これらの活性は、不整合ｄｓＲＮＡ（データ示さず）により与えられる最適な抗−ＨＩＶ−１活性のそれぞれ８４％、８０％および８１％であった。これは、不整合ｄｓＲＮＡがインビトロにて有力な抗−ＨＩＶ薬剤であることを考慮すれば、極めて顕著な抗−ＨＩＶ活性である［モンテフィオリ等、プロシーディング・ナショナル・アカデミ−・サイエンス、ＵＳＡ、第８４巻、第２９８５〜２９８９頁（１９８７）］。

より低い強度の濃度依存型抗−ＨＩＶ−１活性が、２′。

５　’　　　ｐ　Ｃ４（■）につき１２．５〜５０μモルにて観察された。

最も効果的な濃度にてＣ３およびＡ−Ｃ−Ａにつき細胞毒性は観察されなかったのに対し、これら最適な抗ウイルス濃度にてｐＣ３およびｐ　Ｃ４につき若干の毒性が観察された。

これに対し、コルジセピン（Ｉ）　　（０，３１〜１０μモル）と２’、５’− オリゴアデニレート三量体コア（Ｉｔ）　　（８〜２５０　μモル）は、抗ウィルス活性を示さなかった。コルジセピンにつき２．５μモルより高い外来性濃度にて細胞毒性が観察されたのに対し、試験した２’、５’　−オリゴアデニレート三量体コアの全ゆる濃度にて毒性は観察されなかった。

２’、５’　−コルジセピン四量体５′−モノホスフェート（Ｖｌ）はインビトロニテ弱い抗−ＨＩＶ−１活性（１２，５〜５０μ５０μ外来性濃度にて３０〜３８％の保護）を示したのに対し５０μモルより高い濃度は細胞に対し毒性であった（データ示さず）。

同じ感染分析において、２’　、５’−キシロ−Ａ４は１５０μモルの濃度にて１００％の阻止（７５μモルにて９１％）を示したのに対し、２’　、５’　− Ａ−Ａ−Ａ−３’　−アミノは７５μモルにて１００％の阻止を与えた。これら投与量にて毒性は観察されなかった。

他の薬剤と組み合せた場合、２−５Ａ同族体は抗−ＨＩＶ活性に関し次の実験で示したように相乗作用を示すことかで組換α−インターフェロン（ｒＩＦＮ−α １）、およびインターフェロンの不整合ｄｓＲＮＡ誘発体のインビトロにおける抗ウィルス活性を強力化させ或いは低下させる２′。

５’−Ｃ３の能力を試験した。標準チェッカーボード分析を各薬剤の単独および組合せに関する８種の無毒性濃度にて行なった。データについては、チャウおよびタレイ、アドバンスト・エンザイム・レギュレーション、第２２巻、第２７〜５５頁（１９８４）の方法により分析した。要するに、組合せ薬剤効果を保護値％から計算した。組合せ指数（ＣＩ）を投与量−作用曲線の傾斜から計算すると共に、保護値％または感染割合に対しプロットした。〈１のＣＩ値は相乗効果を示す。〉１の数値は拮抗作用を示す。１に等しい数値は加算作用を示す。

これらの結果を図３に示す。２’、５’　−コルジセピン三量体コアは、ｒＩＮＦ−αＡと不整合ｄｓＲＮＡとの両者に関し、試験した各薬剤の最大有効投与量にて強力な相乗作用を示した。相乗作用は、不整合ｄｓＲＮＡよりもｒＩＦＮ− αＡにつき強力であった。

合成法もしくは分析法に関し上記した全ての引例を、ここに参考のため引用する。

本発明はその思想および本質的な特徴を逸脱することなく他の特定構成でも実施することができ、したがって本発明の範囲は上記説明のみでなく以下の請求の範囲を参照すべきである。

ＲＴ活性の阻止　％感染割合感染割合国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】

１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは１〜８の数であり、ｍは０、１、２もしくは３であり、Ｒは同一もしくは異なるものであって水素、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシおよび−ＯＳｉ−（ＣＨ３）２Ｃ（ＣＨ３）３から選択され、ただし同一化合物において全Ｒ基が水素であってはならない］の少なくとも１種の化合物またはその医薬上許容しうる塩を哺乳動物に投与することを特徴とする２−５Ａ経路の欠陥を有する障害にっき哺乳動物を処置する方法。
２．ｎが１〜３である請求の範囲第１項記載の方法。
３．２′−末端ヌクレオチドのＲ基が水素以外のものである請求の範囲第２項記載の方法。
４．レトロウイルスによる感染を処置するための請求の範囲第１項記載の方法。
５．ＨＩＶ感染を処置するための請求の範囲第４項記載の方法。
６．各Ｒが同一もしくは異なるものであって水素およびヒドロキシルから選択される請求の範囲第２項記載の方法。
７．化合物を３′−デオキシアデニリルー（２′，５′）−３′−デオキシアデニリル（２′，５′）−３′−デオキシアデノシン、その５′モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
８．化合物が５′−トリホスフェートまたはその医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第７項記載の方法。
９．化合物を３′−デオキシアデニリル−（２′，５′）−３′−デオキシアデニリル（２′，５′）−３′−デオキシアデニリル（２′，５′）−３′−デオキシアデノシン、その５′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲の第６項記載の方法。
１０．化合物をアデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデニリル（２′，５ ′）３′−デオキシアデノシン、その５′モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１１．化合物をアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデノシン、その５′モノー、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１２．化合物を３′−デオキシアデニリルー（２′，５′）−アデニリル（２′ ，５′）３′−デオキシアデノシン、その５′−モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１３．化合物をアデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデニリル（２′，５ ′）アデノシン、その５′モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１４．化合物がアデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデニリル（２′，５ ′）アデノシン、またはその医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第１３項記載の方法。
１５．化合物をアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）−３′− デオキシアデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデノシン、その５′モノ− 、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１６．化合物をアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデニリル（２′，５′）アデノシン、その５′モノ−、ジ−およびトリ −ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第６項記載の方法。
１７．各Ｒが同−もしくは異なるものであって水素およびアミノから選択される請求の範囲第５項記載の方法。
１８．化合物をアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）３′−アミノ−３′−デオキシアデノシン、その５′モノ−、ジ−およびトリ−ホスフェート、並びにそのいずれかの医薬上許容しうる塩よりなる群から選択する請求の範囲第１７項記載の方法。
１９．化合物がアデニリル（２′，５′）アデニリル（２′，５′）３′−アミノ−３′−デオキシアデノシンまたはその医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第１８項記載の方法。
２０．次の化合物、またはその５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩：３′−デオキシアデニリル（２′，５′）３′−デオキシアデニリル（２′，５ ′）−（Ｒ）−３−（２−デオキシ−β−Ｄ−エリスロペントフラノシル）−３，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｄ］［１，３］ジアゼピン−８ −オール、アデニリル（２′，５′）アデニリル（２′，５′）ツベルシジン、ツベルシジル（２′，５′）−ツベルシジル（２′，５′）−ツベルシジン、アデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）−９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン、イノシニリル（２′，５′）−イノシニリル（２′，５′ ）−イノシン、キシロアデニリル（２′，５′）−キシロアデニリル（２′，５′）キシロアデノシン、キシロアデニリル（２′，５′）−キシロアデニリル（２′，５′）−キシロアデニリル（２′，５′）−キシロアデノシン、エリスロ−９（２−ヒドロキシ−３−ノニル）−アデニリルー（２′，５′）− アデニリル（２′，５′）−アデノシン、５，６−ジクロルベンズイミダジリル（２′，５′）−５，６−ジクロルーベンズイミダジリル（２′，５′）−５，６−ジクロルベンズイミダゾールよりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を哺乳動物に投与することを特徴とする２−５Ａ経路の欠陥を有する障害につき哺乳動物を処置する方法。
２１．レトロウイルスによる感染を処置するための請求の範囲第２０項記載の方法。
２２．ＨＩＶ感染を処置するための請求の範囲第２１項記載の方法。
２３．化合物が３′−デオキシアデニリル（２′，５′）−３′−デオキシアデニリル（２′，５′）−（Ｒ）−３−（２−デオキシ−β−Ｄ−エリスロペントフラノシル）−３，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｄ〕［１，３］ジアゼピン−８−オール、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２４．化合物がアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）ツベルシジン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２５．化合物がアデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）−９−β −Ｄ−アラピノフラノシルアデニン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはその医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２６．化合物がイノシニリル（２′，５′）−イノシニリル（２′，５′）イノシン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２７．化合物がキシロアデニリル（２′，５′）−キシロアデニリル（２′，５ ′）−キシロアデノシン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２８．化合物がキシロアデニリル（２′，５′）−キシロァデニリル（２′，５ ′）−キシロアデニリル（２′，５′）キシロアデノシン、その５′モノ−、ジ −もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
２９．化合物がツベルシジリル（２′，５′）−ツベルシジリル（２′，５′）ツベルシジン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
３０．化合物がエリスロ−９−（２−ヒドロキシ−３−ノニル）−アデニリル（２′，５′）−アデニリル（２′，５′）アデノシン、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しうる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。
３１．化合物が５，６−ジクロルベンズイミダジリル（２′，５′）５，６−ジクロルベンズイミダジリル（２′，５′）−５，６−ジクロルベンズイミダゾールリボシド、その５′モノ−、ジ−もしくはトリ−ホスフェート、またはそのいずれかの医薬上許容しる塩からなる請求の範囲第２０項記載の方法。