JPH02215327A - 養魚類の疾病の予防方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は養殖魚類の疾病による斃死を予防する方法に関
する。

〈従来技術〉 魚類の養殖は近年魚類の生態の解明、飼育技術の向上に
伴って、多種類の魚類を用いて行なわれるようになった
。しかし、単位面積当りの魚体数密度が天然条件下とは
比較にならないほど高いこと、しばしば自然の浄化能力
を越えた形で飼育が行なわれることなどから各種の疾病
により多聞死を附く事例がしばしば報告されている。

抗生物質などの薬剤による治療も試みられているが種々
の制約があり有効な方法とは言えない。

特に出荷直前においてはかかる薬剤の使用は事実上困難
なことから疾病による養魚業者の損害は計り知れない。

く本発明が解決しようとする課題〉 本発明は薬剤の使用によらず魚類の疾病の発症を防止す
ることにより出荷時期に拘らず魚類を疾病から護る方法
を提供せんとするものである。

〈課題を解決するための手段〉 本発明者は、上述の目的を達成せんとして種々研究した
ところ、養魚用の飼料に魚肉由来のペプチドを添加して
飼育すると、魚類の免疫力が上昇し、それにより細菌類
等の各種疾病の原因菌が体内に侵入してもこれを死滅し
うることを見い出し本発明を完成するにいたった。

養魚用飼料に添加すべき魚肉ペプチドとしては特に限定
はないが、経済性の観点から比較的安価でかつシーズン
により著るしく左右されることなく入手出来るサバ肉の
ペプチドが好適に使用される。特に好ましいものとして
は、特公昭５３−３１９３５号による魚肉エキスが挙げ
られる。

上記魚肉由来のペプチド（以下魚肉ペプチドという）は
上記飼料に０．１〜１０＠匿パーセント添加し、魚類に
給餌する。餌料への添加は配合飼料の場合には予じめ飼
料ｗＡ製時に行なえばよく、また市販の養魚用飼料を用
いる場合には給餌時に行なえばよい。

本発明に係る魚類の疾病を予防する方法は、養殖魚類、
例えば、ブリ類、タイ類、アジ類、サケ類、ヒラメ、フ
グ類、エビ類、カンバチ、キス、ボラ、イサキ、カマス
などの高水産のもの、ウナギ、コイ、マス類、アユ、テ
イラビア、フナ類、スツポン、ドジョウ、ナマズ、キャ
ットコイシュなどの淡水産ものなど広範囲の魚類に適用
可能である。

対象の疾病としては、ビブリオ病、連鎖球菌、せっそう
病、類結節病、カナムチリス病（えらぐされ病）、伝染
性すい臓壊死症（ＩＰＮ）、伝染性造血器壊死症＜ＩＨ
Ｎ）、赤ひれ病、エロモナス症、シュードモナス症、エ
ドワジエラ症、潰瘍病、腎臓病、えら病、ウィルス性出
血性敗血症などが挙げられる。

本発明に係る予防方法は、上記魚肉ペプチドを魚類に投
与することにより魚類の生体防御機構に好影響を与え、
免疫力を高めて病源菌の攻撃から魚類を守る方法である
ため、少なくとも一定ｍ間、好ましくは７日〜３０日間
連続して投与することが必要であり状況に応じてこの操
作を間欠的に繰り返してもよい。

従って、稚魚などの養魚池の放流するに先き立って１〜
２週間、上記魚肉ペプチドを含む飼料で給餌して免疫力
を高め放流後の環境の激変によるストレスなどからの免
疫力の低下を防止し、もって疾病による斃死を防止する
方法として利用できる。

また、飼育環境の急激な変化が予測される場合など予じ
め上記魚肉ペプチドを含む飼料で飼育するなどの方法と
して利用可能である。

給餌量は、魚種、大きさなどにより適宜選択すればよい
が通常は魚体重の１．２〜２．０％で、これを１日１回
投与すればよい。

く作用〉 かかるメカニズムにより免疫力が増加するのかは判然と
しないが、上記魚肉ペプチドを含む飼、料で飼育した場
合、魚類の血清の溶菌作用の増加が認められて居り、こ
の増加が免疫力の増大をもたらし疾病による斃死の予防
が出来るものと考えられる。

以下本発明を実験例をもって説明するが、勿論本発明は
この実験例によりなんら限定されるものではない。

実験例 １、生菌攻撃に対する抵抗性　（１） く供試魚〉　平均体重８３．０９のニジマスを１試験区
につき９尾実験に用いた。実験には屋外の容ｆ１１１６
５０ＴｒＬ”コンクリート水１１（１水量５、０１／Ｗ
ｉｎ　）で攻撃区ごと別々の水槽で試験を行なった。試
験期間中の水温は１４．４℃から１７．０℃で、平均水
温は１５．６℃だった。

く飼料〉　試験区としてペプチド区、対照区を作り、ペ
プチド区には０．５％ペプチドを市販飼料に添加したベ
レット状飼料を、対照区には無添加のベレット状市販飼
料を給餌した。これらのベレットで７日間与え、それ以
降は試験区、対照区共に無添加のベレットを与。（た。

給ｆＡ量は、魚体重の１．５％看として、これを１日に
１度与えた。

く攻撃菌〉　ニジマスより分離したＡＣ！ｒ０１０ｎａ
ｓｓａｌｉｏｎｉｃｉｄａ　Ｍ　Ｚ　８５０１株を０．
３％イースト加Ｈ１寒天培地で２５℃、４８時間培養を
行ない、集菌した後、滅菌生理食塩水で３回遠心洗浄（
３，０ＯＯｒｔｎ　、１０分間）を行ない、ＯＤ６□ｏ
ｏ１１．２に調整したものを攻撃菌液とした。攻撃には
、この菌液を腹腔内に０．２℃接種した。

く試験区の設定〉　ペプチド区、対照区ともに７日間所
定のベレットを与え、実験開始８８目にＡ、　ｓａｌｍ
ｏｎｉｃｉｄａの生菌浮遊液（００１，２）６２０ｎｌ を腹腔内に０．２ａｅ接種した。攻撃後１０日間は、全
ての試験区で無添加のベレットを与え、供試魚の生死を
観察し、死亡した供試魚については、腹腔内、牌臓、腎
臓より０．３％イースト加Ｈｉ寒天培地で菌の分離を行
ない、＾、　ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａの感染を確認し、
ペプチド添加飼料ベレットによる抗病性の獲得について
の検討を行なった。

く結果〉　ペプチド区は、攻撃後６日に供試魚が１尾死
亡がみられたのみであり、生存率は８８．９％と高く、
攻撃から死亡が認められるまでの１１間も長かった。対
照区は、攻撃後３．４日に死亡がみられ、９尾中４尾が
死亡しており、生存率が５５．６％で、低くなった。攻
撃後に死亡した全供試魚は共通して腹部から出血し、牌
臓の腫大がみられた。また、各試験区で死亡した供試魚
に対し、菌の分離を行なった結果、死亡した全ての供試
魚よりＡ、　ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａが分離された。

この実験により、魚肉由来のペプチド添加飼料を給餌す
ることにより生菌攻撃に対する抗病性の獲得が認められ
た。

２、生菌攻撃に対する抵抗性　（２１ く供試魚〉　平均体１７５．５ｇのニジマスを１攻撃区
につき２６尾、合計４攻撃区、１０４尾を実験に用いた
。実験には屋外の容１９９０７ＦＬ３コンクリート水槽
（流水量２．５１／Ｗｉｎ　）を４槽用意し、各攻撃区
ごと別々の水槽で試験を行なった。試験期間中の水温は
１５．５℃から１８．０℃で平均水温は１６．５℃だっ
た。

〈飼料〉　前述の試験と同一とした。

く攻！菌〉　前述の試験と同一とした。

〈試験区の設定〉　ペプチド区、対照区ともに、７日間
それぞれの飼料で給餌後、それ以降は無添加のベレット
を与えるとともに経時的に攻撃を行ない、その供試魚の
生死を観察し、ペプチド添加飼料給餌による抗病性の獲
得および持続性についての検討を行なった。攻撃は、ペ
プチド添加飼料給餌終了１，３，７，１０日後に合計４
回行ない、それぞれ第１．第２．第３．第４攻撃区とし
た。

各攻撃区には、ペプチド区および対照区として１３尾ず
つ、計２６尾のニジマスを用いた。死亡した供試急は、
腹腔内、牌臓、腎臓より０．３％イースト加Ｈ１寒天培
地で菌の分離を行ない、Ａ、　５ａｌｌＯｎｉＣｉｄａ
の感染を確認した。

〈結果〉　第１攻撃区では、攻撃を行なった翌日に、ペ
プチド区は１３尾全てが、対照区では１１尾が死亡した
。死亡した供試急について菌分離を行なったところ、全
ての供試急より＾、　ｓａｌｍｏ−ｎｉｃｉｄａが分離
されたが、同水槽で飼育していた、攻撃を行なっていな
いニジマスも死亡したことより、死亡の原因はＡ、　５
ａｌｌＯｎｉＣｉｄａによる攻撃ではなく、水質などの
攻撃以外の要因で死亡したと思われる。第２攻撃区では
、ペプチド区の死亡期間が攻撃２．３日後の２日間と短
いのにたいし、対照区では攻撃２，４，５．６日後と長
く、生存率もペプチド区が高い値を示した。第３攻撃区
も同様に、ペプチド区は対照区に対し死亡期間が短く、
高い生存率を示した。また、第４攻撃区においては、ペ
プチド区では全ての供試急が生存したが、対照区の生存
率は第３攻撃区の対照区と同じであった。各試験区で死
亡した供試急に対し、菌の分離を行なった結果、死亡し
た全ての供試急よりＡ、　ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａが分
離された。

今回の実験により７日間ペプチドを摂取した供試急の抗
病性はペプヂド摂取終了後１０日目にも持続しているこ
とが認められた。

３、供試無血清の溶菌活性および殺菌活性体１７５０ｇ
のニジマスを、０．５％ペプチド添加ベレットを用い、
７日間給餌した後１．３．１００日目供試急より血清を
採取し、血清の溶菌活性および殺菌活性を測定した。対
照には、無添加ベレットで飼育したニジマスを用いた。

給餌量は、魚体重の１．５％酸を１日に１度与えた。

く血清の分離〉　供試急の尾柄部より注射器によって採
血した模、３０００　ｒｕで１０分間の遠心操作により
血清を分離した。分離されたｒｆｎ清は、−２０℃で凍
結保存した。

く溶菌活性の測定〉　測定用基質として、ＨｉＣｒＯＣ
ＯＣＣＩＪ３１ｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓの乾燥菌体を
用いた。

基質はＰＢＳに懸濁した後、菌体を均一にするため超音
波処理を行ない、ＯＤ　　　における透過３０ｎｌ 率が１５％となるように調整し、基質液とした。

この基質液７容に供試急より採取した血清１容を加え、
２０℃で１時間反応させた後、０Ｄ５３゜。１で透過率
を測定しその差を以て溶菌活性度とした。

〈殺菌活性の測定〉　殺菌活性に用いる菌体は、Ｅｓｃ
ｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉをＨＩ寒天培地で３７℃２
４時間培養して実験に用いた。菌体は、ＰＢＳ　（＋）
で２．５Ｘ１０９に調整し、細菌浮遊液とした。

供試急の血清には、生血清および４５℃で３０分の加熱
処理をした加熱血清を用いた。測定には、ＰＢＳ　（＋
）で４倍に希釈した血清とＩｔ菌浮遊液を等量混和し２
５℃で６時間反応させた後、供試菌の生存率を平板培養
法によって求め殺菌活性とした。

〈結果〉　溶菌活性を測定した結果、ペプチド添加１ｉ
料で飼育した供試急の血清は、１．３．１００日目も対
照より若干高い値を示した。殺菌活性の測定では、生血
清は加熱血清に比べ高い殺菌活性を示したが、ペプチド
区と対照区とを比べた場合には、差はほとんど見られな
かった。加熱血清では、生血清の場合より殺菌活性は低
下したがペプチド区は対照区に比べ高い殺菌活性を示し
、特に７日間ペプチド添加飼料を与えた翌日に採取した
血清では高い値を示した。

表−２ ７日間ペプチド添加ペレットで飼育した供試急より採取
した血清の溶菌活性 供試急 溶菌活性度（ΔＯＤ） ペプチド区　１日目 ３日目 １００日 目照 表−３ ７日間ペプチド添加ペレットで飼育した供試魚より採取
した生血清および加熱血清（４５℃。

３０ｓｉｎ）の殺菌活性 ペプチド区１日目　　−４，１０−２，７５３日目　　
　−３，４０−２，１０ １００１０日目−３，９５−２，１５ 対照　　　　　　　　−３，６５−１，８０く効果〉 以上の実験例より明らかな如く、本発明に係る方法によ
り魚類の免疫力を増加させ疾病による斃死の予防が出来
、この方法は魚類の養殖業者にとって有望な方法と考え
られる。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）魚類の養殖用飼料に魚肉由来のペプチドを０．１
   〜１０重量パーセント添加したものを養殖魚類に給餌し
   て魚類の免疫活性を高めることにより疾病による斃死す
   るのを予防する方法。
2. （２）魚肉由来のペプチドがサバ肉エキスである請求項
   １の方法。
3. （３）養殖魚類がニジマスである請求項１の方法。