JP7426764B1 - タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット - Google Patents
タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット Download PDFInfo
- Publication number
- JP7426764B1 JP7426764B1 JP2023092204A JP2023092204A JP7426764B1 JP 7426764 B1 JP7426764 B1 JP 7426764B1 JP 2023092204 A JP2023092204 A JP 2023092204A JP 2023092204 A JP2023092204 A JP 2023092204A JP 7426764 B1 JP7426764 B1 JP 7426764B1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- translation
- translating
- template mrna
- energy regeneration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000014616 translation Effects 0.000 title claims abstract description 309
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 102
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 title claims description 29
- 239000000654 additive Substances 0.000 title claims description 15
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims abstract description 181
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 138
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 137
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 137
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 137
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims abstract description 133
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims abstract description 91
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims abstract description 91
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims abstract description 43
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 45
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 45
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 claims description 43
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 claims description 39
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 14
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 12
- 102000013901 Nucleoside diphosphate kinase Human genes 0.000 claims description 6
- 101710100179 UMP-CMP kinase Proteins 0.000 claims description 6
- 101710119674 UMP-CMP kinase 2, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 6
- 102000002281 Adenylate kinase Human genes 0.000 claims description 5
- 108020000543 Adenylate kinase Proteins 0.000 claims description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- 108010020366 Arginine kinase Proteins 0.000 claims description 4
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 claims description 4
- 102000009617 Inorganic Pyrophosphatase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010009595 Inorganic Pyrophosphatase Proteins 0.000 claims description 3
- 108030001289 Inorganic diphosphatases Proteins 0.000 claims description 3
- 102000006010 Protein Disulfide-Isomerase Human genes 0.000 claims description 3
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 claims description 3
- 108020003519 protein disulfide isomerase Proteins 0.000 claims description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 abstract description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 33
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 29
- 241000894007 species Species 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 14
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 10
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N N-phosphocreatine Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=N)NP(O)(O)=O DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000269849 Thunnus Species 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 3
- 101100281005 Bos taurus FGF2 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 3
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 3
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 3
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 3
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 3
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 102000003745 Hepatocyte Growth Factor Human genes 0.000 description 3
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- 102000004058 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 3
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 3
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 3
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 3
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 229940077737 brain-derived neurotrophic factor Drugs 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 3
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 3
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 3
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 3
- -1 for example Proteins 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 3
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 3
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 2
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 2
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 2
- 244000059546 zoonotic virus Species 0.000 description 2
- AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound NCC(O)=O.OCC(N)(CO)CO AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000242764 Aequorea victoria Species 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102000052866 Amino Acyl-tRNA Synthetases Human genes 0.000 description 1
- 108700028939 Amino Acyl-tRNA Synthetases Proteins 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- VIOCWWOOUYUPMA-ZDUSSCGKSA-N C(=O)OC(CC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)C1=CC=C(NCC2=CN=C3N=C(N)NC(=O)C3=N2)C=C1)=O Chemical compound C(=O)OC(CC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)C1=CC=C(NCC2=CN=C3N=C(N)NC(=O)C3=N2)C=C1)=O VIOCWWOOUYUPMA-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 241000258955 Echinodermata Species 0.000 description 1
- 241000257465 Echinoidea Species 0.000 description 1
- 108010041308 Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- 102100030856 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000005877 Peptide Initiation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010044843 Peptide Initiation Factors Proteins 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- 208000024777 Prion disease Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 description 1
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- CCTIOCVIZPCTGO-BYPYZUCNSA-N phosphoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)NP(O)(O)=O CCTIOCVIZPCTGO-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
Abstract
Description
前記翻訳鋳型mRNAが、
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを含む
タンパク質の生産方法。
(2)前記翻訳鋳型mRNAが、目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
上記(1)に記載のタンパク質の生産方法。
(3)前記タンパク質翻訳工程が、
前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを用いてエネルギー再生酵素を翻訳する第1タンパク質翻訳工程と、
前記第1タンパク質翻訳工程の翻訳産物と、前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、を用いて目的タンパク質を翻訳する第2タンパク質翻訳工程と、
を含む
上記(2)に記載のタンパク質の生産方法。
(4)前記タンパク質翻訳工程が、
前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAおよび前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが共存した状態で実施される
上記(2)に記載のタンパク質の生産方法。
(5)前記エネルギー再生酵素が、クレアチンキナーゼ、ヌクレオシド2リン酸キナーゼ、アルギニンキナーゼ、および、アデニル酸キナーゼからなる群から選択した少なくとも1種である
上記(1)~(4)の何れか一つに記載のタンパク質の生産方法。
(6)無機ジホスファターゼ、無機ピロホスファターゼおよびジスルフィドイソメラーゼからなる群から選択した少なくとも1種を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
上記(1)~(4)の何れか一つに記載のタンパク質の生産方法。
(7)前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNA、および、前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが、
前記翻訳鋳型mRNAをコードする領域と、前記翻訳鋳型mRNAをコードする領域の5’末端に配置されるプロモーター領域と、を含む転写鋳型DNAを用い、
細胞の不存在下であってかつ前記転写鋳型DNAをmRNAに転写するための要素の存在下で、前記転写鋳型DNAを用いて翻訳したものである
上記(2)に記載のタンパク質の生産方法。
(8)前記エネルギー再生酵素および前記目的タンパク質が、同一の生物種のものである
上記(2)に記載のタンパク質の生産方法。
(9)前記目的タンパク質が成長因子である
上記(2)~(4)、(7)、(8)の何れか一つに記載のタンパク質の生産方法。
(10)培養肉の生産方法であって、
上記(9)に記載のタンパク質の生産方法で生産した翻訳産物を添加物として含む培養液を用いて細胞培養する工程を含む
培養肉の生産方法。
(11)培養肉の生産方法に用いる添加物であって、
上記(9)に記載のタンパク質の生産方法で生産した翻訳産物を含む
添加物。
(12)タンパク質の生産方法に用いるキットであって、該キットは、
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、
細胞の不存在下であってかつ前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAをタンパク質に翻訳するための要素と、
を含む
キット。
(13)目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
上記(12)に記載のキット。
(14)前記エネルギー再生酵素および前記目的タンパク質が、同一の生物種のものである
上記(13)に記載のキット。
第1の実施形態に係るタンパク質の生産方法は、細胞の不存在下であってかつ翻訳鋳型mRNAをタンパク質に翻訳するための要素の存在下で、翻訳鋳型mRNAを用いてタンパク質を翻訳するタンパク質翻訳工程を備える。そして、翻訳鋳型mRNAは、タンパク質であるエネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを含む。
(1)無細胞タンパク質合成系により翻訳したエネルギー再生酵素を用いてエネルギー再生系を構築できる。したがって、単離したエネルギー再生酵素が不要であることからコストダウンができる。
(2)無細胞タンパク質合成系により生産したタンパク質は、医薬品や食品として用いることができる。しかしながら、摂取したことが無い生物種由来のタンパク質を医薬品や食品として摂取した場合、アレルギー反応等を引き起こす恐れがある。例えば、クレアチンキナーゼはウサギ由来等、市販のエネルギー再生酵素は由来する生物種の選択肢が限定されている。一方、本出願ではエネルギー再生酵素は翻訳鋳型mRNAから翻訳することで得られることから、所望の生物種由来のエネルギー再生酵素を翻訳できる。したがって、アレルギー等の恐れを少なくできる。
(3)生産したタンパク質を食品や医薬品に使用する場合、宗教的理由あるいは人畜共通ウィルスの汚染を回避するために、特定の生物種の原料を使用できない場合がある。しかしながら、本出願のタンパク質生産方法では、所望の生物種由来のエネルギー再生酵素を翻訳により得られることから、宗教的理由あるいは人畜共通ウィルスの汚染による問題を解決できる。
(4)プリオン病等の影響により、動物由来の原料を使用して食品や医薬品を製造することが忌避される傾向にある。本出願のタンパク質生産方法では、エネルギー再生酵素の種類は動物であっても、非動物原料のみでタンパク質を生産することができる。したがって、動物原料由来の疾患等の恐れがない。
次に、タンパク質の生産方法の第2の実施形態について説明する。第2の実施形態に係るタンパク質の生産方法は、目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを含む点で第1の実施形態に係るタンパク質の生産方法と異なるが、その他の点は、第1の実施形態に係るタンパク質の生産方法と同じである。重複記載を避けるため、タンパク質の生産方法の第2の実施形態では、第1の実施形態と異なる点を中心に説明する。したがって、第2の実施形態において、明示的に説明をしなかったとしても、第1の実施形態において説明済みの事項を第2の実施形態に適用できることは言うまでもない。
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを用いてエネルギー再生酵素を翻訳する第1タンパク質翻訳工程を先ず実施し、
次に、第1タンパク質翻訳工程の翻訳産物と、目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、を用いて目的タンパク質を翻訳する第2タンパク質翻訳工程を実施する、
例が挙げられる(以下、「第1の例」と記載することがある)。
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAおよび目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが共存した状態で実施する、
例が挙げられる(以下、「第2の例」と記載することがある)。
(5)第1の実施形態に係るタンパク質の生産方法が奏する(2)~(4)に記載の効果において、「エネルギー再生酵素」を「目的タンパク質」と読み替えた効果を奏する。
次に、タンパク質の生産方法の実施形態において採用可能な任意付加的事項について説明する。
(その他酵素を翻訳する翻訳鋳型mRNAの追加)
タンパク質翻訳工程では、エネルギー再生酵素に加え、転写/翻訳で生じる副産物(例えば、無機ピロリン酸)を分解するための酵素、および/または、目的タンパク質をフォールディング(目的タンパク質の活性化)するための酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが添加されていてもよい。副産物を分解するための酵素としては、限定されるものではないが、例えば、無機ジホスファターゼ、無機ピロホスファターゼ等が挙げられる。また、目的タンパク質をフォールディングするための酵素としては、限定されるものではないが、例えば、ジスルフィドイソメラーゼ等が挙げられる。
(6)無細胞タンパク質合成系の効率的な合成を阻害する副産物を除去できることから、タンパク質の生産効率が向上する。また、生産したタンパク質の活性化ができる。
エネルギー再生酵素および目的タンパク質の組合せは、同一の生物種由来となるようにしてもよい。その場合、公知のDBから同一生物種のエネルギー再生酵素および目的タンパク質の核酸配列を入手し、翻訳鋳型mRNAを設計すればよい。また、翻訳鋳型mRNAを転写鋳型DNAから転写することで作製する場合は、当該翻訳鋳型mRNAをコードする領域と、翻訳鋳型mRNAをコードする領域の5’末端に配置されるプロモーター領域を含む転写鋳型DNAを設計すればよい。
(7)生産したタンパク質を食品に使用する場合、異なる生物種由来のタンパク質を混合することが忌避される場合がある。エネルギー再生酵素および目的タンパク質の組合せを同一の生物種由来とすることで、忌避の恐れが少なくなる。
目的タンパク質は成長因子あるいはサイトカインであってもよい。近年、人口増加・食料増産への対応、食肉動物の餌となる牧草地増加に伴う環境問題、動物への抗生物質投与による安全性、動物の生命を奪うことに対する倫理等の観点から、培養肉が注目されている。培養肉は、アミノ酸や炭水化物など細胞の増殖に必要な物質が入った培養液を用い、動物から取り出した幹細胞を培養するが、培養には成長因子が必要である。また、細胞分化のためにはサイトカインが必要である。成長因子あるいはサイトカインとしては、限定されるものではないが、例えば、以下の成長因子が挙げられる。
・EGF(Epidermal growth factor):上皮成長因子、
・IGF(Insulin-like growth factor):インスリン様成長因子、
・TGF(Transforming growth factor):トランスフォーミング成長因子、
・bFGFまたはFGF2(basic fibroblast growth factor):塩基性線維芽細胞増殖因子、
・NGF(Nerve growth factor):神経成長因子、
・BDNF(Brain-derived neurotrophic factor):脳由来神経栄養因子、
・VEGF(Vesicular endothelial growth factor):血管内皮細胞増殖因子、
・G-CSF(Granulocyte-colony stimulating factor):顆粒球コロニー刺激因子、
・GM-CSF(Granulocyte-macrophage-colony stimulating factor):顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、
・PDGF(Platelet-derived growth factor):血小板由来成長因子、
・EPO(Erythropoietin):エリスロポエチン、
・TPO(Thrombopoietin):トロンボポエチン、
・HGF(Hepatocyte growth factor):肝細胞増殖因子。
・LIF(leukemia inhibotory factor):白血病阻止因子
(8)成長因子は非常に高価である。しかしながら、本出願で開示するタンパク質の生産方法を用いることで、成長因子を安価に製造することができる。
タンパク質の生産方法において、目的タンパク質として成長因子を生産した場合、翻訳産物は培養肉の生産方法に用いることができる。培養肉の生産方法は、翻訳産物を添加物として含む培養液を用いて細胞培養する工程により実施すればよい。培養液は公知の培養液を用いればよい。細胞は、上記のとおり培養対象である動物の細胞を用いればよい。培養対象である動物としては、食肉として摂取しているものであれば特に制限はない。限定されるものではないが、牛、豚、馬、羊等の哺乳類;鶏、鴨、うずら等の鳥類;サーモン、うなぎ、マグロ等の魚類;エビ、カニ等の甲殻類;等が挙げられる。
(9)成長因子を安価に入手できることから、培養肉のコストを低減できる。
(10)培養対象の動物と同じ生物種のエネルギー再生酵素および成長因子を用いた場合、他の種類の動物由来のタンパク質を含まない培養肉を生産できる。
次に、タンパク質の生産方法に用いるキットの実施形態について説明する。上記のとおり、従来の無細胞タンパク質合成系では、エネルギー再生酵素は動物等から単離した酵素を用いていた。一方、無細胞タンパク質合成系において、エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAから得られたエネルギー再生酵素を用いてエネルギー再生系を構築することは、本発明者らが新たに見出したことである。したがって、エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、細胞の不存在下であってかつ翻訳鋳型mRNAをタンパク質に翻訳するための要素と、を含むタンパク質の生産方法に用いるキットは新規の発明である。また、キットは、目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含んでもよく、エネルギー再生酵素および目的タンパク質が同一の生物種のものであってもよい。
[無細胞タンパク質合成系を用いたタンパクの生産におけるクレアチンキナーゼの重要性]
先ず、蛍光タンパク質であるGFPを無細胞タンパク質合成する際に、ウサギから精製したクレアチンキナーゼを用いた場合と用いなかった場合のタンパク質合成の違いについて確認を行った。実験手順を以下に記載する。
・WGE:コムギ胚芽抽出液。特開2006-288320号公報に記載の手順で作製した。
・CK:Roche Diagnostics Deutschland GmbH社製クレアチンキナーゼ(製品番号10127566001)
・AAM:アミノ酸基質。NUProtein社製PSS5100に付属のアミノ酸基質を用いた。
・mRNA:Water jellyfishのGFPのアミノ酸配列をコードするコード領域を含むように設計した。なお、mRNAは、後述する<実施例1>の表3のCK_Organisumの部分にGFPをコードする配列(Acc.No.P42212、Eurofins Genomicsから購入)を挿入した転写鋳型DNAを、実施例1と同様の手順で転写することで得た。
(2)翻訳反応
以下の表1に記載の組成の翻訳反応液を1.5mLチューブ中で調製した。なお、以下の表1に記載の組成液の単位はμLである。添加したCKのストック濃度は20mg/mL、終濃度は200ng/μLとなる。表1中のXについて、CK+は77.8、CK-は80である。
参考例1で合成されたGFPを含む溶液220μLのうち200μLを試料とし、波長475nmの励起光を0.5秒照射して、GFPからの蛍光強度を1時間毎に15時間、プレートリーダーで測定した(吸収フィルター500-550nm)。プレートリーダーは、GloMax(登録商標)プレートリーダー(プロメガ社)を用いた。測定結果を図1に示す。
<実施例1>
(1)クレアチンキナーゼ配列
各種生物由来のエネルギー再生酵素の中で、クレアチンキナーゼ(CK)の配列情報(ACC.No.)、生物種、入手先を表2に示す。なお、実施例1では、No.4のCK_T(Thunnus、マグロ)を用いた。No.1~3、5については、後述する実施例2~4で用いた。
図2にCKの転写鋳型DNA(以下、「CK_DNA」と記載することがある。)の概略を示す。また、表3にCK_DNAの各領域の配列を示す。なお、以下の表3のCK_Organismには、上記No.1~5のOrganismのCK配列が挿入される。
・PCR酵素:東洋紡株式会社 KOD-Plus-Neo
・Primer,人工遺伝子:ユーロフィンジェノミクス株式会社 受託合成サービス
・Thermal Cycler:eppendorf社製 Mastecycler X50s
・微量高速冷却遠心機:トミー工業株式会社 MX-307
次に、作製した転写鋳型DNAを用いて、翻訳鋳型mRNAを作製した。転写反応は、NUProtein社製PSS5100の以下の反応液を用い、先に作製した第2回のPCR反応溶液(転写鋳型DNA含有)2.5μLを用いて1.5mLチューブ中で調製し、37℃で3時間インキュベートした。
次に、以下の組成の翻訳反応液を1.5mLチューブ中で調製し、23℃に設定したインキュベーターに入れて15時間反応させた。表9に記載の組成はCK_Tの翻訳鋳型mRNAに加えCKを加えた。表10に記載の組成はCK_Tの翻訳鋳型mRNAのみであり、翻訳反応液にCKは加えなかった。なお、比較のため、表10のCK_Tの翻訳鋳型mRNAに代え、<参考例1>で作製したGFPの翻訳鋳型mRNAを投与して翻訳反応を実施した。なお、表9および表10の数値の単位はμLで、表9のXは77.8、表10のXは80である。ある。添加したCKのストック濃度は20mg/mL、終濃度は200ng/μLとなる。
・ゲル:4-15% Tris-Glycine gel(バイオラッドラボラトリーズ社製)
・メンブレン:0.2μm PVDFメンブレン(バイオラッドラボラトリーズ社製)
・一次抗体:HA抗体(Proteintech社製)
・二次抗体:goat anti mouse HRP 抗体(Southern Biotech社製)
・ウェスタンブロット発光試薬:SuperSignal West Pico(Thermo社製)
実施例1のCK_T(Thunnus、マグロ)に代え、CK_B(Bovine、ウシ)、CK_C(Chicken、ニワトリ)、CK_U(Unagi、ウナギ)を用い、1st_CK_NFおよび1st_CK_NR_01として、以下の配列のプライマーを用いた以外は、実施例1と同様の手順で実験を行った。なお、後述する実施例4で使用するCK_R(Rabbit、ウサギ)のプライマーも併せて記載する。表11では、CKの後ろに生物種を記載することで、どの生物種のプライマーであるのか特定する。
次に、エネルギー再生酵素を自己増殖する系を用いたタンパク質の合成を行った。
<実施例3>
上記<実施例1>で得られた翻訳産物であるCK_T(図4のL3)を用いて、GFPを目的タンパク質とした合成を行った。表12に翻訳反応液の組成を示す。翻訳産物であるCK_Tは、No.1~4に示すとおり添加量を変えて実験を行った。目的タンパク質はGFPで、参考例1に記載の翻訳鋳型mRNAを用いた。ネガティブコントロール(NC)はCK、CK_TおよびGFPのmRNAなし、ポジティブコントロール(PC)は翻訳産物であるCK_Tに代えCKを用いた。表11の組成で約15時間翻訳反応を実施し、上記<参考例1>と同様の手順で実験を行い合成されたGFPの蛍光強度を測定した。なお、表11の数値の単位はμLである。添加したCKのストック濃度は20mg/mL、終濃度は200ng/μLとなる。
上記<実施例2>で得られた翻訳産物であるウシ、ニワトリ、マグロ、ウナギのCKを用い、以下の表13に記載のそれぞれの生物種に対応するFGF2を目的タンパク質とした合成を行った。具体的手順を以下に記載する。
図7に、ニワトリ、マグロ、ウナギのFGF2の転写鋳型DNA(以下、「FGF2_DNA」と記載することがある。)の概略を示す。また、表14に、FGF2_DNAの各領域の配列を示す。なお、以下の表13のFGF2_Organismには、上記表13のChicken、Thunnus、UnagiのFGF2配列が挿入される。
図8に、ウシのFGF2の転写鋳型DNAの概略を示す。また、表14にウシのFGF2の転写鋳型DNAの各領域の配列を示す。なお、以下の表15のFGF2_Bovineには、上記表13のBovineのFGF2配列が挿入される。
上記(1)および(2)に記載のFGF2の転写鋳型DNA(ニワトリ、マグロ、ウナギ、ウシ)を用い、実施例1と同様の手順で転写反応を行った。
上記<実施例2>で得られた翻訳産物である各種CKと、上記(3)で得られた翻訳鋳型mRNAを用いて、FGF2の合成を行った。表19に翻訳反応液の組成を示す。表19の組成で、上記<実施例1>と同様の手順で実験を行った。なお、1次抗体については、実施例1の1次抗体に代え、以下の1次抗体を用いた。
・1次抗体:抗DYKDDDDKタグ(モノクローナル抗体 Code No.018-22381;富士フィルム和光純薬株式会社)
<実施例5>
次に、エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAおよび目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが共存した状態で翻訳反応を行った。実験手順を以下に記載する。
(1)エネルギー再生酵素
実施例1の表2のNo.1に記載のCK_Rを用い、実施例1と同様の手順で翻訳鋳型mRNAを作製した。
(2)目的タンパク質
参考例1に記載のGFPの翻訳鋳型mRNAを用いた。
(3)エネルギー再生酵素と目的タンパク質の共発現
表20に翻訳反応液の組成を示す。ネガティブコントロール(NC)はCK、CK_RabbitおよびGFPのmRNAなし、ポジティブコントロール(PC)はCK_Rabbitの翻訳鋳型mRNAに代えCKを用いた。表20の組成で約15時間翻訳反応を実施し、上記<参考例1>と同様の手順で実験を行い合成されたGFPの蛍光強度を測定した。
Claims (13)
- 細胞の不存在下であってかつ翻訳鋳型mRNAをタンパク質に翻訳するための要素の存在下で、翻訳鋳型mRNAを用いてタンパク質を翻訳するタンパク質翻訳工程を備える、タンパク質の生産方法であって、
前記翻訳鋳型mRNAが、
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを含み、
タンパク質合成開始時に、エネルギー再生酵素が添加されておらず、前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAから翻訳したエネルギー再生酵素のみを用いてエネルギー再生系が構築される
タンパク質の生産方法。 - 前記翻訳鋳型mRNAが、目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
請求項1に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記タンパク質翻訳工程が、
前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを用いてエネルギー再生酵素を翻訳する第1タンパク質翻訳工程と、
前記第1タンパク質翻訳工程の翻訳産物と、前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、を用いて目的タンパク質を翻訳する第2タンパク質翻訳工程と、
を含む
請求項2に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記タンパク質翻訳工程が、
前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAおよび前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが共存した状態で実施される
請求項2に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記エネルギー再生酵素が、クレアチンキナーゼ、ヌクレオシド2リン酸キナーゼ、アルギニンキナーゼ、および、アデニル酸キナーゼからなる群から選択した少なくとも1種である
請求項1~4の何れか一項に記載のタンパク質の生産方法。 - 無機ジホスファターゼ、無機ピロホスファターゼおよびジスルフィドイソメラーゼからなる群から選択した少なくとも1種を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
請求項1~4の何れか一項に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNA、および、前記目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAが、
前記翻訳鋳型mRNAをコードする領域と、前記翻訳鋳型mRNAをコードする領域の5’末端に配置されるプロモーター領域と、を含む転写鋳型DNAを用い、
細胞の不存在下であってかつ前記転写鋳型DNAをmRNAに転写するための要素の存在下で、前記転写鋳型DNAを用いて翻訳したものである
請求項2に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記エネルギー再生酵素および前記目的タンパク質が、同一の生物種のものである
請求項2に記載のタンパク質の生産方法。 - 前記目的タンパク質が成長因子である
請求項2~4、7、8の何れか一項に記載のタンパク質の生産方法。 - 培養肉の生産方法であって、
請求項9に記載のタンパク質の生産方法で生産した翻訳産物を添加物として含む培養液を用いて細胞培養する工程を含む
培養肉の生産方法。 - タンパク質の生産方法に用いるキットであって、該キットは、
エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAと、
細胞の不存在下であってかつ前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAをタンパク質に翻訳するための要素と、
を含み、且つ、
前記エネルギー再生酵素を翻訳するための翻訳鋳型mRNAから翻訳したエネルギー再生酵素のみを用いてエネルギー再生系が構築されるため、エネルギー再生酵素が添加されていない
キット。 - 目的タンパク質を翻訳するための翻訳鋳型mRNAを更に含む
請求項11に記載のキット。 - 前記エネルギー再生酵素および前記目的タンパク質が、同一の生物種のものである
請求項12に記載のキット。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023092204A JP7426764B1 (ja) | 2023-06-05 | 2023-06-05 | タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023092204A JP7426764B1 (ja) | 2023-06-05 | 2023-06-05 | タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP7426764B1 true JP7426764B1 (ja) | 2024-02-02 |
Family
ID=89718103
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023092204A Active JP7426764B1 (ja) | 2023-06-05 | 2023-06-05 | タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP7426764B1 (ja) |
Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000333673A (ja) | 1999-05-31 | 2000-12-05 | Wakenyaku Kk | 連続無細胞タンパク質合成手段 |
US20030113778A1 (en) | 2001-10-30 | 2003-06-19 | Schulte Jennifer Theresa | Enhanced in vitro nucleic acid synthesis using nucleoside monophosphates |
JP2006340694A (ja) | 2005-06-10 | 2006-12-21 | Post Genome Institute Co Ltd | 分子シャペロンを用いたinvitro転写・翻訳系によるタンパク質合成方法 |
JP2007097438A (ja) | 2005-09-30 | 2007-04-19 | Cellfree Sciences Co Ltd | 無細胞タンパク質合成方法 |
JP2008029204A (ja) | 2004-11-12 | 2008-02-14 | Cellfree Sciences Co Ltd | 無細胞タンパク質合成方法 |
JP2011079845A (ja) | 1999-03-17 | 2011-04-21 | Univ Leland Stanford Jr | 外因性アミノ酸および新規atp再生システムを用いたインビトロ高分子生合成の方法 |
WO2018143145A1 (ja) | 2017-01-31 | 2018-08-09 | 中外製薬株式会社 | 無細胞翻訳系におけるペプチドの合成方法 |
US20220257706A1 (en) | 2019-07-10 | 2022-08-18 | Nanyang Technological University | Epidermal growth factor receptor (egfr) ligands |
US20230016607A1 (en) | 2020-01-02 | 2023-01-19 | Fyberaworks Foods, Inc. | A novel method to manufacture synthetic meat |
JP2023036506A (ja) | 2021-09-02 | 2023-03-14 | ダナグリーン カンパニー リミテッド | 植物性タンパク質を含む多孔質細胞支持体およびそれを用いて製造された培養肉 |
WO2023047831A1 (ja) | 2021-09-27 | 2023-03-30 | 国立大学法人 東京大学 | 細胞培養用ゲル、細胞入り細胞培養用ゲルの製造方法、細胞の製造方法、該細胞の製造方法により製造された三次元筋組織及び培養肉 |
-
2023
- 2023-06-05 JP JP2023092204A patent/JP7426764B1/ja active Active
Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011079845A (ja) | 1999-03-17 | 2011-04-21 | Univ Leland Stanford Jr | 外因性アミノ酸および新規atp再生システムを用いたインビトロ高分子生合成の方法 |
JP2000333673A (ja) | 1999-05-31 | 2000-12-05 | Wakenyaku Kk | 連続無細胞タンパク質合成手段 |
US20030113778A1 (en) | 2001-10-30 | 2003-06-19 | Schulte Jennifer Theresa | Enhanced in vitro nucleic acid synthesis using nucleoside monophosphates |
JP2008029204A (ja) | 2004-11-12 | 2008-02-14 | Cellfree Sciences Co Ltd | 無細胞タンパク質合成方法 |
JP2006340694A (ja) | 2005-06-10 | 2006-12-21 | Post Genome Institute Co Ltd | 分子シャペロンを用いたinvitro転写・翻訳系によるタンパク質合成方法 |
JP2007097438A (ja) | 2005-09-30 | 2007-04-19 | Cellfree Sciences Co Ltd | 無細胞タンパク質合成方法 |
WO2018143145A1 (ja) | 2017-01-31 | 2018-08-09 | 中外製薬株式会社 | 無細胞翻訳系におけるペプチドの合成方法 |
US20220257706A1 (en) | 2019-07-10 | 2022-08-18 | Nanyang Technological University | Epidermal growth factor receptor (egfr) ligands |
US20230016607A1 (en) | 2020-01-02 | 2023-01-19 | Fyberaworks Foods, Inc. | A novel method to manufacture synthetic meat |
JP2023036506A (ja) | 2021-09-02 | 2023-03-14 | ダナグリーン カンパニー リミテッド | 植物性タンパク質を含む多孔質細胞支持体およびそれを用いて製造された培養肉 |
WO2023047831A1 (ja) | 2021-09-27 | 2023-03-30 | 国立大学法人 東京大学 | 細胞培養用ゲル、細胞入り細胞培養用ゲルの製造方法、細胞の製造方法、該細胞の製造方法により製造された三次元筋組織及び培養肉 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NUProteinホームページ,Internet Archive Wayback Machine,,2023年04月05日,[2023年6月12日検索],http://www.nuprotein.jp/ja/を検索,インターネット |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Craig | Hsp70 at the membrane: driving protein translocation | |
Honkoop et al. | Single-cell analysis uncovers that metabolic reprogramming by ErbB2 signaling is essential for cardiomyocyte proliferation in the regenerating heart | |
Schwechheimer et al. | Biotechnology of riboflavin | |
Kovtun et al. | Leishmania cell-free protein expression system | |
Berghoff et al. | Integrative “omics”-approach discovers dynamic and regulatory features of bacterial stress responses | |
JPH06503477A (ja) | 真核無細胞抽出物中での転写と翻訳の共役 | |
Khan et al. | RNA-sequencing analysis of shell gland shows differences in gene expression profile at two time-points of eggshell formation in laying chickens | |
CN112888794A (zh) | 用于处理或分析多物种核酸样品的组合物、方法和系统 | |
Failmezger et al. | Site-specific cleavage of ribosomal RNA in Escherichia coli-based cell-free protein synthesis systems | |
WO2014119600A1 (ja) | Flexible Display法 | |
Reinhart et al. | Differential gene expression of a feed-spiked super-producing CHO cell line | |
Samiullah et al. | Downregulation of ALAS1 by nicarbazin treatment underlies the reduced synthesis of protoporphyrin IX in shell gland of laying hens | |
JP7426764B1 (ja) | タンパク質の生産方法、培養肉の生産方法、培養肉の生産方法に用いる添加物、および、タンパク質の生産方法に用いるキット | |
Fujisawa et al. | Transcriptome dynamics of blood-fed and starved poultry red mites, Dermanyssus gallinae | |
US7399610B2 (en) | Method for cell-free protein synthesis using extract solution derived from insect cell | |
JP2007319064A (ja) | 修飾化アミノ酸を部位特異的に導入したタンパク質を発現させる方法 | |
Chang et al. | A cis-regulatory antisense RNA represses translation in Vibrio cholerae through extensive complementarity and proximity to the target locus | |
CN110199025A (zh) | 用于无细胞蛋白质合成的启动子构建体 | |
TWI716392B (zh) | 控制銅離子之製造方法 | |
Finkler et al. | Bead-based assay for spatiotemporal gene expression control in cell-free transcription–translation systems | |
Yousefi Taemeh et al. | Effect of glutamine stability on the long-term culture and line establishment of chicken primordial germ cells | |
Szaflarski et al. | Question 7: optimized energy consumption for protein synthesis | |
Ermakov et al. | An innovative modification of the nutrient medium formulation for the isolation and differentiation of enterobacteria | |
JP6108170B2 (ja) | 細胞培養用培地 | |
JP2023546997A (ja) | 熱及び酵素加水分解に対する耐性の増加を示す重水素安定化リボ核酸(rna)分子、安定化rna分子を含む水性組成物、及びその製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230605 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20230605 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230619 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230718 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20230814 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231114 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20231120 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240109 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240116 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7426764 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |