JP7483699B2 - 腫瘍の進行を制御するためまたは抗腫瘍免疫を回復するための、マクロファージと、照射された白血球との共培養物から得られる上清 - Google Patents
腫瘍の進行を制御するためまたは抗腫瘍免疫を回復するための、マクロファージと、照射された白血球との共培養物から得られる上清 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7483699B2 JP7483699B2 JP2021520460A JP2021520460A JP7483699B2 JP 7483699 B2 JP7483699 B2 JP 7483699B2 JP 2021520460 A JP2021520460 A JP 2021520460A JP 2021520460 A JP2021520460 A JP 2021520460A JP 7483699 B2 JP7483699 B2 JP 7483699B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pharmaceutical preparation
- preparation according
- leukocytes
- macrophages
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 title claims description 26
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 title claims description 13
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 title claims description 9
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 title claims description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 title claims description 7
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 title claims description 4
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 title claims description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 43
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 15
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 5
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 4
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims description 4
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 4
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 claims 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 22
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 22
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 4
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 2
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 2
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 210000004985 myeloid-derived suppressor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 230000005904 anticancer immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000037451 immune surveillance Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004980 monocyte derived macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000722 protumoral effect Effects 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 230000000381 tumorigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012762 unpaired Student’s t-test Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4614—Monocytes; Macrophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4622—Antigen presenting cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0645—Macrophages, e.g. Kuepfer cells in the liver; Monocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/11—Coculture with; Conditioned medium produced by blood or immune system cells
- C12N2502/1157—Monocytes, macrophages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/30—Coculture with; Conditioned medium produced by tumour cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、医薬製剤を用いて腫瘍誘発性炎症を解消するための方法に関する。
炎症反応は、生物の自然な防御反応の一部である生物学的プロセスであるが、多数の病理学的反応にも関連している。
特に、炎症は、クローン病や関節性リウマチなどの炎症性腸疾患を含む炎症性疾患を引き起こすと共に、肥満、糖尿病、およびうつ病などの神経疾患の病原体にも関与している。炎症誘発性サイトカインなどの炎症誘発性因子は、肥満、腫瘍形成および癌の進行中の炎症に関与し、それを支持している。実際、慢性炎症は、免疫系による腫瘍の治療の失敗を促し、腫瘍の発生を維持する上で重要な役割を果たしている。炎症は、依然として癌の急性危険因子である。
慢性炎症は、炎症反応の部分的または不完全な解消に関連しており、遺伝的、環境的または感染性の因子によって促進される場合がある。特に、慢性炎症は、首の癌の危険性を増加させるヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）に関連する炎症やＢ型およびＣ型肝炎ウイルスならびに肝細胞癌の出現に関連する炎症、またはヘリコバクターピロリに関連する炎症や腺癌またはリンパ腫の発症など、ウイルス感染によって引き起こされる癌の進行に関与している。また、クローン病や潰瘍性大腸炎などの自己免疫疾患の慢性炎症も、大腸癌を発症する危険性の増加に関連する。最後に、刺激物への露出または肥満によって引き起こされる炎症も、腫瘍誘発活動を促進する。
したがって、炎症を引き起こす生物の攻撃中に、炎症の解消を引き起こすことが重要である。炎症が完全に解消されない場合、炎症が慢性化して、上述した病状につながる可能性がある。
炎症メディエーターが、特に癌免疫編集段階で抗腫瘍サーベイランスに不可欠であり、適応した抗腫瘍免疫応答を確立できる場合、後者が腫瘍誘発の役割、特にＴＮＦ（腫瘍壊死因子）を果たすことができる。実際、腫瘍の炎症性微小環境は、腫瘍の成長、血管新生、浸潤および転移部の形成を促進する可能性がある。腫瘍の発生は、癌細胞の増殖の増加による腫瘍細胞の浸潤、ならびに腫瘍性微小環境におけるアポトーシスおよび血管新生を介したそれらの死滅に対する抵抗性の結果である。
例えば、ＴＮＦは、腫瘍内の調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）や骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の誘引を促進し、抗腫瘍反応をさらに弱める可能性がある。逆説的に、腫瘍細胞の免疫原性死を誘発する細胞毒性療法は、従来の抗癌治療の選択における免疫系の大きな役割を実証することが可能になった。ここでは、同じアプローチが、腫瘍の成長を刺激するこれらの治療法により死滅した細胞を介して二次的な腫瘍誘発効果と関連付けられることとして説明する。
慢性炎症性疾患では、炎症の解消を緩和することも、炎症の自然な解消を再活性化させるため、すなわち炎症反応の停止を可能にするための任意の治療手段の１つである。現時点では、炎症性因子を中和または破壊する標的治療アプローチには限界があることが示されている。さらに、病状の結果でしかない炎症性因子を中和するだけで、クローン病などの複雑な病状を制御することができるというのは、幻想である。しかしながら、効果的な解決策を再確立して炎症を解消することで、炎症反応の核心部を治療することができる可能性がある。
したがって、炎症の解消を促進し、抗癌治療によって死滅した腫瘍細胞の排除を改善することは、癌治療における主要な課題となっている。同様に、炎症の解消を目標とすることで、炎症性病変の根本原因を制御することができるようになる。
本発明は、特に免疫サーベイランスおよびその発生からの腫瘍の脱出を阻害して、炎症の解消を誘発することができる解消因子（resolutome）、すなわち解消誘発性因子の組み合わせを投与すること、および効果的な抗腫瘍免疫を再確立することで、癌を予防するための方法に関する。
欧州特許第２９４１２５７号には、病理学的免疫応答の予防または治療に使用される医薬製剤が記載されている。この医薬製剤は、食細胞とアポトーシス細胞との共培養物から得ることができる上清を含む。この特許では、医薬製剤は、例えば関節性リウマチ（ＲＡ）または慢性炎症性腸疾患（ＣＩＢＤ）などの自己免疫疾患の病状の治療に使用される。また、この医薬製剤は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の治療にも使用される。
本発明は、異なる目的を有する。すなわち、本発明の目的は、照射されたマクロファージと白血球との共培養物によって得られた上清を用いて腫瘍誘発性炎症を解消する方法を提供することである。この上清は、欧州特許第２９４１２５７号に記載されている上清と比較して予想外の利点を多く有する。特に、本発明は、上述した特許の上清よりも多くの解消誘発因子を提供する（図１ａ）。また、本発明は、上述した特許よりも生物学的優位性を有する（図１ｂ）。
本発明による医薬製剤は、炎症反応の解消が失敗した場合に、炎症反応の効果的な解消を再確立し、炎症反応の停止を可能にするために使用することができる。したがって、本発明の目的は、特に、上述した医薬製剤を用いて、慢性炎症を解消すること、および腫瘍の成長を促進する炎症を解消することである。
本発明は、まず、腫瘍誘発性炎症の解消を標的にすることで、抗腫瘍免疫応答を回復させ、慢性的な抗炎症反応を停止させることができるという事実に基づいている。
この段階では、炎症は、腫瘍が確立し始めたときに有益であるが、その後の治療の失敗を促進するという負の効果があることに留意されたい。本発明は、それを制御することを目的としている。
本発明による方法は、白血球から単球に由来するマクロファージを生成することによって得られた上清を使用することと、それらを以前に照射された白血球と共に保存してそれらの共培養を可能にすることと、その細胞によって生成された上清に含まれる因子を集めることと、を含む。
炎症を解消するように意図された本発明による医薬製剤の上清は、以下の説明において「Ｒｅｓｏｌｖｉｘ」と呼ぶ。
これらの因子の注入によって、複数の実験モデルにおける活性な炎症反応（関節炎、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、大腸炎、実験的自己免疫性脳脊髄炎）を解消することができ、また、組織の修復を促進することもできる。また、興味深いことに、このアプローチによって、抗癌免疫を回復することができ、腫瘍の退縮を促進することもできる。
以下に、本発明による上清（Ｒｅｓｏｌｖｉｘ）の製造方法を、非限定的な一例として記載する。
白血球は、全血から密度勾配によってＤ０上に単離され、洗浄され、当該技術分野における当業者によって一般的に使用される、例えばＲＰＭＩ１６４０として知られる培地のような塩、アミノ酸およびビタミン基を含む所定の培地に再懸濁され、次いで、第１のポケットに６０％、第２のポケットに４０％配分される。次いで、第１のポケットは、Ｍ－ＣＳＦ（マクロファージコロニー刺激因子）であり得る分化因子を受け取り、細胞の生存能力を維持する条件下で、例えば３７℃、５％のＣＯ２で数日間、好ましくは３日間保存され、次いで、上述した新鮮な所定の培地を再び受け取る。次いで、第１のポケットは、細胞の生存能力を維持する条件下で、例えば３７℃、５％のＣＯ２で数日間、好ましくは４日間保存された後、そのまま放置されてマクロファージが生成される。次いで、第２のポケットは、低温、好ましくは＋１０℃未満、より好ましくは＋５℃未満の温度で保存される。７日目に、例えばＸ線によって第２のポケットが照射され、次いで、第１および第２のポケットは、それぞれの培地から解放される。次いで、第２のポケットは、当業者に知られている、例えばＭＥＭとして知られる塩、アミノ酸およびビタミン基を有する分泌培地内に配置され、第１のポケットに移され、細胞の生存能力を維持する条件下で、例えば３７℃、５％のＣＯ２で保存される。この保存期間中に共培養が実施されて、調整された上清が生成される。これには数日、好ましくは２日かかることがある。本明細書において、「調整された上清」とは、細胞に由来する因子を含む上清を意味する。この共培養期間に次いで、上清は、新しいポケットに集められ、濾過され、非常に低温、好ましくは－８０℃の領域で保存される。次いで、この上清は、上述した方法に従って他の血液提供者から得られたバフィーコートから生成された他の上清と有利に混合され、次いで、この混合物は、単位用量に配分され、凍結乾燥されてから、または凍結乾燥されることなく、保存される。
より詳細には、腫瘍の成長のインビボモデルを使用した。得られた結果を以下に説明する図に示す。
図１は、Ｒｅｓｏｌｖｉｘという名称の上清が得られた新しい製造方法における生物学的および活動の比較を示す図である。新しい製造方法によって、ＥＬＩＳＡ試験で定量化された抗炎症性サイトカインＴＧＦ－β（ａ）や、フィトヘマグルチニンで刺激された単球におけるＴＮＦの生成を阻害する生物学的試験で評価された生物学的優位性（ｂ）などの、より多くの解消誘発因子を得ることができる。従来の方法において３５のサンプルからのデータおよび新しい方法において８９のサンプルからのデータを、ＴＮＦ生成の阻害率（％）として表し、平均±平均の標準誤差で示されている。＊＊＊＝ｐ＜０．００１、＊＊＊＊＝ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定である。この図において、従来の方法は、上述した欧州特許第２９４１２５７号に記載されている上清をもたらす方法に関する。
図２は、腫瘍の成長の追跡を示す図である。白血病細胞が注入された後にＤ０またはＤ７においてＲｅｓｏｌｖｉｘで治療したまたは治療していない白血病のマウスＣ５７Ｂ１／６において、腫瘍株ＥＬ４－Ｌｕｃ＋（ルシフェラーゼ注入後）から放出された生物発光を定量化した（ａ）。グループあたり５匹の動物を用いた２つの代表的な実験から得られたデータであり、グループ平均±平均の標準誤差で示されている。＊＝ｐ＜０．０５、＊＊＊＊＝ｐ＜０．０００１、対賦形剤、２元配置ＡＮＯＶＡ検定である。腫瘍細胞の注入から２１日後に取得した、未処置のマウス５匹およびＤ０においてＲｅｓｏｌｖｉｘを投与したマウス５匹の生物発光（賦形剤）の代表的な画像が示されている（ｂ）。放出された発光の強度（濃い青から黄色へ）は、増殖した腫瘍細胞の数に比例するように関連する。
図３は、Ｒｅｓｏｌｖｉｘによる治療後の腫瘍の進展を示す図である。腫瘍株Ｂ１６－ＯＶＡ（ａ）または腫瘍株ＥＬ－４（ｂ）をマウスＣ５７Ｂ１／６の右腹部脇腹に皮下注射して、腫瘍の体積（ｍｍ３）を経時的に評価した。癌細胞の注入日（Ｊ０）またはその７日後（Ｊ７）に、Ｒｅｓｏｌｖｉｘを注入した。グループあたり５匹の動物を用いた６つの結果を示す２つの代表的な実験（ａおよびｂ）から得られたデータであり、平均±平均の標準誤差で示されている。＊＝ｐ＜０．０５、＊＊＝ｐ＜０．０１、＊＊＊＝ｐ＜０．００１、対賦形剤、２元配置ＡＮＯＶＡ検定である。
図４は、Ｒｅｓｏｌｖｉｘの存在下での癌細胞株ＥＬ－４のインビトロ細胞増殖の進展を示す図である。３日間毎日細胞の数を数えることで、細胞増殖を評価した。２つの代表的な実験から得られたデータであり、３回分の平均±平均の標準誤差で示されている。＊＝ｐ＜０．０５、＊＊＊＊＝ｐ＜０．０００１、対Ｒｅｓｏｌｖｉｘ、２元配置ＡＮＯＶＡ検定である。
図５は、免疫不全マウスにおける固形腫瘍のＲｅｓｏｌｖｉｘ治療を示す図である。免疫不全マウスＲＡＧ－γ／ｃの右腹部脇腹に癌株ＥＬ－４を皮下注射して誘発した腫瘍の体積（ｍｍ３）を、様々な時間で測定した。癌細胞の注入日（Ｄ０）またはその７日後（Ｄ７）に、Ｒｅｓｏｌｖｉｘを注入した。グループあたり５匹の動物を用いた実験から得られたデータであり、平均±平均の標準誤差で示されている。
上記のデータは、Ｔリンパ腫白血病（バイオイメージングによる腫瘍の成長の追跡を可能にする腫瘍株ＥＬ４－ルシフェラーゼ＋）を保有するマウスにＲｅｓｏｌｖｉｘを注入したところ、興味深いことに、腫瘍の成長が退縮したことを示している（図１）。
固形腫瘍（皮下注射した腫瘍株ＥＬ－４またはＢ１６－ＯＶＡ）を用いた２つ目のモデルで同じ観察を実施した。ここで、Ｒｅｓｏｌｖｉｘの注入によって、腫瘍の大きさを縮小させることができた（図２）。
これらの結果から、Ｒｅｓｏｌｖｉｘ治療は、直接的な細胞毒性効果により、インビボで腫瘍株の成長に直接影響を与える可能性があることが示された。この可能性を評価するために、インビトロでの追加実験を実施した。これらの実験から、Ｒｅｓｏｌｖｉｘの存在下での腫瘍細胞ＥＬ－４の培養物が、腫瘍株の成長をむしろ促進することが示された（図３）。これらのデータは、Ｒｅｓｏｌｖｉｘによる治療後にインビボで観察された腫瘍の成長の抑制が腫瘍細胞に対する薬剤の直接的な細胞毒性効果とは関連していないことを示している。
さらに、治療の効果が腫瘍細胞に直接作用しないという事実は、抗腫瘍免疫の回復が、上記治療によるものであることを示している。実際、免疫系が欠落している場合、すなわち腫瘍を保有する免疫不全マウスＣ５７Ｂ１／６ ＲＡＧ－γ／ｃにおいて、Ｒｅｓｏｌｖｉｘ治療は、インビボでの腫瘍の成長に影響を与えない（図４）。
腫瘍モデルにおけるＲｅｓｏｌｖｉｘの注入は、腫瘍細胞の移植時（Ｄ０）またはその７日後（Ｄ７）に実施される。このようにして様々な時期で炎症を制御することで、腫瘍の成長を制御することができ、抗腫瘍免疫を再確立することができる。
上記を鑑みて、本発明によるＲｅｓｏｌｖｉｘを使用することで、抗腫瘍免疫を回復することができ、および／または腫瘍の進行を停止することができると考えられる。より一般的には、本発明による医薬製剤は、癌に関連する炎症を標的化、制御、抑制、および解消するために使用することができる。これにより、前述したように、抗腫瘍免疫を回復することができ、および／または腫瘍の進行を停止することができる。
特に、本発明による上清は、単独でまたは他の治療法と共に、人間医学または獣医学における癌の治療に使用することができる。癌は、特にリンパ腫、白血病、肉腫および癌腫、より正確にはＴ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、メラノーマおよび結腸癌に代表されるものである。
Claims (11)
- 腫瘍の進行を制御するため、または抗腫瘍免疫を回復するために使用される医薬製剤であって、マクロファージと照射された白血球との間の共培養液の上清を含み、
ここで、前記マクロファージは、Ｍ－ＣＳＦ（マクロファージコロニー刺激因子）の存在下で培養された白血球から由来する、医薬製剤。 - 前記マクロファージは、白血球であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬製剤。
- 前記白血球は、全血から得られるバフィーコートから単離されることを特徴とする、請求項１および２に記載の医薬製剤。
- 前記白血球の一部は、洗浄され、所定の培地に再懸濁され、次いで、分化因子を受け取る第１のポケット内に配置され、細胞の生存能力を維持する条件下で数日間、好ましくは３日間保存され、次いで、新鮮な所定の培地を再び受け取り、次いで、数日間、好ましくは４日間そのまま放置されてマクロファージが生成されることを特徴とする、請求項３に記載の医薬製剤。
- 前記白血球の別の部分は、＋１０℃未満の温度で保存される第２のポケット内に配置されることを特徴とする、請求項４に記載の医薬製剤。
- 前記第２のポケットは、照射された培地から解放された後に、その培地から解放され、次いで、細胞の生存能力を維持する条件下で、前記第２のポケットおよびその内容物を分泌培地内に配置されることを特徴とする、請求項５に記載の医薬製剤。
- 前記第２のポケットの内容物を、事前にその培地から解放された前記第１のポケットに移され、２つの前記ポケットのセットは、調整された上清が生成されるまでの期間、細胞の生存能力を維持する条件下で保存されて、白血球間の共培養物が生成されることを特徴とする、請求項６に記載の医薬製剤。
- 前記共培養物から得られた上清は、新しいポケットに集められ、濾過され、－８０℃を超えない低温で保存されることを特徴とする、請求項７に記載の医薬製剤。
- 単独でまたは他の抗癌治療と共に、癌の治療に使用されることを特徴とする、請求項１～８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
- 前記癌は、特にリンパ腫、白血病、肉腫および癌腫、より正確にはＴ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、メラノーマおよび結腸癌の一種であることを特徴とする、請求項９に記載の医薬製剤。
- 請求項９または１０の記載において使用される医薬製剤であって、請求項１～８のいずれか１項に従って複数の白血球源から得られた上清の混合物を含むことを特徴とする、医薬製剤。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1800636A FR3082730B1 (fr) | 2018-06-21 | 2018-06-21 | Methode de resolution de l'inflammation pro-tumorale a l'aide d'une preparation pharmaceutique |
| FR1800636 | 2018-06-21 | ||
| PCT/EP2019/066406 WO2019243544A1 (fr) | 2018-06-21 | 2019-06-20 | Surnageant de coculture entre macrophages et leucocytes irradiés utilisé pour controler une progression tumorale ou pour restaurer une immunite anti-tumorale |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021528494A JP2021528494A (ja) | 2021-10-21 |
| JP7483699B2 true JP7483699B2 (ja) | 2024-05-15 |
Family
ID=63896221
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021520460A Active JP7483699B2 (ja) | 2018-06-21 | 2019-06-20 | 腫瘍の進行を制御するためまたは抗腫瘍免疫を回復するための、マクロファージと、照射された白血球との共培養物から得られる上清 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210145874A1 (ja) |
| EP (1) | EP3810157B1 (ja) |
| JP (1) | JP7483699B2 (ja) |
| KR (1) | KR20210022577A (ja) |
| CN (1) | CN112334143A (ja) |
| CA (1) | CA3101508A1 (ja) |
| DK (1) | DK3810157T3 (ja) |
| ES (1) | ES2935969T3 (ja) |
| FI (1) | FI3810157T3 (ja) |
| FR (1) | FR3082730B1 (ja) |
| PL (1) | PL3810157T3 (ja) |
| WO (1) | WO2019243544A1 (ja) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001028573A2 (en) | 1999-10-21 | 2001-04-26 | The Center For The Improvement Of Human Functioning, International, Inc. | Monocyte conditioned medium for cancer treatment |
| WO2014106666A1 (en) | 2013-01-07 | 2014-07-10 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Disease therapy using a tolerogenic pharmaceutical preparation |
| JP2018507208A (ja) | 2015-02-18 | 2018-03-15 | エンリヴェックス セラピューティクス リミテッド | 癌治療のための免疫療法とサイトカイン制御療法との組み合わせ |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20000049096A (ko) * | 1996-10-11 | 2000-07-25 | 린다 에스. 스티븐슨 | 혼합 림프구와 조합된 종양세포를 사용하는 암 면역요법 |
| EP1005531A2 (en) * | 1997-07-21 | 2000-06-07 | Cerus Corporation | Method of treating leukocytes, leukocyte compositions and methods of use thereof |
| US20080089875A1 (en) * | 2006-10-13 | 2008-04-17 | Zheng Cui | Methods and compositions for the treatment of cancer |
| EP2723381A4 (en) * | 2011-06-21 | 2015-03-18 | Univ Johns Hopkins | FOCUSED RADIATION FOR THE REINFORCEMENT OF IMMUNE TREATMENTS AGAINST NEOPLASMS |
-
2018
- 2018-06-21 FR FR1800636A patent/FR3082730B1/fr active Active
-
2019
- 2019-06-20 DK DK19734724.8T patent/DK3810157T3/da active
- 2019-06-20 EP EP19734724.8A patent/EP3810157B1/fr active Active
- 2019-06-20 WO PCT/EP2019/066406 patent/WO2019243544A1/fr active Application Filing
- 2019-06-20 KR KR1020207036661A patent/KR20210022577A/ko not_active Application Discontinuation
- 2019-06-20 CN CN201980041571.0A patent/CN112334143A/zh active Pending
- 2019-06-20 FI FIEP19734724.8T patent/FI3810157T3/fi active
- 2019-06-20 JP JP2021520460A patent/JP7483699B2/ja active Active
- 2019-06-20 US US17/252,818 patent/US20210145874A1/en active Pending
- 2019-06-20 ES ES19734724T patent/ES2935969T3/es active Active
- 2019-06-20 CA CA3101508A patent/CA3101508A1/fr active Pending
- 2019-06-20 PL PL19734724.8T patent/PL3810157T3/pl unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001028573A2 (en) | 1999-10-21 | 2001-04-26 | The Center For The Improvement Of Human Functioning, International, Inc. | Monocyte conditioned medium for cancer treatment |
| WO2014106666A1 (en) | 2013-01-07 | 2014-07-10 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Disease therapy using a tolerogenic pharmaceutical preparation |
| JP2018507208A (ja) | 2015-02-18 | 2018-03-15 | エンリヴェックス セラピューティクス リミテッド | 癌治療のための免疫療法とサイトカイン制御療法との組み合わせ |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Front Immunol，2017年，Vol. 8, Article 71，11 pages |
| J Clin Invest，1998年，Vol. 101, No. 4，pp. 890-898 |
| Jpn. J. Med. Mycol.，1997年，Vol. 38，pp. 209-214 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR3082730B1 (fr) | 2022-04-22 |
| JP2021528494A (ja) | 2021-10-21 |
| US20210145874A1 (en) | 2021-05-20 |
| DK3810157T3 (da) | 2023-02-06 |
| EP3810157A1 (fr) | 2021-04-28 |
| CA3101508A1 (fr) | 2019-12-26 |
| FI3810157T3 (fi) | 2023-02-28 |
| CN112334143A (zh) | 2021-02-05 |
| PL3810157T3 (pl) | 2023-03-13 |
| WO2019243544A1 (fr) | 2019-12-26 |
| FR3082730A1 (fr) | 2019-12-27 |
| KR20210022577A (ko) | 2021-03-03 |
| ES2935969T3 (es) | 2023-03-13 |
| EP3810157B1 (fr) | 2022-11-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Abbas et al. | An overview of cancer treatment modalities | |
| Hou et al. | Intestinal stem cells and immune cell relationships: potential therapeutic targets for inflammatory bowel diseases | |
| Goldszmid et al. | Host immune response to infection and cancer: unexpected commonalities | |
| WO2019056404A1 (zh) | 脆弱拟杆菌在制备用于治疗和预防肿瘤的药物中的应用 | |
| Das et al. | Electrical stimulation for immune modulation in cancer treatments | |
| JP2019512495A5 (ja) | ||
| Wang et al. | The pros and cons of dying tumour cells in adaptive immune responses | |
| JP7483699B2 (ja) | 腫瘍の進行を制御するためまたは抗腫瘍免疫を回復するための、マクロファージと、照射された白血球との共培養物から得られる上清 | |
| CN111346092A (zh) | 安罗替尼在制备治疗急性髓系白血病药物的新用途 | |
| Kuang et al. | Mechanism of exosomes in the tumor microenvironment in the abscopal effect | |
| Ajeawung et al. | Progress from clinical trials and emerging non-conventional therapies for the treatment of Medulloblastomas | |
| Klotskova et al. | The role of interleukin‐22 in mammalian intestinal homeostasis: Friend and foe | |
| CN107536845B (zh) | 一种防治肿瘤的药物及其用途 | |
| Mattot et al. | Combined C02-Laser and Alfa Recombinant Interferon Treatment in Five Children with Juvenile Laryngeal Papillomatosis | |
| CN111195250A (zh) | 西达本胺联合dice的应用及联合药物 | |
| Yu et al. | Killing two birds with one stone: Abscopal Effect Mechanism and its application prospect in radiotherapy | |
| WO2017114215A1 (zh) | 重组人钙调磷酸酶b亚基的应用 | |
| Molina et al. | A review of IMMUNEPOTENT CRP, a modifier of biological response: efficacy and current practice | |
| Nguyen et al. | Neuroblastoma: Molecular Mechanisms and Therapeutic Interventions | |
| RU2487727C1 (ru) | Способ лечения больных с рефрактерным и рецидивным течением лимфомы ходжкина | |
| KR100522526B1 (ko) | 면역 치료용 수지상 세포의 제조방법 | |
| Oth | PAMPering immune responses: spotlight on helper cells for dendritic cell vaccination | |
| Razzaq et al. | Cancer: From Theory to Practice–Ideology of Etiology and Treatment | |
| Sobti et al. | Advanced Therapeutic Approaches in Cancer Therapy | |
| Mollick | Retinal Tumorigenesis and Neurodegeneration: Strategies to Promote Tumor Cell Death and Support Retinal Cell Survival to Preserve Vision |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220525 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230314 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230322 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230615 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230921 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20230922 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231212 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240301 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240402 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240501 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7483699 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |