JPH03503536A - 敗血症または敗血症ショックの処置または予防のための組成物および方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 敗血症または敗血症ショックの処置または予防のための組成物および方法ル咀Ｏ 賀玖 本発明は敗血症または敗血症ショックの処置または予防のための組成物および方 法に関する。注目ｔべき特徴において、本発明は存在する細菌感染の処置に加え て、更に敗血症ショックに寄与する凝血システムにおけるＩＩＩ害を軽減する組 成物および方法に関する。

敗血症は主どして入院患者であって、通常疾患を有し、ている者についてその疾 患が患者に血流侵入を起こり易くすることによって発生ずる。殆どの敗血症の場 合に、支配的な病原菌はニジｌリヒア・コリ（Ｅｓｅｈｅｒｉｅｈｉａ　ｅｏＨ ）　、引き続いてクレブシェラーエンテロバクターーセラディア族（Ｋｌｅｂｓ ｉｅｌ　１ａ−Ｅｎｔｅｒｏ〜ｂａｃｔｅｒ−３ｅｒｒａｔｉａ　ｇｒｏｕｐ　 ）　、そしてシェードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　）である。

性尿器路が最も一般的な感染の部位であり、胃腸路および呼吸路が次に最も頻度 の高い敗血症源である。その他の一般的な病巣は創傷、火傷および骨盤感染なら びに静脈内カテーテルである。

ダラム陰性菌は病院の患者における宿命的な細菌感染の主要な原因となる。

抗生物質の利用およびｍ補的な支援技術にも拘らず、ダラム陰性菌罹患患者の死 亡率は過去２０年間に４０％に接近し、ていた。これらの細菌は、医薬に対し比 較的不浸透性である隔膜および全てのダラム陰性菌により生成される内毒素では あるが、たとえ細菌細胞が破壊された後であっても致死の毒性を残すものによっ て区別される。このＪ：うに、ダラム陰性菌感染の致死性は生活力のある細菌の 制御できない成長および内毒素の解放の両者に起因する。

非常に大きな構造的多様性を有し、かつダラム陰性菌に特有である内毒素は細菌 細胞の外Ｊｌｌ膜のリボ多糖（”ＬＰＳ”）成分と関連している。異なった細菌 種からのＬＰＳは構造的に類似である。

ダラム陰性菌菌血症の容易ならぬ結果は屡々敗血症ショックを引き起こす。

敗血症ショックは不適切な組織潅流、組織に対する不十分な酸素供給を導くこと 、低血圧症および減尿症によって特徴づけられる。敗血症ショックは細菌生成物 、主としてＬＰＳが細胞膜ならびに凝集、補体、繊維素溶解（ｆｔｂｒｉｎｏ１ ３１ｊｅ）およびブラジキニン系の成分ど反応して凝固を活性化し、これが細胞 を損傷し、かつ血液の流れを特に毛細血管において変更するものである。凝血シ ステムに関する微生物感染の様々な影響が図面の第１図に概略的に示されている 。

微生物は屡々古典的補体経路を活性化し、そして内毒素は第二経路を活性化する 。好中球に対する内毒素の補体活性、ロイコトリエンの生成およびその直接作用 は肺内のこれら炎症を起こした細胞の蓄積、それら酵素の解放および毒性酸素基 の生成をもたらし、これが肺動脈の内皮を損傷し、かつ急性呼吸困難症候群〈” ＡＲＤＳ”）を引き起こす、　ＡＲＤＳは敗血症ショックを伴う患者における死 の主要原因であり、また呼吸器の欝血、顆粒球のＶ集、出血および毛ＭＵ白、管 ｌ・ロンビ（ｃａｐｉｌｌａｒｙ　Ｉ、ｈｒｏｍｂｉ　）により特徴づけられる 。

凝固システムの活性化は数多くの組織内の＠組なａｉｓｍにおいて、トロンビン の生成および血小板トロンビの形成を６たらす。この症候群の発病はＸ１因子Ｃ ごよる固有の凝固システムの活性化を伴う。活性化Ｘ１因子は固有の凝固カスケ ードを起こし５また最後にはフィブリノーゲンがフィブリンに変換され、そして 血餅が生ずる９通常ショックを伴う、凝固についての制御されない活性化は血栓 症を招来し、かつ凝固■、■および■因子の消耗をもたらす、撒き散らされた脈 管内の凝固に関する幾つかの一般的な合併症は、重大な臨床的出血、血栓症、組 織の虚血および壊死、溶血ならびに臓器破損である。

同時に、凝固が内毒素によって明らかに引き起こされると、カウンターヴイーン 仕ｏｕｎＬｅｒｖｅｎｉｎｇ　）　＠序もまた血餅、すなわちＭｌ維素溶解シス テムの活性化によって活性化されて出現する。活性化Ｘ１因子はプラスミノーゲ ン・プロ活性化因子をプラスミノーゲン活性化因子に変換するが、これは引き続 いてプラスミノーゲンをプラスミンに変換し、それによって血餅溶解の仲介役を 勤める。従って、血ＭＷ維素溶解システムの活性化もまた出血の傾向に寄与する 可能性がある。

エンドトクセミア（Ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ　）は組織プラスミノーゲン活性化 因子インヒビター（”ＰＡＩ”）の循環レベルにおける増加に関連している。こ のインヒビターは組織プラスミノーゲン活性化因子（”ｔＰＡ’”）を急速に不 活性化し、それによってその能力を妨げて、プラスミノーゲンからプラスミンへ の活性化を通じて繊維素溶解を促進する。繊維素溶解の阻害は血管内に繊維素の 沈着を生ずる可能性があり、その結果、敗血症ショックに関連する撒き散らされ た脈管内の凝固に寄与することになる。

撒き散らされた脈管内の凝固はグラム陰性菌感染だけに限られた合併症ではない 、それはまた、グラム陰性菌、カビ類およびウィルス性感染においても観察され て来た。

グラム陰性菌の処置における抗生物質の限定された効果に鑑みて、努力は抗体製 剤を用いてグラム陰性菌感染と戦うことに傾けられて来た。研究は、ポリクロー ナル免疫グロブリンが日和見の病院グラム陰性菌の罹病率、特に免疫屈従（ｉｍ ｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ　）患者におけるそれの減少に関して有効であ ることを示して来た。ポリクローナル免疫グロブリンは細菌生体を破壊するのに は有効であるが、この種の製剤は敗血症ショックを処置するには一般的に不満足 であることが立証されて来た。

１９８８年ｌＯ月１２日に出願され、かつ本願と同一の譲受人に対し譲渡された 同時係属米国特許出願第２５７，４４５号は、グラム陰性菌血症または内毒素シ ョックの予防または処置において使用するための組成物を開示している。これら の組成物はヒトのポリクローナル免疫グロブリンであって、グラム陰性菌の抗原 に対抗する抗体を含むものと、モノクローナル抗体であって、様々なグラム陰性 菌のリボ多糖のリビドＡ部分と共通であるエピトープに関して特異であるものと の組合せを含んで構成されるものである。前記出願の開示はここに参考として引 用するものとする。同時係属出願中に記載される組成物は存在する細菌感染およ び敗血症ショックの苛酷さを抑制し、あるいは減少させるために非常に有用であ ることが判明している。

Ｃ−蛋白質として知られる血漿蛋白質がグラム陰性菌感染に対する防御に際して 自然の過程に従った役割を果たすことが示唆されて来た。ティラー他（Ｔａｙｌ ｏｒ　ｅｔ　ａｔ、　）のｒＪ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｊ　７９．９ １ｇ−９２５（１９８７年）参照、この論文の著者はエシェリヒア・コリの生き ている培地を注入した動物において、活性化されたＣ−蛋白質の高い投薬量が有 効な生体内抗凝固剤として機能し得ること、そしてその動物を細菌の致死的な影 響から保護し得ることを論証して来た。グラム陰性菌に対抗する蛋白質がティラ ー他によって示されたけれども、Ｃ−蛋白質の非常に高い投薬量を必要として来 た。更に、Ｃ−蛋白質は存在する細菌感染に影響を及ぼすことはなく、単にその 感染に関連する敗血症障害にのみ作用するものである。米国心臓協会（Ａｌｅｒ ｉｃａｎ　１ｌｅａｒｔ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｉｏｎ）の１９８８年１１月１５日 の第６１回年次例会における最近の発表に際して、ティラーは細菌関連の凝固障 害を処置するためのＣ−蛋白質の投薬量を、それをＳ−蛋白質および組織因子に 対するモノクローナル抗体との組合せにおいて使用することにより減少せしめる 可能性のあることを示唆した。この種のアプローチの実現可能性は未だ確立され ていない。

従って、グラム陰性菌血症および敗血症ショックの処置または予防のための組成 物および方法であって、存在する感染ならびに疾病を伴う広範囲におよぶ脈管内 の凝固の両者に対して有効なものに関するニーズが存在している。

光列り！杓 本発明によれば、グラム陰性菌血症および敗血症ショックの処置または予防のた めの組成物は、単一の投薬形態において、殺菌剤として有効量の、グラム陰性菌 の抗原に対する抗体を含有するヒトのポリクローナル免疫グロブリンと、血餅溶 解有効量の活性化Ｃ−蛋白質とを含んで構成される。詳細な実施態様において、 この組成物は更にモノクローナル抗体であって、様々なグラム陰性菌のリボ多糖 のリビドＡ部分と共通であるエピトープに関して特異であるものを含んで構成さ れる。

更に、本発明はグラム鴎性菌血症または敗血症ショックの処置または予防のため の方法中に存在し、これはグラム陰性菌によって感染した患者に対し、殺菌剤と して有効量の、グラム陰性菌の抗原に対する抗体を含有するヒトのポリクローナ ル免疫グロブリンおよび血餅溶解有効量の活性化Ｃ−蛋白質を投与することを含 んで構成される。詳細な実施態様において、この方法は更にこの種の患者に対し 、モノクローナル抗体であって、様々なグラム陰性菌のリボ多糖のリビドＡ部分 と共通であるエピトープに関し２て特異であるものを投与することを含んで構成 される。

敗血症および現実の、もし７くは切迫している敗血症ショックは屡々、緊急状態 とＬ５て医師に対し提示される。このような状況において、患者の生活状態およ び生存は迅速な処置に左右される。従って、更に池の実施！Ｂ様においＣ１本発 明は、たとえば緊急状況において医師により使用されるための治療用キット中に 存在する。この種の治療用キットは、敗血症または敗血症ショックの処置のため の非経口的投与に適した形態および投与量におけるポリクローナル免疫グロブリ ンと活性化Ｃ−蛋白質の別個の容器を有するパッケージを含んで構成される。好 ましい実施態様において、これらの容器はガラス瓶であり、それは再横晟に適し たポリクローナル免疫グロブリンの滅菌し、凍結乾燥した製剤を含有している。

匿匡Ｏ直拳な説明 第１図は、グラム陰性菌の侵入によって開始される酵素反応のカスケードであっ て、これは敗血症ショックに関連する脈管向凝固の撒き散らしをもたらすものに ついての該略図である。

ル叫の詳縄望脱叫 本発明の組成物および方法は活性化Ｃ−蛋白質を用いている。血漿のビタミンに 依存蛋白質であるＣ−蛋白質は主要な生理学的重要性を有する蛋白質である。Ｃ −蛋白質は他の蛋白質と協力して坑凝固剤として、また繊維素溶解剤として両機 能を果たす。

Ｃ−一蛋白質の活性化形態の作用の機序および不活性チモーゲンの活性化機序は 近年になって明らかになった。検討のために、ジェー・イー・ガーディナーおよ びジェー・エッチ・グリフイン（Ｊ、Ｅ、　Ｇａｒｄｊｎｅｒ　ａｎｄ　、Ｊ、 Ｈ，Ｇｒｉｆｆｉｎ）の１血液学における進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｈｅ ｍａｔｏｌｏｇｙ）　Ｊ■ｏ１．　　ＸＩ、　ＰＰ、　２６５−２７８、エルマ ー・ビー・ブラウンｌｌ１Ａ集、グルン・アンド・ストラットン・インコーホレ ーデラド（Ｇｒｕｎｅ　ａｎｄ　５ＬｒａＬＬｏｎ、　Ｉｎｃ、　）　、１９８ ３年を参照されたい。

活性化Ｃ−蛋白質は、活性化凝固補因子、Ｖａ因子および勧因子を選択的に加水 分解するごとによって強力な坑凝固剤として機能する。活性化Ｃ−蛋白質は即に これら凝固因子の不活性前駆体を最小限分解するに過ぎない。

活性化Ｃ−蛋白質は迅速−作用組織プラスミノーゲン活性化因子インヒビター（ ”ＦＡＩ−１”　）を中和することにより繊維素溶解剤として機能するものと考 えられている。エンドトクセミア中には、報告によればＰＡＩ−１の増強された レベルが存在する。このようにして、外因的に投与したＣ−蛋白質はプラスミ７ −ゲ〉・活性化因子の循環レベルを増大させ、それによって繊維素溶解の速度を 増加させる。

本発明の組成物および方法は更にＣ−蛋白質補因子を、そのＣ−蛋白質の活性を 増加させるに足る量をもって使用してもよい、活性化Ｃ−蛋白質のための重要な 補因子はＳ−蛋白質、他のビタミンに一依存血漿蛋白質である。Ｓ−蛋白質はｖ ａおよび１ａ因子について活性化Ｃ−蛋白質を仲介した加水分解を実質的に増加 させる。

カルシウムイオンもまた、Ｃ−蛋白質のための補因子として必要である。適切な カルシウムイオン濃度は血漿中に存在しているので、カルシウム塩を本発明の組 成物中に供給する必要はない、カルシウムイオンは活性化Ｃ−蛋白質を安定させ ることが判明しており、従ってそれらは安定化量をもって該組成物中に含まれる のが好ましい。

本明細書中で使用される場合、「Ｃ−蛋白質」および「Ｓ−蛋白質」はその蛋白 質の充分に発達ｌまた、活性化形態のものならびにその生物学的に活性なフラグ メンＩ・、相似体および誘導体を包含することを意図するものである。これら酵 素のチモーゲンをも使用してよいが、それらは好ましいものではない。それはそ れらを活性化させる患者の能力についての有り得る減少の故である０、−の種の 蛋白質は天然に由来するものであっても、あるいは組換え休閑Ａ技法によって生 成されるものであってもよい、Ｃ−蛋白質活性を有する活性組換え体蛋白質の例 はバング他（Ｂａｎｇ　ｅｔ　ａｌ、　）の米国特許第４，７７５．６２４号中 に記載されている。

本発明の組成物および方法はまた、ヒトのポリクローナル免疫グロブリンであっ て、グラム陰性菌に対する抗体を含むものを使用する８本発明の組成物および方 法において有用なポリクローナル免疫グロブリンは精製１１Ｇ　、　ＩｇＭ、Ｉ ｇＡまたはその免疫グロブリンのクラスの組合せを含んで構成することができる 。ＩｇＧ免疫グロブリンが好ましい０通常または高レベルの特異ポリクローナル 抗体を含有するしＩ〜血漿を使用することができる。抗体を高レベルにすること は数種類の方法のうちの何れの一方法によっても達成可能である、１種類以上の 特異抗原、たとえばシュードモナス・アエルギ、ノーサ（Ｐ、　ａｅｒｕｇｉｎ ｏｓａ　）に対する高力価の抗体を含有する血漿を得るためにドナーに免疫性を 与えることができる。或いは、人口の可成りの部分からの血漿は自然にグラム陰 性菌に対抗する高レベルの抗体を含有していることが知られている。従って、ド ナー血漿は関心のある１種類以上の抗原に対する高力価の自然生成抗体ならびに この種の高力価血漿から抽出された免疫グロブリンに関して選別することが可能 である１本発明の目的に関して、もし、これら抗体の力価が、生体内試験により 測定されたとき、通常の血漿のそれよりも少なくとも５倍高ければ、血漿はグラ ム陰性菌に対し「高力ｆＩｉＪの抗体を含有するものと考える。望ましくは、こ の種の血漿から調製された免疫グロブリンが、通常の血漿プールにおける抗体レ ベルの１０倍を超えるグラム陰性菌に対する抗体の力価を有することである。

ポリクローナル免疫グロブリン濃縮物は、冷エタノール沈殿、透析、イオン交換 吸着および限外濾過による濃縮を含む当該技術分野において知られる手順を利用 することによって血漿から得ることができる。別の手順であるが、これらに限定 されないものには、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、無機 塩類（ｔ：とえば、硫酸アンモニウムまたは硫酸ナトリウム）を使用する沈殿法 、カルボキシメチル、ジエチルアミノエチルまたは第四アミノエチル官能基を含 有する媒質によるイオン交換吸着、免疫吸着、親和力吸着、等電沈殿、表面吸着 またはゲル濾過がある。

酸性ρｌにおけるインキュベーション、酸性ｐｌ＋における微量のペプシンによ るインキュベーション、ペプシンまたはプラスミンによるインキュベーション、 還元およびアルキル化、スルホン化、Ｂ−プロピオラクトンによる処理またはヒ ドロキシエチル澱粉による処理によって生成されたポリクローナル静脈管内免疫 グロブリンもまた、血漿誘導ポリクローナル免疫グロブリンであって、これに対 しハイブリドーマ誘導モノクローナル抗体が付加されるものの供給源と１７で使 用することができる。或いは、ポリクローナル免疫グロブリンは正た、ポリヒド ロキシ化合物、たとえばマルトースまたはソルビトールの存在あるいは不存在下 で低ｐＦ！　（たとえば、３．５−５．５　＞において配合してもよい。

次いで、このポリクローナル免疫グロブリン溶液は従来の手順に従って滅菌する ことが可能である０次に、この免疫グロブリンを安定化させ、そして液状または 凍結乾燥状態において貯蔵する、二とができる。安定なポリクローナル免疫グロ ブリンは一般に約１．０ｍｇ／−乃至約２００ｍ＋ｃ／ｍの範囲におよぶ濃度を 有しており、これらは筋肉内、腹腔内および静脈内注射に適している。望ましく ない副反応は、ＩｇＧ凝集体、血管に作用する、または潜在的な凝集物質、たと えばＰＫＡまたはトロンビンによる汚染物を除去すること、。またはその他の非 １ｇＧ蛋白質、たとえばＩｇＡおよびＩｇＢの大幅な減少によって回避される。

本発明において使用可能であるポリクローナル免疫グロブリン製剤は市販されて いる。この種製剤の一つは商標ｒＧａｍｍａｇａｒｄ”’１ＶＩＧ」の下にカリ ７１ルニア州、デユア−１〜のバクスター・ヘルスケア・コーポレーション（Ｂ ａｘＬｅｒｌ（ｅａｌｔ、ｈｃａｒｅ　Ｃｏｒｐ、　）のハイランド・ラボラト リーズ・ディヴイジョンにより販売されている。

本発明の組成物および方法は血餅溶解有効盪のＣ−蛋白質を使用している。

この種の１は疾病の苛酷さ、患者の凝血および繊維素溶解システムの状態ならび に（もし、あるとすれば）それに対し外因性Ｃ−蛋白質補因子が使用される範囲 にＪ：つ、て変化してもよい。一般に、患者はＣ−蛋白質的３（Ｘｌ乃至約６０ ００国際単位（′”ＩＩＪ”）／体重ｋｇ　、／日を受けることになる。好まし い投薬量範囲は約１０００乃至約３０００　’ＩＵ／職／日である。Ｃ−蛋白質 は非経口的に、好ましくは静脈内、筋肉内または腹腔内注射によって投与される 。最も好まし、いル〜！・は静脈内注射である。

本発明の組成物および方法は有効殺菌剤鳳のポリクローナル免疫グロブリンを用 いている。この種の量は感染の苛酷さおよびタイプ、使用される特定の免疫グロ ブリン製剤および補助治療、たとえば抗生物質投４が行われているか否かによっ て変化する。一般に免疫グロブリン約１００乃至約５００ｗ＋ｇ　／体重１＜５ ７日、好ましくは約２００乃至約４α〕郵／体重眩／日が投手される。Ｃ−蛋白 質と同様に、免疫グロブリンもまた非経口的に、たとえば静脈内、筋肉内まフ、 ＝は腹腔内注射によ−）で投ｑ〜される。投手の好ましいルートは静脈内注射て ′ある。

Ｃ−蛋白質およびポリクローナル免疫グロブリンは別々に、若しくは薬学的に受 容可能な投薬形態におＧｊる組合せにおいて投与される。そわらは滅菌ｌ、、た 注射可能な液体、場合（、゛より従来の薬剤トの賦形剤を含有して溶解ま〆、− は懸濁させるのが好ましい、適切な注射可能キャリヤーの例には生理Ｔ的ｃ：緩 衝化させた等張食塩水、落花生油等がある。この組成物は、たとえば注射用の滅 菌食塩水で再構成するために凍結乾燥した粉末状て′薬局および医師に供給すれ ばよい。これらの凍結乾燥させた粉末は安定剤、たとえばカルシウム塩およびし ｉ〜血清アルブミンを含むのが有利である。適切なカルシウム塩には、たとノー ば塩化カルシウムがあり、０．１ｍＭ乃至約１０１Ｍの範囲におよぶ濃度をもっ て存在するのが望ましい。ヒト血清アルブミンの望ましい濃度は一般に組成物の 重量基準で約０．１％乃至１％の範囲内にある。

本発明による組成物の単位投薬形態は滅菌した注射可能薬剤的キャリヤー中にＣ −蛋白質約１５０乃至約３０００　ＫＵ／−おＪ：びポリクロ・・−プール免疫 グロブリン約５０乃至約１５０断ｇ／ｒｄを一般に含有）７ている。好ましい単 位投薬形態は滅菌［７た注射可能薬剤的キャリヤー中にＣ−蛋白質約３００乃至 約１５００　ＮＯ／−およびポリクローナル免疫グロプリ〉・約゛７５乃至約１ ．Ｏｆ）ｍｇ／ｍＱを含有している。

上で特に述べたように５本発明による組成物おＪ゛、び方法は、１９８８年ＩＯ 月１２日番ご出願された同時係属米国特許出願第２５７．４４５号中に記載され るように、１．、ＰＳ内毒素成分に対するモノクロ−ナール抗体を使用１７でも また有利である。使用するのならば、このモノクローナル抗体はＣ−蛋白質およ びポリクローナル免疫グロブリンと別々Ｇこ、または組み合わせ′て投与すれば ＪＸい。このモノクローナル抗体はポリクロ・−ナル免疫グロブリンの殺菌剤効 果に対し寄与、するのに有効である投薬量において投与するのが有利である。ポ リクローナル免疫グロブリンの有効投薬量が変化した場合、この投薬量は変化１ 、でよい。このモノクローナル抗体投薬量は一般に約０．ｌｓ＋ｇＪ５至約３魁 、／患者体重ｋｇ１０、好ま１７＜は約０゜２５乃至１．ｍｇ／ｋｇ／日の範囲 に及んでいる。

注射可能薬学的組成物は一般Ｃモノク【７・−・ナル抗体的０，２５乃至約ｌｌ １ｇ／ｚΩ、好ましくは約０．５乃至約１ｍｇ／ｍＱを含んでいる。

本発明による組成物および方法はまた１、有効策のＳ−蛋白質を有利ル、二含Ａ ７でいてもよい。、二のＳ−蛋白質はｃ−１白質と同じ方法４８″おいて、別々 にあるいはＣ−蛋白質と組み合わせて投与される、Ｓ−蛋白質の有効投薬量は変 化するが、一般的に約０，１乃至約１０ｍｇ／患者体重ｋｇ／Ｂの範囲（：及ん でいる。Ｓ−蛋白質の好ましい投薬量は約１．乃至約５■／ｋｇ／日の範囲に及 ぶ。

更に本発明において意図さｔ］ているのは、たとえば緊急事態において医師によ り使用されるための治療用キットである。この種のキットは病院の薬局および迅 速かつ便利な使用のために救急室にストックされるとよい、一般に、この種のキ ットは投薬形態および直接あるいは再構成に関する非経口的投与のための適切な 量において、ポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質の別個の容器を含 有するパッケージを含んで成っている。このキットはまた、その使用に関する医 師またはへルスケアの専門家に対するインストラクションをも含むことになる。

好ましいのは、これらの容器がガラス瓶であって、これらが滅菌した注射可能ビ ヒクル、たとえば通常の食塩水により再構成されるための無菌凍結乾燥した粉末 状のポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質を含有していることである 。再構成可能な、凍結乾燥状態の蛋白質は一般に溶液より一層安定であり、従っ て都合の良い貯蔵寿命を有している。このキットはまた、注射可能なビヒクルを 収容する別のガラス瓶を備えていてもよく、場合により更に適切なサイズの滅菌 した針を含むものとする。これらのガラス瓶は各成分について少なくとも１投薬 量を含んでおり、そして好ましくは開封または再構成後、製品の貯蔵寿命内に投 与されるであろう以上の投薬量を含まないものとする。

この種のキットは、たとえば静脈内免疫グロブリンについて４本のガラス瓶（ガ ラス瓶ごとに２．５ｇ）および活性化Ｃ−蛋白質について１本のガラス瓶（１０ ０ｍｇ）を収容することができる。　ＩＧ［Ｖは、適切な容量の希釈剤によって 再構成される場合、塩化ナトリウム約１％、グルコース２０ｍｇ／−未満、ＰＥ Ｇ　Ｏ，２ｇ　／　ｄ９未満および安定剤とし７て０．３Ｍのグリシンを含有し ている。活性化Ｃ−蛋白質は、そのサンプルを注射用の適切なビヒクル、たとえ ば＆Ｉ［ｆ液（りん酸塩類、塩化ナトリウム等）、等張剤、賦形剤（たとえば、 マンニトール、デキスｌ〜ラン等）、安定剤（たとえば、アルブミン）と混合し 、そしてこの混合物を蒸留水中に溶解し、次いでこの溶液を凍結乾燥して組成物 を得て、これが注射用のガラス瓶内に充填されることによって、注射可能製剤中 に配合することができる。　ＩＧＩＶおよびＡＰＣについて投与の主要ルートは 静脈内の注入によるが、これは注入バッグまたはボ１〜ル内に収容されたそれぞ れの非経口的溶液をもって行うことができる。これらの溶液は注入ポンプの使用 によりＹ−接続部を経由して患者に対し同時に送り出すことができる０本実施懸 様において、ＩＧＩＶの全投薬量は１０ｇであって、２００ｓ＋ｇ／ｋｇにおい て投与され、またＡＰＣの投薬量は１０ｆ）ｍａｒ、２１１ｇ／ｋｇニオＮで投 ！ｃ’し７’、：。

本発明は、限定を意図するものではない下記の実施例によって更に例示されるも のとする。

Ｃ−蛋白質は、商ｆｌｌ　ｒＰｒｏｐｌｅｘ　Ｊの下にカリフォルニア州、デュ アートのハイランド・ラボラトリーズから得た市販の■因子濃縮物から免疫アフ ィニティークロマトグラフィーによって精製した。

各Ｃ−蛋白質製剤について、）ｆｌ＜１０本のｒＰｒｏｐｌｅｘ　」濃縮物をそ れぞれ０．０２Ｍトリス５＊１！、　ｐＨ７，４の０．１５Ｍ塩化ナトリウム（ トリス−緩衝化食塩水）中に懸濁させた。この懸濁液を、抗体濃度２ｍｇ乃至５ ｍｇ／樹脂−においてｒＳｅｐｈａ−ｒｏｓｅ　ＣＬ−４ＢＪとカップルさぜた （ｃｏｕｐｌｅｄ　）アンチＣ−蛋白質モツクローナル１２−のカラムに適用し た。流量３０ｄ／時間におけるサンプル適用の後、このカラムを６容量のトリス 緩衝化食塩水で洗浄した。Ｃ−蛋白質は引き続いて、トリス−緩衝化食塩水中の ３Ｍチオシアン酸カリウムを使用してモノクローナル抗体カラムから溶離させた 。

この方法で溶離されたＣ−蛋白質をトリス−緩衝化食塩水に抗して徹底的に透析 してチオシアン酸塩を除去し、そして０．０２％アジ化すｌ〜ツリウム存在下に ＋５℃において貯蔵した。

ｂ、ｃ二坂亘Ｕ括怪化 Ｃ−蛋白質を二つの異なった方法の何れかにより活性化した。

（ｉ）トロンビン活性化 上記のように免疫アフィニティにＪ：り調製されたＣ−蛋白質をｐＨ８，０の０ ．０５Ｍトリス／ＨＩＰＯ４に抗して透析し、次いでトロンビン４　ｍｇ／　Ｃ −蛋白質１００ｍｇの割合においてし１〜のトロンビンと混合した。この混合物 を３７°で（３）分間インキュベー１〜し、次いで０．１Ｍ　Ｈ，ＰＯ４を用い てそのｐｌ＋を６．５に調節した９次に１、二のサンプルをｐＨ６，５の０．５ Ｍりん酸ナトリウム緩衝液で予め平衡化させたｒ　Ｓ　−３ｅｐｂａｒｏｓｅ　 Ｊのカラムに対し適用した。活性化Ｃ−蛋白質はこれらの条件下で樹脂と結合す ることはなく、そしてフロー・スルー　（ｆｌｏｗ−ｔｈｒｏｕｇｈ）中で収集 された。トロンビンはｐｉ（６，５の０．３Ｍりん酸ナトリウムＭ衝液の存在下 で溶離させることが出来た。

Ｃ９持−判↓１）庁二恒丁ＦＫ門グ・乙ヤイー上記したように、ｒＰｒｏｐｌｅ ｘ　Ｊ濃縮物から精製り、たＣ−蛋白質を二つの方法のそれぞれにおい“Ｃ測定 した。

（ｉ）７ｏモム÷ｌター（印畦−ゴ乙ム竺イクＩ７モジエ：ツク・アッセイは本 質的に文献（マルティノリ・ジ工−・エルおよびゲー＝・スＩ−ツカ−（Ｍａｒ Ｌｉｎｏｌｉ、　Ｊ、Ｌ、、　ａｎｄに、　３ｔ、ｏｅｋｅｒ　）のｒＴｈｒｏ ｍｂ。

Ｒｅｓ、　４３：　２５３　［１９８６年１、フランシス・アール・ビー・ジュ ニアおよびニー・セイファート（Ｆｒａｎｃｉｓ、　Ｒ，Ｂ、、　Ｊｒ、　ａｎ ｄ　Ｕ、　５ｅｙｆｅｒｔ　）のｒＡｓ、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ。

ＰａＬｈｏｌ、　３８７：　６ｔ９　　［１９８７年］）中に記載されるように 、〇−蛋白質の活性化物質としＣｒＰｒｏＬａｃ、１　　（Ａｇｋｉｓｌ−ｒｏ ｄｏｎ　ｃｏｎＬｏｒｔｒｆｘ　ｃｏｎｔｏｒＬｒｉｘの毒液がらの特異か−） 迅速なＣ−蛋白質活性化物質）を使用して行った。このア・ソセイにおい゛Ｃ， 適切に希釈したサンプル１０μＢを９６個の個々の容器−貯蔵器ｍ１ｃｒｏＬｉ ｔｅｒプレート内に配置した。次いで、ｒ　Ｐｒｏｔａｃ　Ｊまたは通常の食塩 水５０＃１を各容器に添加し、そｌ、てこのプレート・を室温で１５分間インキ ュベートした。この時点でｐＨ８，３のイミダゾール／トリス緩衝液１００μｍ を各容器に添加し、そしてこのプレー１へを更に５分間インキュベートした０次 に、濃度２ｍ１４における基質（Ｓ−２３６６＞　５０μＪを各サンプルに添加 し、そしてそのプレートを室温において２５分間放置した。その最終工程は、こ の反応を５０％（ｗ／ｖ　）酢Ｍ！５０ｕ’ｌをもって停止させることを包含す る。次いで、このＡ４０５　　Ａ４＜１２を％個の貯蔵器ｍ１ｃｒｏｔｉＬｅｒ プレー１〜・リーダー内で測定し、そして未知のサンプル中のＣ−蛋白質の濃度 を、知られた標準Ｃ−蛋白質の吸光度と比較することにより決定した。

（ｊ）急炎！気体動 免疫精製した（　ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｊ　ｆｉｅｄ　）製剤中のＣ−蛋白質の濃 度を更に、Ｃ−蛋白質抗原を測定するための免疫電気泳動法を利用して測定し、 た、これは基本的に刊行された文献中に記載されるように行った。グリフイン・ プレー・エッチ他（Ｇｒｉｆｆｊｎ、　Ｊ、Ｉｌ、、　ｅＬ　ａｌ、、　）のｒ Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　［ｎｖｅｓｔ、」６８：　１３７０　（１９８１年）を参照 されたい。

（ｔｉｉ　）　９二蛋１ｘ清法化　　’ＰＣＡ　　（１）’快化Ｃ−蛋白質活性 化物質を文献中に記載されるように調製した。オースナー・シー・エル他（Ｏｒ Ｌｈｎｅｒ、　Ｃ，Ｌ、、　ｅｔ　ａｌ、　）のｒＴｈｒｏ＠ｂ、　ｌ＋ａｅｍ ａｓＬａｓ　」５８：アブストラクト＃　１０１４　（１９７８年）、活性化に 先立って、説明したように免疫アフィニティクロマ１−グラフィーにより単離さ れたＣ−蛋白質を０．０５Ｍ　）リス、ｐＨ７，５の２０ｍＭ塩化ナトリウムに 抗して透析した０次いで、この透析したプールを活性化物質対Ｃ−蛋白質１：１ ０α）の比率をもってＣ−蛋白質と混合した。

ｄ、山川指Ｍ月区ＪロＭ−＠赳異 活性化Ｃ−蛋白質の全てのプールを限外濾過を利用して約２ｍｇ／−に濃縮し、 そし２てトリス緩衝化食塩水に抗［２て徹底的に透析した９次いで、各製剤を１ 、てポリミキシンのカラムを横切らせて発熱物質を除去した。活性化Ｃ−蛋白質 製剤の平均内毒素濃度は＞　Ｉ　ＥｔＪ／ｄであった。

使用した攻撃細菌はエシェリヒア・コリ（２７３５）菌株であった。これはカリ フォルニア州、デュアートのシティ・オブ・ホープ・ナショナル・メディカル・ センターからの臨床単離物（ｃｌｉｎｊｃａｌ　１ｓｏｊａＬｅ）である。

各１０匹のＣＦＩｌｌ＃１マウス３グループに対し、ニジ１リヒア・コリのコロ ニー生成単位１　ｘｉｏ６．１　ｘｌＯ’またはｌＸｌ０”を含有する選択され たサンプルを静脈内注射した。これらの投与量はＬＤ５ｏの計算を容易とするた めに選択した。各マウスに対し約２０ｇを計り分け、そして各マウスは合計容ｉ ０．３３−を受けた。

これらの攻撃グループは下記の製剤を受けた。

１、トリス緩衝化食塩水中の１％ヒト血清アルブミン２．１％ＩＳＡ中ヒトトロ ンビン１μｇ３１％ｌｌ５Ａ中Ｃ−蛋白質活性物質（ＰＣＡ　）　　ｏ、４ｎｇ ４、静脈内ポリクローナル免疫グロブリン（ｒＧａｍｍａｇａｒｄ”’　Ｊ　Ｉ ＶＩＧ）　１５ｍｇ５、　　ｒＧａｍｍａｇａｒｄ　Ｊ１５＋ａｇ＋トロンビン ｌａｇ６、　　ｒＧａｓｓａｇａｒｄ　Ｊ　１５ｍｇ　　ＰＣＡ　Ｏ，ｈｇ７、 トロンビン−活性化Ｃ−蛋白質２ＣＪＯｔｔｇ８、トロンビン−活性化Ｃ−蛋白 質４００μｇ９、トロンビン−活性化Ｃ−蛋白質２００ｕｇ＋　ｒＧａｍｍａｇ ａｒｄ　Ｊ　ｍ５ｍｇ１０、　）−ロンビン−活性化Ｃ−蛋白質４０ｈｇ＋　ｒ Ｇａ＋ｕａｇａｒｄ　Ｊ　Ｒ５ｍｇ１１、　　ＰＣＡ−活性化Ｃ−蛋白質２００ ｕｇ１２、　　ＰＣＡ−活性化Ｃ−蛋白質４ｆＸ）ｕｇ１３、　　ＰＣＡ−一活 性化Ｃ−蛋白質２００１ｇ＋ｒＧａ＋ｕａｇａｒｄ　Ｊ　１５ｑ１４、　　ＰＣ Ａ−活性化Ｃ−蛋白質４（ＸＪｕｇ＋　ｒＧａｍｍａｇａｒｄ　Ｊ　１５＋１ｇ ７日後、実験を終結した。これらのデータを多くの方法において分析した。

第一に、２×２分割表の組合せから成る強化したカイ二乗試験を用いた。第二に 、素髪的応答（ｑｕａｎＬａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ）のアッセイに関するスペア −マン−カーパー（Ｓｐｅａｒｍａｎ−Ｋａｒｂｅｒ　）法を利用してＬＤ５ｏ の検討を行った。

第１表に示すように、ヒトトロンビンによって活性化されたＣ−蛋白質は生きた エシェリヒア・コリにより攻撃されたマウスの生存を改良した。この特定の実験 においては、ｒＧａ關ａｇａｒｄ　」ポリクローナル免疫グロブリン製剤をポジ ティブ対照として使用し１、そしてポリクローナル免疫グロブリンと組み合わせ た場合の活性化Ｃ−蛋白質の効果は研究されなかった。

活性化Ｃ−蛋白質を静脈内免疫グロブリンと組み合わせた場合の別の実験におい ては、製剤を受けている生存体の数は、活性化Ｃ−蛋白質またはポリクローナル 免疫グロブリン製剤のいずれかのみが投与された場合に生存したマウスの数より も多かった。更に、Ｃ−蛋白質がトロンビンか、あるいは蛇毒液から単離したＣ −蛋白質活性化物質により活性化されたか否かによってＣ−蛋白質の治療効果は 明らかであった。

これらの結果は、細菌感染により引き起こされた敗血症および／または敗血症シ ョックの処置において活性化Ｃ−蛋白質とポリクローナル免疫グロブリンとの組 合せの効果的であることを示している。

第１表 １仝徂］７盟で次！登扛なヱク囚引は支」Ｈ工二員日ＩＩ匹ユ聯力果ＩＭＬ　　 　、−、−一−−−−−−−　　虫π俸０１−−トリス榎衝化食塩水（ＴＢＳ　 ）中の １％ヒト血清アルブミン（ＩＳＡ）　　　　　　１０　　　１　　　０静脈内免 疫グロブリフ　（ＩＧｉＶ）　１５ｇ　　　　　１０　　　１０　　　０ＨＳＡ 中のヒトトロンビン（１１，）ｂ＋ｇ　　　　９　　　３　　　０■、で活性化 されたＡＰＣ２００＃ｇ　　　　　　　１０　　　８　　　０Ｉ１．で括作化登 れ々醪東観躯Ｌ−１０６０−２入２全剤店 ゼＬ　　　　　　　　　　　　　　　ＰＸｉ１１ｓＡ対ＩＧＩＶ　　　　　　　 　　　　　　　　　　２　ｐ　＜０．００３”トロンビン　　　　　　　　　　 　　２　ｐ　＞０．６１７トロンビン対トロンビンで 活性化されたｃ＞−蛋白質４００ｕｇ　　　　　　　２　ｐ　＝０．０９９１Ｇ ［Ｖ対１〜口〉′ビンで 活性化されたＣ〜蛋白質２００ｕｇ　　　　　　　２　ｐ　＝０．０６ＩＧｍＶ 対トロンビンで 活性化されたＣ−蛋白質４（Ｘ）ｌ１ｇ２　ｐ　＝０．０２５”ｌ統計学上顕著 直２遺 り免１↓、ｒ九−舅」挑−−−−−−一一一度−−−」舷−一−１八処Ｗ−−− 、＝−〜−一一一一一一一一、−一一一、−先！＝７）ｌ−ＴＢＳ中１％ｌδＡ 　　　　　　　　　　　１０　　８　　０１％ｔＩｓＡ中１１．．１バ　　　　 　　　　　１０８３ＩＧＩＶ　１５　ｍｇ　　　　　　　　　　　　　　　　１ ０　　　６　　　０Ｉ１．　１ｇｇ＋ＩＧＩＶ　１５　ｍｇ　　　　　　　　　 　　　１０　　　８　　　２ｐ、−活性化ＰＣ２００１Ｉｇ　　　　　　　　　 　　１０　　　８　　　２■、−活性化ＰＣ４００ｕ　　　　　　　　　　　ｕ ｏ　　　　６　　　０ｎ、−活性化ＰＣ２００μｇ＋　！ＧＩＶ　１５　ｕ　　 　　　１０　　　７　　　３ＭＬ−ｉｉｆ１イヒＰＣ４にＸｂ謙【」二ｌｑＪ又 （ラ−１−，ｔｏ　−、、ｌ（−ｍ−−ｆｖ、−、−ＴＢＳ中１％＋１Ｓａ　　 　　　　　　　　　　　３．６　Ｘ　ｘｏ′！１％ＲＡ中Ｌ　ＩＩｇ　　　　　 　　　　　　　？、２ｘｉＯ’ＩＧＩＶ　　１５　ｍｇ　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．３Ｘ！０〕１１ａ 　　ＩＪｊｇ−）　［Ｇ！Ｖ　１５　ｍｇ　　　　　　　　　　　　　　　　５ ．７Ｘ１０’■、−活性化ＰＣ２００μｇ５．７ＸＩＯ’■、−活性化ｐｅ　４ ｏｏｌ１ｇ　　　　　　　　　　　　　２．３ｘｌＯ’■１−活性化ＰＣ２ｆ） Ｏｘｇ−１−ＩＧＩＶ　１５　ｍｇ　　　　　　　５．７Ｘ１０７１．１−：粘 土１化棹ン、、４００Ｋｇ−士ノｑｊＹ、、、Ｒ５，、、、、；罫−−−−−＞ 　　ｉ、；×−２，−−Ｚ引責１試験 比較−」−几二値 ９１統計学上顕著 第１人 Ｅ、　Ｃｏ１１２７３５　＝　　　　れｔ・マウスに　　　　４旦ニーＣｏ１１ ２７コ乏ニー彦川１酊の　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０６　 　　　１０７　　　　１０８生　　の ＴＢＳ中１％Ｈ８Ａ　　　　　　　　　　　　１０　　６　　０Ｃ−蛋白質活性 化物質＜ＰＣＡ　）Ｏ，ｈｇ　　　　９　　　６　　　０ＩＧＩＶ１５ｇ　　　 　　　　　　　　　　　　　１０　　　８　　　０ＰＣＡ　Ｏ，ｈｇ　＋ＩＧＩ Ｖ　１５　＋ａｇ　　　　　　　　　　１０　　　８　　　０ＰＣＡ−活性化Ｃ −蛋白質２００ｘｇ　　　　　　　１０　　　４　　　０ＰＣＡ−活性化Ｃ−蛋 白質４００μｇ　　　　　　　１０　　　４　　　０ＬＤ　　（ＣＦＵ ＴＢＳ中１％ｌｌ５Ａ　　　　　　　　　　　　　　１．８ＸｌＯ’ＰＣＡ　Ｏ ，ｈｇ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ｌ　、４　ｘ　１０’ＩＧＩＶ 　１５　ｍｇ　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．８Ｘ１０’ＰＣＡ　Ｏ ，ｈｇ　＋ＩＧＩＶ　１５　ｍｇ　　　　　　　　　　　　２．８ＸｌＯ’ＰＣ Ａ−活性化Ｃ−蛋白質２０ｈｇ　　　　　　　　　１．ｌＸ１０’ＰＣＡ−活性 化Ｃ−蛋白質４０ｈｇ＋ＩＧＴＶ　１５　ＩＩｇｌ、ｌＸ１０）ＰＣＡ−活性化 Ｃ−蛋白質２００＃ｇ＋ＩＧＩＶ　１５１１ｇ４．４Ｘ１０フＬ、ｊ馳＋［ＧＩ Ｖ　１５亙−８，８刈０７２こ凝壇湛鳳 Ｆｉｇ、１ グラム陰性菌内毒素の生物学的 影曾についての概略図示 Ｘｌｌ因子 国際調査報告

Claims (39)

【特許請求の範囲】
1. １．単一の投薬形態において、殺菌剤有効量の、グラム陰性菌の抗原に対する抗 体を含有するヒトのポリクローナル免疫グロブリンおよび血餅溶解有効量の活性 化Ｃ−蛋白質を含んで構成されるグラム陰性菌血症および敗血症ショックの処置 または予防のための組成物。
2. ２．ポリクローナル免疫グロブリンがグラム陰性菌の１種類以上の抗原に対する 抗体の力価を、通常の血漿において見出される値の少なくとも５倍の範囲におい て有している請求項１記載の組成物。
3. ３．ポリクローナル免疫グロブリンがグラム陰性菌の１種類以上の抗原に対する 抗体の力価を、通常の血漿において見出される値の少なくとも１０倍の範囲にお いて有している請求項１記載の組成物。
4. ４．ポリクローナル免疫グロブリンが、グラム陰性菌抗原ワクチンをもってワク チン接種されたヒトドナーから得られた血漿より単離される請求項３記載の組成 物。
5. ５．ポリクローナル免疫グロブリンが、少なくとも１種類のグラム陰性細菌に対 し自然に高い抗体力価を有しているヒトドナーから得られた血漿より単離される 請求項３記載の組成物。
6. ６．Ｃ−蛋白質が天然由来の活性化Ｃ−蛋白質である請求項１記載の組成物。
7. ７．Ｃ−蛋白質が組換え体活性化Ｃ−蛋白質である請求項１記載の組成物。
8. ８．ポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質が滅菌した注射可能液体中 に溶解または懸濁される請求項１記載の組成物。
9. ９．ポリクローナル免疫グロブリンの濃度が約５０乃至約１５０ｍｇ／ｍｌであ り、またＣ−蛋白質の濃度は約１５０乃至約３０００ＩＵ／ｍｌである請求項８ 記載の組成物。
10. １０．ポリクローナル免疫グロブリンの濃度が約７５乃至約１００ｍｇ／ｍｌで あり、またＣ−蛋白質の濃度は約３００乃至約１５００ＩＵ／ｍｌである請求項 ８記載の組成物。
11. １１．更に、Ｃ−蛋白質の生物学的活性を増加させるに足る量においてＳ−蛋白 質を含んで構成される請求項９記載の組成物。
12. １２．Ｓ−蛋白質の濃度が約０．１乃至約１０ｍｇ／ｍｌである請求項９記載の 組成物。
13. １３．Ｓ−蛋白質の濃度が約１ｍｇ８乃至約５ｍｇ／ｍｌである請求項９記載の 組成物。
14. １４．更に、殺菌剤有効量においてグラム陰性菌のリポ多糖のリピドＡ部分に対 するモノクローナル抗体を含んで構成される請求項９記載の組成物。
15. １５．モノクローナル抗体の濃度が約０．２５乃至約１ｍｇ／ｍｌである請求項 １４記載の組成物。
16. １６．モノクローナル抗体の濃度が約０．５乃至約１ｍｇ／ｍｌである請求項１ ４記載の組成物。
17. １７．減菌した、注射可能液体によって再構成するためにシールされた容器内で 凍結乾燥状態にある請求項１記載の組成物。
18. １８．グラム陰性菌によって感染した患者に対し、殺菌剤有効量の、グラム陰性 菌の抗原に対する抗体を含有するヒトのポリクローナル免疫グロブリンおよび血 餅溶解有効量の活性化Ｃ−蛋白質を投与することを含んで構成されるグラム陰性 菌血症または敗血症ショックの処置または予防のための方法。
19. １９．ポリクローナル免疫グロブリンがグラム陰性菌の１種類以上の抗原に対す る抗体の力価を、通常の血漿において見出される値の少なくとも５倍の範囲にお いて有している請求項１８記載の方法。
20. ２０．ポリクローナル免疫グロブリンがグラム陰性菌の１種類以上の抗原に対す る抗体の力価を、通常の血漿において見出される値の少なくとも１０倍の範囲に おいて有している請求項１８記載の方法。
21. ２１．ポリクローナル免疫グロブリンが、グラム陰性菌抗原ワクチンをもつてワ クチン接種されたヒトドナーから得られた血漿より単離される請求項２０記載の 方法。
22. ２２．ポリクローナル免疫グロブリンが、少なくとも１種類のグラム陰性細菌に 対し自然に高い抗体力価を有しているヒトドナーから得られた血漿より単離され る請求項２０記載の方法。
23. ２３．Ｃ−蛋白質が天然由来の活性価Ｃ−蛋白質である請求項１８記載の方法。
24. ２４．Ｃ−蛋白質が組換え体活性化Ｃ−蛋白質である請求項１８記載の方法。
25. ２５．ポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質は、それを減菌した注射 可能液体中に溶解または懸濁して非経口的に投与する請求項１８記載の方法。
26. ２６．ポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質が別々に投与される請求 項２５記載の方法。
27. ２７．ポリクローナル免疫グロブリンおよびＣ−蛋白質が同一の注射可能液体内 で同時に投与される請求項２５記載の方法。
28. ２８．ポリクローナル免疫グロブリンが静脈内注射によって投与される請求項２ ５記載の方法。
29. ２９．ポリクローナル免疫グロブリンが約１００乃至約５００ｍｇ／患者体重ｋ ｇ／日の投薬量をもって投与され、またＣ−蛋白質は約３００乃至約６０００Ｉ Ｕ／患者体重ｋｇ／日の投薬量をもって投与される請求項２５記載の方法。
30. ３０．ポリクローナル免疫グロブリンが約２００乃至約４００ｍｇ／患者体重ｋ ｇ／日の投薬量をもって投与され、またＣ−蛋白質は約１０００乃至約３０００ ＩＵ／患者体重ｋｇ／日の投薬量をもって投与される請求項２５記載の方法。
31. ３１．更に、Ｃ−蛋白質の生物学的活性を増加させるに足る量をもってＳ−蛋白 質を投与することを含んで成る請求項２９記載の方法。
32. ３２．Ｓ−蛋白質が約０．１乃至約１０ｍｇ／患者体重ｋｇ／日の投薬量をもっ て投与される請求項２９記載の方法。
33. ３３．Ｓ−蛋白質が約１乃至約５ｍｇ／患者体重ｋｇ／日の投薬量をもって投与 される請求項２９記載の方法。
34. ３４．更に、殺菌剤有効長をもってグラム陰性菌のリポ多糖のリピドＡ部分に対 するモノクローナル抗体を、前記患者に対し投与することを含んで構成される請 求項２９記載の方法。
35. ３５．モノクローナル抗体が約０．１ｍｇ乃至約３ｍｇ／患者体重ｋｇ／日の投 薬量をもって投与される請求項３４記載の方法。
36. ３６．モノクローナル抗体が約０．２５ｍｇ乃至約１ｍｇ／患者体重ｋｇ／日の 投薬量をもって投与される請求項３４記載の方法。
37. ３７．敗血症または敗血症ショックの処置のための非経口的投与に適した形態お よび投薬量におけるポリクローナル免疫グロブリンと活性化Ｃ−蛋白質の別個の 容器を有するパッケージを含んで構成される治療用キット。
38. ３８．これらの容器が、再構成に適したポリクローナル免疫グロブリンの減菌し 、凍結乾燥した製剤を含有するガラス瓶である請求項３７記載の治療用キット。
39. ３９．更に、製品使用のためのインストラクションならびに凍結乾燥したＣ−蛋 白質およびポリクローナル免疫グロブリンを再構成するための減菌したビヒクル の容器を含んで構成される請求項３８記載の治療用キット。