JP7440126B2

JP7440126B2 - 新生物性病変治療用ペプチド含有組成物

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Publication number: JP7440126B2
Application number: JP2022541709A
Authority: JP
Inventors: エヴァンス、チャールズ; スティーヴンソン、キャメロン; エドモンズ、スザンヌ
Original assignee: サイトベーションエーエスエー
Priority date: 2020-01-07
Filing date: 2020-03-10
Publication date: 2024-02-28
Anticipated expiration: 2040-03-10
Also published as: AU2020421659A1; KR20220124765A; CA3163417A1; EP4087532A1; GB202000167D0; JP2023509508A; CN115003280A; WO2021139901A1; US20230052378A1

Description

本発明は、疣贅または他の新生物性病変の治療のための医薬組成物であって、有効成分として、配列番号１のアミノ酸配列を有するペプチドＣｙＰｅｐ－１の配列に基づく治療用ペプチドを含む、医薬組成物を提供する。本発明は、本発明の組成物を用いた疣贅または他の新生物性病変の治療方法も提供する。

疣贅は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の感染によって引き起こされる良性皮膚腫瘍（病変）である。尋常性疣贅（verruca vulgaris）は、小さくて、硬く、表面がざらざらした突起として皮膚上に現れる傾向があり、最も一般的には手にできやすい。疣贅が足の裏にできる場合、通常、足底疣贅（verruca plantaris）と呼ばれる。疣贅は、一般的に性器または肛門に発生するが、その場合は、肛門性器疣贅（condylomata acuminata）として知られている。他にも、あまり一般的ではないタイプの疣贅としては、顔または首、手、手首および膝に多発する扁平疣贅（verruca plana）、顔によくできる糸状疣贅、および手指の爪または足指の爪の周囲に集団で生じる爪囲疣贅が挙げられる。

疣贅は、通常、損傷した皮膚がＨＰＶに曝されることで、皮膚のＨＰＶ感染の主要な標的である基底ケラチノサイトにウイルスが侵入することによって発生すると考えられている。疣贅からＨＰＶが放出されることにより、直接的および間接的な人から人への疣贅の感染が起こる（Lipke, Clinical Medicine and Research 4(4): 273-293, 2006）。ＨＰＶの血清型が異なれば、疣贅の種類も異なる。例えば、皮膚の尋常性疣贅および足底疣贅は、ＨＰＶ２７、５７、２および１型が原因であることが最も多い（Bruggink et al., Journal of Clinical Virology 55(3): 250-255, 2012）。一方、性器疣贅は、ＨＰＶ６および１１型が原因であることが最も多い（Lowy & Schiller, Journal of Clinical Investigation 116(5): 1167-1173, 2006）。

疣贅は非常に一般的であるため、大多数の人が生涯のある時点で疣贅を患うと考えられている。疣贅は無害とみなされることもあるが、ほとんどの患者は不快に感じており、恥ずかしいと思っている患者も多い。ゆえに、患者の生活の質が損なわれている（Lipke、上記参照）。しかしながら、疣贅の有効な治療法は不足している。いくつかの治療法はあるものの（例えば、サリチル酸、凍結療法、レーザー治療、５－フルオロウラシル等）、それらの大部分には、治療効果についてのエビデンスがない（Sterling et al., British Journal of Dermatology 171:696-712, 2014）。成功した治療がないので、疣贅は、通常、自己限定的であるが、治癒するまでに２年かかることもある。成功したように見受けられる治療でさえも、疣贅の再発はよくある。従って、疣贅の新たな治療法が必要とされている。他の新生物性病変の新たな治療法も有益となるだろう。

ＷＯ２０１１／０９２３４７は、ＣｙＰｅｐ－１を含み、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる抗新生物性ペプチドを開示している。ＷＯ２０１１／０９２３４７に示されているように、ＣｙＰｅｐ－１は、新生細胞に対して選択的細胞毒性を有する。また、同時係属出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１９／０６６２９５において、ＣｙＰｅｐ－１をチェックポイント阻害剤と併用すると、がん治療に極めて効果的であることが立証されている。ＣｙＰｅｐ－１は、疣贅の治療に特に有効であることが分かっている。

ＣｙＰｅｐ－１は、ＨＩＶ－ＴＡＴ細胞透過性ペプチドのＣ末端に結合した腫瘍抑制タンパク質コンダクチン／アキシン２（Conductin/Axin2）のフラグメントに基づく融合ペプチドである。ＨＩＶ－ＴＡＴ細胞透過性ペプチドはカチオン性ペプチドであり、理論に拘束されることなく、新生細胞に対するＣｙＰｅｐ－１の選択的細胞毒性は、新生細胞膜に保持された負電荷によるものと考えられている（一方で、健康な哺乳類細胞の細胞膜は、より中性の電荷を持つ傾向がある）。有利なことに、ＣｙＰｅｐ－１は、標的細胞の溶解を促進するため、細胞死と同時に細胞内容物が放出される。ＨＰＶに感染した疣贅細胞に関しては、これにより、ＨＰＶ抗原も放出される。免疫系は、放出されたＨＰＶ抗原に暴露されると、Ｔ細胞応答を誘導する。その結果、疣贅の破壊だけでなく、ＨＰＶ（または少なくとも感染ＨＰＶ株）に対する持続的な免疫も得られる。従って、ＣｙＰｅｐ－１を用いた疣贅の治療は、既存の疣贅を破壊するだけでなく、その再発の可能性も阻止または抑制する。

ＣｙＰｅｐ－１は抗菌特性も有し（おそらくこれも多くの細菌細胞膜に保持された負電荷に起因する）、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の医学的に関連のある種に対して強力な殺菌効果を有することが明らかになっている（ＷＯ２０１１／０９２３４７を参照）。

本発明は、疣贅または実際には他の新生物の治療に適したＣｙＰｅｐ－１組成物を提供する。この組成物は、組成物中のＣｙＰｅｐ－１の溶解性および安定性の点で特に有利な特性を有し、かつ、疣贅治療の成功に必要な、ＣｙＰｅｐ－１の適用頻度を限定するＣｙＰｅｐ－１の徐放性を有することが示されている。このＣｙＰｅｐ－１製剤を疣贅治療に用いることが有効であることが見出された。

従って、第１の態様において、本発明は、
（ｉ）０．１％～５％の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．１％～５％の防腐剤と、
（ｉｉｉ）０．１％～５％のシリコーンと、
（ｉｖ）１０％～２０％のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．００５％～０．１％のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）１％～１０％の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）１％～１０％の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）１％～１０％のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）０．１％～５％のポリオキシル２０セトステアリルエーテルとを含む医薬水性組成物であって、前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、医薬水性組成物を提供する。

本発明の組成物は、疣贅治療に適しているが、以下に説明するように、他の目的に用いることもできる。

別の態様において、本発明は、治療に使用するための上記組成物を提供する。

別の態様において、本発明は、皮膚新生物等の、体表面の新生物の治療に使用するための上記組成物を提供する。特に、上記組成物は、疣贅の治療に用いられうる。別の実施形態において、上記組成物は、皮膚がんの治療に用いられうる。

関連する態様において、本発明は、上記組成物を投与することを含む、被験者の疣贅等の新生物を治療する方法を提供する。

別の関連する態様において、本発明は、疣贅等の新生物を治療するための薬剤の製造における、上記組成物の使用を提供する。

上記組成物において、各成分の量は、本発明の組成物中の該成分の含有率として表される。上記組成物において、また本明細書全体にわたって、全ての含有率の値は重量パーセント（％ｗ／ｗ）で示される。

従って、本発明は、治療用ペプチドを送達するための製薬上許容される組成物を提供する。これは、疣贅治療に関して特に有用であると考えられうる。すなわち、本明細書で提供される組成物は、疣贅の治療に適している。本明細書で使用されている「医薬の」または「製薬上許容される」とは、上記組成物を投与されるレシピエントにとって、上記組成物が生理学的に許容されることを意味する。本発明の組成物は、局所投与（すなわち、皮膚への投与）に適したクリーム剤である。ゆえに、本発明の組成物は、製薬上許容されるクリーム剤である。クリーム剤としては、本発明の組成物は半固体である。製薬上許容されるクリーム剤は、非毒性であり、好ましくは非刺激性であるとともに、特に標的の疣贅に有効成分（後述）を送達するための好適なビヒクルである。医薬クリーム剤としては、本発明の組成物は、水相および油相を含むエマルジョンである。本発明の組成物は、特に水中油型エマルジョンであってもよい。本発明の組成物は、好ましくは無菌である。

本発明の組成物は、水性組成物である。本明細書に記載されている水性組成物は、水を含む組成物または水で構成された組成物（composition made up with water）である。すなわち、本発明の組成物は、水に加えて、有効成分および後述する様々な賦形剤を含む。上記組成物は水性であるが、組成物の全ての成分が水に溶解しているわけではない。上述のように、上記組成物は、水相および油相の両方を含むエマルジョンである。しかし、水性組成物として、その水は、通常、上述のように水中油型エマルジョンであるエマルジョンの連続相を形成する。本明細書において、本発明の組成物が記載され、各賦形剤の含有率が合計して１００％にならない（または１００％にならないことがある）場合、組成物の残り（すなわち、残部）は水である。

上述のように、本発明の組成物は、新生物の治療に適している。「新生物」は、悪性、前悪性または非悪性のあらゆる新生物疾患を含むように広く定義されている。新生物は、制御されていない、または望ましくない細胞増殖によって特徴づけられうる。新生物は、特に、皮膚がんもしくは非悪性皮膚新生物を含む皮膚の新生物でもよく、またはクリーム剤を塗布するような体の表面または部位に発生する新生物でもよい。より詳しくは、本発明の組成物は、疣贅の治療に適している。本明細書で定義されている「疣贅」は、以下にさらに説明するように、全ての種類の疣贅を包含する。本発明の組成物を用いた疣贅または他の新生物の治療は、その有効成分によって達成される。「有効成分」という用語は、組成物の成分のうち、治療効果を有する成分、すなわち、抗新生物効果または抗疣贅効果がある成分を表すのに用いられる。本発明の組成物中の有効成分は、治療用オリゴペプチドである。被験者の疣贅または他の新生物に本発明の組成物を投与すると、治療用オリゴペプチドがそれらの疣贅または他の新生物と接触し、破壊する。従って、本発明で用いられる治療用オリゴペプチドは、抗疣贅活性、より一般的には、新生細胞に対する活性を有する。

本発明の組成物に用いられる治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、または配列番号１と少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。上述のように、配列番号１の治療用オリゴペプチド（ＣｙＰｅｐ－１）は、ＷＯ２０１１／０９２３４７に開示されている。配列番号１は、ＨＩＶ－ＴＡＴ細胞透過性ペプチドのＣ末端に結合した腫瘍抑制タンパク質コンダクチン／アキシン２のフラグメントで構成されている。上記コンダクチン／アキシン２のフラグメントは、配列番号２に記載のアミノ酸配列（配列番号１のアミノ酸番号１３～２７に相当）を有し、ＨＩＶ－ＴＡＴ細胞透過性ペプチドは、配列番号３に記載のアミノ酸配列（配列番号１のアミノ酸番号１～１２に相当）を有する。

オリゴペプチドは、ペプチド結合によってアミノ酸が互いにつながったポリマーである。本明細書で定義されているように、オリゴペプチドは少なくとも３個のアミノ酸を含むが、本明細書に記載されている治療用オリゴペプチドが３個を超えるアミノ酸を含むことは明らかである。本明細書で定義されているオリゴペプチドは、その最大長は特に限定されないが、例えば、最大で３０、４０、５０または１００個のアミノ酸を含むことがあり、それ以上を含むこともある。しかし、一般的に「オリゴ」という接頭語は、比較的少数のアミノ酸サブユニット、すなわち、２００個未満、好ましくは１００、９０、８０、７０、６０または５０個未満のアミノ酸を表すのに用いられる。従って、本発明の組成物に用いられる治療用オリゴペプチドは、２３個以上２００個以下のアミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態において、治療用オリゴペプチドは、２４、２５、２６または２７個以上のアミノ酸を含む。別の定義としては、治療用オリゴペプチドは、５０、４５、４０、３５、３０、２９、２８または２７個以下のアミノ酸を含む。従って、治療用オリゴペプチドは、サブユニットの最小数または最大数について、上記整数のいずれかで規定される範囲内の数のアミノ酸を含み得る。代表的なサブユニットの範囲としては、２３～１５０、２３～１００、２３～８０、２３～５０、２３～４０、２３～３０、２５～１５０、２５～１００、２５～８０、２５～５０、２５～４０、２５～３０、２６～１５０、２６～１００、２６～８０、２６～５０、２６～４０、２６～３０、２７～１５０、２７～１００、２７～８０、２７～５０、２７～４０、２７～３０、２７～２９および２７～２８等が挙げられる。

本発明の組成物に用いられる治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％もしくは９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。特定の実施形態において、治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列を含む。別の実施形態において、治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％もしくは９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる。別の実施形態において、治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる。

配列アラインメントを行うことによって、２つの配列（例えば、対象のオリゴペプチド配列および配列番号１に記載の配列）間の配列同一性レベルを判断することができる。配列アラインメントは、適切な方法を用いて行うことができる。
例えば、ペアワイズ（pairwise）配列アライメントには、コンピュータープログラムのＥＭＢＯＳＳＮｅｅｄｌｅまたはＥＭＢＯＳＳｓｔｒｅｔｃｈｅｒ（共にRice, P. et al., Trends Genet. 16(6): 276-277, 2000）が用いられる。一方、多重配列アラインメントには、ＣｌｕｓｔａｌＯｍｅｇａ（Sievers, F. et al., Mol. Syst. Biol. 7:539, 2011）またはＭＵＳＣＬＥ（Edgar, R.C., Nucleic Acids Res. 32(5): 1792-1797, 2004）が用いられる。このようなコンピュータープログラムは、標準入力パラメータと共に用いてもよい。標準的な入力パラメータとしては、例えば、標準的なＣｌｕｓｔａｌＯｍｅｇａパラメータ：matrix Gonnet、gap opening penalty 6、gap extension penalty 1、または標準的なＥＭＢＯＳＳＮｅｅｄｌｅパラメータ：matrix BLOSUM62、gap opening penalty 10、gap extension penalty 0.5が挙げられる。他に適切なパラメータがあれば、代わりに用いてもよい。配列アラインメントは、全体的に行わなければならず、すなわち、比較された配列の全長にわたって行わなければならない。

本発明で用いられる治療用オリゴペプチドは、タンパク質構成アミノ酸（proteinogenic amino acids）（すなわち、標準遺伝コードによってコードされるＬ－アミノ酸）のみを含み得る。あるいは、本発明で用いられる治療用オリゴペプチドは、１個以上の非タンパク質構成アミノ酸を含み得る。例えば、本発明で用いられる治療用オリゴペプチドは、１個以上のＤ－アミノ酸（例えば、１、２、３、４、５、６、７または８個以上のＤ－アミノ酸）、人間工学的（human-engineered）アミノ酸、または天然の非タンパク質構成アミノ酸（例えば、代謝過程で形成されるアミノ酸）を含み得る。使用可能な非タンパク質構成アミノ酸としては、例えば、オルニチン（尿素サイクルの生成物）； HYPERLINK "http://en.wikipedia.org/wiki/9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl" ＼o "9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl" ９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）保護アミノ酸、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）保護アミノ酸および２，２，５，７，８－ペンタメチルクロマン－６－スルホニル（Ｐｍｃ）保護アミノ酸等の人工的に修飾されたアミノ酸；およびカルボキシベンジル（Ｚ）基を有するアミノ酸が挙げられる。

治療用オリゴペプチドは、インビトロおよび／またはインビボでの安定性を、当該技術分野において公知の安定化手段または保護手段を用いて改善または向上することができ、例えば、保護基もしくは安定化基の付加、アミノ酸誘導体もしくはアミノ酸類似体の組み込み、またはアミノ酸の化学修飾等を用いて改善または向上することができる。このような保護基または安定化基は、例えばＮ末端および／またはＣ末端に付加され得る。このような基としてはアセチル基が挙げられ、他の保護基やペプチドを安定化させうる基は当該技術分野において公知である。

全てがＬ－アミノ酸からなるペプチドは、当技術分野においてＬ－ペプチドとして知られ、全てがＤ－アミノ酸からなるペプチドは、当該技術分野においてＤ－ペプチドとして知られている。「インベルソ（inverso）ペプチド」という用語は、Ｌ－ペプチドと同じアミノ酸配列を有するが、全てがＤ－アミノ酸からなるペプチド（つまり対応するＬ－ペプチドと同じ配列を有するＤ－ペプチド）を表すのに用いられる。インベルソペプチドは、それと対応するＬ－ペプチド（つまり同じアミノ酸配列のＬ－ペプチド）に対してミラー構造をもつ。インベルソペプチドは、一般的に血清プロテアーゼによる分解の影響を受けにくいため（インベルソペプチドは、その人為的な構造により、プロテアーゼ酵素に認識されない場合がある）、（Ｌ－ペプチドに比べて）臨床現場での使用に有利となり得る。特定の実施形態において、本発明で用いられる治療用オリゴペプチドは、その全てのアミノ酸はＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である。すなわち、治療用オリゴペプチドはＤ－ペプチドであってもよい。オリゴペプチド化合物は、特に、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなるＤ－ペプチドを含むか、または該Ｄ－ペプチドからなり得る。

本明細書に記載されている治療用オリゴペプチドは、当業者であれば標準的な生化学的手法を用いて合成することができる。上記オリゴペプチドがタンパク質構成アミノ酸のみを含むＬ－ペプチドである場合、組み換えＤＮＡ技術によって合成することができる。すなわち、上記オリゴペプチドをコードするＤＮＡ配列をクローン化して、発現ベクターに導入すればよい。本明細書に記載されている治療用オリゴペプチドをコードするＤＮＡ配列は、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％もしくは９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むか、または該ヌクレオチド配列からなる。このようなヌクレオチド配列は、当業者であれば容易に生成および合成することができる。

本明細書に記載されている治療用オリゴペプチドをコードするＤＮＡ配列は、当該技術分野において公知の標準的な方法を用いて、テンプレートからの増幅（例えばＰＣＲ）または人工遺伝子合成によって生成され得る。上記オリゴペプチドをコードするＤＮＡ配列は、制限酵素またはギブソン・アセンブリ等の標準的な分子クローニング技術を用いて発現ベクターに導入され得る。適切な発現ベクターは、当該技術分野において公知である。次に、発現ベクターは、標準的な手法を用いて細胞発現系に導入され得る。適切な発現系としては、細菌細胞および／または真核細胞（例えば、酵母菌）、昆虫細胞または哺乳類細胞が挙げられる。本明細書に記載されている治療用オリゴペプチドが（上述のように）細菌細胞に対して毒性があるとすれば、真核細胞は、オリゴペプチド化合物の製造により適した細胞発現系であると考えられる。

細胞発現系の代わりに、無細胞インビトロタンパク質発現系を用いて、本明細書に記載されているＬ－ペプチド化合物を合成してもよい。このような系において、オリゴペプチドをコードするヌクレオチド配列はｍＲＮＡに転写され、該ｍＲＮＡはインビトロでタンパク質に翻訳される。無細胞発現系キットは広く市販されており、例えばＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社（米国）から購入することができる。

あるいは、本発明で用いられるオリゴペプチドは、非生物系において化学的に合成され得る。Ｄ－アミノ酸または他の非タンパク質構成アミノ酸を含むオリゴペプチドは、この場合、通常、生物学的合成が不可能であることから、特に化学合成され得る。液相タンパク質合成または固相タンパク質合成を用いて、本発明で用いられるオリゴペプチド化合物を構成するポリペプチドまたはそれに含まれるポリペプチドを生成してもよい。そのような方法は当業者にとって周知であり、当業者ならば、当該技術分野において一般的で、適切な技法を用いて、オリゴペプチドを容易に製造することができる。

上述のように、本発明の組成物に用いられる治療用オリゴペプチドは、抗疣贅活性を有する。これは、被験者の疣贅に治療用オリゴペプチドを適用した場合、疣贅の治癒には、一定期間（例えば、少なくとも４週間）がかかることを意味する。例えば、疣贅が縮小したり、剥がれ落ちたりすることもあれば、疣贅を形成した皮膚が正常に戻ることもある。オリゴペプチドに抗疣贅活性があるかどうかを確認するために、数人の被験者の疣贅に、対象のオリゴペプチドを含む組成物を適用し、その結果を、プラセボ（すなわち、対象のオリゴペプチドを含まないが、それ以外は同一の組成物またはクリーム剤）で治療された被験者から得られた結果と比較してもよい。プラセボよりも、対象のオリゴペプチドを含む組成物による結果の方が優れていれば、このオリゴペプチドは、抗疣贅活性を有すると考えられ、よって本明細書で定義されている治療用オリゴペプチドを構成すると考えられる。

本発明の組成物は、０．１％～５％の範囲で治療用オリゴペプチドを含む。特定の実施形態において、上記組成物は、０．５％～２％、０．５％～２．５％または０．５％～３％の治療用オリゴペプチドを含む。好ましい実施形態において、上記組成物は、１％の治療用オリゴペプチドを含む。最も好ましくは、上記組成物は、１％のＣｙＰｅｐ－１を含む。すなわち、上記組成物は、１％の治療用オリゴペプチドを含み、この治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなるＤ－ペプチドである。

本発明の組成物は、さらに防腐剤を含む。防腐剤は、上記組成物の無菌性を維持するように機能する（すなわち、抗菌作用を有する）。特に、防腐剤は、細菌および酵母等の真菌を死滅させるか、またはそれらの増殖を抑制する殺菌特性を有し得る。従って、防腐剤は、抗細菌作用および抗真菌作用を有していてもよい。特に好ましい防腐剤は、フェノキシエタノールである。

他の好適な防腐剤としては、当該技術分野において公知であり、パラベン（メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベンおよびブチルパラベンを含む）、ソルビン酸（２，４－ヘキサジエン酸としても知られている）およびその塩（ソルビン酸ナトリウムおよびソルビン酸カリウムを含む）、ならびに安息香酸およびその塩（安息香酸ナトリウムおよび安息香酸カリウムを含む）等が挙げられる。

本発明の組成物は、０．１％以上５％以下の防腐剤を含む。特定の実施形態において、上記組成物は、０．５％以上２％以下、０．５％以上２．５％以下または０．５％以上３％以下の防腐剤を含む。好ましい実施形態において、上記組成物は、１％の防腐剤を含む。好ましくは、本発明の組成物は、０．１％以上５％以下のフェノキシエタノールを含む。特に、上記組成物は、０．５％以上２％以下、０．５％以上２．５％以下または０．５％以上３％以下のフェノキシエタノールを含んでもよい。特に好ましい実施形態において、上記組成物は、１％のフェノキシエタノールを含む。

本発明の組成物は、さらにシリコーン（ポリシロキサン）を含む。シリコーンは、上記組成物に心地よい質感を与える働きをする。通常、本発明の組成物に用いられるシリコーンは、ジメチコン（ジメチルポリシロキサン）である。ポリマーの平均長さが異なるジメチコンは、動粘度の違いによって区別される（ポリマーの平均長さが長いほど、粘度は高くなり、その逆も同様である）。ジメチコンとの関連において、動粘度は、センチストークス（ｃＳｔ）を用いて測定される。動粘度のＳＩ単位はｍ²／ｓである。動粘度１ｍ²／ｓは動粘度１０⁶ｃＳｔと同等であり、逆に、動粘度１ｃＳｔは動粘度１０^-6ｍ²／ｓと同等である。粘度は、２５℃で測定される。広範囲の粘度を有するジメチコンは、医薬組成物における賦形剤として用いることができる。例えば、組成物中のジメチコンの濃度および組成物全体としての所望の粘度に応じて、２０ｃＳｔから１０００ｃＳｔの間の粘度が適しているとされる。本発明の組成物は、２５℃における粘度が３５０ｃＳｔのジメチコン（一般的には、ジメチコン３５０ｃＳｔと称される）を含むことが特に好ましい。

本発明の組成物は、０．１％以上５％以下のシリコーン（好ましくはジメチコン）を含む。特定の実施形態において、上記組成物は、０．５％以上２％以下、０．５％以上２．５％以下または０．５％以上３％以下のシリコーン（好ましくはジメチコン）を含む。好ましい実施形態において、上記組成物は、１％のジメチコンを含む。好ましくは、本発明の組成物は、０．１％以上５％以下のジメチコン３５０ｃＳｔを含む。特に、上記組成物は、０．５％以上２％以下、０．５％以上２．５％以下または０．５％以上３％以下のジメチコン３５０ｃＳｔを含んでもよい。特に好ましい実施形態において、上記組成物は、１％のジメチコン３５０ｃＳｔを含む。

本発明の組成物は、さらにジ（エチレングリコール）エチルエーテル（ＤＥＧＥＥ）を含む。これは、一般的には、その商品名であるトランスクトールＰ（Transcutol-P）と称される。
ＤＥＧＥＥは、溶媒および浸透促進剤として作用する。「浸透促進剤」とは、被験者に本発明の組成物を適用した際に、ＤＥＧＥＥが皮膚を通した有効成分の吸収を向上させることを意味する。本発明の組成物は、１０％以上２０％以下のＤＥＧＥＥを含む。特定の実施形態において、上記組成物は、１０％以上１８％以下、１０％以上１６％以下、１２％以上２０％以下、１２％以上１８％以下、１２％以上１６％以下、１４％以上２０％以下、１４％以上１８％以下または１４％以上１６％以下のＤＥＧＥＥを含み、好ましくは１４％以上１６％以下のＤＥＧＥＥを含む。最も好ましくは、上記組成物は、１５％のＤＥＧＥＥを含む。

本発明の組成物は、さらにブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）を含む。ＢＨＡは、異性化合物である２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソールと３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソールとの混合物である。

本発明の組成物に用いられるＢＨＡは、２－ｔｅｒｔ異性体および３－ｔｅｒｔ異性体を任意の比率で含んでもよい。特定の実施形態において、ＢＨＡは、少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％または９５％の３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソールを含む。

ＢＨＡは、その芳香環に、組成物中の遊離基を隔離することができるという点で、酸化防止剤である。これにより、組成物の他の成分の酸化および分解を防ぐため、組成物の安定性が向上する。本発明の組成物は、０．００５％以上０．１％以下のＢＨＡを含む。特定の実施形態において、上記組成物は、０．０１％以上０．１％以下、０．０１％以上０．０９％以下、０．０１％以上０．０８％以下、０．０１％以上０．０７％以下、０．０１％以上０．０６％以下または０．０１％以上０．０５％以下のＢＨＡを含み、好ましくは０．０１％以上０．０５％以下のＢＨＡを含む。さらなる実施形態において、上記組成物は、０．０１％以上０．０４％以下または０．０１％以上０．０３％以下のＢＨＡを含む。最も好ましくは、上記組成物は、０．０２％のＢＨＡを含む。

本発明の組成物は、さらに流動パラフィン（鉱油としても知られている）を含む。流動パラフィンは皮膚軟化剤（または保湿剤）として機能し、上記組成物が適用される皮膚の水和を維持する。本発明の組成物は、１％以上１０％以下の流動パラフィンを含む。特定の実施形態において、上記組成物は、２％以上１０％以下、２％以上８％以下、２％以上６％以下、４％以上１０％以下、４％以上８％以下または４％以上６％以下の流動パラフィンを含み、好ましくは４％以上６％以下の流動パラフィンを含む。最も好ましくは、上記組成物は、４．８％の流動パラフィンを含む。

本発明の組成物は、さらに軟パラフィン（ワセリンとしても知られている）を含む。本発明の組成物には、白色または黄色の軟パラフィン（白色ワセリンまたは黄色ワセリン）のいずれかを用いることができる。好ましくは、白色軟パラフィン（白色ワセリン）が用いられる（白色軟パラフィンは、本質的に脱色されるように、高度に精製されたワセリンである）。軟パラフィン（白色軟パラフィンを含む）も、皮膚軟化剤として機能する。

本発明の組成物は、１％以上１０％以下の軟パラフィン（好ましくは白色軟パラフィン）を含む。特定の実施形態において、上記組成物は、１％以上９％以下、１％以上７％以下、３％以上１０％以下、３％以上９％以下、３％以上７％以下、５％以上１０％以下、５％以上９％以下または５％以上７％以下の軟パラフィン（好ましくは白色軟パラフィン）を含む。好ましくは、本発明の組成物は、５％以上７％以下の軟パラフィン（好ましくは白色軟パラフィン）を含む。最も好ましくは、上記組成物は、６．３％の軟パラフィンを含み、特に６．３％の白色軟パラフィンを含む。

本発明の組成物は、さらにセトステアリルアルコールを含む。セトステアリルアルコールは、固体アルコールであるセチルアルコール（ヘキサデカン－１－オール）とステアリルアルコール（オクタデカン－１－オール）との混合物である。セトステアリルアルコールは乳化剤として機能することで、本発明の組成物のエマルジョンを安定化させ、相分離を防止する。

セトステアリルアルコール中のセチルアルコールおよびステアリルアルコールの割合は調節可能である。通常、本明細書に記載されているセトステアリルアルコールは、セチルアルコールおよびステアリルアルコールを、それぞれ３０％以上７０％以下含むことができる。また、セトステアリルアルコールは、セチルアルコールおよびステアリルアルコールの純粋な混合物ではなく、少量の他のアルコール（ミリスチルアルコール等）を含むことがある。セトステアリルアルコールは、セチルアルコールとステアリルアルコールとの比が（ほぼ）７０：３０、６０：４０、５０：５０、４０：６０または３０：７０の混合物であればよい。最も好ましくは、セトステアリルアルコールは、セチルアルコールとステアリルアルコールとの比が５０：５０の混合物である。本明細書において、セチルアルコールとステアリルアルコールとの比が５０：５０の混合物であるセトステアリルアルコールは、セトステアリルアルコール５０：５０と称される。

本発明の組成物は、１％以上１０％以下のセトステアリルアルコール（好ましくはセトステアリルアルコール５０：５０）を含む。特定の実施形態において、上記組成物は、２％以上１０％以下、２％以上８％以下、２％以上６．５％以下、２％以上６％以下、４％以上１０％以下、４％以上８％以下、４％以上６．５％以下、４％以上６％以下、４．５％以上８％以下、４．５％以上６．５％以下、４．５％以上６％以下または５％以上６％以下のセトステアリルアルコール（好ましくはセトステアリルアルコール５０：５０）を含む。好ましい実施形態において、上記組成物は、４．５％以上６．５％以下のセトステアリルアルコール（好ましくはセトステアリルアルコール５０：５０）を含む。別の好ましい実施形態において、上記組成物は、５％以上６％以下のセトステアリルアルコール（好ましくはセトステアリルアルコール５０：５０）を含む。最も好ましくは、上記組成物は、５．５％のセトステアリルアルコールを含み、特に５．５％のセトステアリルアルコール５０：５０を含む。

本発明の組成物は、さらにポリオキシル２０セトステアリルエーテル（セテアレス－２０またはマクロゴールセトステアリルエーテルとしても知られている）を含む。ポリオキシル２０セトステアリルエーテルは、エトキシ化セチルアルコールとエトキシ化ステアリルアルコールとの混合物であり、エトキシ化セチルアルコールおよびエトキシ化ステアリルアルコールは、それぞれ平均エトキシ単位数が１７．２個から２５個の間である。好ましくは、エトキシ化セチルアルコールおよびエトキシ化ステアリルアルコールは、それぞれ平均２０個のエトキシ単位を有する。特定の実施形態において、エトキシ化セチルアルコールおよびエトキシ化ステアリルアルコールは、どちらも２０個のエトキシ単位を含む。ポリオキシル２０セトステアリルエーテルは、乳化剤としても非イオン界面活性剤としても機能することで、本発明の組成物のエマルジョンの形成および安定化を促進する。

本発明の組成物は、０．１％以上５％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルを含む。特定の実施形態において、上記組成物は、０．１％以上４％以下、０．１％以上３％以下、０．５％以上５％以下、０．５％以上４％以下、０．５％以上３％以下、１％以上５％以下、１％以上４％以下、１％以上３％以下、２％以上５％以下、２％以上４％以下または２％以上３％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルを含む。好ましい実施形態において、上記組成物は、１％以上３％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルを含む。別の好ましい実施形態において、上記組成物は、２％以上３％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルを含む。最も好ましくは、上記組成物は、２．４％のポリオキシル２０セトステアリルエーテルを含む。

本発明の組成物に用いられる賦形剤は、通常、医薬品添加物ハンドブック、第６版（編者：Raymond C Rowe、Paul J Sheskey、Marian E Quinn、出版社：Pharmaceutical Press (UK)およびAmerican Pharmacists Association、２００９）に記載されている。使用される全ての賦形剤は、当該技術分野において一般的であり、商業的供給業者から広く入手可能である。上述のように、本発明の組成物は水性組成物であるため、有効成分および賦形剤の合計量が組成物全体の１００％にならない場合、その残部は水とすればよい。

本発明の組成物に用いられる水は殺菌されており、好ましくは、脱イオン化もされている。好ましい実施形態において、灌注用水（water for irrigation）が用いられる。灌注用水は、当該技術分野において周知である。灌注用水は浸透圧が０Ｏｓｍ／Ｌであり、低張である。

特定の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）０．１％以上５％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．１％以上５％以下の防腐剤と、
（ｉｉｉ）０．１％以上５％以下のシリコーンと、
（ｉｖ）１０％以上２０％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．００５％以上０．１％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）１％以上１０％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）１％以上１０％以下の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）１％以上１０％以下のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）０．１％以上５％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、組成物である。

別の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）０．１％以上５％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．１％以上５％以下のフェノキシエタノールと、
（ｉｉｉ）０．１％以上５％以下のジメチコン３５０ｃＳｔと、
（ｉｖ）１０％以上２０％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．００５％以上０．１％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）１％以上１０％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）１％以上１０％以下の白色軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）１％以上１０％以下のセトステアリルアルコール５０：５０と、
（ｉｘ）０．１％以上５％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなり、かつ全てのアミノ酸がＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である、組成物である。

別の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）０．５％以上２％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．５％以上２％以下の防腐剤と、
（ｉｉｉ）０．５％以上２％以下のシリコーンと、
（ｉｖ）１４％以上１６％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０１％以上０．０５％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４％以上６％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）５％以上７％以下の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）４．５％以上６．５％以下のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）１％以上３％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、組成物である。

別の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）０．５％以上２％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．５％以上２％以下のフェノキシエタノールと、
（ｉｉｉ）０．５％以上２％以下のジメチコン３５０ｃＳｔと、
（ｉｖ）１４％以上１６％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０１％以上０．０５％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４％以上６％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）５％以上７％以下の白色軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）４．５％以上６．５％以下のセトステアリルアルコール５０：５０と、
（ｉｘ）１％以上３％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなり、かつ全てのアミノ酸がＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である、組成物である。

別の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）１％の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）１％の防腐剤と、
（ｉｉｉ）１％のシリコーンと、
（ｉｖ）１５％のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０２％のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４．８％の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）６．３％の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）５．５％のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）２．４％のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと、
（ｘ）６２．９８％の水と
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、組成物である。

別の実施形態において、本発明の組成物は、
（ｉ）１％の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）１％のフェノキシエタノールと、
（ｉｉｉ）１％のジメチコン３５０ｃＳｔと、
（ｉｖ）１５％のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０２％のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４．８％の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）６．３％の白色軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）５．５％のセトステアリルアルコール５０：５０と、
（ｉｘ）２．４％のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと、
（ｘ）６２．９８％の水と
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなり、かつ全てのアミノ酸がＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である、組成物である。

本発明の組成物はクリーム剤であり、チューブ（例えば、プラスチック製）、タブもしくはポット（例えば、プラスチック製、金属製またはガラス製）、または他の適切な容器に入れて提供され得る。
本発明は、さらに、治療に使用するための上記組成物を提供する。治療とは、病気または疾患を患う被験者の治療のことである。本明細書において、通常、治療とは、疾患に罹患している被験者を治す目的で行われる治療を意味する。本明細書で定義されている被験者とは、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタもしくはヤギ等の家畜、ウサギ、ネコもしくはイヌ等の愛玩動物、またはサル、チンパンジー、ゴリラもしくはヒト等の霊長類といったあらゆる哺乳動物を対象とする。最も好ましくは、ほとんどの状況において、被験者はヒトである。

本発明は、新生物の治療に使用するための上記組成物も提供する。一実施形態において、本発明は、皮膚新生物（すなわち、皮膚の新生物疾患）の治療に使用するための上記組成物を提供する。より詳しくは、本発明は、疣贅の治療に使用するための上記組成物を提供する。同様に、本発明は、被験者（より詳しくは、その新生物）に本発明の組成物を投与することを含む、被験者の新生物を治療する方法を提供する。一実施形態において、本発明は、被験者（より詳しくは、その新生物）に本発明の組成物を投与することを含む、被験者の皮膚新生物を治療する方法を提供する。特に、本発明は、被験者（より詳しくは、その疣贅）に本発明の組成物を投与することを含む、被験者の疣贅を治療する方法を提供する。同様に、本発明は、新生物を治療するための薬剤の製造における、本発明の組成物の使用を提供する。一実施形態において、本発明は、皮膚新生物を治療するための薬剤の製造における、本発明の組成物の使用を提供する。特に、本発明は、疣贅を治療するための薬剤の製造における、本発明の組成物の使用を提供する。つまり、本発明の組成物は、疣贅等の新生物を破壊または縮小させる、および／または疣贅等の新生物がうつることを防ぐために、疣贅等の皮膚の新生物に罹患している被験者（すなわち、疣贅等の新生物の治療を必要としている被験者）の治療に用いられる。

本発明の組成物は、疣贅（上記参照）、光線性角化症、脂漏性角化症およびボーエン病（扁平上皮内がん）を含む、皮膚の非悪性新生物疾患を治療するのに用いてもよい。光線性角化症（日光性角化症としても知られている）は、太陽暴露による皮膚の損傷に起因する、非悪性の、ざらざらした皮膚の斑点である。脂漏性角化症は、原因不明のろう状／いぼ状の増殖物である。一般的には、光線性角化症も、脂漏性角化症も治療を必要としない。ただし、これらの疾患による皮膚病変が炎症を起こす場合は、治療が必要になることもある。光線性角化症は皮膚がんを発症する可能性があるため、この疾患に対する治療の選択肢を用意することは、皮膚がんの予防にとって重要である。ボーエン病を治療しないままでいると、悪性扁平上皮がんになることがある。本発明の組成物は、上記疾患に対する重要かつ新たな治療の選択肢を提供する。

本発明の組成物は、皮膚の悪性新生物疾患（すなわち、皮膚がん）を治療するのにも用いられる。例えば、本発明の組成物は、扁平上皮がんおよび基底細胞がんの治療に用いてもよい。

本発明の組成物を用いて治療され得る全ての新生物皮膚疾患において、本発明の組成物は、皮膚病変に直接（局所的に）適用される。

上述のように、本発明の組成物による治療対象は、例示したような家畜または愛玩動物等のあらゆる哺乳動物を含むが、好ましくはヒトである。本発明の組成物は、新生物（例えば、疣贅）に罹患しているヒトであれば、性別（男性または女性）および年齢（成人または小児）に関わりなく、あらゆるヒトの治療に用いることができる。

上述のように、本明細書で使用されている「疣贅」とは、あらゆる種類の疣贅を意味する。好ましい実施形態において、本発明の組成物は、皮膚疣贅の治療に用いられる。皮膚疣贅としては、尋常性疣贅（verruca vulgaris）、足底疣贅（verruca plantaris）、扁平疣贅（verruca plana）、中間疣贅（尋常性疣贅および扁平疣贅の両方の特徴を有する）、糸状疣贅および爪囲疣贅が挙げられる。基本的に、肛門性器疣贅を除く全ての疣贅は、本明細書では皮膚疣贅として定義されている。例えば、本発明の組成物は、尋常性疣贅の治療に用いてもよい。本発明の組成物は、足底疣贅の治療に用いてもよい。本発明の組成物は、扁平疣贅または中間疣贅の治療に用いてもよい。本発明の組成物は、糸状疣贅の治療に用いてもよい。本発明の組成物は、爪囲疣贅の治療に用いてもよい。別の実施形態において、本発明の組成物は、肛門性器疣贅の治療に用いられる。

本発明の組成物は、被験者の任意の数の疣贅を同時に治療するために用いることができる。上記組成物は、一つの疣贅のみを治療するのに用いてもよく、あるいは、複数の疣贅を同時に治療するのに用いてもよい。例えば、本発明の組成物を用いて、単一の被験者の２、３、４または５個以上の疣贅を同時に治療することができる。類推により、他の新生物性病変の治療にも同様の考察が当てはまる。

疣贅等の治療を必要とする被験者に、本発明の組成物の治療有効量を投与する。「治療有効量」とは、被験者の病態に効果を発揮するのに十分な量のことである。被験者の病態に効果を発揮するのに十分な量であるかどうかは、被験者自身か、または医師／獣医師によって判断され得る。特に、治療する疣贅を縮小または破壊するために十分な量の組成物が投与される。

通常、本発明の組成物は、治療される被験者に局所的に投与される。上記組成物のクリーム剤は、新生物、例えば疣贅の表面に直接投与される。被験者自身、医師または第三者（例えば、親等の被験者の親族）によって、クリーム剤が新生物（例えば、疣贅）に塗布されてもよい。クリーム剤は、容器（例えば、チューブ）から直接、または指を介して容易に塗布することができる。通常、上記組成物は、治療対象の病変または疣贅を覆うのに十分な量で、その都度塗布される。クリーム剤の投与後、病変または疣贅の部位にクリーム剤が保持されるように、絆創膏または包帯（好ましくは閉鎖性の絆創膏または包帯）で病変または疣贅を覆ってもよい。本発明の組成物を用いて複数の病変または疣贅を同時に治療する場合、クリーム剤は、治療対象の病変または疣贅のそれぞれに、別々に塗布される。

本発明の組成物は、治療対象の新生物（例えば、疣贅）に、毎日、例えば、１日１回、１日２回または１日３回適用され得る。あるいは、本発明の組成物は、１日おきに、２日おきに、または毎週適用されてもよい。好ましい実施形態において、本発明の組成物は、治療対象の新生物／疣贅に、１日１回適用される。別の好ましい実施形態において、上記組成物は、治療対象の新生物／疣贅に、１日２回適用される。本発明の組成物による新生物／疣贅の治療は、不特定の期間、例えば、新生物／疣贅が破壊されるまで、すなわち、治療が成功するまで行うことができる。あるいは、本発明の組成物による疣贅の治療は、指定された期間、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２週間以上、または約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２週間以上行うことができる。治療期間は、１、２もしくは３ヵ月以上、または約１、２もしくは３ヵ月以上であってもよい。例えば、治療期間は、２～８週間でもよく、例えば、４～８週間または６～８週間、２～４週間または２～６週間であってもよい。好ましい実施形態において、治療期間は４週間くらいである。

特に好ましい実施形態において、治療は、４週間または約４週間の間、治療対象の疣贅にクリーム剤を１日１回投与することを含む。別の好ましい実施形態において、治療は、２～８週間（例えば、４～８週間）の間、治療対象の疣贅にクリーム剤を１日１回投与すること、または２～８週間（例えば、４～８週間）の間、治療対象の疣贅にクリーム剤を１日２回投与することを含む。

本発明は、以下の非限定的な実施例を参照することによって、さらに理解される。

図１は、ＨＰＬＣ（実施例１の方法を使用）でＣｙＰｅｐ－１濃度を測定する較正実験の結果を示す。図１Ａは、２．５～５００μｇ／ｍｌの濃度範囲にわたって脱イオン水中で調製されたＣｙＰｅｐ－１標準物質の代表的な検量線を示す。グラフに示された点は、３回のＨＰＬＣ測定の平均値である。図１Ｂは、ＣｙＰｅｐ－１の較正標準のサンプルクロマトグラム（この場合、１００μｇ／ｍｌのＣｙＰｅｐ－１の濃度で）を示す。図２は、試験した５つの医薬製剤からアイソポア（isopore）膜を通ってレセプター溶液（脱イオン水）に放出された、１～７時間の間の単位面積（μｇ／ｃｍ²）当たりのＣｙＰｅｐ－１の平均累積量（時間の平方根として表される）を示す。データは平均値±標準偏差（ｎ＝６）として示された。

実施例１－分析法の開発
試験された医薬製剤中のＣｙＰｅｐ－１の安定性を測定するために、以下のＨＰＬＣによるＣｙＰｅｐ－１の定量分析法を開発した。様々な条件（温度、流量等）を試験した上で（データは示さず）、以下の手順が最適であることが判明した。
ＨＰＬＣは、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（米国）ＫｉｎｅｔｅｘＣ１８，５μｍ，１００Å，４．６×２５０ｍｍカラムおよびＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄＣ１８，５μｍ保護カラムを用いて以下のように行った。

このＨＰＬＣ法は、ＣｙＰｅｐ－１の定量下限値が２．５μｇ／ｍｌとなるように定められた。図１Ａおよび図１Ｂは、それぞれ、上記ＨＰＬＣ法により得られたＣｙＰｅｐ－１標準物質の代表的な検量線および較正標準を表すサンプルクロマトグラムを示す。

実施例２－製剤開発
最初の実験では、脱イオン水（ｐＨ４、５、６または７）、エタノール、フェノキシエタノールおよびベンジルアルコールへのＣｙＰｅｐ－１の高い溶解度が示された（それぞれにおけるＣｙＰｅｐ－１の飽和溶解度は１０％ｗ／ｗを超えていた）。これらの液体中のＣｙＰｅｐ－１の安定性を試験した。脱イオン水（ｐＨ４～７）中で４０℃および５０℃で４週間保存した後と、エタノールとフェノキシエタノールとの混合物中で４０℃で４週間保存した後とにおいて、ＣｙＰｅｐ－１は良好な回収率（少なくとも９５％）を示した。

溶解度試験－方法
様々な液体賦形剤中のＣｙＰｅｐ－１の飽和溶解度を以下のように評価した。
（ｉ）ＣｙＰｅｐ－１（約２０．０ｍｇ）を適切な大きさのガラスバイアル中に秤量した。
（ｉｉ）工程（ｉ）のガラスバイアルのそれぞれに、各賦形剤（約５００ｍｇ）を添加した。
（ｉｉｉ）ＣｙＰｅｐ－１および賦形剤系を、予め較正された２５℃の水浴中で（飽和が観察されたら）２４時間撹拌した。
（ｉｖ）ＣｙＰｅｐ－１が賦形剤に溶解したかどうかを確認するために、２４時間の撹拌の間、１時間ごとに溶液を目視で検査した（可能な場合）。
（ｖ）ＣｙＰｅｐ－１が溶解したことを確認したら、次に、前記ガラスバイアルにＣｙＰｅｐ－１を約２０．０ｍｇずつ、飽和に達するまで添加するか、または溶解度が１０％ｗ／ｗ以上として報告された点まで、合計６０ｍｇ添加した。
（ｖｉ）飽和系では、約１６０００×ｇで１０分間遠心分離を行ったことにより、飽和溶液から未溶解のＣｙＰｅｐ－１を除去した。ライカ（ドイツ）製ＤＭＥ光学顕微鏡を用いた、倍率２００～１０００倍の光学顕微鏡検査法により、飽和上清のサンプルを調べた。顕微鏡のスライドに飽和上清を載せ、偏光および非偏光の両方を用いて、ＣｙＰｅｐ－１結晶の存在を直ちに調べた。希釈（工程（ｖｉｉ））は、遠心分離工程の直後に行った。
（ｖｉｉ）上記賦形剤におけるＣｙＰｅｐ－１の溶解度は未知なので、分析の前に、適切な希釈を行って、試料希釈液（脱イオン水）中のＣｙＰｅｐ－１濃度がＨＰＬＣ法の定量限界を超えるようにした。ＣｙＰｅｐ－１を約２０ｍｇ添加後に飽和した賦形剤については、以下の希釈を行った。
（ａ）約５０ｍｇの飽和溶液を１０ｍＬメスフラスコ中に秤量した。
（ｂ）工程（ａ）のメスフラスコに試料希釈液（脱イオン水）を加えて定容とし、３０秒間渦流（vortex）混合した。
（ｃ）工程（ｂ）で希釈したサンプルのアリコートをＨＰＬＣバイアルに移し、上記ＨＰＬＣ法によって分析した。
（ｖｉｉｉ）ＣｙＰｅｐ－１を約４０ｍｇ添加後に飽和した賦形剤については、２０ｍＬメスフラスコを用いた以外は、工程（ｖｉｉ）に記載したような希釈を行った。

安定性試験－方法
ＣｙＰｅｐ－１の飽和溶解度が１０％（ｗ／ｗ）を超える液体賦形剤において、ＣｙＰｅｐ－１の安定性を評価した。上記賦形剤中のＣｙＰｅｐ－１の安定性は、以下のように評価した。
（ｉ）ＣｙＰｅｐ－１（４０．０±０．１ｍｇ）を適切な大きさのガラスバイアル中に秤量した。
（ｉｉ）工程（ｉ）の適切な大きさのガラスバイアルのそれぞれに、各賦形剤（３９．９６±０．２ｇ）を添加した。
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）の混合物に、ＰＴＦＥマグネチックスターラーを加えて、約１６時間混合した。
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）の溶液を、テフロン（登録商標）で裏打ちされた蓋を備えた３ｍＬのホウケイ酸ガラスバイアルに移した。ｔ＝０の時点およびさらに２つの時点で、２５、４０および５０℃での試験のために、十分なバイアルを用意した。各時点のｎ＝１アリコートを採取した。
（ｖ）プラセボ溶液（ＣｙＰｅｐ－１を添加していない）も調製し、工程（ｉｖ）に従い安定に配置した。
（ｖｉ）４０℃および５０℃で保存し、評価時点をｔ＝０、２週間および４週間とした。各時点において、溶液中のＣｙＰｅｐ－１含有量および％ａ／ａを以下のように分析した。
ａ）それぞれのＣｙＰｅｐ－１溶液（５００±１０ｍｇ）を３つの別々の１０ｍＬメスフラスコ中に秤量した。
ｂ）上記メスフラスコに試料希釈液（脱イオン水）を加えて定容とし、３０秒間渦流混合した後、５回反転させて完全に混合した。
ｃ）賦形剤が試料希釈液と混合しないことが認められた場合（工程（ｂ））、抽出物を周囲温度で約２時間攪拌してから、約１６０００×ｇで１０分間遠心分離にかけた。
ｄ）工程（ｂ）または（ｃ）の各サンプルのアリコートをアンバーＨＰＬＣバイアルに移し、実施例１に記載したＨＰＬＣ法を用いて分析した。
ｅ）プラセボ溶液については、工程（ａ）～（ｄ）に従ったが、複製物（replicate）を１つだけ準備し、分析した。

これらの初期溶解度および安定性実験に基づき、さらなる試験のために、以下に示すＣｙＰｅｐ－１製剤を合成した。

実施例３－製剤試験
軟膏１および非水性ゲル剤１は、ＣｙＰｅｐ－１がこれらの製剤に溶けないことが判明したため、直ちに廃棄された。次に、製剤を１６分間遠心分離にかけた。その間に分離した製剤は、不安定とみなして廃棄された。遠心分離中に分離したため不安定であるとみなして廃棄されたのは、クリーム剤０１および軟膏０２であった。水性ゲル剤０１および０２は、ゲル化剤（カルボポール９７４）が十分に水和されなかったことを示唆する、濁りを生じたため廃棄された。これは、カルボポール９７４とＣｙＰｅｐ－１とが互いに相溶性がないことによるものと判断された。クリーム剤２、クリーム剤３および水性ゲル剤３も廃棄された。その後、様々な製剤におけるＣｙＰｅｐ－１の安定性を調査した。

ＣｙＰｅｐ－１の抽出－方法
安定性試験に先立ち、ＣｙＰｅｐ－１抽出法を作成した。いくつかの方法が試された（データは示さず）。開発された最適な抽出法を以下のように実施した。
（ｉ）１５０ｇの製剤を１０ｍＬメスフラスコ中に秤量した。
（ｉｉ）上記フラスコに５０：５０（ｖ／ｖ）の水：エタノールを加えて定容とした。
（ｉｉｉ）上記メスフラスコに対して３０秒間の渦流混合を行って製剤を分散させた。その結果、濃度１５０μｇ／ｍｌのＣｙＰｅｐ－１を含む抽出溶液を得た。
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）のメスフラスコに、ＰＴＦＥマグネチックスターラーを加えて、メスフラスコの内容物を５００ｒｐｍで２時間撹拌した。
（ｖ）工程（ｉｖ）の抽出溶液を遠心分離管に移し、サンプルを２５℃、１６０００×ｇで１０分間遠心分離にかけた。
（ｖｉ）０．２μｍのＰＴＦＥフィルターを用いて、上清を濾過した。
得られた濾過液をＨＰＬＣ分析に用いた。この方法により、製剤から推定９６％のＣｙＰｅｐ－１が回収されたことが分かった。

短期安定性試験
廃棄されなかった１０個の上記製剤について、安定性試験を行った。製剤のサンプルを２～８℃、２５℃および４０℃でそれぞれ保存した。２週間後に、２５℃および４０℃で保存したサンプルを評価した。４週間後および１１週間後に、２～８℃および２５℃で保存したサンプルを評価した。

いずれの製剤についても、あらゆる時点で、巨視的（目測で）外観にも、微視的（倍率４００倍）外観にも変化は見られなかった。
各製剤中のＣｙＰｅｐ－１の安定性は、それぞれの温度における、それぞれの時点で、どのくらいのＣｙＰｅｐ－１を回収できたかに基づいて決定した。結果を以下の表に示す。データは、括弧内の範囲の平均値として示されている(他に指定がない限り、ｎ＝２)。
ｔ＝０のとき、短期安定性を評価するために調製した全ての製剤からのＣｙＰｅｐ－１回収率は、理論濃度の９４．１４～１０３．１５％であることが確認された。この例外は水性ゲル剤５であり、ｔ＝０のＣｙＰｅｐ－１回収率が理論濃度の７４．２６％であった。しかし、その後の各時点でのＣｙＰｅｐ－１回収率は、理論濃度の９６．６８～１０６．２６％であることから、ｔ＝０における結果は異常だった可能性がある。

４０℃でｔ＝２週間保存した後、評価した全てのクリーム剤および軟膏について、ＣｙＰｅｐ－１回収率の低下が確認された（６６．４５～７８．１１％）。これらの結果に基づき、４０℃ではＣｙＰｅｐ－１が不安定になると考えられたため、その後の安定性評価は、２～８℃および２５℃で実施した。２５℃でｔ＝２、４および１１週間保存した後も、２～８℃でｔ＝４および１１週間保存した後にも、ＣｙＰｅｐ－１回収率の実質的な変化（＜１０％）は確認されなかった。このことは、試験した保存条件下で１１週間まで、これらの製剤中のＣｙＰｅｐ－１が安定していたことを示している。この例外は軟膏３であり、２５℃で保存した場合、ＣｙＰｅｐ－１回収率は、時間とともに低下傾向を示した。

上記結果の組み合わせと各製剤の審美性とに基づいて、さらなる研究のために以下の製剤が選択された。
・クリーム剤０５
・クリーム剤０９
・クリーム剤１０
・水性ゲル剤４
・水性ゲル剤５

なお、以下の製剤は廃棄された。
・クリーム剤０４：この製剤は、安定性が比較的低く、審美的にも劣っている（オフホワイト色で脂っぽい）ことが分かった。
・クリーム剤０６：この製剤は、安定性が比較的低かった。
・クリーム剤０７：この製剤は、安定性が比較的低かった。
・クリーム剤０８：この製剤は、選択された上記製剤と同等の安定性を示したが、酸化防止剤を含有していない。酸化は、ＣｙＰｅｐ－１酸化の潜在的な経路であることが判明したため（データは示さず）、この製剤は廃棄された。
・軟膏３：この製剤は、安定性が比較的低く、審美的にも劣っている（オフホワイト色で脂っぽい）ことが分かった。

実施例４－インビトロ薬物放出試験
ＣｙＰｅｐ－１は、ガラスおよびプラスチックに対して最小限の非特異的結合しか示さないことが判明した。よって、非特異的結合を防止するために、レセプター溶液に界面活性剤を含む必要がなかった。そこで、調査のためのレセプター溶液として、脱イオン水が選ばれた。
次に、製剤の逆拡散について、５つの合成膜を評価した。試験した膜はスーポア（Supor）、ニトロセルロース、アイソポア、セルロースおよびナイロンであった。セルロース膜だけが、レセプター溶液として脱イオン水を用いた製剤の適用後に逆拡散を起こした。これは、適用された製剤の組成を変化させた可能性がある。試験した他の膜では逆拡散は認められなかった。

ＣｙＰｅｐ－１の結合について、同じ膜を評価した。膜とともにインキュベーションした後のＣｙＰｅｐ－１回収率を以下に示す(平均回収率、ｎ＝３、膜なしのコントロールとの比較、３２℃でのインキュベーション)。
アイソポア膜は、ＣｙＰｅｐ－１回収率が最も高く、逆拡散も見られなかったので、薬物放出研究に用いる膜として選ばれた。

インビトロ薬物放出実験－方法
この方法では、個別に較正した静置型フランツセルを使用した。各セルの平均表面積および体積は、それぞれ約２ｃｍ²および１０ｍｌであった。静置型フランツセルにアイソポア膜を取り付け、そして脱イオン水を充填した。次に、静置型フランツセルを水浴中で３２℃に平衡化し、３０分後に「無限用量」（３００ｍｇ／ｃｍ²）の試験製剤を適用した。ブランクとして機能させるために、１つのフランツセルには、アイソポア膜を取り付けたが、製剤を適用しなかった。
各時点（０、１、２、３、４、５、６および７時間）において、サンプリングアームを介して、シリンジを用いることにより、フランツセルからレシーバー流体（脱イオン水）の１ｍｌのアリコートを採取した。それぞれの１ｍｌアリコートの代わりに、１ｍｌの予め加温した脱イオン水を加えて一定量を保ち、セル内に気泡が生じないようにした。採取したアリコートを、上記方法を用いてＨＰＬＣで分析し、アイソポア膜を通って放出されたＣｙＰｅｐ－１の累積量を算出した。実験期間中、フランツセルをパラフィルムで密封し、光から保護した。

インビトロ薬物放出実験－結果
各製剤を用いた７時間の実験期間にわたって、アイソポア膜を通ってレセプター溶液中に放出されたＣｙＰｅｐ－１の量を図２に示す。図２に示されているように、ゲル製剤である、水性ゲル剤４および水性ゲル剤５は、試験した製剤のうち最も高いレベルのＣｙＰｅｐ－１を放出することが確認された。これらの製剤からは、実験期間の最初の１時間にＣｙＰｅｐ－１の急速な放出があり、その後、追加の放出は極めて少なかった。クリーム製剤である、クリーム剤０５、クリーム剤０９およびクリーム剤１０は、ゲル製剤に比べると、１時間の時点で、ＣｙＰｅｐ－１の放出量が当初は少なかったが、１時間から７時間の間にＣｙＰｅｐ－１を放出し続けた。

これらの実験により、クリーム剤０９が医薬として使用するのに最も有利な特性を有することが明らかになった。上記実施例３に示されているように、ＣｙＰｅｐ－１はこのクリーム剤中で非常に安定している。また、実施例４の結果は、このクリーム剤からの高いレベルのＣｙＰｅｐ－１の持続放出を示す。ＣｙＰｅｐ－１の持続放出が望ましいのは、疣贅に製剤を１回適用しただけで、この疣贅に対してＣｙＰｅｐ－１が連続的に放出されることになり、クリーム剤を適用するごとに、治療効果が長時間持続するからである。その結果として、試験した水性ゲル剤のような製剤に比べて、クリーム剤の適用頻度が少なくて済むことになる。水性ゲル剤の場合、そのＣｙＰｅｐ－１含有量を実質的に瞬時に放出するため、治療する疣贅に対して、比較的短時間の治療効果しか有さない。クリーム剤０９は、試験したクリーム剤（それぞれがペプチドの持続放出を示す）のうち最も高いレベルのＣｙＰｅｐ－１をゆっくり放出する。従って、クリーム剤０９は、試験した全ての製剤の中で最も有利な特性を有し、疣贅治療において最高レベルの効力を発揮することが期待される。

実施例５－クリーム剤０９の製造
製造工程中に、２つの容器、すなわち容器Ａおよび容器Ｂを用いた。容器Ａに、フェノキシエタノールおよびトランスクトールＰを加えた後、ＢＨＡを加えた。ＢＨＡが溶解するまで、容器の内容物を攪拌した。次に、容器Ａに水を加え、さらにＣｙＰｅｐ－１を加えた。透明な溶液（粒子または結晶を含まない）が得られるまで、この混合物を攪拌した。
容器Ｂに、流動パラフィン、白色軟パラフィン、セトステアリルアルコールおよびポリオキシル２０セトステアリルエーテルを加えた。容器Ｂの内容物を６５℃に加熱し、溶融した。容器Ａの内容物も６５℃に加熱した。次に、容器Ａに容器Ｂの内容物を加えて、１００００ｒｐｍで数分間均質化した。均質化プロセスの間に、ジメチコンを加えた。その後、連続的に攪拌しながら、製剤を室温まで冷却した。

実施例６－クリーム剤０９による疣贅治療
クリーム剤０９に関して、ＣｙＰｅｐ－１の皮膚疣贅への効果を調べる臨床試験を実施した。患者を２つのグループに分け、一方のグループにはクリーム剤０９を与え、他方のグループにはプラセボを与えた（プラセボ０９、ＣｙＰｅｐ－１の代わりに水を用いた以外はクリーム剤０９と同等）。
クリーム剤は、各患者に対して、２８日間、１日１回、治療する疣贅に直接、局所的に投与された。クリーム剤の塗布後、クリーム剤で覆われた疣贅を、透明フィルムで８～１２時間覆うことで、疣贅からクリーム剤が失われないようにした。毎週、患者の追跡調査を行った。

Claims

水性医薬組成物であって、
前記組成物は、
（ｉ）０．１ｗ／ｗ％以上５ｗ／ｗ％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．１ｗ／ｗ％以上５ｗ／ｗ％以下の防腐剤と、
（ｉｉｉ）０．１ｗ／ｗ％以上５ｗ／ｗ％以下のシリコーンと、
（ｉｖ）１０ｗ／ｗ％以上２０ｗ／ｗ％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．００５ｗ／ｗ％以上０．１ｗ／ｗ％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）１ｗ／ｗ％以上１０ｗ／ｗ％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）１ｗ／ｗ％以上１０ｗ／ｗ％以下の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）１ｗ／ｗ％以上１０ｗ／ｗ％以下のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）０．１ｗ／ｗ％以上５ｗ／ｗ％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと、
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列、または前記配列番号１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、水性医薬組成物。
（ｉ）０．５ｗ／ｗ％以上２ｗ／ｗ％以下の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）０．５ｗ／ｗ％以上２ｗ／ｗ％以下の防腐剤と、
（ｉｉｉ）０．５ｗ／ｗ％以上２ｗ／ｗ％以下のシリコーンと、
（ｉｖ）１４ｗ／ｗ％以上１６ｗ／ｗ％以下のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０１ｗ／ｗ％以上０．０５ｗ／ｗ％以下のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４ｗ／ｗ％以上６ｗ／ｗ％以下の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）５ｗ／ｗ％以上７ｗ／ｗ％以下の軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）４．５ｗ／ｗ％以上６．５ｗ／ｗ％以下のセトステアリルアルコールと、
（ｉｘ）１ｗ／ｗ％以上３ｗ／ｗ％以下のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと、
を含む、請求項１に記載の組成物。
前記治療用オリゴペプチドは、前記配列番号１に記載のアミノ酸配列を含むか、または前記配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる、請求項１または２に記載の組成物。
前記オリゴペプチド化合物は、全てのアミノ酸がＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である、請求項１～３のいずれか１項に記載の組成物。
（ｉ）前記防腐剤は、フェノキシエタノールである、および／または、
（ｉｉ）前記シリコーンは、ジメチコンである、および／または、
（ｉｉｉ）前記軟パラフィンは、白色軟パラフィンである、
請求項１～４のいずれか１項に記載の組成物。
前記ジメチコンは、２５℃における粘度が３５０ｃＳｔのジメチコン（ジメチコン３５０ｃＳｔ）である、請求項５に記載の組成物。
前記セトステアリルアルコールは、セチルアルコールとステアリルアルコールとの比が５０：５０の混合物（セトステアリルアルコール５０：５０）である、請求項１～６のいずれか１項に記載の組成物。
前記組成物は、
（ｉ）１ｗ／ｗ％の治療用オリゴペプチドと、
（ｉｉ）１ｗ／ｗ％のフェノキシエタノールと、
（ｉｉｉ）１ｗ／ｗ％のジメチコン３５０ｃＳｔと、
（ｉｖ）１５ｗ／ｗ％のジ（エチレングリコール）エチルエーテルと、
（ｖ）０．０２ｗ／ｗ％のブチル化ヒドロキシアニソールと、
（ｖｉ）４．８ｗ／ｗ％の流動パラフィンと、
（ｖｉｉ）６．３ｗ／ｗ％の白色軟パラフィンと、
（ｖｉｉｉ）５．５ｗ／ｗ％のセトステアリルアルコール５０：５０と、
（ｉｘ）２．４ｗ／ｗ％のポリオキシル２０セトステアリルエーテルと、
（ｘ）６２．９８ｗ／ｗ％の水と、
を含み、
前記治療用オリゴペプチドは、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなり、かつ全てのアミノ酸がＤ－アミノ酸であるインベルソ化合物である、請求項１～７のいずれか１項に記載の組成物。
新生物の治療に使用するための、請求項１～８のいずれか１項に記載の組成物。
前記新生物は、疣贅である、請求項９に記載の使用のための組成物。
前記治療は、前記疣贅に前記組成物を局所投与することを含む、請求項１０に記載の使用のための組成物。
前記治療は、前記疣贅に前記組成物を約４週間毎日投与することを含む、請求項１１に記載の使用のための組成物。
前記疣贅は、皮膚疣贅である、請求項１０～１２のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
前記新生物は、皮膚の新生物である、請求項９に記載の使用のための組成物。
前記皮膚の新生物は、光線性角化症、脂漏性角化症、ボーエン病、基底細胞がんまたは扁平上皮がんである、請求項１４に記載の使用のための組成物。