JPH0343401A - 置換されたポリサツカライドおよびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、置換されたポリサッカライド、その製法およ
びウィルス病の予防および治療に対するその使用Ｉこ関
するものである。ｉ酸化ポリサッカライドがウィルス病
の治療に適していることは既に知られている（例えば、
ＷＯ８８１０５，３０１およびＥＰ　Ｏ，２４０，０９
８を参照された）。これらの化合物は活性を示すけれど
も、これらの化合物は、例えば、血液凝固に影響を及ぼ
すという不利点を有している（例えば、Ｒｙｄｅ等二Ｔ
ｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　２３　（１９
８１）　４３５〜．４４５を参照されたい）。ウィルス
病の治療に対する良好な化合物を得る目的で、驚くべき
ことには、ＯＨ基が単に部分的に硫酸化されそしてさら
にＯＨ基の他の一部がエーテル化またはエステル化され
ているポリサッカライドは、単にＷｔ酸化されたポリサ
ッカライドよりもウィルスに対してより大なる活性度を
有しそして同時に血液凝固に対する影響が少ないという
ことを見出した。本発明により使用することのできる化
合物の若干は、既に日本特許出願昭４６−３６，２７７
号から知られている。しかしながら、該出願明細書には
、完全に異なる適用に対するそれらの化合物の活性のみ
が記載されている。ウィルスに対してのべた化合物の活
性は、例えば末梢血管の拡張および血液循環の改善のよ
うな化合物の既知の作用という事実を考えると、予期さ
れない。

例えば、キシロフラン、リポフランおよび種々なデキス
トランのような大部分の中性のポリサッカライドは全く
抗−〇ＩＶ活性を示さない（Ｈ，Ｎａｋａｓｈｉｍａ等
：　Ｊａｐ、　　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、／Ｇａ
ｕｎ　７８（１１）、１１６４−６８．１９８７）ため
にそしてまたその多くの陽イオン性および中性誘導体は
同じ程度不活性であるＣＰ、　　Ｅｂｂｅｓｅｎ　：　
Ｂｒ１ｍ　　Ｊ。

Ｃａｎｃｅｒ　３０（１）、６８−７２．１９７４）た
めに、本発明による化合物に対して記載した活性もまた
驚くべきことである。

さらに、低分子量の化合物の薬学的活性は、どのような
程度においても重合体の薬学的活性についての結論を引
き出すことを可能にしないので、薬学的に活性な重合体
化合物の発見は困難である。すなわち、例えば、ある若
干の低分子量の活性化合物は、脂肪親和性基の導入によ
ってその細胞膜透過性に関して変化されるが、このよう
な変化は、高分子量の物質においては脂肪親和性基の導
入によって起らない（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｄｒｕｇ　Ｄ
ｅｌｉｖｅｒｙ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｌ、　１９８７．２
３５〜２４８、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）。

従うて、本発明は、線状または分枝鎖状であってもよく
、そして単量体単位当り１個の置換されたまたは置換さ
れないアミノ基を含有していてもよい一様なまたは異な
る天然に存在するまたは合成の単量体からなり、そして
ＯＨ基が平均して式−Ｘ−Ｂ−Ｙ 〔式中、 Ｘは、オキシ基または式Ｉ （炭素原子はＢに結合している）の基を示し、Ｂは、２
〜３０個の炭素原子を有する非−芳香族炭化水素基（こ
の基のアルキル鎖において、３個までのメチレン単位は
オキシ基により置換されていてもよく、この基の中にお
いて３個までのＣ−Ｃ二重結合が存在していてもよくそ
してこの基は３個までのＣ３〜Ｃ２−アルキル基により
置換されていてもよい）を示し、モしてＹは、もしもＸ
がオキシ基である場合は、水素、Ｃ０ＯＲまたは０ＳＯ
３Ｒ’　（式中、Ｒは生理学的に許容し得る１価または
２価の陽イオンであるかまたは２０個までの炭素原子を
有する炭化水素基または３〜１０個の炭素原子を有する
モノ−またはビスエーテル基を示しそしてＲ′は生理学
的に許容し得る陽イオンを示す）であることができ、ま
たは Ｙは、もしもＸが式工の基である場合は、水素またはＣ
００Ｒ（式中、Ｒは上述した意義を有す）を示す〕 の基によって５〜８０％置換されており、そして上述し
たポリサッカライドのＯＨ基が式０５０．Ｍ（式中、Ｍ
は生理学的に許容し得る陽イオンを示す）の基によって
１０〜９５％置換されておりそしてＯＨ基の０〜４０％
が置換されていない置換されたポリサッカライド（前述
した日本特許出願明細書昭４６−３６．２７７号に既に
記載されているコンドロイチンサルフェートのバルミチ
ン酸エステルおよびデキストランサルフェートのラウリ
ン酸エステルを除く）に関するものである。

好ましい置換されたポリサッカライドは、次の化合物の
群から選択された一様なまたは異なる単量体単位から構
成されるかまたは次の化合物からなるポリサッカライド
マトリックスを有するものである。

キシロース、アラビノース、ラムノース、フコース、グ
ルツース、マンノース、ガラクトース、７ラクトース、
グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、グルク
ロン酸、ガラクトウロン酸、マンヌロン酸、カラゲナン
、フコイダン、ラミナラン、アルギネート、レンチナン
、プルラン、キシラン、デキストラン、ヘパリン、ケラ
タンサルフェート、コンドロイチン４−および６−サル
フェート、デルマタンサルフェート、ヘパリンサルフェ
ート、ヒアルロン酸、タイクラロン酸および澱粉、セル
ローズ、グリコゲン、キチンまたはペクチンの部分的加
水分解物。

上述した化合物は、合皮または天然源の何れであっても
よく、例えば特に、植物または微生物源のものである。

硫酸化形態の既に天然に存在する化合物を、天然に存在
するサルフェートをもってまたは追加的な硫酸化後に、
使用することができる。特に好ましいポリサッカライド
は、キシランおよびデキストランである。

本発明によるポリサッカライドのＯＨ基は、式−Ｘ−Ｂ
−Ｙの基によって好ましくは５〜８０％、特に好ましく
は５〜５０％そして特に１０〜４０％置換されており、
そしてさらに式ＯＳＯ，Ｍの基によって１０〜９５％、
特に好ましくは４５〜９５％そして特に５０〜９０％置
換されており、モしてＯＨ基の好ましくは０〜４０％、
特に好ましくは０〜２０％そして特に０〜ｌＯ％が置換
されていない。

好ましい基Ｂは、２〜２０個の炭素原子を有し、１個の
二重結合を有しているかまたは二重結合を有しておらず
そして置換されていないかまたは１個のＣ，−Ｃ，−ア
ルキル基により置換されている。

Ｘがオキシ基である場合は、Ｙは、好ましくはＨ％Ｃ０
ＯＲまたは０ＳＯ３Ｒ’　（式中、Ｒはアルカリ金属陽
イオン、特にカリウムまたはナトリウムまたは分枝鎖状
または非分枝鎖状のＣＩ−Ｃ，−アルキル基でありモし
てＲ１は好ましくはアルカリ金属陽イオン、特にナトリ
ウムである）である。

Ｘが式Ｉの基である場合は、Ｙは、好ましくは、Ｈまた
は弐〇〇ＯＲ（式中、Ｒは、アルカリ金属陽イオン、好
ましくはナトリウムまたはカリウム、分枝鎖状または非
分枝鎖状のＣ３〜Ｃ８−アルキル基または６〜９個の炭
素原子を有するモノ−またはビスエーテル基である）の
基を示す。

式−Ｘ−Ｂ−Ｙの基の例は、エトキシ、プロポキシ、イ
ソプロポキシ、ブトキシ、ヘキシルオキシ、オクチルオ
キシ、デシルオキシ、ドデシルオキシ、グロビオニルオ
キシ、ブチリルオキシ、バレリルオキシ、ヘキサノイル
オキシ、オクタノイルオキシ、デカノイルオキシ、ドデ
カノイルオキシ、バルミトイルオキシ、ステアロイルオ
キシ、２−メチルブチリルオキシ、９−オクタデセノイ
ルオキシ、リノロイルオキシ、リルノイルオキシ、コレ
ステリルオキシ、ヒドロキシオキサリルオキシ、ヒドロ
キシマロニルオキシ、ヒドロキシサクシニルオキシ、ヒ
ドロキシグルタリルオキシ、ヒドロキシアジポイルオキ
シ、クロトノイルオキシ、メサコノイルオキシおよび非
分枝鎖状のＣ１〜Ｃ，−アルコールと上述したジカルボ
ン酸とのエステル、または（（１，３−ジイソプロポキ
シ）−プロピル−２−オキシカルボニルヨープロパノイ
ルオキシである。

ドデカノイルオキシおよびステアロイルオキシ基が、殊
にキシランポリサッカライドマトリックスに対して、特
に重要である。

本発明による置換されたポリサッカライドは、広範囲に
わたって延長される平均分子量を有することができる。

好ましくは、置換されたポリサッカライドは、１００Ｋ
Ｄまで、特に好ましくは４０ＫＤまでそして特に１〜２
２ＫＤの平均分子量を有す。ポリサッカライドマトリッ
クスがキシランまたはデキストランからなりそして１〜
２２ＫＤの平均分子量を有する本発明による置換された
ポリサッカライドが、特に重要である。

さらに、本発明は、塩基性触媒の存在下において、ポリ
サッカライドをハロゲン化アルキルマタハω−ハロゲノ
カルボン酸塩で部分的にエーテル化しそしてそれから生
成物を直接またはアルコキシル化後に完全にまたは部分
的に硫酸化することからなるＸがオキシ基である置換さ
れたポリサッカライドの製法を包含する。この方法にお
いては、アルキル化は、例えば、ＤＩＪＦ。

ジオキサン、ＤＩＪＳＯなどのような無水の溶剤中にお
いて、ハロゲン化アルキルまたはω−ハロゲノカルボン
酸塩を使用して実施される。この場合、例えば、アルカ
リ金属水酸化物を塩基性触媒として使用することができ
る。特に適当なハロゲン化アルキルは、臭化アルキルお
よび沃化アルキルである。この方法の特に好適な変形法
は、一般的な実施説明Ｉに記載される通りである。

さらに、本発明は、ポリサッカライドを七ノーまたはジ
カルボン酸でまたはジカルボン酸モノエステルで部分的
にアシル化しそしてポリサッカライド中に残っているＯ
Ｈ基を完全にまたは部分的に′ｒＥＨ化することからな
るＸが式Ｉの基である置換されたポリサッカライドの製
法に関するものである。アシル化に対しては、種種な方
法を使用することができる〔例えば、Ｏｒｇａｎｉｋｕ
ｍｌＶＥＢ、　Ｖｅｒｌａｇ　ｄｅｒ　Ｗｉｓｓｅｎｓ
ｃｈａｆＬｅｎ。

Ｂｅｒｌｉｎ　１９７７、Ｃｈａｐｔｅｒ　７またはＨ
ｏｕｂｅｒ＋−Ｗｅｙｌ、Ｖｏｌｕｍｅ　　８．５０３
頁、Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−ＶｅｒｌａｇＳｔｕｔ
ｔｇａｒｔ　（１９５２）を参照されたい〕。

好適な方法は、約２０〜６０’Ｏの温度で例えば無水の
ＤＭＦまたはＤＭＳＯのような有機溶剤中において、ポ
リサッカライドに導入されるカルボン酸またはその誘導
体を等モル量のＮ、Ｎ’−カルポニルジイミダゾールと
反応させそして特定のポリサッカライドを形成されたア
シルイミダゾールでアシル化することからなる。後者の
反応は、既に説明した溶剤中の特定のポリサッカライド
を約２０〜６０℃で添加することによって行うことがで
きる。アシル化の程度は、特定のポリサッカライドに対
するアシルイミダゾールの量の比によって決定される。

ポリサッカライドをアシル化する好適な方法は、一般的
な実施説明■に記載する通りである。

置換されたポリサッカライドは、種々な方法で硫酸化す
ることができる〔例えば、Ｗｈｉｓｔｌｅｒ等：　Ｃａ
ｒｂｏｈｙｄｒ、　Ｃｈｅｍ、　２．２９８　（１９６
３）、ＵＳ２．７１５．０９１またはＣＨ２９３，５６
６を参照されたい〕。

好適な方法は、硫酸化されるポリサッカライドを有機溶
剤、好ましくはＤＭＦにとりそしてそれから約３０〜６
０℃の温度で、好ましくはピリジンで複合体とした複合
三酸化硫黄を加えることからなる。実験は、１個のＯＨ
基の硫酸化に対して二酸化硫黄複合体約１．５〜３当量
が必要であるということを示す。硫酸化が行われた場合
、反応生成物を水にとりそして混合物を好ましくはＮａ
ＯＨで中和しそしてそれから既知方法により処理するこ
とができる。本発明による特に好適なポリサッカライド
の硫酸化方法は、一般的な実施説明■に記載される通り
である。

アミノ官能が存在するポリサッカライドは、硫酸化前に
、反応が行われた場合に再び分裂除去できる保護基で保
護しなければならない。

適当な保護基は、例えば、Ｅ、　　ＷＧｎｓｃｈによっ
てＨｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、　Ｖｏｌｕｍｅ　１５．　
Ｉ　／Ｉｆ　、　Ｇｅｏｒｇ　ＴｈｉｅｍｅＶｅｒｌａ
ｇ　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ（１９７４）に記載されている
。

さらに、本発明は、ウィルスにより引き起される病気を
抑制（ｃｏｍｂａｔ　ｉｎｇ）するための置換されたポ
リサッカライドの使用に関するものである。置換された
ポリサッカライドは、例えば庖疹ウィルスのようなヒト
に対して［［性である多数のウィルスに対して活性であ
る。しかしながら、レトロウィルス、特にＨＩＶに対す
る置換されたポリサッカライドの活性が、特に重要であ
る。本発明による化合物は、ウィルス、特にレトロウィ
ルスにより引き起される病気を抑制、すなわち、治療ま
たは予防するために、種々な方法で投与することができ
る。例えば、置換されたポリサッカライドは、静脈内的
に、筋肉内的に、腹腔内的に、皮下的に、連続静脈内滴
注として、直腸的にまたは経口的に投与することができ
る。急性の病気に対しては、連続静脈内滴注としての投
与が、好ましい。例えば、経口的投与は、長期間の薬物
治療に使用される。

さらに、本発明は、本発明による置換されたポリサッカ
ライドを含有する薬学的組成物に関するものである。本
発明による薬学的組成物は、少なくとも１種の置換され
たポリサッカライドを、もし適当であるならば他の補助
剤および（または）賦形剤と一緒に、適当な投与形態に
することにより製造される。補助剤および賦形剤は、担
体、防腐剤および他の慣用の補助剤の群から選択される
。

例えば、澱粉例えば、馬鈴薯、とうもろこしまたは小麦
澱粉、セルローズまたはその誘導体、特に微小結晶性セ
ルローズ、二酸化珪素、種々な糖１例えばラクトース、
炭酸マグネシウムおよび（まＩ；は）燐酸カルシウムの
ような補助剤を、経口投与形態に対して使用することが
できる。

さらに、例えば粘質物−形成剤および樹脂のような医薬
の耐容性を改善する補助剤を、経口投与形態に添加する
ことが有利である。医薬は、また、良好な耐容性の目的
で、胃液中で不溶性であるカプセルの形態で投与するこ
ともできる。

さらに、もし適当である場合は、例えばセルローズまた
はポリスチレン樹脂を基にしｌ；透過性膜のような透過
膜の形態の遅延剤またはイオン交換体を投与形態または
組み合わせ製剤の成分に添加することが有利である。

本発明の薬剤について使用される投与量は、医薬の投与
形態および患者の状態、体重および病気の性質のような
種々な因子に依存する。しかしながら、短期間の投与に
おける場合にかぎって、置換されたポリサッカライドの
１日当りの投与量は約５０００＋＋＋９を超えなければ
ならない。

体重的７０ｋｇのヒトに対して、置換されたポリサンカ
ライド約１０〜２５００ｍｇが好ましい１日当りの投与
量である。置換されたポリサッカライドの１日当りの投
与量は、単一の投与量においてまたは数回の少量の投与
量において投与することができる。１日当り３〜８回の
投与量の投与が好ましい。ある場合においては、例えば
連続静脈内滴注の形態の置換されたポリサッカライドの
連続投与が使用される。

試験管内および生体内における本発明による置換された
ポリサッカライドの抗ウイルス性は、次の実験において
証明される。

１、　１（ＩＶに対する活性、細胞培養における試験方
法の説明： 培　　地　　　ＲＩＪＰＩ　　ｐＨ６，８完全な培地は
、さらに、子牛の血清２０％および組換えインターロイ
キン２　２０１．Ｕ、／＋＋１２ヲ含有する。

ｍ　　胞 Ｆｉｃｏｌｌ”’勾配遠心分離によって新鮮な供血者の
血液から単離したリンパ球を、３７°Ｃで００２５％下
で、植物性血球凝集素（Ｗｅｌ　ｌｃｏｍｅ）　２　ｕ
９／ｍＱを添加した完全培地中で３６時間培養する。

ＤＭＳｏ　１０％の添加後、細胞を５ＸｌＯ’の細胞密
度で凍結しそして液体窒素中で貯蔵する。実験に当って
は、細胞を解氷し、ＲＰ旧培地中で洗滌しそして完全培
地中で３〜４日培養する。

混合物 試験標本を、普通１２ｍｇ／ｒｓＱの濃度で完全培地に
溶解する。それぞれの場合において、完全培地０．５ｍ
Ｑを２４個の穴の多穴皿に導入する。溶解した標本０．
１ｍＱの添加後、それぞれの場合において標本０．１ｍ
＋２を移すことによって、希釈を、７アクター５の等比
希釈系で遂行する。１−当り５　Ｘ　１０’のリンパ球
を含有する懸濁液０．４ｍαを、それぞれの混合物に加
える。

細胞変性効果が３〜４日後に混合物中で検出され得るよ
うに調節されたＨＩＶＩ（Ｄ３４、ＧｅｏｒｇＳｐｅｙ
ｅｒ　　Ｈａｕｓ、　　Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ／Ｍａｉｎ
）またはＨＩＶＩｔ　（ＲＯＤ）感染リンパ球の上澄液
０．１ｍＱを、混合物に加える。感染単位の多重性（ｍ
ｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ）は、０．０１〜０．０２であ
る。

すなわち、実験混合物は、完全培地中に次の成分を含有
し７ている。

２００μｇ／　ｒｔｒｎ〜１−６７’９７　ｍ（１の標
本０．５ｍＱ 約ｌＸ１０”、ｙへａの細胞 ０．４ｍＱ 実験混合物は、また、標本を含有していない感染コント
ロールであるかまたは標準標本、例えば０．２μｇ　／
　ｒｎ　Ｑの３′−アジド−３′−デオキシチミジンま
たは２５μｇ／ｒａ（ｌのベントサンポリサルフェート
を含有する。

評　　価 感染後４日月に、混合物の顕微鏡検査によって評価を行
う。ウィルス多重度（ｍｕｌｔｉｐｌｉ−ｃａｔｉｏｎ
）および最小阻止濃度（ＭＩＣ）をウィルス−関連シン
シチウム（ｖｉｒｕｓ−ｒｅｌａｔｅｄ　５ｙｎｃｙｔ
ｉａ）形成の助けにより測定する。この試験の結果は、
第１表に示される通りである。

第１表：リンパ球培養におけるＨＩＶ−Ｉに対する活性
度 標 本 ＩＣ （μ９／ｍ１２） 化合物に相当する実施例 ■ ０ ０ ０ １ ０ ２ ＜０．８ ３ ４ ０ ５ 〈０．８ 比較：デキストラン１０，０ＯＯＤからのデキストラン
サルフェート ０ キシランサルフェート ０ 第２表：リンパ球培養における旧Ｖ−■（ＲＯＤ）に対
する活性度 比較：デキストラン１．０ＯＯＤからのデキストランサ
ルフェート ５ デキストラン５　、０００　Ｄからの デキストランサルフェート　　　　　　５０デキストラ
ンサルフエートｌＯ０ 組換えＨＩＶ　ＲＴを使用した逆転写酵素阻止試験試験
は、９６個の穴を有するマイクロタイタープレートで実
施する。混合物１００μＱは、トリス−ＨＣｌ２　（ｐ
）１８．０）　１００ｍＭ、　ＫＣｌ２８０ｍＭ、　Ｍ
ｇＣＱｘ　１０ｍＭ。

ジチオスレイトール５　ｍＭ、　（’Ｈ）ｄＴＴＰ　（
デオキシチミジントリホスフェート）ｌＯμＱ（１２１
ｃｉ／ｍｍｏＱ、　ｌ−０ｍＣ１／　ｍＱ）、ポリ（ｒ
Ａ）オリゴ（ｄＴ）１２−１８　（Ｄｅｕｔｓｃｈｅ　
Ｐｈａｒｍａｃｉａ　ＧｍｂＨ，ＦｒｅｉｂｕｒｇＦＲ
Ｇ）　１．５μ９、オヨびＨＩＶ　ＲＴ　（希釈した１
　：　２００、Ｄ　Ｅ　Ａ　Ｅ　／　Ｐ　Ｃ／　Ａ　ｇ
　ａ　（ｒ　Ｃ）フラクション）（Ｈａｎｓｅｎ　Ｊ、
。

５ｃｈｕｌｚｅ　Ｔ、、　Ｍ６１１ｉｎｇ　Ｋ、　：Ｒ
Ｎａｓｅ　Ｈａｃｔｉｖｉｔｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　
ｗｉｔｈ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ
ｒｅｖｅｒｓｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ　ｏｆ　
Ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃａｌｌＬｙｎｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　
Ｖｉｒｕｓ　　ｎＩ／Ｌｙｍｐｈ　ａｄｅｎｏｐａＬｈ
ｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　Ｖｉｒｕｓ、　　Ｊ、　Ｂｉ
ｏｌ、　Ｃｈｅｍ−１２６２゜１２３９３〜１２３９６
　（１９８７））　１０μＱを含有する。

４１　’０で９０分培養した後、凍結（−８０℃）およ
び１０％強度のＴＣＡ（トリクロロ酢酸）５０μａおよ
びＮａピロホスフェート５０μａの存在下で再解氷する
ことによって、核酸を沈殿させる。ワットマン（ＲＩ　
ＧＦ／Ｃフィルター上に混合物を吸収させ、１０％強度
のＴＣＡ／１０ｍＭのＮａピロホスフェート（１：１）
、それから、ｌｏｍＭのＮａピロホス７ｘ−ト、Ｈ２Ｏ
および７０％強度のエタノールそれぞれ約２禦Ｑで洗滌
しそしてフィルターを１２０℃で乾燥した後に、結合放
射能を測定する。

阻止剤の不存在下においてＤＮＡ中に混入された３Ｈｃ
ｐｍを、１００％として定義する。これは、反応当り８
０．０００〜２００．０００ｃｐｍの混入に相当する。

阻止剤の異なる濃度を、この試験において調査する。バ
ッチにおける最終濃度のμｇ／ｍ（ｌを述べる。

第３表：　ＨＩＶ逆転写酵素阻止試験 化合物に相当する実施例 ０．１５９ ３ ０．０４１ 比較：キシランサル７エート ０．４９７ 細胞培養における庖疹に対する抗ウ ィルス活性 試験物質を、細胞培養培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍ
ＥＭ）に溶解しそしてファクター３の等比希釈系で標準
マイクロタイタープレート中の細胞培養培地１００μＱ
に導入する。次に２　Ｘ　１０’細胞／ｒｎＱの細胞密
度の子牛血清５％を含有する培地中のヒーラまたはベロ
細胞の懸濁液１００μａを加える。この混合物を、細胞
が７２時間以内に細胞変性効果（ＣＰＥ）を示すように
調節された特定の試験ウィルスの懸濁液５０μａで感染
させる。評価は、細胞ローンの顕微鏡的評価および中性
赤色吸収（濾過後の色試験）の光度測定により行う。細
胞の約５０％が、感染後生存する標本の濃度（μ９７ｍ
０を、ＭＩＣと仮定する。

第４表：庖疹に対する作用 化合物に相当する実施例２　　　　　　　　　４．９４
４　　　　　　　　　４．９４ ６　　　　　　　　　４．９４ ７　　　　　　　　　４．９４ １０　　　　　　　　　４．９４ １１　　　　　　　　　＜０．１８ １２　　　　　　　　　１．６５ １３　　　　　　　　　４．９４ ２４　　　　　　　　　４．９４ ２６　　　　　　　　　１．６５ ２７　　　　　　　　　１．６５ 比較：キシランサルフェート ４．９４ ２、　レトロウィルスを使用したマウスにおける生体内
試験 ヒトのＨＩＶ感染については、実験動物の確信のもてる
モデル感染は存在しないので、化学療法剤の試験に対し
ては他のレトロウィルスによる感染によらねばならない
。本発明の場合においては、フレンド白血病ウィルスに
よるマウスの感染を選んだ。

普通の実験マウス（ＮＭＲＩ＝Ｎａｖａｌ　　Ｍｅｄｉ
ｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ　ｌｍ５Ｌｉｔｕｔｅ）を、フ
レンドウィルスを含有するマウス血清を使用した静脈内
注射によって感染させる。未処理のコントロール動物に
おいては、感染の徴候として肺臓および肝臓の有意な拡
大が２週間または３週間以内に生ずる。

処理は、試験物質の腹腔的投与により１０日にわたって
および試験物質の経口的投与により１６日にわたって実
施する。処理は、試験物質の腹腔的投与の場合において
は注射後４８時間後そして経口投与の場合においては注
射前４日前に開始する。感染後１４日日月、動物を、頚
椎の脱臼によって犠牲にしそして開く。肺臓を取出しそ
して重量を計る。処理した動物の肺臓重量を、治療活性
を測定するパラメーターとして、未処理の感染コントロ
ールの肺臓重量に関して示す。

経口投与においては、試験物質を飲み水に溶解する。そ
れぞれｌｏｏｍ（２の容積の飲み水容器を２４時間毎に
取り替える。毎日測定される実験動物群当りの飲み水の
消費から、２４時間当り一匹のマウスに投与した平均投
与量を計算する。

非感染の成人実験マウス（体重２０〜２４ｇ）の肺臓重
量が体重の１％以下であるのに対して、感染した動物の
肺臓は、実験の終りにおいて、体重の約１０％までに達
する。

使用した比較標本は、腹腔的投与におけるスラミン（−
３，３’−ウレイレン−ビス−（８−（３−ベンズアミ
ド−４−メチルベンズアミド）ナフタレン−１，３，５
−トリスルホン酸）でありそして腹腔内および経口投与
におけるペントサンポリサルフェートである。

結果は、第５表および第６表に示す通りである。

第５表：マウスのＦＬＶモデル 処理の開始　　：　　感染２日後 処理の期間　　＝ｌＯ日 ウィルス希釈　：　　　ｌ　：　５．０００投与方法　
：　　腹腔内 肺臓除去　　：　　感染後の１４日 コントロール スラミン ｘＳ ｘＳ 実施例１４ 実施例１３ 実施例１５ コントロール スラミン ｘＳ ｘＳ 実施例１ｆｉ 実施例１１ 実施例１７ １０Ｘ１．０ １０Ｘ０．５ １０Ｘ１．０ １０Ｘ０．１ １０Ｘ１．０ １０Ｘ１．０ ０ＸＩ−０ １０Ｘ０．５ １０Ｘ１．０ １０Ｘ１．０ １０Ｘ１．０ １０Ｘ０．５ ６．４１±３．１１ ４．９６±１．４５ ５．６７±２．３１ ５．０７±３．１９ ３．７９±１．５０ ２．９５±０．９５゜ ２．４２±１．００ ７．２５±２．９１ ５．６８±２．５７ ５．４０±１，５３ ５．６０±２．６２ ４．９４±１．８１ ４．６０±１．８３ ３．７９±１．９２ １．００００ ０．０９８５ ０．２８８３ ０．２１４１ ０．０３７２ ０．０１５６ ０．００４６ ｔ、ｏｏｏ。

Ｏ，１０６９ ０，０６０１ ０，１５３２ ０，０２２３ ０，０１５２ ０，００３８ ｘＳ：キシランサルフェート 第６表： マウスのＦＬＹモデル 処理の開始 処理の期間 ウィルス希釈： 投与方法 肺臓除去 感染４日前 １６日 １　：　５，０００ 飲み水によって経口的 感染後１４日 コントロール ｘＳ 実施例１８ 実施例１９ 実施例２０ １６Ｘ４９．０ １６Ｘ４２．４ １６Ｘ２２．３ １６Ｘ４１．４ ｘＳ：キシランサルフェート ７．３４±２．３６ ６．４３±３．２５ ４．５４±１．１１ ３．５８±２．０５ ５．９ｌ−ｉ＝１．９４ １．００００ ０．２５４８ ０．００１９ （ＬＯＯＩＯ ０，０８３５ ３、細胞培養におけるＶＩＳＮＡウィルスに対する作用 Ｖ　Ｉ　ＳＮＡウィルスおよび旧Ｖウィルス（ヒト免疫
欠損のウィルス）は、何れも、レンチウィルスのレトロ
ウィルス亜科に属する（Ｈａａｓｅ　Ａ、Ｔ。

Ｎａｔｕｒｅ　（１９８６）　３２２．１３０〜１３６
）。この２種のウィルスは、他のレトロウィルスに比較
して類似したゲノム組織化および複合転写パターンを有
している（Ｓｏｎｉｊｏ　Ｐ、等：　Ｃｅ１ｌ　（１９
８５）、４２．３６９〜３８２゜Ｄａｖｉｓ　Ｊ、Ｌ、
等：Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（１９８
７）、６１（５）、　１３２５〜１３．３１）。

Ｖ　Ｉ　ＳＮＡウィルス試験は、Ｏ，Ｎａｒａｙａｎ等
（Ｊｏｕｒ−ｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｒ＋ｓ　
Ｄｉｓｅａｓｅｓ　１３５．５．１９７７．８００〜８
０６）の方法によって実施する。このために、本発明の
化合物を、９６個の穴を有するマイクロタイタープレー
トで非−細胞毒性濃度の培養培地中で希釈する。次に、
生産培地中の羊からの線維芽細胞（ｌ穴当り５Ｘ１０’
細胞）をそれぞれの穴に加える。次に、それぞれの穴に
、約２．５Ｘ　１０’のＴＣＩＤ、。（ＴＣＩＤ＝組織
培養感染量）の力価を有するＶ　Ｉ　ＳＮＡウィルス溶
液を含有させる。

このウィルスの量は、約０．０５のＭＯ＋（感染の多重
度）に相当する。

これらの感染条件下において、ウィルス−誘起細胞変性
効果は、試験物質を含有していない感染コントロールに
おいて５〜ｌＯ日の間で得られる。感染したそして処理
した細胞およびコントロール細胞を、ｃｏ、　５％下３
７°０で７日間培養する。

未処理のウィルスコントロールにおケルウィルス−誘起
細胞発病効果の発現に関しては、培養物はホルマリンで
固定しモしてギムザ溶液で染色された。

作用力価は、シンシチウム形成により測定した３段階で
評価する。１４１１″はウィルス多重度の約２０％阻止
、２゛″は約７０〜８０％阻止そして゛３″′第７表二
ＶＩＳＮＡウィルスに対する作用濃度（μＱ／　ｍＱ’
）　　　　　　５００　　２５０　１２５　６２．５３
１゜ 実施例１に相当 する化合物 ２〜１ 実施例２に相当 する化合物　　　　２〜３２２２２〜１実施例３に相当 する化合物　　　　　２　　２　２　２〜１２〜ｌキシ
ランサル フェート　　　　　　　２　　　２２　　　２　　　２
４、血液凝固に対する置換されたポリサ・ンカライドの
作用 トロンビン時間（ＴＴ）および部分的トロンビン時間（
ＰＴＴ）を、凝固の過程に対する物質の影響の評価のた
めに測定する。ヘパリンを、６１、ｕ、／ｍＱの濃度で
、比較物質として使用する。

それぞれの場合において、重量でヘパリンの６１．０に
相当する本発明による置換されたポリサッカライドの濃
度を使用する。

物質を計量しそしてアルブミン１％を含有する生理食塩
溶液中に、６ｖｎｇ／ｍＱの濃度で溶解する。それぞれ
の場合において、この１０μＱをクエン酸塩添加血漿１
ｍ＋２に加える。室温で１５分培養した後、ＴＴおよび
ＰＴＴを測定する。

実験の結果は、第８表に記録される通りである。実験結
果は、本発明による置換されたポリサッカライドが、血
液凝固に対してヘパリンおよびキシランサルフェートよ
りはるかに小さい影響を及ぼすことを示す。

第８表：血液凝固に対する作用 実施例２１ ２ ３ ４ ５ キシランサル７エート ヘパリン（６１０／ｍ（１） コントロール １８．１　　　　　　　６１．５ １９．４　　　　　　　５５．２ ２１．７　　　　　　　７２．４ ２４．９　　　　　　　＋２４．３ １９．５　　　　　　　６７．２ ２８．４　　　　　　＞４００ ＞４００　　　　　　　＞４００ １８．３　　　　　　　４１．８ 一般的な実施説明Ｉ： ポリサッカライドのアルキル化および硫酸化炭水化物を
無水のＤＭＳＯに溶解して約５％強度の溶液を得、そし
て加熱しながら、酸素を排除して（窒素またはアルゴン
雰囲気）、所望の程度のエーテル化Ｉこ対して必要な量
の水酸化カリウムおよび臭化アルキルまたは沃化アルキ
ル（アルキル化剤に対する塩基の比１．５：１）と−緒
４コ】６時間撹拌する。次に、１．５〜３倍過剰の三酸
化硫黄−ピリジン複合体（遊離ＯＨ基を基にして）を加
えそして硫酸化を５０°Ｃで更に３時間実施する。次に
、溶液を真空濃縮し、残留物を水にとりそして混合物を
水性ＮａＯＨで中和する。

適当な隔膜を通した限外が過によって、精製および脱塩
を実施する。

一般的な実施説明■： ポリサッカライドのアシル化 撹拌しながら、Ｎ、Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（
ＣＤＩ）等モル量を、５０℃の無水のＤＭＳＯ中の導入
されるカルボン酸の溶液に、小量ずつ加える。ＣＯ２の
逃出は、反応性のアシルイミダゾールの形成を示す。混
合物を、５０’Ｏで更に１時間撹拌し次にＤＩＪＳＯ中
のポリサッカライドの溶液を加える。この場合使用され
る量は、所望のエステル化の程度によって選定される。

反応混合物を５０℃で３時間放置しそしてそれから真空
濃縮する。

一般的な実施説明■： ポリサッカライドの硫酸化 硫酸化すべきポリサッカライドを、ＤＭＦにとりモして
５０°Ｃで過剰の三酸化硫黄−ピリジン複合体（１個の
遊離の０１４基当り１．５〜３当量）で３時間硫酸化す
る。溶剤を除去した後、残留物を水にとりそしてＮａＯ
Ｈで中和しそして溶液を再び濃縮してピリジンおよびＤ
ＭＦを除去する。残留物を再び水に溶解しそして適当な
排除限界の隔膜を通した限外が過によって塩および不純
物を除去する。乾燥物質を基にして２％重量強度の燐酸
塩緩衝液（ｐＨ７）を保持物質に加えそして漬合物を噴
霧−または凍結−乾燥する。

実施例　ｌ プロパノイル−キシランサルフェート ＧＷＩ（一般的な実施説明）■および■によってプロピ
オン酸５　ｍＱｃ４−９７ｇ．　６７ミリ％／ｌ，）９
Ｊ：びＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）
目１（６ミリモル）を、無水のＤＭＳＯ　２０Ｃｍｆｆ
中において、キシラン（分子量Ｍ〜４，ＯＯＯＤ）１５
ｇ（１１４ミリモル）と反応させそして次に生成物を、
無水のＤＭＩ３００＋Ｑ中において、ＳＯ，−ピリジン
複合体６０≦（３７７ミリモル）で硫酸化する。

処理、精製および凍結乾燥を行って、帯黄色の無定形の
粉末２６．７９を得る。

アシル化の程度：ＯＨ基の２０％（０．０中における１
　３Ｃ−ＮＭＲによる） 硫酸化の程度：ＯＨ基の７５％ 分析値：Ｃ２６．７％　Ｈ４．５％　Ｓ　１２．９％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４０ｃｍ−’　（ｖｓ，　ｘ　
ステルｃｏ）’　”Ｃ−ＮＩＪＲ（ＤｔＯ）　：δー１
７６〜１７８ｐｐｍ（ｍ，　Ｃｏ）、９５〜１０３ｐｐ
ｍ（ｍ，　Ｃ−１）、６９　〜７９ｐｐｍ（ｍ，　Ｃ−
２．３．４）、５６〜６４ｐｐｍ（＋ｎ．　Ｃ−５．　
Ｃｏ−ＣＨ，）、２８．５ｐｐｍ（ｓ，　ＣＨ．）、９
、２ｐｐｍ（ｓ，　ＣＨ，）。

アシル化の程度は、定量曲目Ｃ−ＮＭＲ（ＩＮＶＧＡＴ
法）　ｇ−　ｈ　ｉｆ　６　ＣＨｓＣ９．２ｐｐｍ）　
８よびＣ−ｔ　（９５　〜７９ｐｐｍ）のシグナルの積
分から測定することができる。

実施例　２ デキストラン６、０００Ｄからのプロパノイル−デキス
トランサルフェートＮａ塩 ＧＷＩｎオよびｍ　ｊ：　Ｊ：　ッテ、無水（７）ＤＭ
ＳＯ　２００＋ｎＱ中において、プロピオン酸９．２１
１＜２（９．１４ｇ．　１２３ミリモル）およびＣＤＩ
　２０９（１２３ミリモル）をデキストラン（Ｍ〜　６
，０００Ｄ）２０９（１２３ミリモル）と反応させそし
て次に無水のＤＭＦ　３００＋ｌｌＱ中において、生成
物を５０３−ピリジン複合体１００９　（６３０ミリモ
ル）で硫酸化する。

処理、精製および乾燥を行って、白色の無定形の粉末３
５．９９を得る。

アシル化の程度二〇Ｈ基の２９％（　＋　”Ｃ−ＮＭＲ
による） 硫酸化の程度：５６％ 分析値：Ｃ２６．２％　Ｈ４．５％　Ｓ　１３．６％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４２ｃ＋ｘ−’　（ｖｓ．エス
テルｃｏ）■Ｃ−ＮＭＲ（０２０）　：　、ａ　−　１
７７ｐｐｍ（ｂｓ，　Ｃｏ）、９５．５−９９、５ｐｐ
ｍ（ｍ．　Ｃ−１）、６５〜８０ｐｐｍ（ｍ，　Ｃ−２
．３，４．５．６。

Ｃｏ−ＣＨ　、　）、２３ｐｐｍ（ｓ，　ＣＨｚ）、８
．７ｐｐｍ（ｓ，　ＣＨｓ）。

実施例　３ デキストラン６、０００Ｄからのヘキサノイル−デキス
トランサルフェートＮａ塩 ＼（（’　ＤＡ　　　／’　ｔｌ ＧＷＩｌｌオよび■によって、無水ＤＮＳ０　２００ｍ
１２中において、ヘキサン酸１４＋１！（１３９．　１
１１２９モル）、ＣＤＩ　１８．１ｇ　（　１１１ミリ
モル）およびデキストラン（Ｍ″″６，ＯＯＯＤ）２０
ｇ（１２３ミリモル）を反応させそして次に無水のＤＭ
Ｆ　３００ｒＲＱ中において、反応生成物をＳＯ，−ピ
リジン複合体９０９（５６６ミリモル）で硫酸化する。

収量：僅かに帯黄色の無定形粉末４４．２９アシル化の
程度二〇Ｈ基の２０％（Ｄ，０中の１３Ｃ−ＮＭＲによ
る） 硫酸化の程度：６５％ 分析値：Ｃ２６．４％　Ｈ４．３％　Ｓ　１３．６％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４０ｃｍ”’　（ｖｓ，　ｘス
テルＣＯ）口Ｃ−ＮＭＲ（ＤｔＯ）　：δ＝　１７７、
５ｐｐｍ（ｂｓ，　ｃｏ）、９７〜１９、５ｐｐｍ（ｍ
．　　Ｃ−１）、６６−７９ｐｐｍ（＋ｎ，　Ｃ−２．
３．４．５．６。

Ｇｏ−ＣＨ，）、３３．５、３２．２、２５．６、２３
．２ｐｐｍ（ｓ．　４　ＸＣＨ．）、５．０ｐｐｍ（ｓ
，　ＣＨｓ）。

実施例 ４ デキストラン３，５００Ｄからのドデカノイル−デ キストランサルフェートＮａ塩 ＼（ＣＨｚ）＋。−ＣＨ。

ＧＷＩ　ＩＩおよび■によっ”Ｃ１無水のＤＭＳＯ２０
０＋Ｊ中においＣ、ドデカン酸１４．８ｇ（０，０７４
モル）、ＣＤＩ　１２ｇ（０，０７４モル）およびデキ
ストラン（Ｍ〜３．５００）２０ｇ（０，１２３モル）
を反応させそして次に無水（’）ＤＩＪＦ　３００＋１
ｌｆｆ中におイテ、反応生成物をＳＯ，−ピリジン複合
体９０ｇ（０，５７モル）でｉ酸化する。

収量：白色の無定形の粉末４２．３ｇ アシル化の程度：ＯＨ基の６％（目Ｃ−ＮＭＲによる） 硫酸化の程度：８３％ 分析値：Ｃ２１，３％　Ｈ３，１％　３１７．３％ＩＲ
（ＫＢｒ）　：　１７４１ｃｍ−’　（ｓ、　ｘステル
−ＣＯ）口Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２０）　：　δ＝　１７７．
３ｐｐｍ（ｂｓ、　Ｃｏ）、９７〜９９ｐｐｍ（ｂｓ、
Ｃ−１）、６６〜７８．５ｐｐｍ（ｍ、Ｃ−２，３，４
，５，６゜Ｃｏ−ＣＨ，）、３５．５．３３．３．３１
．４．２６．０，２４．３ｐｐｍ（ｓ、　　９　ｘｃＨ
，）、１５．５ｐｐｍ（ｓ、ＣＨ３）。

実施例　５ デカノイル−キシランサルフェートＮａ塩ＧＷＩ　ｎお
よび■によって、無水のＤＭＳＯ２００＋＋＋Ｑ中にお
いて、ドデカン酸９．１ｇ（０，０４５モル）、ＣＤｌ
７．３６ｇ（０，０４５モル）およびキシラン１５９（
０，１１４モル）を反応させそしてそれから無水のＤＭ
Ｆ　３００ｍα中において反応生成物を５Ｏ１−ピリジ
ン複合体６０ｇ（０，３８モル）で硫酸化する。

収量：淡い帯褐色の無定形粉末３０　、５ｇアシル化の
程度二〇Ｈ基の２０％（”　Ｃ−ＮＭＲによる） 硫酸化の程度：　　７２．５％ 分析値：Ｃ３０−４％　Ｈ４，４％　Ｓ　１２．０％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４０ｃｍ−’　（ｓ、エステル
Ｃｏ）目Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　：　δ−１７４〜１７
８．５ｐｐｍ（ｂｓ、　ＣＯ）、９４．５−１０５−１
Ｏ６ｐｐ、Ｃ−１）、５７−８３．５ｐｐｍ（ｍ、Ｃ−
２゜３．４，５．Ｃｏ−ＣＨ，）、３５．３．３３．４
．３１，５．２６．０゜２４、Ｉｐｐｍ（ｂｓ、　　９
　ｘＣＨ２）、１５．７ｐｐｍＣｓ、　　ＣＨ３）。

実施例　６ デキストラン１０，０ＯＯＤからのヘキサノイル−デキ
ストランサルフェートＮａ塩 ＧＷＩ　　ｍおよび■によって、無水のＤＭＳＯ５０＋
Ｑ中において、ヘキサン酸１．１ｍＱ（１，０８９，９
ミリモル）、ＣＤＩ　１．５ｇ（９ミリモル）およびデ
キストラン（Ｍ′″１０，０ＯＯＤ　）　５　ｇ（３１
ミリモル）を反応させそして次に無水のＤＭＦ　　１０
０ｍ１２中において反応生成物を５Ｏ２−ピリジン複合
体３０ｇ（１８９ミリモル）で硫酸化する。

収量：白色の無定形の粉末１０．７ｇ アシル化の程度・ＯＨ基の１０％（’　”Ｃ−ＮＭＲに
よる） 硫酸化の程度：５１％ 分析値：Ｃ２７，０％　Ｈ４，２％　Ｓ　１４．１％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７３８ｃｍ−’　（ｍ、エステル
Ｃｏ）口Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ！Ｏ）　：　δ−１７５，５〜
１７８ｐｐｍ（ｍ、　Ｃｏ）、９６−９６−９９ｐｐ、
Ｃ−１）、６６〜８１ｐｐｍ（ｍ、Ｃ−２，３，４，５
゜６、Ｃｏ−ＣＨ２）、３５．７．３２．１，２５．５
．２３．４ｐｐｍ（ｓ、４ｘＣＨ，）、１５．０ｐｐｍ
（ｓ、ＣＨ３）。

実施例　７ デキストラン１０，０ＯＯＤからのヘキサノイル−デキ
ストランサルフェートＮａ塩 ＧＷＩ　　ｎおよび■によって、無水のＤＭＳＯ５０＋
＋＋＋２中において、ヘキサン酸２　、２ｍ１２（２、
１６ｇ、１８ミリモル）、ＣＤＩ　３．ｈ（１８ミリモ
ル）およびデキストラン（Ｍ−１０，０ＯＯＤ　）　５
　ｇ（３１ミリモル）を反応させそして次にＤＭＦ　１
００ｍ１２中において反応生成物を５０３−ピリジン複
合体３０９（１８９ミリモル）で硫酸化する。

収量：白色の無定形の粉末１１．８ｇ アシル化の程度：ＯＨ基の２０％（”Ｃ−ＮＭＲによる
） 硫酸化の程度：５７％ 分析値：Ｃ２９，１％　Ｈ４，３％　Ｓ　１３．８％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４０ｃ＋＋＋−’　（ｓ、エス
テルＣｏ）目Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　：δ−１７６〜１
７８．５ｐｐｍ（ｂｓ、　Ｃｏ）、９６．５〜９９−５
９９−５ｐｐ、　Ｃ−１）、６６〜８２ｐｐｍ（ｍ、　
Ｃ−２，３゜４．５，６．　ｃｏ−ｃ、Ｈｚ）、３５．
６．３２．１．２５．８．２３．５ｐｐｍ（ｓ、　　４
　ＸＣＨｘ）、１５．２ｐｐｍ（ｓ、　ＣＨｚ）。

実施例　８ デキストラン１０．０ＯＯＤからのヘキサノイル−デキ
ストランサルフェートＮａ塩 ＧＷＩ　　ＩＩおよび■によって、無水のＤＮＳＯ５０
ｍＱ中において、ヘキサン酸５ＪｍＱ（５，３８９，４
６ミリモル）、ＣＤＩ　７．５ｇ（４６ミリモル）およ
びデキストラン（Ｍ〜１０，０ＯＯＤ　）　５９（３１
ミリモル）を反応させそして次に無水のＤＭＦ　　ｌｏ
ｏ＋ａ１２中におし１て反応生成物をＳＯ１ピリジン複
合体２０ｇ（１２６ミリモル）で硫酸化する。

収量：白色の無定形の粉末１２．２９ アシル化の程度：ＯＨ基の４４％（”Ｃ−ＮＭＲによる
） 硫酸化の程度：５０％ 分析値：Ｃ３３，６％　Ｈ５，２％　Ｓ９．７％ＩＲ（
ＫＢｒ）　：　１７４１ｃｍ−’　（ｖｓ、エステルＣ
Ｏ）目Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ＊０）　：δ−１７２，５〜１７
９ｐｐｍ（ｍ、　Ｃｏ）、９６．２〜９９−９９−７ｐ
ｐ、　Ｃ−１）、６５〜７９ｐｐｍ（ｍ、　Ｃ−２，３
゜４．５．６．　　Ｃｏ−仁Ｈ８）、３５．６．３２．
２．２５．７．２３．８（ｓ。

４ＸＣＨり、１４．８ｐｐｍ（ｓ、　ＣＨ３）。

実施例　９ デキストラン６　、０００　Ｄからのヘキサデカノイル
−デキストランサルフェートＮａ塩 ｃｗｔ　　ｎおよび■によって、無水のＤＭＳＯ２０ｍ
（１中において、ヘキサデカン酸１．９ｇ（７，４ミリ
モル）、ｃＤＩ　１．２ｇ（７，５２９モル）およびデ
キストラン（Ｍ〜６．０００Ｄ　）　２９（１２，３ミ
リモル）を反応させそして次に無水のＤＭＦ　　１００
ｍ２中において反応生成物を５Ｏ１−ピリジン複合体１
０９（６３ミリモル）で硫酸化する。

収量：白色の無定形の粉末４．３ｇ アシル化の程度：ＯＨ基の２０％（’　３Ｃ−ＮＭＲに
よる） 硫酸化の程度＝７０％ 分析値：Ｃ２６，９％　Ｈ４，８％　Ｓ　１２．６％Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ）　：　１７４０ｃｍ−’　（ｓ、エステル
Ｃｏ）２８６０．２９３０ｃｉ＋−’（ｓ、　ＣＨｚ）
口Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　：δ−１７４〜１７９．５ｐ
ｐｍ（ｍ、　Ｃｏ）、９８．５〜１００．５ｐｐｍ（ｍ
、　Ｃ−１）、６２〜８３ｐｐｍ（ｍ、　Ｃ−２，３゜
４．５，６．−Ｇｏ−ＣＨ２）、３９．０．３４．９．
３２．８．２５．５（ｂｓ。

１４ＸＣＨ＊）、１６．８ｐｐｍ（ｓ、　ＣＨｓ）。

実施例　１０ デキストラン６．０００Ｄからのドデカノイル−デキス
トランサルフェートＮａ塩 ＧＷＩ　ＩＩおよび■によって、無水のＤＭＳＯ２００
＋ｎＱ中において、ドデカン酸１５９（７５ミリモル）
、ＣＤ１１２ｇ（７５ミリモル）およびデキストラン（
Ｍ〜６．０００Ｄ　）２０ｇ（１２３ミリモル）を反応
させそして次に無水のＤＭＦ　３００ｍＱ中において反
応生成物を５Ｏ１−ピリジン複合体９０ｇ（５６６ミリ
モル）で硫酸化する。

収量：淡い帯黄色の無定形の粉末４７．４９アシル化の
程度：ＯＨ基の２０％（目Ｃ−ＮＭＲによる） 硫酸化の程度：４８％ ＩＲ（ＫＢｒ）　＝　１７４０ｃｍ−’　（ｍ、エステ
ルＣＯ）”Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　　二　δ　−１７５
，５〜　１８０ｐｐｍ（ｙａ、　　Ｃｏ）　、９７〜７
９．５ｐｐｍ（＋ｏ、　Ｃ−１）、６５．５〜７９．５
ｐｐｍ（＋ｏ、　Ｃ−２゜３．４．５，６．　Ｃ０−Ｃ
Ｈ，）、３５．６．３３．８．３１．０．２６．２．２
４．０ｐｐｍ（ｂｓ、　ＩＯＸ　ＣＨ２）、１５．５ｐ
ｐｍ（ｓ、　ＣＢ、）。

実施例　１１ デキストラン６　、０００　Ｄからのヘキサノイル−デ キストランサルフェー トＮａ塩 アシル化の程度二〇Ｈ基の１４％ （”Ｃ−ＮＭＲによ る） 硫酸化の程度： ６６％ 分析値： ２２．９％ ３．９％ １４．１％ 実施例 ２ デキストラン６　、０００　Ｄからのプロパノイル−デ
キストランサルフェー トＮａ塩 アシル化の程度： ＯＨ基の２２％ 硫酸化の程度： ５９％ 分析値： ２３．７％ ４．０％ １３．９％ 実施例 ３ ヘキサノイル−キシランサルフェートＮａ塩アシル化の
程度： ０Ｈ基の２５％ 硫酸化の程度ニ ア０％ 分析値： ２４．５％ ２．８％ １３．８％ 実施例 ４ デキストラン１０，０ＯＯＤからの（（１，３−ジ−イ
ソプロポキシル）−プロピル−２−オキシカルホニル〕
−プロパノイル−デキストランサルフェートＮａ塩 ＣＨ。

ＣＨ。

アシル化の程度二〇Ｈ基の１０％ 硫酸化の程度：６６％ 分析値：Ｃ２５，０％　Ｈ４，１％　Ｓ　１３．３％実
施例　１５ 水素添加デキストラン３，５００Ｄからのヘキサノイル
−デキストランサルフェートＮａ塩アシル化の程度：Ｏ
Ｈ基の２０％ 硫酸化の程度ニア８％ 分析値：Ｃ２：Ｌ８％　Ｈ３，４％　Ｓ　１５．９％実
施例　１６ デキストラン１０，０ＯＯＤからのプロパノイル−デキ
ストランサルフェートＮａ塩 アシル化の程度二〇Ｈ基の３８％ 硫酸化の程度：５３％ 分析値：Ｃ２４−７％　Ｈ４，０％　Ｓ　１１．２％実
施例　１７ デキストラン２０　、０００　Ｄからのヘキサノイル−
デキストランサルフェートＮａ塩 アシル化の程度二〇Ｈ基の８％ 硫酸化の程度：５５％ 分析値：Ｃ２７，２％　Ｈ３，１％　Ｓ　１６．０％実
施例　１８ デキストラン３．５００Ｄからのプロパノイル−デキス
トランサルフェートＮａ塩 アシル化の程度：ＯＨ基の２１％ 硫酸化の程度：６５％ 分析値：Ｃ２３，０％　Ｈ４，１％　Ｓ　１５．２％実
施例　１９ デキストラン１０，０ＯＯＤからのドデカノイル−デキ
ストランサルフェートＮａ塩 アシル化の程度：ＯＨ基の１７％ 硫酸化の程度二８０％ 分析値：Ｃ２５，９％　Ｈ４，６％　５１４．６％実施
例　２０ ヘキサノイル−キシランサルフェートＮａ塩アシル化の
程度二〇Ｈ基の１０％ 硫酸化の程度ニア８％ 分析値：Ｃ２１，７％　Ｈ３゜９％　３１４．６％実施
例　２１ プロパノイル−キシランサルフェートＮａ塩アシル化の
程度：ＯＨ基の２０％ 硫酸化の程度ニア２％ 分析値：Ｃ２２，５％　Ｈ３，１％　Ｓ　１２．７％実
施例　２２ プロパノイル−キシランサルフェートＮａｆｌアシル化
の程度二〇Ｈ基の３９％ Ｆｉ＆＃化の程度： ５４％ 分析値： ２６．６％ ３．５％ １０．４％ 実施例 ３ ヘキサノイル−キシランサルフェー トＮａ塩 アシル化の程度： ＯＨ基の１６％ 硫酸化の程度： ５６％ 分析値：Ｃ ２６，６５％ ３．６５％ １１．４％ 実施例 ４ ドデカノイル−キジランスサルフェー トＮａ塩 アシル化の程度：ＯＨ基の１２％ 硫酸化の程度： ８１％ 分析値： ２４．５％ ３．７％ １３．４％ 実施例 ５ ヘキサノイル イル− キシランサルフェー）Ｎａ 塩 ＧＷＩ ■によって、 ７０℃で無水のＤＭＳＯ ２００ｍ（ｌ中 で、 キシラン２０ｇ（１５２ミリモル） をバルミチン 酸１５．５ｇ（６０，５ミリモル）およびＮ、Ｎ’−力
ルボニルジイミダゾール９．８９（６０，５ミリモル）
と３時間反応させる。次に、溶剤を真空下で除去しモし
てＧＷＩ　　Ｉ［［によって、５０℃でＤＩＪＦ　２０
ＯｍＱ中で残留物を二酸化硫黄−ピリジン複合体８０９
（０，５モル）で３時間硫酸化する。

処理、限外濾過および凍結乾燥によって、帯黄色の無定
形の粉末４６．２９を得る。

アシル化の程度：ＯＨ基の２０％ 硫酸化の程度＝５０％ 分析値：Ｃ３８，６５％　Ｈ５，９５％　Ｓ　９．１％
ＩＲ（ＫＢｒ）　：　１７４２ｃ＋１１−’　（ｖｓ、
エステルＣｏ）口Ｃ−ＮＩＪＲ（Ｄ、Ｏ）　：δ＝　１
７１”　１７８．５ｐｐｍ（ｍ、　Ｃｏ）、９２−５−
１００．５ｐｐｍ（ｍ、　Ｃ−１）、４７〜８１ｐｐｍ
（ｍ、　Ｃ−２，３゜４．５．　Ｃｏ−ＣＨ，）、３４
．１．３１．８．２６．５．２４．４ｐｐｍ（ｍ。

１４ＸｃＬ）、１５．２１）９！ＩＩ（Ｓ、　ＣＨ，）
。

実施例　２６ 水素添加デキストラン６　、５００　Ｄからのヘキシル
−デキストランサルフェートＮａ塩 −Ｘ−Ｂ−Ｙ＝−０−（ＣＨｘ）ｓ−ＣＨｓＧＷＩ　　
Ｉによって、水素添加デキストラン（Ｍ〜６．５００Ｄ
　）　５　ｇを無水のＤＭＳＯｌｏＯ＋＊Ｑに溶解しそ
して窒素下において５０℃で、粉末状水酸化ナトリウム
１．２ｇおよび１−ブロモヘキサン３．９ｒｘＱ（ＯＨ
基を基にして３０％の当量に相当する）と８時間反応さ
せる。次に、はげしく撹拌しながら、二酸化硫黄−ピリ
ジン複合体２２ｇを加えそして硫酸化を５０℃で３時間
実施する。処理、限外濾過および凍結乾燥により、帯黄
色の無定形の粉末８．９９を得る。

アルキル化の程度二〇Ｈ基の１２％ 硫酸化の程度：８３％ 分析値：Ｃ２０，１％　Ｈ２，９％　Ｓ　１６．４％目
Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ＊Ｏ）　：δ−９７〜９９．５ｐｐｍ（
ｍ、　Ｃ−１）、６５．５〜８１ｐｐｍ（ｍ、　Ｃ−２
，３，４，５，６，０−ＣＨｉ）、３２．４．３０．７
．２６．３．２３．５ｐｐｍ（４ｓ、　４　ｘＣＨ，）
、１５．１ｐｐｍ（ｓ、ＣＨｓ）。

実施例　２７ デキストランＩＯ，ｏｏＯＤからのブチル−デキストラ
ンサルフェートＮａ塩 −Ｘ−Ｂ−Ｙ＝１−０−（ＣＨｚ）ｓ−ＣＨｓ一般的な
実施説明Ｉによって、窒素雰囲気下５０℃で無水のＤＭ
ＳＯ１００ｍ１２中において、デキストラン（Ｍ’″Ｉ
Ｏ，ｏｏｏＤ　）　５　ｇを１−ブロモブタン２１１Ｑ
および粉末状水酸化カリウム１ｇと８時間反応させる。

次に、反応生成物を５０℃で三酸化硫黄−ピリジン複合
体２２ｇで３時間硫酸化する。

処理、精製および凍結乾燥により、淡い帯黄色の無定形
の粉末８．１ｇを得る。

アルキル化の程度二〇Ｈ基の８％ 硫酸化の程度ニア２％ 分析値：Ｃ２０，１％　Ｈ３，１％　Ｓ　１６．８％目
Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　：δ＝９８．２〜９９．５ｐｐ
ｍ（ｍ、　Ｃ−１）、６５．５〜８４．５ｐｐｍ（ｍ、
Ｃ−２，３，４，５，６，０−ＣＨｚ）、３３．２−２
０，５ｐｐｍ（ｂｓ、　　２　ＸＣＨ，）、　１５．３
ｐｐｍ（ｂｓ、ＣＨ，）。

実施例　２８ デキストラン１０，０ＯＯＤからのオクチル−デキスト
ランサルフェートＮａ塩 Ｘ−Ｂ−Ｙ＝−０−（ＣＨｚ）、−Ｃ）Ｉｓ一般的な実
施説明Ｉ（こよって、デキストラン（Ｍ〜１０，０ＯＯ
Ｄ）　５９を、窒素下において、ｌ−ヨードオクタン３
．４ｍ１２および粉末状ＮａＯＨ１ｇと反応させそして
それから反応生成物を三酸化硫黄−ビリジン複合体２２
ｇで硫酸化する。

収量：淡い帯褐色の無定形粉末１０．２ｇアルキル化の
程度二〇Ｈ基の７％ 硫酸化の程度：８９％ 分析値：Ｃ１８，７％　Ｈ２，７％　５１７．６％’　
”Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ！Ｏ）　：δ−９６，５〜９９．５ｐ
ｐｍ（ｍ、　Ｃ−１）６７〜７８．５ｐｐｍ（ｍ、　Ｃ
−２，３，４，５，６，０−ＣＨ２）、３３．６．３１
．０．２７．５．２４．２ｐｐｍ（ｂｓ、　６　ｘＣＨ
，）、１５．８ｐｐ（ｓ、　ＣＨ，）。

実施例　２９ 水素添加デキストラン６．５００Ｄからのヘキシル−デ
キストランサルフェートＮａ塩 一般的な５Ｉ！施説明Ｉによって、窒素雰囲気下無水の
ＤＭＳＯ１００ｍｆｆ中において、水素添加デキストラ
ン（Ｍ〜６，５００Ｄ　）　５　ｇを、１−ブロモヘキ
サン５．２＋ａおよび粉末状水酸化ナトリウム１．６ｇ
と反応させそして次に反応生成物を三酸化硫黄−ピリジ
ン複合体２２ｇで硫酸化する。

収量二ベージュ色の無定形粉末８．８９アルキル化の程
度二〇Ｈ基の７％ 硫酸化の程度：８０％ 分析値：Ｃ１８，３％　Ｈ２，９％　３１６．１％ロＣ
−ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）　：δ−９７，５ｐｐｍ（ｂｓ、　
Ｃ−１）、６７．０〜８０．５ｐｐｍ　（ｍ、　Ｃ−２
，３，４，５，６，０−ＣＨ２）　、３２．５．３０．
５．２６．２．２３．８ｐｐｍ（ｂｓ、　４　ｘＣＨ，
）、１４．９ｐｐｍ（ｓ、　ＣＨ３）。

実施例　３０ 水素添加デキストラン１０，０ＯＯＤからのヘキシル−
デキストランサルフェートＮａ塩 一般的な実施説明Ｉによって、窒素雰囲気下７０°Ｃで
無水のＤＭＳＯ１００ｍｆｆ中において、水素添加デキ
ストラン（Ｍ〜６．５００Ｄ　）　５　ｇを１−ブロモ
ヘキサン７．８ｒｎｎ８よび水酸化ナトリウム２．４９
と反応させそして次に反応生成物を三酸化硫黄−ピリジ
ン複合体２２ｇで硫酸化する。

収量：帯褐色無定形粉末７．２ｇ アルキル化の程度：ＯＨ基の１７％ 硫酸化の程度：６４％ 分析値：Ｃ２６，７％　Ｈ３，９％　３１５．２％目Ｃ
−ＮＩＪＲ（Ｃ２０）　：δ−９７，２〜９９．５ｐｐ
ｍ（ｍ、　Ｃ−１）、６６．０−８０．５ｐｐｍ（ｍ、
　Ｃ−２，３，４，５，６，０−ＣＨｚ）、３２．５３
０．７．２６．２．２３．９ｐｐｍ（ｂｓ、　４　ｘＣ
Ｈｚ）、１５．０ｐｐｍ（ｓ、　Ｃ）＋３）。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）線状または分枝鎖状であってもよく、そして単量体
   単位当り１個の置換されたまたは置換されないアミノ基
   を含有していてもよい一様なまたは異なる天然に存在す
   るまたは合成の単量体からなり、そしてＯＨ基が平均し
   て式−Ｘ−Ｂ−Ｙ 〔式中、 Ｘは、オキシ基または式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （炭素原子はＢに結合している）の基を示し、 Ｂは、２〜３０個の炭素原子を有する非−芳香族炭化水
   素基（この基のアルキル鎖において、３個までのメチレ
   ン単位はオキシ基により置換されていてもよく、この基
   の中において３個までのＣ−Ｃ二重結合が存在していて
   もよくそしてこの基は３個までのＣ＿１〜Ｃ＿４−アル
   キル基により置換されていてもよい）を示し、そして Ｙは、もしもＸがオキシ基である場合は、 水素、ＣＯＯＲまたはＯＳＯ＿３Ｒ＾１（式中、Ｒは生
   理学的に許容し得る１価または２価の陽イオンであるか
   または２０個までの炭素原子を有する炭化水素基または
   ３〜１０個の炭素原子を有するモノーまたはビスエーテ
   ル基を示しそしてＲ＾１は生理学的に許容し得る陽イオ
   ンを示す）であることができ、または Ｙは、もしもＸが式 I の基である場合は、 水素またＣＯＯＲ（式中、Ｒは上述した意義を有す）を
   示す〕 の基によって５〜８０％置換されており、そして上述し
   たポリサッカライドのＯＨ基が式ＯＳＯ＿３Ｍ（式中、
   Ｍは生理学的に許容し得る陽イオンを示す）の基によっ
   て１０〜９５％置換されておりそしてＯＨ基の０〜４０
   ％が置換されていない置換されたポリサッカライド（コ
   ンドロイチンサルフェートのパルミチン酸エステルおよ
   びデキストランサルフェートのラウリン酸エステルを除
   く）。 ２）Ｘがオキシ基でありそしてＹが水素、ＣＯＯＲまた
   はＯＳＯ＿３Ｒ＾１（式中、Ｒは生理学的に許容し得る
   陽イオンであるかまたは２０個までの炭素原子を有する
   炭化水素基を示しそしてＲ＾１は生理学的に許容し得る
   陽イオンを示す）であることができる請求項１記載の置
   換されたポリサッカライド。 ３）Ｘが式 I の基でありそしてＹが水素またはＣＯＯ
   Ｒ（式中、Ｒは前述した意義を有す）を示す請求項１記
   載の置換されたポリサッカライド。 ４）ポリサッカライドマトリックスが次の化合物群から
   選択された一様なまたは異なる単量体から構成されるか
   または次の化合物からなる請求項１〜３の何れかの項記
   載の置換されたポリサッカライド。 キシロース、アラビノース、ラムノース、 フコース、グルコース、マンノース、ガラクトース、フ
   ラクトース、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサ
   ミン、グルクロン酸、ガラクトウロン酸、マンヌロン酸
   、カラゲナン、フコイダン、ラミナラン、アルギネート
   、レンチナン、プルラン、キシラン、デキストラン、ヘ
   パリン、ケラタンサルフェート、コンドロイチン４−お
   よび６−サルフェート、デルマタンサルフェート、ヘパ
   リンサルフェート、ヒアルロン酸、タイクウロン酸およ
   び澱粉、セルローズ、グリコゲン、キチンまたはペクチ
   ンの部分的加水分解物。 ５）１００ＫＤまでの平均分子量を有する請求項１〜４
   の何れかの項記載の置換されたポリサッカライド。 ６）ポリサッカライドマトリックスが１，０００〜２２
   ，０００の平均分子量を有するキシランまたはデキスト
   ランからなる請求項１〜５の何れかの項記載の置換され
   たポリサッカライド。 ７）塩基性の触媒下においてポリサッカライドをハロゲ
   ン化アルキルまたはω−ハロゲノカルボン酸塩で部分的
   にエーテル化しそしてそれから生成物を直接にまたはア
   ルコキシル化後に完全にまたは部分的に硫酸化すること
   からなる請求項１、２または４〜６の何れかの項記載の
   Ｘがオキシ基である置換されたポリサッカライドの製法
   。 ８）ポリサッカライドをカルボン酸またはカルボン酸誘
   導体で部分的にアシル化しそして次にポリサッカライド
   中に残留するＯＨ基を完全にまたは部分的に硫酸化する
   ことからなる請求項１、３または４〜６の何れかの項記
   載のＸが式 I の基である置換されたポリサッカライド
   の製法。 ９）ウィルスにより引き起される病気、特にＨＩＶによ
   り引き起される病気を抑制するための前記請求項の何れ
   かの項記載の置換されたポリサッカライド（コンドロイ
   チンサルフェートのパルミチン酸エステルおよびデキス
   トランサルフェートのラウリン酸エステルを含む）の使
   用。 １０）請求項１記載の化合物を含有する薬学的組成物。 １１）ウィルス病、特にＨＩＶにより引き起される病気
   を抑制するための前記請求項の何れかの項記載の化合物
   を含有する薬学的組成物。 １２）ウィルス病、特にＨＩＶにより引き起される病気
   を抑制する薬学的組成物を製造するための請求項１〜６
   の何れかの項記載の化合物の使用。 １３）請求項１〜６の何れかの項記載の１種または２種
   以上の化合物を投与することからなるウィルス病の治療
   方法。 １４）請求項１〜６の何れかの項記載の１種または２種
   以上の化合物を、適当な補助剤および（または）賦形剤
   と一緒に、適当な投与形態にすることからなるウィルス
   病抑制用の薬学的組成物の製法。