JPH023623A - 抗高コレステロール血症剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 高コレステロール血症は、・西洋諸国における死亡及び
工具の主要原因たるアテローム性動脈硬化症及び冠動脈
性心疾患の主なリスクファクターの一つであることが知
られている。

しかしながら、ＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａレダクターゼ酵素
を介してコレステロール生合成を制限することにより機
能する非常に活性な杭高コレステロール血症剤たる薬剤
が知られている。

これらの薬剤としては、°メバスタチン、ロバスタチン
及びプラバスタチンのような天然発酵産物、並びにシム
バスタチンのような半合成類縁体がある。これらの化合
物は下記化学構造式を有する： メバスタチン ロバスタチン シムバスタチン プラバスタチン 最近、活性剤としてロバスタチンを含有するメバコール
（ＭＥＶＡＣＯＲ■）が杭高コレステロール血症剤とし
ての使用に関し食品医薬品局（Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒ
ｕｇ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）から承認された
。

これら化合物の多数の類縁体及び同族体が特許文献中に
記載されている。米国特許第４．４４４，７８４号明細
書は、ポリヒドロナフチル部分及びそれに結合した様々
な８−アシルオキシ基を有するロバスタチンの類縁体に
ついて開示している。米国特許第４，４４４，７８４号
明細書は、８−アシルオキシ基が様々に修正されたこれ
らロバスタチン類縁体の多数の薬学上許容される塩につ
いても開示している。

米国特許第４，６６１，４８３号明細書も、８−アシル
オキシ基が修正されたロバスタチン類縁体について開示
している。しかも、すべて　１９８６年５月５日付で出
願された同時係属米国特許出願第８５９．５１３号、第
８５９．５２４　号、第８５９，５２５号、第８５９．
５３０号、第８５９，５３４号及び第８５９．５３５号
明細書でも、８−アシルオキシ基を機能化させたロバス
タチン類縁体について更に開示している。

１９８７年５月１５日付で出願された同時係属米国特許
出願第４８，１３６号明細書は、ポリヒドロナフチル部
分の６位で置換されたヒドロキシメチル基又はカルボキ
シ基を有するロバスタチン及び関連化合物の類縁体であ
る化合物について開示しているが、これらは公知微生物
株ノカルジア・オートトロフィカ（Ｎｏｃａｒｄｉａ　
ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ）の、培養物ＭＡ−６１８１
のカンベリ力（ｃａｎｂｅｒｒｉｃａ）亜種ＡＴＣＣ３
５２０３及び培養物ＭＡ−６１８０のアメチスチナ（ａ
　ｍ　ｅｔｈｙｓｔｉｎａ）亜種ＡＴＣＣ３５２０４を
用いたロバスタチンの微生物酸化産物である。

１９８８年１月７日付で出願された同時係属米国特許出
願第１４２，３７７号（代理人事件整理番号第１７７０
６号）は、ポリヒドロナフチル部分の４，４ａ及び５，
６位に２つの二重結合を有するロバスタチン及び関連化
合物の類縁体である化合物について開示している。

本発明は、ＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａレダクターゼ阻害剤で
あって抗高コレステロール血症剤として有用である新規
化合物に関する。具体的には、本発明の化合物は１，２
，７，８，８ａ（Ｒ）−ペンタヒドロナフチル部分及び
３−オキソ基を有するロバスタチン及び関連化合物の微
生物酸化産物である。しかも、唯一の治療活性成分とし
てこれらの新規化合物を胆汁酸封鎖剤と共に含有した医
薬組成物が開示されている。

本発明の特異的ＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａレダクターゼ阻害
剤は、下記−殻構造式（Ｉ）及び（ＩＩ）で示される化
合物： ［上記式中： ＲはＣ１−１１，アルキルである； Ｒ１は水素、Ｃ１−、アルキル又はフェニル、ジメチル
アミノもしくはアセチルアミノからなる群のうちいずれ
かで置換されたＣ１−、アルキルであるコ 及びＲ１が水素である化合物（ＩＩ）の薬学上許容され
る塩である。

本発明の一態様は、Ｒが５ｅｃ−ブチル又は１，１−ジ
メチルプロピルでかつＲ１が水素である式（Ｉ）及び（
Ｉｆ）の化合物である。

この態様の例としては、６　（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）
　−（２−メチルブチリルオキシ）−２（Ｓ）、６−シ
メチルー３−オキソ−１，２゜７．８，８ａ（Ｒ）−ペ
ンタヒドロナフチル−１（Ｓ）　］エチル］　−４（Ｒ
）−ヒドロキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ
−ピランー２−オン；及び６（Ｒ）　−［２−［８（Ｓ
）−（２，２−ジメチルブチリルオキシ）−２（Ｓ）、
６−シメチルー３−オキソ−１゜２＝　７．８，８ａ（
Ｒ）−ペンタヒドロナフチル−１（Ｓ）］エエチル］４
（Ｒ）−ヒドロキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ−
２Ｈ−ピランー２−オンがある。

本発明のもう１つの態様は、Ｒ１がＣ１−５アルキルで
ある式（ＩＩ）の化合物及びＲ１が水素である式（Ｉｆ
）の化合物の薬学上許容される塩のクラスである。

本発明の薬学上許容される塩としては、ナトリウム、カ
リウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネ
シウム、亜鉛のような陽イオン及びアンモニア、エチレ
ンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、リジン、アルギニ
ン、オルニチン、コリン、Ｎ、Ｎ’　−ジベンジルエチ
レンジアミン、クロロプロ力イン、ジェタノールアミン
、プロ力イン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチ
ルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン、テトラメチルアンモニウムヒドロキシドの
ような塩基から形成される塩がある。

式（Ｉ）の化合物は、下記３つの方法のうちいずれか一
つによりロバスタチンから製造されることが都合よい： （ａ）　　適切なインキュベート時間にわたり基質をノ
カルジア・オートトロフィカの増殖培養物に加え、しか
る後単離し、かつ所望であれば誘導化する； （ｂ）　　生物変換微生物の培養物を集め、かつ集めら
れた細胞を基質と接触させる；又は （ｃ）　　生物変換微生物細胞から無細胞酵素含有抽出
物を調製し、この抽出物を基質と接触させる。

ノカルジア属生物変換微生物の培養は、かかる微生物の
場合に使用されることが周知の栄養物を含有した慣用的
培地中で常用手段により行うことができる。例えば、周
知のように、このような培地は同化性炭素源、同化性窒
素源及び通常無機塩を含有している。同化性炭素源の例
としては、グルコース、スクロース、　デンプン、　グ
リセリン、キビゼリ−（ｍｉｌｌｅｔ　ｊｅｌｌｙ）、
糖蜜及び大豆油がある。同化性窒素源の例としては、大
豆固体物（大豆粗びき粉及び大豆細粉を含む）、小麦麦
芽、肉エキス、ペプトン、コーン浸漬液、乾燥酵母及び
硫酸アンモニウム等のアンモニウム塩がある。必要であ
れば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭酸カルシウム
又はリン酸カルシウムのような無機塩が含まれていても
よい。

所望であれば、水酸化酵素の産生を促進しうる他の添加
剤も適切な組合せで用いることができる。特殊な培養技
術は本発明のプロセスに不要であり、微生物培養のため
に常用される技術であればいずれも本発明で同様に用い
られる。一般には、当然ではあるが、用いられる技術は
産業効率を考慮して選定される。

したがって、液体培養が通常好ましく、深部培養法が産
業的観点から最も好都合である。

培養は、好気性条件下、２０〜３７℃、更に好ましくは
２６〜２８℃の範囲内の温度で通常行われる。

方法（ａ）は、培養過程で基質を培地に加えることによ
り行われる。培養中に出発化合物が加えられる正確な時
点は、培養装置、培地組成、培地温度及び他のファクタ
ーに応じて変動するが、但し微生物の水酸化能が高まり
始めた時点であることが好ましく、通常これは微生物培
養開始後１〜２日目である。基質の添加量は、好ましく
は培地の０．０１〜５．０重量％、更に好ましくは０．
０５〜０．５、例えば０．０５〜０．１重量％である。

基質添加後、培養は通常上記範囲内の温度で好気的に続
けられる。培養は基質添加後１〜２日間にわたり通常続
けられる。

方法（ｂ）において、微生物培養は最初にその最大の水
酸化能を発揮しうるような条件下で行われ、この能力は
通常培養開始後４〜５日目に最大に達するが、但しこの
期間は培地の性質及び温度、微生物種並びに他のファク
ターに応じて変動する。培養物の水酸化能は、適切な間
隔で培養物サンプルを採取し、それらを標準的条件下で
基質と接触させかつ得られた生成物の量を測定してサン
プルの水酸化能を調べ、この能力度を時間に対してグラ
フにプロットすることによりモニターしうる。水酸化能
がその最大点に達したとき、培養は中止され、微生物細
胞が回収される。これは、培養物を遠心分離、ミ濾過又
は類似の公知分離方法に供することによって行われる。

こうして回収された培養微生物の全細胞は、次いで生理
塩水又は適切な緩衝液のような適切な洗液で洗浄される
。

回収されたノカルジア属微生物細胞と基質との接触は１
例えばＰＨ値５〜９のリン酸緩衝液のような水性媒体中
で通常行われる０反応温度は好ましくは２０〜４５℃、
更に好ましくは２５〜３０℃の温度内である。反応媒体
中の基質濃度は０．０１〜５．０重量％の範囲内である
ことが好ましい。反応時間は１〜５日間が好ましいが、
但しこれは反応混合物中の基質濃度、反応温度、微生物
の水酸化能（これは勿論種毎に異なるが、前記のように
培養時間にも依存する）及び他のファクターに応じて変
動する。

方法（ｃ）で用いられる無細胞酵素含有抽出物は、方法
（ｂ）においての記載のように得られた微生物の全細胞
を物理的又は化学的手段で破壊することにより、例えば
分解細胞塊を得るために粉砕もしくは超音波処理により
又は細胞溶液を得るために界面活性剤もしくは酵素との
処理によって得られる。次いで、得られた無細胞抽出物
は方法（ｂ）において前記された同様の条件下で基質と
接触される６本発明の新規プロセスにおいて有用な微゛
生物はノカルジア属である。特に重要なものは、公知微
生物株ノカルジア・オートトロフィカの、ニューシャー
シー州ローウェイ（Ｒａｈすａｙ）メルク社（Ｍｅｒｃ
ｋ　＆　Ｇｏ、、　Ｉ　ｎｃ）の培養コレクションであ
る培養物ＭＡ−６１８１のカシベリカ亜種ＡＴＣＣ３５
２０３及び培養物ＭＡ−６１８０のアメチスチナ亜種Ａ
ＴＣＣ３５２０４である。培養物名称ＡＴＣＣ３５２０
３及びＡＴＣＣ３５２０４のサンプルは、１２３０１パ
ークローン・ドライブ（Ｐ　ａｒｋｌａｗｎ　Ｄｒｉｖ
ｅ）　＋ロックビル（Ｒｏ　ｃ　ｋｖｉｌｌｅ）　＊メ
リーランド州２０８５２におけるアメリカン・タイプ・
カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐ
ｅＣｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）の永久培養
コレクションから入手可能である。

上記方法のいずれかによる変換反応の終了後、所望の化
合物は常用手段により直接単離。

分離又は精製される。例えば、分離及び精製は、反応混
合物をミ濾過し、得られたら戸液を非水混和性有機溶媒
（例えば、酢酸エチル）で抽出し、抽出物から溶媒を留
去し、得られた粗製化合物をカラムクロマトグラフィー
（例えば、シリカゲル又はアルミナ上）に付し、カラム
を特にＨＰＬＣ装置中適切な溶離液で溶出させることに
よって行われる。

特許請汞化合物の内在的ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻
害活性は、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミスト
リー、第２８巻、第３４７−３５８頁、１９８５年［Ｊ
ｏｕｒｎａｌ　ｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ、　２　Ｂ　、　ｐ　、　３４７−３５８　（１
９８５）］で発表された生体外プロトコールにより測定
される。

相対的阻害効力の評価のために、試験化合物のＬＣ，ａ
値は公表された生体外プロトコールで共に測定されたシ
ムバスタチンの場合と比較された。

特許請汞化合物の内在的ＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａレダクタ
ーゼ阻害活性の代表例は、シムバスタチンのＩＣ５ａ値
４．２ｎｇ／ｍＱと比較した場合に　ＩＣｓ。値２　ｎ
　ｇ　／　ｍ　Ｑを示した６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）
−（２，２−ジメチルブチリルオキシ）−２（Ｓ）、６
−シメチルー３−オキソ−１，２，７，８，８ａ　（Ｒ
）　−ペンタヒドロナフチル−１（Ｓ）　］エチル］−
４（Ｒ）−ヒドロキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ
−２Ｈ−ピランー２−オンの相対的効力である。

本発明の化合物は、ヒトにおける動脈硬化症、高脂血症
、家族性高コレステロール血症等の疾患の治療用の抗高
コレステロール血症剤として有用である。それらはカプ
セル、錠剤、注射用製剤等の形で経口又は非経口投与さ
れる。通常経口を用いることが望ましい。

容量はヒト患者の年齢、重篤度、体重及び他の条件に応
じて変動するが、但し成人の一日量は約２〜２０００ｍ
ｇ　（好ましくは１０〜１００ｍｇ）の範囲内であって
、２〜４回に分割された用量で投与される。更に高い用
量は必要に応じて用いられることが好ましい。

本発明の化合物は、胃腸管内において非再吸収性の形で
胆汁酸と結合しうる薬学上許容される無毒性の陽イオン
性ポリマーと共に同時投与されてもよい。このようなポ
リマーの例としては、コレスチラミン、コレスチラミン
及びポリ［メチル−（３−トリメチルアミノプロピル）
イミノトリメチレンシバライド］がある。本発明の化合
物及びこれらポリマーの相対量は　１：１００〜１：１
５．Ｏｏｏである。

本発明の範囲内には、動脈硬化症、家族性高コレステロ
ール血症又は高脂血症の治療方法が含まれるが、これは
かかる治療の要する対象に非毒性的治療有効量の式（Ｉ
）もしくは（ＩＩ）の化合物又はその医薬組成物を投与
することからなる。

下記実施例は式（Ｉ）及び（ｎ）の化合物の製造法並び
に医薬組成物中へのそれらの組入れ方について説明する
が、それら自体は特許請求の範囲に記載された発明を制
限するものとして考えられるべきではない。

実施例１ ６−チトラヒドロー２Ｈ−ピラン−２−オンｎ」わと １９８７年５月１５日付で出願された同時係屈特許出願
第４８，１３６号明細書で記載されているように７−［
１，２，６，７，８゜８ａ　（Ｒ）−ヘキサヒドロ−２
（Ｓ）、６（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ）−（２，２−ジ
メチルブチリルオキシ）−１（Ｓ）−ナフチル］−３（
Ｒ）　、　５　（Ｒ）−ジヒドロキシヘプタン酸ナトリ
ウム塩の生体内変換のための常法を用いて、上記表題化
合物を副産物として単離した。

下記の培地が下記生体内変換反応で用いられるニ ーＬ／」ｊ１位述＝ ４．０ 培地Ａ 酵母エキス 麦芽エキス 栄養ブロス デキストロース ｐ　Ｈ７，４ １２１°Ｃで２０分間滅菌された培地；４．０ １０．０ ４．０ 培地Ｂ　　　　　　　　」巨りｍ デキストロース　　　　　　　１０．０ポリペプトン　
　　　　　　　２°０ 肉エキス　　　　　　　　　　　１・Ｏコーン浸漬液　
　　　３．０ ｐＨ７，０ １２１℃で２０分間滅菌された培地； １、　培養条件　び生体白変 ノカルジア・オートトロフィカ亜種カンベリカＡＴＣＣ
３５２０４（ＭＡ−６１８０）の凍結乾燥チューブを用
いて１８Ｘ１７５寒天斜面（培地Ａ）に接種し、これを
２７℃で７日間インキュベートした。斜面培養物を無菌
培地Ｂ　５ｍｆｌで洗浄し、無菌培地Ｂ　５０ｍｆｌ含
有の２５０ｍＱフラスコに移した。この第−段階種を２
２Ｏｒｐｍシェーカー上２７℃で増殖させ、２４時間後
２ｍｆｌを別の無菌培地Ｂフラスコに移した。

上記条件下で増殖後、第二の種を用いて生体内変換培養
を開始させた二種培養物２　Ｑｍ１２を２Ｑ、フラスコ
中の無菌培地Ｂ４００ｍＡに加えた。培養物が２４時間
増殖した後、７゛−［１＋　２＋　”＋　７＋　８＋　
８ａ　（Ｒ）−ヘキサヒドロ−２（Ｓ）、６　（Ｒ）−
ジメチル−８（Ｓ）（２，２−ジメチルブチリルオキシ
）−１（Ｓ）−ナフチル］−３（Ｒ）、５（Ｒ）−ジヒ
ドロキシヘプタン酸ナトリウム塩８０ｍｇを各フラスコ
に加えた。インキュベートを２８時間続けるか、又は　
７−　Ｅｌ、２，６，７゜８．８ａ（Ｒ）−へキサヒド
ロ−２（Ｓ）　。

６（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ）−（２，２−ジメチルブ
チリルオキシ）−１（Ｓ）−ナフチルコ−３（Ｒ）　、
　５　（Ｒ）−ジヒドロキシヘプタン酸がＨＰＬＣで検
出されなくなるまで続ける。全ブロスを遠心分離しかる
後ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ）　２号ミ戸紙でのミ濾
過によって清澄化させた。

ｎ、　　ＨＰＬＣ法 全ブロスの一部が７−　［１，２，６，７゜８．８ａ　
　（Ｒ）−ヘキサヒドロ−２（Ｓ）　。

６（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ）　−（２，２−ジメチル
ブチリルオキシ”）　−１（Ｓ）−ナフチル］　−３（
Ｒ）　、　５　（Ｒ）−ジヒドロキシへブタン酸誘導体
に関してＨＰＬＣにより分析することができる。ミ濾過
されたブロスは直接（１０〜２０μＱ）でも又はメタノ
ールで蒸留後であっても注入しうる。化合物を１〜３　
ｍ　Ａ　／　ｍ　ｉ　ｎの流速で３５〜４５％水性アセ
トニトリル勾配により逆相カラム上で分離した。氷酢酸
又はＨ３Ｐ　Ｏ４（０、１ｍ　Ｑ　／　Ｑ移動相）の添
加が遊離酸の分離のために必要とされた。７　　［１ｒ
　２　ｐ　６　＋　７　ｖ　８＋　８ａ（Ｒ）−へキサ
ヒドロ−２（Ｓ）　、　６　（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ
）　−（２，２−ジメチルブチリルオキシ）−１（Ｓ）
−ナフチルコ−３（Ｒ）。

５（Ｒ）−ジヒドロキシへブタン酸の誘導体は２３８＋
ｍの吸光度及び２３８＋ｍ／　２２８＋ｍの吸光度比を
モニターすることにより検出された。望ましい生成物６
　（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２−アルキルアシルオ
キシ）−２（Ｓ）、６−シメチルー３−オキソ−１，２
゜７，８．８ａ　（Ｒ）−ペンタヒドロナフチル−１（
Ｓ）］エチルコー４（Ｒ）−ヒドロキシ−３，４，５，
６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピランー２−オンは２９３Ｑ
ｍの吸光度をモニターすることにより検出された。

上記の常法に従い、７−　［１，２，６，７゜８．８ａ
（Ｒ）−へキサヒドロ−２（Ｓ）、　６（Ｒ）−ジメチ
ル−８（Ｓ）−（２，２−ジメチルブチリルオキシ）−
１（Ｓ）−ナフチル］−３（Ｒ）　、　５　（Ｒ）−ジ
ヒドロキシへブタン酸ナトリウム塩２０ｋｇの生体内変
換による全ブロス（１２，７００リツトル）のｐＨを２
Ｎ硫酸で４．０　に調節し、しかる後酢酸エチル（２Ｘ
４５００Ｑ、）で抽出する。全ブロス抽出液を更にＩＮ
炭酸水素ナトリウム（２０容量％）で抽出し、しかる後
水性抽出液を酢酸エチルで洗浄した。次いで、水性抽出
液にメチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ、５７０Ｑ）を
加え、水相のｐＨを７．２Ｎ硫酸で３．１に調節する。

次いで、ＭＩＢＫを水相から分離し、しかる後これをＭ
ＩＢＫ　（５７０Ｑ）で抽出し、ＭＩＢＫ抽出液を合わ
せ、ケイソウ土で濾過し、共沸乾燥し、８７０Ｑまで減
圧濃縮する。ＭＩＢＫ溶液を９５℃に加熱し、しかる後
ＭＩＢＫ　（２３Ｑ）中トリフルオロ酢酸（０，９１２
）で処理する。約１５分間後、混合物を２５℃に冷却し
、ＩＮ炭酸水素ナトリウム（０，５倍容量）及び水（２
Ｘ０．５倍容量）で連続的に洗浄する。有機相を減圧濃
縮し、残渣をアセトニトリルに溶解し、しかる後これを
ｐＨ７の０．０２Ｍリン酸緩衝液で３０％アセトニトリ
ルまで希釈する。６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２，
２−ジメチルブチリルオキシ）−６−ヒドロキシメチル
−２（Ｓ）−メチル−１，２，６，７，８，８ａ（Ｒ）
−へキサヒドロナフチル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ
）−ヒドロキシ−３，４，５゜６−テトラヒドロ−２Ｈ
−ピランー２−オン約７００ｇを含有する一部（１／３
）を５ｐ−２０７（３００Ｑ、スチレン及びジビニルベ
ンゼンの臭素化コポリマー、三菱社）カラムクロマトグ
ラフィーに付し、アセトニトリル／緩衝液（３０％、３
７％、４７％、５７％）で溶離させ、アセトニトリル／
水（６７％）から上記表題生成物及び６−ヒドロキシメ
チル化合物を得た。所望の生成物は、混合物を酢酸イソ
プロピル（ＩＰＡＣ）又はメチル１−ブチルエーテル（
ＭＴＢＥ）に溶解し次いで溶液を非極性溶媒（ｎ−へブ
タン、シクロヘキサン又は石油エーテル）に加えて結晶
化させ、大半の６−ヒドロキシメチル化合物を除去する
ことにより、更に精製することができる。

ｒｖ、６（Ｒ）　　−［２−［８Ｓ　　　−２，２ンの
単離 工程■からの結晶化母液を油状物にまで濃縮し、しかる
後最終容量１００ｍＱまでトルエン：メタノール：アセ
トニトリル（８：１：１ｖ：ｖ：ｖ）に溶解した。この
溶液をヘキサン：トルエン：メタノール（３：１：ｌｖ
：　ｖ　：　ｖ）で平衡化されたセファデックスＬＨ−
２０［ファルマシア社（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｉｎｃ、
）］の１０Ｑカラムに入れ、この溶液により流速１００
ｍｆｉ／ｍｉｎで溶離させた。

所望の化合物は１１〜１４倍目のカラム容量で溶出し、
この溶出液を固体物に濃縮した。

生成物をＣ１，カラム（２１，４ｍｍ　　ＩＤＸ３０ｃ
ｍ）プレバレーテイブ（ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ）逆相
ＨＰＬＣにより注入後１０分目から流速１０ｍＱ／ｍｉ
ｎで４０分間にわたり水中２５％アセトニトリル〜水中
７５％アセトニトリルの直線勾配で溶離させて更に精製
した。所望の生成物を含有する両分（２９分目に溶出）
を合わせ、濃縮させて、結晶形の所望の生成物約４００
ｍｇを得た。

１３　ＣＮＭＲデータ（ＣＤ、ＣＱ　２゜２ヒ！　　　
　　　　　２２！ ９．４　　　　　　　３６．５ １０．６　　　　　　　３６．８ ２４．１　　　　　　　３７．７ ２４．３　　　　　　　３９．０ ２４．４　　　　　　　３９．６ ２４．９　　　　　　　４２．７ ３２．９　　　　　　　４３．３ ３３．４　　　　　　　６３．１ δｃ＝５３．８ｐｐｍ） Ｒ２！ ６７．０ ７６．０ １２３．１ １２４．５ １４４．３ １５４．９ １７０．２ １７７．６ ２０３．４ ＭＳ分析ではｍ／ｚ４３２で弱い Ｍ１イオン 及びｍ／ｚ３１６及び１７３（ベース）でフラグメント
イオンを示した。ＵＶスペクトルは１＝２１，９００で
λｍａｘ＝２９０ｎｍを示した。

同様の方法で、ノカルジア・オートトロフィカ亜種カン
ベリカＡＴＣＣ３５２０３（ＭＡ６１８１）を７−［１
，２，６，７，８，８ａ（Ｒ）−へキサヒドロ−２（Ｓ
）、　６　（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ）−（２，２−ジ
メチルブチリルオキシ）−１（Ｓ）−ナフチルコ−３（
Ｒ）、５　（Ｒ）−ジヒドロキシへブタン酸ナトリウム
塩の生体内変換に利用して、所望の生成物を得た。

更に、開環ロバスタチンナトリウム塩である７−［１，
２，６，７，８，８ａ　（Ｒ）　−へキサヒドロ−２（
Ｓ）　、　６　（Ｒ）−ジメチル−８（Ｓ）−（２−メ
チルブチリルオキシ）−１（Ｓ）−ナフチル］−３（Ｒ
）、５（Ｒ）−ジヒドロキシへブタン酸ナトリウム塩を
　Ｎ。

オートトロフィカ亜種アメチスチナＡＴＣＣ３５２０４
（ＭＡ６１８０）及びＮ、オートトロフィカ亜種カンベ
リカＡＴＣＣ３５２０３（ＭＡ６１８１）双方を利用す
る類似生体内変換反応に供し、６（Ｒ）−［２−［８（
Ｓ）−（２−メチルブチリルオキシ）−２（Ｓ）、６−
シメチルー３−オキソ−１，２，７，８，８ａ（Ｒ）−
ペンタヒドロナフチル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）
−ヒドロキシ−３，４，５゜６−テトラヒドロ−２Ｈ−
ピランー２−オンを得た。

実施例２ 化合物■のアンモニウム塩の製造 実施例１からのラクトン（１、０ｍ　ｍ　ｏ　Ｑ　）を
環境温度で撹拌下０．ＩＮ　ＮａＯＨ（１，１ｍｍｏ（
１）に溶解する。得られた溶液を冷却し、ＩＮＨＣ＆Ｉ
　　の滴下により酸性化する。得られた混合物をジエチ
ルエーテルで抽出し、抽出液を塩水で洗浄し、（Ｍ　ｇ
　Ｓ　Ｏ４）乾燥させる。ＭｇＳＯ４をミ戸去し、ミ戸
液をアンモニア（ガス）で飽和させてゴム状物を得、こ
れを固化させて、アンモニウム塩を得る。

実施例３ 化合物■のアルカリ及びアルカリ土類塩のｌ盗 エタノールＱｍＱ中の実施例１がらのラクトン４２　ｍ
　ｇの溶液にＮ　ａ　ＯＨ水１ｍ１２（１当量）を加え
る。室温で１時間後、混合物を減圧乾燥させて、所望の
ナトリウム塩を得る。

同様の方法で、カリウム塩を水酸化カリウム１当量から
製造し、カルシウム塩をＣａ○１当量から製造する。

実施例４ 化合物■のエチレンジアミン塩の　造 メタノール１０　ｍ　Ｑ中の実施例２からのアンモニウ
ム塩０．５ａｇの溶液にエチレンジアミン０．７５ｍＱ
を加える。メタノールを減圧除去し、所望のエチレンジ
アミン塩を得る。

実施例５ 化合物■のトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩
の製造 メタノールＢｍＱ中の実施例２からのアンモニウム塩２
０２ｍｇの溶液にメタノールＳｍＱ中トリス（ヒドロキ
シメチル）アミノメタン６０．５ｍｇの溶液を加える。

溶媒を減圧除去し、所望のトリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン塩を得る。

実施例６ 化合物■のＬ−リジン塩の製造 ８５％エタノール１５　ｍ　Ｑ中のＬ−リジンｏ、ｏｏ
ｔモル及び実施例２からのアンモニウム塩０．００１１
モルの溶液を減圧濃縮乾固させて、所望のＬ−リジン塩
を得る。

同様に、Ｌ−アルギニン、Ｌ−オルニチン及びＮ−メチ
ルグルカミン塩が製造される。

実施例７ 化合物■のテトラメチルアンモニウム塩の１遣 塩化メチレンＺ　ｍ　Ｑ中の実施例２からのアンモニウ
ム塩６８ｍｇ及びメタノール中２４％水酸化テトラメチ
ルアンモニウム０．０８ｍΩの混合物をエーテルで希釈
し、所望のテトラメチルアンモニウム塩を得る。

実施例８ 化合物Ｈのメチルエステルの製造 無水メタノール１００ｍＱ中の実施例１からのラクトン
４００ｍｇの溶液に無水メタノール中０．１Ｍナトリウ
ムメトキシド１０ｍＱを加える。この溶液を室温で１時
間放置し、しかる後水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出
する。有機相を分離し、（Ｎａ２Ｓ０４）乾燥し、ミ濾
過し、減圧蒸発させ、所望のメチルエステルを得る。

同様の方法で、相当量のプロパツール、ブタノール、イ
ソブタノール、ｔ−ブタノール、アミルアルコール、イ
ソアミルアルコール、２−ジメチルアミノエタノール、
ベンジルアルコール、２−アセトアミドエタノール等の
使用により、対応エステルを得る。

実施例９ 遊離ジヒドロキシ酸の製造 実施例３からの化合物■のナトリウム塩をエタノール−
水（１：１　　ｖ　：　ｖ）２＋ｎＱに溶解し、ＩＮ塩
ａ　１０　ｍρに加え、そこからジヒドロキシ酸を酢酸
エチルで抽出する。有機抽出液を水で１回洗浄し、（Ｎ
　ａ２Ｓ　Ｏ４）乾燥し、３０℃以下の浴温で減圧蒸発
させる。

ジヒドロキシ酸誘導体は放置時徐々に対応母ラクトンに
戻るが、但しｐＨ約７で安定である。

実施例１０ 本発明の組成物の具体的態様として、実施例１からのラ
クトン２０　ｍ　ｇを十分に微細なラクトースと配合し
て全量５８０〜５９０■にし、０号硬ゼラチンカプセル
に充填する。

手続補正書 （方式） １、事件の表示 平成１年特許願第４８６５８号 ２、発明の名称 抗高コレステロール血症剤 ３、補正をする者 事件との関係

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記一般構造式（ I ）又は（II）で示される化合
   物： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（II） ［上記式中： ＲはＣ＿１＿−＿１＿０アルキルである；及びＲ＾１は
   水素、Ｃ＿１＿−＿５アルキル又はフェニル、ジメチル
   アミノもしくはアセチルアミノからなる群のうちいずれ
   かで置換されたＣ＿１＿−＿５アルキルである］ 又はＲ＾１が水素である化合物（II）の薬学上許容され
   る塩。 ２、Ｒがｓｅｃ−ブチル又は１，１−ジメチルプロピル
   である、請求項１記載の化合物。３、６（Ｒ）−［２−
   ［８（Ｓ）−（２−メチルブチリルオキシ）−２（Ｓ）
   ，６−ジメチル−３−オキソ−１，２，７，８，８ａ（
   Ｒ）−ペンタヒドロナフチル−１（Ｓ）］エチル］−４
   （Ｒ）−ヒドロキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ−
   ２Ｈ−ピラン−２−オン又はその開環ジヒドロキシ酸類
   縁体もしくはエステルである、請求項１記載の化合物。 ４、６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２，２−ジメチル
   ブチリルオキシ）−２（Ｓ），６−ジメチル−３−オキ
   ソ−１，２，７，８，８ａ（Ｒ）−ペンタヒドロナフチ
   ル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−３，
   ４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン又
   はその開環ジヒドロキシ酸類縁体もしくはエステルであ
   る、請求項１記載の化合物。 ５、非毒性的治療有効量の請求項１記載の化合物及び薬
   学上許容される担体を含有した血中コレステロール低下
   血中脂質低下用医薬組成物。 ６、治療活性成分が６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２
   −メチルブチリルオキシ）−２（Ｓ），６−ジメチル−
   ３−オキソ−１，２，７，８，８ａ（Ｒ）−ペンタヒド
   ロナフチル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）−ヒドロキ
   シ−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２
   −オン又はその開環ジヒドロキシ酸類縁体もしくはエス
   テルである、請求項５記載の組成物。 ７、治療活性成分が６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２
   ，２−ジメチルブチリルオキシ）−２（Ｓ），６−ジメ
   チル−３−オキソ−１，２，７，８，８ａ（Ｒ）−ペン
   タヒドロナフチル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）−ヒ
   ドロキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラ
   ン−２−オン又はその開環ジヒドロキシ酸類縁体もしく
   はエステルである、請求項５記載の組成物。 ８、胃腸管内において非再吸収性の形で胆汁酸と結合し
   うる薬学上許容される無毒性の陽イオン性ポリマー及び
   薬学上許容される担体と共に非毒性的治療有効量の請求
   項１記載の化合物を含有した血中コレステロール低下血
   中脂質低下用医薬組成物。 ９、治療の要する対象に非毒性的治療有効量の請求項１
   記載の化合物を投与することからなるコレステロール生
   合成の阻害方法。 １０、治療活性成分が： （１）６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２−メチルブチ
   リルオキシ）−２（Ｓ），６−ジメチル−３−オキソ−
   １，２，７，８，８ａ（Ｒ）−ペンタヒドロナフチル−
   １（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−３，４，
   ５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン； （２）６（Ｒ）−［２−［８（Ｓ）−（２，２−ジメチ
   ルブチリルオキシ）−２（Ｓ），６−ジメチル−３−オ
   キソ−１，２，７，８，８ａ（Ｒ）−ペンタヒドロナフ
   チル−１（Ｓ）］エチル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−３
   ，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン
   ； 又はそれらの開環ジヒドロキシ酸類縁体もしくはエステ
   ル； から選択される、請求項９記載の方法。