JPH0236124A

JPH0236124A - 抗ウイルス剤

Info

Publication number: JPH0236124A
Application number: JP63184539A
Authority: JP
Inventors: Shiro Yonezawa; 米澤　司郎; Noboru Ueha; 上羽　昇; Satoru Muramatsu; 村松　了
Original assignee: YAMAJIRUSHI JOZO KK; Nippon Mining Co Ltd; Osaka Prefecture
Current assignee: YAMAJIRUSHI JOZO KK; Osaka Prefecture; Eneos Corp
Priority date: 1988-07-26
Filing date: 1988-07-26
Publication date: 1990-02-06

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は薬用エンジンから得られる抗ウィルス剤、特に
は日本脳炎ウィルスに有効に作用する抗ウィルス剤に関
する。

〔従来の技術〕

オタネエンジン（Ｐａｎａｘ　ｇｉｎｓｅｎｇ　Ｃ，Ａ
、　Ｍｅｙｅｒ）。

チクセツエンジン（Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　
Ｃ，Ａ、　Ｍｅｙｅｒ）、アメリカエンジン（Ｐａｎａ
ｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ　Ｌｉｎｎｅ）、三七
エンジン（Ｐａｎａｘ　ｎｏｔｏｇｉｎｓａｎｇ　Ｆ、
　）１．　Ｃｈｅｎ）等の薬用エンジンの根は、古来よ
り、有用漢方薬として広く利用され、強壮、長生、鎮静
、興奮、利尿作用等の薬効が知られている。

また、薬用エンジン中の成分についての薬理作用は、サ
ポニン成分について、抗糖尿病作用（特開昭５５−１２
２７２１号公報）、抗腫瘍作用（特開昭５４−８９０１
２号公報）が、また多糖成分について、生体防御能亢進
作用（特開昭６１−１８７２２号公報）を有することが
知らている。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかしながら、薬用エンジンに含まれている糖タンパク
成分についてはほとんど研究がなされていない。

薬用エンジン中の糖タンパクに新たな薬効が見出されれ
ば、すぐれた薬が提供できることになるのである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者は、上記現状に鑑み、鋭意研究を進めた結果、
薬用エンジン中の糖タンパク成分に抗ウィルス作用を有
するものがあることを見出した。

薬用エンジン中の糖タンパク成分の抗ウィルス作用は新
たな知見であり、本発明は副作用が極めて少ないと考え
られる新規抗ウィルス剤を提供するものである。

本発明は、薬用エンジンの抽出物であって、平均分子量
が３　、０００〜７０，０００の糖タンパク成分を有効
成分とする抗ウィルス剤に関するものである。

本発明でいう薬用エンジンとは、ウコギ科（Ａｒａｌｉ
ａｃｅａｅ）　、パナックス属（Ｐａｎａｘ）に属する
植物で、オタネエンジン、チクセツエンジン、アメリカ
エンジン、三七エンジンなどを例示することができる。

これらの植物で抽出すべき部分は、根部が良く、またそ
の乾燥物を用いると抽出効率が高く、特に好ましい。ま
た、本発明においては。

上記のパナックス属の植物を通常の手段により組織培養
して得られた培養物を用いることもできる。

抽出は、上記薬用エンジンをそのまま或いは破砕した後
、水もしくは水溶性有機溶媒を用いて行うことができる
。この場合、多糖成分が抽出されるのをできるだけ抑え
た方が好ましく、抽出液のヨード−デンプン反応の陽性
への変化により、抽出を終了させるようにすると良い。

このようにして得られる抽出物から平均分子量が３，０
００〜７０，０００の糖タンパク成分を分画するのであ
るが、先ずは、この抽出物からサポニン成分を除くこと
が好ましい。このサポニン成分は、メチルアルコール、
エチルアルコール、プロピルアルコール、ブチルアルコ
ール等の低級アルコールで抽出することにより除くこと
ができる。次に、これを、イオン交換樹脂やゲル濾過剤
等を用いたクロマトグラフィーを適宜組合わせることに
より、上記分子量を有する糖タンパク成分の両分を得。

溶媒等を除去することにより目的成分を得ることができ
る。

上記糖タンパク成分は、それ自体でまたは製剤用の賦形
剤、結合剤或いは希釈剤等と適宜混合して用いることが
でき、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、注
射剤等の形態で経口的或いは非経口的に投与することが
できる。また、必要に応じ、他の薬剤と調合して用いて
も良い。投与量は、年齢、体重、症状により適宜決定さ
れるが、経口的には、成人、−日当たり、０．１　”−
１０００ｍｇの範囲で選定すると良い。

〔実施例〕

抽遇１旦ｌ聚乾燥薬用エンジン１００ｇに蒸留水４００＋ｉｌを加え
、室温で撹拌しつつ、ヨード−デンプン反応が陽性にな
るまで抽出した。得られた抽出液をガーゼで濾過した後
、再度蒸留水４００ｍ１を加え、同様の操作を繰返した
。これらの両袖出液を合わせ、８．００Ｏｒｐｍで、３
０分間遠心分離し、上清を得、これを減圧下に３０＋＋
＋１まで濃縮した。この濃縮液を１０倍容量のメタノー
ル中へ滴下し、室温で静置後、上澄を除去し、残部を遠
心分離し、得られた沈殿を少量の蒸留水で溶解した。こ
の溶液から遠心分離して不溶物を除去した後、等容量の
ｎ−ブタノールを加え、残存するサポニンを抽出した。

このサポニンを除いた水層を減圧下に濃縮し、凍結乾燥
して、粗抽出物５ｇを得た。

抽出物の精製上記粗抽出物を５０ｍＭ　）−リス−塩酸緩衝液（ｐ）
１８．０）に溶解し、これを、同緩衝液で羊衡化したジ
エチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）−陰イオン交換体（Ｄ
ＥＡＥ−トヨパー／Ｌ／６５０Ｍ）を充填したカラム（
２，ＯＸ　１５．Ｏｃｍ）に通した後、吸着成分を０．
５Ｍの塩化ナトリウムを含む同緩衝液でグラジェントさ
せて溶出した。非吸着画分及び溶出させた吸着画分をそ
れぞれ透析し、凍結乾燥して非吸着成分（ＤＥ−Ａ）及
び吸着成分（ＤＥ−８）を得た。（ＤＥ−Ａ及びＤＥ−
８は第１図に示す。）ｒウィルス作　゛果試隨（１）試験動物ｄｄｙ、ｖ８雄性マウスの４〜５週齢のもの６０匹を１
群として本試験に用いた。

（２）試験方法上記で得られたＤＥ−Ａ及びＤＥ−８をそれぞれリン酸
緩衝生理食塩水（Ｐ　Ｂ　Ｓ　＋）に溶解し、上記マウ
スの各群に対し、前老を１　、５ｍｇ　／マウス、後者
を２．５ｍｇ／マウス、それぞれ腹腔内投与を行った。

この投与から１日経過後、各マウスに対し、日本脳炎ウ
ィルス（ＪａＴＨ−１，６０株）を、　０．２８％牛血
清アルブミンを含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７，４）で
１０−’　（ＩＰＦＵｌｏ、２ｍ１）まで希釈して腹腔
内に接種した。このウィルス接種後の死亡率１体重、一
般症状を観察した結果、第１表の通りであった。

尚、対照としてＰ　Ｂ　Ｓ　（＋）のみを与えたものに
ついても第１表に併記した。

この結果から明らかなように、薬用エンジンの抽出物に
抗ウィルス作用があることが分かる。

皿貰璽り立性上記ＤＥＡＥ−陰イオン交換体によるカラムクロマトグ
ラフィーの検出波長２８０ｎｍでの溶出結果を第１図に
示した。次に、上記ＤＥ−ＡをセファデックスＧ−７５
を充填したカラム（２，０Ｘ７２ｃ層）を用い、ゲルろ
過を行った。溶出には５０ｍＭのリン酸バッファー（ｐ
Ｈ７，２）を用い、２８０ｎｍの波長で検出した。この
結果を第２図に示した。さらに、このゲルろ過により得
られた主溶出画分（八〇−■）について、ＯＯＳを充填
したカラム（２，ＯＸ　４０ｃＩｌ）を用いて、逆相タ
ンパク液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）を行った。

バッファーとして、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ
）を用い、アセトニトリルを０〜６０％の範囲でグラジ
ェントさせて溶出した。このクロマトグラフ第３図に示
した。

これらの結果から、イオン交換により得られた活性画分
は、ゲル濾過による精製で、その分画範囲内（ＭＬ　７
０．０００〜３，０００）に紫外吸収（２８０ｎｍ）が
有り、また、ＦＰＬＣでタンパク質様の溶出パターンを
示したことから、上記抽出物ＤＥ−Ａ及びＤＥ−Ｂの有
効成分ハ、分子−ｆｆｉ　３，０００〜７０，０００（
７）間にあり、さらに、これらの両分がビューレット反
応、ニンヒドリン反応で陽性を示したことにより、タン
パク質を含み、フェノール硫酸反応で、陽性を示し、糖
を含むことが判明し、これらの両分は糖タンパク成分で
あることが分かった。

〔発明の効果〕

以上のように本発明の抗ウィルス剤は、新たな、しかも
副作用が極めて少ないと考えられ、抗ウィルス剤として
極めて有効なものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、実施例における粗抽出物のＤＥＡＥ−陰イオ
ン交換クロマトグラフィーの溶出状態を示すクロマトグ
ラフ、第２図は抽出物ＤＥ−Ｂのゲルろ過のクロマトグ
ラフ、第３図は、抽出物ＤＥ−Ｂ中のＡＧ−■のＦＰＬ
Ｃのクロマトグラフである。代理人　弁理士　戸　１）親　男第図勇図「ワラクシ３シ秩第図す薗ｏＯ溶ム埼閲（ｍｉｎｔ

Claims

【特許請求の範囲】

薬用エンジンの抽出物であって、平均分子量が３，００
０〜７０，０００の糖タンパク成分を有効成分とする抗
ウィルス剤。