JPH03118398A - フイブリノーゲンレセプター拮抗剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般的に細胞付着を調節し、においてフィブリ
ノーゲン及び伯のタンパク質の結合を阻害しかつ特にＩ
Ｉ　ｂ　／　Ｉｌｌ　ａフィブリノーゲンレセプタ一部
位への血小板の凝集を阻害することに関する。フィブリ
ノーゲンは血漿中に存在する糖タンパク質であって、血
小板凝集及びフィブリン形成に関与する。血小板は全咄
乳動物の血液中にみられる細胞様無核断片であって、血
液凝固に関与する。フィブリノーゲンとＩＩ　ｂ　／　
ＩＩＩ　ａレセプタ部位との相互作用は正常な血小板機
能にとって不可欠であることが知られている。

血管が損傷された場合、血小板は破壊された内皮下表面
に付着する。次いで付着血小板は生物学的に活性な成分
を放出して凝集する。凝集は特異的な血小板膜レセプタ
ーへのトロンビン、エピネフリン又は△Ｄ　Ｉ）のよう
な作用物質の結合によって開始されろ６．イ１用物質に
Ｊ：る！ｔｉｌ＋激で血小トル人面１−に潜伏的フィブ
リノーゲンレセプターを露出さＵ、フィブリノーゲンを
糖タンパク′（′口ｌ　ｂ　／　Ｉｌｌ　＋１複合体に
結合させる。

血小板凝集及び付着のメカニズムを研究するため天然産
物及び合成ペプチドを用いる試みが行われた。

ルスラーチ（Ｒｏｕｓｌａｈｔｉｌ及びビアーシュバッ
チャ−（Ｐｉｅｒｓｃｈｂａｃｈｅｒｌ　、サイエンス
（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、１９８７年、第２３８巻、第４９
］−４９７頁では細胞外マトリ・ンクス及び血液中に存
在するフィブロネクチン、ビトロネクチン、オステオポ
ンヂン、コラーゲン、トロンポスボンジン、フィブリノ
ーゲン及びフォンビルプラント因子のような付着タンパ
ク質について記載している。本タンパク質はそれらの細
胞認識部位としてトリペプチドのアルギニン−グリシン
−アスパラギン酸を有する。トリペプチドは２つの膜間
サブユニットのへテロタイマータンパク質である構造的
に類似したレセプターたるインテグリンの群のうち少な
くともｌ　ｈＩ！で認識される。著者らは個々のタンパ
ク質におけるトリペプチド配列のコンホメーションが認
識特異性上重要であろうと述べている。

グーエレッシ、：＋−（ＣｂｐｒｃＳｈ）　、プロシー
プインク・オブ・ナショナル・アカデミ−・才ブ・サイ
エンス［Ｊ　Ｓ　Ａ　（Ｐｒｏｃｅｒ４ｄｉｎｇｏｆ　
Ｎａ１．１ｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙｏｆｓｃｉｐ、ｎ
ｃｅＩＩｓＡＩ、１９８７年、第８４巻、６４７１６４
７５頁ではヒト内皮細胞で発現される向Ａｒｇ−Ｇｌｙ
−Ａｓｐ付着レセプターについて記載しているが、これ
は血小板−ＬのＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａ複合体と構造
的にｚｎ似しているものの抗原的及び機能的には異なる
。本レセプターはフィブリノーゲン、フィンビルプラン
ト因子及びビトロネクチンへの内皮細胞付着に直接関与
している。

ビアーシュバッチャ−及びルスラーヂ、ジャプル・詞ブ
・パイ′ＡＬＪジカル・ウミス］〜す（Ｊｏｕｒｎａｌ
　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　にｈｅｍｉｓｔｒｙｌ
　、　１９８７年、第２６２巻、第３６号、第１７２９
４−１７２９８頁ではトリペプチド配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ
−△Ｓ　ｐ含有ペプチドの結合特異性に関する配列Ａｒ
ｇ−Ｇｌｙ−△Ｓ　ｐ　　Ｘ　ａ　ｔｔ　（＋）立体化
′ｙ゛的影響Ｌコし）いて記−１＆シているが、ここで
Ｘ　）ｌ　ｉｌはＭ　ｅ　１．、Ｃｙｓ、１１１ｓ、ｉ
’　ｒ　ｐ叉はＧｌｙ以外の２０人然Ｉ、−アミノ酸の
ＩＩΦである。プロシーディング・オブ・ナショナル・
アカデミ−・オブ・サイエンスＩＪ　Ｓ　Ａ、１９８４
年、第８１為、第５９８５５９８８頁において、同一の
著者らは付着促進活性を留めたフィブロネクチンの細胞
認識部位の変種について記載している。テトラペプチド
Ａｒｇ−Ｇａｙ−Ａｓｐ−３ｃ１〜は大きな付着糖タン
パク質フィブロネクチン中において細胞で認識される最
小構造として記載されている。−Ａｒｇ−Ｇ　１ｙ−Ａ
ｓｐ−５ｅｒ一部分を有するペプチドは米国特許第４，
５８９，８８１号及び第４．６１４．５１７弓明細書で
記載されている。

Ａｒｇ−Ｇ　］　ｙ−Ａｓ　ｐ−Ｒ部分（ＲはＴｈｒ、
Ｃｙｓ又はフィブロネクチンと同様の細胞付着活性を有
する他のアミノ酸から選択される）を有するペプチドは
米国特許第４，５７８，０７９号明細書で記載されてい
る。

ルゲリ（Ｒｕｇｇｅｒｉｌ　ら、プロシープインク・オ
ブ・ナショナル・アカデミ−・オブ・サイエンス・ＵＳ
Ａ、１９８６年、第８３巻、第５７０８５７１２頁では
配列△ｒｇ−Ｇｌｙ−ΔＳ　ｐＶａｌを含有しにおいて
フィブリノーゲン結合を阻害する鎖長１６残Ｊｌ（にｉ
゛す′インされた一連の合成ペプチドについて記載して
いる。

トリペプチド配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−△Ｓ　ｐはフィブロ
ネクチン及びヒドロネクチンの細胞付着促進効果を複製
叉はμｌ害しつるあるポリペプチド中に存在することが
知られているが、トリペプチドＡｒｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａ
ｓ　ｐは低活性を有している。ポリペプチド中における
他のアミノ酸の結合特異性に関する影響についてはほと
んど理解されていない。本出願人らは：＋’Ｊ性な血小
機凝集１１１１　’、ｌ；削であるトリペプチド配列Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを有した小さな直鎖状ペンタペプ
チドについて製造した。

本発明はＦ記構造のフィブリノーゲンレセプター拮抗化
合物である・ Ａ　　−Ｂ−Ｃ−Ｇ　　ｌ　　ｙ　　−Δ　５ｐ−１）
Ｅｆｒｌ上記式中、 Δはα−アミノ酸、アシル化（Ｉ−アミノ酸、デス−α
−アミノ酸又はＮ−メチル−α−アミノ酸のＬ又はＤ−
異性体である： Ｂはプロリン、ヒドロキシプロリン、ヂオブロリン、β
、β−ジメヂルメチブロリン、デヒドロプロリン、ピペ
コリン酸、アゼチジンカルボン酸及びＮ−メチルアミノ
酸からなる群より選択される二級アミノ酸のＬ−′Ｊ′
１１性体である：Ｃはアルギニン、ホモアルギニン、グ
アニドアミノ酪酸又はグアニドアミノプロピオン酸のＬ
異性体である： Ｄはトリプトファン、フェニルアラニン、ロイシン、バ
リン、イソロイシン、ナメチルアラニン、メヂオニン、
ヂロシン又はトリプトファン、ヂロシン、フェニルアラ
ニン、アルギニン、ホモアルギニン、オルニチン、リジ
ンもしくはヒスチジンの環状置換誘導体のＬ−異性体で
ある。及びＥはＯＨ，ＮＲ２，ＮＨＲ，ＮＲ１Ｒ２であ
る：ここでＲは炭素原子１〜４を有するアルキル基であ
り、Ｒ＋　Ｒ２は炭素原子１〜４を有するアルキル基、
二級アミノ酸又は ０ を表す。

好ましい化合物はｌ＜がＯＨである場合である３゜史に
好ましい化合物はＦ記の場合である４ΔはＩ、−アスパ
ラギン、Ｄ−アスパラギン又はアシル化アスパラギンで
ある： １３はプロリン、−／Ａ’　７１Ｊリン、１＋、１＋−
ジメＪルチオプロリン又はＮ−メチルアラニンの１６−
異性体である： Ｃはアルギニンである： Ｄはフェニルアラニン又はトリゾ［・ファンである：及
び ＥはＯＨである。

更に好ましい化合物は以下である・ ｉｌ　Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ　ｓ　ｐ　
−Ｐ　ｈ　ｅ　−０１−１。

１ｉ）Ａｓｎ−チオＰ　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇ　−Ｇ　
Ｉ　ｙ−Ａｓ　ｐ−Ｐ　ｈ　ｅ　＝　ＯＨ。

１ １１１）△８ｎ−（β、β−ジメチルグーオＰｒｏ）−
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ Ｐ　ｈ　ｅ　−ＯＨ。

ｉｖ）　　（Ｄ−Ａｓｎ）−Ｐｒｏ−ＡｒｇＧ　　Ｉ　
　、ｙ−Ａｓｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ−Ｐｈｅ−ＯＨ　。

ｖｌ　　（△ｃ　Ａ　ｓ　ｎ　）　　−Ｐ　ｒ　ｏ　−
Ａ　ｒ　ｇ　−Ｇ　Ｉ　ｙ　−Ａ　ｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　
ｃ　−ＯＲ。

ｖｉｌ　　Ａ　ｓ　ｎ　−Ｐ　ｒ　ｏ−Δｒｇ−Ｇｌｙ
Δ５ｐ−Ｔｒｐ−Ｏ１ｌ。

ｖｉｉｌＡｓｎ−チオＰｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ　ｌ　３’−
Ａｓ　ｐ−Ｔ　ｒ　ｐ−０１ｌ。

ｖｉｉｉｌ　Ａ　ｓ　ｎ　−（β、β−ジメチルチオＰ
　ｒ　ｏ　）　　−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−△Ｓ　ｐ
Ｔｒ　ｐ　−ＯＩｔ　。

ｉｘ）Δ５ｎ−（Ｎ−メチルΔｌａ） Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ　− ＯＨ。

ｘｌ　　Ｓｅｒ−３ａｒ−Ａｒｇ−ｃｔｙ−八５ｐ−Ｐ
ｈｅ−ＯＨ。

　２ ｘｊｌ　　Ａｓ　ｎ　−ＩＩ　ｙ　ｐ　ｒ　Ｏ−Ａ　ｒ
　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙＡ　ｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−ＯＮ　
。

ｘｉｉｌ　　Ａｓｎ−ｄｅｂｙｐｒｏ−ＡｒｇＧｌｙ−
Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｉｉｉｌ　　Δ５ｎ−（１）−八　「ＩＺ）　　−Ａ
　Ｉ’　ｌτ−Ｇ　　Ｉ　　ｙ　−Ａ　ｓ　　ｐ　−Ｐ
　ｌ＋　ｔ：　−〇　ＩＩ　。

ｘｉｖｌ　　Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ　−ΔＳ
　ＩＪ　−Ｐ　ｌ＋　ｃ−ＯＩｆ　。

ｘｖｌ　　Ａｓｎ−Ｐｒｏ　−（Ｄ−Ａｒ　ｇ）Ｇ　ｌ
　　ｙＡ　Ｓ　ｐ　　　Ｐ　ｈ　ｅ　　　Ｏｔｌ　。

ｘｖｉｌ　　Ａｓｎ−Ｐｒｏ　−（１）−八ｒｇ）Ｇｌ
ｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ２゜ ｘｖｉｉ）　　Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｃ−Ｇ　　Ｉ　　
ｙ　−Ｍ　ｅ　Ａ　ｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−ＯＩｔ　
。

ｘｖｉｉｉｌ　　Ｇ　　Ｉ　　ｙ　−１’　ｒ　ｏ−Ａ
ｒ　ｇ−ＧｌｙＡ　ｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−Ｏｔｌ　
。

ｘｉｘ）　　Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｒ　ｇ−Ｃ；Ｉｙ　−
Ａｓｐ−Ｐｈｅ−０）ｆ。

ｘｘｌ　　Ａ　　ｌ　　ａ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ　　ｌ
　　ｙ　−Ａ　ｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−０１−１。

　３ ｘｘｉ）　　Ｓ　ｅ　ｒ　−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇ
　−Ｇ　ｌ　　ｙ　−Ａｓ　ｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｉｉｌ　　（Ｄ−Ａｓｎ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ　
ｌ　　ｙ−Ａｓ　ｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｉｉｉｌ　　Ｉ　　ｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ
−Ａ　ｓｐ　−Ｐ　ｈ　ｃ−０１−１。

ｘｘｉｖｌ　　Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−△Ｓ
　１１−　Ｐ　ｈ　Ｃ−ＯＩｆ　。

ｘｘｖ）　　Ｈｉ　　ｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ　ｌ　ｙ
　−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｖｉｌ　　Ｇ　Ｉ　　ｎ−Ｐ　ｒ　ｏ−Ａｒ　ｇ−
Ｇ　ｌ　　ｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｖｉｉ）　　Ｐ　ｈ　ｅ　−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ
　ｇ　−Ｇ　ｌ　　ｙ　−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｖｉｉｉｌ　　Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ａｒ　ｇ−Ｇ　　
１ｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

ｘｘｉｘｌ　　△５ｐ−Ｐｒｏ−ΔｒｇＧｌｙ−Ａ　ｓ
　ｐ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−Ｏｆ（。

ｘｘｘｌ　　Ｍｅ　　ｔ−Ｐｒｏ−Δｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓ　ｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ。

　４ ｘｘｘｉｌ　　（Ｄ　−Ｎ−メチル−Ａｌａ）−Ｐｒ。

Δｒｇ−Ｇｌｙ−△Ｓ　ｐ　−Ｐ　ｔｉ　ｅｏ　１−１
　。

ｘｘｘｉｉ）　　（Ｎ−メヂルーＡｌａ）−Ｐｒ。

Ａｒ　ｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ　　ｐ　−Ｐ　ＩＩ　０ＯＨ゜ ｘｘｘｉｊｉｌ　アセチル−Ａｓ　ｎ　−Ｐ　ｒ　Ｏ−
Ａ　ｒ　ｇＧ　ｌ　　ｙ−ＡＳ　ＩＪ−ＰＩＩＣ−Ｏｌ
ｌｘｘｘｉｖｌ　　Ａｓ　　ｎ−Ｐ　ｒ　ｏ−Ａｒ　ｇ
　−Ｇ　　ｌ　　ｙＡｓ　ｐ−Ｍｅ　　Ｌ−ＯＨ゜ ｘｘｘｖｌ　　Ａｓ　ｎ　−１’　ｒ　ｏ−Ａｒ　ｇ−
ＧｌｙＡｓ　ｐ−Ｖａ　　ｌ　　−Ｏｌｌ。

ｘｘｘｖｉ）　　Ａｓｎ　−Ｐ　ｒ　ｏ−Δｌ”Ｉ？（
’；１ｙＡｓｐ−Ｔｒｐ−ＯＨ　　（Ｆｏｒ）。

ｘｘｘｖｉｉｌ　　Ａｓ　ｎ　−Ｐ　ｒ　ｏ−Ａｒ　ｇ
−ＧｌｙＡ　ｓ　ｐ　−Ｔ　ｒ　ｐ　−ＯＬｌ　。

ｘｘｘｖｉｉｉｌ　　Ａｓｎ　−Ｔ　ｈ　　ｉ　　ＯＰ
　　ｌ−０−Ａ　ｒ　ＩＣＧ　Ｉ　　ｙ　−Ａ　ｓ　ｐ
　−’ｒｒ　Ｌｌ−Ｐｈｅ−ＯＨ　。

ｘｘｘｉｘ）　　Ａｓ　ｎ−Ａｚ　ｔ、−ΔｒｇＧＩｙ
Δ５ｐ−１’丁・ｐ−０Ｉｔ。

　５ ｘｘｘｘ）　　Ａｓｎ−Ｐｉｐ−Ａｒｇ−ＧｌｙＡｓｐ
−Ｔｒｐ−ＯＨ。

ｘｘｘｘｉｌ　　Ａ　ｓ　ｎ　−（Ｄ　−Ｐ　ｉ　　ｐ
　）　　−Ａ　ｒ　ｇＧｌｙ−Ａｓ　ｐ　−’ｒｒ　ｐ
−〇　ＩＩ　。

ｘｘｘｘｉｉｌ　Ａ　ｓ　ｎ　−（Ｎ−メチル−Ａｌａ
）Ａｒｇ−Ｇ　　１　　ｙ−Ａｓ　　ｐ−Ｔｒｐ　−Ｏ
Ｈ。

ｘｘｘｘｉｉｉｌ　Ａ　ｓ　ｎ　−（Ｎ−メチル−Ｐｈ
ｅ）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ Ｏ［］。

ｘｘｘｘｉｖｌ　　△５ｎ−（Ｄ−Ａｒ　ｇ　）　　　
Ａ　ｒ　ｇＧｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＯＨ及び ｘｘｘｘｖ）　　Ａ　ｓ　ｎ　−Ｈｉ　　ｓ　−Ａ　ｒ
　ｇ−Ｇ　　ｌ　　ｙＡｓ　ｐ−Ｔｒ　ｐ−ＯＨ。

伯に指摘のない限り、各アミノ酸はＬ−異性体である。

更に好ましい化合物は以下である： ｌｉ）ＡＳ　ｎ−チオＰ　ｒ　ｏ−Ａｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　
ｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｃ−Ｏｌｌ。

　６ ｉｉｉ）Ａｓｎ−（β、β−ジメチルチオＰｒｏ）−Ａ
ｒ（ｚ−Ｇｌｙ−Ａｓ　ｐ　−Ｐ　ｈ　Ｃ０１４゜ ＡＳ　　ｎ　−Ｐ　　ｒ　（］　−八　ｒ　　Ｈ＠　−
Ｇ　　ｌ　　、ｙＡｓｐ−Ｔｒｐ−ＯＮ。

Ａｓｎ−ヂ才Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ　ｌ　ｙＡ　ｓ　ｐ　
−Ｔ　ｒ　ｐ　−０１−１及びＡｓｎ−（Ｎ−メチルＡ
　Ｉ　２１　）△　ｒ　ｇ　−Ｇ　　Ｉ　　ｙ　−Ａ　
ｓ　　ｐ−Ｔ’　ｒ　　ｐＯＯ１２ 本発明は血小板凝集の阻害を促進するため本発明のフィ
ブリノーゲンレセプター拮抗ペブグ〜ド及び連続静注、
経［Ｊ又は静脈内ポーラス投与に適した１種以上の生理
学上許容される担体、例えば塩水を生理学上許容される
ｐｌ＋、例えば７．４で含む組成物にも関する。

本発明は連続静注、経Ｌ１又は静脈内ポーラス法のいず
れかで本発明の組成物の有効量を患者に投与することか
らなる血小板凝集の阻害）Ｊ″法にも関する。

１ｌ ｖｉ　ｉ） ｘｌ 　７ 本発明の化合物はフィブリノーゲン誘導血小板凝集を阻
害するフィブリノーゲンレセプター拮抗剤である。これ
らの化合物は当業界で周知の同相合成又は当業界で周知
の液相合成で製造される。

合成方法はニューラス、ヒル及びボーダー編集、°ザ・
プロテインズ°゛、第３版、第２巻、アカデミツクプレ
ス、１９７６年（Ｎｅｕｒａｔｈ、Ｈｉｌｌ　ａｎｄＢ
ｏｅｄｅｒ、Ｅｄｓ、、　　”Ｔｈｅ　　Ｐｒｏｔｅｉ
ｎｓ”　　３ｒｄ　　Ｅｄｉｔｉｏｎ。

Ｖｏｌ−１０．Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　１９７
６１で一般的に記載されている。

本化合物は短時間の血小板凝集予防が望まれる治療処置
用にそれらを望ましいものにさせる比較的短時間の活性
を有している。更に本化合物はそれらが血小板数を有意
に減少させろことがないため特に有利である。

本発明の化合物の本質的特徴は、化合物の式中Ｂ位にお
けるプロリン、チオプロリン、β、β−ジメチルチオプ
ロリン、デヒドロプロリン、ピペコリン酸、アゼチジン
カルボン酸又はＮ−メチルアミノ酸からなる群より選択
される二級アミノ８ 酸のＬ−異性体の存在である。本出願人らはいかなる特
定の理論にも拘東されるつもりはないが、Ｂ位における
二級アミノ酸の存在はそれがＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａ
レセプタ一部イ◇にＪ：って容易に１認識かつ受容され
るよう化合物のコンホメーションに影響を与えてそれに
よりその効力を高めていると考えられる。

共通ａ−アミノ酸は細菌からヒトまての全種におけるす
べてのタンパク質が構成される２０１重である。

共通アミノ酸 アミノ酸 アラニン アルギニン アスパラギン アスパラギン酸 システィン グルタミン グルタミン酸 グリシン 唯一」 Δ　ｌ　　Ｆ−１ △（’　ｇ △ｓｎ △ｓｐ ｙ　Ｓ Ｇ　　Ｉ　　ｒ＋ ｌｕ ｌｙ ■　９ ヒスチジン　　　　　　　　　Ｈｉ　ｓイソロイシン　
　　　　　　　Ｉｌｅ ロイシン　　　　　　　　　　Ｌ　ｅ　ｕリジン　　　
　　　　　　　　Ｌ　ｙ　ｓメチオニン　　　　　　　
　　Ｍｅｔ。

フェニルアラニン　　　　　　Ｐｈｅ プロリン　　　　　　　　　　　Ｐｒ。

セリン　　　　　　　　　　Ｓｅｒ トレオニン　　　　　　　　　Ｔ　ｈｒトリブｌ−ファ
ン　　　　　　　ｌ’　ｒ　ｐヂロシン　　　　　　　
　　　Ｔｙｒ バリン　　　　　　　　　　Ｖ　ａ　１本発明の化合物
はメリフィールド （Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄｌ、ジャーナル・オブ・アメリ
カン・ケミカル・ソサエティ（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　
ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｒ、１ｅｔｙ
ｌ、第８５巻、第２１４９頁、１９６４年で記載されて
いるような固相ペプチド合成を用いて製造されるが、ツ
ーテン（Ｈｏｕｇｈｔｅｎｌ、プロシープインク・オブ
・ナショナル・アカデミ−・才ブ・サイエンス、第８２
巻、０ 第５１３２頁、１９８５年の合成のような当業界で公知
の他の相当化学的合成も使用可能である。同相合成は１
９８２年＋　Ｊ＝Ｉ　２　Ｉ　Ｅｌ付でリビア−（Ｒｉ
ｖｉｅｒｌらに発行された米国特許第４．２４４，９４
６号明細書で一般的に記載されているように保護アミノ
酸を適切な樹脂にカップリングさせることでペプチドの
Ｃ末端から開始されるが、その開示は参考のため本明細
書に組込まれる。この−射的タイブの合成例は米国特許
第４．３０５，８７２号及び第４．３１６．８９１号明
細書で記載されている。本発明の化合物はニューラス、
ヒル及びボーダー編集、°ザ・ブ［１テインズー、第３
版、第２巻、第２章、第１０６−２５２頁で記載されだ
液相合成に従い合成することもできる。

これらのポリペプチドを合成する場合、適切に保護され
たａ−アミノ基を有するカルボキシル末端アミノ酸はク
ロロメチル化ポリスチレン樹脂等にカップリングされる
。塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸を用いることによ
るようなα−アミノ１ 保護基の除去後、合成の次のステップが進められる。特
定アミノ保護基の除去に関する他の標準開裂試薬及び条
件も公開文献中で記載されているように用いてよい。

次いで残りのａ−アミノ及び側鎖保護アミノ酸は樹脂に
結合された中間化合物を得るため望ましい順序で段階的
な縮合によりカップリングされる。

２つのアミノ酸又はアミノ酸とペプチド又はペプチドと
ペプチドの間における縮合はアジド法、混合酸無水物法
、ＤＣＣ（ジシクロへキシルカルボジイミド）法、活性
エステル法（ｐ−ニトロフェニルエステル法、Ｎ−ヒド
ロキシコハク酸イミドエステル法、シアノメチルエステ
ル法等）、ウッドワード試薬に法、カルボニルジイミノ
ゾル法、酸化還元法又はＢＯＩ）（ベンゾトリアゾル−
１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム
ヘキサフルオロホスフェート）法のような通常の縮合法
に従い行うことができる。固相法でペプチド鎖を伸長さ
せる場合には、ペプチド２ はＣ末端アミノ酸で不溶性１μ体に結合される。不溶性
担体としては、Ｃ末端アミノ酸のカルボキシ塞と反応し
て後で容易に開裂される結合を形成しつる担体、例えば
クロロメグ−ル樹脂及びブ［１モメヂル樹脂のようなハ
ロメープル樹脂、ヒドロキシル基ル樹脂、アミツメブー
ル樹脂、ベンズヒドリルアミン樹脂及びｔ−アルキルオ
キシカルボニルヒドラジド樹脂が使用可能である。

様々なアミノ酸部分の反応性側鎖基の適切な保護基によ
るその部位での保護は、鎖が完全に組立てられた後その
基が最終的に除去されるまでペブヂドの化学的合成にと
って共通である。アミノ酸又は断片」−におけるα−ア
ミノ括の保護も共通であってその間にその存在物はカル
ボキシル基で反応し、しかる後（Ｚ−アミノ保、１μ〕
、（を彦根的に除去して次の反応をその箇所で起こさせ
る。したがって、合成の一ステップとして、ペプチド鎖
中望ましい順序で位置する各々のアミノ酸残基を含み様
々なこれら残基が側鎖保護基なイイした中間化合物が製
造されることは共通である。次いてこれら３ の保護基は、精製後に望ましい最終産物を得ることがで
きるよう一般的には実質上同時に除去される。

α及びω−側鎖アミノ基を保護する上で適用可能な保護
基としては例えばベンジルオキシカルボニル（以下Ｚと
略記される）、イソニコチニルオキシカルボニル（ｉＮ
Ｏｃ）、ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル［Ｚ　（
２−ＣＩ）］、　］ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニ
ルＺ（ＮＯ□）］、］ｐ−メトキシベンジルオキシカル
ボニルＺ　（ＯＭｅ）］　、］ｔ−ブトキシカルボニル
Ｂｏｃ）、ｔ−アミルオキシカルボニル（Ａｏｃ）、イ
ソボルニルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカル
ボニル、２−（４−ビフェニル）−２プロピルオキシカ
ルボニル（Ｂｐｏｃ）、９−フルオレニルメトキシカル
ボニル（Ｆｍｏｃ）　、メチルスルホニルエトキシカル
ボニル（Ｍｓｃ）、トリフルオロアセチル、フタリル、
ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル（ＮＦＳ）
、ジフェニルホスフィノヂオイル（Ｐｐｔ）、ジメチ４ ルホスフィノヂオイル（Ｍｐｔ）等が例示される。

カルボキシ塞の保Ｊ　ｊ）’５としては、例えばベンジ
ルエステル（ＯＢｚｌ）、４−ニトロペンシルエステル
（ＯＮｂ）、ｔ−ブチルエステル（ＯＩＪｕｔ；）、シ
クロヘキシル（Ｃｈｘ）、４ピリジルメチルエステル（
Ｏｐｉｃ）等が例示される。アミノ及びカルボキシル基
以外の官能Ｊ、（を有するアルギニン、システィン及び
セリンのような特定アミノ酸は臨時的要求として適切な
保護基で保護されることが望ましい。例えば、アルギニ
ン中のグアニジノ基は二１４Ｊ、ｐ−トルエンスルホニ
ル、ベンジルオキシカルボニル、アクマンチルオキシカ
ルボニル、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル、４−メト
キシ−２，６−シメチルベンゼンスルホニル（Ｍｄｓ）
、Ｉ　、３．５−トリメデルフェニルスルホニル（Ｍｕ
ｓ）等で保護される。システィン中のチオール基はベン
ジル、ｐ−メトキシベンジル、トリフェニルメチル、ア
セデルアミノメチル、エチルカルバモイル、４−５ メチルベンジル、２，４．６−１−リメチルベンジル（
Ｔｍｂ）等で保護され、セリン中のヒドロキシル基はベ
ンジル、ｔ−ブチル、アセチル、テトラヒドロピラニル
等で保護することができる。

スチュワート（Ｓｔｅｗａｒｔ）及びヤング（Ｙｏｕｎ
ｇ）、°゛固相ペブヂド合成”、ピアース・ケミカル社
（Ｐｉｃｒｃｃ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙｌ
　、ロックフィード、イリノイ州、１９８４年ではベブ
ヂドの製造操作に関して詳細な情報を示している。ａ−
アミノ基の保護は第１４−１８頁で記載され、側鎖ブロ
ックは第１８−２８頁で記載されている。アミン、ヒド
ロキシル及びスルフヒドリル官能基に関する保護基の表
は第１４９−１５１頁で示されている。これらの記載は
参考のため本明細書に組込まれる。

望ましいアミノ酸配列が完成された後、中間ベブヂドは
樹脂からベプヂドを開裂させるばかりでな（残りずべて
の側鎖保護基を開裂させる液体ＨＦのような試薬による
処理で樹脂支持体から除去される。次いでポリペブーＪ
ドはリビアーら、ぺ６ ブヂド：構造及び生物学的機能、Ｉ　！］　７９４１、
第１２５−１２８頁で記載されているようにゲル透過し
かる後セミプレパラティブＨＩ）　Ｌ　Ｃで精製するこ
とができる。

実施例１ ０．５ｍＭのＢ　ｏ　ｃ　−Ｐ　ｈ　ｅ　−０−Ｐ　ａ
　ｍ−樹（”ｐｃｒ”はボリスヂレン架橋樹脂である）
かう出発シテ、ａ　−７ミ／　１１０　ｅ　保＋ｉｌ［
Ｊ＋しく　Ｌ＋：ｒｌ、−ブチルオキシカルボニル）を
トリフルオロ酢酸及び塩化メールシンで除去し、脱保、
：μされたフＪ、ニル）′ラニンをジイソプロピルエチ
ルアミンで中和する。

　７ 次いでＢｏｃ保護Ａｓｐ（ベンジルエステル）〔Δ５ｉ
）−（ＯＩＪｚ　ｌ）］　２２ｍをジシクロへキシルカ
ルボジイミド１ｍＭで媒介されたフェニルアラニンにカ
ップリングさせ、トリフルオロ酢酸及び塩化メチレンで
脱保護し、ジイソプロピルエチルアミンで中和する。

次いでＢｏｃ保護ＧＩｙ２ｍＭをジシクロへキシルカル
ボジイミドｌＩＩＩＭで媒介されたＡｓｐ　（ベンジル
エステル）にカップリングきり、ＯＨ記のように脱保護
及び中和する。

次いでＢｏｃ保護Ａｒｇ（４−）ルエンスルホニル）［
Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）］　２２ｍをジシクロへキシルカル
ボジイミド２ｍＭ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル２ｍＭで媒介されたグリシンにカップリングさせ、前
記のように脱保護及び中和する。

次いでＢｏｃ保Ｊ　Ｐ　ｒ　ｏ　２　ｍＭをジシクロへ
キシルカルボジイミド１ｍＭで媒介されたＡｒｇ　（４
トルエンスルホニル）にカップリングさせ、ｉｉ記のよ
うに脱保護及び中和する。

８ 次いでＢｏｃ保護Ａｓｎ２ｍＭをジシクロへキシルカル
ボジイミド２ｍＭ及び１−ヒドロ＼−ジベンゾトリアゾ
ール２ｍＭで媒介されたＰｒｏにカップリングさせる。

トリフルオロ酢酸及び塩化メチレンを脱保護されたΔＳ
　Ｈに加えて上記４をＪ［ａ成さセる： １’　ＯＳ 樹脂からのペプチドの開裂はＩ−Ｉ　Ｆ　／アニソール
（９：　ｌ　（ｖ／ｖ）　）で行い、−上記１１　Ｆ塩
を形成させる： １１・　　△ｓ　ｎ　−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ
　Ｉ　　ｙ−△Ｓ　ｐｈｅ−ＯＨ 精製は０．１％−［Ｆ　Ａ　Ｈ２０−ＣＩ−１３ＣＮ勾
配中プレバラティブＨＰＬＣを用いて行う。最終’Ｉ’
　Ｖ　Ａ塩１１成物をイオン交換カラノ＼バー（−４ラ
ツド（Ｉｌｉｎｒｌａｄｌ　△Ｇ　：’、−Ｘ　４△（
アセデー１−リイクル）に通ずことでＩｔ　ＯＡ　ｃ　
ｌＱに変換する。

　９ 治ｆｉｌ途 本発明のペプチドは細胞付着活性に関係するインラグリ
ンタンパク質複合体機能を阻害するために用いられる。

例えば、それらはヒト又は哺乳動物血小板凝集又は付着
の阻害が望まれる患者に投与される。

本発明のポリペプチドは急速に循環から排出され、短時
間の強抗血栓有効性が必要とされる状況下で血小板凝集
を阻害する上で特に有用である。

このため、それらは動脈及び器官の処置及び／又は血小
板と人工表面との相互作用で血小板凝集及び消費に至る
場合の心血管手術並びに末梢動脈の手術（動脈移植片、
頚動脈内膜切除術）に際して用途を有している。凝集血
小板は血栓及び血栓塞栓を形成する。本発明のポリペプ
チドは血栓及び血栓塞栓の形成を防止するためこれらの
外科患者に投与される。

体外循環は血液に酸素供給するため心血管手術でルーチ
ンに用いられる。血小板は体外回路の表面に付着する。

付着は血小板股上における０ Ｇ　Ｐ　Ｉｌ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａ間の相互作用に依存
しており、フィブリノーゲンは回路の表面に吸着される
〔グラス：Ｊ（Ｉｉｌｕｓｚｋｏｌ　ら、アメリカン・
ジャージルオフ２フイジオロジー（Ａｍｅｒｉｃａｎ　
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｒ１’ｌ＋ｙｓｉｏｌｏｌ；ｙｌ　
、　Ｉ　り　８フイ１、第２５２査Ｉ１．第６１５−６
２１頁］。人工表面から放出された血小板は障害のある
止血機能を示す。本発明のポリペプチドは付着を防止す
るために投与してもよい。

これらポリペプチドの他の適用例としては血栓溶解療法
中及び後における血小板血栓症、血栓塞栓症及び再閉塞
のｆ・防・１１・びに冠動脈及び他の動脈の血管形成後
及び冠動脈バイパス処置後における血小板血栓症、血栓
塞栓症及びｔ１ｆ閉塞の予防がある。本発明のポリペプ
チドは心筋梗塞な防止するためにも用いられる。

これらのポリペプチドは連続静脈内もしくはポーラス注
射又は経口法を含めて実質的量で血流中にそれを運搬す
るいずれかの慣用的手段で投与される。本発明の組成物
は血小板凝集の１ｔＩｔ害を達１ 成するために適したｐＨレベル、例えば７４で本発明の
ベプＪ−ド及び生理学上許容される担体を含有している
。それらは血小板凝集を阻害するためブラスミノーゲン
アクチベーター又はストレプトキナーゼのような血栓溶
解剤と組合せてもよい。

それらはヘパリン、アスピリン又はワルファリンのよう
な抗凝血剤とも組合せてよい。静脈内投与は好ましい投
与経路として現在考えられている。

それらは水に可溶性であり、したがって溶解状態で有効
に投与される。

一適用例においては、適量のペプチドが血管形成術をう
ける心臓発作患者に静脈内投与される。投与は血管形成
術中又はその数分間前に行うが、血小板凝集を阻害しつ
るに十分な量、例えば約０．０５〜３０μＭ／ｋｇ、好
ましくは約０．３〜３μＭ／ｋｇの定常的血漿濃度を達
成しつる量で行う。この量が達成された場合、約１〜１
００　ｎＭ／ｋｇ／ｍｉｎ　、好ましくは約１１０−３
０ｎ／ｋｇ／ｍｉｎの注入が血小板凝集を阻害するため
に維持される。患者がバイパス手術をうける必要がある
場合　２ には投′ｊは直ちに中正され、アスピリン又はモノク［
１−ナル抗体のような他の物質で（にじる′ｒ術中の合
併症を引き起こさないが、その効果は投与中止後も数時
間続く。

本発明は本発明のペプチド及び組織型ブラスミノーゲン
アクチベーター又はストレプトキナーゼを含有した医薬
組成物にも関する。本発明は患者において血栓溶解を促
進しかつ再閉塞を防止するだめの方法にも関し、本発明
の組成物の有効量を患者に投与する。

本発明はその精神又は必須特性から逸脱することなく他
の具体的形で実現させてもよい。このため、前記具体例
は本発明の範囲を制限すると解釈されるべきではない。

３：３ 手続輔ｌＩＥ書 平成２年ｌＯ月１５日

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. １．下記式のフィブリノーゲンレセプター拮抗化合物： Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｅ（ I ）〔上記式
   中、 Ａはα−アミノ酸、アシル化α−アミノ酸、デス−α−
   アミノ酸又はＮ−メチル−α−アミノ酸のＬ又はＤ−異
   性体であり； Ｂはプロリン、ヒドロキシプロリン、チオプロリン、β
   ，β−ジメチルチオプロリン、デヒドロプロリン、ピペ
   コリン酸、アゼチジンカルボン酸及びＮ−メチルアミノ
   酸からなる群より選択される二級アミノ酸のＬ−異性体
   であり； Ｃはアルギニン、ホモアルギニン、グアニドアミノ酪酸
   又はグアニドアミノプロピオン酸のＬ−異性体であり； Ｄはトリプトファン、フェニルアラニン、ロイシン、バ
   リン、イソロイシン、ナフチルアラニン、メチオニン、
   チロシン又はトリプトファン、チロシン、フェニルアラ
   ニン、アルギニン、ホモアルギニン、オルニチン、リジ
   ンもしくはヒスチジンの環状置換誘導体のＬ−異性体で
   あり；及び ＥはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＲ、ＮＲ＿１Ｒ＿２（ここで
   、Ｒは炭素原子１乃至４を有するアルキル基であり、Ｒ
   ＿１Ｒ＿２は炭素原子１乃至４を有するアルキル基、二
   級アミノ酸又は ▲数式、化学式、表等があります▼ を表す）である。〕。
2. ２．ＥがＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲン
   レセプター拮抗剤。
3. ３．ＡはＬ−アスパラギン、Ｄ−アスパラギン又はアシ
   ル化アスパラギンであり； Ｂはプロリン、チオプロリン、β，β−ジメチルチオプ
   ロリン又はＮ−メチルアラニンのＬ−異性体であり； Ｃはアルギニンであり； Ｄはフェニルアラニン又はトリプトファンであり；及び ＥはＯＨである； 請求項２記載のフィブリノーゲンレセプター拮抗剤。
4. ４．Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ
   −ＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲンレセプ
   ター拮抗剤。
5. ５．Ａｓｎ−ＴｈｉｏＰｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ
   −Ｐｈｅ−ＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲ
   ンレセプター拮抗剤。
6. ６．Ａｓｎ−（β，β−ジメチルチオＰｒｏ）−Ａｒｇ
   −Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨである、請求項１記載
   のフィブリノーゲンレセプター拮抗剤。
7. ７．（Ｄ−Ａｓｎ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ
   −Ｐｈｅ−ＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲ
   ンレセプター拮抗剤。
8. ８．（ＡｃＡｓｎ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ
   −Ｐｈｅ−ＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲ
   ンレセプター拮抗剤。
9. ９．Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ
   −ＯＨである、請求項１記載のフィブリノーゲンレセプ
   ター拮抗剤。
10. １０．哺乳動物においてフィブリノーゲン誘導凝集を阻
    害するための組成物であって、 請求項１記載のペプチド及び薬学上許容される担体を含
    むことを特徴とする組成物。
11. １１．哺乳動物血小板へのフィブリノーゲン結合を阻害
    するための方法であって、 患者に請求項１０記載の組成物を投与することを特徴と
    する方法。