CN115003280A - 用于治疗肿瘤性病变的含肽组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种包含治疗性肽CyPep‑1的药物组合物，用于治疗肿瘤性病变，尤其是疣。

Description

用于治疗肿瘤性病变的含肽组合物
技术领域
本发明提供一种用于治疗疣或其他肿瘤性病变的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的基于肽CyPep-1的序列的治疗性肽，该治疗性肽具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列。本发明还提供使用本发明的组合物治疗疣或其他肿瘤性病变的方法。
背景技术
疣是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的良性皮肤肿瘤(病变)。寻常疣(verrucavulgaris)往往在皮肤上，最常见于手部，以小的、坚硬的、粗糙的增生物的形式存在。如果存在于足底上，疣一般被称为跖疣(verruca plantaris)。疣常生长在生殖器或肛门上，在这种情况下，他们被称为肛门生殖器疣(尖锐湿疣(condylomata acuminata))。另外，不常见的疣类型包括最常发生于面部或颈部、手部、腕部和膝部的扁平疣(verruca plana)、常形成于面部的丝状疣和在手指甲或脚趾甲周围以簇状存在的甲周疣。
一般认为，疣在受损皮肤暴露于HPV时产生，这使病毒能够进入基底角质形成细胞，基底角质形成细胞是HPV感染皮肤的主要目标。疣的直接和间接人际传播都是通过疣中脱落的HPV发生(Lipke，Clinical Medicine and Research 4(4)：273-293，2006)。不同的HPV血清型与不同类型的疣相关：例如，皮肤寻常疣和肉赘最常由HPV27型、HPV57型、HPV2型和HPV1型引起(Bruggink等，Journal of Clinical Virology 55(3)：250-255，2012)，而生殖器疣最常由HPV6型和HPV11型引起(Lowy和Schiller，Journal of ClinicalInvestigation116(5)：1167-1173，2006)。
疣是很常见的，据信大多数人在一生中的某个时候都会患疣。虽然在某些情况下疣可能被认为是无害的，但大多数患者都会发现他们不舒服，而许多疣患者还发现他们的疣令人尴尬，使得他们的生活质量受损(Lipke，同上)。然而，疣缺少有效的治疗——虽然存在几种疣治疗(例如水杨酸、冷冻治疗、激光治疗、5-氟尿嘧啶等)，但大多数治疗都缺乏其有效性证据(Sterling等，British Journal of Dermatology 171：696-712，2014)。在没有成功治疗的情况下，疣一般是自限性的，但可能需要长至两年才能痊愈。即使有明显成功的治疗，疣的复发也是很常见。因此，需要针对疣的新治疗。新治疗对于其他肿瘤性病变也将是有益的。
WO 2011/092347公开了抗肿瘤肽，包括CyPep-1，其由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。如WO 2011/092347所示，CyPep-1对肿瘤细胞具有选择性细胞毒性，而共同未决申请PCT/EP2019/066295表明，CyPep-1与检查点抑制剂组合使用时在治疗癌症中非常有效。已发现CyPep-1对于疣的治疗特别有效。
CyPep-1是一种基于偶联至HIV-TAT细胞穿膜肽C末端的肿瘤抑制蛋白Conductin/Axin2的片段的融合肽。HIV-TAT细胞穿膜肽是一种阳离子肽，并且不受理论的约束，CyPep-1对肿瘤细胞的选择性细胞毒性被认为是由于肿瘤细胞膜所带的负电荷(相反，健康的哺乳动物细胞的膜往往带有更中性的电荷)。有益地，CyPep-1促进靶细胞裂解，导致细胞死亡时细胞内容物的释放。在HPV感染的疣细胞的情况下，这包括HPV抗原的释放。免疫系统暴露于释放的HPV抗原，促进T细胞反应，这不仅导致对疣的破坏，而且导致对HPV(或至少感染的HPV毒株)的持久免疫。因此，用CyPep-1治疗疣不但破坏了现有的疣，而且还防止或降低了其复发的可能性。
CyPep-1还具有抗菌特性(可能也是由于许多细菌细胞膜带有负电荷)，并且已被证明对革兰氏阳性细菌及革兰氏阴性细菌的医学相关物种具有强效的杀菌作用(参见WO2011/092347)。
发明内容
本发明提供了一种适用于治疗疣或者甚至其他肿瘤的CyPep-1组合物。该组合物已被证明在CyPep-1的溶解度和稳定性方面具有特别有利的特性，并且CyPep-1的缓慢释放限制了成功治疗疣所需的CyPep-1的施用频率。已发现在疣治疗中使用这种CyPep-1制剂是有效的。
因此，在第一方面，本发明提供了一种药物水性组合物，其包含：
(i)0.1-5％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列；
(ii)0.1-5％防腐剂；
(iii)0.1-5％有机硅；
(iv)10-20％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.005-0.1％丁基羟基苯甲醚；
(vi)1-10％液体石蜡；
(vii)1-10％软石蜡；
(viii)1-10％鲸蜡硬脂醇；和
(ix)0.1-5％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
本发明的组合物适用于疣治疗，但也可用于其他目的，如下所述。
在另一方面，本发明提供了一种用于治疗的如上所述的组合物。
在另一方面，本发明提供了一种用于治疗身体表面上的肿瘤(例如皮肤的肿瘤)的如上所述的组合物。具体地，该组合物可以用于疣的治疗。在另一实施方案中，它可以用于皮肤癌的治疗。
在相关方面，本发明提供了一种治疗受试者中的肿瘤(例如疣)的方法，包括施用如上所述的组合物。
在另一相关方面，本发明提供了如上所述的组合物在制造用于治疗肿瘤(例如疣)的药物中的用途。
在上面示出的组合物中，每种成分的量以该成分在本发明组合物内的百分比含量示出。在上面示出的组合物中以及在整个该说明书中，所有百分比含量值都表示重量百分比(％w/w)。
因此，本发明提供了一种用于递送治疗性肽的药学上可接受的组合物。这在治疗疣的情况下可能具有特别的效用。也就是说，本文提供的组合物适用于治疗疣。如本文使用的“药物的”或“药学上可接受的”表示该组合物对于被施用该组合物的接受者是生理学上可接受的。本发明的组合物是适用于局部施用(即施用于皮肤)的乳膏。因此，本发明的组合物是药学上可接受的乳膏。作为乳膏，本发明的组合物是半固体的。药学上可接受的乳膏是无毒的，并且优选是无刺激性的，并且提供了用于递送(下文讨论的)活性成分的合适载体，特别是递送至目标疣。作为药物乳膏，本发明的组合物是包含水相和油相的乳剂。本发明的组合物尤其可以是水包油乳剂。本发明的组合物优选是无菌的。
本发明的组合物是水性组合物。如本文所提及的，水性组合物是含有水或由水组成的组合物。换言之，本发明的组合物包含如下所述的活性剂和各种赋形剂，以及水。尽管该组合物是水性的，这也并不意味着该组合物的所有组分都溶解于水中——相反，该组合物是一种含有水相和油相两者的乳剂，如上面详述的。然而，作为水性组合物，水一般形成乳剂的连续相，这意味着该乳剂是如上面所指定的水包油乳剂。在本文描述了本发明的组合物，并且每种赋形剂的百分比含量加起来未(或可能未)达到100％的情况下，则组合物的余量(即剩余部分)是水。
如上面所提到的，本发明的组合物适用于治疗肿瘤。“肿瘤”被广义地定义为包括任何恶性的、恶变前的或非恶性的肿瘤病况。肿瘤的特征可能是不受控制或不想要的细胞增殖。肿瘤可以特别是皮肤的肿瘤，包括皮肤癌或非恶性皮肤肿瘤，或发生在可以施用乳膏的身体表面或区域上的肿瘤。更具体地，该组合物适用于治疗疣。如本文所定义的术语“疣”涵盖所有种类的疣，如下文进一步讨论的。使用本发明的组合物治疗疣或其他肿瘤是通过其活性成分实现的。术语“活性成分”用于指组合物中具有治疗作用(即抗肿瘤或抗疣作用)的组分。本发明的组合物中的活性成分是治疗性寡肽。一经向受试者身上的疣或其他肿瘤施用本发明的组合物，治疗性寡肽就会与疣或其他肿瘤接触，并破坏疣或其他肿瘤。因此，本发明中使用的治疗性寡肽具有抗疣活性，或更一般地说，具有抗肿瘤细胞的活性。
本发明的组合物中使用的治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:1具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。如上面详述的，SEQ ID NO:1的治疗性寡肽(CyPep-1)公开于WO 2011/092347中。SEQ ID NO:1由偶联至HIV-TAT细胞穿膜肽C末端的肿瘤抑制蛋白Conductin/Axin2的片段组成。前面提到的Conductin/Axin2的片段具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列(对应于SEQ ID NO:1的第13-27位氨基酸)，而HIV-TAT细胞穿膜肽具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列(对应于SEQ ID NO:1的第1-12位氨基酸)。
寡肽是由氨基酸通过肽键相互连接形成的聚合物。如本文所定义，寡肽包含至少3个氨基酸，尽管显然地如本文使用的治疗性寡肽包含多于3个氨基酸。如本文所定义的寡肽无特定的最大长度，例如它可以包含多达30个、40个、50个或100个氨基酸或更多氨基酸，但典型地前缀“寡糖”用于表示相对较少数量的氨基酸亚基，即少于200个，优选少于100个、90个、80个、70个、60个或50个氨基酸。本发明的组合物中使用的治疗性寡肽因此可以包含至少23个且不超过200个氨基酸。在实施方案中，它包含至少24个、25个、26个或27个氨基酸。可选择地定义，它包含不超过50个、45个、40个、35个、30个、29个、28个或27个氨基酸。因此，该治疗性寡肽可以包含在由如上针对最小或最大数量的亚单位示出的任何整数组成的范围内的多个氨基酸。因此，代表性亚基范围包括23-150、23-100、23-80、23-50、23-40、23-30、25-150、25-100、25-80、25-50、25-40、25-30、26-150、26-100、26-80、26-50、26-40、26-30、27-150、27-100、27-80、27-50、27-40、27-30、27-29和27-28。
本发明的组合物中使用的治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列。在一个特定的实施方案中，治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。在另一实施方案中，治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列组成。在另一实施方案中，治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。
可以通过进行序列比对来确定两个序列(例如目标寡肽序列和SEQ ID NO:1所示的序列)之间的序列同一性水平。序列比对可以使用任何合适的方法进行，例如，诸如EMBOSS Needle或EMBOSS stretcher(二者均为Rice P.等，Trends Genet.16(6)：276-277，2000)的计算机程序可用于双序列比对，而Clustal Omega(Sievers F.等，Mol.Syst.Biol.7：539，2011)或MUSCLE(Edgar R.C.，Nucleic Acids Res.32(5)：1792-1797，2004)可用于多序列比对。这样的计算机程序可以与标准输入参数一起使用，例如标准Clustal Omega参数：矩阵Gonnet，空位开放罚分6，空位延伸罚分1；或标准EMBOSSNeedle参数：矩阵BLOSUM62，空位开放罚分10，空位延伸罚分0.5。或者可以使用任何其他合适的参数。序列比对必须全局地进行，即横跨比较序列的整个长度进行。
本发明中使用的治疗性寡肽可以仅包括蛋白源性氨基酸(即由标准遗传密码编码的L-氨基酸)。或者，根据本发明使用的治疗性寡肽可以包含一种或多种非蛋白源性氨基酸。例如，根据本发明使用的治疗性寡肽可以包含一种或多种D-氨基酸(例如至少1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种或8种或更多种D-氨基酸)、人类工程化的氨基酸或天然非蛋白源性氨基酸，例如通过代谢过程形成的氨基酸。可以使用的非蛋白源性氨基酸的实例包括鸟氨酸(尿素循环的产物)和人工修饰氨基酸，例如9H-芴-9-基甲氧基羰基(Fmoc)-、叔丁氧羰基(Boc)-和2,2,5,7,8-五甲基色满-6-磺酰基(Pmc)保护的氨基酸，以及具有羧苄基(Z)基团的氨基酸。
治疗性寡肽的体外和/或体内稳定性可以通过使用本领域已知的稳定或保护手段来改善或增强，例如添加保护或稳定基团、掺入氨基酸衍生物或类似物或化学修饰氨基酸。这样的保护或稳定基团可以例如添加在N末端和/或C末端。这样一种基团的实例为乙酰基和本领域已知的其他可能稳定肽的保护基团或基团。
完全由L-氨基酸组成的肽在本领域中称为L-肽，而完全由D-氨基酸组成的肽在本领域中称为D-肽。术语“反向肽”用于指与L-肽具有相同的氨基酸序列但完全由D-氨基酸(即与对应的L-肽具有相同序列的D-肽)组成的肽。反向肽与其对应的L肽(即具有相同氨基酸序列的L-肽)具有镜像结构。反向肽在临床环境中使用可能是有利的(相对于L-肽)，因为它们一般不易被血清蛋白酶降解(由于其非天然构象，反向肽可能无法被蛋白酶识别)。在一个特别的实施方案中，根据本发明使用的治疗性寡肽为反向化合物，其每个氨基酸都是D-氨基酸。也就是说，治疗性寡肽可以是D-肽。该寡肽化合物尤其可以包含由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的D-肽或由其组成。
本文使用的治疗性寡肽可以由技术人员使用标准生化技术合成。如果该寡肽是仅包含蛋白源性氨基酸的L-肽，则它可以通过重组DNA技术合成。也就是说，可以克隆编码寡肽的DNA序列并将其引入表达载体。编码本文使用的治疗性寡肽的DNA序列包含或由核苷酸序列组成，该核苷酸序列编码SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列。这样一种核苷酸序列可以由技术人员毫不费力地生成和合成。
编码本文使用的治疗性寡肽的DNA序列可以使用本领域已知的标准方法，通过从模板扩增，例如通过PCR生成，或通过人工基因合成。然后可以使用诸如限制性内切酶或Gibson组装的标准分子克隆技术将编码寡肽的DNA序列引入到表达载体中。合适的表达载体是本领域已知的。然后可以使用标准技术将该表达载体引入细胞表达系统中。合适的表达系统可以包括细菌细胞和/或真核细胞，例如酵母细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。鉴于本文使用的治疗性寡肽可能对细菌细胞有毒(如上面所讨论的)，真核细胞可能是用于生产寡肽化合物的更合适的细胞表达系统。
可以使用无细胞体外蛋白质表达系统代替细胞表达系统来合成本文使用的L-肽化合物。在这样一个系统中，在体外，将编码寡肽的核苷酸序列转录成mRNA，并将mRNA翻译成蛋白质。无细胞表达系统试剂盒是可广泛地从市场上获得的，并且能够从例如赛默飞世尔科技(美国)购买。
本发明中使用的寡肽可以可选择地在非生物系统中化学合成。包含D-氨基酸或其他非蛋白源性氨基酸的寡肽尤其可以化学合成，因为在这种情况下一般不可能进行生物合成。液相蛋白质合成或固相蛋白质合成可以用于生成多肽，这些多肽可以形成或包含于在本发明中使用的寡肽化合物内。这样的方法是技术人员众所周知的，他们能够使用本领域常见的适当方法轻而易举地生产寡肽。
如上面所指出的，本发明组合物中使用的治疗性寡肽具有抗疣活性。这意味着当向受试者身上的疣应用治疗性寡肽时，经过一段时间(例如至少4周)，疣得到愈合。例如，疣可能会缩小或脱落，和/或形成疣的皮肤可能会恢复正常。为了确定寡肽是否具有抗疣活性，可以将包含目标寡肽的组合物应用于数名受试者的疣上，并将结果与用安慰剂(即在其他方面相同的缺少目标寡肽的组合物或乳膏)治疗的受试者获得的结果进行比较。如果使用含有目标寡肽的组合物获得的结果优于使用安慰剂获得的结果，则可以认为目标寡肽具有抗疣活性，从而构成本文定义的治疗性寡肽。
本发明的组合物包含范围为0.1％至5％的治疗性寡肽。在具体实施方案中，该组合物包含0.5％至2％、2.5％或3％的治疗性寡肽。在优选实施方案中，该组合物包含1％的治疗性寡肽。最优选地，该组合物包含1％CyPep-1，即该组合物包含1％的治疗性寡肽，并且该治疗性寡肽是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的D-肽。
本发明的组合物进一步包含防腐剂。防腐剂的作用是维持组合物的无菌性(即它具有抗微生物活性)。特别是，防腐剂可以具有生物灭杀特性，使得它杀死或抑制细菌和诸如酵母的真菌的生长。因此，防腐剂可以具有抗菌活性和抗真菌活性。特别优选的防腐剂是苯氧乙醇。
苯氧乙醇：
Figure BDA0003730219590000061
其他合适的防腐剂是本领域已知的，并且包括对羟基苯甲酸酯类(包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯)；山梨酸(或者称为2,4-己二烯酸)及其盐，包括山梨酸钠和山梨酸钾；以及苯甲酸及其盐类，包括苯甲酸钠和苯甲酸钾。
本发明的组合物包含范围为0.1％至5％的防腐剂。在具体实施方案中，该组合物包含0.5％至2％、2.5％或3％的防腐剂。在优选实施方案中，该组合物包含1％的防腐剂。优选地，本发明的组合物包含0.1％至5％的苯氧乙醇。特别是，该组合物可以包含0.5％至2％、2.5％或3％的苯氧乙醇。在特别优选的实施方案中，该组合物包含1％的苯氧乙醇。
本发明的组合物进一步包含有机硅(聚硅氧烷)。有机硅起到为组合物提供令人愉悦的质地的作用。一般地，本发明的组合物中使用的有机硅是二甲硅油(二甲基聚硅氧烷)。不同平均聚合物长度的二甲硅油通过它们不同的运动粘度来区分(平均聚合物长度越长，粘度越高，反之亦然)。在二甲硅油的情况下，运动粘度使用厘斯托克斯(cSt)测量。运动粘度的国际单位制(SI)单位是m2/s。1m2/s的运动粘度相当于106cSt的运动粘度；相反地，1cSt的运动粘度相当于10-6m2/s的运动粘度。粘度在25℃下测量。具有宽范围粘度的二甲硅油可以用作药物组合物中的赋形剂。例如，粘度在20cSt与1000cSt之间可能是合适的，这取决于组合物中二甲硅油的浓度和组合物作为整体所需的粘度。特别优选的是，本组合物包含在25℃下粘度为350cSt的二甲硅油(常称为二甲硅油350cSt)。
本发明的组合物包含范围为0.1％至5％的有机硅(优选二甲硅油)。在具体实施方案中，该组合物包含0.5％至2％、2.5％或3％的有机硅(优选二甲硅油)。在优选实施方案中，该组合物包含1％的二甲硅油。优选地，本发明的组合物包含0.1％至5％的二甲硅油350cSt。特别是，该组合物可以包含0.5％至2％、2.5％或3％的二甲硅油350cSt。在特别优选的实施方案中，该组合物包含1％的二甲硅油350cSt。
本发明的组合物进一步包含二(乙二醇)乙醚(DEGEE)，常以其商品名Transcutol-P命名。
DEGEE：
Figure BDA0003730219590000062
DEGEE具有作为溶剂和渗透促进剂的活性。就“渗透促进剂”而言，它是指当将本发明的组合物应用于受试者时，DEGEE改善了活性成分通过皮肤的吸收。本发明的组合物包含范围为10％至20％的DEGEE。在具体实施方案中，该组合物包含10％至18％、10％至16％、12％至20％、12％至18％、12％至16％、14％至20％、14％至18％或14％至16％的DEGEE，优选地14％至16％的DEGEE。最优选地，该组合物包含15％的DEGEE。
本发明的组合物进一步包含丁基羟基苯甲醚(BHA)。BHA是异构化合物2-叔丁基-4-羟基苯甲醚和3-叔丁基-4-羟基苯甲醚的混合物。
Figure BDA0003730219590000071
2-叔丁基-4-羟基苯甲醚(左)和3-叔丁基-4-羟基苯甲醚(右)。
本发明的组合物中使用的BHA可以包含任何比例的2-叔丁基-异构体和3-叔丁基-异构体。在具体实施方案中，BHA包含至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的3-叔丁基-4-羟基苯甲醚。
BHA是一种抗氧化剂，因为它能够将组合物中的自由基隔离在其芳环中。这防止了组合物的其他组分氧化和降解，提高了其稳定性。本发明的组合物包含范围为0.005％至0.1％的BHA。在具体实施方案中，该组合物包含0.01％至0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％或0.05％的BHA，优选0.01％至0.05％的BHA。在另外的实施方案中，该组合物包含0.01％至0.04％或0.03％的BHA。最优选地，该组合物包含0.02％的BHA。
本发明的组合物进一步包含液体石蜡(也称为矿物油)。液体石蜡起到润肤剂(或保湿剂)的作用，维持应用该组合物的皮肤的水合作用。本发明的组合物包含范围为1％至10％的液体石蜡。在具体实施方案中，该组合物包含2％至10％、2％至8％、2％至6％、4％至10％、4％至8％或4％至6％的液体石蜡，优选4％至6％的液体石蜡。最优选地，该组合物包含4.8％的液体石蜡。
本发明的组合物进一步包含软石蜡(也称为凡士林或矿脂)。白色或黄色软石蜡(白色凡士林或黄色凡士林)均可用于本发明的组合物中。优选地，使用白色软石蜡(白色凡士林)(白色软石蜡是经过高度精炼使其基本上脱色的凡士林)。软石蜡(包括白色软石蜡)也起到润肤剂的作用。
本发明的组合物包含范围为1％至10％的软石蜡(优选白色软石蜡)。在具体实施方案中，该组合物包含1％至9％、1％至7％、3％至10％、3％至9％、3％至7％、5％至10％、5％至9％或5％至7％的软石蜡(优选白色软石蜡)。优选地，该组合物包含5％至7％的软石蜡(优选白色软石蜡)。最优选地，该组合物包含6.3％的软石蜡，特别是6.3％的白色软石蜡。
本发明的组合物进一步包含鲸蜡硬脂醇。鲸蜡硬脂醇是固体醇鲸蜡醇(1-十六醇)和硬脂醇(1-十八醇)的混合物。鲸蜡硬脂醇起到乳化剂的作用，因此起到稳定本发明的组合物的乳剂的作用，防止相分离。
鲸蜡硬脂醇中鲸蜡醇和硬脂醇的比例是可变的。一般地，本文使用的鲸蜡硬脂醇可以包含30-70％的鲸蜡醇和硬脂醇两者。鲸蜡硬脂醇可能不是鲸蜡醇和硬脂醇的纯混合，也可能包含少量其他醇，例如肉豆蔻醇。鲸蜡硬脂醇可以是(大约)70:30、60:40、50:50、40:60或30:70的鲸蜡醇和硬脂醇混合物。最优选地，鲸蜡硬脂醇是鲸蜡醇和硬脂醇的50:50混合物。鲸蜡醇和硬脂醇的50:50混合物的鲸蜡硬脂醇在本文中称为鲸蜡硬脂醇50:50。
本发明的组合物包含范围为1％至10％的鲸蜡硬脂醇(优选鲸蜡硬脂醇50:50)。在具体实施方案中，该组合物包含2％至10％、2％至8％、2％至6.5％、2％至6％、4％至10％、4％至8％、4％至6.5％、4％至6％、4.5％至8％、4.5％至6.5％、4.5％至6％或5％至6％的鲸蜡硬脂醇(优选鲸蜡硬脂醇50:50)。在优选实施方案中，该组合物包含4.5％至6.5％的鲸蜡硬脂醇(优选鲸蜡硬脂醇50:50)。在另一优选实施方案中，该组合物包含5％至6％的鲸蜡硬脂醇(优选鲸蜡硬脂醇50:50)。最优选地，该组合物包含5.5％的鲸蜡硬脂醇，特别是5.5％的鲸蜡硬脂醇50:50。
本发明的组合物进一步包含鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20(也称为鲸蜡硬脂醇聚醚-20或聚乙二醇十六十八烷基醚)。鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20是乙氧基化的鲸蜡醇和硬脂醇的混合物，每个的平均乙氧基单元数在17.2和25之间。优选地，乙氧基化的鲸蜡醇和硬脂醇各自具有平均20个乙氧基单元。在具体实施方案中，乙氧基化的鲸蜡醇和硬脂醇均含有20个乙氧基单元。鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20起到了乳化剂和非离子型表面活性剂两者的作用，促进了本发明的组合物的乳剂的形成和稳定。
本发明的组合物包含范围为0.1％至5％的鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。在具体实施方案中，该组合物包含0.1％至4％、0.1％至3％、0.5％至5％、0.5％至4％、0.5％至3％、1％至5％、1％至4％、1％至3％、2％至5％、2％至4％或2％至3％的鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。在优选实施方案中，该组合物包含1％至3％的鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。在另一优选实施方案中，该组合物包含2％至3％的鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。最优选地，该组合物包含2.4％的鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
本发明的组合物中使用的赋形剂一般在《药用辅料手册》第6版(由Raymond CRowe、Paul J Sheskey和Marian E Quinn编辑，医药出版社(英国)和美国药师协会出版，2009)中进行了描述。使用的所有赋形剂在本领域中都是常见的，并且是从商业供应商处可广泛获得的。如上面所指出的，本发明的组合物是水性组合物，因此如果活性成分和赋形剂的总量并未占组合物的100％，剩余部分可以由水构成。
本发明的组合物中使用的水是无菌的。优选地，水也是去离子的。在优选实施方案中，使用冲洗用水。冲洗用水在本领域是众所周知的。冲洗用水是低渗的，渗透压为0Osm/L。
在具体实施方案中，本发明的组合物包含：
(i)0.1-5％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列；
(ii)0.1-5％防腐剂；
(iii)0.1-5％有机硅；
(iv)10-20％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.005-0.1％丁基羟基苯甲醚；
(vi)1-10％液体石蜡；
(vii)1-10％软石蜡；
(viii)1-10％鲸蜡硬脂醇；和
(ix)0.1-5％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
在另一实施方案中，本发明的组合物包含：
(i)0.1-5％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成，并且该治疗性寡肽为反向化合物，其每个氨基酸为D-氨基酸；
(ii)0.1-5％苯氧乙醇；
(iii)0.1-5％二甲硅油350cSt；
(iv)10-20％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.005-0.1％丁基羟基苯甲醚；
(vi)1-10％液体石蜡；
(vii)1-10％白色软石蜡；
(viii)1-10％鲸蜡硬脂醇50:50；和
(ix)0.1-5％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
在另一实施方案中，本发明的组合物包含：
(i)0.5-2％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列；
(ii)0.5-2％防腐剂；
(iii)0.5-2％有机硅；
(iv)14-16％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.01-0.05％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4-6％液体石蜡；
(vii)5-7％软石蜡；
(viii)4.5-6.5％鲸蜡硬脂醇；和
(ix)1-3％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
在另一实施方案中，本发明的组合物包含：
(i)0.5-2％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成，并且该治疗性寡肽为反向化合物，其每个氨基酸为D-氨基酸；
(ii)0.5-2％苯氧乙醇；
(iii)0.5-2％二甲硅油350cSt；
(iv)14-16％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.01-0.05％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4-6％液体石蜡；
(vii)5-7％白色软石蜡；
(viii)4.5-6.5％鲸蜡硬脂醇50:50；和
(ix)1-3％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
在另一实施方案中，本发明的组合物由以下组成：
(i)1％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列；
(ii)1％防腐剂；
(iii)1％有机硅；
(iv)15％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.02％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4.8％液体石蜡；
(vii)6.3％软石蜡；
(viii)5.5％鲸蜡硬脂醇；
(ix)2.4％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20；和
(x)62.98％水。
在另一实施方案中，本发明的组合物由以下组成：
(i)1％治疗性寡肽，其中该治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成，并且该治疗性寡肽为反向化合物，其每个氨基酸为D-氨基酸；
(ii)1％苯氧乙醇；
(iii)1％二甲硅油350cSt；
(iv)15％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.02％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4.8％液体石蜡；
(vii)6.3％白色软石蜡；
(viii)5.5％鲸蜡硬脂醇50:50；
(ix)2.4％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20；和
(x)62.98％水。
作为乳膏的本发明的组合物可以在管(例如由塑料制成)或桶或罐(例如由塑料、金属或玻璃制成)或任何其他合适的容器中提供。
本发明进一步提供了一种用于治疗的如上所述的组合物。治疗是指对患有疾病或身体病况的受试者的治疗。一般在本文中，治疗用于表示试图治愈患有病况的受试者所施用的治疗。本文所定义的受试者是指任何哺乳动物，例如，诸如牛、马、绵羊、猪或山羊的农场动物，诸如兔、猫或狗的宠物动物，或者诸如猴子、黑猩猩、大猩猩或人类的灵长类动物。最优选地，并且在大多数情况下，受试者是人类。
本发明还提供了一种用于治疗肿瘤的如上所述的组合物。在一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗皮肤肿瘤(即皮肤肿瘤性病况)的如上所述的组合物。更具体地，本发明提供了一种用于治疗疣的如上所述的组合物。类似地，本发明提供了一种治疗受试者肿瘤的方法，包括向受试者(或更具体地，向肿瘤)施用本发明的组合物。在一个实施方案中，本发明提供了一种治疗受试者皮肤肿瘤的方法，包括向受试者(或更具体地，向肿瘤)施用本发明的组合物。尤其是，本发明提供了一种治疗受试者的疣的方法，包括向受试者(或更具体地，向疣)施用本发明的组合物。类似地，本发明提供了本发明的组合物在制造用于治疗肿瘤的药物中的用途。在一个实施方案中，本发明提供了本发明的组合物在制造用于治疗皮肤肿瘤的药物中的用途。尤其是，本发明提供了本发明的组合物在制造用于治疗疣的药物中的用途。也就是说，本发明的组合物用于治疗患有皮肤肿瘤(例如疣)的受试者(即需要治疗肿瘤(例如疣)的受试者)，以破坏或缩小肿瘤(例如疣)和/或预防肿瘤(例如疣)的扩散。
本发明的组合物可以用于治疗皮肤的非恶性肿瘤性病况，包括疣(如上所述)、光化性角化病、脂溢性角化病和鲍温病(原位鳞状细胞癌)。光化性角化病(也称为日光性角化病)是由日光照射造成皮肤损伤引起的皮肤的非恶性、粗糙斑块。脂溢性角化病是原因不明的蜡状或疣状的增生物。通常，光化性角化病或脂溢性角化病都不需要治疗。但是，如果由这些病况引起的皮肤病变变得有刺激性，则可能需要治疗。光化性角化病可能发展成为皮肤癌，因此为这种病况提供治疗选项对于预防皮肤癌很重要。如果不治疗，鲍温病可能会转变成恶性鳞状细胞癌。本发明的组合物为这些病症提供了重要的新治疗选项。
本发明的组合物还可以用于治疗皮肤的恶性肿瘤性病况(即皮肤癌)。例如，本发明的组合物可以用于治疗鳞状细胞癌和基底细胞癌。
对于可以使用本发明的组合物治疗的所有肿瘤性皮肤病况，可以将该组合物直接(局部地)应用于皮肤病变。
如上详述的，用本发明的组合物治疗的受试者可以是任何哺乳动物，例如上面例示的农场动物或宠物动物，但优选人类。本发明的组合物可以用于治疗任何患有肿瘤(例如疣)的人类，包括任何性别(男性或女性)和任何年龄(成人或儿童)的人类。
如上面所提到的，本文所用的“疣”是指如上所述的任何和所有种类的疣。在优选实施方案中，该组合物用于治疗皮肤疣。皮肤疣包括寻常疣(verruca vulgaris)、跖疣(足底疣plantar warts、verruca plantaris)、扁平疣(verruca plana)、中间疣(具有寻常疣和扁平疣两者的特征)、丝状疣和甲周疣。基本上，除肛门生殖器疣外的所有疣在本文中均定义为皮肤疣。例如，本发明的组合物可以用于治疗寻常疣；本发明的组合物可以用于治疗跖疣；本发明的组合物可以用于治疗扁平疣或中间疣；本发明的组合物可以用于治疗丝状疣；本发明的组合物可以用于治疗甲周疣。在另一实施方案中，该组合物用于治疗肛门生殖器疣。
该组合物可以用于并行地治疗受试者身上的任何数量的疣。该组合物可以仅用于治疗单个疣，但也可以可选择地用于同时治疗多个疣。例如，可以使用本发明的组合物同时治疗单个受试者身上的2个、3个、4个或5个或更多个疣。以此类推，类似的考虑可以应用于其他肿瘤性病变的治疗。
本发明的组合物以治疗有效量施用于需要治疗(例如针对疣)的受试者。“治疗有效量”是指足以显示对受试者病况有益的量。量是否足以显示对受试者病况有益可以由受试者他或她自己，或者医生或兽医确定。尤其是，施用足够的组合物以便缩小或破坏治疗的疣。
一般地，向待治疗的受试者局部施用发明的组合物。将组合物乳膏直接施用于肿瘤，例如疣的表面。该乳膏可以由受试者他或她自己、医生或第三方(例如受试者的亲人，如父母)应用于肿瘤(例如疣)。该乳膏可以容易地直接从容器中(例如从管中)或通过手指应用。一般地，每次应用该组合物的量将足以覆盖待治疗的病变或疣。施用乳膏后，可以用贴布或敷料(优选封闭的贴布或敷料)覆盖病变或疣，以便将乳膏保留在病变或疣的部位。在本发明的组合物用于并行治疗多个病变或疣的情况下，将乳膏分别施用于每个待治疗的病变或疣。
本发明的组合物可以每天应用于待治疗的肿瘤(例如疣)，例如每天一次，每天两次或每天三次。本发明的组合物可以可选择地每隔一天或每隔三天施用一次，或每周施用一次。在优选实施方案中，将本发明的组合物向待治疗的肿瘤或疣每天应用一次。在另一优选实施方案中，将组合物向待治疗的肿瘤或疣每天应用两次。用本发明的组合物治疗肿瘤或疣的持续时间可能是不确定的，例如直至肿瘤或疣被破坏，也就是说直至治疗成功。或者，用本发明的组合物治疗疣可以持续定义的时间长度，例如1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周或更长时间，或约1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周或更长时间。该治疗可以持续1个月、2个月或3个月或更长时间，或约1个月、2个月或3个月或更长时间。例如，治疗可以持续2-8周，例如4-8周或6-8周、2-4周或2-6周。在优选实施方案中，治疗持续4周左右。
在特别优选的实施方案中，治疗包括每天一次向待治疗的疣施用乳膏，持续4周或约4周的时间。在其他优选实施方案中，治疗包括每天一次向待治疗的疣施用乳膏，持续2-8周(例如4-8周)的时间，或每天两次向待治疗的疣施用乳膏，持续2-8周(例如4-8周)的时间。
通过参考以下非限制性实施例，可以进一步理解本发明。
附图说明
图1示出了通过HPLC(使用实施例1的方法)测定CyPep-1浓度的校准实验的结果。A示出了在2.5-500μg/ml浓度范围内在去离子水中制备的CyPep-1标准品的代表性校准曲线。图中显示的点是运行HPLC 3次的平均值。B示出了代表CyPep-1校准标准品的样品色谱图(在这种情况下，CyPep-1浓度为100μg/ml)；和
图2示出了CyPep-1在1-7小时(表示为时间的平方根)之间从5种受试药物制剂通过等孔膜进入受体溶液(去离子水)每单位面积释放的累积量(μg/cm2)。数据表示为平均值±标准偏差(n＝6)。
具体实施方式
实施例
实施例1-分析方法的开发
为了测量CyPep-1在受试药物制剂中的稳定性，开发了以下通过HPLC定量CyPep-1的分析方法。测试了各种条件(温度、流速等)(数据未示出)，并发现以下程序是最佳的。
使用Phenomenex(美国)Kinetex C18 5μm
Figure BDA0003730219590000122
4.6×250mm柱和PhenomenexSecurityGuard C18 5μm保护柱进行HPLC，如下：
Figure BDA0003730219590000121
Figure BDA0003730219590000131
这个HPLC程序测定CyPep-1的定量下限为2.5μg/ml。CyPep-1标准品的代表性校准曲线和使用上述HPLC方法获得的代表校准标准品的样品色谱图分别在图1A和图1B中示出。
实施例2-制剂开发
初步实验表明，CyPep-1在去离子水(pH 4、pH 5、pH 6或pH 7)、乙醇、苯氧乙醇和苯甲醇中的溶解度高(CyPep-1在每种中的饱和溶解度均超过10％w/w)。对CyPep-1在这些液体中的稳定性进行了测试。在40℃和50℃下在去离子水(pH 4-7)中和在40℃下在乙醇和苯氧乙醇混合物中储存4周后，观察到CyPep-1的回收率良好(至少95％)。
溶解度测试-方法
CyPep-1在各种液体赋形剂中的饱和溶解度评估如下：
(i)称取CyPep-1(约20.0mg)到适合大小的玻璃小瓶中。
(ii)将每种赋形剂(约500mg)添加到步骤(i)中的各玻璃小瓶中。
(iii)在25℃的预校准水浴中，将CyPep-1和赋形剂系统搅拌24h(一旦观察到饱和)。
(iv)在搅拌的24h期间，每小时(如果可能)目视检查溶液以观察CyPep-1是否已溶解于赋形剂中。
(v)如果观察到CyPep-1溶解，则向小瓶中添加约20.0mg增量的CyPep-1，直至达到饱和或直至在溶解度报告为≥10％w/w的点时总共添加了60mg。
(vi)对于饱和系统，经由在约16,000x g下离心10分钟，从饱和溶液中取出任何未溶解的CyPep-1。使用Leica(德国)DME光学显微镜使用放大倍数为200-1000x的光学显微镜检查饱和上清液的样品。将饱和的上清液安放在显微镜载玻片上，并使用偏振光和非偏振光两者立即检查是否存在CyPep-1晶体。稀释(步骤(vii))在离心步骤后立即进行。
(vii)由于CyPep-1在这些赋形剂中的溶解度未知，在分析前，进行适当稀释，以使CyPep-1在样品稀释液(去离子水)中的浓度在HPLC方法定量的限值以上。对于添加约20mgCyPep-1后饱和的赋形剂，进行以下稀释：
(a)称取约50mg饱和溶液到10mL容量瓶中。
(b)将步骤(a)中的容量瓶用样品稀释液(去离子水)定容并涡旋混合30s。
(c)将步骤(b)中的稀释样品的等分试样转移到HPLC小瓶，并如上所述通过HPLC进行分析。
(viii)对于添加约40mg CyPep-1后饱和的赋形剂，如步骤(vii)中的详述进行稀释，但使用20mL容量瓶。
稳定性测试-方法
评估CyPep-1在液体赋形剂中的稳定性，评估表明CyPep-1的饱和溶解度在10％(w/w)以上。CyPep-1在赋形剂中的稳定性评估如下：
(i)称取CyPep-1(40.0±0.1mg)到适合大小的玻璃小瓶中。
(ii)将每种赋形剂(39.96±0.2g)添加至步骤(i)中的每个适合大小的玻璃小瓶中。
(iii)将PTFE磁力搅拌器添加至步骤(ii)的混合物，并让其搅拌约16h。
(iv)将步骤(iii)中的溶液转移到带聚四氟乙烯内衬盖的3mL硼硅酸盐玻璃小瓶。准备足够的小瓶，用于在25℃、40℃和50℃下在t＝0和2的额外时间点时进行测试；n＝每个时间点制备1份等分试样。
(v)还制备了安慰剂溶液(未添加CyPep-1)并按照步骤(iv)置于稳定性上。
(vi)在40℃和50℃下储存后，评估时间点为t＝0周、2周和4周。在每个时间点，溶液中的CyPep-1含量和％a/a分析如下：
a)称取每种CyPep-1溶液(500±10mg)到3个单独的10mL容量瓶中。
b)将容量瓶用样品稀释液(去离子水)定容，并在倒置5次后通过涡旋彻底混合30s。
c)如果观察到赋形剂与样品稀释液不混溶(步骤(b))，在环境温度下搅拌提取液约2h，然后在约16,000x g下离心10min。
d)将每个样品的等分试样(从步骤(b)或步骤(c)中))转移到琥珀色HPLC小瓶中，并使用实施例1中所述的HPLC进行分析。
e)对于安慰剂溶液，遵循步骤(a)至(d)，但仅制备和分析一个复制品。
基于这些初始溶解度和稳定性实验，合成了几种CyPep-1制剂用于进一步测试，如下：
乳膏01：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 24
PEG 400 42
Transcutol-P 12
苯甲醇 1
鲸蜡硬脂醇 5
Crodamol GTCC 10
二甲硅油 1
司盘60 1.4
吐温60 2.6
乳膏02：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 24
PEG 400 42
Transcutol-P 12
苯甲醇 1
鲸蜡硬脂醇 5
Crodamol GTCC 10
二甲硅油 1
Brij-S2 1.5
Brij-S20 2.5
乳膏03：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 24
PEG 400 42
Transcutol-P 12
苯甲醇 1
鲸蜡硬脂醇 5.5
液体石蜡 4.8
白色软石蜡 6.3
二甲硅油 1
鲸蜡硬脂醇聚醚20 2.4
乳膏04：
Figure BDA0003730219590000151
Figure BDA0003730219590000161
乳膏05：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 78
苯氧乙醇 1
液体石蜡 11.17
鲸蜡硬脂醇 3.83
二甲硅油 1
Brij-S2 1.4
Brij-S20 2.6
乳膏06：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 78
苯氧乙醇 1
鲸蜡硬脂醇 5
Crodamol GTCC 10
二甲硅油 1
Brij-S2 1.5
Brij-S20 2.5
乳膏07：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 77
苯甲醇 2
鲸蜡硬脂醇 5
Crodamol GTCC 10
二甲硅油 1
Brij-S2 1.5
Brij-S20 2.5
乳膏08：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 78
苯氧乙醇 1
鲸蜡硬脂醇 5.5
液体石蜡 4.8
白色软石蜡 6.3
鲸蜡硬脂醇聚醚20 2.4
二甲硅油 1
乳膏09：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 62.98
苯氧乙醇 1
Transcutol-P 15
鲸蜡硬脂醇 5.5
液体石蜡 4.8
白色软石蜡 6.3
BHA 0.02
鲸蜡硬脂醇聚醚20 2.4
二甲硅油 1
乳膏10：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 41.98
PEG 400 35
苯甲醇 2
BHA 0.02
鲸蜡硬脂醇 5.5
液体石蜡 4.8
白色软石蜡 6.3
鲸蜡硬脂醇聚醚20 2.4
二甲硅油 1
软膏1：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
PEG 400 58
Transcutol-P 15
苯甲醇 1
PEG 3350 25
软膏2：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
PEG 400 49
Transcutol-P 15
去离子水 10
PEG 4000 25
软膏3：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
PEG 400 62.98
苯氧乙醇 1
BHA 0.02
去离子水 10
PEG 4000 25
水性凝胶1：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 30
PEG 400 52
Transcutol-P 15
苯甲醇 1
卡波姆974 1
水性凝胶2：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 96
苯甲醇 2
卡波姆974 1
水性凝胶3：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 96
苯甲醇 2
羟乙基纤维素 1
水性凝胶4：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 85.98
BHA 0.02
乙醇 10
苯氧乙醇 1
羟乙基纤维素 2
水性凝胶5：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
去离子水 70.98
BHA 0.02
乙醇 10
Transcutol-P 15
苯氧乙醇 1
羟乙基纤维素 2
非水性凝胶1：
成分 浓度(％w/w)
CyPep-1 1
PEG 400 68.1
乙醇 4.9
Transcutol-P 25
羟丙基纤维素 1
实施例3-制剂测试
立即弃用软膏1和非水性凝胶1，因为CyPep-1被证明不溶于这些制剂。然后在16分钟时离心制剂。在那期间分离出的制剂被视为不稳定，并被弃用。以下制剂因在离心期间分离被视为不稳定而弃用：乳膏01和软膏02。水性凝胶01和02因浑浊被弃用，表明凝胶剂(卡波姆974)未完全水合。已确定这是由于卡波姆974与CyPep-1不相容。乳膏2和3以及水性凝胶3也被弃用。然后研究CyPep-1在各种制剂中的稳定性。
CyPep-1提取-方法
在稳定性测试前，生成CyPep-1提取方法。测试了几种方法(数据未示出)。开发的最佳提取方法如下：
(i)称取150mg制剂到10mL容量瓶中。
(ii)用50:50v/v水:乙醇将烧瓶定容。
(iii)将容量瓶涡旋混合30s以分散制剂，产生含有浓度为150μg/ml的CyPep-1的提取溶液。
(iv)将PTFE磁力搅拌器添加至步骤(iii)中的容量瓶，并将容量瓶的内容物以500rpm搅拌2h。
(v)将步骤(iv)中的提取溶液转移到离心管，并在25℃下以16,000x g离心样品10min。
(vi)使用0.2μm PTFE过滤器过滤上清液。
将获得的过滤溶液用于HPLC分析。这种方法被发现可以从制剂中回收估计96％的CyPep-1。
短期稳定性测试
将上面所述的10种未被弃用的制剂纳入稳定性测试。制剂样品储存在2-8℃、25℃和40℃下。2周后，对存储在25℃和40℃下的样品进行评估；4周和11周后，对存储在2-8℃和25℃下的样品进行评估。
在任何时间点，任何制剂的宏观(通过眼睛)或微观(400x放大倍数)外观均未见变化。
Figure BDA0003730219590000211
在t＝0时，观察到针对短期稳定性制备的所有制剂的CyPep-1百分回收率为理论浓度的94.14％-103.15％。对此例外的是制剂水性凝胶5，其在t＝0时的CyPep-1的回收率为理论浓度的74.26％。然而，后续时间点的结果在CyPep-1理论浓度的96.68％和106.26％之间，因此在t＝0时获得的结果很可能是一个异常结果。
在40℃下储存t＝2周后，观察到所有评估的乳膏和软膏制剂的CyPep-1回收率均有下降(66.45％-78.11％)。基于这些结果，剩余的稳定性评估在2-8℃和25℃下进行，因为CyPep-1在40℃下被视为是不稳定的。在25℃下储存t＝2周、4周和11周以及在2-8℃下储存t＝4周和11周后，CyPep-1的百分回收率未观察到有实质变化(<10％)，这表明CyPep-1在测试的储存条件下在这些制剂中长达11周是稳定的。对此例外的是软膏3，当储存在25℃下时，其显示出CyPep-1的回收率随着时间的推移呈下降趋势。
基于这些结果的组合以及每种制剂的美观性，选择以下配方进行进一步研究：
·乳膏05
·乳膏09
·乳膏10
·水性凝胶4
·水性凝胶5。
弃用以下制剂：
·乳膏04：该制剂显示出相对较差的稳定性，并且发现该制剂在美观性上较差(灰白色和油腻)。
·乳膏06：该制剂显示出相对较差的稳定性。
·乳膏07：该制剂显示出相对较差的稳定性。
·乳膏08：尽管该制剂表现出与所选制剂等同的稳定性，但该制剂未含有抗氧化剂。氧化被发现是CyPep-1氧化的潜在途径(数据未示出)，因此该制剂被弃用。
·乳膏3：该制剂显示出相对较差的稳定性，并且发现该制剂在美观性上较差(灰白色和油腻)。
实施例4-体外药物释放试验
发现CyPep-1展示出对玻璃和塑料的非特异性结合极小，这意味着受体溶液中不需要去污剂来防止非特异性结合。因此选择去离子水作为受体溶液用于研究。
然后评估5种合成膜对制剂的反向扩散。受试膜为supor膜、硝酸纤维膜、聚碳酸酯膜、纤维素膜和尼龙膜。在应用去离子水作为受体溶液的制剂后，只有纤维素膜表现出反向扩散，这可能会改变应用的制剂的组成。任何其他受试膜均未发现反向扩散。
相同的膜都进行了CyPep-1结合评估。CyPep-1与膜孵育后的回收率如下所示(平均回收率，n＝3，与无膜对照样品相比，在32℃下孵育)：
Figure BDA0003730219590000221
Figure BDA0003730219590000231
选择聚碳酸酯膜用于药物释放研究，因为该膜的CyPep-1回收率最高，并且未发现该膜有反向扩散。
体外药物释放实验-方法
该方法中采用了单独校准的静态Franz池，每个池的平均表面积和体积分别约为2cm2和10mL。静态Franz池安装有聚碳酸酯膜并注满去离子水。然后在水浴中将静态Franz池平衡至32℃，并在30分钟后给予“无限剂量”(300mg/cm2)的测试制剂。一个Franz池安装有聚碳酸酯膜，但未给予制剂，以便充当空白。
在每个时间点(0小时、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时和7小时)，使用注射器经由取样臂从Franz池中取出1mL接收器流体(去离子水)的等分试样。每1mL等分试样用1mL预热去离子水代替，以保持恒定体积，确保池中不产生气泡。使用上述方法通过HPLC分析取出的每个等分试样，并计算通过聚碳酸酯膜释放的CyPep-1的累积量。在实验期间，通过用石蜡膜封闭来为Franz池遮光。
体外药物释放实验-结果
每种制剂在7小时的实验过程中通过聚碳酸酯膜释放到受体溶液中的CyPep-1的量在图2中示出。如图所示，观察到凝胶制剂水性凝胶4和水性凝胶5的受试制剂的CyPep-1的释放水平最高。这些制剂被观察到在最初的1h实验期内快速释放CyPep-1，然后为最小的额外释放。当与凝胶制剂相比时，乳膏制剂乳膏05、乳膏09和乳膏10在1h时间点最初释放的CyPep-1的量较低，但在1h和7h时间点之间继续释放CyPep-1。
这些实验表明，乳膏09明显具有作为药物使用的最有利特性。如上面的实施例3所示，CyPep-1在该乳膏中非常稳定。实施例4所示的结果表明，CyPep-1从该乳膏中持续高水平释放。CyPep-1的持续释放是想要的，因为它意味着在向疣单次应用制剂后，CyPep-1会连续不断释放到疣上，这意味着每次应用乳膏都具有持久的治疗作用。这反过来意味着该乳膏所需的应用频率低于诸如受试水性凝胶的制剂，这些受试水性凝胶基本上瞬时释放它们的CyPep-1含量，因此对治疗的疣仅具有相对短暂的治疗作用。乳膏09轻松地释放出受试乳膏的最高水平的CyPep-1(乳膏中的每一种都显示出肽的持续释放)，因此在所有受试制剂中具有最有利的特性，并且可以有望在疣治疗中展示出最高的功效水平。
实施例5-乳膏09的制造
在制备过程中使用了容器A和容器B两个容器。将苯氧乙醇和Transcutol-P添加到容器A，然后添加BHA。搅拌容器内容物直至BHA溶解。然后将水添加到容器A，然后添加CyPep-1。搅拌混合物直至获得澄清溶液(不含颗粒或晶体)。
将液体石蜡、软白色石蜡、鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20添加到容器B。将容器B的内容物加热至65℃并熔化。将容器A的内容物也加热至65℃。然后将容器B的内容物添加到容器A并以10,000rpm均化数分钟。在均化过程中添加二甲硅油。然后将制剂冷却至室温，同时连续搅拌。
实施例6-用乳膏09治疗疣
进行临床试验，测试CyPep-1在乳膏09的情况下对皮肤疣的作用。患者被分成两组：一组接受乳膏09，另一组接受安慰剂(安慰剂09，除CyPep-1用水代替外，相当于乳膏09)。
将乳膏施用于患者每日一次，通过直接局部施用于治疗的疣，持续28天。应用乳膏后，用透明薄膜覆盖乳膏覆盖的疣8-12小时，以防止乳膏从疣处流失。每周对患者进行随访。
序列表
<110> 西托瓦申公司
<120> 用于治疗肿瘤性病变的含肽组合物
<130> FSP1V223462ZX
<150> GB2000167.3
<151> 2020-01-07
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial Sequence）
<220>
<223> CyPep-1
<400> 1
Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly Lys Thr Leu Arg
1 5 10 15
Val Ala Lys Ala Ile Tyr Lys Arg Tyr Ile Glu
20 25
<210> 2
<211> 15
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 2
Lys Thr Leu Arg Val Ala Lys Ala Ile Tyr Lys Arg Tyr Ile Glu
1 5 10 15
<210> 3
<211> 12
<212> PRT
<213> 人类免疫缺陷病毒1型
<400> 3
Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly
1 5 10

Claims (23)

1.一种水性药物组合物，所述组合物包含：
(i)0.1-5％治疗性寡肽，其中所述治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列；
(ii)0.1-5％防腐剂；
(iii)0.1-5％有机硅；
(iv)10-20％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.005-0.1％丁基羟基苯甲醚；
(vi)1-10％液体石蜡；
(vii)1-10％软石蜡；
(viii)1-10％鲸蜡硬脂醇；和
(ix)0.1-5％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
2.根据权利要求1所述的组合物，其包含：
(i)0.5-2％治疗性寡肽；
(ii)0.5-2％防腐剂；
(iii)0.5-2％有机硅；
(iv)14-16％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.01-0.05％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4-6％液体石蜡；
(vii)5-7％软石蜡；
(viii)4.5-6.5％鲸蜡硬脂醇；和
(ix)1-3％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述治疗性寡肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或由其组成。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述寡肽化合物为反向化合物，其每个氨基酸为D-氨基酸。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述防腐剂为苯氧乙醇。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述有机硅为二甲硅油。
7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述二甲硅油是在25℃下粘度为350cSt的二甲硅油(二甲硅油350cSt)。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中所述鲸蜡硬脂醇是鲸蜡醇和硬脂醇50:50的混合物(鲸蜡硬脂醇50:50)。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中所述软石蜡为白色软石蜡。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述组合物由以下组成：
(i)1％治疗性寡肽，其中所述治疗性寡肽由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成并且为反向化合物，其每个氨基酸为D-氨基酸；
(ii)1％苯氧乙醇；
(iii)1％二甲硅油350cSt；
(iv)15％二(乙二醇)乙醚；
(v)0.02％丁基羟基苯甲醚；
(vi)4.8％液体石蜡；
(vii)6.3％白色软石蜡；
(viii)5.5％鲸蜡硬脂醇50:50；
(ix)2.4％鲸蜡硬脂醇聚氧乙烯醚20；以及
(x)62.98％水。
11.如权利要求1至10中任一项定义的组合物,用于治疗。
12.如权利要求1至10中任一项定义的组合物,用于治疗肿瘤。
13.根据权利要求12所述用途的组合物，其中所述肿瘤为疣。
14.根据权利要求13所述用途的组合物，其中所述治疗包括向所述疣局部施用所述组合物。
15.根据权利要求14所述用途的组合物，其中所述治疗包括向所述疣每日施用所述组合物约4周的时间。
16.根据权利要求13至15中任一项所述用途的组合物，其中所述疣为皮肤疣。
17.根据权利要求12所述用途的组合物，其中所述肿瘤为皮肤的肿瘤。
18.根据权利要求17所述用途的组合物，其中所述皮肤的肿瘤是光化性角化病、脂溢性角化病、鲍温病、基底细胞癌或鳞状细胞癌。
19.一种治疗受试者中的肿瘤的方法，包括向所述受试者施用如权利要求1至10定义的组合物。
20.如权利要求1至10中任一项定义的组合物在制造用于治疗肿瘤的药物中的用途。
21.根据权利要求19所述的方法或权利要求20所述的用途，其中所述肿瘤是疣。
22.根据权利要求21所述的方法或用途，其中所述疣的治疗如权利要求14或15定义，和/或所述疣如权利要求16定义。
23.根据权利要求19所述的方法或权利要求20所述的用途，其中所述肿瘤如权利要求17或18定义。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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TR201203732T1 (tr) * 2009-10-01 2012-09-21 Ak Ki̇mya İthalat-İhracat Ve Sanayi̇i̇ A.Ş. Opioid antagonistlerin topikal bileşimleri ve deri hastalıklarının bu bileşimler ile tedavisi için yöntemler.
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