JPH01151525A

JPH01151525A - 生理活性ポリペプタイド類含有組成物

Info

Publication number: JPH01151525A
Application number: JP62310615A
Authority: JP
Inventors: Ikufumi Miura; 三浦　郁文; Kikuo Kotani; 小谷　喜久男
Original assignee: Toyo Jozo KK
Current assignee: Toyo Jozo KK
Priority date: 1987-12-08
Filing date: 1987-12-08
Publication date: 1989-06-14

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】「産業上の利用分野」本発明は、生理活性ポリペプタイド類の器具、容器等へ
の吸着防止を目的とした組成物に関する。

「従来の技術」カルシトニン、パラサイドホルモン（ＰＴＨ）、インシ
ュリン等の生理活性ポリペプタイド類はペプタイドホル
モンや生理活性物質として極めて重要な生理活性を示し
、医薬品としてこれらを投与する場合、その有効性と安
全性を確保するために他の薬剤以上に、より厳密に投与
量を守る必要がある。従来より生理活性ポリペプタイド
類を水溶液で保存した場合に、ガラス製やプラスチック
製などの器具、容器等へ生理活性ポリペプタイド類が吸
着することが知られており、しかも例えばインシュリン
においては、この吸着がインシュリンの濃度の低い時に
、より起きやすいことが示されている（薬剤学　Ｖｏｌ
、３９．１０７−１１１（１９７９））。通常これらの
生理活性ポリペプタイド類は極めて微量で活性を示すこ
とより、その投与溶液は極めて低い濃度であり、前述の
通り吸着が起こり易い状態にあるといえる。さらに吸着
による損失率は、当初の配合量が少ないだけに大きなも
のであり薬剤の有効性を確保する上で解決するべき重要
な問題点である。

生理活性ポリペプタイド類の吸着防止を目的として加え
る物質（以下、吸着防止剤と略す）には、従来、メチル
セルロース、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ヒドロ
キシプロピルセルロース、エチレンオキサイドプロピレ
ンオキサイド共重合体、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレー
ト、レシチン、ＰＯＥ−ソルビタンモノラウレート、メ
チルサイクロデキストリン、ソルビタン脂肪酸エステル
、ＰＯＥ−オキチルフェニルエーテル、ＰＯＥ−ラウリ
ルエーテル、バシトラシン、ポリエチレングリコール６
．０００．ゼラチン、ＢＳＡＳＨ３Ａ。

尿素およびカゼイン等が知られている。

「発明が解決しようとする問題点」注射液等の非経口投与製剤は、安全であり、且つ安定で
なければならず、さらにその溶液は澄明なものが好まし
いが、前述の吸着防止剤においてはこれらの条件を必ず
しも満足するとは言えなかった。例えば、レシチンにつ
いては、吸着を防止するのに必要な０．００１％以上の
濃度では、その水溶液はうるみ（極軽微な濁りを生ずる
こと）を生じるためプロピレングリコール等の溶解補助
剤の併用を必要とし、しかもレシチン自身に充分な安定
性がなかった。

その他の吸着防止剤においても、安全性の問題のため吸
着防止に必要な量を使用しえなかったり吸着防止の効果
が弱いなどの問題があり、さらに有用な吸着防止剤の開
発が求められている。

「問題点を解決するための手段」本発明者らは、前述の問題点を解決するべく挿接の物質
の吸着防止効果を研究した結果、水酸化レシチンにより
所期の目的が達成されることを知り本発明を完成するに
至った。

すなわち、本発明は、生理活性ポリペプタイド類と水酸
化レシチンを含有してなる組成物に関する。

本発明において、生理活性ポリペプタイド類とは、ペプ
タイド結合を有する化合物で医薬品として投与されるに
当り吸着防止を必要とするものなら特に限定されないが
、例えばカルシトニン、ＡＣＴＨ（副腎皮質刺激ホルモ
ン’）　、ＰＴＨ（バラサイロイドホルモン）、インシ
ュリン、セクレチン、オキシトシン、成長ホルモン、ア
ンギオテンシン、ブラデイキニン、β−エンドルフィン
、グルカゴン、グイノルフィン、パップレシン、ソマト
スタチン、ガストリン、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）
、プロラクチン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ
−ＲＨ）　、エンケファリン、ニューロテンシン、心房
性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）　、インターフェ
ロン等およびそれらの誘導体または塩類が挙げられる。

これらの物質は生理活性ペプタイドホルモンとして極め
て重要な生理活性を有し、例えばカルシトニンは血清カ
ルシウム低下作用を有するペプタイドホルモンの総称で
、天然型カルシトニンまたはその１ｉ４Ｕ体が知られて
いる。天然型カルシトニンとしては、ウナギカルシトニ
ン、サケカルシトニン、ブタカルシトニン、ヒトカルシ
トニン、ニワトリカルシトニン等が挙げられ、内分泌細
胞から分泌されたカルシウム調節ホルモンとしての機能
を果たしている。また類似体としてはニルカドニア　（
（ＡＳＵ’−’　）ウナギカルシトニン）、〔Ａｓｕｌ
、’？　）ヒトカルシトニンなどが知られている。

またＰＴＨ（バラサイロイドホルモン）とは血清カルシ
ウム上昇作用を有するペブクイドホルモンで３４〜８４
個のアミノ酸配列を有し、天然型ＰＴＨまたはその類似
体が知られている。それらを例示すれば、ヒ゛トーバラ
サイロイドホルモン（１−８４）（ｈｕｍａｎ　　ｐａ
ｒａｔｈｙｒｏｉｄ　　ｈｏｒｍｏｎ；ｈ−ＰＴＨ）（
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　　１７．５７２３　（１９
７８））、ｈ−ＰＴＨ（１３４）（Ｈｏｐｐｅ　　Ｓｅ
ｙｌｅｒ’　　ｓ　　　Ｚ、　　Ｐｈｙｓｉｏｌ、Ｃｈ
ｅｍ、、　　３５５．　４１５　　（１９７４））、ｈ
−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ２（特開昭５８−９６０５２
号公報〕、　（Ｎｌｅ”’）ｈ−ＰＴＨ（１−３４）　
　、　〔Ｎｌｅ””、Ｔｙｒ”）ｈ−ＰＴＨ（１３４）
　　（特開昭５５−１１３７５３号公報〕、（Ｎｌｅｓ
・”）ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ２（特開昭６１−２
４５９８号公報〕、（Ｎ　ｌ　ｅ””、　Ｔｙ　ｒ”）
ｈ−ＰＴＨ（１，３４）ＮＨ２（特開昭６０−３４９９
６号公報〕、ラット−ＰＴ）Ｉ（１−８４）　　（Ｊ、
Ｂｉｏ　　１．　Ｃｈｅｍ、、　　２５９　　（５）。

３３２０　（１９８４）　、ラット−ＰＴＨ（１−３４
）　　（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、、　　１１７　　（３
）。

１２３０　（１９８５））、ウシ−ＰＴＨ（１−８４）
　　（Ａｍ、　　Ｊ、Ｍｅｄ、、　　５０．　６３９　
　（１９７１））、ウシ−ＰＴＨ（１−３４）　、ウシ
−ＰＴＨ（１−３４）　ＮＨ２等（Ｐｔｈｏｂｉｏｌ。

ｇｙ　　　ａｎｎｕａｌ　　　１１．　５３　　（１９
８１））等が挙げられる。

本発明に用いられる水酸化レシチンとは、レシチンの脂
肪酸部分に存在する不飽和結合の一部または全部を水酸
化して得ることができ、−船釣にはレシチンを原料とし
て有機酸例えば、乳酸の存在下で過酸化水素と反応させ
ることにより得られる。水酸化の度合は、過酸化水素の
添加量の加減により制御することができる。出発原料で
あるレシチンは、一般に大豆レシチン、トウモロコシレ
シチン、綿実レシチン、ビーナツツレシチンなどの植物
性レシチンや卵黄レシチンに代表される動物性レシチン
を用いることができる。さらにまた水酸化の度合は、上
記に示した方法の他、予め不飽和結合に水素添加または
その他の置換基を導入したレシチンを原料とすることも
できる。

本発明に用いられる水酸化レシチンは、好ましくはその
水酸基価（衛生試験法・注解、日本薬学会編、金原出版
株式会社、１９８０年　ｐ１８３参照のこと）が１５０
〜４００であればよい。すなわち通常の原料レシチンお
よび方法では、水酸基価４００以上に水酸基を導入する
ことは困難であり、また逆に水酸基価が少なすぎる場合
には吸着防止の効果が減じうるみを生じやすくなる。

本発明の水酸化レシチンは、レシチン同様に安全であり
、レシチンの脂肪酸部分に存在する不飽和結合の一部ま
たは全部を水酸化して得られるものであるのでレシチン
に比べより親水性であり、反応性の高い不飽和結合が減
じているため安定性に優れているものである。

本発明において生理活性ポリペプタイド類を吸着させる
器具、容器壁とは、ガラス製またはプラスチック製の容
器壁等であり、例えば各種のガラス、ポリプロピレン、
ポリエチレン、ポリスチレンアクリロニトリル、ポリス
チロール、ポリカーボネート、ポリメチルペンチル等の
材質のものが挙げられる。これらの器具、容器はアンプ
ル、注射筒、輸液ボトル、点滴用導出管等であって、非
経口用製剤の製造時、貯蔵時、使用時等に使用されるも
のである。

吸着防止に必要な水酸化レシチンの配合量は、主に生理
活性ポリペプタイド類の種類や容器壁の接触面積および
その材質に応じて変動しうるので適宜量を決めることが
望ましいが、必ず、しもそれぞれに応じて決定すること
ができないので一般的には生理活性ポリペプタイド類含
有物を水溶液または水性懸濁液とした場合において０．
０００５％以上配合すればよい。また吸着防止剤自身が
何らの薬理作用を呈しないようにするため上限量として
１．０％程度存在すれば充分である。

さらに好ましくは、顕著な吸着防止効果を示す　　　　
−０，００１％以上であり、うるみの生じない０゜０３
％以下の濃度で使用すればよい。

次に本発明の生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチ
ンとを含有する組成物の形態について述べろと、本発明
においては生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチン
とが必ずしも当初から同一の組成物中に共存している必
要はなく使用時に混合することを目的として組み合わせ
た組成物であってもよい。またそれらの組成物は、生理
活性ポリペプタイド類が単独で溶液状態である場合を除
き溶液状態であるか乾燥固体状態であるかを問わない。

すなわち以下に示す数種の形態が挙げられる。

■生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチンとが同一
の水溶液または水性懸濁液中に直接共存するように配合
された組成物。

■生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチンとが同一
の乾燥固体中に直接共存するように配合された組成物。

■生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチンとがそれ
ぞれ別の乾燥固体として与えられ用時に両者を混合せし
めるように組み合わせた組成物。

■生理活性ポリペプタイド類が乾燥固体として与えられ
、水酸化レシチンが水溶液または水性懸濁液として与え
られ用時に両者を混合せしめるように組み合わせた組成
物。

また上記の組成物を乾燥固体状態で得るには凍結乾燥法
が有利に利用される。なお、乾燥固体状態の組成物の使
用に際しては、用時に生理食塩液等で溶解すればよいこ
とは言うまでもない。

本発明の組成物は上記に述べた形態において、さらに適
当な安定化剤、界面活性剤、溶解補助剤、緩衝剤、等張
化剤または増量剤等を適宜選択し加えてよいものである
。

次いで本発明を実施例に沿って、以下にさらに説明する
が、本発明はこれらによって何ら限定されるものではな
い。

実施例ルシノールＳＨ（水酸化レシチン；日光ケミカル社製、商
品名、水酸基価＊Ｈ３２１）を生理食塩液によ’ｖｏ、
０００５％、０．００１％、０゜０５％、０．０１％の
各濃度の溶液（Ａ液）とし、別にサケカルシトニン２０
０μｇを生理食塩液１ｍｌに溶解した液（Ｂ液）および
ｈ−ＰＴＨ（１−３４）３００μｇを生理食塩液１ｍｌ
に溶解した液（Ｃ液）を各々調製する。各濃度のＡ液２
ｍ２にＢ液またはＣｉをそれぞれ２０μｉ別途添加し、
この液１　ｍ　ｌをポリプロピレン製試験管（内径；４
．５ｍｍφ、長さ；　７０　ｍ　ｒｎ　）およびガラス
製試験管（内径；５．Ｏｍｍφ、長さ２８５ｍｍ）に入
れ、１時間放置後高速成体クロマトグラフィーにてサケ
カルシトニンおよびｈ−ＰＴＨ（１−３４）の残存率を
求めた。なおレジノールＳＨ無添加の液を対照とした。

高速液体クロマトグラフィーの条件は、Ｎｕｃｌｅｏｓ
ｉｌ　　５Ｃ１Ｂ、４．６Ｘ２５０ｍｍ、波長２１０ｎ
ｍ、移動層はＣ）（３ＣＮ−０，１％ＴＦＡ（３２：６
８）とした。

＊水酸基価の測定法（衛生試験法・注解、日本薬学全編、金原出版株式会社
、１９８０年　ｐ　１８３）試料１ｇを無水酢酸・ピリジン溶液５　ｍ　ｌと加熱し
アセチル化する。冷却後、水を加え加熱し過剰の酢酸を
フェノールフタレインを指示薬として０．１または０．
５Ｎエタノール性ＫＯＨで滴定する。別に空試験を設は
以下の式で算出する。

Ｓ：試料ｇ数　　　ａ：本試験ＫＯＨ滴定ｍｌ数ｂ＝り
試験ＫＯＨ滴定ｍＪ数Ｆ：エタノール性ＫＯＨの規定数遊離脂肪酸の中和に要した分を酸価としてプラスする。

結果ｌ）ポリプロピレン製試験管に対する吸着防止効果２）ガラス製試験管に対する吸着防止効果いずれにおい
ても０．００１％以上で顕著な吸着防止効果が認められ
た。

実施例２水酸化レシチンとレシチンとの吸着防止効果の比較を行
った。

実験方法１）レジノールＳＨ添加溶液の調製０．０２％サケカルシトニン生理食塩溶液２０μｌを０
．００１％レジノールＳＨ生理食塩溶液２ｍｌに添加混
合する。

２）卵黄レシチン添加溶液の調製卵黄レシチンを用い、レジノールＳＨと同様に０．００
１％の澄明な溶液とするためにはプロピレングリコール
０．４％（対液）の併用を必要とする。すなわち、卵黄
レシチン添加溶液の調製方法は卵黄レシチン（旭化成社
製）０．００１部にプロピレングリコール０．４部を混
合し、生理食塩液１００部に溶解し、この液’１ｍ１２
に０．０２％サケカルシトニン生理食塩溶液２０μｌを
添加混合するものである。

評価は、１）６５０部ｍにおける透過率測定による澄明
度に関する評価と、２）各法１　ｍ　ｌをポリプロピレ
ン製試験管（内径Ｈ４，５ｍｍφ、長さ；７０ｍｍ）に
入れ、１時間放置後高通液体クロマトグラフィーにてサ
ケカルシトニンの残存率を求め吸着防止効果の評価を行
った。

結果１）６５０部ｍにおける透過率実施例３生理食塩液を用いて０．０３％レジノールＳＨ溶液１０
ｍ１を調製し、同様に０．０５％サケカルシトニン（シ
グマ社製）生理食塩溶液１００μｌを調製し両溶液を混
合し、１バイアル当り１ｍｌずつ充填する。これをさら
に以下の条件で凍結乾燥し粉末を得た。

く凍結乾燥の条件〉一４０℃で凍結後、＋２５℃まで漸次昇温しながら真空
乾燥を行い、＋２５℃を保ち二次乾燥を行った。

実施例４実施例３において用いた０、０５％サケカルシトニン生
理食塩溶液の代わりに０．０５％ｈ−ＰＴＨ（１−３４
）（シグマ社製）を用い同様の操作により凍結乾燥粉末
を得た。

実施例５実施例３において用いた０、０５％サケカルシトニン生
理食塩溶液の代わりに０．０５％ｈ−ＡＣＴＨ（１−３
９）（シグマ社製）を用い同様の操作により凍結乾燥粉
末を得た。

実施例６実施例３において用いた０、０５％サケカルシトニン生
理食塩溶液の代わりに０．０５％ｈ−エンドルフィン（
シグマ社製）を用い同様の操作により凍結乾燥粉末を得
た。

実施例７実施例３において用いた０、０５％サケカルシトニン生
理食塩溶液の代わりに０．０５％ｈ−インシュリン（シ
グマ社製）を用い同様の操作により凍結乾燥粉末を得た
。

実施例８実施例３において用いた０、０５％サケカルシトニン生
理食塩溶液の代わりに０．０５％セクレチン（ｐｏｒｃ
ｉｎｅ）（シグマ社製）を用い同様の操作により凍結乾
燥粉末を得た。

「発明の効果」以上説明したように、本発明によれば、水酸化レシチン
を添加することによってカシトニン等を始めとする生理
活性ポリペプタイド類の器具、容器等への吸着が効率的
に防止され、医薬としてこれらを投与する場合、投与量
を不正確とすることな（その有効性と安全性が確保され
る。また本発明を製造時や保存時に用いるなら、高価格
であるこれら生理活性ポリペプタイド類が吸着により失
われることを防ぐ経済的メリットは大きいものである。

特許出願人　　東洋醸造株式会社

Claims

【特許請求の範囲】

（１）生理活性ポリペプタイド類と水酸化レシチンを含
有する組成物。
（２）生理活性ポリペプタイド類が、カルシトニン、Ａ
ＣＴＨ、ＰＴＨ、インシュリン、セクレチン、オキシト
シン、成長ホルモン、アンギオテンシン、ブラデイキニ
ン、β−エンドルフィン、グルカゴン、ダイノルフィン
である特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
（３）水酸化レシチンの水酸基価が、１５０〜４００で
ある特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
（４）水酸化レシチンの配合量が、該組成物を水溶液ま
たは水性懸濁液とした場合において０．０００５％〜１
．０％である特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
（５）該組成物に安定化剤、界面活性剤、溶解補助剤、
緩衝剤、等張剤または増量剤を併用してなる特許請求の
範囲第１項に記載の組成物。
（６）該組成物が、水溶液または水性懸濁液あるいは用
時溶解を目的とした凍結乾燥粉末である特許請求の範囲
第１項から第５項に記載の組成物。