JPH02500524A - １‐（２’‐デオキシ‐２’‐フルオロ‐β―Ｄ―アラビノ―フラノシル）‐５‐エチルウラシルを使用する肝炎ウイルス感染症の治療用組成物及び方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １１２’−デオキシ−２“−フルオロ−β−Ｄ−アラビノ−フラノシル）−５− エチルウラシルを使用する肝炎ウィルス５染症の治療甲組成　び　去 本明細書は、１９８７年９月３日出願の米国特許第０９２，４４６号の一部継続 出願であり、前記特許の内容は参照によって本明細書に包含されるものとする。 本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ（認可番号Ｃ Ａ−０８７４８，１８６０１及び１８８５６）、ＣＡ−４４０９４，Ｄｅｐａｒ ｔｍｅｎｔ　ｏｆ　）Ｉｅａｌｔｈａｎｄ　Ｈｕｍａｎ　５ｅｒｖｉｃｅｓ、Ｔ ｈｅ　Ｖｅｔｅｒａｎｓ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ並びにＮａｔｉｏｎａ ｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｌｌｅｒｇｙ　ａｎｄ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕ ｓＤ　ｉ　５ｅａｓｅｓ　（認可番号Ｎｏ−Ａｌ−６２５２１）の補助３一部受 けており、従って米国政府は本発明に所定の権利を有する。 えユニヱＪ 本明細書中、幾つかの刊行物３かっこ内に数字を付して引用しているが、これら の参考文献の全引用例は、本明細書の末尾の請求の範囲の直前に示しである。こ れらの刊行物の開示内容全部は、本発明が関与する技術の現状を充分に説明する ために、参照によって本明細書に包含するものとする。 本発明は、１−（２’−デオキシ−２′−フルオロ−β−Ｄ−アラビノ−フラノ シル）−５−エチルウラシル［ＦＥＡＩＩ］を使用して肝炎ライスル感染症と治 療するための組成物とその治療方法とに関する。ＦＥＡＵは、１ｏｐｅｚら名義 の米国特許第４，２１１，７７３号明細書に開示された、抗ヘルペスウィルス剤 としてすてに公知の化合物５−置換−１−（２°−デオキシ−２゛−置換−β− Ｄ−アラビノ−フラノシル）類の１種である。但し、ＦＥＡｔｌ自体は前記特許 明細書に記述されていない。 しかしながら、ＦＥＡｔｌ及びその抗ヘルペス活性は、ＦｏｘらがＨｅｒ　ｅｓ 　Ｖｉｒｕｓｅｓ　ａｎｄ　Ｖｉｒｕｓ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａ　（Ｒ，Ｋａｎ ｏ、＾Ｎａｋａｊｉｍａ、編集）　Ｅｘｃｅｒｐｔａ　Ｍｅｄｉｃａ、＾ｍｓｔ ｅｒｄａｍ、ｐｐ、５３−５６（１９８５）に開示している。この種の化合物の その他の例としては、１−（２°−デオキシ−２゛−フルオロ−β−Ｄ−アラビ ノフラノシル）−５−メチルウラシル［ＦＭ＾Ｕコ及び１−（２’−デオキシ− ２゛−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−ヨードシトシン［ＦＩ八 へコがある。 抗ヘルペスウィルス剤が肝炎の治療にも有効であることを期待したわけてはない か、これらの化合物の抗肝炎剤としての有効性について研究したところ、この研 究で、ＦＥＡＵが肝炎の治療に特に埋だ的であることが判った。ＦＭ＾Ｕは、肝 炎ウィルスの複ｇ＝阻害する上で有効若しくは恐らくより有効であるとして示さ れたが、潜在的に致死的な中毒性副作用３生じる。しかしながらＦＥＡＵは、深 刻な中毒性副作用き引き起こすこともなく、肝炎ウィルスの複製を効果的に阻害 することが判った。 肝炎の特に一般的な形態の１つはＢ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）である、ゾーン粒 子としても公知のＨＢＶは、リポタンパク質外被（Ｂ型肝炎表面抗原、　ＨＢｓ Ａｇ）と内部コア（Ｂ型肝炎コア抗原、　ＨＢｃＡＣ）とから成る４２ｎｍの複 合球型粒子である。前記コアは、環状で一部二重鎖の１個のＤＮＡ及び１個のＤ ＮＡポリメラーゼを含む、　ｉｎ　ｖｉｔｒｏでは、ＤＮＡポリメラーゼはゲノ ム中の大きな一重鎖領域内を占有し、ゲノム中に完全な二重鎖領域を生成する。 ゾーン粒子にかかわるＤＮＡポリメラーゼの特異的性質は定かではない、挿入剤 （ｉｎｔｅｒｅａｌａｔｉｒＨａｇｅｎｔｓ）、ピロリン酸塩類似体及びアラビ ノフラノシルヌクレオチドによるＨＢＶ　ＤＮＡポリメラーゼの選択的阻害は公 知であって、慢性Ｂ型肝炎に冒された個体においてＢ型肝炎ウィルスの複製を阻 害する能力を発揮する。 ）ＩＢＶと極めて関係が深い作用因子は、ウッドチャック（ｗｏｏｄｃｈｕｃｋ ｓ）に公知なウッドチャック肝炎ウィルス（ＷＨいである。どちらのウィルスも 同じ種類のウィルスに属し、Ｈｅｐａ−ＤＮＡウィルスと指称されることもある 。前記したように、ＨＢＶ及びＷＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼは同じ基本的特性を 有する。従って、ＷＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼ活性は、初期のｉｎ　ｖｉｔｒこ の種のＨｅｐａ−ＤＮＡウィルスでは、１（ＢＶ及びＷＩＩＶのみが慢性毛 磨動性肝炎及び肝細胞癌を引き起こすことが公知である。 一般的に、ウッドチャックにおけるＩＩＩＨｖ恐染はヒトにおけるＨＢ〜感染と ウィルス学的にも組織病理学的にも類似している。 Ｂ型肝炎ウィルスと肝細胞癌との関連は、ウッドチャック肝炎ウィルス（ＷＨＶ ）／ウッドチャックモデルから証明される。ウッドチャックの出生時にＷＨＶを 接種することにより肝細胞癌を実験的に誘発することか可能である。これらのデ ータは、Ｊ４〜“の癌誘発機能シ実験的に証明するだけでなく、ヒトにおけるＢ 型肝炎ウィルスに関する病原モデルとしてのウッドチャック肝炎ウィルスの使用 の有効性を確認する。 ル更二１１ 本発明は、被検対象において肝炎ウィルスの複製を阻害するのに有効な、構造・ を有する化合物１−（２“−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノ シル）−５−エチルウラシル並びにその薬物前駆体形態及び医薬的に許容可能な 塩を所定量と医薬的に許容可能なキャリヤとを含有する、被検対象において肝炎 ウィルス感染症を治療するための組成物に関する。 更に本発明は、被検対象において肝炎ウィルスの複製を阻害するのに有効な、精 造： を有する化合物並びにその薬物前駆体形態及び医薬的に許容可能な塩を所定量、 被検体に投与することから成る、被検体において肝炎ウィルス感染症を治療する 方法を提供する。 ′　の　−電　」羊１　フ゛戸　ｔ″′　日第１図は慢性的に怒染したウッドチ ャックにおけるＷＨＶＤＮＡポリメラーゼ活性を表す。 第２図はＦＭ＾Ｕ及びＦＥＡｔｌを用いて治療したウッドチャックにおける一Ｈ Ｖ複製の阻害の比較である。 第３図はＦＭ＾Ｕ及びＦＥＡＬＩを少量用いて治療したウッドチャックにおける ＷＨＶ複製の阻害の比較である。 第４図はＦＥＡＵを経口投与したウッドチャックにおけるＷｌｌＶ複製の阻害を 表す。 ｅ日の＝−；Ｂ 本発明は、被検対象において肝炎ウィルスの複製を阻害するのに有効な、構造： を有する化合Ｔｈ　１−（２°−デオキシ−２”−フルオロ−β−Ｄ−アラビノ フラノシル）−５−エチルウラシル［ＦＥＡＬｌ］並びにその薬物前駆体形態及 び医薬的に許容可能な塩を所定量と医薬的に許容可能なキャリヤとを含有する、 被検対象、特にヒトにおいて肝炎ウィルス感染症を治療するための組成物に間す る。 本明細書中「薬物前駆体（ｐｒｏｄｒｕ８）Ｊとは、被検対象に投与されると容 易にＦＥＡｔｌに変換し得る任意の化学物質を官味する０例な挙げると、ＦＥＡ Ｕの薬剤前駆体形態には、糖の５゜位にあるヒドロキシル基がモノ−若しくはジ −リン酸基に変換されるものが含よれる。本明細書中「医薬的に許容可能な塩」 とは、ＦＥＡＵのアルカリ若しくはアルカリ性金属塩のごときＦＥＡｕの代わり に使用し得るＦＥＡｔｌの任意の通常の塩な意味する。最後に、本明細書中「医 薬的に許容可能なキャリヤ」とは、無菌溶液、錠剤、被膜付き錠剤及びカプセル といった任意の標準的な医薬キャリヤを意味する。典型的にはこのようなキャリ ヤには、澱粉、ミルク、糖、ある種のクレー、ゼラチン、アテアリン酸若しくは その塩、ステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウム、タルク、 植物脂肪若しくＩ物油、ゴム、グリコール、又は他の公知の賦形剤が含まれる。 このようなキャリヤは香料及び着色料又は他の成分ご含有することもできる。が がるキャリヤを含有する組成物は公知の通常の方法で処方される。本発明の好ま しい実施態様においては、この組成物は経口投与に適したものて゛ある。 本発明の教示するところの肝炎ウィルスは、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、若しくは非、 へ非Ｂ型肝炎のウィルスであるが、特にＢ型肝炎ウィルスである。 更に不発明の教示するところによれば、該組成物に配合する化合物の蓋は広範囲 に変えることができる。正確な量を決定する方法は当業者には公知であって、特 に、治療されるべき被検対象、使用する特定の医薬キャリヤ及び投与経路、並び に組成物２投与する回数に依存する０通常、肝炎ウィルスの複製を阻害するのに 有効な組成物中の該化合物の量は１日に被検対象の体重１ｋｙ当たり約０．０１ ｍｇ〜約１００、ＯｍＦＩであるが、１日に被検対象の体重１１当たり約０．０ ４ｍ１＋以上、例えば１日に被検対象の体重１ｋｐ当たり約０．０４〜約５０． ＯｍＦＩの量が好ましい。 更に本発明は、被検対象において肝炎ウィルスの複製を阻害するのに有効な、構 造： を有する化合物並びにその薬物前駆体形態及び医薬的に許容可能な塩を所定量、 被検体に投与することから成る、被検対象において肝炎ウィルス感染症を治療す る方法を提供する。 この方法において、化合物の投与は、限定されることはないが、経口、静脈内、 筋肉内及び皮下投与を含む任意の公知の方法で実施することができるが、化合物 を経口投与することが好ましい。 本発明方法を実施する際には、ウィルスの複製を阻害するのに有効な化合物の量 は組成物中、通常は１日に被検対象の体重１ｋｙ当たり約０．０１〜約１００． ００ｍｇであるが、好ましくは１日に被検対象の体重１ｋｙ当たり約０．０４ｍ ｇ以上、例えば１日に被検対象の体重１１ｖ当たり約０．０４〜約５０．ＯｍＦ Ｉである。 最後に、本発明の方法を使用して治療することができる肝炎ウィルスは、Ａ型肝 炎、Ｂ型肝炎、若しくは非Ａ非Ｂ型肝炎のウィルスであるが、特にＢ型肝炎ウィ ルスである。 １に例Ｒｊ 本発明を理解する助けとなるように以下の実施例を行なったが、これらの実施例 は、請求の範囲に規定したような本発明をいかようにも限定したり、また限定す るように解釈されるべきでｉない。 １４１ｙＩ遣 旨ν１ｔｒｏ−スト ウィルスを二の；　」 ＤＮＡポリメラーゼ活性を含むＨＢＶ粒子を、ＨＢｓＡＣ陽性を示す免疫抑制患 者の血清から精製した。該ウィルスを慢性的に保菌するウッドチャック（Ｍａｒ ｍｏｔａ　ｒｔｌｏｎａｘ）　５個体の血清プールから−）ＩＶを得た。ある群 落に属していたウッドチャックをペンシルバニアから入手し、ＨａｎｔｚらがＪ 、Ｖｉｒｏｌ、ＭｅｔｈＯ，７：４５−５５（１９８３）に記述したような血清 学的テストを１年間に渡って実施した。ウィルスを、スクロース勾配及び等密度 ＣｓＣｆ勾配の遠心分離によって精製した。 他主上１ ｉｎ　ｖｉｔｒｏテストにおいては三リン酸塩を使用した。細胞代謝過程が予期 されるために三リン酸塩の使用を要望した。 未標識のヌクレオシド三リン酸塩をＳｉｇｍａ　ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎ ｙ、ＳＬ、Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ、米国から入手し、トリチウム化デオ キシリボヌクレオシド三リン酸塩、　［’Ｈ］ｃｌＴＴＰ＜３０　Ｃｉ／ｍｍｏ ｌ）、［コＨコｄＡＴＰ（２４Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、［コＨ］ｄＣＴＰ（１７Ｃｉ ／ｍｍｏｌ）及び［コＨ］ｄＣＴＰ（９，５Ｃｉ／ｍｌｌ１ｏｌ）をΔｍｅｒｓ ｈａ＋ａ（＾ｌ１ｌｅｒｓｈａｌ　、仏国）から入手した、八ＣＶをＢｕｒｒｏ ｕｇｈｓ　Ｗｅｌｃｏｍｅ、Ｃｈａｐｅｌ　Ｈｉｌｌ、Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｉ ｉｎｓから入手した。　ＢＶｄＵの合成はｄｅ　Ｃ１ｅｒｑらがＰｒｏｅ、Ｎａ ｔｌ　、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ　、υ、Ｓ、＾、７６：２９４７−２９５Ｈ１９７９ ）に記述しており、Ｆ１＾Ｃの合成はＬｏｐｅｚら（米国特許第４，２１１，７ ７３号明細書）が託９ｌ−９４（１９８４）に記述している。３種類のヌクレオ シド類似体を全てそれらの対応する５′−三リン酸塩に、＾ｌ　ｌ　ａｕ’ｃｌ ｅｅｎらがＰｒｏｃ、Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ、ｓｃｉ、Ｌ１．ｓ、＾、７８：２６ ９８−２７０２（１９８１）に記述した方法によって変換し、これらの三リン酸 塩の純度を、Ｂｒｕｋｅｒ　ＨＸ−２７０分光計を用いた’ＨＮＭＲと＾１ｔｅ ｘ　Ｍｏｄｅｌ　３３２勾配液体クロマトグラフを用いた高圧液体クロマトグラ フィーとによって測定した。 ＤＮＡポリメラーゼ ＤＮＡポリメラーゼをＫａｐｌａｎ　らがＪＪｉｒｏｌ　、１２：９９５（１９ ７３）に記述した方法を若干変更した方法で分析した。分析は、５０ｍＭ　Ｔｒ ｉｓ−ＨＣｆ　ｐＨ７，５，４０ｍＭ　ＭｙＣＮ２．６０ｍＭ　ＮＨ，Ｃ１、ｄ ＡＴＰ、ｄＣＴＰ及びｄＧＴＰをそれぞれ１００１４Ｍ、０．２〜０．７．Ｍ　 ［コＨ］ｄＴＴＰ（３０Ｃｉ／ｍｍｏ　ｌ　）、１０ｍＭ　２−メルカプトエタ ノール、０．５％Ｎｏｎ１ｄｅｔＰ−４０、並びに酵素を含む反応混合物５０ｕ １中で実施した。ウィルス粒子と２−メルカプトエタノール及びＮｏｎ１ｄｅｔ 　Ｐ−４０とを一緒に添加して反応を開始し、３７℃で１時間インキュベートし た。酸不溶性の放射性物質をガラスファイバーフィルタ（ＣＦ／ＣＷｈａｔｍａ ｎ）上に回収し、このフィルタを、１０＋ｏＭピロリン酸ナトリウムを含む冷た い５％トリクロロ酢酸で５回洗浄し、次いで９５％エタノールで洗浄した。乾燥 後のフィルタの放射能を液体シンチレーションカウンターで測定した。 ３２ＰＤＮＡのアガロースゲル−泳 内因性ＤＮＡポリメラーゼ反応の［”ｐ］ＤＮＡ産物を、ＳｕｍｍｅｒｓらがＰ ｒｏｃ、Ｎａｔｌ、＾ｅａｄ、ｓｅｉ、Ｕ、ｓ、＾、７２：４５９７−４６０１ （１９７５）に記述したようなアガロースゲル電気泳動によって分析した。 標識ヌクレオチドとして１ｕＭ［３２Ｐ］ｄＣＴＰ（５００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を 含む標準ＤＮＡポリメラーゼ混合物１５ｕ１中で反応させた。 ３７℃で２時間インキュベートした後、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ、１０ｍＭＥＤＴ＾ 、０．１Ｂ／ｍｆのプロテイナーゼＫ、％（重量／容積）ドデシルｖＩＬ酸ナト リウムを２０ｕ１添加して反応分停止し、更に３７℃で６０分間インキュベート した。５％（重量／容積）スクロース、１％ブロモフェノールブルーを５ν！加 え、混合物全体を６５℃で６０分間加熱し、すぐに４℃に冷却し、次いで１％ア ガロースの横型スラブゲル電気泳動によって分析した。 電気泳動後ゲルを乾燥し、オートラジオグラフィーによって現像した。 １１ＢＶ　賀）ＩＶ　ＤＮ＾ボ１メー−ゼ　・ＨＢＶ及び−ＢＶ粒子調製物中の ＤＮＡポリメラーゼの特異性及び効率は、その内因性反応の際に合成される標識 ＤＮへの活性分析によって制御された。　ＤＮＡポリメラーゼは、標識ヌクレオ チドとして［２す３ｃｌＣＴＰを使用し、方法及び材料で記載したようにして活 性分析した６次いで反応生成物をアガロースゲル電気泳動及びオートラジオグラ フィーによって分析した。この結果から、１５．３０．１２０．１８０分間の反 応の後にＨＢＶ及びＷＨＶ　ＤＮＡ合成が進行したことが判った。　ＨＢＶでは 、長さ３．３ｋｂの兜全ＤＮＡとウィルスゲノムの一重鎖領域の不完全充填に対 応するより小さい（１，８〜２．８ｋｂ）形状のＤＮＡとが得られた。　ＷＨＶ 　ＤＮＡポリメラーゼの反応生成物はより不均質であって、わずかに速く移動し 、１８０分間の反応後に長さ３．１ｋｂの、より長い形状の−ＨＶ　ＤＮＡが得 られた。 ＨＦ３Ｖ　７ＪＩＡＨＶ　ＤＮＡ；ｔ？ｌ　メーーゼノＡＣＶＴＰ　ＦＩＡＣＴ Ｐ　びＢＶｄＵＴＰに江ｍ亙】Ｉ ＡＣＶＴＰ、ＦＩＡＣＴＰ及びＢＶｄＵＴＰ４：対する双方の酵素の相対感度を 過剰のヌクレオチドを使用して比較した。それぞれの阻害剤に対して、対応する 放射性三リン酸塩の濃度をＫｍ値の２〜３倍に維持し、残りのヌクレオチドは大 過剰にした（５０ｐＭ）　、　＋　（７）結果、ＦＩＡＣＴＰハＨＢＶ　ＤＮＡ ホ！Ｊ　メラ−セ（７）　ＲＬ有効な阻害剤であり、ａｒａ−Ｃ丁Ｐは最も有効 ではなく　、ＢＶｄｔｌＴＰ及びａｒｍ−ＴＴＰは同様の阻害を示すことが判っ た。 ＷＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼを使用しても同様の結果が見られた。ＨＢＶ及びＷ ＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼを５０％阻害するのに必要とされる三リン酸塩の濃度 を測定すると、　ＦＩＡＣＴＰのＩＤ、。は非常に低くて（０，５￥＋Ｍ）、Ｂ ＶｄＵＴＰ及びＡＣＶＴＰに関して得られた値と比較して（れぞれ５及び１８倍 以上であることが判った。 １１段ｌユ３ 種々の化合物に対する作用方式が異なることは公知であるが、ＨＢＶ及びＷ）Ｉ Ｖ　ＤＮＡポリメラーゼの触媒作用によるウィルスＤＮＡ合成と阻害すルＡＣＶ 丁Ｐ、ＦＩＡＣＴＰＡびＢＶｄｌｌＴｌ￥）　１ｍ　’ｔＦ　特性を、基質濃度 を増加させたときの阻害の程度を測定することにより；周査した。ＡＣＶＴＰを 用いｆＳ活性分析では、［’）ｌ）ｄｃＴＰが律速な基質であり、他の３種のヌ クレオチドは過剰に存在した。ＦＩＡＣＴＰ阻害に対しては［３１コｄＣＴＰヲ 、ＢＶｄＬＩＴＰｆｆｌ害に対しては［’Ｈ］ｃｌＴＴＰを同じ条件で使用した 。Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋ７　Ｄ　ットによルト、　ＡＣＶＴＰ、　Ｆ ＩＡＣＴＰ及びＢＶｄＵＴＰニよるＨＢＶ　ＤＮＡポリメラーゼ反応の阻害はそ れぞれｄｌｌ：ＴＰ＝　ｄＣＴＰ及びｄＴＴＰと拮抗することが判った。　Ｗ） ＩＶ　ＤＮＡポリメラーゼに対しても同様の結果が得られた。両ウィルスのＤＮ Ａボリメラ−−ｔ’　ニＺ　Ｌ　Ｔ、　ｄＧＴＰ、ｄｃＴＰ＆びｄＴＴＰノＫｍ 値とＡＣＶＴＦ’及びＢＶｄＬＩＴＰノＫｉ値とを測定すると、ＷＨＶ　ＤＮＡ ホ！Ｊ　、ｄ　ラーゼはＨＢＶ　ＤＮＡポリメラーゼよりもΔＣＶＴＰ、　ＦＩ ＡＣＴＰ及びＢＶｃｌＵＴＰに対する親和性が小さかった。しかしながら、Ｋｍ ／Ｋ　ｉ比は両酵素に関して同等であった。 国！−肛且二９１恒］１１長】二虹も旦軛■匡−工以（■ｊ己と江ＶＴＰ瞭級Ｌ ３種の類似体のウィルスＤＮＡ合成に対する効果を測定するために、ＨＢ〜’　 ＤＮＡポリメラーゼを用いて経時的実験を実施した。標識基質としては［３Ｈ］ ｄＡＴＰを使用した。４種類全てのヌクレオシド三リン酸塩基質を用いると、反 応は６０分までＭ線的に進行した。ｄＴＴＰ、　ｄＧＴＰ若しくはｄＧＴＰを反 応混合物から除外すると、有意なりＮＡ合成は見られなかった。ｄＴＴＰをＢ　 Ｖ　ｄ　［Ｉ　Ｔ　Ｐで置き換えると、３時間の反応後ウィルスＤＮ＾がコント ロールの４６％まで合成された。この値は、４時間の反応後には最適活性の６７ ％までに増加した。しかしながら、同様の実験において、ｄＴＴＰをａｒａ−Ｔ ＴＰに置き換えても有意なりＮＡ合成は見られなかった。 このような実験をｄＣＴＰに代わってＦＩＡＣＴＰを使用して実施した場合には 、［３Ｈ］ｄＡＭＰが少量（３時間反応してコントロールの約１０％）取り込ま れたが、ｄｃＴＰに代えてａｒａ−ＣＴＰを使用しても宥！な取り込みは見られ なかった。ｄＧＴＰを八ＣＶＴＰで置き換えても、ＨＢＶ及び１ＩＩＨＶ　ＤＮ Ａポリメラーゼの代替基質に対するこれらの異なる類似体の効能によって見られ るように重合過程を増進しなかった。　ＢＶｃｌＵＴＰは両酵素に対する最も有 効な代替基質であった８代替基質としてＢＶｄｌｌＴＰを用いて合成したＤＮＡ をアガロースゲル電気泳動によって分析すると、ＨＢＶ若しくは［ＩＶ　ＤＮＡ の一重鎖領域の不完全充填のみがＢＶｄＵＴＰを用いて得られた。 ）ＩＢＶ　ＤＮＡ合成に対するＡＣＶＴＰの効果についても経時的実験によって 調査した。標識基質は［’Ｈ］ｄＴＴＰであった。ｄＧＴＰを用いずにそれに代 わってＡＣＶＴＰ　５１１ｍを用いて反応を開始した。これらの条件では［’Ｈ ］ｄＴＭＰの取り込みは測定されなかった。１２０分間の反応後にｄＣＴＰ　１ １００ｕを加えた。ｄｆｌ：ＴＰだけを加えなかった分析では、ｄにＴＰを添加 すると［ｌＮＮＡ合成期待通りに増加した。しかしながら、まず、ｃｉＧＴＰに 代わってＡＣＶＴＰ　５１Ｍを使用して分析した場合は、ｄＧＴＰ　１００ｕ１ ００ｕ添加後にＤＮＡ合成は見られなかった。これと比較して同じ割合のＡＣＶ ＴＰ（５ｍＭ）及びｄにＴＰ（１０ｈＭ）を使用して反応を開始した場合、有意 なりＮＡ合成が見られた。　ａｒａ−＾ＴＰ及ａｒａ−ＣＴＰを使用して同様の 実験を実施すると、いずれも場合も、類似体の存在下、１２０分間の反応後に通 常の基質（ｄＡＴＰ及びｄＣＴＰ）を添加するとＨＢＶ　ＤＮＡ合成を増加した 。従って、天然の三リン酸塩基質ｄＣＴＰに代えてＡＣＶＴＰ　３添加してもＤ 　Ｎ　Ａ合成を増進しないが、更なる伸長をブロックするようであった。 ＨＥ！３＝び一１！Ｖ　ＤＮへポリメラーゼに・するヌクレオシド　似体へＩＬ Ｌ匁】 抗ウイルスイ舌性を示すヌクレオシド類似体は、ウィルスＤＮＡ合成を妨害する ためには細胞内でそれらの三リン酸塩誘導体に変換されねばならない９八ＣＶＴ Ｐ、ＢＶｄＵＴＰ及びＦＩＡＣＴＰによる単純ヘルペスウィルスのＤＮＡポリメ ラーゼの優先的な阻害が報告されており、ヌクレオシド類似体へＣＶ、　ＢＶｃ ｌＵＴＰ及びＦ１＾Ｃの選択的抗つイスル活性を一部説明できる。このｉｎ　ｖ ｉｔｒｏ証明から、３種類全ての化合物がＨＢＶ及び−ＨＶのＤＮＡポリメラー ゼを阻害し、しかもこの阻害が対応する天然の三リン酸塩基質と拮抗することが 判る。八ＣＶＴＰ、ＢＶｃｌｌｌＴＰ、　ＦＩＡＣＴＰ並びに他の２種のヌクレ オチド類似体ａｒａ−ＣＴＰ及びａｒａ−ＴＴＰのそれぞれの阻害活性を比較し たところ、ＨＢＶ及び−ＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼに対する阻害活性は、ＦＩＡ ＣＴＰ、　ＢＶｄＵＴＰ、ａｒａ−ＴＴＰ、ＡＣＶＴＰ、　ａｒａ−ＣＴＰの順 で小さくなった。 ｉｎ　ｖｉν０−スト ウッド　ツクの　′　さに・　ＦＭ＾Ｕのｉｎνｉｖ。 ｉス上 化合物ＦＭＡｕを水に溶解した。この化合物を投与するための溶剤としては水若 しくは水をベースとする溶液が好ましい、　ＦＭＡｕのン客解度は２４℃で６６ ｍｇ１’Ｊ及び２８℃で８１ｍｐ／Ｊであり、ＦＭＡｕの分子量は２６０である 。 厖 慢性滑動性肝炎ウィルス（Ｈａｎｔｚ、ｓｕ且已）をもつ全てのウッドチャック にＦＭ八へを腹腔的注射によって１日２回、以下に示す量で投与した Ｌｋ支１９１　１王１ ２　１日当たり２　ｍ　ｇ　／’　ｋ　ｇ　（７）量で７口開２　１日当たり４ 　＋ｎ　ｇ　ｌ′ｋ　ｇの量で５日間４個体全ての試験動物においてウッドチャ ック肝炎ウィルスの複製が非著にしかもほとんど即座に阻害された。投与してか ら１週間後に、ウッドチャック肝炎ウィルスＤＮＡポリメラーゼはバックグラウ ンドレベルに低下した。　ＦＭＡｕはウッドチャック肝炎ウィルスの複製と阻害 し、この阻害は治療中止後２０〜５０日関持続した。 アシクロビル（ａｃｙｃｌｏ髪・ｉｒ）若しくはａｒａ−八ＭＰを同様の投与量 で使用した実験を実施してもウィルス複製レベルは低下した。しかしながら、こ れらのレベルは、治療中止後にはすぐに治療前のレベルに戻った。 肝炎ウィルスをもつウッドチャックの！Ｉ続テストど更にピリミジンヌクレオシ ド化合物：　ＦｌＡＣ＜２“−フルオロ−２゛−デオキシーアラヒ′ノシル−５ −ヨードシトシン）及びＦＩＡＩ！（２’−フルオロ−２゛−チオキシ−アラビ ノシル−５−ヨードウラシル）を用いて実施した。ＦＭＡｕを用いたときと同様 に、好ましいキャリヤは水である。これらの化合物を以下のように水に溶解ＦＩ ＡＣ２２℃で７．２ｍｇ／ｍｌ　３７１ＦＩＡＵ　２８℃て’４．Ｏｍｙ／ｍＮ 　３７２必要であれば、水性溶剤に酸若しくは塩基を加えることによって化合物 ＦＭ＾Ｌ１．　ＦＩＡＣ及びＦＩＡＩＩの溶解度を大きくすることができる。こ の方法でＦＩＡＣの溶解度は、幾分希薄な塩酸が効果を示すが、塩酸約１モル当 量を加えることで約２５０ｍ９７ｍ（’に増大し得る。 ＦＩＡｕについては、ＦＩＡｕのナトリウム塩を生成する水酸化ナトリウム１当 量と加えることで溶解度を何倍にもすることができる。 １里■ユ ＦＥＡＵのｉｎ　ｖｉｖｏ−スト この実施例では、２°−フルオロ−置換アラビノシルピリミジンヌクレオシド、 ＦＭｐ＋Ｕ及びＦＥＡｔｌについての生化学的及び抗ウイルス的な比較研究を説 明する。生化学的研究によると、ＦＥＡＵはＦＭＡｕよりも毒性が低い選択的抗 ヘルペスウィルス剤である。アフリカミドリザル（＾ｆｒｉｃａｎ　ｇｒｅｅｎ 　ｍｏｎｋｅｙｓ＞におけるサル水痘ウィルス感染症に対してＦＥＡＵを評価す ると、投与量３０．１０若しくは３ｍｇ７ｋｇ１日×１０を静日内１０すると、 ＦＭ＾Ｕ同様に見掛けの毒性を示すこともなく発疹を予防しウィルス血症を低下 するのに非常に有効であった。上：己ミドリザルにＦＥ八へ］０．３及び１　ｍ ｓ／ｋｇ／日ｘ　１０を経口投与しても同様の効果があった。 ＦＥＡＵは、これまでのところｈｅｐａ−ＤＮＡウィルスに対してテストしたヌ クレオシド類似体なかで最も有望と見られ、本発明ではＢ型肝炎ウィルスに対し て臨床上の有効性を実証する。 １−（２’〜デオキシ−２′〜フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）部分を 含む数種の５−置換ビリミジンヌクレオシドの合成及び抗ヘルペスウイルス活性 についてのオリジナルレポート（１）以来、構造活性研究では、”ｕｐ”（アラ ビノ）配列内の２°−フルオロ置換は、２’−０Ｈ５水素若しくは他の２°−ハ ロゲンよりも強力な抗ウィルス活性を与えるとされている（２）、更に研究され たところによると（３，４）、２゛−フルオロヌクレオシドは、ヌクレオシドホ スホリラーゼによる異化的切断（陰性の２′−置換によって付与されるＮ−グリ コジル結合の代謝安定性を増大することが推定される０合成された数種の２°− フルオロ−５−置換−アラビノシルピリミジンヌクレオシド（１）の中で、Ｆ１ 八ＣＥＩ−（２°−デオキシ−２゛−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル） −５−ヨードシトシン］は、免疫抑制された癌（ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉ ｓｅｄ　ｃａｎｃｅｒ）患者におけるフェーズ１の１原試験のヘルペスウィルス 忌染症に対して（５）、及びフェーズ２の臨床試験の帯状水痘ウィルスに対して （６）臨床上有効性を示した。対応するチミン類似体１−（２“−デオキシ−２ °−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−メチルウラシル［ＦＭ八へ ］は、単純ヘルペスウィルス（ＨＳＶ）　１型及び２型に忌染したマウスにおい て、有効投与量レベルで毒性もなく、より強力であることが判った。更にＦＭＡ ＩＩは抗白血病剤アラビノフラノシルシトシン［＾ｒａ−Ｃ］に耐性を示すＰ− ８１５及びＬ−１２１０白血病細胞系に対してｉｎ　ｖｉｔｒｏ及びｉｎ　ｖｉ ｖｏ活性があることが判った。癌が進行した患者のＦＭＡＵのフェーズ１試験は 、薬剤誘発の中枢神経系（ＣＮＳ）ｌｌｊｌ能不全が投与量で調節される毒性で あることが判った（７）。 出発化合物としてＦＭＡＵを用いて、１−（２’−デオキシ−２゛−フルオロ− β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチルウラシル［ＦＥ＾Ｕ］を含む他の５ −アルキル置換２゛−フルオロ−ａｒａ−ウラシルの合成３行なツタ＜８．９） 。表１に示すように、ＦＥＡＩＩハ、ＨＳＶ−１及びＨＳＶ−２に怒染した培養 ＶｅｒｏＩｉｆＢＵに対してＦＭＡＵよりもおおよそ１対数オーダーだけ弱いが 、ＦＥＡｔｌは宿主細胞毒性もはるかに弱いものを示し、治療指数は極めて好ま しい結果となった（９．１０＞。 表止 Ｓし ｖｅｒｏ細胞のブザツク減少分析におけるＦＭＡＵ及びＦＥＡＵの抗１１ｓＶ活 性の比較障相関係数０．８６゜ ＃細胞を速やかに分割して測定した細胞毒性効果。 ）１ｓＶ−２を大脳内に接種したマウスにおけるＦＭＡＵ、　ＦＥＡＩＩ及び５ −エチル−２°−デオキシウリジン（ＥＤｌｊ）の抗ウィルス活性の比較を表■ に示す（１０）、　ＦＥＡＬＩは、投与量５０＋ｎ２／ｋｆＩ／日を４日間投与 すると活性を示し、投与量１００〜２００Ｂ／ｋｇ／日ではこれらのマウスの死 亡率を低下するのに極めて有効であった。この投与量レベルでは毒性は見られな かった。正常（未感染）のマウスにおいて、ＦＥＡＵは、投与量８００ｍｇ／ｋ ｆＩ／日を１日２回４日間与えても無毒性であった。ＦＥＡＵと比べて２“−フ ルオロ置換がないだけの構造的相違をもつＥＤＵが、このＨＳＶ−２マウス脳炎 モデルにおいてＦＥＡｔｌよりも有効性が極めて低いことは注目するに値する。 この知見は、これらのアラビノフラノシル−ビリミジンヌクレオシドが示す抗Ｈ ３ｖ活性のためには２°−フルオロ置換が重要であると立証した先行論文（１） と一致する。 ■ ＨＳＶ−２（［：株）を大脳内に接種したマウスにおけるＦＥＡＵ、　ＦＭＡＵ 及びＥＤＬ’の抗ウイルス効果 ＮＥＣコントロール（ウィルスなし）　−１００−３９１３１６ＰＢＳ（ウィル スコレトロール）　６．７　７　−２２　−１４’　８’　１７゜車庫２１日め に算出、＃かつこ内にある数字は１匹の試験動物が死亡したことを示す、且１日 めとの比較であって、弓＝生存動物１匹のみの体重に基づくことを示す。 ＦＭＡＵが、ＨＳ〜１−２に起因するマウス脳炎の治療に最も強力な選択的抗ウ ィルス化合物であり、従って新生児及び成人のＨ５Ｖ脳炎の治療のために、低投 与量でヒトに試行する可能性のある薬剤として考慮する価値があることは前から 言われていた。ＦＥＡＩＩについて表Ｉ及び■に示した予備データは、この化合 物もまた同様に考慮する価値があることを示唆している００）。これらの先の知 見及び前提となる生化学報告書（１２）に基づいて、アフリカミトリサルにおけ るサル水痘ウィルスとウッドチャック動物モデルにおける肝炎ウィルスとに対す る相対活性を含む、ＦＭＡＵ及びＦＥＡＩｌについでの生化学的及び抗ウイルス 的な比較研究を更に行なった。 よ玉ｊυひ上Ｊ冒ｉＥ 哺乳動物細胞の増殖に及はすＦＥＡＬＩ及びＦにＡしの相対的影響についての生 化学的研究（１３）を表ｍに示す。表１に示した匡」ユニ研究と比較して、ヒト 前骨髄性白血病細胞系（ＨＬ−６０）及び（アフリカミド１ノザル由未の）Ｖｅ ｒｏ細胞に対して、ＦＥ　Ａ　ＵはＦＭＡＵよりも増殖阻害がはるかに小さいこ とに留意されたい。同様に、噌歯類細胞系（Ｐ−８１５，Ｌ−１２１０及びラッ ト骨髄細胞）に対してＦＥｔ、しはＦＭＡＵよりも増殖阻害が実質的に小さい（ 表■）。 と屁じ及びＦＭＡＵによる天然前駆体のＬ−１２１０細胞Ｄ　Ｎ　八／＼の取り 込みの阻害に対する細胞動力学的定数（Ｋｉ）を測定した。 基質としてトリチウム標識天然前駆体（チミジン、２°−デオキシシチジン及び ２゛−デオキシシチジン）を使用すると、二γとら、″）哺乳動物細胞において ＦＥＡＵはＦＭＡＵよりも天然ヌクト！ンド同化作用の極めて弱い阻害剤て゛あ ることが明らかて゛あっ７．：（コ２　、１３）。 噴乳動”ＡＥ胞のＤＮＡに２−１ｔ（で標識したＦＥＡＵ及びＦＭＡｕを取り込 む研究では、非常に重要な相違が判ったく表Ｔｈ’　）。Ｌ−１２１０若しくは 〜’ｅｒｏ細胞系のＤＮＡへはＦＥＡＵ放射能が検出て゛きる（えど取り込まれ なかったか、実質的な量のＦＭ八へ放射能が両方の細胞系のＤＮＡに取り込まれ た。ｏｓｖ−ｉ５染のＶｅｒｏ細胞を１１ｃ標ｍ　ＦＥＡＵ及びＦＭＡＵに暴露 すると、両方のヌクレオシドがこれらのウィルス感染細胞のＤＮＡに取り込まれ た。この条件下で、ＦＭＡＵのＨＳＶ−１恐染Ｖｅｒｏ細胞への取り込みはＦＥ ＡＵに対して観測されたものの７倍であった。この取り込みにおける相違は、ウ ィルスによってコードされるＤＮＡポリメラーゼに対するＦＭＡＵの親和性がよ り大きく、抗ヘルペスウィルスのｉｎ　ｖｉＬｒｏ効果の差の大きさに匹敵し得 ることに起因するものであろう。 轟Ｉ 哺乳動杓紀胞におけるＦＥＡＬ’及びＦＭＡＵの効果の比較ＨＬ−６０細胞　２ ０６０　１５．４　１３３〜’Ｅｌ’ｌＯＥ胞　＞２００　２．８　＞７ＩＰ− ８１５ｋＡ胞　７００　１４．０　５０Ｌ−コ２コＣ細胞　６３０　２８．０　 ２２ラット骨ＨＭＡ胞　３，７００　８．９　４１５［２−五″Ｃ］ＦＥＡＵス はＵ２−”ＣＩＦＭ＾υの哺乳動物細胞ＤＮＡへの取込み １０ｕ−における取込み（ｐモル／１０６細胞／時間）旦忽五　ＦＥＡｔｌ　Ｆ Ｍ＾Ｕ Ｌ−１２１０検出不可熊本　０．６９ ＶＥＲＯ検出不可能基１．３ ＨＳＶ−１感染ＶＥＲＯ細胞　０．４８　３．４本１００ｔ＋’Ｈにおいては検 出不可能一般的に、２′−フルオロ−アラビノシルピリミジンヌクレオシドの選 択的抗ヘルペス活性は、ＨＳＶ−特異的チミジンキナーゼ（ＴＫ）の優れた基質 として認識される能力と大いに関係するが、宿主下Ｋには関係しないことが容認 されている（ｌの細胞質及びミトコンドリアのＴＫに対してもＨＳＶ−１及びｌ ｌ５Ｖある。それに反して、　ＦＥＡＵは宿主ＨＬ−６０由釆のＴＫに対して極 めて劣悪な基質である（１３）。これらのデータは、ＦＥＡＵが〜”ｅｒｏ細胞 ＴＫに対して（チミジンと比較して）非常に低い親和性を示すが、Ｈ２Ｎ（−１ 及びＨＳＶ−２によってコードされるＴＫに対してば高い親和性を示すことを記 したＭａｎｓｕｒｉ　らによる最近の報告と一致する。更にＭａｎｓｕｒｉら、 のデータは、未感染ＶｅｒｏａＵにおいてＦＥＡｔｌは、チミジンの存在下では 非常に遅い速度でリン酸化することを示している。 これらの生化学的研究（１０，１２〜１６）は、ＦＥＡＵがその抗ウィルス活性 においてより選択的であって、宿主毒性がより小さいことを示唆している。マウ スを使用したｉｎνｉｖｏ実験から、ＦＭＡＵ及びＦＥＡＵは共に比較的無毒性 であることが判る。しかしながら、ＦＭＡＵはイヌにおいては高い神経毒性（致 。 死Ｊｉ　２．５ａ＋ｙ／ｋｉｔ／日、静脈内投与ｘ　５）、イヌにＦＥＡＬＩ　 ５０釦ＦＩ／ｋｇ／日×１０２投与したＦＥＡＬＩの予備研究は、中程度の毒性 く致死量１００ｍＦＩ／ｋＦ／／日×１０）を示す。前記したように、陣＾じは 、癌が進行した患者においては静脈内投与０．８ｍ１Ｊ／ｋｆ／日×５では投与 量が制限されるＣＮＳ毒性を示した。 ）ＩＬ−６０未Ｓ月泣 細胞５カ′　丁Ｋ　Ｏ〜２．１　８１．７ミトコンドリアＴＫ　Ｎ／＾　２１９ ．ＯＨ５〜’−１（ＫＯＳ株）ＴＫ　８２．７　４２．０）ｌＳ〜’−２（３３ ３株）　２０３．２　１４６．６算４００１．ＩＭにおけるチミジン ル水痘ウィルスに対するミドリ　ルにおける　較研１Ｄｅｌｔａ　Ｒｅｇｉｏｎ ａｌ　Ｐｒｉｍａｔｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒで行われた研究では、 サル水痘ウィルス（ＳＶＶ）に感染したアフリカミドリザルにおけるＦＥＡＵ及 びＦＭＡＵの活性を比較した０表■に示すように、治療していない３匹のコント ールは顕著なウィルス血症を示して１１日めまでに死亡した。　ＦＥＡＵを３種 類の投与量を用いて治亨した（静脈内投与）ミドリザルは、３０ｍｇ／ｋｆＩ／ 日ｘ　１０の高い投与量でも見掛けの毒性を示すことなく、治療したミドリザル 全ての血液テスト及び血清化学作用は正常であり、（コントロールと比較して） ウィルス血症は低投与量３ｍｇ／ｋｙ／日でも最小であった。コンドロールミト リザルには激しい発疹が見られたが、ＦＥＡＵで治療したミドリザルにはこれら の薬物レベルで発疹はなかった。更なる研究では、より少ない投与量１ｍｇ／ｋ ｆＩ／日でも発疹を予防したが、３匹中２匹のミドリザルでウィルス血症が縮小 しないことが判った。これらのデータは、ＦＥＡＵのこの系の最少有効投与量が 約１　ｍｙ／ｋｆＩ／日であるとことを示唆している。 ＦＭＡＵを用いた同一の研究では、ＦＭＡＵが、最少有効投与量的０．０４ｍ１ ｌ／ｋｇ／日　ｘ　１０でもＳＶＶに対して約４０倍強力であることが判った。 ＦＥＡＩＩは、経口投与してもサル水痘ウィルスの治療に極めて有効であった。 投与量１０．３若しくはｌ　ｍｙ／ｋｇ１日×１０で日日１０すると、発疹を予 防しく表■）ウィルス血症を大幅に縮小する。１１を投与しても発疹はほとんど 完全に予防される（９日めに２つの小胞が現れたがすぐに消失した）。 投与量１０ｍｆ／にρ／日ｘ　１０と経口投与しても毒性は見られなかった。 従って、　ＦＥＡｔｌは、静脈内投与及び経口投与いずれによってもＳｖｖ感染 の治療に非常に有効で選択的な抗ウイルス性があることが判る。 五Ｍ アフリカミドリザルのサル水痘ウィルス感染症の治療におけるＦＥＡｕの評価： ウィルス血症に対する効果 治療百本　ミドリザルウイルス血「草本　１種７′の平；ＰＦＵ番号　３　５　 ７　９　１１（日） コントロール−に０２９　１　１４０　＞４００　死亡Ｈ２０［；０３０　３　 １６３　＞４００　＞４００　死亡ＧＯ３１１９９＞４００　死亡 ＦＥＡＩＩ−Ｃ；０２３　１　０　０　０　０３０ｍｇ／に９／日　ＧＯ２４２ ００００ＦＥＡＵ−に０２５　１　１４　５　０　０１０ｍｇ／ｋｖ／日　ＩＩ ；０２６　０　１　１　０　０ＦＥＡＵ　（：０２７　１　８　０　０　０３ｍ ｙ／ｋｇ／日　ＧＯ２８０１１００本つィルス接種の４８時間後から１日２回の 静脈内注射による投与を１０日間継続して治療した。 ■接種後の表示した日数の後にヘパリン化血液３−から採取したリンパ球の培養 によってウィルス血症を洞窟した。 平均ＰＦｕはリンパ球懸濁液をそれぞれ接種したＶＥＲＯ細胞の共通培養の２つ のフラスコ中に存在するプラークの平均数である。 五Ｍ アフリカミドリザルのサル水痘ウィルス感染症の治療におけるＦＥＡｕ経口投与 の評価。 発疹に対する効果＃ 治１１　ミドリザル　゛の　疹の　声 番号　６　７　８９　１０　１１　１２　１４（日）コント−ルーＦ６４４　± 　３＋　４＋４＋死亡ＰＢＳ　Ｃ６６８−−土　２＋　１＋　±　士　−６６０ ４−±　３＋４＋　４＋２＋＋＋ＦＥΔＩＪ−Ｇ２４９−−−−−−−−１０＋ ｎｙ／ｋｙ／日　Ｇ２６フーーーーーーーーＧ２６４　−　−−　−　−　−　 −　−　−Ｇ２６Ｓ　−−−−−−−−− 茸ウイルス接種の４Ｓ［４間後から胃管を通して１日に２回、１０日開継続投与 することによって治療した。 ＃発疹の程度を＝から４−の尺度で表しており、士は数個の小胞が見られる発疹 を示し、４＋は体表面全体に広く分布した発疹が見られることを示す。 （ｉ）帯状水痘ウィルス（ＶＺＶ、ヒトヘルペスウィルス利の１種）に対するＦ ＩＡＣ及びＦＭ＾Ｕのｉｎ　ｖｉｔｒｏ活性（１５，１７）　；　（ｂ）免疫抑 制患者のフェーズ２臨店試験における帯状水痘ウィルスの治療のためのＦＩＡＣ の公称効能（６）；並びに（ｃ）本明細書及び他に記述されたサル水痘ウィルス に対するＦＭＡＬＩ及びＦＥＡＵのｉｎ　ｖｉｖｏ活性の観点から、ＦＥＡｕが 更に、ヒトにおけるＶＺｖに対して有意な選択的活性を示すであろうことが期待 される。 Ｗユ ウ・・ド　ヤ・・　にお番る　ヘルペスウィルスの　１この実施例においては、 慢性的に感染したウッドチャ・ｙりにおけるウッドチャック肝炎ウィルス（ＷＨ Ｖ）（ヒトにおいて潜在的抗Ｂ型肝炎ウイルス剤を評価するために選択した動物 モデル）に対してＦＥＡＵ及びＦＭ＾Ｕを評価した。　ＦＥＡＩＩは、テストし た全ての動物個体において投与量２及び０．２ｍｆＩ／ｋｇ／日ｘ　１０で−Ｈ Ｖの複製を阻害した。この阻害効果は即時的であって、毒性もなく、しかも長時 間持続した。予備研究では更に、ＦＥＡＵが経口投与でもＩＩＩＨＶに対して有 効であることが判った。更にＦＭ八へは、投与量２及び０．２＋ｅｇ／ｋｙ／日 ｘ５で糾Ｈ■複製に対して即時的阻害効果を与えるが、ＦＭ＾Ｕをこの投与量で 用いると受容し得ない毒性が見られた。 Ｈｅｐａ−ＤＮＡウィルスの１種であるＢ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）はヒトにお いて急性及び慢性の肝炎の原因となる。おおよそ２００万人がこのウィルスの保 菌者であることが予想される。）ＩＢＶは肝細胞癌の主要原因物質であり得る（ １９）。Ｈｅｐａ−ＤＮＡウィルスは、他の動物、例えばウッドチャック（Ｍａ ｒｍｏｔａ　Ｍｏｎａｘ）にも発見された。ウッドチャック肝炎ウィルス（−Ｈ Ｖ）とＨＢＶとの間に見られる、核酸の相同（２０）を含む構造的及び臨床病理 学的な密接な類似性は、ウッドチャックが、永続性の肝炎ウィルス忌染症及びそ の肝臓癌の発生との関係を研究する上で有効なモデルであることを意味する（２ １）。 １１ＢＶ同様に、ウッドチャック肝炎ウィルスは、その複製及び組み込みのため に極めて類似したＤＮＡポリメラーゼを作り出す、潜在的な抗）ＩＢ〜（剤は、 慢性保菌ウッドチャック及び、Ｂ型肝炎ウィルス表面抗原に陽性と示す免疫抑制 患者から調製される血清から得られる、内因性ＷＨＶ若しくはＨＢＶＤＮＡポリ メラーゼの阻害によって検出することができる。 かかる研究はｔｈｅ　Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｖｉｒｕｓ　Ｌｌｎｉｔ、ＩＮＳＥ ＲＭ、Ｌｙｏｎ、仏画で行われて、これらの内因性ウィルスＤＮＡポリメラーゼ に対するある種のヌクレオシド三リン酸塩の阻害効果を測定した。 一連の活性分析において（２２，２３Ｌ数種のヌクレオシド三リン酸塩に対する ＨＢＶ及びＷＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼの相対３度を測定した（表■）。測定し た６種のヌクレオシド三リン酸塩のうち、ＦＭＡＵがＨＢＶ及びＷＨＶ　ＤＮ＾ ポリメラーゼ双方の最も有効な阻害剤であり、すぐ続いてＦＩＡＣが有効であっ た。 更に、ＨＢＶ若しくは−ＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼに対するこれら６種の三リン 酸塩のそれぞれの効能（＋０５６）は、同一ではないが、かなり近かった。更に 重要なことは、これらのウィルスＤＮＡポリメラーゼの阻害剤としての効能のオ ーターが同一であることである。これらの結果はＨＢＶとＷ）ｉ〜′との驚くべ き類似性を更に立証し、潜在的抗Ｂ型肝炎ウイルス剤の」ｖｉｖｏ評価のために 選択した動物モデルとしてのウッドチャックの有効性を指摘する（２３）。 次なる研究は、自然環境においてウッドチャック肝炎ウィルスに慢性的に５染し たウッドチャックを使用し、この動物モデルにおいてＦＭＡＵ及びＦＥＡＬ’を 評価することであった（２４）。これらのヌクレオシドは動物体内でヌクレオシ ド三リン酸塩に同化されることが仮定された。内因性ＤＮＡポリメラーゼ活性に よって及び、ドットープロットハイブリダイゼーシ：　ン（ｄｏｔ−ｂｌｏｔ　 ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）活性分析による―ＨＶ　ＤＮＡの検出によって、 ｌ？）ＩＶ複製を定期的に測定した。治療していないウッドチャックのウィルス ＤＮＡポリメラーゼ活性を第１Ｉ２１に示す。ＦＭＡＵ及びＦＥＡｔｌについて ３種の異なる投与量で調査した。ＦＭ＾ＩＪ　２ｍｇ７ｋ６１日×５（０日めか ら腹腔的投与開始）では、１ＩＩＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼ活性が完全に抑制さ れした。しかしながらこの投与量では、結果的に致死的な激しいＣＮＳ毒性か見 られた。ＦＥＡｔｉ　２ｍｇ／ｋｙ／日　×１０を股腔内投与してもＷ）ＩＶの 複製をほとんどすぐに抑制し、毒性は全く示さなかった。投与量０．２ｍｇ／ｋ ｙ／日ては、ＦＭＡＵ（ｘ　５投与）及びＦＥＡＬＩ＜ｘ　１０投与）はウィル スの複製を抑制する上で等しく有効であった（第３７）。この投与量で、ＦＭ＾ しは毒性がやや少なくてしかも遅れて現れたが、ＦＥＡｔｌはやはり無毒性であ った。投与量０．０４ｍｙ／ｋｙ、／日ｘ　１０でさえも、ＦＥＡＵは効果が幾 分低下するものの依然として抗ＷＨＶ効果を示した。ＦＥＡｔｌ　０゜２ｍｙ／ ｋｇ／日×１０と経口投与したウッドチャック１個体について予備研究すると、 ＦＨ〜゛の複製が大いに抑制され、またも毒性は見られなかった（第４図）。 轟１ ヒト肝炎ウィルス（ＨＢＶ）及びウッドチャック肝炎ウィルス（糾ＨＶ）のＤＮ Ａポリメラーゼに対するヌクレオシド三リン酸塩類似体の阻害活性の比較 ヌクレオシド　ｌＤ５゜（ｕＭ）寞 三リン酸塩阻害剤　ＨＢＶ　ＤＮＡポリメラ−ｆ　Ｗ）ＩＶ　ＤＮＡポリメラー （ＦＭＡＵ−ＴＰ　Ｏ，０２５０，０５ ＦＩＡＣ−ＴＰ　Ｏ，０５０，１０ ＢＶＤＵ−ＴＰ　Ｏ，２５０，３０ ＾ＲＡ　Ｔ−ＴＰ　Ｏ，３００，４０ ＡＣＶ−ＴＰ　Ｏ，９００，７０ ＾ＲＡ　Ｃ−ＴＰ　１．１０　１．２０本Ｉｎｓ。＝　ＤＮＡポリメラーゼ活性 を５０％阻害する阻害剤の濃度 ＦＥＡＩＩを０．２若しくは２Ｂ投与したときの阻害活性は、薬物投与中止後、 治療前のレベルにゆっくりと戻りながらも６週間にわたって有意に持続した。　 ＥＥＡＵのＷＨＶ複製阻害はほとんど即時的で、５−＝オキジ−アシクロビル、 ＤＩ（ＰＧ若しくは＾ｒａ−八ＭＰへいった他の抗ウィルス剤を用いた場合より も顕著に維持される。これら後者の抗ウィルス剤もＷＨＶ　ＤＮＡポリメラーゼ レベルを低下させるが、薬物投与中止後は治療前のレベルにすぐに戻る、（致死 量の毒性が見られた）ＦＭＡＵ及びＦＩＡＣを使用して得られた前記結果とは対 象的に、以下のＦＥＡＵ治療では約１０２６の体重減少が見られたにすぎなかっ た（２４）。 これらの低投与量でウッドチャック肝炎ウィルスの複製に対して見られたＦＥＡ Ｕの効能は全く驚くばかりである。単純ヘルペスウィルスについてのｉｎ　ｖｉ ｔｒｏ研究（１９，１０）、マウスにおけるヘルペス脳炎モデルにおけるｉｎν ｉｖｏ研究及び、本明細書に記述したアフリカミドリザルにおけるサル水痘ウィ ルス研究に基づいて、　ＦＥＡｕがＦＭＡＵよりも強力ではないとどうして予想 されようか、これらのデータから、ＥＥＡＵはＢ型肝炎ウィルスに対して臨床上 有効な物質であることが判る。その効能及び選択性に基づき、これまでテストし たヌクレオシド類似体のうちで最も有望であると考えられる。 去１１凱旦 実施例２の方法に従って、ウッドチャックに種々の投与量で胃管を通して経口投 与し、ＦＥΔしのＷＨＶ複製阻害を研究した。異なるーＨＶ複製初期値を６つ２ つのクループのウッドチャックについて調査した。 ＬｌユＩＪ −〇Ｖ複製率が高いラットチャフ２フ個体きテストした。 複製率が高いとは、ＤＮＡポリメラーゼ活性が１分間に１０００カウンｌ〜以上 であると定義し、平均複製率は１６００であった。 これらのウッドチャックのうち２個体をコントロールとして維持すると、わ寸か に変動したものの６０日間の実験の間同じＷＨＶ複製を示した。 残りのウッドチャック５個体はＦＥＡＩＩ　０．２ｍＦＩ／に９／日を経口投与 して治療した。２３日めまでに、これらのウッドチャック全ての複製値は低下し た。しかしながら、５個体のうちの４個体は依然として正常値（１）Ｎへポリメ ラーゼ活性が１分開当たり５０カウントと定義した）以上であった。そのため２ ４日めに、それら４個体の投与量分ＦＥＡＵ　１ｍｌ？／ｋｙ／日に増加し、第 ５の個体はＦＥＡ１４０．２Ｂ７’ｋＦＩ／日に維持した。６０日めまでに試験 動物５個体全てにおいて複製は完全に阻害され、中毒性副作用もなかった。 しめユ呈Ａ ＷＨＶ複製率が低いウッドチャック７個体をテストした。 複製率が低いとは、ＤＮＡポリメラーゼ活性が１分間に１０００カウント未満で あると定義し、平均複製率は６００〜８００であった９これらのウッドチャック のうち２個体をコントロールとして維持すると、わずかに変動したものの６０日 間の実験の間同じ−ＨＶ複製？示した。 残りのウッドチャック５個体はＦＥＡＵ　０．０４ｍｇ／ｋｌＪ／日を経口投与 して治療した。２３日めまてに、これらのウッドチャック全ての複製値は低下し た。しかしながら、５個体のうちの２個体は依然として正常値以上て゛あった。 そのため２４日めに、それら２個体の投与量ＥＦＥΔＵ　０．２ｎ＋ｇ／ｋｇ／ 日に増加し、残りの３個イ本はＦＥＡＵ　Ｏ，０４叶／ｋｇ／日に維持した。６ ０日めまでに試験り物５個体全てにおいて複製は完全に阻害され、中毒性副作用 もなかった。 １−　Ｋ−Ａ、　ｈａｔｌｎｌｂｅｔ　Ｕ−ＲｅＬＣｈ二ｌｎｒ　Ｋ−Ｈｌｒｃ ｔａ、　Ｃ−Ｌｃｐｅｚ。 Ｊ、Ｊ、Ｆｏｘ、Ｊ、ｏｒｇ、ＣＦ、ｔ＝二、２２：　２１−２４　（１９７９ ）。 ２、　Ｊ、Ｊ、　ＦＯＸ、　Ｃ，Ｌｃｐｅｚ、ｘ、λ、　ＷａｔａｎＩ−ｂａ　 ｉｎ　Ｍａｃｉｉｃｉｒ、ａｌＣｈａ：ｌ：ｌＬｇｔｒ！／Ａｄｖａｈｃａｍ　 （Ｆ−Ｇ、ｄａ　工ａｓ　Ｈａｒａｓ、ｓ、Ｖａｇａ。 ａｄｓ）、Ｐｅｒｇａｚｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、０ｘｆｏｒｄ、ｐｐ−２７−４０（ １９８１）。 コ、　Ｔ−ｃ、ｃｈｅｔ：、λ、Ｆ　＠　Ｌ　ｎｂＱｌ：ｑ　ｒ　λ、Ｊ、　（ 、ｒａｎｔ、Ｐ、Ｖｉｄａｌ、Ｕ。 Ｒａ１ｃｌｕｚａｎ、Ｋ、λ、Ｗａｔａｎａｂｅ、Ｊ、Ｊ、ｒｏｗ、Ｃａｎｃｅ ｒ　Ｒａｓ、４１：コ３３６−３３４２　（１９８１）。 ４、Ｊ、入、　Ｃｃｄａｒｒ＠、　Ｄ、Ｖ、　５ａｎｔｉ、　Ａ、　Ｍａｔｚｕ ｄａ、　ＬＡ。 Ｗａｔａｎａｂａ、　ＪＪ、　Ｆｏｘ、　：ｆ、　Ｍａｄ、　Ｃｈａｐ、　２６ ：　１１４９−４１５２（１９８３）。 ５、　Ｃ，ＩＪ、Ｙｏｕｎｇ、Ｒ，５ｃｈｎａｉｄｅｒ、Ｂ、Ｌｅｙｌａｎｄ− Ｊｃｒｓａｓ、Ｄ。 Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ、Ｃ，Ｔａｎ、Ｃ＋　ＴＡｐａｚ、ＬＡ、Ｗａｔａｒｉａｂ ａ、Ｊ、：ｆ。 Ｔｏｘ、　？、Ｓ、　Ｐｈ１ｌｉｐｓ、　Ｃａｎｃａｒ　ＲｅＳ＋　丘ユニ　５ ００６−５００９（１９８３）。 ６　、　Ｂ−Ｌ４ｉ！ｙｌａｎｃ！−３ｏｎａｓ／　Ｈ−ＤＯｎｎｅｌＸ”／ｌ 　Ｓ　、ＧｒＯ５１−ｔｉｎｒ　Ｐ　。 ｐ、ｙｓｋｏｗｓｋｉ、λ−Ｌ−ＤＯｎｎ＠ｒｒ　Ｍ−ＦａｎｕｃｃｈＪ　Ｊ− ３，ＴＣＸｒ　Ｊ。 工ｎｆａｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓ、λ互丘：　４コ０−４３６　（１９ａ６）。 フ−Ｍ−Ｐ−ＦａｎｕＣ（：！１１ｔ　Ｂ　、　Ｌｅ’／１ａｎ（１−ＪＯｎＱ ５ｒ　Ｃ、Ｗ　、　ＹＣｕ二９ｔ　Ｊ−Ｈ−Ｂｕｒｃｈａｎａｌ、　Ｋ、入、　 Ｗａｔａｎａｂａ、　：ｆ、、：；、　Ｆａｘ、　ＣａｎｃｅｒＴｒ＠ａｔｉａ ｎｔ　Ｒａｐ、６９：　５５−５９　（１９８５）。 ８、Ｋ、入、Ｗａｔａｎａｂａ、Ｔ−Ｌ、’　Ｓｕ、Ｕ、Ｒａ１ｃ！ｍａｒｌ、 Ｎ、Ｇｒａａｎｈ＋ｅｒｇ。 Ｃ，Ｌｃｐｅｚ、Ｊ、Ｊ、Ｆａｘ、Ｊ、Ｍａｄ、Ｃｈａ！：１．　２７：、９１ −９４”（１９８４）。 ９、　Ｍ、Ｅ、ＰｅｒＬ＝ａｒ＋、ＬＡ、Ｗａ：ａｎａｋＱ、Ｒ０？−５ｃｈｘ ｎａｚｉ、Ｊ、：ｆ−Ｆｏｘ、　Ｊ、　Ｍａｄ、　Ｃｈａ＝、　２１ｉｉ：　７ ４１−７４８　（１９８５）。 １ｏ、、：ｒ、Ｊ、Ｆｃｘ、ＬＡ、Ｗａｔａｒ；ａｊｅ、Ｒ，Ｆ、Ｓｃｈ土ｒ、 ａｚｉ、ｃ、Ｌｃｐｅｚｉｎ　Ｈｅｒ℃ｅｓ　ＶｉｒａＳｅｓ　ａ＝、６　ｖｉ ｒｍｓ　Ｃｈｅ：ｏ？ｈｅτａｂｖ　（Ｒ，Ｘａｎｏ。 入、Ｎａ５ｃａづｉ＝ａ、ａｄｓ、）　Σｘｃｅｒｐｔａ　ｌ’、ａｃｌｉｃａ 、入：５ｔｅｒｄａ：＋＋　Ｐ？−５３−５６（Ｌ９８５）−Ｂａ５ｅｄ　ｕｐ ｏｎ　ｐｒｏｃａａｄｉｎｇｓ　ｏｆ！ｒ、ｔａ：Ｔｌａ：ｉｃｒ、ａＩ　５ｙ ＝ｐｃｓｉｕ二　ｏｎ　Ｐｈａ＝；ａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｈａＣｌｉｈｉｃ ｚｌ　入ｐｐｒｃａｅｈｅｓ　ｔｏ　Ｈｅｒｐｅｓ　Ｖｉｚｓａｓ　ａｎｄ　Ｖ ｉｒｕｓｃｈａ＝、ｏｔ−ｈａｒａｐｙ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｉｎ　０ｉｓｏ 、Ｊａｐａｎ、５ｅｐｔａｄｅｒ。 １９１ｉ４゜ １１・　ｋ、Ｆ、　Ｓｃ？、１ｒｔａｚｉ、　Ｊ、　Ｐｅｔａｒｓ、　Ｍ、Ｌ　 Ｓｃｋ口１．　入、Ｊ。 Ｎ！ｈ二ｌａＳ、Ａｎ’、止ＩＣｒＣ；Ｄｉａｌ　入ｇｇｈｔｓ　（ｈｉ！：： Ｏｔａ’ｌｌ！ｉｒ　ヱ４：　９５−１０３（１９８コ）。 １２、　Ｔ−（、Ｃｈｃｕ、　χ−Ｂ、　Ｘｏｒ＋ｇ、　Ｖ、Ｐ、　Ｐｏｔｔａ ｒ、　？、λ、　５ｃｈ＝ｉｄ。 Ｊ−Ｊ、Ｆｏｘ、］Ｉ：、λ、ｗａｔａｎａｂａ、Ｍ、Ｆａｒ、ｕｃｃｈｉ、Ｐ ｒｏｃａｅｄｉｎｇｓ口ｆ　ＡＡＣＲヱ互：　コココ　（：１．９８５）。 １コ＋　Ｔ−Ｃ＋　Ｃｈｏｕ、Ｘ−Ｂ、Ｋｏｎｇ、Ｍ＋Ｐ、Ｆａｎ＊ｃｃｈｉ、 Ｙ−Ｃ−Ｃｈａｎｇ。 Ｋ、　Ｔａｋａｂａｓｈｉ、　：に−人、　ｗａｔａｎとｂｅ、　ＪＪ、　Ｆｅ ｗ、’Ａｒ＋ｔｉ：１ｃ＝ｅｂｉａｌλｇｅｎｔｓ　Ｃｈｅ＝ｏｔｈｅｒ　（ｉ ｎ　ｐｒｅｓｓ）　。 １４−　Ｙ−Ｃ，Ｃｈｅｈｇ、Ｇ、Ｄｕ：ｓｃ？、＝ａｎ、　Ｊ、Ｊ、Ｆａｘ、 Ｋ、λ、　Ｗａｔａｒ、ａｈｅ。 Ｅ、　Ｍａｃｈｉｄａ、　入ｎ”−ｉ　：ｉＣｒ　ロｂ　ｉａｌ　入ｑｆａｎｊ Ｓ　Ｃｈａ　：Ｏセｈａｒ　ヱ９：４２０−４２コ　（１９８１）。 １５・　Ｃ，Ｌｏｐｅｚ、に、入、ｗａｔａｎａｂａ、Ｊ、７．　Ｆａｘ、Ａｎ ｔＬｍＬＣｒＯｋ＋１ＪＬ１人ｇａｎｔｓ　Ｃｈｅ二〇’Ｔ：Ｊ’ｒｅｒ　に： 　８０コー８０６　（１９８０）。 １６・　Ｍ、Ｍ、：（ａｈｓｔ：ｒｉ、工、Ｇｌ、ａｚ：ｏ＊ｌｉ、Ｍ、Ｓ、Ｃ ｈｅｎ、Ｈ，Ｇ、Ｈｏｗａｌ。 Ｐ−Ｒ，Ｂｒｃｄ？＊ｅｈｒｅ＝、Ｄ、λ、Ｂｅｒ、ｉｇ＝ｉ、Ｊ、Ｃ，Ｍａｒ ｔｉｎ、Ｊ。 Ｍａｄ、Ｃｈａ＝、３０：　６６フー８７１　（１９８７）。 １７、　Ｈ，Ｍａｃｈｉｄａ、　λ、　Ｘｕ二１ｎａｋａ、　Ｊ、　Ｙｃｓｈｉ ｒ、ａｏ、　Ａ＝ｔｉ−＝ｉｃｒｃｂｉａｌ　Ａ９ｅｎｔＪ　Ｃ，’＋ａ＝口ｔ Ｐａｒ　２１：　３５ε−３６ユ　（ユＳε２ン。 ＝１３．　Ｘ、Ｔ、　５ｃｉｋａ、　Ｃ，Ｃａ＋＝ｒａユｌ、　Ｐ、、７．　Ｇ ｅｒｏｎａ。 Ｌ＊＝ｉ＝ｉｃｒｃｂｉａλλｇａｒｌｔｌ！　Ｃｈａ＝ｏ笥ａニー　２９：　 ２０−２５　（ｉ９ａ６）。 Ｂｏｓｔｏｎ、ｐｐ、７７−９１　（１９８４）。 ２０、Ｆ、Ｇａ１ｉｂａ：−ヒ、”＝’、Ｖ−Ｃコ】ｅ：１ｔＥ−ａａｈｃａ二 −ヒ、？ｒｃｃ、Ｈａ’ヒ１゜λｃａｃｉ、Ｓｃｉ、Ｕ、Ｓ、入、ヱ旦：　５３ Ｌ５−５：！１９　（１９８１）。 ２１＋Ｂ、Ｓ、　Ｂ１℃凸ｅｒｇ、　Ｈｗ、Ｐａ２ｏ１．、　Ｚ２：　１１０７ −１１１３　（１９８１）。 ２コ、　Ｏ，Ｈａｎｔｚ、Ｈ，Ｓ、入ユ１ａｖｄｅｅｎ、’　Ｔ、０ｏｋａ、Ｅ 、Ｄｅ　Ｃ１ｅｒｃｑ。 Ｃ，Ｔｒｅｐｏ、λｘｔｉｖｉｒａｌ　Ｒａａ、丘＝　１８７−１’＋９　（１ ９Ｅｉ４）。 ２４、工、ＦｏｕｒａＬ、Ｏ，１（ａｎｔ：ｚ、　Ｌ入、ＷａｔａｎＴｏａ、Ｊ 、Ｊ、　Ｆｏｘ、ｃ。 Ｔｒｅｐｏ、λｂｓｔｒ、入二ａｒ、入５ＳＯＣ−５ｔｕａ　ｙ　ＬＩＶｅｒ　 Ｄ　１Ｓ６ＥＩＳＱＳＨＣ１＊ｖａｌａｎｄ、０ｈｉｏ　（Ｏｃ＝ｃｂｅｒ　１ ｓｓ７）。 匡際調査報告

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．被検対象において肝炎ウイルスの複製を阻害するのに有効な、構造： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物又はその薬物前駆体形態若しくは医薬的に許容可能な塩を所定量 と医薬的に許容可能なキャリヤとを含有する、前記被検対象において肝炎ウイル ス感染症を治療するための組成物。
2. ２．肝炎ウイルスがＡ型肝炎ウイルスである請求項１に記載の組成物。
3. ３．肝炎ウイルスがＢ型肝炎ウイルスである請求項１に記載の組成物。
4. ４．肝炎ウイルスが非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスである請求項１に記載の組成物。
5. ５．肝炎ウイルスの複製を阻害するのに有効な前記化合物の量が、１日に被検対 象の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約１００．０ｍｇである請求項１に記載の組 成物。
6. ６．前記化合物の量が１日に被検対象の体重１ｋｇ当たり約０．０４ｍｇ以上で ある請求項５に記載の組成物。
7. ７．前記化合物の量が１日に被検対象の体重１ｋｇ当たり約０．０４〜約５０． ０ｍｇである請求項６に記載の組成物。
8. ８．被検対象において肝炎ウイルスの複製を阻害するのに有効な、構造： ▲数式、化学式、表等があります▼ の化合物又はその医薬前駆体形態若しくは医薬的に許容可能な塩を所定量、前記 被検対象に投与することから成る、被検対象において肝炎ウイルス感染症を治療 する方法。
9. ９．経口投与することから成る請求項８に記載の方法。
10. １０．静脈内投与することから成る請求項８に記載の方法。
11. １１．肝炎ウイルスの複製を阻害するのに有効な前記化合物の量が、１日に被検 対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約１００．０ｍｇである請求項８に記載の 方法。
12. １２．前記化合物の量が１日に被検対象の体重１ｋｇ当たり約０．０４ｍｇ以上 である請求項１１に記載の方法。
13. １３．前記化合物の量が１日に被検対象の体重１ｋｇ当たり約０．０４〜約５０ ．０ｍｇである請求項１２に記載の方法。
14. １４．前記被検対象がヒトである請求項８に記載の方法。
15. １５．肝炎ウイルスがＡ型肝炎ウイルスである請求項８に記載の方法。
16. １６．肝炎ウイルスがＢ型肝炎ウイルスである請求項８に記載の方法。
17. １７．肝炎ウイルスが非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスである請求項８に記載の方法。
18. １８．ＦＥＡＵの薬物前駆体形態。
19. １９．ＦＥＡＵの医薬的に許容可能な塩。