JPH0257175A - 成形培地及びその製造法 - Google Patents
成形培地及びその製造法Info
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- JPH0257175A JPH0257175A JP20618388A JP20618388A JPH0257175A JP H0257175 A JPH0257175 A JP H0257175A JP 20618388 A JP20618388 A JP 20618388A JP 20618388 A JP20618388 A JP 20618388A JP H0257175 A JPH0257175 A JP H0257175A
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、種々の培養用粉末培地を顆粒状あるいはタブ
レット状に成形した培地及びその成形方法に関するもの
である。
レット状に成形した培地及びその成形方法に関するもの
である。
従来の技術及び発明が解決しようとする課題従来の動物
細胞培養用培地、植物培養用培地、バクテリア培養用培
地は、微粉末状であるため、以下に示すような問題点が
あった。
細胞培養用培地、植物培養用培地、バクテリア培養用培
地は、微粉末状であるため、以下に示すような問題点が
あった。
a、計量あるいは水への投入の際、舞い上がり飛散する
ため、不都合であった。
ため、不都合であった。
b、吸湿性の培地が多いため、計量の際、サジあるいは
計量容器に付着し、計量操作が不便であり、計量を正確
に行うことが難しかった。また、開封後、使用した残り
を保存する場合、吸湿、変質等のおそれがあった。
計量容器に付着し、計量操作が不便であり、計量を正確
に行うことが難しかった。また、開封後、使用した残り
を保存する場合、吸湿、変質等のおそれがあった。
C1酸化しやすい物質を含む培地の場合、空気に曝され
て、変質しやすかった。
て、変質しやすかった。
d、培地を溶解する際、アワができ溶解しにくがった。
この発明は、このような問題点を解決しようとして行っ
たものである。
たものである。
課題を解決するための手段
本発明者らは、微粉末の培地を加工する検討を行った結
果、培地を顆粒状あるいはタブレット状にすることに成
功味 これが本目的に適合することから、これに基づい
て本発明を完成するに至っ以下に本発明について詳細に
説明する。
果、培地を顆粒状あるいはタブレット状にすることに成
功味 これが本目的に適合することから、これに基づい
て本発明を完成するに至っ以下に本発明について詳細に
説明する。
(1)培地
本発明の培地とは、動物細胞培養用培地、植物培養用培
地あるいはバクテリア培養用培地を言う。
地あるいはバクテリア培養用培地を言う。
更に詳しくは、ダルベツコMEM培地(Du I be
cco ’ sModified Eagle Med
ia)、 RPMI 1640培地、 ハム(Ham
’s)培地、マツコイ5A培地等の単独あるいは混合し
た動物細胞培養用培地、ムラシゲ・スクーグ植物培地、
シュート増殖培地A及びB、ガーベラ増殖培地等の植物
培養用培地、LB培地、YT培地等のバクテリア培養用
培地等を言う。
cco ’ sModified Eagle Med
ia)、 RPMI 1640培地、 ハム(Ham
’s)培地、マツコイ5A培地等の単独あるいは混合し
た動物細胞培養用培地、ムラシゲ・スクーグ植物培地、
シュート増殖培地A及びB、ガーベラ増殖培地等の植物
培養用培地、LB培地、YT培地等のバクテリア培養用
培地等を言う。
(2)顆粒の作製
顆粒の作製法としては、押し出し造粒法、流動層造粒法
あるいは乾式造粒法が利用できる。しかし、培地の場合
には、構成する物質の種類、量等が定められているため
、顆粒化に適した賦形剤を使用することができず、一部
の培地を除いて乾式造粒することは難しい。したがって
、主に押し出し造粒あるいは流動層造粒法が用いられる
。
あるいは乾式造粒法が利用できる。しかし、培地の場合
には、構成する物質の種類、量等が定められているため
、顆粒化に適した賦形剤を使用することができず、一部
の培地を除いて乾式造粒することは難しい。したがって
、主に押し出し造粒あるいは流動層造粒法が用いられる
。
(1)に例示した粉末培地をまず5〜95%の有機溶剤
を含む水を用いて適度に湿らせる。有機溶剤としては、
メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコ
ール、ブチルアルコール等が用いられる。好ましくは、
エチルアルコールを用いる。
を含む水を用いて適度に湿らせる。有機溶剤としては、
メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコ
ール、ブチルアルコール等が用いられる。好ましくは、
エチルアルコールを用いる。
有機溶剤は、市販の特級試薬を用いるのが望ましい。水
は目的とする培養物の培養に適する純度の水を使用する
。水に対する溶解度が大きく、水の添加により粘度が上
がり、顆粒状にすることが困難な培地の場合には、有機
溶剤の濃度を上げることにより、顆粒状にすることがで
きる。
は目的とする培養物の培養に適する純度の水を使用する
。水に対する溶解度が大きく、水の添加により粘度が上
がり、顆粒状にすることが困難な培地の場合には、有機
溶剤の濃度を上げることにより、顆粒状にすることがで
きる。
培地に適度の湿り気を与えるためには、培地IKg当り
40〜200m l程度の含水有機溶剤を噴霧する。
40〜200m l程度の含水有機溶剤を噴霧する。
このようにして湿らせた培地な造粒機に供する。
造粒機としては市販の縦型あるいは横型等が利用できる
。顆粒の大きさとしては直径0.5〜2mm程度、長さ
1〜5mm程度とする。次いで、減圧状態で顆粒状培地
の乾燥を行う。安定な物質のみから成る培地の場合には
、減圧することなく温度を上昇させ、乾燥することもで
きる。
。顆粒の大きさとしては直径0.5〜2mm程度、長さ
1〜5mm程度とする。次いで、減圧状態で顆粒状培地
の乾燥を行う。安定な物質のみから成る培地の場合には
、減圧することなく温度を上昇させ、乾燥することもで
きる。
含水有機溶剤の添加量あるいは有機溶剤の含量を変える
ことにより、顆粒の強度を増減できる。
ことにより、顆粒の強度を増減できる。
乾燥させた顆粒状培地を、使用目的に合わせた容量、例
えば1リツター 10リツター等の培地用に計量し、防
湿性及び空気遮断性の容器に封入、密閉する。
えば1リツター 10リツター等の培地用に計量し、防
湿性及び空気遮断性の容器に封入、密閉する。
(3)タブレットの作製
タブレットの作製は、粉末培地を直接打錠するか、ある
いは(2)で作製した顆粒状培地を、好ましくはそのま
ま、必要ならは滑沢剤を添加し打錠することにより行う
。この場合のタブレ・叫の大きさは、使用者が、計量す
る必要のないような大きさとする。例えば1リツターの
培地を作るのに適した大きさのタブレットを基本単位と
し、10リツターの培地の場合には上記のタブレットを
10個使用す る。
いは(2)で作製した顆粒状培地を、好ましくはそのま
ま、必要ならは滑沢剤を添加し打錠することにより行う
。この場合のタブレ・叫の大きさは、使用者が、計量す
る必要のないような大きさとする。例えば1リツターの
培地を作るのに適した大きさのタブレットを基本単位と
し、10リツターの培地の場合には上記のタブレットを
10個使用す る。
(2)及び(3)の操作は、室温で短時間で行い得るこ
とから、培地の変性は起こらず安定に保つことができる
。
とから、培地の変性は起こらず安定に保つことができる
。
発明の効果
粉末培地を顆粒状あるいはタブレット状にすることによ
り以下に示す効果がある。
り以下に示す効果がある。
a、顆粒状培地は微粉末状と異なり飛散することがない
ことから、計量しゃすく、しかも正確に行い得る。
ことから、計量しゃすく、しかも正確に行い得る。
b、 タブレット状培地は、作製する培地量に合わせて
タブレットを何個か添加するのみでよいことから、操作
が簡単でしかも計量ミスがない。
タブレットを何個か添加するのみでよいことから、操作
が簡単でしかも計量ミスがない。
C1吸湿性の培地であっても、顆粒状あるいはタブレッ
ト状培地は、計量用容器、サジ等に付着しない。
ト状培地は、計量用容器、サジ等に付着しない。
d、酸化しやすい物質を含む培地の場合、顆粒状あるい
はタブレット状培地は、微粉末状培地より空気に接触し
にくいことから酸化を受けにくい。
はタブレット状培地は、微粉末状培地より空気に接触し
にくいことから酸化を受けにくい。
e、粉末状培地を水に溶解する場合、粉末中に空気が入
り込みアワ状となり、溶けにくいことがある。しかし、
顆粒状培地は、底に沈み容易に溶解する。
り込みアワ状となり、溶けにくいことがある。しかし、
顆粒状培地は、底に沈み容易に溶解する。
以下本発明の実施例を示す。
実施例1
動物細胞培養用基礎培地である RDF粉末培地(RP
旧1640.ダルベツコMEM及びハムビー12培地を
2:l:lで混合した培地)を顆粒状に成形した。まず
、RDF粉末培地500gに50χ工チルアルコール含
有2段蒸留水約40■1を培地に均等に行き渡るよう噴
霧した。これを造粒機(菊水社製)で直径1.2mmの
メツシュのパケットを通して、顆粒になるように押し出
した。これを、減圧しつつ室温で乾燥した。
旧1640.ダルベツコMEM及びハムビー12培地を
2:l:lで混合した培地)を顆粒状に成形した。まず
、RDF粉末培地500gに50χ工チルアルコール含
有2段蒸留水約40■1を培地に均等に行き渡るよう噴
霧した。これを造粒機(菊水社製)で直径1.2mmの
メツシュのパケットを通して、顆粒になるように押し出
した。これを、減圧しつつ室温で乾燥した。
このようにして作製した顆粒状RDF培地を用いRDF
培養液の作製を行った。計量が容易で、しかも正確に行
い得た。また溶解は瞬時に完了した。
培養液の作製を行った。計量が容易で、しかも正確に行
い得た。また溶解は瞬時に完了した。
実施例2
実施例1により得られた顆粒状RDF培地を用いて 1
00m1培地用タブレツトを作製した。1.3gの顆粒
状RDF培地を打錠機により厚さ3mm、直径19mm
程度のタブレット状にした。タブレット状RDF培地を
用いた場合、計量を行う必要がなく簡便に培地の調製を
行い得た。溶解に要した時間は2.5分と短時間であり
、容易にRDF培養液の作製を行い得た。
00m1培地用タブレツトを作製した。1.3gの顆粒
状RDF培地を打錠機により厚さ3mm、直径19mm
程度のタブレット状にした。タブレット状RDF培地を
用いた場合、計量を行う必要がなく簡便に培地の調製を
行い得た。溶解に要した時間は2.5分と短時間であり
、容易にRDF培養液の作製を行い得た。
この培養液を濾過滅菌後、10χウシ胎児血清(FCS
)を添加した血清培地及び5gg/m lインシュリン
、35μg/ml )ランスフェリン、20μ門エタノ
ールアミン、2.5gMセレニウムとl mg/ifヒ
ト血清アルブミン(ITEs/H5A)を添加した無血
清培地で、ヒト−ヒトハイブリドーマHB4C5(特願
昭63−116289号)を培養した。第1図に示した
ように、血清培地及び無血清培地において、タブレット
状培地は粉末培地と同様、良好なハイブリドーマの増殖
が認められた。
)を添加した血清培地及び5gg/m lインシュリン
、35μg/ml )ランスフェリン、20μ門エタノ
ールアミン、2.5gMセレニウムとl mg/ifヒ
ト血清アルブミン(ITEs/H5A)を添加した無血
清培地で、ヒト−ヒトハイブリドーマHB4C5(特願
昭63−116289号)を培養した。第1図に示した
ように、血清培地及び無血清培地において、タブレット
状培地は粉末培地と同様、良好なハイブリドーマの増殖
が認められた。
実施例3
植物培養用培地であるムラシゲ・スクーグ粉末培地を顆
粒状に成形した。まず、培地500gに20χ工チルア
ルコール含有2段蒸留水約401を培地に均等に行き渡
るよう噴霧した。これを造粒機で実施例1と同様の方法
で顆粒状にし、減圧しつつ室温で乾燥した。
粒状に成形した。まず、培地500gに20χ工チルア
ルコール含有2段蒸留水約401を培地に均等に行き渡
るよう噴霧した。これを造粒機で実施例1と同様の方法
で顆粒状にし、減圧しつつ室温で乾燥した。
このようにして作製した顆粒状ムラシゲ・スクーグ培地
を用い、培養液の作製を行った。計量が容易で、しかも
正確に行い得た。また溶解は瞬時に完了した。
を用い、培養液の作製を行った。計量が容易で、しかも
正確に行い得た。また溶解は瞬時に完了した。
実施例4
実施例3により得られた顆粒状ムラシゲ・スクーグ培地
を用いて 100ml培地用タブレットを作製した。0
.47gの顆粒状培地を打錠機により厚さ1mm、
直径19mm程度のタブレット状にした。タブレット状
培地を用いた場合、計量を行う必要がなく簡便に培養液
の調製を行い得た。溶解に要した時間は3分と短時間で
あり、容易に培養液の作製を行い得た。
を用いて 100ml培地用タブレットを作製した。0
.47gの顆粒状培地を打錠機により厚さ1mm、
直径19mm程度のタブレット状にした。タブレット状
培地を用いた場合、計量を行う必要がなく簡便に培養液
の調製を行い得た。溶解に要した時間は3分と短時間で
あり、容易に培養液の作製を行い得た。
実施例5
バクテリア培養用培地であるしB粉末培地を顆粒状に成
形した。まず、LB粉末培地500gに95χ工チルア
ルコール含有蒸留水約80m1を培地に均等に行き渡る
よう噴霧した。これを実施例1と同様の方法で造粒機を
用いて顆粒状にし、減圧しつつ室温で乾燥した。
形した。まず、LB粉末培地500gに95χ工チルア
ルコール含有蒸留水約80m1を培地に均等に行き渡る
よう噴霧した。これを実施例1と同様の方法で造粒機を
用いて顆粒状にし、減圧しつつ室温で乾燥した。
このようにして作製した顆粒状LB培地を用いLB培養
液の作製を行った。計量が容易で、しかも正確に行い得
た。また溶解は瞬時に完了した。
液の作製を行った。計量が容易で、しかも正確に行い得
た。また溶解は瞬時に完了した。
実施例6
実施例5により得られた顆粒状LB培地を用いて100
m1培地用タブレツトを作製した。2.0gの顆粒状L
B培地を打錠機により厚さ5 mm、 直Bij9m
m程度のタブレット状にした。タブレット状培地を用い
た場合、計量を行う必要がなく簡便に培養液の調製を行
い得た。溶解に要した時間は5分と短時間であり、容易
に培養液の作製を行い得た。
m1培地用タブレツトを作製した。2.0gの顆粒状L
B培地を打錠機により厚さ5 mm、 直Bij9m
m程度のタブレット状にした。タブレット状培地を用い
た場合、計量を行う必要がなく簡便に培養液の調製を行
い得た。溶解に要した時間は5分と短時間であり、容易
に培養液の作製を行い得た。
この培養液をオートクレーブにより滅菌後、大腸菌を培
養したところ、粉末培地と同様、良好な増殖が認められ
た。
養したところ、粉末培地と同様、良好な増殖が認められ
た。
第1図は、本発明のタブレット状RDF培地及び粉末培
地を用いたハイブリドーマの増殖曲線であり、横軸は時
間(日)を示し、縦軸は細胞密度(x 10−5個/m
1)を示す。 また、○はITEs/H5^添加タブレ
ット状培地を、口はFC5添加タブレット状培地を、△
はITEs/H5A添加粉末培地を、及びXは、FC5
添加粉末培地をそれぞれ示す。
地を用いたハイブリドーマの増殖曲線であり、横軸は時
間(日)を示し、縦軸は細胞密度(x 10−5個/m
1)を示す。 また、○はITEs/H5^添加タブレ
ット状培地を、口はFC5添加タブレット状培地を、△
はITEs/H5A添加粉末培地を、及びXは、FC5
添加粉末培地をそれぞれ示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 (1)顆粒状あるいはタブレット状に成形した培地。 (2)粉末培地を顆粒状あるいはタブレット状にするこ
とを特徴とする培地の成形方法。(3)該顆粒状あるい
はタブレット状にするために、含水有機溶剤を用いるこ
とを特徴とする請求項2記載の培地の成形方法。 (4)該有機溶剤がメチルアルコール、エチルアルコー
ル、プロピルアルコールあるいはブチルアルコールであ
る請求項3記載の培地の成形方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP20618388A JPH0257175A (ja) | 1988-08-19 | 1988-08-19 | 成形培地及びその製造法 |
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JP20618388A JPH0257175A (ja) | 1988-08-19 | 1988-08-19 | 成形培地及びその製造法 |
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