JP7406829B2 - 観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法 - Google Patents
観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法 Download PDFInfo
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Description
本発明は、観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法に関する。
顕微鏡によるイメージング技術は、時々刻々と進化を挙げており、生命現象をライブで可視化しありのままの情報を得る必要不可欠な観察法である。２光子励起顕微鏡、全反射蛍光顕微鏡、超解像度顕微鏡の開発が例として挙がるように、ハード面（顕微鏡本体や観察精度）の開発には、目を見張るものがある。また、最近、臓器等の生体組織を透明化する試薬（非特許文献１、２）が開発され、生体組織の特定蛋白質の深部イメージングが可能となり、これまでなし得なかった生体組織を丸ごとイメージングするニーズが急増している。
ここで、説明が容易になるように、先に観察試料と観察検体について定義する。観察試料は、細胞や生体組織等、または、観察用基材もしくは保持材の上に載置された細胞や生体組織等とし、この観察試料を超薄膜で被覆したものを観察検体と定義する。
一方で、観察試料の作製（ソフト面）においては、従来技術では、観察したい細胞や生体組織を透明化試薬（非特許文献１、２）で透明化し、その生体組織をカバーガラス（観察用基材）に乗せている。ところが、この観察試料では、細胞や生体組織の乾燥を防げないうえに、慣性の力で像がぶれてしまい、長時間の観察や高解像度の画像を得ることが難しい。この従来技術の課題の乾燥については、細胞や生体組織をヒドロゲルで包むことで回避できるが、透明化した細胞や生体組織がもとの不透明な状態に戻ってしまう。そこで、観察したい細胞や生体組織をカバーガラス（観察用基材）に乗せ、その上から超薄膜で被覆する方法（観察検体）が開発されている。このようにすることによって、透明性を維持しながら、長時間の観察が可能になっている。この観察試料では、カバーガラス（観察用基材）側から顕微鏡による観察を行うが、この他に、超薄膜を観察用基材とし、細胞や生体組織を超薄膜で被覆し、超薄膜側から顕微鏡による観察を行う方法が提案されている。この方法によると、顕微鏡による観察の際に、カバーガラスのような光学的な妨げとならないため、細胞や生体組織のより深部まで観測が可能になっている。（非特許文献３）このように、顕微鏡によるイメージングの際には、超薄膜で被覆する需要が生じている。しかしながら、被覆する前の超薄膜は水性溶媒に浸漬された状態を経る。したがって、超薄膜を水性溶媒から大気中にピンセット等で取り出す際、超薄膜に縒り等が発生して平坦な状態で取り出すことが困難であった。その結果、対象の細胞や生体組織全体を超薄膜で被覆することが非常に難しいという問題がある。
このような問題を解決するため、不織布を基材として、その上に超薄膜を有しており、不織布の超薄膜側を被覆体に貼り付け、指の腹で不織布を擦ることで被覆体に超薄膜を転写する方法が提案されている。（特許文献１）
この他、水性溶媒に超薄膜を浮かべ、その超薄膜上に生体組織を乗せ、さらにその上からカバーガラス（観察用基材）を乗せ、生体組織とカバーガラス（観察用基材）を超薄膜で被覆することが行われている（非特許文献４）。
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このような問題を解決するため、不織布を基材として、その上に超薄膜を有しており、不織布の超薄膜側を被覆体に貼り付け、指の腹で不織布を擦ることで被覆体に超薄膜を転写する方法が提案されている。（特許文献１）
この他、水性溶媒に超薄膜を浮かべ、その超薄膜上に生体組織を乗せ、さらにその上からカバーガラス（観察用基材）を乗せ、生体組織とカバーガラス（観察用基材）を超薄膜で被覆することが行われている（非特許文献４）。
H. Hama, et al., Nat. Neurosci., 14, 1481 (2011)
H. Hama, et al., Nat. Neurosci., 18, 1518 (2015)
撥水性超薄膜の調製とカバーグラスフリー生体深部イメージング法の確立、第８回ＣＳＪ化学フェスタ２０１８、学生ポスター発表、分野：２．無機化学・分析化学、発表番号：Ｐ２－０７２、２０１８年１０月２３日開催
Y. Okamura, et al., Adv. Mater., 29, 1703139（2017）
しかしながら、特許文献１に記載された超薄膜の転写方法では、観察試料の表面に転写することは可能であるが、観察試料の裏面まで超薄膜で包み込んで観察検体を作製することは難しい。また、超薄膜を転写するために、不織布側を擦る必要があるため、細胞や生体組織がつぶれることや、細胞や生体組織がカバーガラス（観察用基材）の所定の位置からズレたり、する可能性があり、観察したい細胞や生体組織に圧力による影響を与える可能性がある。
また、非特許文献４に記載された観察検体の作製方法では、作業が煩雑で熟練を要するものである。また、生体組織とカバーガラス（観察用基材）が超薄膜で被覆される前に、カバーガラス（観察用基材）と超薄膜との間に必要以上に水性溶媒が入り込み、観察したい細胞や生体組織環境に影響を与える可能性がある。更に、生体組織が重い場合には、超薄膜の下方への変形が大きくなり、生体組織が水性溶媒に落ちてしまい、観察検体を作製できないことがある。
この他、細胞や生体組織を観察する研究者が、このような観察検体を製造するためには、超薄膜を得る必要があるが、超薄膜を搬送するためには、前述のように超薄膜が貼り付いた不織布での提供以外には、超薄膜製造時に使う犠牲層と基材をつけたままのフィルムを提供するか、超薄膜を溶媒に浮かせた状態で溶媒ごと提供するしかなく、超薄膜の搬送・流通が非常に難しいという課題があった。
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、観察検体の作製において、作業が容易な観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法を提供することを課題とする。
また、非特許文献４に記載された観察検体の作製方法では、作業が煩雑で熟練を要するものである。また、生体組織とカバーガラス（観察用基材）が超薄膜で被覆される前に、カバーガラス（観察用基材）と超薄膜との間に必要以上に水性溶媒が入り込み、観察したい細胞や生体組織環境に影響を与える可能性がある。更に、生体組織が重い場合には、超薄膜の下方への変形が大きくなり、生体組織が水性溶媒に落ちてしまい、観察検体を作製できないことがある。
この他、細胞や生体組織を観察する研究者が、このような観察検体を製造するためには、超薄膜を得る必要があるが、超薄膜を搬送するためには、前述のように超薄膜が貼り付いた不織布での提供以外には、超薄膜製造時に使う犠牲層と基材をつけたままのフィルムを提供するか、超薄膜を溶媒に浮かせた状態で溶媒ごと提供するしかなく、超薄膜の搬送・流通が非常に難しいという課題があった。
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、観察検体の作製において、作業が容易な観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法を提供することを課題とする。
前記課題を解決するため、本発明に係る観察試料用被覆具は、観察試料を被覆するための超薄膜と、開口部が形成された保持部を有する本体部と、を備え、前記超薄膜は、前記開口部よりも大きく形成され、前記超薄膜は、前記開口部を塞ぐように少なくとも前記保持部の上面と側面の一部に物理吸着で貼り付き、前記保持部に保持されていることを特徴とする。
このような構成によれば、犠牲層と基材とが除去された超薄膜を、すぐに利用することができる。また、超薄膜が保持部に物理吸着で貼り付き保持されているため、観察検体の作製において、超薄膜に縒り等を発生させずに、容易に観察試料を被覆することができる。
このような構成によれば、犠牲層と基材とが除去された超薄膜を、すぐに利用することができる。また、超薄膜が保持部に物理吸着で貼り付き保持されているため、観察検体の作製において、超薄膜に縒り等を発生させずに、容易に観察試料を被覆することができる。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記本体部が、前記保持部を板材で構成し、前記板材に貫通孔を形成して前記開口部としたプレート部と、前記プレート部の外周部から下方に延ばして設けた壁部と、を備えることが好ましい。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げ、取出すときに壁部で支持することで、超薄膜の掬い上げる作業が容易になる。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げ、取出すときに壁部で支持することで、超薄膜の掬い上げる作業が容易になる。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記本体部が、前記保持部を線材で構成し、前記線材を枠状に配置して前記開口部とした枠部と、前記枠部に接続された取手部と、を備えることが好ましい。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げ、取出すときに取手部を持つことで、超薄膜の掬い上げる作業が容易になる。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げ、取出すときに取手部を持つことで、超薄膜の掬い上げる作業が容易になる。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記保持部は、前記超薄膜が保持される上面側に凹部を形成する段差部を有し、前記段差部は前記開口部より外側の前記保持部の外周側に形成され、前記凹部の底面には前記開口部が開口することが好ましい。
このような構成によれば、保持部が段差部を有するため、観察検体の作製において、観察試料用被覆具を作業テーブル等に置いてしまった場合にも、自立可能であると共に、観察試料を被覆する領域の超薄膜が作業テーブル等に貼り付くこともない。
このような構成によれば、保持部が段差部を有するため、観察検体の作製において、観察試料用被覆具を作業テーブル等に置いてしまった場合にも、自立可能であると共に、観察試料を被覆する領域の超薄膜が作業テーブル等に貼り付くこともない。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記本体部は、金属、ガラス又は樹脂からなり、
前記本体部が水性溶媒、有機溶媒からなる群から選択される一つの溶媒に不溶であることが好ましい。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げるときに、本体部が溶媒に溶けて変形をしたり、消失したりしない。
前記本体部が水性溶媒、有機溶媒からなる群から選択される一つの溶媒に不溶であることが好ましい。
このような構成によれば、溶媒に浮いた超薄膜を本体部で掬い上げるときに、本体部が溶媒に溶けて変形をしたり、消失したりしない。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記保持部の上面側を覆う蓋部及び下面側を覆う受部の少なくとも一方をさらに備えることが好ましい。
このような構成によれば、蓋部及び受部の少なくとも一方が、超薄膜の上面及び下面の少なくとも一方を覆うため、超薄膜に埃や塵等が付着することがない。
このような構成によれば、蓋部及び受部の少なくとも一方が、超薄膜の上面及び下面の少なくとも一方を覆うため、超薄膜に埃や塵等が付着することがない。
本発明に係る観察試料用被覆具は、前記開口部は、前記観察試料よりも大きく形成されていることが好ましい。
このような構成によれば、観察検体の作製において、観察試料用被覆具を観察試料の下方側に容易に移動できるため、観察試料の下面まで超薄膜で被覆することができる。
このような構成によれば、観察検体の作製において、観察試料用被覆具を観察試料の下方側に容易に移動できるため、観察試料の下面まで超薄膜で被覆することができる。
本発明に係る被覆具包装体は、前記観察試料用被覆具と、前記観察試料用被覆具を外側から包み込む包装袋と、を備えることが好ましい。
このような構成によれば、包装袋が観察試料用被覆具を覆うため、輸送中の超薄膜の破れ等を防止できる。また、滅菌バッグを包装袋に用い、滅菌処理を施した観察試料用被覆具を包み込むと、滅菌済みの観察試料用被覆具を提供することができる。さらに、滅菌バッグの少なくとも１面が紫外線を透過する素材であれば、滅菌バッグで包装した後に、紫外線を照射し、観察試料用被覆具を滅菌することができる。
このような構成によれば、包装袋が観察試料用被覆具を覆うため、輸送中の超薄膜の破れ等を防止できる。また、滅菌バッグを包装袋に用い、滅菌処理を施した観察試料用被覆具を包み込むと、滅菌済みの観察試料用被覆具を提供することができる。さらに、滅菌バッグの少なくとも１面が紫外線を透過する素材であれば、滅菌バッグで包装した後に、紫外線を照射し、観察試料用被覆具を滅菌することができる。
本発明に係る観察試料の被覆方法は、前記観察試料用被覆具と、観察試料と、を準備する工程と、前記観察試料用被覆具を前記観察試料の上に配置して、前記超薄膜で前記観察試料を被覆する被覆工程と、を含むことが好ましい。
このような方法によれば、超薄膜から犠牲層と基材とを溶媒で除去する工程を省略でき、観察試料を被覆することが容易になる。
このような方法によれば、超薄膜から犠牲層と基材とを溶媒で除去する工程を省略でき、観察試料を被覆することが容易になる。
本発明に係る観察試料用被覆具、被覆具包装体及び観察試料の被覆方法によれば、観察検体の作製において、作業が容易となる。
本発明の第１実施形態について、図面を参照して説明する。
＜観察試料用被覆具＞
まず、本発明に係る観察試料用被覆具（以下、被覆具と称す）について説明する。
図１A、図１Bに示すように、本発明に係る被覆具１０は、超薄膜１と、本体部２と、を備える。以下、各構成について説明する。
＜観察試料用被覆具＞
まず、本発明に係る観察試料用被覆具（以下、被覆具と称す）について説明する。
図１A、図１Bに示すように、本発明に係る被覆具１０は、超薄膜１と、本体部２と、を備える。以下、各構成について説明する。
（超薄膜）
超薄膜１は、観察試料を被覆するためのものである。ここで、観察試料とは、細胞や生体組織、または、観察用基材もしくは保持材の上に載置された細胞や生体組織を意味する。なお、観察条件によって、細胞や生体組織と一緒に観察に必要な試薬や培養液等を含めてもよい。また、ここでの観察用基材は、顕微鏡等で光等をあてる側に位置するものを意味する。
細胞としては、動物細胞、植物細胞等の真核細胞や、細菌、古細菌等の原核細胞も含まれる。生体から採取されるあらゆる細胞としては、例えば、皮膚、筋肉、骨、脂肪組織、脳神経系、感覚器系、心臓及び血管等の循環器系、肺、肝臓、脾臓、膵臓、腎臓、消化器系、胸腺、リンパ等、由来の細胞、並びにそれらの培養物が挙げられる。細胞には、血液（例えば、全血、血清、血漿）、リンパ液、唾液、尿、腹水、喀痰等の体液が含まれていてもよい。
生体組織としては、生体から採取されるあらゆる組織、例えば、皮膚、筋肉、骨、脂肪組織、脳神経系、感覚器系、心臓及び血管等の循環器系、肺、肝臓、脾臓、膵臓、腎臓、消化器系、胸腺、リンパ等、並びにそれらの培養物が挙げられる。生体組織には、血液（例えば、全血、血清、血漿）、リンパ液、唾液、尿、腹水、喀痰等の体液が含まれていてもよい。このうち、蛍光色素等を用いた蛍光イメージングを利用することが多い、脳神経系、感覚器系、循環器系、骨、筋肉等の生体組織が好ましい。観察用基材として、プラスチック、カバーガラス、スライドガラス等を利用することが多い。なお、観察に利用できる材料であれば、これらに限定されない。また、被覆する超薄膜１を観察用基材とする場合であって、細胞や生体組織が小さい場合に保持材を使用する。保持材は、プラスチック、カバーガラス、スライドガラス等を利用することが多い。なお、細胞や生体組織を保持できる材料であれば、これらに限定されない。
なお、観察試料は、細胞や生体組織だけでなく、生体由来ではない微粒子・ナノ粒子、または、観察用基材もしくは保持材の上に載置された微粒子・ナノ粒子であってもよい。微粒子・ナノ粒子としては、例えば、ポリマー粒子、リポソーム、ポリマーソーム、液滴、金属コロイド等が挙げられる。また、微粒子・ナノ粒子の粒径は、１ｎｍ以上１ｍｍ以下であれば、材料は特に限定されない。
超薄膜１は、観察試料を被覆するためのものである。ここで、観察試料とは、細胞や生体組織、または、観察用基材もしくは保持材の上に載置された細胞や生体組織を意味する。なお、観察条件によって、細胞や生体組織と一緒に観察に必要な試薬や培養液等を含めてもよい。また、ここでの観察用基材は、顕微鏡等で光等をあてる側に位置するものを意味する。
細胞としては、動物細胞、植物細胞等の真核細胞や、細菌、古細菌等の原核細胞も含まれる。生体から採取されるあらゆる細胞としては、例えば、皮膚、筋肉、骨、脂肪組織、脳神経系、感覚器系、心臓及び血管等の循環器系、肺、肝臓、脾臓、膵臓、腎臓、消化器系、胸腺、リンパ等、由来の細胞、並びにそれらの培養物が挙げられる。細胞には、血液（例えば、全血、血清、血漿）、リンパ液、唾液、尿、腹水、喀痰等の体液が含まれていてもよい。
生体組織としては、生体から採取されるあらゆる組織、例えば、皮膚、筋肉、骨、脂肪組織、脳神経系、感覚器系、心臓及び血管等の循環器系、肺、肝臓、脾臓、膵臓、腎臓、消化器系、胸腺、リンパ等、並びにそれらの培養物が挙げられる。生体組織には、血液（例えば、全血、血清、血漿）、リンパ液、唾液、尿、腹水、喀痰等の体液が含まれていてもよい。このうち、蛍光色素等を用いた蛍光イメージングを利用することが多い、脳神経系、感覚器系、循環器系、骨、筋肉等の生体組織が好ましい。観察用基材として、プラスチック、カバーガラス、スライドガラス等を利用することが多い。なお、観察に利用できる材料であれば、これらに限定されない。また、被覆する超薄膜１を観察用基材とする場合であって、細胞や生体組織が小さい場合に保持材を使用する。保持材は、プラスチック、カバーガラス、スライドガラス等を利用することが多い。なお、細胞や生体組織を保持できる材料であれば、これらに限定されない。
なお、観察試料は、細胞や生体組織だけでなく、生体由来ではない微粒子・ナノ粒子、または、観察用基材もしくは保持材の上に載置された微粒子・ナノ粒子であってもよい。微粒子・ナノ粒子としては、例えば、ポリマー粒子、リポソーム、ポリマーソーム、液滴、金属コロイド等が挙げられる。また、微粒子・ナノ粒子の粒径は、１ｎｍ以上１ｍｍ以下であれば、材料は特に限定されない。
超薄膜１は、開口部４を塞ぐように少なくとも保持部３（プレート部５）の上面５ａと側面５ｂの一部に物理吸着で貼り付き、プレート部５に保持されている。また、超薄膜１の形状は、平面視において、例えば、四角形状、長方形状、円形状、楕円形状が挙げられる。なお、超薄膜１は、開口部４よりも大きく形成されていれば、超薄膜１の形状は限定されない。超薄膜１の大きさは、好ましくは、平面視おける超薄膜１の大きさが、プレート部５の外径よりも大きく、超薄膜１を浸漬し、超薄膜１の基材や犠牲層を溶解する溶媒を収容した容器の収容部の大きさよりも小さいことが好ましい。
超薄膜１は、厚みをナノオーダーに制御した自己支持性（観察用基材の支えを必要としない状態）の薄膜であり、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで種々の界面（ガラス、プラスチック、生体組織等）に貼付できる。
超薄膜１は、厚みをナノオーダーに制御した自己支持性（観察用基材の支えを必要としない状態）の薄膜であり、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで種々の界面（ガラス、プラスチック、生体組織等）に貼付できる。
超薄膜１の膜厚は、２０ｎｍ以上、好ましくは３０ｎｍ以上、より好ましくは４０ｎｍ以上であり、一方、２００ｎｍ以下、好ましくは１８０ｎｍ以下、より好ましくは１５０ｎｍ以下である。膜厚が２０ｎｍ以上であることにより超薄膜１のハンドリングがしやすい、一方、２００ｎｍ以下であることにより超薄膜１の接着性が良好となる。
超薄膜１に含まれる樹脂は生体組織の観察時に用いられる培養液や緩衝液に不溶であり、超薄膜１の製造時に犠牲層を溶解するための溶媒に不溶であることが好ましい。また、該樹脂は、生体組織に影響を与えるものではなく、例えば、生物学的な刺激を与える樹脂や、生体組織に対して毒性を有する樹脂でないことが好ましい。
超薄膜１は、超薄膜１を観察用基材として使用する場合には、顕微鏡で使用する光は可視光（４００ｎｍ以上）であり、その波長の半分以下の膜厚である２００ｎｍ以下の超薄膜は光学系に影響がなく、顕微鏡等の光学系に支障のない屈折率を有する樹脂で作製すればよい。
超薄膜１は、超薄膜１を観察用基材として使用する場合には、顕微鏡で使用する光は可視光（４００ｎｍ以上）であり、その波長の半分以下の膜厚である２００ｎｍ以下の超薄膜は光学系に影響がなく、顕微鏡等の光学系に支障のない屈折率を有する樹脂で作製すればよい。
該樹脂は、細胞や生体組織の乾燥を防ぎ、これらの移動を抑制することを目的にする場合、例えば、撥水性樹脂が挙げられる。撥水性は水接触角により評価でき、例えば接触角計等を用いて測定できる。水接触角は、好ましくは９０度以上、より好ましくは９５度以上、さらに好ましくは１００度以上であり、一方、好ましくは１３０度以下、より好ましは１２５度以下、さらに好ましくは１２０度以下である。撥水性樹脂としては、例えば、パーフルオロ（１－ブテニルビニルエーテル）ポリマーがあり、製品としては、ＡＧＣ旭硝子株式会社製のＣＹＴＯＰ（登録商標）が挙げられる。ただし、該樹脂は、超薄膜１として形成できる材料であれば撥水性樹脂に限定されず、観測対象や観測したいデータ等の目的にあわせて材料を選択することができる。
（本体部）
本体部２は、開口部４が形成された保持部３を備える。また、本体部２は、保持部３を板材で構成し、板材に貫通孔を形成して開口部４としたプレート部５と、プレート部５の外周部から下方に延ばして設けた壁部６と、を備えることが好ましい。そして、プレート部５は、その上面５ａ及び側面５ｂで超薄膜１を保持している。
本体部２は、開口部４が形成された保持部３を備える。また、本体部２は、保持部３を板材で構成し、板材に貫通孔を形成して開口部４としたプレート部５と、プレート部５の外周部から下方に延ばして設けた壁部６と、を備えることが好ましい。そして、プレート部５は、その上面５ａ及び側面５ｂで超薄膜１を保持している。
プレート部５（保持部３）の形状は、超薄膜１を保持できれば特に限定されないが、平面視において円形状、楕円形状が好ましい。プレート部５を構成する板材の外径、厚さも、超薄膜１を保持できれば特に限定されず、例えば、外径：１０ｍｍ以上１００ｍｍ以下、厚さ：０．１ｍｍ以上５ｍｍ以下である。
プレート部５（保持部３）に形成される貫通孔（開口部４）の形状は、特に限定されず平面視において円形状、楕円形状が好ましい。貫通孔（開口部４）の外径は、観察試料Ｓを超薄膜１で被覆する際に、被覆具１０を観察試料Ｓの下方に移動することによって、観察試料Ｓを十分に被覆する大きさに超薄膜１を切断できれば（図７Ｂ参照）、特に限定されず例えば１０ｍｍ以上１００ｍｍ以下である。
壁部６は、プレート部５の外周部全体から下方に延ばして設けたものが好ましいが、外周の一部から下方に延ばして設けたものであってもよい。また、壁部６は、プレート部５から垂直に下方に延ばして設けたものが好ましいが、プレート部５から所定角度で外方に傾斜したものであってもよく、溶媒に浮いた超薄膜１を本体部２で掬い上げ、取出すときに壁部６で支持することができれば、形状は特に限定されない。壁部６の長さ（高さ）、厚さも、本体部２が自立可能であれば特に限定されず、例えば、長さ（高さ）：１ｍｍ以上２０ｍｍ以下、厚さ：０．３ｍｍ以上３ｍｍ以下である。
プレート部５は、超薄膜１が保持される上面５ａ側に凹部５ｃを形成する段差部５ｄを有し、段差部５ｄは開口部４より外側のプレート部５の外周側に形成され、凹部５ｃの底面には開口部４が開口することが好ましい。段差部５ｄは、プレート部５の外周全体に沿って形成されていることが好ましいが、外周の一部に沿って形成されていてもよい。段差部５ｄの形成位置は、プレート部５の外周（側面５ｂ）を形成する外端部に形成されることが好ましいが、側面５ｂより開口部４側に所定間隔をおいて形成してもよい。段差部５ｄの高さは、観察検体の作製において被覆具１０を作業テーブル等に置いてしまった場合、超薄膜１と作業テーブとの間に隙間を生じさせ、超薄膜１の作業テーブルへの貼り付きを防止できる０．１ｍｍ以上５ｍｍ以下である。
本体部２の素材は、それに保持される超薄膜１の性質を変化させなければ特に限定されないが、後記する超薄膜浸漬工程Ｓ１４で使用される水性溶媒、有機溶媒からなる群から選択される一つの溶媒５３（図５Ｄ参照）に不溶であり、金属、ガラス又は樹脂からなることが好ましい。金属としてはアルミニウム、鉄、銅、真鍮、ステンレス等が挙げられ、樹脂としては、例えば、ＰＳ、ＰＣ、ＰＥＴ、ＣＯＰ、ＰＭＭＡ、ＰＥＥＫ、ＰＤＭＳ等が挙げられる。本体部２の素材としては、樹脂がさらに好ましい。
図２に示すように、被覆具１０は、保持部３（プレート部５）の上面５ａ側を覆う蓋部９Ａ及び下面５ｅ側を覆う受部９Ｂの少なくとも一方をさらに備えることが好ましい。
蓋部９Ａ及び受部９Ｂの形状は、プレート部５の上面５ａ側、又は、プレート部５の下面５ｅ側すなわち壁部６の下面６ａを覆うことができれば特に限定されないが、平面視したプレート部５と同様な円形状、楕円形状が好ましい。蓋部９Ａ及び受部９Ｂは、被覆具１０を上下から挟み込むように覆っており、蓋部９Ａと受部９Ｂとは、同じ形状でも側面の高さを異ならせてもよい。蓋部９Ａ及び受部９Ｂの素材は、特に限定されないが、プレート部５又は壁部６と同一材料が好ましい。
蓋部９Ａ及び受部９Ｂの形状は、プレート部５の上面５ａ側、又は、プレート部５の下面５ｅ側すなわち壁部６の下面６ａを覆うことができれば特に限定されないが、平面視したプレート部５と同様な円形状、楕円形状が好ましい。蓋部９Ａ及び受部９Ｂは、被覆具１０を上下から挟み込むように覆っており、蓋部９Ａと受部９Ｂとは、同じ形状でも側面の高さを異ならせてもよい。蓋部９Ａ及び受部９Ｂの素材は、特に限定されないが、プレート部５又は壁部６と同一材料が好ましい。
超薄膜１は、厚みがナノオーダーと薄いため、何にでも貼り付きやすい性質がある。そのため、超薄膜１に一度貼り付いた埃や塵等は除去が難しく、超薄膜１が生体組織等の観察に適さない膜となる。本発明に係る被覆具１０では、蓋部９及び受部９Ｂを備えることにより、プレート部５に保持された超薄膜１に埃や塵等が付着するのを防止することができ、生体組織等の観察に適した超薄膜１を保持できる。
プレート部５の上面５ａ側を覆う蓋部９は、蓋部９の内面に超薄膜１が貼り付かないように、超薄膜１との間に隙間９ａが形成される形態が好ましい。このような隙間９ａを形成するには、プレート部５に段差部５ｄを形成するのが好ましい。なお、蓋部９の超薄膜１側となる内面に凸部（図示しない）を形成してもよい。
＜被覆具包装体＞
次に、本発明に係る被覆具包装体について説明する。
図３に示すように、被覆具包装体３０は、被覆具１０と、被覆具１０を外側から包み込む包装袋１１と、を備える。被覆具１０については、前記と同様の構成であるので、説明を省略する。
包装袋１１は、例えば、樹脂フィルムであるピール包装等の従来公知の包装袋や、滅菌バッグを使用できる。なお、被覆具１０を包装できれば、袋形状でなくとも、１枚のシート形状の被覆具包装体で被覆具１０を包んでもよく、形状は特に限定されない。被覆具包装体３０では、被覆具１０を外側から包み込む包装袋１１を備えることにより、輸送中に蓋部９が外れて超薄膜１に破れ等の損傷が発生するのを防止できる。また、滅菌バッグを包装袋に用い、滅菌処理を施した被覆具１０を包み込むと、滅菌済みの被覆具１０を提供することができる。さらに、滅菌バッグの少なくとも１面が紫外線を透過する素材であれば、滅菌バッグで包装した後に、紫外線を照射し、被覆具１０を滅菌することができる。
次に、本発明に係る被覆具包装体について説明する。
図３に示すように、被覆具包装体３０は、被覆具１０と、被覆具１０を外側から包み込む包装袋１１と、を備える。被覆具１０については、前記と同様の構成であるので、説明を省略する。
包装袋１１は、例えば、樹脂フィルムであるピール包装等の従来公知の包装袋や、滅菌バッグを使用できる。なお、被覆具１０を包装できれば、袋形状でなくとも、１枚のシート形状の被覆具包装体で被覆具１０を包んでもよく、形状は特に限定されない。被覆具包装体３０では、被覆具１０を外側から包み込む包装袋１１を備えることにより、輸送中に蓋部９が外れて超薄膜１に破れ等の損傷が発生するのを防止できる。また、滅菌バッグを包装袋に用い、滅菌処理を施した被覆具１０を包み込むと、滅菌済みの被覆具１０を提供することができる。さらに、滅菌バッグの少なくとも１面が紫外線を透過する素材であれば、滅菌バッグで包装した後に、紫外線を照射し、被覆具１０を滅菌することができる。
＜観察試料用被覆具の製造方法の工程＞
次に、本発明に係る観察試料用被覆具の製造方法の工程について説明する。
図４に示すように、被覆具１０は、基材準備工程Ｓ１１、犠牲層形成工程Ｓ１２、超薄膜形成工程Ｓ１３、超薄膜浸漬工程Ｓ１４、超薄膜取出工程Ｓ１５、好ましくはさらに乾燥工程Ｓ１６を行うことで製造される。具体的には、基材準備工程Ｓ１１～超薄膜形成工程Ｓ１３は超薄膜１の製造工程、超薄膜浸漬工程Ｓ１４～超薄膜取出工程Ｓ１５、又は、超薄膜浸漬工程Ｓ１４～乾燥工程Ｓ１６は、本体部２に超薄膜１を貼り付ける被覆具１０の製造工程を意味する。
次に、本発明に係る観察試料用被覆具の製造方法の工程について説明する。
図４に示すように、被覆具１０は、基材準備工程Ｓ１１、犠牲層形成工程Ｓ１２、超薄膜形成工程Ｓ１３、超薄膜浸漬工程Ｓ１４、超薄膜取出工程Ｓ１５、好ましくはさらに乾燥工程Ｓ１６を行うことで製造される。具体的には、基材準備工程Ｓ１１～超薄膜形成工程Ｓ１３は超薄膜１の製造工程、超薄膜浸漬工程Ｓ１４～超薄膜取出工程Ｓ１５、又は、超薄膜浸漬工程Ｓ１４～乾燥工程Ｓ１６は、本体部２に超薄膜１を貼り付ける被覆具１０の製造工程を意味する。
（超薄膜の製造工程）
ここでは、超薄膜１の製造方法の例として、スピンコートにおける超薄膜１の製造工程を説明するが、超薄膜１が製造できれば、製造方法は特に限定されない。図５Ａに示すように、基材準備工程Ｓ１１では、表面が平滑で、超薄膜１と同様な形状、例えば、平面視において、円形状の基材５１を、スピンコート等の常法に従って準備する。基材５１の厚みは、超薄膜１の種類に応じて適宜設定し、例えば、１０μｍ以上１００００μｍ以下とする。なお、基材５１の形状は、例えば、四角形状、長方形状、円形状、楕円形状が挙げられるが、平面であれば形状は特に限定されない。
基材５１の素材としては、例えば、シリコン、シリコンゴム、シリカ、ガラス、マイカ、グラフィト等のカーボン材料、ポリエチレン、ポリプロピレン、セロハン、エラストマー等の高分子材料、アバタイト等のカルシウム化合物等が挙げられる。好ましい素材としてはシリコンであり、好ましい基材はシリコンウエハーである。
ここでは、超薄膜１の製造方法の例として、スピンコートにおける超薄膜１の製造工程を説明するが、超薄膜１が製造できれば、製造方法は特に限定されない。図５Ａに示すように、基材準備工程Ｓ１１では、表面が平滑で、超薄膜１と同様な形状、例えば、平面視において、円形状の基材５１を、スピンコート等の常法に従って準備する。基材５１の厚みは、超薄膜１の種類に応じて適宜設定し、例えば、１０μｍ以上１００００μｍ以下とする。なお、基材５１の形状は、例えば、四角形状、長方形状、円形状、楕円形状が挙げられるが、平面であれば形状は特に限定されない。
基材５１の素材としては、例えば、シリコン、シリコンゴム、シリカ、ガラス、マイカ、グラフィト等のカーボン材料、ポリエチレン、ポリプロピレン、セロハン、エラストマー等の高分子材料、アバタイト等のカルシウム化合物等が挙げられる。好ましい素材としてはシリコンであり、好ましい基材はシリコンウエハーである。
図５Ｂに示すように、犠牲層形成工程Ｓ１２では、基材５１の上に、犠牲層５２をスピンコート等の常法に従って準備する。犠牲層５２の厚みは、超薄膜１の種類に応じて適宜設定し、例えば、０．０１μｍ以上１０μｍ以下とする。
犠牲層５２の素材としては、次工程において、犠牲層５２の上に超薄膜１を準備した後、溶媒に浸漬して犠牲層５２を溶解するため、その際に溶媒に可溶であれば特に限定されない。例えば、溶媒が水性溶媒の場合、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリスチレンスルホン酸等の高分子電解質；ポリエチレングリコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール；デンプン、セルロースアセテート等の多糖類等の非イオン性の水溶性高分子が挙げられる。
犠牲層５２の素材としては、次工程において、犠牲層５２の上に超薄膜１を準備した後、溶媒に浸漬して犠牲層５２を溶解するため、その際に溶媒に可溶であれば特に限定されない。例えば、溶媒が水性溶媒の場合、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリスチレンスルホン酸等の高分子電解質；ポリエチレングリコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール；デンプン、セルロースアセテート等の多糖類等の非イオン性の水溶性高分子が挙げられる。
図５Ｃに示すように、超薄膜形成工程Ｓ１３では、犠牲層５２の上に、超薄膜１をスピンコート等の常法に従って準備する。超薄膜１の厚み及び素材は、前記のとおりである。
（被覆具の製造工程）
図５Ｄに示すように、超薄膜浸漬工程Ｓ１４では、犠牲層５２及び超薄膜１が準備された基材５１を、容器５４に収容された犠牲層５２だけが溶解する溶媒５３中に浸漬することで、犠牲層５２を溶解して超薄膜１のみを溶媒５３中に浮遊させる。なお、基材５１は、溶媒５３中に沈降する（図示せず）。
溶媒としては、水性溶媒又は有機溶媒が用いられる。水性溶媒としては、水、蒸留水、塩を溶解させた水、界面活性剤を溶解させた水、緩衝液等が挙げられる。犠牲層５２がポリビニルアルコールである場合には、水、蒸留水が好ましい。
図５Ｄに示すように、超薄膜浸漬工程Ｓ１４では、犠牲層５２及び超薄膜１が準備された基材５１を、容器５４に収容された犠牲層５２だけが溶解する溶媒５３中に浸漬することで、犠牲層５２を溶解して超薄膜１のみを溶媒５３中に浮遊させる。なお、基材５１は、溶媒５３中に沈降する（図示せず）。
溶媒としては、水性溶媒又は有機溶媒が用いられる。水性溶媒としては、水、蒸留水、塩を溶解させた水、界面活性剤を溶解させた水、緩衝液等が挙げられる。犠牲層５２がポリビニルアルコールである場合には、水、蒸留水が好ましい。
図５Ｅに示すように、超薄膜取出工程Ｓ１５では、溶媒５３中に浮遊（浸漬）している超薄膜１を、超薄膜１の下方側から本体部２で掬い上げ、超薄膜１を本体部２の上面、具体的には保持部３（プレート部５）の上面で保持する。なお、本体部２は、超薄膜浸漬工程Ｓ１４のときに、事前に溶媒５３に沈めておいてから超薄膜１を掬い上げてもよいし、超薄膜取出工程Ｓ１５のときに、後から溶媒５３に入れ、超薄膜１を掬い上げてもよい。
乾燥工程Ｓ１６では、被覆具１０に保持された超薄膜１を、自然乾燥、凍結乾燥、真空乾燥等の常法に従って乾燥させる。なお、本体部２に保持された超薄膜１をデシケータ内で乾燥させてもよい。
＜観察試料の被覆方法＞
次に、本発明に係る被覆具を用いた観察試料の被覆方法について説明する。
図６に示すように、被覆方法は、準備工程Ｓ１と、被覆工程Ｓ２と、を含む。
［第１の被覆方法］
（準備工程）
図７Ａに示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１が上方に配置される姿勢で被覆具１０を準備すると共に、観察試料Ｓを作業台１１０上に準備する。なお、観察試料Ｓは、観察に必要な試薬や、培養液等と一緒に生体組織１０１を観察用基材１０２の上に載置している。作業台１１０は、観察用基材１０２よりも小さいものが好ましい。
次に、本発明に係る被覆具を用いた観察試料の被覆方法について説明する。
図６に示すように、被覆方法は、準備工程Ｓ１と、被覆工程Ｓ２と、を含む。
［第１の被覆方法］
（準備工程）
図７Ａに示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１が上方に配置される姿勢で被覆具１０を準備すると共に、観察試料Ｓを作業台１１０上に準備する。なお、観察試料Ｓは、観察に必要な試薬や、培養液等と一緒に生体組織１０１を観察用基材１０２の上に載置している。作業台１１０は、観察用基材１０２よりも小さいものが好ましい。
（被覆工程）
ここでは、観察用基材が超薄膜では無い観察試料への被覆工程ついて説明する。図７Ａ、図７Ｂに示すように、被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を観察試料Ｓの上に配置して、その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、前記本体部２に保持された超薄膜１が開口部４の周縁部で切断され、切断された超薄膜１の下面１ｂにおいて、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで貼り付き、観察試料Ｓが被覆され、容易に観察検体が作製できる。観察試料Ｓが、生体組織１０１を載置した観察用基材１０２である場合には、生体組織１０１の外周面が超薄膜１の下面１ｂで被覆されると共に、観察用基材１０２の上面及び側面だけでなく下面の一部も超薄膜１の下面１ｂで被覆される。
ここでは、観察用基材が超薄膜では無い観察試料への被覆工程ついて説明する。図７Ａ、図７Ｂに示すように、被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を観察試料Ｓの上に配置して、その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、前記本体部２に保持された超薄膜１が開口部４の周縁部で切断され、切断された超薄膜１の下面１ｂにおいて、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで貼り付き、観察試料Ｓが被覆され、容易に観察検体が作製できる。観察試料Ｓが、生体組織１０１を載置した観察用基材１０２である場合には、生体組織１０１の外周面が超薄膜１の下面１ｂで被覆されると共に、観察用基材１０２の上面及び側面だけでなく下面の一部も超薄膜１の下面１ｂで被覆される。
［第２の被覆方法］
（準備工程）
図８Ａに示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１が下方に配置される姿勢で被覆具１０を準備すること以外は、第１の被覆方法と同様である。
（被覆工程）
図８Ｂに示すように、第１の被覆方法と同様に、被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を観察試料Ｓの上に配置して、その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、前記本体部２に保持された超薄膜１が開口部４の周縁部で切断され、切断された超薄膜１の上面１ａにおいて、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで貼り付き、生体組織１０１の外周面が被覆されると共に、観察用基材１０２の上面及び側面だけでなく下面の一部も超薄膜１の上面１ａで被覆され、容易に観察検体が作製できる。
（準備工程）
図８Ａに示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１が下方に配置される姿勢で被覆具１０を準備すること以外は、第１の被覆方法と同様である。
（被覆工程）
図８Ｂに示すように、第１の被覆方法と同様に、被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を観察試料Ｓの上に配置して、その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、前記本体部２に保持された超薄膜１が開口部４の周縁部で切断され、切断された超薄膜１の上面１ａにおいて、ナノ厚特有の高接着性を発現し、反応性官能基や接着剤を使用せずに、ファンデルワールス力、静電相互作用等の物理的吸着のみで貼り付き、生体組織１０１の外周面が被覆されると共に、観察用基材１０２の上面及び側面だけでなく下面の一部も超薄膜１の上面１ａで被覆され、容易に観察検体が作製できる。
［第３の被覆方法］
（準備工程）
図９に示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１の上面１ａを水Ｗ、又は、培養液等で濡らすこと以外は、第１の被覆方法（図７Ａ参照）と同様である。
（被覆工程）
被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を上下方向で反転させ、水Ｗ、又は、培養液等で濡れた超薄膜１の上面１ａを観察試料Ｓと接触させる。その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、生体組織１０１及び観察用基材１０２を超薄膜１で被覆する際、被覆の密着性が向上する。また、観察試料Ｓの乾燥を防止できるため、生体組織１０１の観察時間を延長することができる。
（準備工程）
図９に示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１の上面１ａを水Ｗ、又は、培養液等で濡らすこと以外は、第１の被覆方法（図７Ａ参照）と同様である。
（被覆工程）
被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を上下方向で反転させ、水Ｗ、又は、培養液等で濡れた超薄膜１の上面１ａを観察試料Ｓと接触させる。その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、生体組織１０１及び観察用基材１０２を超薄膜１で被覆する際、被覆の密着性が向上する。また、観察試料Ｓの乾燥を防止できるため、生体組織１０１の観察時間を延長することができる。
［第４の被覆方法］
（準備工程）
図１０に示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１の下面１ｂを水Ｗ、又は、培養液等で濡らすこと以外は、第２の被覆方法（図８Ａ参照）と同様である。
（被覆工程）
被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を上下方向で反転させ、水Ｗ、又は、培養液等で濡れた超薄膜１の下面１ｂを観察試料Ｓと接触させる。その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、生体組織１０１及び観察用基材１０２を超薄膜１で被覆する際、被覆の密着性が向上する。また、観察試料Ｓの乾燥を防止できるため、生体組織１０１の観察時間を延長することができる。
（準備工程）
図１０に示すように、準備工程Ｓ１では、超薄膜１の下面１ｂを水Ｗ、又は、培養液等で濡らすこと以外は、第２の被覆方法（図８Ａ参照）と同様である。
（被覆工程）
被覆工程Ｓ２では、被覆具１０を上下方向で反転させ、水Ｗ、又は、培養液等で濡れた超薄膜１の下面１ｂを観察試料Ｓと接触させる。その後、被覆具１０を観察試料Ｓの下方側に移動する。これによって、生体組織１０１及び観察用基材１０２を超薄膜１で被覆する際、被覆の密着性が向上する。また、観察試料Ｓの乾燥を防止できるため、生体組織１０１の観察時間を延長することができる。
なお、図１１に示すように、本発明の第１実施形態に係る被覆具１０Ａは、プレート部５（保持部３）、プレート部５に形成された開口部４を、平面視において矩形状、好ましくは四角形状としてもよい。なお、被覆具１０Ａは、形状以外の前記した構成は、図１Ａに示した被覆具１０と同様である。
本発明の第２実施形態について、図面を参照して説明する。
＜観察試料用被覆具＞
まず、本発明に係る観察試料用被覆具（以下、被覆具と称す）について説明する。
図１２Ａ、図１２Ｂに示すように、本発明に係る被覆具２０は、超薄膜１と、本体部２と、を備える。超薄膜１については、第１実施形態と同様であるので、説明を省略する。
＜観察試料用被覆具＞
まず、本発明に係る観察試料用被覆具（以下、被覆具と称す）について説明する。
図１２Ａ、図１２Ｂに示すように、本発明に係る被覆具２０は、超薄膜１と、本体部２と、を備える。超薄膜１については、第１実施形態と同様であるので、説明を省略する。
（本体部）
本体部２は、開口部４が形成された保持部３を備える。また、本体部２は、保持部３を、断面形状が丸あるいは楕円の線材で構成し、線材を枠状に配置して開口部４とした枠部７と、枠部７に接続された取手部８と、を備えることが好ましい。そして、枠部７で超薄膜１を保持している。
本体部２は、開口部４が形成された保持部３を備える。また、本体部２は、保持部３を、断面形状が丸あるいは楕円の線材で構成し、線材を枠状に配置して開口部４とした枠部７と、枠部７に接続された取手部８と、を備えることが好ましい。そして、枠部７で超薄膜１を保持している。
枠部７（保持部３）の形状は、超薄膜１を保持できれば特に限定されないが、平面視において円形状、楕円形状が好ましい。枠部７を構成する線材の外径も、超薄膜１を保持できれば特に限定されず、例えば、１０ｍｍ以上１００ｍｍ以下である。なお、線材は、複数の線材を縒り合わせて一本化した線材であってもよい。
枠部７（保持部３）に形成される開口部４、すなわち、線材を枠状に配置して形成される開口部４の形状は、特に限定されず平面視において円形状、楕円形状が好ましい。開口部４の外径は、観察試料Ｓよりも大きく形成され、観察試料Ｓを十分に被覆する大きさに超薄膜１を切断できる、例えば１０ｍｍ以上１００ｍｍ以下である。また、枠部７に保持される超薄膜１は、枠部７の内周側で、超薄膜１の上面１ａと下面１ｂとが貼り合わされて重複する重複部１ｃを形成している。
取手部８は、枠部７に接続され、枠部７から所定角度で上方に延ばして設けた棒状の部材である。取手部８は、前記した超薄膜取出工程Ｓ１５において、溶媒中に浮遊（浸漬）した超薄膜１を枠部７で溶媒から掬い取る（取り出す）際の、枠部７の持ち手としての機能を有する。また、取手部８は、長さ方向の途中で屈曲する屈曲部（図示せず）を有してもよい。なお、取手部８の外径及び長さは、超薄膜１の取り出し作業性を考慮して、適宜設定する。
本体部２の素材は、超薄膜１の性質を変化させず、前記した超薄膜浸漬工程Ｓ１４で使用される溶媒５３（図５Ｄ参照）に不溶である金属又は樹脂からなることが好ましく、アルミニウム、鉄、銅、真鍮、ステンレス等の金属がさらに好ましい。
図１３に示すように、被覆具２０は、保持部３（枠部７）の上面側及び下面側を覆う蓋部９をさらに備えることが好ましい。蓋部９を備えることによって、超薄膜１への埃や塵等の付着が防止される。
蓋部９は、超薄膜１を保持する枠部７を内部に収納するもので、一端に開口端面９ｃを有する箱状に構成されている。また、蓋部９は、収納された超薄膜１が貼り付くのを防止するため、蓋部９と超薄膜１との間に隙間９ａを形成する凸部９ｂを有することが好ましい。さらに、蓋部９は、開口端面９ｃ側に取手部８を収納する切欠部９ｄを有することが好ましい。なお、蓋部９の素材は、枠部７と同一材料が好ましい。
蓋部９は、超薄膜１を保持する枠部７を内部に収納するもので、一端に開口端面９ｃを有する箱状に構成されている。また、蓋部９は、収納された超薄膜１が貼り付くのを防止するため、蓋部９と超薄膜１との間に隙間９ａを形成する凸部９ｂを有することが好ましい。さらに、蓋部９は、開口端面９ｃ側に取手部８を収納する切欠部９ｄを有することが好ましい。なお、蓋部９の素材は、枠部７と同一材料が好ましい。
＜被覆具包装体＞
被覆具包装体は、被覆具２０と、被覆具２０を外側から包み込む樹脂フィルムからなる包装袋と、を備える。被覆具２０は前記のとおりで、包装袋は第１実施形態の包装袋１１（図３参照）と同様なものが使用できる。
被覆具包装体は、被覆具２０と、被覆具２０を外側から包み込む樹脂フィルムからなる包装袋と、を備える。被覆具２０は前記のとおりで、包装袋は第１実施形態の包装袋１１（図３参照）と同様なものが使用できる。
＜観察試料の被覆方法＞
観察試料の被覆方法は、被覆具２０を使用すること以外は第１実施形態と同様である。
観察試料の被覆方法は、被覆具２０を使用すること以外は第１実施形態と同様である。
なお、図１４Ａ、図１４Ｂに示すように、本発明に係る被覆具２０Ａは、保持部３（枠部７）を板材で構成し、板材を枠状に配置して開口部４としたものであってもよい。また、枠部７は、プレート部５（図１Ｂ参照）と同様に、外周側に段差部７ｄを有することが好ましい。ここで、板材の幅は、線材の外径よりも大きい、例えば、１１ｍｍ以上１５０ｍｍ以下とする。なお、前記した構成以外は、図１２Ａに示した被覆具２０と同様である。
枠部７を板材で構成することによって、枠部７に超薄膜１を保持した際、枠部７の下面７ｂに回り込む超薄膜１が少なくなるため、枠部７の内周側に超薄膜１の上面１ａと下面１ｂとが貼り付いて重複する重複部１ｃ（図１２Ｂ参照）が形成されない。その結果、観察試料Ｓを超薄膜１で被覆する際、超薄膜１の外周側の強度が重複部１ｃよって大きくなることがなく、開口部４の端部で超薄膜１が容易に切断され、被覆作業が容易となる。
また、図１５に示すように、本発明の第２実施形態に係る被覆具２０Ｂは、枠部７（保持部３）、枠部７に形成される開口部４を、平面視において矩形状、好ましくは四角形状としてもよい。なお、前記した構成以外は、図１２Ａに示した被覆具２０と同様である。
＜他の被覆方法＞
前記被覆方法では、観察用基材が超薄膜では無い観察試料に被覆し、観察検体を作製する方法について説明をしたが、観察用基材を超薄膜とする場合であって、生体組織等（観察試料）が十分に大きい場合は、生体組織等（観察試料）を保持材に乗せずに、生体組織等（観察試料）を作業台１１０に乗せて、同様の工程で被覆具を使って生体組織等（観察試料）に超薄膜を被覆し、観察検体を作製することができる。また、観察用基材を超薄膜とする場合であって、細胞や生体組織等が小さい場合は、保持材の上に細胞や生体組織等を乗せて観察試料を作製し、同様の工程で被覆具を使って観察試料に超薄膜を被覆し、観察検体を作製することができる。このようにすることで、容易に超薄膜側から細胞や生体組織等を観察することができる。
前記被覆方法では、観察用基材が超薄膜では無い観察試料に被覆し、観察検体を作製する方法について説明をしたが、観察用基材を超薄膜とする場合であって、生体組織等（観察試料）が十分に大きい場合は、生体組織等（観察試料）を保持材に乗せずに、生体組織等（観察試料）を作業台１１０に乗せて、同様の工程で被覆具を使って生体組織等（観察試料）に超薄膜を被覆し、観察検体を作製することができる。また、観察用基材を超薄膜とする場合であって、細胞や生体組織等が小さい場合は、保持材の上に細胞や生体組織等を乗せて観察試料を作製し、同様の工程で被覆具を使って観察試料に超薄膜を被覆し、観察検体を作製することができる。このようにすることで、容易に超薄膜側から細胞や生体組織等を観察することができる。
１ 超薄膜
１ａ 上面
１ｂ 下面
１ｃ 重複部
２ 本体部
３ 保持部
４ 開口部
５ プレート部
５ａ 上面
５ｂ 側面
５ｃ 凹部
５ｄ 段差部
６ 壁部
６ａ 下面
７ 枠部
７ｄ 段差部
８ 取手部
９Ａ 蓋部
９Ｂ 受部
９ａ 隙間
９ｂ 凸部
９ｃ 開口端面
９ｄ 切欠部
１０ 被覆具
１０Ａ 被覆具
１１ 包装袋
２０ 被覆具
２０Ａ 被覆具
２０Ｂ 被覆具
３０ 被覆具包装体
５１ 基材
５２ 犠牲層
５３ 溶媒
５４ 容器
１０１ 生体組織
１０２ 観察用基材
１１０ 作業台
Ｓ 観察試料
１ａ 上面
１ｂ 下面
１ｃ 重複部
２ 本体部
３ 保持部
４ 開口部
５ プレート部
５ａ 上面
５ｂ 側面
５ｃ 凹部
５ｄ 段差部
６ 壁部
６ａ 下面
７ 枠部
７ｄ 段差部
８ 取手部
９Ａ 蓋部
９Ｂ 受部
９ａ 隙間
９ｂ 凸部
９ｃ 開口端面
９ｄ 切欠部
１０ 被覆具
１０Ａ 被覆具
１１ 包装袋
２０ 被覆具
２０Ａ 被覆具
２０Ｂ 被覆具
３０ 被覆具包装体
５１ 基材
５２ 犠牲層
５３ 溶媒
５４ 容器
１０１ 生体組織
１０２ 観察用基材
１１０ 作業台
Ｓ 観察試料
Claims (10)
- 観察試料を被覆するための超薄膜と、
開口部が形成された保持部を有する本体部と、を備え、
前記超薄膜は、前記開口部よりも大きく形成され、
前記超薄膜は、前記開口部を塞ぐように少なくとも前記保持部の上面と側面の一部に物理吸着で貼り付き、前記保持部に保持されており、
前記本体部は、前記保持部を板材で構成し、前記板材に貫通孔を形成して前記開口部と したプレート部と、前記プレート部の外周部から下方に延ばして設けた壁部と、を備えることを特徴とする観察試料用被覆具。 - 前記保持部は、前記超薄膜が保持される上面側に凹部を形成する段差部を有し、前記段差部は前記開口部より外側の前記保持部の外周側に形成され、前記凹部の底面には前記開口部が開口することを特徴とする請求項１に記載の観察試料用被覆具。
- 観察試料を被覆するための超薄膜と、
開口部が形成された保持部を有する本体部と、を備え、
前記超薄膜は、前記開口部よりも大きく形成され、
前記超薄膜は、前記開口部を塞ぐように少なくとも前記保持部の上面と側面の一部に物 理吸着で貼り付き、前記保持部に保持されており、
前記保持部は、前記超薄膜が保持される上面側に凹部を形成する段差部を有し、前記段 差部は前記開口部より外側の前記保持部の外周側に形成され、前記凹部の底面には前記開 口部が開口することを特徴とする観察試料用被覆具。 - 前記観察試料用被覆具は、前記保持部の上面側を覆う蓋部及び下面側を覆う受部の少なくとも一方をさらに備えることを特徴とする請求項１乃至請求項３のいずれか一項に記載の観察試料用被覆具。
- 観察試料を被覆するための超薄膜と、
開口部が形成された保持部を有する本体部と、
前記保持部の上面側を覆う蓋部及び下面側を覆う受部の少なくとも一方と、を備え、
前記超薄膜は、前記開口部よりも大きく形成され、
前記超薄膜は、前記開口部を塞ぐように少なくとも前記保持部の上面と側面の一部に物 理吸着で貼り付き、前記保持部に保持されていることを特徴とする観察試料用被覆具。 - 前記本体部は、金属、ガラス又は樹脂からなり、
前記本体部が水性溶媒、有機溶媒からなる群から選択される一つの溶媒に不溶であることを特徴とする請求項１乃至請求項５のいずれか一項に記載の観察試料用被覆具。 - 前記開口部は、前記観察試料よりも大きく形成されていることを特徴とする請求項１乃至請求項６のいずれか一項に記載の観察試料用被覆具。
- 請求項１乃至請求項７のいずれか一項に記載の観察試料用被覆具と、
前記観察試料用被覆具を外側から包み込む包装袋と、を備えることを特徴とする被覆具包装体。 - 観察試料を被覆するための超薄膜と、
開口部が形成された保持部を有する本体部と、を備え、
前記超薄膜は、前記開口部よりも大きく形成され、
前記超薄膜は、前記開口部を塞ぐように少なくとも前記保持部の上面と側面の一部に物 理吸着で貼り付き、前記保持部に保持されている観察試料用被覆具と、
前記観察試料用被覆具を外側から包み込む包装袋と、を備えることを特徴とする被覆具 包装体。 - 請求項１乃至請求項７のいずれか一項に記載の観察試料用被覆具と、観察試料と、を準備する工程と、
前記観察試料用被覆具を前記観察試料の上に配置して、前記超薄膜で前記観察試料を被覆する被覆工程と、を含むことを特徴とする観察試料の被覆方法。
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