JPH03246223A

JPH03246223A - 抗高脂血症剤および抗動脈硬化症剤

Info

Publication number: JPH03246223A
Application number: JP4043290A
Authority: JP
Inventors: Hideki Ogawara; 大河原　秀樹; Takashi Yokoyama; 隆横山; Eiji Tanaka; 栄治田中; Teruyuki Sakai; 輝行酒井; Yoshiaki Takatani; 高谷　芳明
Original assignee: Kirin Brewery Co Ltd
Current assignee: Kirin Brewery Co Ltd
Priority date: 1990-02-21
Filing date: 1990-02-21
Publication date: 1991-11-01

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】く技術分野〉本発明は、新規な抗高脂血症剤および抗動脈硬化症剤に
関し、更に詳しくは血中コレステロール低下作用を有す
る抗高脂血症剤および抗酸化作用に基づくマクロファー
ジ泡沫化抑制作用を有する抗動脈硬化症剤に関する。

く先行技術〉次式（Ｉ）で示される化合物（Ｎ、　Ｎ−ジゲラニルー
３，４−メチレンジオキシアニリン）は西独特許第２３
３８８１９号に記載されている公知化合物であり、幼若
ホルモン様の生理活性を有し害虫駆除薬としての用途が
知られているが、抗高脂自作用および抗動脈硬化作用に
ついては従来知られていない。

近年わが国においても、生活水準の変化に伴い、高カロ
リー高コレステロール食を主体とする欧米型食生活の増
加、人口の高齢化とともに高脂血症およびそれに起因す
る動脈硬化性疾患が急増し大きな社会問題となっている
。高脂血症の治療法としては一般に食事療法、運動療法
、薬物療法等が行なわれているが、薬物療法としては主
に血中脂質を低下させることがおこなわれている。

一方、動脈硬化症は、血管の内膜肥厚と脂質蓄積という
特徴的な病変であり、その薬物療法として従来より動脈
硬化症の大きな危険因子の１つである血中コレステロー
ルを低下させる薬物が用いられているが、最近の生化学
的知見から、酸化ＬＤＬ　（低比重リボ蛋白）等の変性
ＬＤＬの生成を抑制し、マクロファージの泡沫化を抑え
ることで直接的な抗動脈硬化作用が得られるのではない
かと期待されている。

また、近時、疫学調査の結果、血中のＨＤＬコレステロ
ール（高比重リポ蛋白コレステロール）の含有量が低く
なると動脈硬化が促進される事が知られている。

〔発明の概要〕

く要旨〉本発明ハ、血中コレステロール低下作用、抗酸化作用に
基づくマクロファージ泡沫化抑制作用、更にＨＤＬコレ
ステロールを上昇させ長期投与可能な毒性の小さい新規
な薬剤を提供することを目的とするものである。

本発明者らは、上記の目的を達成するために鋭意研究を
行なった結果、上記式（１）で示される化合物およびそ
の薬理学的に許容しうる酸付加塩が優れた血中コレステ
ロール低下作用を有し、抗高脂血症剤として、更に抗酸
化作用に基づくマクロファージ泡沫化抑制作用を有し、
抗動脈硬化剤として、有用な医薬化合物であることを見
出し、この知見をもとに本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明による抗高脂血症剤および抗動脈硬化
症剤は、次式（Ｉ）で示される化合物またはその薬理学
的に許容しうる酸付加塩を有効成分として含有するもの
である。

く効果〉本発明による抗高脂血症剤および抗動脈硬化症剤は、優
れた血中コレステロール低下作用、および抗酸化作用に
基づくマクロファージ泡沫化抑制作用を発揮し、更に毒
性も低く、従って高脂血症ひいては動脈硬化症に対して
間接的あるいは直接的な優れた治療効果を示す長期投与
可能な薬剤である。

〔発明の詳細な説明〕

く化合物（Ｉ）および薬学的に許容しうる塩〉次式（Ｉ
）で示される化合物は血中コレステロール低下作用、お
よび抗酸化作用に基づくマクロファージ泡沫化抑制作用
を有することは前記した通りである。

この化合物は、合目的的な任意の方法によって製造する
ことができる。この具体的な製造法の一例は、３．４−
メチレンジオキシアニリンを非プロトン性溶媒（たとえ
ばジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テト
ラヒドロフラン、ジエチルエーテル）中で、塩基存在下
および水冷下でゲラニルプロミドと反応させることによ
って化合物（１）を生成させる方法である。

式（１）で示される化合物は、塩基性の窒素原子を有し
ているのでこの位置において酸付加塩があり得る。酸付
加塩を形成すべき酸としては、例えば無機酸、例えば塩
酸、硫酸、硝酸、リン酸など、或いは有機酸、例えば酢
酸、プロピオン酸、マレイン酸、オレイン酸、パルミチ
ン酸、クエン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、グルタ
ミン酸、パントテン酸、ラウリルスルホン酸、などをあ
げることができる。なお酸付加塩を医薬として使用する
場合には、酸は薬学上許容されるものでなければならな
い事は言うまでもない。

式（１）で示される化合物は、後記薬理試験における実
験例（１）〜（３）の結果から血中コレステロール低下
作用を有していることが、また実験例（４）〜（５）の
結果からＨＤＬコレステロールを上昇させ抗酸化作用に
基づくマクロファージ泡沫化抑制作用を有していること
が明らかになった。また、実験例（６）の急性毒性試験
の結果よりＬＤ５ｏ値が３０００＋１ｇ／ｋｇ以上であ
り、長期投与可能な安全な化合物であることがわかった
。

従って式（１）で示される化合物は、抗高脂血症剤およ
び抗動脈硬化症剤として使用することができる。

く抗高脂血症剤および抗動脈硬化症剤〉本発明による抗
高脂血症剤および抗動脈硬化症剤は、前記式（１）で示
される化合物またはその薬理学的に許容しうる酸付加塩
（以下、有効成分化合物ともいう）を有効成分として含
有するものである。

上記式（１）で示される化合物またはその薬理学的に許
容しうる酸付加塩は通常の処方により錠剤、散剤、カプ
セル剤、シロップ剤などの軽口投与剤や注射剤などとし
て用いることが出来る。また、剤型に応じて適当な担体
ないし希釈剤（例えば、パイロジエン不含蒸留水、デン
プン等）を配合して調剤することが普通である。更に、
上記式（Ｉ）で示される化合物またはその薬理学的に許
容しうる酸付加塩をこれらと両立可能な生理活性物質な
いし医薬を混合、調剤することも可能である。投与方法
としては、経口あるいは注射（主として筋肉内、静脈内
、皮下）などにより行なわれ、投与量は疾患の種類、患
者の年齢、体重、症状の程度および投与経路などによっ
ても異なるが、通常成人１日体重１キログラム当り有効
成分化合物が０．１〜５００■、好ましくは０．１〜１
００■、の範囲となる量が適当である。

く実験例〉１）　合成例（有効成分化合物）３．４−メチレンジオキシアニリン７０゜（０，５１ｇ
ｏｌ　）をジメチルホルムアミド３００ｍ１に溶かし、
炭酸カリウム１５０ｇ　（１，０９ｍｏｌ　）を加えた
後、水冷下ゲラニルプロミド２６５ｇ　（１，２２ｍｏ
ｌ　）を滴下する。滴下後、室温まで昇温し１２時間攪
拌する。沈澱物を濾去後、母液に塩化アンモニウム水、
水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで
乾燥する。

硫酸マグネシウムを濾去後、溶媒を留去し、得られる粗
生成物をシリカゲル１２００．を用いてカラムクロマト
グラフィーに付し、ヘキサン−酢酸エチル（５０：１）
流分よりＮ、　Ｎ−ジゲラニル３．４−メチレンジオキ
シアニリンを１２０ｇ（０，２９ｍｏｌ　）得た。この
化合物の物理化学的性状は次の通りである。

淡黄色油状物質　　Ｃ２□Ｈ３９ＮＯ２１Ｈ−ＮＭＲ（
５００ＭＨｚ、　ＣＤ　Ｃ１３）δ（１）Ｉ）層　）　
　　：　　　　６．　　６８　　（ＩＨ，ｄ）、　　　
６．　　３９（ＩＨ，ｄ）、６．　１６　　（ＬＨ，ｄ
ｄ）。

５．８４　　（２Ｈ，ｓ）、５．　１９　　（２Ｈ。

５．０６　　（２Ｈ，ｔ）、　　３．　７７　　（４Ｈ
。

２、　１−１．　９　　（８Ｈ，ｍ）、　　１．６６゜
１、　６５．　１．　５８　　（ｅａｃｈ　　　３Ｈ。

ＩＲ（ｎｅａｔ）　　ν　　　：　　　２９５０．　１
５０５゜ａＸ１４９０、　１２１５．　１０１０４Ｏ（ＦＤ）ｍ／ｚ　　　４０９ｔ）。

５）ｄ）。

２）　薬理試験（１）トライトンＷＲ−１３３９誘発高脂血マウスにお
ける血中脂質低下作用６週齢ｄｄＹ系雄性マウスー群６匹（試験群）に、生理
食塩水に溶解させたトライトンＷＲ−１３３９４００ｍ
ｇ／）ｃｇを尾静脈内投与するとともに、供試化合物３
００ｍｇ／ｋｇを０．５％Ｔｖｅｅｎ８０溶液に懸濁さ
せ腹腔内投与した。またトライトンを投与した同マウス
ー群６匹に０．５％Ｔｗｅｅｎ　８０溶液のみを投与し
たものを対照群とした。

トライトン投与８時間後に採血し、血清中総コレステロ
ール量をコレステロールＥ−テスト（和光純薬工業社製
）を用いて測定した。対照群における測定値を基準とし
て、試験群における測定値から、下式に従い、血清中総
コレステロール量の低下率（％）を算出した。

得られた結果を第１表に示す。

第１表低下率（％）式（Ｉ）で示される化合物　　　　２２用開田らの方法（日本薬理学会誌、８３．３３１（１９８
４））に準じて、以下の通り行なった。

即ち、５週齢Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラットー群５匹（試験
群）に、０．５％Ｔνｅｅｎ８０溶液に懸濁した供試化
合物を一定時間（午前中）に１０日間連続経口投与した
。また同うットー群６匹に０．５％Ｔｖｅｅｎ　８０溶
液のみを投与したものを対照群とした。

最終投与４時間後に採血し、血清中の総コレステローノ
：量およびトリグリセライド量を、それぞれコレステロ
ールＥ−テスト及びトリグリセライドＧ−テスト（いず
れも和光純薬工業社！りにて測定した。対照群における
上記各測定値を基準として、試験群の各測定値から、試
験例（１）と同一の式から血清中総コレステロール量及
びトリグリセライド量の低下率（％）を算出した。

得られた結果を第２表に示す。

第２表１６０　　　　　２２　　　　　　６５（３）高コレス
テロール飼料食ラットにおける血中脂質低下作用坂下らの方法（動脈硬化、１４．６８５−６９０　（１
９８６））に準じて、以下の通り行なった。

即ち、５週齢Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラットを高コレステロ
ール飼料（オリエンタル酵母社製精製飼料（無脂肪食）
に１％コレステロール、０．２％コール酸および１０％
ラードを配合したもの）にて７日間飼育し高コレステロ
ール血症とした。引き続き高コレステロール飼料で飼育
するとともに、１群５匹（試験群）に、０．５％Ｔｖｅ
ｅｎ８０溶液に懸濁した供試化合物を一定時間（午前中
）に７日間連続経ロ投与した。また同うットー群６匹に
０．５％Ｔｗｅｅｎ８０溶液のみを投与したものを対照
群とした。

最終投与４時間後に採血し、血清中の総コレステロール
量は試験例（２）と同様の方法で測定した。ＨＤＬ−コ
レステロール量はＨＤＬ−コレステロール沈澱試液セッ
ト（和光純薬工業社製）によりβ−リボ蛋白を沈澱させ
た後、上清の総コレステロール量を試験例（１）と同様
にして測定しＨＤＬ−コレステロール量とした。それぞ
れの変化率は、試験例（１）に準じて算出した。

得られた結果を第３表に示す。

第３表１６０　　　　　　４９　　　　　　　５９（４）抗酸
化作用Ｈｅｉ　ｎｅｃｋｅらの方法（ジャーナル・オブ・クリ
ニカルψインベスティゲーション、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ’Ｃ１１ｎｉｃａｌ　ＩｎｖｅｓＮｇａｔｌｏｎ、　
７４．１８９０−１８９４　（１９８４））に従い、ヒ
ト　ＬＤＬ　（１５０μｇ−タンパク質／ｍ１）を５　
ｔｔ　Ｍ　Ｃｕ　２＋を含むＦ−１２培地の中で供試化
合物（２５μＭ）と共に３７℃、２４時間インキュベー
トした。得られたＬＤＬ溶液の過酸化脂質量は、Ｂｕｅ
ｇｅらの方法（メソッズ・イン・エンザイモロジー、Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｓｏｌｏｇｙ、　５２　
。

３０２−３１０（１９７８））にならい、ＴＢＡ反応性
物質（ｒｅａｃｔｌｖｅ　５ｕｂｓｔａｎｃｅ）量とし
て求めた０その結果、供試化合物を加えない対照に比し
、上記式（１）で示される化合物は過酸化脂質生成量を
７７％抑制した。また過酸化を５０％抑制する薬物濃度
（ＩＣ５ｏ）は１．２μＭであった。

（５）マクロファージ泡沫化抑制作用マウスにリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）９ｍｌを腹腔
内に投与し、腹腔マクロファージを採取した。２０％牛
脂児血清を含むＤＭＥＭ培地に２×１０６細胞／ｍｌと
なる様懸濁し、４８穴培養プレートに２００μｍずつ播
いた。２時間後非接着性の細胞を取り除き、さらに１６
時間培養した。培地を２００μｍの０．２％ヒト血清ア
ルブミン含有ＤＭＥＭに交換し、試験例４で得られた供
試化合物含有のＬＤＬ溶液１００μｌを添加して培養し
た。４８時間後細胞をＰＢＳで洗浄し、１０％ホルマリ
ンで固定し、オイルレッドＯ脂肪染色に供した。

位相差顕微鏡観察の結果、供試化合物を加えないＬＤＬ
溶液はマクロファージの細胞内に著しい脂質蓄積を引き
起こしたが、上記式（１）で示される化合物を含むＬＤ
Ｌ溶液は脂質蓄積をほぼ完全に抑制した。

３）　急性毒性試験上記式（１）で示される化合物を０．　５％Ｔｗｅｅｎ
　８０溶液に懸濁し、８週齢ｄｄＹ系雄性マウスー群６
匹に経口投与し、１力月間急性毒性を観察した。その結
果、化合物のＬ　Ｄ　ｓｏ値は３０００■／ｋｇ以上で
あった。

４）　製剤例製剤例１（錠剤） ■上記式（Ｉ）で示される化合物　　　　　　１０ｇ■
コーンスターチ　　　　　　　　　　　　　　４０ｇ■
結晶セルロース　　　　　　　　　　　　　４５ｇ■カ
ルボキシメチルセルロースカルシウム　　　４ｇ■軽質
無水ケイ酸　　　　　　　　　　　　５００■ｇ上記の
処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて圧縮成
型して一錠２５０■の錠剤を得た。

この錠剤−錠には上記式（Ｉ）で示される化合物日５〜
３０錠を２５■が含有されており、成人１数回に分けて服用する。

製剤例２（カプセル剤） ■上記式（１）で示される化合物　　　　　　２０ｇ■
コーンスターチ　　　　　　　　　　　７９．５μ計　
　　　　　　　　　　　　　１００ｇ上記の処方に従っ
て■〜■を均一に混合し、その２００ｍｇを２号カプセ
ルに充填してカプセル剤を得た。このカプセル剤１カプ
セルには上記式（１）で示される化合物４０ｍｇが含有
されており、成人１日１〜２０カプセルを数回に分けて
服用する。

製剤例３（顆粒剤） ■上記式（１）で示される化合物　　　　　　１０ｇ■
結晶セルロース　　　　　　　　　　　　　４０ｇ■１
０％ヒドロキシプロピルセルロースエタノール溶液　　
　　　　　　　　　　　　５０μ計　　　　　　　　　
　　　　　１００ｇ上記の処方に従って■〜■を均一に
混合し、練合した後、押出し造粒機により造粒後、乾燥
し篩別して顆粒剤を得た。この顆粒剤１ｇには上記式（
１）で示される化合物１００■が含有されており、成人
１日１〜８ｇ−を数回に分けて服用する。

Claims

【特許請求の範囲】１、次式（ I ）で示される化合物またはその薬理学的
に許容しうる酸付加塩を有効成分として含有する、抗高
脂血症剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）２、次式（ I ）で示される化合物またはその薬理学的
に許容しうる酸付加塩を有効成分として含有する、抗動
脈硬化症剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）