JPH02223592A - １α，３β―ジヒドロキシ―２７―ノル―コレスト―５―エン―２５―オン及びそのアシル化物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、ビタミンＤ様活性で特徴づけられる化合物の
調整に有用な化合物に関する。

（従来の技術及び発明が解決しようとする課題）ビタミ
ンＤ３は、カルシウム及びリンのホメオスタシスの制御
剤として周知である。正常な動物又は人間に対し、この
化合物が腸内カルシウム輸送及び骨−カルシウム流通を
刺激することが知られており、くる病の予防に有効であ
る。

また、有効であるためには、ビタミンＤ３が生体内でそ
のヒドロキシル化型に転換されなければならないことも
周知である。例えば、そのビタミンは最初肝臓中でヒド
ロキシル化されて２５ヒドロキシビタミンＤ３を形成し
、さらに腎臓中においてヒドロキシル化され、１α、２
５−ジヒドロキシビタミンＤ３又は２４．２５−ジヒド
ロキシビタミンＤ３を生成する。そのビタミンのｌα−
ヒドロキシル化型は一般に生理学的に活性又はホルモン
型のビタミンであり、ビタミンＤ様活性、たとえば、腸
内のカルシウム及びリン酸塩の吸収増加、骨ミネラルの
流通化及び腎臓中におけるカルシウムの維持のようなビ
タミンＤ様活性といわれるものに対してレスポンシブル
であると考えられる。

特許及び他の文献中に種々のビタミンＤ誘導体について
の言及がある。例えば米国特許筒３．５６５．９２４号
（２５−ヒドロキシコレカルシフェロールについて）、
同３，６９７．５５９号（１，２５−ジヒドロキシ−コ
レカルシフェロールについて）、同第３．７４１．９９
６号（ｌａ−ヒドロキシコレカルシフェロールについて
）、同３．９０７．８４３号（１αヒドロキシエルゴカ
ルシフエロールについて）、同３．７１５．３７４号（
２４，２５−ジヒドロキシ−コレカルシフェロールにつ
いて）、同３．７３９．９９１号（２５，２６−シヒド
ロキシーコレカルシフエロルについて）、同３．７８６
．０６２号（２２−デヒドロ−２５−ヒドロキシコレカ
ルシフェロールについて）、同３．８４７．９５５号（
１，２４，２５−トリヒドロキシコレカルシフェロール
について）、同３．９０６．０１４号（３−デオキシ−
１０−ヒドロキシコレカルシフェロールについて）、同
３．０６９．３２１号（種々の側鎖フッ素化ビタミンＤ
３誘導体及び側鎖フッ素化ジヒドロタキステロール３類
似体について）を参照。

ビタミンＤ３誘導体については、活性の高い新規なもの
の開発が望まれている。

（課題を解決するための手段） すぐれたビタミンＤ様活性を現わす新規なビタミンＤ誘
導体が見出され、それゆえそれは、その種々の公知の適
用例についてビタミンＤ３の代替物質として役立ち、骨
軟化症、変形性骨異栄養症及び副甲状腺機能低下症のよ
うな種々の病気の治療に有用であろう。

この誘導体は、１α−ヒドロキシ−２５−才キソー２７
−ツルーコレカルシフェロール（１αヒドロキシ−２５
−ケト−２７−ツルービタミンＤ３）である。本発明の
１α、３β−ジヒドロキシ−２７−ツルーコレスト−５
−エン−２５−オン及びそのアシル化物（ただしアシル
は炭素原子数１〜４の脂肪族アシル又はベンゾイルであ
る）は、この誘導体の調製に有用な化合物である。

本発明の化合物を用いるビタミンＤ３誘導体の合成は次
式に従って行うことができる。

この方法は、２７−ツルーコレスト−５−エン−２５−
オン（構造１．Ｒ＝Ｈ）を対応の２５ケタ一ル誘導体（
２）に転換することを含む。

２７−ツルーコレスト−５−エン−２５−オンの３−ア
シル誘導体（例えば構造１においてＲ＝ニアセチルはベ
ンゾイル基）は、またこの反応段階に適当な出発物質で
あり、そのアシル基は、２５ケタールの形成後塩基中の
加水分解により除去される。ケタール２は、脱水素に付
されてトリエノン３を生し、これは塩基中でＨ２０□で
エポキシ化されて１α、２α−エポキシ−４，６−ジエ
ン３−オン誘導体４を与える。後者を、金属／アンモニ
ア溶液中で還元して（バートンら、Ｊ、Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　９５．２７４８　（１９７３１
，２５，２５−エチレンジオキシ−２７−ツルーコレス
ト−５−エン１α、３β−ジオールが得られ、それから
酸性条件中での加水分解によりケタール保護基が除去さ
れ、２７−ツルー５−コレステシー１α、３βジオール
−２５−オン（化合物量、Ｒ＝Ｈ）を生じる。引き続い
てこの中間体をアシル化して（アセチル化、ベンゾイル
化など）その１．３−ジアシル誘導体（化合物５、そこ
でＲ−アシル基）を与え、それは、いくつかの既知の方
法によって、例えばハンツィカー及びミュールナ−の方
法（Ｈｅｌｖ、Ｃｈｉｍ、Ａｃｔａ　６１．７０（１９
５８１又は７−ケト及び７−トシルヒドラゾン中間体を
経て（オニスコら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍ、
　６．２０３（１９７７１によって５．７−ジエン誘導
体（旦、Ｒ＝ニアシル）に転換される。もし所望ならア
シル基は、この段階で温和な塩基性加水分解により（例
えばｌＯ％アルコール性ＫＯＨ）　、除去されて、対応
の１，３−ジヒドロキシ誘導体を生じる。その５，７−
ジエン６　（Ｒ＝ニアシル）の溶液の紫外線照射により
、２７−ツルー２５−ケト−１α−ヒドロキシ−プレビ
タミンＤ３ジアジレートを生じ、それは、加熱によって
対応のビタミンＤ３類似体に異性化され、次いで温和な
塩基性加水分解でアシル基を除いたのち目的の２７−ツ
ルー２５−ケト−１α−ヒドロキシ−ビタミンＤ３　（
化合物７）を生しる。

また、１α−ヒドロキシ−２５−ケトービクミン類似体
７の別の調製経路は次の図式によって説明される。

この方法は、同様の出発物質（化合物１．そこでＲはア
シル基、例えばアセチル又はベンゾイル基）の既知の２
７−ツルー２５−ケトビタミンＤ３生成物（化合物８）
への転換を１例えばプラント及びデル−力の手順（Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、８６７１（１９６９）　ｌ　を
用いて行うことを包含する。このビタミン類似体はその
３−トシル誘導体に転換され、次いでそれはソルボリシ
スに付されて３．５−シクロビタミン誘導体（９）（そ
こで２は、ツルボッシスで用いられたアルコール溶剤の
アルキル部に対応する。つまり、２はメチル又はエチル
基が典型的であるが、もしソルボリシスが水性媒体中で
行われたならばＺはまた水素である）となる。

この中間体は、順に、バーシンらの方法（Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、７５２０８０（１９７８）
ｌ　を使用して、二酸化セレンによって酸化されてその
ｌα−ヒドロキシ−シクロビタミン誘導体（旦）となる
。旦の直接ソルボリシスを行い、精製するとその１αヒ
ドロキシ−３−０−アシル生成物１１　〔そこで、アシ
ル基Ｒはソルボリシスに使用した有機カルボン酸のアシ
ル部分に相当する。つまり、Ｒがアセデル又はホルミル
基であるのが典型的である）そしてこのアシル化中間体
は、それから温和な塩基で容易にｌα−ヒドロキシ−２
５−ケト−２７−ツルービタミンＤ３　（化合物７）に
加水分解される。

（実施例） 次の各例中、個々の生成物を特定する数字は前記の図式
の方法において同様に番号付けした化合物を言う。

エチレングリコール（１８ｍｌ）を含むドライ・ベンゼ
ン（１５０ｍｌｌ　に溶解した３β−ヒドロキシ−２７
−ツルーコレスト−５−エン−２５−オン３アセテート
（±、Ｒ＝アシル基）　（１，Ｏｇ、２．３３ｍｍｏ１
１及び２−トルエンスルホン酸（１００ｍｇｌ　の溶液
をゆっくりと８．５時間蒸留させた。薄層クロマトグラ
フィー（ＴＬＣ）　　（２０％アセトン／ヘキサン）に
よれば単一の生成物のスポットを示しくＲｆ　Ｏ，５５
）　、なんら出発物質が残留していないことを示した。

反応を冷却し、ベンゼン及び水を加えた。相を分離し、
水性相をさらにベンゼンで抽出した。有機相を一緒にし
水で２回、食塩水で１回洗浄した。溶剤を除去すると２
５．２５−エチレンジオキシ−２７−ノル−コレスト−
５−エン−３β−才−ル３−アセテートが得られた。

ＮＭＲ（２７０Ｍｌｌｚ）　６０．６７（ｓ、１８〜Ｃ
Ｈ３１０，９３（ｄ、Ｊ＝ＣＨ３，２１ＣＨ３１，１，
０１（Ｓ、１９−ＣＨ５）　　、　　１．２８（ｓ、２
６−ＣＨ５）、２．０３ｆアセテ−１−−ＣＨ３）　、
　２゜９１（エチエンケクール）　４．５２（ブロード
ｍ　、　３　（Ｚ−Ｈ）　、　５．２７１ｍ、６−Ｈｌ
　。

生成物をエーテル（５ｍｌ）とＩＭＫＯＨ／メタノール
（４ｍ１．）液中に溶解し、取巻温度で２時間放置した
。ＴＬＣ（２０％アセトン／ヘキサン）によれば、反応
生成物（ＲｆＯ，２３）を示した。

エーテルと水を加え、相分離を行った。水性相をエーテ
ルで抽出した。集めた有機相を水で２回、食塩水で１回
洗浄し、Ｋ２ＣＯ３で乾燥した。溶剤を除き、残留物を
エーテルから再結晶させて、２５．２５−エチレンジオ
キシ−２７−ノル−コレスト−５−エン−３β−オール
、化合物（２）ｆＯ，７ｇ）を得る。ｍｐ１３５〜１３
６°Ｃ，ＴＩ−Ｃ分析で単のスポットを示す（２）がさ
らに２７０ｍｇ母液から回収された。ＮＭＲ（２７０Ｍ
Ｈｚ）０．６７（ｓ、１８〜Ｃｌ５）、０．９３（ｄ、
　Ｊ＝６．２Ｈ，２ｌ−ＣＨ３１、１，０１（ｓ、　１
９−ＣＨ３１、１，３１（ｓ、　２６ＣＨ２１，３，９
３（エチエンケクール）　、　３．５２　（ブロードｍ
、　　３α−Ｈ）　　、　　５．３５１ｍ、６−Ｈ）　
　。

ジオキサン（１ｍｌ）中の（２）　（ｔ］、０４６ｇ、
０．１１ｍｍａｌｌ　と２．３−ジクロロ−５，６−ジ
シアツー１．４−ベンゾ−キノンｆＯ，０８ｇ、　０．
３５ｍｍａｌｌの混合物を２２時間還流した。反応混合
物を冷却し、ろ過した。溶剤を蒸発後得られた残留物を
メチレンクロリドで溶離する中性アルミナ・カラム（０
５×７　ｃｍｌ　でろ過した。得られた物質を１５％ア
セトン／ヘキサンで２回展開する分離用プレート上のク
ロマトグラフィーにかけ、２種の生成物を得た。Ｒｆ　
Ｏ，２１の生成物が目的の化合物（旦）（１０ｍｇ）で
ある。ＮＭＲｆ６０ＭＨｚ）　０．７８　（ｓ、　１８
−ＣＨ３１。

０、９３　（ｄ、　、Ｉ＝６Ｈｚ、　２ｌ−ＣＨ３１、
１，１８（ｓ、　１９−ＣＨ３１、１，３０（ｓ。

２６−ＣＨ）、３．９３　　（エチエンケクール）　、
５．９０．６．０５゜６．２２（３個のｍ、　　ｔ−リ
エンプロトン）　　：　６．９８（ｄ、Ｊ・１０Ｈｚ、
　トリエンプロトン）。

Ｒｆが０．１５の生成物は、２７−ノル−コース１−−
１．．４．６−ドリエンー３．２５−ジオン（９，３ｍ
ｇ）であることが確認された。ＮＭＲ（６０ＭＨｚ１０
、７８　（ｓ、　ＩＬｃＩ（３１、０，９３（ｄ、　Ｊ
＝６Ｈｚ、　２ｌ−ＣＨａｌ　、　１．１８　（Ｓ１９
−（：ｔ（３）、２．１ｆｓ、２６−（：Ｈ３１，５，
９０，６，０３，６，２２（３個の多重線、トリエンプ
ロトン）　、　６．９５（ｄ、Ｊ・１０Ｈｚ。

トリエン旧。

ル性ＮａＯＨ（０，０４ｍ１ｌと３０％Ｈ２Ｏ２［０，
２４＋ｎ］、１を添加した。取巻温度で１６時間後、反
応混合物を一５°Ｃに冷却し氷の上に注いだ。水性相を
メチレンジク、ロリドで抽出後得られた物質を、３０％
アセトン／ヘキサンで３回展開する分離用層でクロマト
グラフィーを行い０．０９ｇの１α、２α−エポキシド
４　ｆ　Ｒｆ　Ｏ，６６）を得た。ＵＶ（ヘキサン丸ｍ
ａｘ２７９．２８８ｎｍ　　（肩１　：　ＮＭＲｆ６０
ＭＨｚ）　　δ０．７８　（ｓ、　１８−ＣＨ３１−０
，９３［ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ、　２ｌ−ＣＨ３１、１，１４
（Ｓ、　１９−ＣＨ３１、１，２５（ｓ。

２６−ＣＨ５）、３．８７　（エチエンケクール）　、
　３．３５（ｄｄ、Ｊ・４、５Ｈｚ、　２Ｈｚ、エポキ
シ旧、３．５２（ｄ、Ｊ＝４．５Ｈｚ、エポキシＨ）　
、　５．５４　ｆｄ、　Ｊ＝１．８Ｈｚｌ　、　５．９
７　（ｓｌ。

裏癒盟ユ メタノール（５ｍｌ）とベンゼン（４ｍｌ）中の（旦）
　（０，１４ｇ、０．３３ｍｍａｌｌの溶液に１０％メ
タノ−蒸留液体アンモニア（７ｍｌ）中のＮａ（０，１
ｇｌの溶液に一３３°Ｃで一気にＴＨＦ　　（７ｍｌ）
中の化合物４　（０，０９ｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加え
た。５分後、ＮＨ４Ｃ１（０，７ｇ）を０．７５時間か
けて少量ずつ加えた。ＮＨ３を蒸発させエーテルで置き
換えた。エーテル相を水、ＩＮＨｃＩ、水、食塩水で洗
浄し、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４１。エーテルを蒸発させ
たのち得られた残留物を３０％アセトン／ヘキサンで２
回展開する分離用層上でクロマトグラフィーを行い、２
５．２５−エチレン−ジオキシ−２７−ノル−コレスト
−５−エン−１α、３β−ジオールを得た。（０，０１
２５ｇ、Ｒｆｏ、２２１　ＮＭＲｆ２７０ＭＨｚ）δ０
．６８　（ｓ、　１８ｃＨ３１、０，９３（ｄ、　Ｊ＝
６　、９Ｈｚ、　２ｌ−ＣＨ３）　、　１．０３　（ｓ
、　１９−ＣＨ５）　。

１、．３１（ｓ、２６−Ｃｔ（３）、３．８５（ｍ、１
β−Ｈｌ、３．９３　（エチエンケクール）　、３．９
７　（７重線、　Ｊ＝５．４Ｈｚ、　３α−１１）。

５、５８　（ｍ、　６−Ｈ）。

エタノール（２ｍｌ）中のこの生成物（１１）１α，５
ｍｇ０、０２８ｍｍｏｌ）と触媒量のｐ−１−ルエンス
ルホン酸の溶液を室温で５時間かきまぜた。ＴＬＣ（５
０％アセトン／ヘキサンで３回展開する）では、単一の
スポット、Ｒｆ　Ｏ，５５を示した。エタノールを除去
し、メチレンクロリドを加えた。有機相を希ＮａＨＣＯ
３及び水で洗浄し、蒸発処理を行って５（Ｒ水素）を得
た。ＮＭＲ（２７ｏＭＨｚｉ　　δ０．６８　［３，１
８−（：Ｈ３１。

０．９４　（ｄ、　Ｊ＝６．６Ｈｚ、　２ｌ−ＣＨ３１
、１，０４（ｓ、　１９−にＨ３１、１）１α，］−３
ｆｓ、２６−（：Ｈ３１，３，８５ｆｍ、　　１ａ−Ｈ
ｌ、３．９８　（ｍ、　　３ａ−Ｈ）５．６０　ｆｍ、
　６−Ｈｌ　：マススペクトル匹Ｚ互（相対強度。

計算量）　４０２．３１５１ｆ　Ｍ”、０．５０．Ｃ２
６１４４２０３として計算４０２．３１３４＋、３８７
．２８９８　（Ｍ　”　−ＣＨ３，０，０７，３８７２
８９９＋　３８４．３０４２　（Ｍ　”　−Ｈ２Ｏ，１
，００，３８４，３０２８１、３６６２９２２（Ｍ　＋
−２ＸＨ２Ｏ，０，１８，３６６，２９２２１，２８９
，２１６９（Ｍ”−側鎖、　Ｏ，１３，２８９，２１６
７）、２７１．２０６１（Ｍ　”Ｈ２Ｏ，−側鎖、０．
１３．２７１．２０６１）、２５３．１９５７（Ｍ“−
２×Ｈ２〇−側鎖、０．１３．２５３．１９５７１　、
。

ピリジン（０，５ｍ１ｌ　と無水酢酸（０，５ｍ１ｌ中
のジオール生成物の溶液を９０℃で窒素中２．５時間加
熱した。その反応を冷水とに２ＣＯ３で急冷した。生成
物をＥｔ２０て抽出した。有機相をＩＮ　ＨＣＩ、希Ｎ
ａＨＣＯ３、水及び食塩水で洗浄し、乾燥した（Ｎａ２
ＳＯ４１゜エーテルを蒸発させると１２．４ｍｇの５（
Ｒ＝ニアセチル）が得られた。それはＴＬＣ（５０％ア
セトン／ヘキサン、Ｒｆ　Ｏ，６５）で均質であった。

スト−５，７−シエンー２５−オン−１ａ、３βヘキザ
ン（０，５ｍ１ｌ中の５（Ｒ＝ニアセチル）（１１）１
α，４ｍｇ、（１，０２５ｍｍａｌｌとＮａＨＣＯ２（
１４ｍｇ）に１，３ジブロモ−５，５−ジメチルヒダン
トイン（３，９ｍｇ、　０．０１３ｍｍｏｌ）を加えた
。窒素中で８０°Ｃで２０分間加熱したのち、反応混合
物を冷却し、ろ過した。ヘキサンを蒸発させ、残留物を
ドライ・キシレン（（１，５ｍ１ｌ及び１）１α，４．
６−ドリメチルビノジン（５０μｍ）中に溶解し、窒素
中で９０分間還流させた。冷却した反応混合物をベンゼ
ンで希釈し、］、　Ｎ　ＨＣＩ　、希ＮａＨＣＯ３、水
及び食塩水で洗浄した。有機相を蒸発乾固させ、得られ
た残留物をｆｌ−トルエンスルホン酸（１，５ｍｇ１　
を含むジオキサン（０，５ｍ１ｌ　に溶解させ、窒素中
７０°Ｃで４０分間加熱した。ワーク・アウプののち得
られた物質を１０％アセトン／ヘキサンで２回展開する
ＴＬＣによって精製し、ジエン−ジアセテート６（Ｒ＝
ニアセチル）　（１）１α，９ｍｇ、Ｒｆｏ、２９］を
得た。Ｕ　Ｖ　（ＥｔＯｌ（］えｍａｘ２９３．２８１
．２７１．２６２ｎｍ；マススペクトルｍ／ｅ（相対強
度）　４８４　Ｆ　Ｍ”、０．旧１．４２１Ｍ”−Ａｃ
ＯＨ，０，０８１，３６４（Ｍ　”　−２ＸＡｃＯＨ，
１，ＯＯ］、５４９（Ｍ”−２ＸＡｃＯＨ−ＣＨ，，０
，０５）、２５１　　（Ｍ”−２×Ａｃ０Ｈ−側＃Ｌ　
（１，１（１１，１１８（０，８４１゜タミンＤ３　（
ヱ） ２０％ＥｔＯＨ／ベンゼン（１５０ｍ］、）中の６（Ｒ
＝ニアセチル）の溶液に、コレツクスフイルターを取り
付けた１２５ワツトのハフ−ビア８Ａ３６ランプで石英
反応容器において、Ｎ２中、０°Ｃで２０分間照射した
。溶剤を蒸発し、取り出した１０−ヒドロキシ−２５−
ケト−２７−ノルプレビタミンＤ３１．３−ジアセテー
トをヘプタンに溶解し、窒素中８５°Ｃで４時間加熱し
て、１α−ヒドロキシ−２５−ケト−２７−ノルプレビ
タミンＤ、１．３−ジアセテートを生じた。溶剤を除去
し、残留物をエーテルｆＯ，５ｍ１ｌ　と口、１Ｍ　Ｋ
ＯＨ／ＭｅＯＨ（０，５ｍ１ｌ　に溶解し２．５時間室
温で放置した。溶剤を除き、エーテルと水を加えた。相
分離を行い、有機相を水で洗浄した。そのビタミン類似
体ヱを６％２−プロパツール／ヘキサンで展開する高圧
液体りｏｖトゲラフイー（ＨＰＬＣ）　（０，６ｘ　２
５　ｃｍ微粒状シリカゲルカラム）で精製した。化合物
ヱは１５１〜１５８ｍ１で溶出した。分析試料はＨＰＬ
Ｃに再注入する時は均質であった。ＵＶ（エタノール）
先ｍａｘ　２６５　、　　λｍｉｎ２２８ｎｍ、　　ん
ｍａｘ／λｍ１ｎ１．７　；マススペクトル匹Ｚ至（相
対強度）　４００．２９７３　（Ｍ“０、１Ｏｃ２４ｔ
（４ｏＯｘとしての計算値４００．２９７７）　、３８
２２８６８（Ｍ“−Ｈ，Ｏ、０，５１，３８１）１α，
２８７２＋、　３６４．２７９８（Ｍ”　−２ＸＨ２Ｏ
、０，３９，３６４，２７６６＋、　２６９．１９１３
（Ｍ”　−８２０−側鎖、　０．０６．２６９．１９０
５１．２５１．１７９２（Ｍ”−２Ｘ−Ｎ２０−側鎖、
　［１，１１）１α，２１５，１８００）、　１５２゜
０８２８［０，３６、Ｃ９Ｈ，，０゜、　１５２．０８
３７＋　、　１３４．０７３５（１，００、Ｃ９Ｈ，。

０．１３４．０７３２１　。

１玉盟１ ２５−ケト−ノルビタミンＤ３　（化合物足）！２２置
製 ５、０ｍｌのピリジン中の２５−ケトル２フーノルコレ
ステロール（１）１α，０ｇ）の溶液に無水酢酸１．Ｏ
ｎ＋１を加え、その混合物を５０℃で４時間加熱した。

その混合物を砕いた氷の上に注ぎ、固体に、Ｃ０３を加
え、そして水性混合液をエーテルで抽出した。

エーテル相をＩＮ　ＨＣＩ溶液、希ＮａＨＣＯ３溶液、
さらに水及び食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥
させた。エーテル溶剤の蒸発後、残留物を、ヘキサン中
の３０％酢酸エチル溶液６００ｍ１で溶離するシリカゲ
ル（４，５Ｘ４ｃｍカラム）上のクロマトグラフィーに
かけて、３−アセテート生成物（化合物ｌ、そこでＲ＝
ニアセチル）を１．８ｇ生じた。

８、５ｍｌのヘキサンと５．５耐のベンゼンに溶解した
２７−ケドー２７−ノルコレステロール３−アセテート
（１）、Ｒ＝ニアセチル）に固体ＮａＨ（：０３（２８
５ｍｇ）と１１５ｍｇの１．３−ジブロモ−５，５ジメ
チルヒダントインを加えた。混合物を８０°Ｃで窒素中
で２０分間加熱後、ろ過し、残留物をドライ・ベンゼン
でよくすすいだ。全ろ液を蒸発させて残留物を８．５ｍ
ｌのドライ・キシレン中に取り出し、それに２．０ｍｌ
のＳ−コリジンを添加した。

この混合物を窒素中で１．５時間還流し、次いで冷却し
、水で希釈し、エーテルで抽出した。エーテル抽出物を
洗浄しくＩＮ　ＨＣＩ、希ＮａＨＣＯ３、Ｎ２０及び食
塩水）、そして乾燥しくＮａ２ＳＯ４１、ろ過したのち
溶剤を蒸発させた。

残留物を８ｍｌのジオキサンに溶解し、ニートルエンス
ルホン酸３５ｍｇを加え、その混合物を７゜°Ｃで３０
分間加熱した。水を加え生成物をエーテルで抽出した。

エーテル相を洗浄しく希ＮａＨ（０３、Ｎ７０及び食塩
水）　Ｎａ２５Ｄ４で乾燥し、ろ過したのち溶剤を蒸発
さぜた。

その残留物に、５ｍｌのエーテル中において、メタノー
ル中の３ｍｌの５％ＫＯＨを添加し混合物を室温で１時
間かきまぜた。水を加えたのち、混合物をエルチルで抽
出し、抽出物を洗浄しく　Ｈ２０及び食塩水）乾燥しく
Ｎａ２Ｓ０４１そして溶剤を蒸発させた。残留物を、ク
ロロホルム中の２５％酢酸エチルで展開する、シリカゲ
ルプレート（０，７５＋ｎｍ厚）上のクロマトグラフィ
ーにより８８ｍｇの目的生成物、２５−ケト−２７−ノ
ル−ツーデヒドロコレステロールを与えた。この５，７
−ジエン生成物をエーテル（１５０ｍ月に溶解し、ビコ
ール・フィルターを取り付けたパノーウランプを用いて
Ｎ２中で５分間照射した。次いで溶剤を蒸発させ、残留
物を２５％酢酸エチエチＣＨＣｌ＆で２回展開するシリ
カゲル薄層板上でクロマトグラフィーさせそのプレビタ
ミン生成物（２５−ケト−２７−ツループレビタミンＤ
、）を生じた。

この生成物を２ｍｌのＣＣＬに溶解し、８０℃で３．５
時間Ｎ２中で加熱して、異性化させた。溶剤を蒸発させ
たところ２５−ケト−２７−ツルービタミンＤ、（化合
物８）が得られた。

０、２５ｍ１のドライ・ピリジン中の２０ｍｇの２５−
ケトビタミン基の溶液を４０ｍｇのトルエンスルホン酸
クロリドで処理した。５°Ｃで９０時間後、氷片と１０
％ＮａＨＣＯａ溶液を加え、その混合物をエーテルで抽
出した。エーテル相を洗浄しく　Ｉ　ＮＨＣｌ。

希ＮａＨＣＯ３、水、食塩水）　ＭｇＳＯ４上で乾燥し
た。溶剤の蒸発後、３−トシル化生成物（２０ｍｇ）を
ドライ・メタノール２ｍｌとドライ・ベンゼン０．３■
１に溶解し、ＮａＨＣＯ３１００ｍｇを加え、混合液を
５５°Ｃで２０時間温めた。Ｎ２０を加えたのち、混合
物をエーテルで抽出し、エーテル抽出物を洗浄しｆＨ□
０と食塩水）、乾燥しくＭｇ５Ｏ□）、蒸発を行って、
目的の３．５−シクロビタミン生成物９　（Ｚ＝メメチ
基）２０ｍｇを生じた。

（１０Ｚ＝Ｍｅ） ドライＣＨ□Ｃ１２の０．７ｍｌ中の５ｅＯｚ１．９ｍ
ｇに０℃で、９０％ｔ−ブチルヒドロペルオキシド１０
μｍを加え、その混合物を０°Ｃで３０分間かきまぜた
。この混合物にシクロビタミン生成物９（Ｚ＝Ｍｅ）２
０ｍｇの０．７ｍｌのＣＨ２ＣＬ２溶液を滴下して加え
、反応を１２分間室温で進めた。反応を飽和ＮａＨＣＯ
３溶液を加えて停止させ、混合液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出
した。有機性抽出物を洗浄しく希ＮａＨＣＯａ、水、食
塩水）乾燥しくＭｇ５ｏ２）、ソシテ生成物を薄層クロ
マトグラフィー（シリカゲル、４０％酢酸エチル／ヘキ
サン）によって精製した。この方法で、１α−ヒドロキ
シシクロビタミン↓０　（２＝メチル）５ｍｇが得られ
た。そしてこれは、マススペクトル及びプロトンｎｍｒ
スペクトルでその特性値が得られた。

化合物−し旦（１ｍｇ）を無水酢酸（口、１ｍ１）でピ
リジン（０，１ｍ１）中５５°Ｃで１．５時間処理する
と、対応の１０−アセトキシ誘導体を生じた。同様に、
１α−ベンゾエートが、ヨ旦のベンゾイルクロリドとの
反応で（ピリジン中室温で３時間）調製される。

クミンＤ３　（化合物７） その１α−ヒドロキシ−６−メドキシー２５−ケト−２
７−ツルー３．５−シクロビタミンＤ３生成物（ｌｏｍ
ｇ）が氷酢酸０．５ｍｌ中に溶がされ、５５℃で１５分
間加熱された。砕き氷と反応混合液を中和するのに十分
な量のＮａＨＣＯ３とを次いで加え、混合物をエーテル
で抽出した。エーテル抽出物を洗浄しく希ＮａＨＣＯ３
、水、食塩水）乾燥しくＭｇ５Ｏ，）　、そして蒸発さ
せた。主として目的の１α−ヒドロキシ−２５−ケト−
２７−ノルビタミンＤ３３−アセテート生成物（化合物
１１、Ｒアセデル基）及び対応の５．６−１−ランス異
性体を含有する残留物を、それからクロマトグラフィー
にかけた（高圧液体クロマトグラフィーＺｏｒｂａｘ　
−ＳＩＬの０．６２Ｘ　２５　ｃｍのカラムを用い、ヘ
キサン中の２５％２−プロパツールを溶離液とする。Ｚ
ｏｒｂａｘ　−ＳＩＬは微粒状シリカゲル調製品、デュ
ポン社（ウイルミントン、デラウエアナ１杓の製品）。

目的のシスービタミン生成物上土（Ｒ＝ニアセチル）は
１０３ｍ１で溶出し、１回リサイクルさせたのち純粋な
形（３，４ｍｇ１で得たが、それはそのプロトンｎｍｒ
スペクトルで特徴付けられた。対応の５．６−トランス
異性体、１α−ヒドロキシ−２５−ケト−５，６−トラ
ンス−２７−ノルビタミンＤ３３−アセテートは１１２
ｍ１で溶出し、純粋な形で取り出された。

このようにして得られた３−アセテート生成物１１（Ｒ
＝ニアセチル）は、エーテル（０，５ｍ１．ｌ　と０、
　］、ＭＫＯＨ／ＭｅＯＨ（０，１ｍ］−）の溶液中で
加水分解された。加水分解は１時間、室温で行うと完全
であり、次いで水を加え、混合液をエーテルで抽出した
。抽出物を水と食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、
溶剤を蒸発させて、上記例６で証明した同じ生成物につ
いての構造及びデータと正確に一致する紫外線、核磁気
共鳴及びマススペクトルを示す２．９ｍｇの１α−ヒド
ロキシ−２５−ケト−２７ノルビタミンＤ、（化合物ヱ
）を生成した。

５．６−トランス生成物の３−アセテート誘導体の全く
同じ加水分解により、１α−ヒドロキシ−２５−ケト−
５，６−トランス−２７−ノルビタミンＤｘ（ＵＶ：ん
ｍａｘ２７３ｎｍ　；　マススペクトルｍ／ｅ４００　
　（Ｍ”″）　、　１５２．１３４　）を生した。

！携笠放括皿 雄の乳離れしたばかりのねずみ（ホルツマン社、マディ
ソン、ウィスコンシン州）を吊下式ワイヤーケージに収
容し、以下の分析に用いる前に、２〜３週間、スダらの
（Ｊ　、　Ｎｕｔｒ、　１００．１０４９（１９７０１
）　、低カルシウムのビタミンＤ欠乏食の餌を随意に与
えた。

腸のカルシウム輸送 上記のねずみは６匹ずつ６つのグループに分けられ９５
％エタノール中０．０５ｍ１に溶解した試験化合物を１
回分の投薬で頚静脈内注射で与えられた。グループ１の
コントロールグループのねずみは、溶剤ビヒクル（０，
０５ｍ１の９５％エタノール）だけが与えられた。それ
らのねずみを、注射２４時間後に首を切り殺し、マーチ
ンとデル−力の技術（Ａｍ、　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、
　２１６．１３５１　（１９６９１）によってカルシウ
ム輸送活性を測るために、その十二指腸が用いられた。

結果を下記の表に示す。

１　　　　　　ＥｔＯＨ１）１α，１±０．２２　　　
　１２．５ｎｇ１．２５−（ＯＨＩ２Ｄ３’　　　４．
６　±０．２３　　０．５μｇ化合物７”　　　２．３
±０．２４　　２５μｇ化合物７　　３２±０．３５　
　　１２．５μｇ化合物７　　３．２±０．４６２５μ
ｇ化合物７　　　３．７±０．３”　　１．２５−（Ｏ
Ｈ１２Ｄ３＝１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３ ５化合物７＝１α−ヒドロキシー２５−ケト２７−ノル
ビタミンＤ３ 菖カルシウム流通しく血清カルシウム濃度の上昇） 上記のようにして餌を与えられたねずみは、それぞれ６
匹ずつのグループに分けられ、０．０５ｍ１の９５％エ
タノール（コントロールグループ）又は０．０５ｍ１の
９５％エタノールに溶解した種々の量の試験化合物（下
記表に示したように）を、頚静脈内注射で与えられた。

その物質を１回の投与により、犠牲にする６又は２４時
間前に与えた。そのねずみを、上記指示した時間後着を
切って殺し、血液を集め、血清を得るために遠心分離に
かけた。アリコートの血清（０，１ｍ１ｌ　を１．９ｍ
ｌの０．１％の塩化ランタン溶液と混合し、原子吸収光
スベクトロホ１〜メーター（パーキン　エルマーモデル
ｌ０−２１４）で血清中のカルシウム濃度（試験化合物
による骨カルシウム遊離の指標）を測定した。結果を下
記の表に示した。

ＥｔＯＨ４，２±０．１　３．７±０．２（コントロー
ル） １２．５μｇｌ、２５１０Ｈ）２Ｄ−”　　４．５±０
．２　４．７±０．２０．５００μｇ化合物７１′４．
５±０．１　３．６±０．１２．５μｇ化合物７５．２
±０．１　３．９±０．２１２、５μｇ化合物７　　５
．３±０．２　４．３士０．２２５ｕｇ化合物７　　　
５．２±０．１　４．４±０．３ａ１，２５　　（ＯＨ
）２Ｄｚ＝１ａ、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３ ０化合物７＝１α−ヒドロキシー２５−ケト−２７−ノ
ルビタミンＤ３ 上記データから１α−ヒドロキシ−２５−ケト２７−ノ
ルビタミンＤ３　（化合物７）は言明したようなビタミ
ンＤ様活性を示すことが明白である。特に、この事につ
いて注目に値するのは迅速に活性が開始することであり
、（上記表の６時間のポイントを参！Ｒ）、そしてそれ
は、これまで知られている最も迅速に作用するビタミン
Ｄ３誘導体である１　、　２５　　（ＯＨ１２Ｄ　３の
それに比べることができる。

生物学的活性なビタミンＤ３類似体としての用途以外に
、本発明の化合物は、また他の所望のビタミンＤ化合物
調製の合成中間体として有用である。例えば、このｌα
−ヒドロキシ−２５−ケトビタミン化合物をメチルグリ
ニヤール試薬（例えばＣＨ３ＭｇＢｒ又はＣ１，Ｍｇ１
）又はメチルリチウム試薬で処理すると、知られている
ビタミンＤ３の最も効力のある代謝物質であるｌα、２
５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ３を生しる。その２５−
ケト誘導体は、このようにこの極めて望ましい代謝物質
の簡単かつ直進的な調製の出発物質として役立つことが
できる。さらに重要なことは、その２５ケトン誘導体は
、高度に放射性の形の１．２５（ＯＨＩ２Ｄ　３合成の
出発物質として役立つことができる。したがって、その
ケトンをトリチウム化メチルグリニヤールもしくはメチ
ルリチウム試薬で処理することにより、直接（２６，２
７−”Ｈ）　−１，２５−（（］）Ｉ１２０３を、及び
適当な１４Ｃ−標識付は試薬との同じ反応により（２６
，２７’Ｃ）−１，２５−（ＯＨＩ２Ｄ３を提供する。

この方法によって、極めて比活性の高い、放射性標識を
付けた１、２５　　［０Ｈ）２Ｄａが単一の容易に実施
できる反応段階によって調製される（例えば、比活性８
０　Ｃｉ／ｍｍｏｌｅの（２６，２７−３Ｈ）１．２５
ｉ０Ｈ１２Ｄ３が調製される）。同じように、トリ重水
素−もしくは”Ｃ−標識付けの１．２５ｉ０１（＋２Ｄ
３は、ケトン（７）を、市販の入手し得る同位体標識骨
はハロゲン化メチル（例えばＣ２ＨａＩ、”ＣＨ３Ｉな
ど）を用いる周知の方法で簡単に調製される適切な同位
体標識骨はグリニヤールもしくはアルキルリチウム試薬
で処理することにより容易に調製される。

５．６−トランスビタミンＤ３化合物は、この技術分野
で周知のように紫外線照射により対応の５．６−シス異
性体に異性化されるので、前記の方法によって得られる
５、６−１−ランス−１α−ヒドロキシ−２５−ケト−
２７−ノルビタミンＤ３生成物はその５．６−シス生成
物への光化学的転換によって有用である。

本明細書において、゛°低級アルキル°゛という語は炭
素ｌから約４のメチル、エグール、イソブチル、５ｅｃ
−ブチル、ｔ−ブヂル基のようなアルキル基を意味し、
そして゛アシル°°という語は炭素原子数１から４の脂
肪族アシル又はベンゾイルを意味し、これはホルミル、
アセチル、ベンゾイル又はニトロベンゾイル基のような
アシル基を包含する。

（発明の効果） 本発明の化合物はビタミンＤ様活性で特徴づけられる化
合物の調製にきわめて有用である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）１α，３β−ジヒドロキシ−２７−ノル−コレス
   ト−５−エン−２５−オン及びそのアシル化物（ただし
   アシルは炭素原子数１〜４の脂肪族アシル又はベンゾイ
   ルである）。