JPH03118332A - フイブリノーゲン受容体拮抗薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般に細胞接着を調節すること、フィブリノー
ゲン及び他のタンパク質の血小板への結合を阻害し血小
板のＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａフィブリノーゲン受容体
部位への特異的凝集を阻害することに関する。フィブリ
ノーゲンは血小板凝集やフィブリン形成に関与する血漿
中に存在する糖タンパク質である。血小板は血液凝固に
関与する全ての哺乳類の血液中に見られる無核の細胞様
断片である。

フィブリノーゲンのＩＩ　ｂ　／　ｍ　ａ受容体部位と
の相互作用は正常な血小板機能に不可欠であることが知
られている。

血管が損傷を受けたとき血小板は破損した内皮下面に粘
着する。粘着血小板は次に生物学的活性成分を放出し凝
集する。凝集はトロンビン、エピネフリン又はＡＤＰの
ようなアゴニストの特定の血小板膜受容体への結合によ
って開始される。アゴニストによる刺激は、血小板表面
に潜在するフィブリノーゲン受容体を露呈し、フィブリ
ノーゲンの糖タンパク質ＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａ複合
体への結合を生じる。

血小板凝集及び粘着のメカニズムを研究するために天然
産物及び合成ペプチドを使用する試みがなされてきた。

ラウスラチ（Ｒｏｕｓｌａｈｔｉ）及びビアシュバッハ
ｆＰｉｅｒｓｃｈｂａｃｈｅｒ）　、サイエンス１９８
７年第２３８巻４９１〜４９７頁は細胞外マトリックス
や血中に存在する粘着タンパク質例えばフィブロネクチ
ン、ビトロネクチン、オステオボンチン、コラーゲン類
、トロンポスポンジン、フィブリノーゲン及びフオンビ
ルプラント因子を記載している。これらのタンパク質は
細胞認識部位としてトリペプチドアルギニン−グリシン
−アスパラギン酸を含む。トリペプチド類は２膜にわた
るサブユニットを有する異種二量体タンパク質である構
造上関連のある受容体群の少なくとも１種インテグリン
によって認識される。個々のタンパク質のトリペプチド
配列の高次構造は認識特異性に決定的であると著者らは
述べている。

ケレシュ（ｃｈｅｒｅｓｈ）Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’１．Ａ
ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ１９８７年第８４巻、６４７１
〜６４７５頁は血小板のＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａ複合
体に構造上類似しているが抗原上及び機能上具なるヒト
内皮細胞によって発現されたＡｒｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｓｐ
決定粘着受容体を記載している。この受容体はフィブリ
ノーゲン、フオンビルプラント因子及びビトロネクチン
に対する内皮細胞付着に直接関係している。

ビアシュバッハ−及びラウスラチＪ　、　ｏｆ　Ｂｉｏ
ｌ。

Ｃｈｅｍ、　１９８７年、第２６２巻３６頁、１７２９
４〜１７２９８頁は配列Ａｒ　ｇ−Ｇ　１　ｙ−Ａｓ　
ｐＸａａ　（ＸａａはＭｅｔ、Ｃｙｓ、Ｈｉ　ｓ、Ｔｒ
ｐ又はＧｌｙ以外の２０種の天然Ｌ−アミノ酸の１つで
ある）のトリペプチド配列ＡｒｇＧｌｙ−Ａｓｐを含む
ペプチドの結合特異性かおよぼす立体化学的影響を記載
している。著者は配列Ｇｌｙ−Ｐｅｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａ　ｓ　ｐ　−Ｓ　ｅ　ｒ　−Ｐ　ｒ　ｏ　
−Ｃｙ　ｓ　−Ａ　１　ａ　（Ｐｅｎはベニシルアミノ
である）のＰｅｎとＣｙＳ間のジスルフィド架橋を形成
することによる環化が、フィブロネクチンへの付着を阻
止するのに無効なペプチドを与えることを示している。

Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔ’１．Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡｌ　９８４年第
８１巻、５９８５〜５９８８頁には同じ著者が付着促進
活性を保持するフィブロネクチンの細胞認識部位の変異
体を記載している。テトラペプチドＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−５ｅｒは、大きな粘着糊タンパク質フィブロネク
チン中の細胞によって認識された最小構造として記載さ
れている。−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−３ｅｐ一部分を
有するペプチドは米国特許節４，５８９，８８１号及び
同第４．６１４，５１７号に記載される。−Ａｒｇ−Ｇ
ｌ　ｙ−Ａｓｐ−Ｒ（ＲはＴｈｒ又はＣｙＳ又はフィブ
ロネクチンと同じ細胞付着活性を有する他のアミノ酸か
ら選択される）部分を有するペプチドは米国特許節４．
５７８，０７９号に記載される。

ルッゲリ（Ｒｕｇｇｅｒｉ）等、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ’
ｌ　Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、ＵＳＡ　Ｉ　９８６年第８３巻、５７０８〜５
７１２頁は血小板に結合するフィブリノーゲンを阻止す
る配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｖａｌを含む１６残基
までの長さに作られた一連の合成ペプチドを記載してい
る。

トリペプチド配列Ａｒｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｓｐがフィブロ
ネクチン及びヒドロネクチンの細胞付着促進作用を倍化
し又は阻止する特定のポリペプチド中に存在することは
知られているがトリペプチドＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐは
活性が低い。ポリペプチド中の他のアミノ酸の結合特異
性かおよぼす影響はほとんど理解されていない。出願人
は有効な血小板凝集阻害剤であるトリペプチド配列Ａｒ
ｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｓｐを含む小さな環状へキサペプチド
を製造した。

本発明は式 （式中ＡはＨ、アシルアミド、アミノアシルアミド又は
Ｎ−メチルアミノアシルアミドである。

Ｒ及びＲ’は同一か又は異なり、Ｈ、メチル、エチル又
は１〜５個の炭素を有する低級アルキルである。

Ｘ−ＹはＳ−５，ＣＨ２−３，５−ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ
２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２５−３，ＣＨ２−３−
３−ＣＨ２，Ｓ−３ＣＨ２である。

Ｆはトリプロファン、フェニルアラニン、ロイシン、バ
リン、イソロイシン、α−ナフチルアラニン、β−ナフ
チルアラニン、メチオニン、チロシン、アルギニン、リ
シン、ホモアルギニン、オルニチン、ヒスチジン、置換
トリプトファン、置換フェニルアラニン及び置換チロシ
ン、チエニルアラニン及び２−１３−又は４−ピリジル
アラニンからなる群から選択されるＬ−アミノ酸である
。

ＧはＤ又はＬアミノ酸、環状第ニアミノ酸又はＮ−メチ
ルアミノ酸である。

Ｄはアルギニン、ホモアルギニン、グアニドアミノ酪酸
、グアニドアミノプロピオン酸又はアルギニンのＬ−異
性体である。

１ ＥはＨｌ ＣＯＯＨｌ ＣＯＮＨ２、 Ｃ０ＮＨＲ２、 Ｃ０ＮＲ３Ｒ’又は （Ｒ２は１〜４個の炭素を有するアルキル基であり、Ｒ
３Ｒ’は２〜６個の炭素を有するアルキル基であり、Ｎ
Ｒ３Ｒ’は第ニアミノ酸である）である。

Ｒ５はＨ又はメチルである。） で表わされれるフィブリノーゲン受容体拮抗薬である。

好適な化合物は、 ＡがＨであり、 Ｒ及びＲ’がＨであり、 Ｘ−ＹがＣＨ２−ＣＨ２ＣＨ２あり Ｆがトリプトファン又はα−ナフチルアラニンであり Ｇがプロリンであり、 Ｄがアルギニンであり、 ２ ＥがＨであり、 Ｒ５がＨである 化合物である。

具体的な化合物は １ｉｉＩ　　Ｃ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　−
Ｐｈｅ−Ｐｒｏ）　　； ｉｖｌ　　Ｃ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　−Ｔ
ｒｐ−Ｐｒｏ）；及び ｖｌ　　Ｃ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ａ−Ｎ
ａｌ）−Ｐｒｏ）、（Ａｈａはアミノヘプタン酸を表わ
す）である。

最も好適な化合物は、化合物ｉｉｉ　、　ｉｖ及びＶで
ありアミノヘプタン酸を含む環状ペプチドである。

特にことわらない限り、アミノ酸は全てＬ−異性体形で
ある。本発明は本発明のフィブリノーゲン受容体拮抗薬
ペプチド及び血小板凝集の阻害を促進する連続静脈内又
は経口又は静脈内ポラス（ｂｏｌｕｓ）投与に適当であ
る薬理的に使用し得るｐＨ例えばｐＨ７，４に於ける薬
理的に使用し得る担体の１種以上例えば食塩水を包含し
ている組成物も含む。

本発明は本発明の組成物の有効量を連続静脈内又は経口
又は静脈内ポラス（ｂｏｌｕｓ）法によって患者に投与
することを特徴とする血小板凝集を阻害する方法も含む
。

本発明の化合物は、フィブリノーゲン誘発血小板凝集を
阻止する環状フィブリノーゲン受容体拮抗薬である。こ
れらの化合物は当業界でよく知られている同相合成法又
は液体法によって製造される（ノイラトｆＮｅｕｒａｔ
ｈ）　、ヒル（Ｈｉｌｌｌ及びボーダー（Ｂｏｅｄｅｒ
）編集°゛タンパク質第三版、第１Ｉ巻、アカデミツク
プレス１９７６年）。

これらの化合物は、血小板凝集の短期間による予防が望
まれる場合の治療処理に於ける使用に望ましい比較的短
期間の活性を有する。これらは代謝分解を受けにくい非
常に効力のある化合物である。

−Ｉｉ１９のアミノ酸は２０種あり、それらにより細菌
からヒトまで全種に於ける全てのタンパク質が構成され
る。

本発明の化合物はメリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌ
ｄ）Ｊ　、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、第８５巻、
２１４９頁ｆ１９６４年）に記載されるような同相ペプ
チド合成を用いてホウテン（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ）　Ｐｒ
ｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｌ、Ｓｃｉ、第８２巻、５１３
２頁（１９８５年）の合成のような当業界で既知の他の
同等な化学合成を使用することもできまたは液体法（°
゛クンバク質′°第３版、第１Ｉ巻、第２章１０６〜２
５３頁アカデミツクプレス（１９７６年）を用いて製造
することができる。

同相合成はリビア（Ｒｉｖｉｅｒ）等により１９８２年
１月２１日に発行された米国特許第４．２４４，９４６
号で一般的に述べられる通り、保護アミノ酸の適当な樹
脂へのカップリングによってペプチドのＣ末　５ 端から開始される。その開示は、引用することによりこ
こに組入れられたものとする。この−射的な合成の具体
例は米国特許第４，３０５，８７２号及び同第４，３１
６，８９１号に述べられている。

これらのポリペプチドを合成することについては、適当
に保護されたα−アミノ基を有するカルボキシル末端ア
ミノ酸をクロロメチル化ポリスチレン樹脂等に結合する
。塩化メチレン中トリフルオロ酢酸を使用することによ
るようにα−アミノ保護基を除去した後、合成の次の工
程は容易に進行する。特定のアミノ保護基を除去するた
めの他の標準の切断試薬及び条件は開示された文献に記
載される通り使用することができる。

次いで残りのα−アミノ−及び側鎖保護アミノ酸は所望
される順序の逐次縮合によって結合されて樹脂に接続し
た中間体化合物が得られる。

２個のアミノ酸又はアミノ酸とペプチド又はペプチドと
ペプチド間の縮合は、常法例えばアジド法、混合酸無水
物法、ＤＣＣ（ジシクロヘキシル　６ カルポジイミド）法、活性エステル法（ｐ−ニトロフェ
ニルエステル法、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステ
ル法、シアンメチルエステル法等）、ウッドワード試薬
に法、カルボニルジイミダゾール法、酸化−還元法又は
ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチル
アミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｂ
ＯＰ）法によって行なうことができる。固相法でペプチ
ド鎖を延長する場合には、ペプチドをＣ末端アミノ酸に
於て不溶性担体に結合させる。

Ｃ末端アミノ酸のカルボキシ基と反応させて、後で容易
に切断する結合を形成する不溶性担体としては例えば、
ハロメチル樹脂例えばクロロメチル樹脂及びブロモメチ
ル樹脂ヒドロキシメチル樹脂アミノメチル樹脂ベンズヒ
ドリルアミン樹脂及びｔ−アルキルオキシカルボニルヒ
ドラジド樹脂を使用することができる。

種々のアミノ酸部分の反応性側鎖基のその部位に適当な
保護基による保護は連鎖が完全に構築された後、その基
が最後には除去されるまでペプチドの化学合成に共通し
ている。その本体がカルボキシル基で反応し、次いでα
−アミノ−保護基を選択除去して次の反応をその場所で
行なわせる間、アミノ酸又は断片のα−アミノ基の保護
は共通である。従って合成の１工程として側鎖保護基を
持つ種々のこれらの残基を有するペプチド鎖に所望の配
列で位置する各々のアミノ酸残基を含む中間体化合物が
生成されることは共通である。次いでこれらの保護基は
、精製によって所望の生成物を生成するように、実質的
に同時に除去される。

α−及びω−側鎖アミノ基を保護するのに適当な保護基
としては、例えば、ベンジルオキシカルボニル（以下Ｚ
と略される）、イソニコチニルオキシカルボニル（ｉ　
Ｎ０Ｃ）、Ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル［Ｚ　
（２−Ｃ℃）］、］ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニ ルｚ　（Ｎｏ２）］、］ｐ−メトキシベンジルオキシカ
ルボニルＺ　（ＯＭｅ）］　、］ｔ−ブトキシカルボニ
ルＢｏｃ）、ｔ−アミノオキシ力ルポニル（Ａｏｃ）、
イソボルニルオキシカルボニル、アゲマンチルオキシカ
ルボニル、２−　（４−ビフェニル）−２−プロピルオ
キシカルボニル（Ｂｐｏｃ）、９−フルオレニルメトキ
シカルボニル（Ｆｍｏｃ）、メチルスルホニルエトキシ
カルボニル（Ｍｓｃ）、トリフルオロアセチル、フタリ
ル、ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル（ＮＦ
Ｓ）、ジフェニルホスフィノチオイル（Ｐｐｔ）ジメチ
ルホスフィノチオイル（Ｍｐｔ　）等が例示される。

カルボキシ基の保護基としては例えばベンジルエステル
（ＯＢｚｌ）、シクロヘキシルエステル（Ｃｈｘ）、４
−ニトロベンジルエステル（ＯＮｂ）、ｔ−ブチルエス
テル（ＯＢｕｔ）、４−ピリジルメチルエステル（ＯＰ
ｉｃ）等が例示される。アミノ及びカルボキシ基以外の
官能基を有するアルギニン、システィン及びセリンのよ
うな特定のアミノ酸は、必要に応じて適当な保護基で保
護されることが望ましい。例えばアルギニンのグアニジ
ノ基はニトロ、ｐ−トルエン−スル９ ホニル、ベンジルオキシカルボニル、アダマンチルオキ
シカルボニル、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル、４−
メトキシ−２，６−シメチルーベンゼンスルホニル（Ｍ
ｄｓ）、１，３．５−トリメチルフェニルスルホニル（
Ｍｔｓ）等で保護することができる。システィンのチオ
ール基は、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、トリフェ
ニルメチル、アセチルアミノメチル、エチルカルバモイ
ル、４−メチルベンジル、２，４．６−１−リメチルベ
ンジル（Ｔｍｂ）等で保護することができ、セリンのヒ
ドロキシル基はベンジル、ｔ−ブチル、アセチル、テト
ラヒドロピラニル等で保護することができる。

ステワード（Ｓｔｅｗａｒｔ）及びヤング（Ｙｏｕｎｇ
ｌ　　”固相ペプチド合成パビアスケミカルカンパニロ
ックフォード、ＩＬ（１９８４年）はペプチドの製造操
作に関して詳細な情報を提供する。

α−アミノ基の保護は１４〜１８頁に記載され側鎖閉塞
は１８〜２８頁に記載される。アミン、ヒドロキシル及
びスルフヒドリル官能基の保護基の０ 表は１４９〜１５１頁に記載される。ここに、これを引
用することによりこれらの説明を組み入れたものとする
。

所望のアミノ酸配列が完了した後中間ペプチドは液体Ｈ
Ｆのような試薬で処理して樹脂支持体から除去されるが
、これはペプチドを樹脂から切断するだけでなく残りの
側鎖保護基金てを切断する。ペプチドはいくつかの既知
の方法のいずれか（シュローダ−（Ｓｃｈｏｄｅｒｌ及
びリュプケ（Ｌｕｂｋｅ）゛ペブチド：ペブチドの合成
方法゛°第１巻アカデミツクプレスニューヨーク（１９
６５年）２７１〜２８６頁参照。引用することによりこ
れらの内容をここに組み入れたものとする。例えば、Ａ
ｃＯＨ中ヨウ素を用いてシスティン残基間のジスルフィ
ド架橋を形成して環化される。次いでポリペプチドはリ
ビア（Ｒｉｖｉｅｒ１等ペプチド：構造及び生物学的機
能（１９７９年）１２５〜１２８頁に記載される通りゲ
ル透過次いで分取用ＨＰＬＣによって精製することがで
きる。

実［１１↓ α−アミノＢｏｃ保護基（ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル
）をトリフルオロ酢酸と塩化メチレンを用いて除去しく
Ｃｙｓはｐ−メトキシベンジルで保護したままである）
、脱保護システィンはジイソプロピルエチルアミンで中
和する。次いで２．０ｍＭＢｏｃ保護Ｐｒｏを１．０ｍ
Ｍジシクロへキシルカルボジイミドによって仲介された
システィンに結合し、トリフルオロ酢酸と塩化メチレン
で脱保護する（アブライドバイオシステム入社ペプチド
シンセサイザー用プロトコール）。次いでＰｒｏをジイ
ソプロピルエチルアミンで中和する。ジシクロへキシル
カルボジイミドによるカップリング、トリフルオロ酢酸
と塩化メチレンによる脱保護及びジイソプロピルエチル
アミンによる中和の段階的手順に従いＢｏｃ保護Ｐｈｅ
、Ａｓｐ、Ｇ１．ｙ、Ａｒｇ及びＣｙｓ残基を逐一結合
する。

更にＡｒｇを４−トルエンスルホニル（Ａｒｇ（Ｔｏｓ
））で保護し、Ａｓｐを更にベンジル（Ａｓｐ　（Ｂｚ
　ｌ））で保護し、最後のＣｙｓ残基を再び更にｐ−メ
トキシベンジルで保護する。

次いで最後のＣｙｓを酢酸無水物でアセチル化する。

アセチル化した後、次のものが生成する。

ＭＢ ■ Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−０−Ｐａｍ■ペプチドの樹脂
からの切断はＨＦ／アニソール（９：　１　　（ｖ／ｖ
）　）を用いて達成されアセチル−Ｃｙｓ−Ａｒｇ−Ｇ
ｌ　ｙ−ＡｓｐＰｈｅ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−ＯＨ，を生成
する。

環状構造はシスティン残基間のジスルフィド架　３ 橋の生成によって形成される。ペプチドを５０〜８０％
ＡｃｏＨ：Ｈ２０に室温で溶解し、この溶液をＡｃｏＨ
中１２〜１５当量のヨウ素溶液を最終濃度２．２５ｍｇ
／ヨウ素のｍｌまで急速添加する間撹拌する。１〜２時
間の反応時間の後過剰のヨウ素及びＨＯＡｃを真空下回
転蒸発によって除去し環化ペプチドを含む水溶液を０．
１％ＴＦＡＨ２Ｏ−ＣＨ３ＣＮ勾配中ＨＰＬＣを用いて
精製する。また遊離ＳＨペプチドを１〜５％ＨＯＡｃに
約２ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解し濃ＮＨ４ＯＨでｐＨ約７
〜８．５にする。環化は勢いのよい撹拌下（好適には反
応を促進するために銅線の小片が加えられる）２５°で
１〜４時間で達成される。次いで反応混合液を同様の方
法で濃縮し環化ペプチドを含む溶液を０．１％ＴＦＡＨ
２０−ＣＨ３ＣＮ勾配中分取用ＨＰＬＣを用いて精製す
る。最終ＴＦＡ塩生成物はイオン交換カラムバイオラド
ＡＧ３−Ｘ４Ａ　（アセテートサイクル）を通過させて
ＨＯＡｃ塩に変換する。仕上げたベブ　４ ラドはアセチル Ｃｙｓ Ａｒｇ−Ｇｌｙ　− Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−ＯＨである。

Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−０−ＰａｍＲで開始してαアミノＢｏ
ｃ保護基をトリフルオロ酢酸と塩化メチレンを用いて除
去する。脱保護グリシンをジイソプロピルエチルアミン
とジメチルホルムアミドで中和する。次いでＢｏｃ保護
Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）を１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ルによって仲介されたＧｌｙに結合し次にトリフルオロ
酢酸と塩化メチレンで脱保護する。次いでＡｒｇをジイ
ソプロピルエチルアミンとジメチルホルムアミドで中和
する。次いでＢｏｃ−保護基Ａｈａ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ及
びＡｓ　ｐ　（Ｎｏ　２　Ｂｚ）をジシクロへキシルカ
ルボジイミンによるカップリング、トリフルオロ酢酸と
塩化メチレンによる脱保護及びジイソプロピルエチルア
ミンによる中和の　５ 段階的手順に従って、ＡｈａをＡｒｇにＰｒｏをＡｂａ
にＴｒｐをＰｒｏに、ＡｓｐをＴｒｐに逐一結合し、 Ｎ　Ｏ２Ｂ　ｚ ■ Ｂｏｃ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｒ。

Ａｂａ を生成する。

ペプチドの樹脂からの切断は、ＨＦ／アニソール（９：
　ｌ　（ｖ／ｖ）　）を用いて達成されＡｒ　ｇ−Ｇ　
ｌ　ｙ−ＯＨを生成する。

次いで環状構造は、次の通り生成する。

線状ペプチドをＮ−エチル−Ｎ′　（３−ジメチルアミ
ノプロピル）カルボジイミド、ｌ−ヒドロキシベンゾト
リアゾール、ジメチルホルムアミド及びＮ−メチルモル
フォリンで処理してＡｒｇ−Ｇｌｙ） を生成し最後にｚ　ｎ　／　ＨＯＡ　ｃ又はＨ２／　ｐ
　ｄ　／木炭で脱保護して を得る。

環化ペプチドを５０％水性ＨＯＡｃによるゲル透過及び
０．１％ＴＦＡＨ２Ｏ−ＣＨ，ＣＮ勾配中ＨＰ　Ｌ　Ｃ
を用いて精製する。最終ＴＦＡ塩生成物をイオン交換カ
ラムバイオラドＡＧ３−Ｘ４Ａ（アセテートサイクル）
を通過させてＨＯＡｃ塩に変換する。

面頂」Ｊ１１肚五 本発明のペプチドは細胞付着活性に関係するインテグリ
ンタンパク質−複合体機能を阻害するために使用するこ
とができる。これらはヒト又は哨乳類の血小板凝集又は
粘着の阻止が所望される場合に患者に投与することがで
きる。

　７ 本発明のポリペプチドは速かに循環系から脱離され、強
力な抗血栓の短期間の有効性が必要とされる場合に血小
板凝集を阻止するのに特に有用である。従ってこれらは
末梢動脈（動脈移植、頚動脈内容除去術）による手術に
及び動脈や組織の処置及び／又は血小板と人工表面との
相互作用が血小板凝集や消費をもたらす場合の心臓血管
手術に有用性を見出すことができる。凝集した血小板は
血栓及び血栓塞栓を形成することができる。本発明のポ
リペプチドは血栓及び血栓塞栓の形成を予防するために
これらの手術患者に投与することができる。

体外循環は血液を酸素化するために心臓血管手術に常用
される。血小板は対外回路の表面に粘着する。粘着は血
小板膜のＧ　Ｐ　ＩＩ　ｂ　／　ＩＩＩ　ａと回路表面
に吸着したフィブリノーゲン間の相互作用に依存する。

（グラスズコ（Ｇｌｕｓｚｋｏ）等、Ａｍｅｒ、　Ｊ　
。

ｐｈｙｓｉｏｌ、　１９８７年第２５２　：　Ｈ巻６１
５〜６２１頁）人工表面から遊離した血小板は凝血機能
が損われていることを示す。本発明のポリペプ　８ チドを、粘着を予防するために投与することができる。

これらのポリペプチドの他の応用は、血栓崩壊治療中及
び′治療後の血小板血栓症、血栓塞栓症及び再閉塞の予
防及び冠動脈や他の動脈の血管形成術後及び冠動脈バイ
パス処置後の血小板血栓症、血栓塞栓症及び再閉塞の予
防を含む。本発明のボッペプチドは心筋梗塞を予防する
ために使用することもできる。

これらのポリペプチドは連続静脈内又はポラス注入又は
経口方法を含む実質量で血流に供給をもたらす便利ない
ずれの手段によっても投与することができる。本発明の
組成物は本発明のペプチド及び血小板凝集の阻止を得る
のに適当なｐＨレベルｐＨ約７．４の薬理的に許容し得
る担体例えば食塩水を含む。これらは血小板凝集を阻止
するためにプラスミノーゲン活性化剤又はストレブトキ
ナゼのような血栓崩壊剤と併用することができる。

これらはヘパリン、アスピリン又はワルファリンのよう
な抗凝血物質と併用することもできる。静脈内投与が現
在好ましい投与経路として考えられる。これらは水に可
溶であり、従って溶液として有効に投与することができ
る。

１つ典型的な適用としては、ペプチドの適当量を血管形
成術を受ける心臓発作の患者に静脈内投与される。投与
は血管形成術中又は数分前に与えられ、血小板凝集を十
分阻止する量例えば１キロ当り約０．０５〜３０μＭ好
ましくは１キロ当り約０．３〜３μＭの定常状態の血漿
濃度を得る量である。この量が得られるとき１キロ当り
１分間約１〜１００ＩＬＭ好ましくは１キロ当り１分間
約１０〜３０μＭの注入液は血小板凝集を阻止すること
を維持する。患者がバイパス手術を受けることが必要で
あるとすれば直ちに投与を停止することができ、手術中
にアスピリン又はモノクローナル抗体のような他の物質
による合併症の原因とならず、その効果は投与停止後数
時間は持続する。

本発明はまた本発明のペプチド及び組織型プラスミノー
ゲン活性化剤又はストレプトキナーゼを包含する医薬組
成物を含む。本発明はまた本発明の組成物の有効量を患
者に投与することを特徴とする患者の血栓崩壊を促進し
、再閉塞を予防する方法を含む。

本発明はその精神又は本質的な特質から逸脱することな
く他の特定の形で具体化され得る。従って上述の具体的
実施例は本発明の範囲を限定するものとして解釈すべき
ではない。

■

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ｛式中ＡはＨ、アシルアミド、アミノアシルアミド又は
   Ｎ−メチルアミノアシルアミドである。 Ｒ及びＲ＾１は同一か又は異なり、Ｈ、メチル、エチル
   又は１〜５個の炭素原子を有する低級アルキルである。 Ｘ−ＹはＳ−Ｓ、ＣＨ＿２−Ｓ、Ｓ−ＣＨ＿２、ＣＨ＿
   ２ＣＨ＿２、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＨ＿２、ＣＨ＿２−Ｓ
   −Ｓ、ＣＨ＿２−Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２、Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２
   である。 Ｆはトリプトファン、フェニルアラニン、 ロイシン、バリン、イソロイシン、α−ナフチルアラニ
   ン、β−ナフチルアラニン、メチオニン、チロシン、ア
   ルギニン、リシン、ホモアルギニン、オルニチン、ヒス
   チジン、置換トリプトファン、置換フェニルアラニン、
   置換チロシン、チエニルアラニン及び２− ３−又は４−ピリジルアラニンからなる群から選択され
   るＬ−アミノ酸である。 ＧはＤ又はＬアミノ酸、環状第二アミノ酸又はＮ−メチ
   ルアミノ酸である。 Ｄはホモアルギニン、グアニドアミノ酪酸、グアニドア
   ミノプロピオン酸又はアルギニンのＬ−異性体である。 ＥはＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ＿２、ＣＯＮＨＲ＾２、Ｃ
   ＯＮＲ＾３Ｒ＾４又は ▲数式、化学式、表等があります▼ （Ｒ＾２は１〜４個の炭素を有するアルキル基であり、
   Ｒ＾３Ｒ＾４は２〜６個の炭素を有するアルキル基であ
   り、ＮＲ＾３Ｒ＾４は第二アミノ酸である）である。 Ｒ＾５はＨ又はメチルである。｝のフィブリノーゲン受
   容体拮抗薬。 ２、ＡがＨであり、 Ｒ及びＲ＾１がＨであり、 Ｘ−ＹがＣＨ＿２−ＣＨ＿２であり、 Ｆがトリプトファン又はα−ナフチルアラ ニンであり、 Ｇがプロリンであり、 Ｄがアルギニンであり、 ＥがＨであり、そして Ｒ＾５がＨである 請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ３、Ａｃ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
   Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−ＮＨ＿２ である請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ４、Ａｃ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
   Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−ＯＨ である請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ５、シクロ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ
   −Ｐｒｏ） である請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ６、シクロ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ
   −Ｐｒｏ） である請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ７、シクロ（Ａｈａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（α−
   Ｎａｌ）−Ｐｒｏ） である請求項１記載のフィブリノーゲン受容体拮抗薬。 ８、請求項１記載のペプチド及び医薬的に許容し得る担
   体を含む哺乳類のフィブリノーゲン誘発血小板凝集を阻
   止する組成物。 ９、請求項８記載の組成物を患者に投与するこことを特
   徴とする哺乳類の血小板に結合するフィブリノーゲンを
   阻止する方法。