JPH02111785A - スフインゴ糖脂質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野」 本発明はオニヒトデ（ＡＣ＆ｎｔｈ＆Ｂｔｅｒ　ｐｌａ
ｎｃｔ）由来で、大脳皮質神経細胞生存維持作用を有す
るスフィンゴ糖脂質に関するものである。

〔従来の技術及びその課題〕

スフィンゴ糖脂質は、動植物の細胞膜全形成する脂質二
重層の構成成分でめシ、細胞の分化、相互識別などに関
与すると言われている。

従来、Ｓｔ皮動物門に属するヒトデ類からもセレプロシ
ド（セラミド−モノへキンシト）セラミドーゾへキンシ
ト、ガングリオシドなどのスフィンゴ糖脂質が数植得ら
れているが（Ｔ、Ｋｏｍｏｒｉ　ｅｔａｌ、　Ｌｉｅｂ
ｉｇｓ　Ａｎｎ、　Ｃｈｅｍ、　、　１９８０　、６５
３）、いずれもセラミド（長ｆｉａ塩基と脂肪酸）Ｓの
組織を異にする混合′＃（分子種）のままでるり、単離
式れたスフィンゴ糖脂質についての構造解析や生理活性
の検討はおこなわれていない。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らは、海洋産物であるオニヒトデ（Ａｃａｎｔ
ｈａｓｔｅｒ　ｐｌａｎｃｉ　）から新規なガングリオ
シドを単離し、その構造決定及び生理活性を検討したと
ころ、このものは下記式（１）で衣わされ、大脳皮質神
経細胞生存維持作用を有するものであることを見出し、
本発明を完成した。

すなわち、本発明は次の式（１） （式中、Ｒは炭素数１０〜２５、好ましくは１３〜２１
の直鎖アルキル基を、Ｒ′は炭素数１０〜２０、好まし
くは１１〜１７の直鎖アルキル基を示す） で表わされるスフィンゴ糖脂質を提供するものでｂる。

本発明のスフィンゴ糖脂質（１）は、例えば、オニヒト
デをクロロホルムとアルコール類（特にメタノール）の
混合溶媒で佃出し、＃縮径溶媒分画（後述の実施例１を
参照）を行い水溶性分画全逆相及び順相カラムクロマト
で精製することによシ得ることができる。

本発明のスフィンゴ糖脂質には、その代表的なものとし
て（Ｉ）式中Ｒ’＝　＋ＣＨｚ　）　１７ｃＨｓ　、Ｒ
’　＝モＣＨ鵞）　１１　ＣＨｓでろるＡＧ−２−１、
（１）式中Ｒ＝＋−ＣＨｚ）ｔｓｃＨｓ　、Ｒ’＝　＋
−ＣＨｚ）ｓｙＣＨｓでめるＡＧ−２−３及び（Ｉ）式
中Ｒ＝ヤＣｋＬｚ　）　ｚ□Ｃ山、　Ｒ’＝＋ＣＨ２）
１□ＣＭ。

でろるＡＧ−２−５が含まれ、これらは逆相高速液体ク
ロマ）　（）ＩＰＬ、Ｃ）が分離可能でるる。

次に、上述の如くして得られた本発明のスフィンゴ糖脂
質（１）について、その大脳皮質神経細胞生存維持作用
を試験した結果を示す。

ＭＴＴ法： ラット胎仔（１６−１８日１）の大脳皮質を、デイスフ
９−ゼとＤＮアーゼにより解離し、無血清培地に懸濁し
た。？リオルニテンでコートした９６穴マルチプレート
に６４００細胞／ウエルの密度で播種しく９０μｔ／ウ
エル）、ＡＣ−２−５をＤＭＳＯに沼かして添加（最終
濃度１０．０　ｐ？／ｍｌ）後、炭酸ガスインキュベー
ター中で２０時間培養した。そして１０μｔのＭＴＴ”
溶液を添加しく最終濃度０．１５■／ＩＲｔ）、更に４
時間培養を続けた。

ｌＯＯμｔのイソｆ０７９ノール−０，０８ＮＨＣ１を
加え反応を停止させ、５５０ｎｍを測定波長、６９０ｎ
ｍを参照波長とし、吸光度を測定した。この結果を下表
に示す。

来ＭＴＴ：　　３−（４，５−ジメチルチアゾール２−
イル）−２，５−ジフェニル テトラゾリウムプロミド この°結果から明らかなように、通常の培養条件下では
時間とともに生存大脳皮質神経細胞数が減少してゆくが
、ＡＧ−２−５の添加により神経細胞が保護され、残存
する生細胞数が増えた。

〔発明の効果〕

本発明のスフィンゴ糖脂質（＋）は、上記の通り大脳皮
質神経細胞生存維持作用を有するので、例えば老人性痴
呆、アルツハイマー病、７９−キンノン病等の神経退行
性疾患の治療薬としての用途を有するものである。

〔実施例〕

次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明する。

実施例１゜ オニヒトデ５２−のクロロホルム−メタノールエキスを
水と酢酸エチル−ｎ−ブタノール混液で分配し、水層を
濃縮乾固後、クロロホルム−メタノール混液で抽出した
。このクロロホルム−メタノール可沼部を逆相および順
相カラムクロマトで精製し、順相ＴＬＣ上単一ス？ット
ヲ示す成分（ＡＣ−２）１．２ｆ’を得た。

実施例Ｚ 上記のようにして得られたＡＧ−２は、工Ｒでアミドの
吸収を示し、１３ＣＮＭＲではオキシ脂肪酸を有する、
フィトスフィンゴシン型セラミドに特壱のシグナルが見
られた。また、　ＣＮＭＲのシグナル、ネガティブ高速
原子衝撃マススペクトロメトリー（ＦＡＢＭＳ　）のイ
オンピークから、ＡＧ−２は糖５個を有するフィトスフ
ィンゴシン型ガングリオ７ド分子種と判断され、その糖
部構造は以下の如く明らかにした。

まず、１３ＣＮＭＨの知見、メタツリシス、ＴＭＳ化、
ガスクロ分析の結果から構成糖はＮ−アセチル７ノイラ
ミン酸（ＮＡＮＡ）、グルコース（Ｑｌｃ　）各１モル
、ガラクトース（Ｇａｌ）３モルよりなり、各糖の結合
順序はネガティブＦ’ＡＢＭＳにおけるフラグメンテー
ションから、ターミナルヘキソース→ヘキソース→ＮＡ
ＮＡ→ヘキソース→ヘキソースであることが判った。

次にＡＧ−２の完全メチル化体から得たアルシト−ルー
アセテートのＧＣ−ＭＳ、完全メチル体のｍｅｔｈａｎ
ｏｌｙｚａｔｅのアセテートのＧＣ−ＭＳ分析から、タ
ーミナルへキソフラノース（１モル）、３位結合ヘキソ
ピラノース（１モルＬ　　４位結合ＮＡＮＡ（１モル）
、４位結合へキソピラノース（２モル）の存在が判った
。

更に、ＡＧ−２をピリシン−水混液中８０℃で加熱して
部分氷解すると、セラミド−ラクトシト及びオリゴ糖が
得られた。このオリゴ糖はその完全メチル化体の電解脱
離マススペクトロメトリー（ＦＤＭＳ）　、アルシト−
ルーアセテートの分析の結果から、Ｇａｆｆ（１→３）
Ｇａｌｐ（１−＋４）ＮＡＮＡからなるトリサツカライ
ドであった。

以上の化学的知見、ＡＧ−２の１３ＣＮＭＨにおけるア
ノメリック炭素のシグナルの挙動等から、ＡＧ−２は、
式０）で表わされる化合物の混合物であると判断された
。

ＡＧ−２： ｍｐ−１５３−１５６℃ ネガティブＦＡＢＭＳ（ｍ／ｚ）［１５３７，１５６５
゜１５７９．１５９３．１６０７［−ＨＪ　　３１３ｃ
旙侃〔６１１０，５（ｄ）、　１０４．５（ｄ）、　１
０４．２（ｄ）、　１００．８（ｓ）　、　９６．４（
ｄ）　） 実施例３ ＡＧ−２の成分の分離はＭｅＯ）Ｌ−Ｈ２ｏ−ｐｉｃＡ
　　ｋ用いた逆相ＨＰＬＣ［カラム：Ｅ期−２１５１，
３μ溶媒＝９７％ＭｅＯＨ−ｐｉｃＡ　（１００：　５
　）流速：１、２　ｍｔ／　ｍｉｎ　〕で行い、ＡＧ−
２−５に単離した。

そしてこのもののｇ−１２１ｊｃ　ＮＭＲ、ネガティブ
ＦＡＢＭＳ１メタツリシスにより得られる脂肪酸メチル
エステルの同定およびネガティブＦ　Ａ　Ｂ　Ｍ　Ｓよ
り得られる分子型等から同定した。

”　ｐｉｃＡ　（イオン抑制剤；商品名ンまた、同様に
してＡＧ−２−１及びＡＧ−２−３を単離した。

以下余白 以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒは炭素数１０〜２５の直鎖アルキル基を、Ｒ
   ′は炭素数１０〜２０の直鎖アルキル基を示す） で表わされるスフインゴ糖脂質。 ２、Ｒが炭素数１３〜２１の直鎖アルキル基、Ｒ′が炭
   素数１１〜１７の直鎖アルキル基である請求項第１項記
   載のスフインゴ糖脂質。 ３、請求項第１項記載のスフインゴ糖脂質を有効成分と
   する神経退行性疾患治療薬。