JP7411205B2 - ＡＧＥｓ形成抑制剤及びその製造方法 - Google Patents
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Description
本発明は、ＡＧＥｓ形成抑制剤に関するものである。
「糖化」とは、タンパク質に糖が結合する現象で、糖化による最終生成物をＡＧＥｓ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）という。体内のＡＧＥｓは、細胞に様々な悪影響を及ぼし、老化の原因の一つと考えられている。例えば、血管で糖化が起こると、ＡＧＥｓの蓄積により毛細血管障害が起こり、肌の真皮ではコラーゲンの糖化により線維が固くなり、ハリ弾力の低下の原因となり、肌の表皮ではくすみの原因となることが知られている。
しかしながら、糖はヒトのエネルギー源として不可欠な存在であり、一方、加齢によりＡＧＥｓが蓄積されることも知られている。以上のことから、安全で効果の高いＡＧＥｓ形成抑制剤が望まれていた。
本発明は上記事情に鑑みなされたもので、安全で効果の高いＡＧＥｓ形成抑制剤を提供することを目的とする。
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、ハトムギを加圧下酵素分解させた「ハトムギの加圧酵素分解物」が、顕著なＡＧＥｓ形成抑制効果を有することを知見し、本発明をなすに至ったものである。後述する実施例、比較例の結果からも明らかであるように、ハトムギ熱抽出物ではＡＧＥｓ形成抑制効果は不十分であり、「ハトムギの加圧酵素分解物」にこのような顕著な効果があることは、本発明者らの新知見である。
従って、本発明は下記ＡＧＥｓ形成抑制剤及びその製造方法を提供する。
１．ハトムギの加圧酵素分解物を含有するＡＧＥｓ形成抑制剤。
２．ハトムギに酵素を加え、加圧下で酵素分解する工程を含む、ハトムギの加圧酵素分解物を含有するＡＧＥｓ形成抑制剤の製造方法。
３．加圧下で酵素分解する工程が、圧力４０～２００ＭＰ、温度は４０～８０℃で１～３６時間反応させる工程である２記載のＡＧＥｓ形成抑制剤の製造方法。
１．ハトムギの加圧酵素分解物を含有するＡＧＥｓ形成抑制剤。
２．ハトムギに酵素を加え、加圧下で酵素分解する工程を含む、ハトムギの加圧酵素分解物を含有するＡＧＥｓ形成抑制剤の製造方法。
３．加圧下で酵素分解する工程が、圧力４０～２００ＭＰ、温度は４０～８０℃で１～３６時間反応させる工程である２記載のＡＧＥｓ形成抑制剤の製造方法。
本発明によれば、安全で効果の高いＡＧＥｓ形成抑制剤を提供することができる。
以下、本発明について詳細に説明する。
［ハトムギの加圧酵素分解物］
ハトムギは、イネ科ジュズダマ属の植物である。使用部位としては特に限定されないが、例えば、種子、葉、根、ヌカ等が挙げられ、種子が特に好ましい。ハトムギは、採取後ただちに乾燥し粉砕したものが好適である。内服の場合、利尿・消炎・鎮痛作用等の効能が知られている。ハトムギ抽出物は外用剤として知られており、肌荒れ改善、いぼ取り等の効能が知られている。
［ハトムギの加圧酵素分解物］
ハトムギは、イネ科ジュズダマ属の植物である。使用部位としては特に限定されないが、例えば、種子、葉、根、ヌカ等が挙げられ、種子が特に好ましい。ハトムギは、採取後ただちに乾燥し粉砕したものが好適である。内服の場合、利尿・消炎・鎮痛作用等の効能が知られている。ハトムギ抽出物は外用剤として知られており、肌荒れ改善、いぼ取り等の効能が知られている。
加圧酵素分解とは、ハトムギ（原料）を加圧下で酵素分解した酵素分解物をいう。ハトムギの加圧酵素分解物の製造方法としては、ハトムギ（原料）に酵素を加え、加圧下で酵素分解する工程を含むものである。ハトムギ（原料）はそのままでもよいが、水を加えてもよい。水を加える場合は特に限定されず、質量比でハトムギ（原料）１に対して、２～５の範囲がよい。
［酵素］
酵素は限定がなく、酵素活性を有すれば特に制限はなく、精製された酵素だけではなく、粗酵素であってもよい。酵素としては、糖質分解酵素、蛋白質分解酵素が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。糖質分解酵素としては、例えば、アミラーゼ、グルコシダーゼ（マルターゼ）、リゾチーム、β－ガラクトシダーゼ等が挙げられ、アミラーゼ、グルコシダーゼが好ましい。蛋白質分解酵素としては、パパイン、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン等の公知のプロテアーゼ、各種微生物が産生するプロテアーゼ等が挙げられる。酵素としては、糖質分解酵素と蛋白質分解酵素とを組み合わせて用いることが好ましく、具体的には、アミラーゼとプロテアーゼとの組み合わせが好ましい。
酵素は限定がなく、酵素活性を有すれば特に制限はなく、精製された酵素だけではなく、粗酵素であってもよい。酵素としては、糖質分解酵素、蛋白質分解酵素が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。糖質分解酵素としては、例えば、アミラーゼ、グルコシダーゼ（マルターゼ）、リゾチーム、β－ガラクトシダーゼ等が挙げられ、アミラーゼ、グルコシダーゼが好ましい。蛋白質分解酵素としては、パパイン、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン等の公知のプロテアーゼ、各種微生物が産生するプロテアーゼ等が挙げられる。酵素としては、糖質分解酵素と蛋白質分解酵素とを組み合わせて用いることが好ましく、具体的には、アミラーゼとプロテアーゼとの組み合わせが好ましい。
［酵素分解条件］
加圧条件としては、加圧４０～２００ＭＰａが好ましく、加圧５０～１５０ＭＰａがより好ましい。温度は加温下、例えば、４０～８０℃が好ましく、５０～７０℃がより好ましい。酵素分解温度は１～３６時間が好ましく、３～２４時間がより好ましい。このような分解条件範囲内であれば、酵素の失活を起こすことなく酵素反応が速やかに進む温度を保つことができる。また、有害微生物の増殖を阻止できるので、腐敗の心配がなく、防腐剤等の添加やその他の腐敗防止措置を取る必要がない。なお、上記加圧加温条件は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、後述する酵素発酵促進装置を用いて行うことが好ましい。
加圧条件としては、加圧４０～２００ＭＰａが好ましく、加圧５０～１５０ＭＰａがより好ましい。温度は加温下、例えば、４０～８０℃が好ましく、５０～７０℃がより好ましい。酵素分解温度は１～３６時間が好ましく、３～２４時間がより好ましい。このような分解条件範囲内であれば、酵素の失活を起こすことなく酵素反応が速やかに進む温度を保つことができる。また、有害微生物の増殖を阻止できるので、腐敗の心配がなく、防腐剤等の添加やその他の腐敗防止措置を取る必要がない。なお、上記加圧加温条件は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、後述する酵素発酵促進装置を用いて行うことが好ましい。
酵素分解の後、必要に応じて酵素失活工程、ろ過工程、濃縮工程、噴霧乾燥工程等を用いることもできる。
本発明の製造方法に用いる装置としては、加圧加温条件を満足することができるものであるならば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のものを使用することができ、例えば、特開２００６－２９６２５５号公報に記載された酵素発酵促進装置等を用いることができる。
本発明のハトムギの加圧酵素分解物は、優れたＡＧＥｓ形成抑制効果を有するため、ＡＧＥｓ形成抑制剤の有効成分として用いることができる。本発明のＡＧＥｓ形成抑制剤は、ハトムギの加圧酵素分解物を含有するものであり、ハトムギの加圧酵素分解物を配合し、製剤化した組成物でもよい。本発明のＡＧＥｓ形成抑制剤は、医薬品、医薬部外品、食品、機能性食品、化粧品等に配合でき、広い用途に使用することができる。食品としては、飲料を含む全ての食品が例示される。化粧品としては、例えば、乳液、ローション、クリーム、パック等の基礎化粧品、ファンデーション、リップクリーム、口紅等のメイクアップ化粧料、及び入浴剤等の皮膚化粧料；シャンプー、リンス、トリートメント、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、ポマード等の頭皮化粧料等が例示される。
医薬品、医薬部外品、食品、機能性食品、化粧品等の剤型は特に限定されず、常法に従い、粉末、顆粒、錠剤、カプセル、固形、液状、クリーム、ゲル、フォーム、スプレー等の任意の剤形に製剤化することができ、それぞれの剤型の任意成分を適量用いることができる。
本発明のＡＧＥｓ形成抑制剤は、内服剤でも外用剤でもよいが、内服剤の場合、ハトムギの加圧酵素分解物（固形分として）の摂取量は、成人１日当たり約１～１，０００ｍｇが好適である。ハトムギの加圧酵素分解物の配合量は製剤の形態により適宜選定されるが、通常、内服剤中０．００１～５０質量％が好ましく、０．０１～２０質量％がより好ましい。また、顆粒、錠剤又はカプセル形態の場合は、通常０．０１～１００質量％が好ましく、５～１００質量％がより好ましい。外用剤の場合は、外用剤中０．０００１～１０質量％が好ましい。
以下、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。
［実施例１］（ハトムギの加圧酵素分解物）
ハトムギ粉末１００ｇに水２００ｍＬ、プロテアーゼ１ｇ、及びアミラーゼ０．３ｇを加え、５０℃、６０ＭＰａで２４時間、酵素発酵促進装置（ヤンマー株式会社）を用い、反応させた。得られた反応液に５００ｍＬの水を加え、珪藻土でろ過を行った。得られたろ液を減圧濃縮し、４８．７ｇのハトムギの加圧酵素分解物を得た。
ハトムギ粉末１００ｇに水２００ｍＬ、プロテアーゼ１ｇ、及びアミラーゼ０．３ｇを加え、５０℃、６０ＭＰａで２４時間、酵素発酵促進装置（ヤンマー株式会社）を用い、反応させた。得られた反応液に５００ｍＬの水を加え、珪藻土でろ過を行った。得られたろ液を減圧濃縮し、４８．７ｇのハトムギの加圧酵素分解物を得た。
［比較例１］（ハトムギの熱水抽出物）
ハトムギ粉末１００ｇに水２００ｍＬを加え、熱水抽出した。得られた抽出液を遠心分離機で固液分離し、噴霧乾燥して、２０ｇのハトムギの熱水抽出物を得た。
ハトムギ粉末１００ｇに水２００ｍＬを加え、熱水抽出した。得られた抽出液を遠心分離機で固液分離し、噴霧乾燥して、２０ｇのハトムギの熱水抽出物を得た。
上記で得られた「実施例１：ハトムギの加圧酵素分解物」と「比較例１：ハトムギの熱水抽出物」について、下記方法でＡＧＥｓ形成抑制効果を評価した。
＜ＡＧＥｓ形成抑制効果試験方法＞
９６ｗｅｌｌのＩ型コラーゲンコートプレートにＰＢＳ（－）にて調製した０．２ｍｏｌ／ＬのＤ（－）－リボース及び表中の濃度になるように調整した各濃度の被験試料の混合液１００μＬを添加し、３７℃で２０日静置した。陰性対照としてＰＢＳ（－）のみを添加したもの、陽性対照として、Ｄ（－）－リボースのみを添加したものを同様に静置した。抗ＡＧＥｓ抗体を用いたＥＬＩＳＡ法によりＡＧＥｓ量を測定し、ＡＧＥｓ形成抑制作用を評価した。
ＡＧＥｓ形成抑制率の計算方法は以下のとおりである。
ＡＧＥｓ形成抑制率（％）＝｛（Ｂ－Ｃ）／（Ｂ－Ａ）｝×１００
Ａ：陰性対照（ＰＢＳ（－）のみ）の波長４０５ｎｍにおける吸光度
Ｂ：陽性対照（Ｄ（－）－リボースのみ）の波長４０５ｎｍにおける吸光度
Ｃ：被験試料添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度
９６ｗｅｌｌのＩ型コラーゲンコートプレートにＰＢＳ（－）にて調製した０．２ｍｏｌ／ＬのＤ（－）－リボース及び表中の濃度になるように調整した各濃度の被験試料の混合液１００μＬを添加し、３７℃で２０日静置した。陰性対照としてＰＢＳ（－）のみを添加したもの、陽性対照として、Ｄ（－）－リボースのみを添加したものを同様に静置した。抗ＡＧＥｓ抗体を用いたＥＬＩＳＡ法によりＡＧＥｓ量を測定し、ＡＧＥｓ形成抑制作用を評価した。
ＡＧＥｓ形成抑制率の計算方法は以下のとおりである。
ＡＧＥｓ形成抑制率（％）＝｛（Ｂ－Ｃ）／（Ｂ－Ａ）｝×１００
Ａ：陰性対照（ＰＢＳ（－）のみ）の波長４０５ｎｍにおける吸光度
Ｂ：陽性対照（Ｄ（－）－リボースのみ）の波長４０５ｎｍにおける吸光度
Ｃ：被験試料添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度
ハトムギの加圧酵素分解物は、ハトムギ熱水抽出物に比べ、強いＡＧＥｓ形成抑制効果が認められた。
［実施例２］
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ５０ｇ
粉糖（ショ糖） １８８ｇ
グリセリン脂肪酸エステル １２ｇ
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ５０ｇ
粉糖（ショ糖） １８８ｇ
グリセリン脂肪酸エステル １２ｇ
［実施例３］
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ５０ｇ
粉糖（ショ糖） １８８ｇ
グリセリン脂肪酸エステル １２ｇ
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ５０ｇ
粉糖（ショ糖） １８８ｇ
グリセリン脂肪酸エステル １２ｇ
［実施例４］
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３４ｇ
ビートオリゴ糖 １０００ｇ
ビタミンＣ １６７ｇ
ステビア抽出物 １０ｇ
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３４ｇ
ビートオリゴ糖 １０００ｇ
ビタミンＣ １６７ｇ
ステビア抽出物 １０ｇ
［実施例５］
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３４ｇ
ビートオリゴ糖 １０００ｇ
ビタミンＣ １６７ｇ
ステビア抽出物 １０ｇ
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３４ｇ
ビートオリゴ糖 １０００ｇ
ビタミンＣ １６７ｇ
ステビア抽出物 １０ｇ
［実施例６］
下記処方に従い、常法によりドリンクを製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３ｇ
ブドウ糖ショ糖果糖 １０ｇ
クエン酸 １ｇ
クエン酸ソーダ ０．５ｇ
香料 ０．０１ｇ
色素 ０．０１ｇ
精製水 残部
全量 １００ｇ
下記処方に従い、常法によりドリンクを製造した。
ハトムギ加圧酵素分解物（実施例１） ３ｇ
ブドウ糖ショ糖果糖 １０ｇ
クエン酸 １ｇ
クエン酸ソーダ ０．５ｇ
香料 ０．０１ｇ
色素 ０．０１ｇ
精製水 残部
全量 １００ｇ
Claims (2)
- ハトムギに、アミラーゼ及びプロテアーゼを加え、圧力４０～２００ＭＰ、温度４０～８０℃で１～３６時間反応させたハトムギの加圧酵素分解物を含有する、ＡＧＥｓ形成抑制剤。
- ハトムギに、アミラーゼ及びプロテアーゼを加え、圧力４０～２００ＭＰ、温度４０～８０℃で１～３６時間反応させ、酵素分解する工程を含む、ハトムギの加圧酵素分解物を含有するＡＧＥｓ形成抑制剤の製造方法。
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| JP2019179924A JP7411205B2 (ja) | 2019-09-30 | 2019-09-30 | ＡＧＥｓ形成抑制剤及びその製造方法 |
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|---|---|---|---|---|
| JP2003531376A (ja) | 2000-04-14 | 2003-10-21 | ナイアダイン コーポレーション | タンパク質−後期糖化反応生成物（タンパク質−ａｇｅ）形成の調節因子を同定する方法 |
| JP2006296255A (ja) | 2005-04-19 | 2006-11-02 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | 穀物酵素分解物及びその製造方法、並びに機能性物品 |
| JP2013253071A (ja) | 2012-05-08 | 2013-12-19 | Antiaging Bank:Kk | Ｏｐｈ活性増強剤 |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Biochim. Biophys. Acta,，2001年，Vol.1535, No.2，pp.110-119 |
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