JPH03135995A - ８―アルコキシアデノシン―３′，５′―環状リン酸の分離精製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、種々の優れた生理活性を有し、医薬及び生化
学試薬としての用途が期待される８−アルコキシアデノ
シン−３’　、　５’　−環状リン酸（以下、８−アル
コキシ−ｃＡＭＰと称する）の分離精製法に関する。

〔従来の技術〕

８−アルコキシ−ｃＡＭＰは、一般にアデノシン−３’
　、　５’−環状リン酸（以下、ｃＡＭＰと称する）あ
るいはその８位置換誘導体を出発原料として化学的合成
法により製造されている。こうして得られた８−アルコ
キシ−ｃＡＭＰを含む反応液には、未反応の出発原料、
副反応生成物のｃＡＭＰ誘導体、さらには着色物質など
の夾雑物が混在する。

従来、その分離精製法としては、例えばシリカゲル、ア
ルミナ、イオン交換樹脂、活性炭などを用いて吸着・溶
出する方法、さらには、再結晶法、ｐｉ調節による析出
法、有機溶媒による抽出法などが知られている。

〔発明が解決しようとする課題〕

上記した反応物中の目的物の８−アルコキシ−ｃＡＭＰ
と夾雑物は、化学構造的、物理化学的性質が類似してい
るため、その分離が特に困難である。

そして、上記した分離精製法のうち、吸着・溶出する方
法は、操作手順が長くかつ繁雑であるばかりでなく、吸
着剤や溶出液が多量となるなどの欠点がある。

さらに再結晶法、ｐＨ調節による析出法、有機溶媒によ
る抽出法では、８−アルコキシ−ｃＡＭＰの純度が必ず
しも高くないなどの欠点がある。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らは、これらの欠点を解消すべく鋭意研究した
結果、上記したような種々の夾雑物を含む粗製の８−ア
ルコキシ−ｃＡＭＰをメタノールに懸濁後、ナトリウム
アルコラードと作用させることにより、８−アルコキシ
−ｃＡＭＰのみをナトリウム塩として高純度で効率良く
、しかも極めて簡単に得ることができることを知り、こ
の知見に基づいて本発明を完成した。

すなわち本発明は、粗製の８−アルコキシ−ｃＡＭＰを
メタノールに懸濁後、ナトリウムアルコラードと作用さ
せて８−アルコキシ−ｃＡＭＰのナトリウム塩を析出さ
せ、これを採取することを特徴とする８−アルコキシ−
ｃＡＭＰの分離精製法である。

以下、本発明について詳しく説明する。

本発明における８−アルコキシ−ｃＡＭＰとは、次の一
般式で表される 占Ｈ （式中Ｒは、例えば炭素数１〜４などの低級アルキル基
を意味する）。

そして具体的には、例えば８−メトキシ−ｃＡＭＰ。

８−エトキシ−ｃＡＭＰ、８−プロポキシ−ｃＡＭＰ　
。

８−ブトキシ−ｃＡＭＰなどが挙げられる。

この８−アルコキシ−ｃＡＭＰは、種々の化学的合成法
によって得られる。例えば、ｃＡＭＰに臭素を作用させ
て得られる８−ブロモ−ｃＡＭＰにアルカリ金属のアル
コラードを反応させる方法〔バイオケミストリー　（Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１０　、２３９０（１９７
１））　、あるいは上記８−ブロモ−ｃＡＭＰにアルカ
リ金属の水酸化物を含むアルコールを作用させる方法な
どである。

このような化学的合成法により得た反応液中には、目的
とする８−アルコキシ−ｃＡＭＰの他に、一般に未反応
のｃＡＭＰ、１３−ブロモ−ｃＡＭＰ　ｓ副反応生成物
であるｃＡＭＰの誘導体、さらには着色物質などの夾雑
物を含んでいる。

この反応液より、−旦そのまま水分、溶媒などを常法に
より除くか、又は例えば塩酸などを用いてｐＨを調節し
、析出物を採取するなどの方法によって、夾雑物を含む
粗製の８−アルコキシ−ｃＡＭＰが得られる。

このときの８−アルコキシ−ｃＡＭＰの純度は、一般的
には９０％以下、よくても通常９５％程度を上限とする
ものである。

本発明においては、先ず該粗製の８−アルコキシ−ｃＡ
ＭＰを４〜４０倍量、好ましくは７〜２０倍量（Ｖ／　
Ｗ）のメタノールに攪拌しつつ懸濁させる。ここでメタ
ノールを用いる意義は次工程で得られる８−アルコキシ
−ｃＡＭＰのナトリウム塩が、メタノールに特異的に易
溶性である点にある。

次いで、該懸濁液に室温附近（２０〜４０℃）で、８−
アルコキシ−ｃＡＭＰの少なくとも１モル当量（１モル
当量より若干大であるのが好ましい）のナトリウムアル
コラードを含有するアルコール溶液を加え攪拌すると、
８−アルコキシ−ｃＡＭＰは夾雑物と共に溶解する。

このとき用いるナトリウムアルコラードのアルコール溶
液としては、例えばナトリウムメチラートのメタノール
溶液、ナトリウムエチラートのエタノール溶液などが挙
げられるが、ナトリウムメチラートのメタノール溶液が
好ましい。

前記のごとくして完全に溶解後さらに有機溶媒を添加し
、室温以下で攪拌、静置するなどして目的とする８−ア
ルコキシ−ｃＡＭＰのナトリウム塩のみを選択的に析出
させることができる。

この有機溶媒としては、例えばエタノール、プロパツー
ル、ブタノール、アセトン、エーテルなどが単独又は組
み合わせて用いられる。そしてこの有機溶媒の添加量は
、前記の懸濁時のメタノール添加量、析出時に用いる有
機溶媒の種類によって異なるが、要するに８−アルコキ
シ−ｃＡＭＰが析出するに十分な量を適宜選択すればよ
い。

次に、析出した８−アルコキシ−ｃＡＭＰのナトリウム
塩の結晶を常法、例えば濾過などの方法により採取し、
必要によりこれを少量のメタノール、エタノールなどで
洗浄して、９７％以上という高純度に精製された８−ア
ルコキシ−ｃＡＭＰのナトリウム塩を得ることができる
。そして夾雑物は濾液中に残存する。

さらにこうして得られた８−アルコキシ−ｃＡＭＰのナ
トリウム塩は、必要に応じて適宜の方法、例えば水に溶
解したのち、塩酸などを用いてｐＨ３以下とし、遊離酸
として晶析させることにより、高純度に精製された８−
アルコキシ−ｃＡＭＰを得ることができる。

〔発明の効果〕

本発明によれば、化学構造的、物理化学的性質が類似し
ている夾雑物が存在するため、従来分離精製が極めて困
難であった８−アルコキシ−ｃＡＭＰを高純度で、効率
よく、しかも極めて簡単な方法で得ることができる。そ
してさらに従来に比べて安価に、かつ−度に大量の精製
を行なうことができ、産業上極めて有意義である。

〔実施例〕

以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。

実施例 ８−ブロモ−ｃＡＭＰ　１０　ｇ　（２４，５ｍｍｏｌ
）を水酸化カリウム５　ｇ　（８９，１ｍｍｏｌ）を溶
解させたメタノール２００　＋ＴＬｉ！に加え、室温（
２５℃）で３時間攪拌しながら反応させる。

次いで、析出した結晶を含む反応液に水１００ｍ１を加
えて結晶を溶解したのち、２Ｎ−塩酸を加え、ｐ）ｌを
約２として１晩室温にて放置する。

析出した結晶を濾取し、乾燥して、粗製の８−メトキシ
−ｃＡＭＰ　８．２　ｇを得た。このときの高速液体ク
ロマトグラフィによる分析値は次の通りである。

８−メトキシ−ｃＡＭＰ　９１．９％、　ｃＡＭＰ　４
．６％、８一ブロモーｃＡＭＰ　２．５％。

また着色物質の吸光度は、Ｅ　”（４００ｎｍ）＝　０
．１４であった。

次にこの粗製の８−メトキシ−ｃＡＭＰ　８．１　ｇ（
２０，７ｍｍｏｌ）をメタノール１００　ｒａｌｌに攪
拌しながら懸濁させたのち、これに２８％（Ｗ／Ｖ）ナ
トリウムメチラート−メタノール溶液４．５　ｎｉｌ　
（２３，３ｍｍｏ　１　）を加え、攪拌下で溶解させる
。室温（２５℃）で３０分間攪拌後、エタノール５０ｍ
１を加えて、さらに３０分間攪拌したのち、５℃で２時
間放置し、析出した結晶を濾取、乾燥して、８−メトキ
シ−ｃＡＭＰのナトリウム塩７．６８を得た。

このときの高速液体クロマトグラフィによる分析値は次
の通りである。

８−メトキシ−ｃＡＭＰ　９９．５％、　ｃＡＭＰ　０
．３％、８−ブロモ−ｃＡＭＰ　０．２％。

また着色物質の吸光度は、Ｅ　”（４００ｎｍ）　＝　
０．００であり、融点は、２５１．５〜２５２．０℃（
分解）であった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 粗製の８−アルコキシアデノシン−３′，５′−環状リ
   ン酸をメタノールに懸濁後、ナトリウムアルコラードと
   作用させて８−アルコキシアデノシン−３′，５′−環
   状リン酸のナトリウム塩を析出させ、これを採取するこ
   とを特徴とする８−アルコキシアデノシン−３′，５′
   −環状リン酸の分離精製法。