JP7375163B2 - Tgf-ベータトラップ - Google Patents
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Description
本出願は、2019年8月15日に出願された米国仮特許出願第62/887,272号明細書の利益を主張し、この全内容は、本明細書において参照によって援用される。
本出願は、「8774-14-PCT_Seq_Listing_ST25.txt」という名称で、68バイトのバイトサイズを有し、2020年8月14日に作成された電子テキストファイルとして提出される配列表を含有する。この電子ファイルに含有される情報は、37CFR§1.52(e)(5)に従って、その全体が参照によってこれによって援用される。
トラップ分子は、トランスフォーミング増殖因子ベータ受容体II(TGFβRII)の細胞外リガンド結合部分に由来するTGF-β結合ドメインを含有する。TGFβRIIのアミノ酸配列は、以下の通りである:
リガンド結合性ドメインは、リガンド結合性ドメインのインビボにおける血漿半減期を延長する安定化タンパク質ドメインに連結される。原則として、任意の長さが長いアミノ酸が、安定化ドメインとして使用されてもよいが、ある好ましい実施形態において、安定化ドメインは、免疫グロブリン定常(Fc)ドメインである。Fcは、有利には、ヒトFcであり、任意のアイソタイプであってもよいが、IgG1及びIgG2アイソタイプが最も一般に使用される。この目的に適したFcドメインは、当技術分野においてよく知られている。例えば、米国特許第5,428,130号明細書;Economides et al.,Nature Medicine 9:47(2003);及びCzajkowsky et al.,EMBO Mol Med.4:1015-28(2012)を参照されたい。適したFc配列を、下記に示す。当業者は、アミノ酸をドメインのN末端及び/又はC末端に追加してもよい又は欠失させてもよいことを認識であろう、ただし、ドメインの安定化特性は、保持される。
天然に存在する免疫グロブリンのリガンド結合性ドメインは、可動性ヒンジ領域を介してFcドメインに連結され、本明細書において記載されるトラップ分子はまた、Fc領域のN末端に融合された修飾ヒンジ領域も含有する。ヒンジ領域は、可動性のつなぎ綱として作用することができ、鎖間のジスルフィド結合を形成するシステイン成分も含有する。天然に存在するヒンジ領域はまた、不対システイン残基も含有する。驚くべきことに、親水性残基(例えばセリン)によるこれらの不対システイン残基の少なくとも1つの置き換えが、トラップ分子が組換え宿主細胞において産生される場合に、より高いレベルのタンパク質発現をもたらすだけでなく、TGF-βに結合する際のトラップの活性の増加ももたらすことがわかった。有利には、ヒンジ領域の少なくとも第1の(N末端に最も近い)システインが、親水性残基と置き換えられる。これは、天然に存在するヒンジ領域のC27位又は下記に示す配列番号29のC5位に相当する。修飾ヒンジのこの修飾は、本明細書において((C27S)H)と称される。例示的な修飾ヒンジ領域を、下記に示すが、下線を引いたセリン残基は、システインをセリンに置換した位置を示す。
トラップ分子は、リガンド結合性ドメインとFc領域との間に挿入される可動性親水性リンカードメインを含有する。有利には、リンカーは、さらに、第二構造を欠いており、例えばScFv分子及びその他同種のものにおいて一般に使用されるよく知られている(G4S)nリンカーにおいてなどのように、グリシン残基及びセリン残基から構成される。リンカーは、長さが約5~35アミノ酸であってもよく、有利には、長さが約15~30アミノ酸である。例示的なリンカーは、G4Sの5つのリピートを含有する。下記に詳細に記載されるように、リンカーは、リガンド結合性ドメインのN末端にFcのC末端を直接連結してもよい又はヒンジ領域のN末端にリガンド結合性ドメインのC末端を連結してもよい。
本明細書において記載されるトラップ分子は、細胞培養において又は患者若しくは対象に投与される宿主細胞においてインビボにおいて、組換え真核宿主細胞において産生される。従って、トラップ分子をコードする核酸分子はまた、新たに合成されたタンパク質を宿主細胞の分泌経路に導くN末端シグナルペプチドもコードする。シグナルペプチドは、分泌の間に、残りのタンパク質から切断され、成熟トラップタンパク質を産生する。適したシグナルペプチドは、当技術分野においてよく知られている。例えばvon Heijne,Eur.J.Biochem.133:17-21(1983);Martoglio and Dobberstein,Trends Cell Biol.8:410-15(1988);Hegde and Bernstein.,Trends Biochem Sci 31:563-71(2006)を参照されたい。有利には、シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドである。例示的なシグナルペプチド配列を、下記に示す。
MDWIWRILFLVGAATGAHSAQPA(配列番号5)
上記に記載される通り、ヒンジ領域は、FcドメインのN末端に融合され、リガンド結合性ドメインは、可動性リンカーペプチドを介してヒンジ-Fc構造に融合される。リガンド結合性ドメインは、Fc領域に関してN末端に又はC末端に配置されてもよい。リガンド結合性ドメインがC末端に配置される場合、成熟トラップタンパク質は、以下のドメイン構造を有する:
NH2-ヒンジ-Fc-リンカー-TGFβRII-CO2H。
NH2-TGFβRII-リンカー-ヒンジ-Fc-CO2H。
トラップ分子をコードする核酸分子及びベクターが、提供される。核酸分子を合成するための方法は、当技術分野においてよく知られている。核酸配列は、ファージ、ウイルス、プラスミド、ファージミド、コスミド、YAC、又はエピソームなどの染色体外の複製に適しているベクター内に含有されてもよい。タンパク質発現について、ベクターは、発現ベクター、すなわち、挿入されたタンパク質コード化配列の転写及び翻訳に必要とされるコントロールエレメントを含有するベクターである。適した発現系は、ウイルス(例えばワクシニアウイルス、アデノウイルスなど)に感染させた哺乳類細胞系;ウイルス(例えばバキュロウイルス)に感染させた昆虫細胞系;酵母ベクターを含有する酵母などの微生物、又はバクテリオファージ、DNA、プラスミドDNA、若しくはコスミドDNAにより形質転換させた細菌を含む。このような宿主ベクター系に適した転写及び翻訳エレメントは、当技術分野においてよく知られている。核酸分子の調製、クローニング、及びタンパク質発現についての一般的な技術は、例えば“Molecular Cloning:A Laboratory Manual”,second edition(Sambrook,1989);“Oligonucleotide Synthesis”(Gait,1984);“Animal Cell Culture”(Freshney,1987);“Methods in Enzymology” “Handbook of Experimental Immunology”(Weir,1996);“Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells”(Miller and Calos,1987);“Current Protocols in Molecular Biology”(Ausubel,1987);“PCR:The Polymerase Chain Reaction”,(Mullis,1994);及び“Current Protocols in Immunology”(Coligan,1991)において記載される。
精製トラップタンパク質の産生について、有利には、哺乳類細胞、特にCHO、J558、NSO、又はSP2-O細胞が、使用される。他の適した宿主は、例えば、Sf9などの昆虫細胞を含む。使用することができる哺乳類細胞株の非限定的な例は、CHO dhfr細胞(Urlaub and Chasm,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77:4216(1980))、293細胞(Graham et al.,J Gen.Virol.,36:59(1977))、又はSP2若しくはNSOのような骨髄腫細胞(Galfre and Milstein,Meth.Enzymol.,73(B):3(1981))を含む。従来の培養条件が、用いられる。Sambrook、前掲を参照されたい。安定した形質転換又はトランスフェクト細胞株を、次いで、選択することができる。トラップ分子を発現している細胞は、既知の手順によって特定することができる。例えば、トラップ分子の発現は、結合ドメイン若しくはFcドメインなどのトラップ分子のドメインに対して特異的なELISAによって及び/又はイムノブロッティングによって決定することができる。
治療薬として使用するためのトラップ分子を含有する医薬組成物が、提供される。トラップ分子は、タンパク質治療薬として投与することができる又はTGFに依存して宿主細胞からインサイツにおいて分泌によって提供されてもよい。
トラップ分子の投与は、他の構成成分と組み合わせて、TGF-β活性を阻害する際に有効である治療薬の濃度をもたらす任意の適した方法によるものであってもよい。トラップ分子は、任意の適したキャリア物質において任意の適切な量で含有されてもよく、一般に、組成物の総重量の1~95重量%の量で存在する(例えば少なくとも10%w/w、少なくとも15%w/w、少なくとも20%w/w、少なくとも25%w/w、少なくとも30%w/w。少なくとも40%w/w、少なくとも50%w/w、少なくとも60%w/w、少なくとも70%w/w。少なくとも75%のw/w、少なくとも80%w/w、少なくとも85%w/w、少なくとも90%w/w、及び95%w/w又は約95%w/w)。組成物は、非経口(例えば皮下、静脈内、筋肉内、膀胱内、腫瘍内、又は腹腔内)投与ルートに適している剤形で提供されてもよい。例えば、医薬組成物は、従来の薬務に従って製剤される(例えばRemington:The Science and Practice of Pharmacy(20th ed.),ed.A.R.Gennaro,Lippincott Williams Wilkins,2000及びEncyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds.J.Swarbrick and J.C.Boylan,1988-1999,Marcel Dekker,New Yorkを参照されたい)。
トラップ分子を含む医薬組成物は、注射、注入、又は移植(皮下、静脈内、筋肉内、腫瘍内、膀胱内、腹腔内)によって、従来の無毒性の薬学的に許容されるキャリア及び補助薬を含有する剤形、製剤において、又は適した送達デバイス若しくは移植片を介して、非経口的に投与されてもよい。このような組成物の製剤及び調製は、医薬製剤の当業者によく知られている。製剤は、Remington:The Science and Practice of Pharmacy、前掲において見つけることができる。非経口使用のためのトラップ分子を含む組成物は、単位剤形において(例えば単回用量のアンプルにおいて)提供される。その代わりに、組成物は、数回の用量を含有し、適した防腐剤が追加されてもよいバイアルにおいて提供される。組成物は、水剤、懸濁剤、エマルション、注入デバイス、若しくは移植のための送達デバイスの形態をしている又は組成物は、使用の前に、水若しくは他の適したビヒクルにより元に戻される乾燥粉剤として与えられる。組成物は、適した非経口的に許容されるキャリア及び/又は賦形剤を含んでいてもよい並びに懸濁化剤、可溶化剤、安定化剤、pH調整剤、等張化剤、及び/又は分散剤を含んでいてもよい。
任意選択で、トラップ分子は、任意の他の標準的な療法と組み合わせて投与される;このような方法は、当業者に知られており、Remington’s Pharmaceutical Sciences by E.W.Martinにおいて記載される。所望される場合、トラップ分子は、任意の従来の抗新生物療法又は免疫療法、治療抗体、標的治療、手術、放射線療法、若しくは化学療法を含むがこれらに限定されない他の療法と組み合わせて投与される。
トラップ分子又はトラップ分子を発現する宿主細胞を含む医薬組成物は、対象又は患者におけるTGF-βを阻害し、それによって、新生物、感染症、又は自己免疫疾患などの疾患を寛解させるのに使用するためのキット又は製剤系にまとめられてもよい。キット又は製剤系は、ボックス、カートン、チューブなどのキャリアを含み、バイアル、チューブ、アンプル、瓶、及びその他同種のものなどの1つ以上の容器がその中に密封されていてもよい。キット又は製剤系はまた、トラップ分子を使用するための関連する指示書を含んでいてもよい。
「寛解させる」は、疾患の発生又は進行を減少させる、抑制する、軽減する、小さくする、抑える、又は安定化することを意味する。
TGF-βレポーター細胞株.TGF-β反応性の安定した細胞株は、メーカー推奨のプロトコールに従ってLipofectamineを使用して、TGF-β反応エレメントによって駆動されるルシフェラーゼを含有する発現プラスミドであるpGL4.28(Promega)をHEK-293T細胞にトランスフェクトすることによって作製した。トランスフェクト細胞は、2ヵ月間、ハイグロマイシンを使用して選択した。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、CMV駆動型発現構築物をトランスフェクトし、Sushiドメイン(Sushi)、無修飾ヒンジ(AltH)、Fcドメイン(Fc)、TGFBRII(トラップ)あり又はなし対修飾ヒンジ((C27S)H)、Fc、TGFBRII(トラップ)あり又はなしを比較した。(配列番号15、17、19、及び21;配列番号14、16、18、及び20の対応するDNA配列を有する)。細胞は、一晩インキュベートし、洗浄し、示す濃度のTGF-βにより刺激した。結果として生じるルシフェラーゼ活性は、18時間後に測定した。図1A及び1Bにおいて示されるデータは、トラップ構築物が、低レベル(0~1ng/ml)でTGF-βを阻害したが、修飾ヒンジを有する構築物だけが、高濃度で有効であったことを実証する。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、TGF-β反応エレメント(TGFBRE)駆動型発現構築物をトランスフェクトし、Sushiドメイン(Sushi)、無修飾ヒンジ(AltH)、Fcドメイン(Fc)、TGFBRII(トラップ)あり又はなし対修飾ヒンジ((C27S)H)、Fc、TGFBRII(トラップ)あり又はなしを比較した。(配列番号7、9、11、及び13;配列番号6、8、10、及び12の対応するDNA配列を有する)。細胞は、一晩インキュベートし、洗浄し、示す濃度のTGF-βにより刺激した。結果として生じるルシフェラーゼ活性は、18時間後に測定し、データは、図2A及び2Bに示す。本来の構築物は、誘導性の形式でTGF-β活性をブロックすることができなかったが、修飾された構築物は、低濃度(0.1ng/ml)で有効であり、中~高濃度(1~10ng/ml)でなお中和活性を実証した。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、TGF-β反応エレメント(TGFBRE)駆動型発現構築物をトランスフェクトし、Sushiドメイン(Sushi)、無修飾ヒンジ(AltH)、Fc、TGFBRII(トラップ)あり又はなし対修飾ヒンジ((C27S)H)、Fc、TGFBRII(トラップ)あり又はなしを比べた(配列番号7、17、11、及び13;配列番号6、16、10、及び12の対応するDNA配列を有する)。細胞は、一晩インキュベートし、洗浄し、示されるように「低濃度帯の」既知濃度のTGF-βを滴下して刺激した。結果として生じるルシフェラーゼ活性は、24時間後に測定した。図3において示されるデータは、修飾ヒンジを有する構築物が、非常に有効であることを示した。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、CMV駆動型発現構築物をトランスフェクトし、修飾ヒンジ((C27S)H)を有するC末端(C-term)対N末端(N-term)TGF-βRII(トラップ)Fc融合タンパク質を比較した配列番号17、21、及び23;配列番号16、20、及び22の対応するDNA配列を有する)。細胞は、一晩インキュベートし、洗浄し、示されるようにTGF-βにより刺激した。結果として生じるルシフェラーゼ活性は、24時間後に測定した。図4におけるデータは、C末端対N末端融合タンパク質の間で、活性における見分けのつく差異を示さない。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、CMV駆動型又はTGF-β反応エレメント(TGFBRE)駆動型発現構築物をトランスフェクトし、次いで、既知濃度のTGF-β2を滴下して刺激した。細胞は、一晩インキュベートし、結果として生じるルシフェラーゼ活性は、24時間後に測定した。図5A及び5Bにおけるデータは、TGF-β2を阻害する、CMV駆動型構築物の部分的な能力及びTGFBRE駆動型構築物の最小限の能力を示すが、TGFBRE駆動型構築物は、TGF-β2を中和する、見分けることができる能力を有していなかった。
TGF-β誘導型ルシフェラーゼを安定して発現する293T細胞株に、CMV駆動型又はTGF-β反応エレメント(TGFBRE)駆動型発現構築物をトランスフェクトし(配列番号8及び16において示されるDNA配列)、次いで、既知濃度のマウスTGF-β1(mTGF-β1)を滴下して刺激した。細胞は、一晩インキュベートし、結果として生じるルシフェラーゼ活性は、24時間後に測定した。図6A及び6Bにおいて示されるデータは、CMV駆動型及びTGFBRE駆動型トラップ発現構築物がマウスTGF-β誘導型ルシフェラーゼ活性を阻害することが可能であったことを示す。
293T細胞株に、Sushiドメイン及び本来の無修飾ヒンジ配列(AltH)を含有する、AltHを有するがSushiドメインを含有しない、又は修飾ヒンジ((C27S)H)を有するがSushiを含有しないCMV駆動型TGFBRIIトラップFc融合タンパク質発現構築物をトランスフェクトした。細胞を休ませ、24時間、無血清培地中で培養し、結果として生じる上清を濃縮し、ヒトIgG Fcのレベルを測定した。図7において示されるデータは、Sushiなし、C27Sヒンジ産物が、最も高い濃度を実証したことを示す。
本発明が、その特定の実施形態への参照により、詳細に示され、記載されたが、形態及び詳細における種々の変更が、添付の特許請求の範囲によって包含される範囲から逸脱することなくなされてもよいことが当業者らに理解されるであろう。
本開示は以下の実施形態を包含する。
[1] トランスフォーミング増殖因子-ベータ受容体2型(TGFβRII)のリガンド結合ドメインに融合された免疫グロブリン定常ドメイン(Fc)を含むTGF-βトラップであって、
前記トラップは、Sushiドメインを含有しない、及び
前記免疫グロブリンFcドメインは、N末端免疫グロブリンヒンジ領域をさらに含み、前記ヒンジ領域の少なくとも1つの不対システイン残基は、セリン残基によって置き換えられる、TGF-βトラップ。
[2] 前記TGFβRIIは、可動性ペプチドリンカー成分を介して前記Fc領域に連結される、実施形態1に記載のトラップ。
[3] TGFβRIIの前記リガンド結合ドメインは、前記可動性ペプチドリンカー成分を介して前記Fcドメインのカルボキシ末端に連結される、実施形態2に記載のトラップ。
[4] TGFβRIIの前記リガンド結合ドメインは、前記可動性ペプチドリンカー成分を介して前記Fcドメインの前記ヒンジ領域のアミノ末端に連結される、実施形態2に記載のトラップ。
[5] 前記ヒンジ領域のC27残基は、セリン残基によって置き換えられる、実施形態1~4のいずれかに記載のトラップ。
[6] 前記トラップは、構造:NH2-ヒンジ-Fc-リンカー-TGFβRII-CO2Hを有する、実施形態1~3又は5のいずれかに記載のトラップ。
[7] 前記トラップは、構造:NH2-TGFβRII-リンカー-ヒンジ-Fc-CO2Hを有する、実施形態1、2、4、又は5のいずれかに記載のトラップ。
[8] 前記可動性リンカーは、G4Sリピートを含む、実施形態1~7のいずれかに記載のトラップ。
[9] 前記リンカーは、5つのG4Sリピートを含む、実施形態8に記載のトラップ。
[10] 前記トラップは、配列番号24に対して少なくとも85%同一な又は配列番号25に対して少なくとも85%同一なアミノ酸配列を含む、実施形態1に記載のトラップ。
[11] ペプチドシグナル配列は、前記トラップのアミノ末端に融合される、実施形態1~10のいずれかに記載のトラップ。
[12] 実施形態1~11のいずれかに記載のトラップをコードする核酸分子。
[13] 実施形態12に記載の核酸を含む発現ベクター。
[14] 前記核酸は、誘導性プロモーターに作動可能に連結される、実施形態13に記載のベクター。
[15] 前記誘導性プロモーターは、TGF-β誘導性プロモーターを含む、実施形態14に記載のベクター。
[16] 前記核酸は、恒常的に活性であるプロモーターに作動可能に連結される、実施形態13に記載のベクター。
[17] 前記恒常的に活性なプロモーターは、CMVプロモーターである、実施形態16に記載のベクター。
[18] 実施形態13~17のいずれかに記載のベクターを含む宿主細胞。
[19] 前記宿主細胞は、IL-2依存性ナチュラルキラー細胞である、実施形態18に記載の宿主細胞。
[20] 対象においてTGF-βの活性を阻害するための方法であって、それを必要とする対象に、実施形態1~10のいずれかに記載のトラップの有効量を投与することを含む方法。
[21] 対象においてTGF-βの活性を阻害するための方法であって、有効量の前記TGF-βトラップを産生するのに十分な量の、実施形態18又は19に記載の宿主細胞を含む組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法。
[22] 対象において新生物を治療するための方法であって、実施形態18又は19に記載の宿主細胞を含む組成物の治療有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む方法。
[23] 前記宿主細胞は、非経口的に、静脈内に、腫瘍周囲に、又は注入によって投与される、実施形態21又は22に記載の方法。
[24] 追加の治療剤を前記対象に投与することをさらに含む、実施形態20~23のいずれかに記載の方法。
Claims (15)
- トランスフォーミング増殖因子-ベータ受容体2型(TGFβRII)のリガンド結合ドメインに融合された免疫グロブリン定常ドメイン(Fc)を含むTGF-βトラップであって、
前記トラップは、Sushiドメインを含有せず、かつ、
前記免疫グロブリンFcドメインは、免疫グロブリンヒンジ領域をさらに含み、前記ヒンジ領域の少なくとも1つの不対システイン残基は、セリン残基によって置き換えられており、
前記トラップは、NH2-ヒンジ-Fc-リンカー-TGFβRII-COOH又はNH 2 -TGFβRII-リンカー-ヒンジ-Fc-COOHなる構造を有し、かつ前記トラップは、配列番号17、配列番号24、配列番号23又は配列番号25と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、前記TGF-βトラップ。 - 前記トラップが、配列番号17、配列番号24、配列番号23又は配列番号25のアミノ酸配列を含む、請求項1に記載のトラップ。
- 請求項1又は2に記載のトラップをコードする核酸分子。
- 請求項3に記載の核酸を含む発現ベクター。
- 前記核酸は、誘導性プロモーターに作動可能に連結される、請求項4に記載のベクター。
- 前記誘導性プロモーターは、TGF-β誘導性プロモーターを含む、請求項5に記載のベクター。
- 前記核酸は、恒常的に活性であるプロモーターに作動可能に連結される、請求項4に記載のベクター。
- 前記恒常的に活性なプロモーターは、CMVプロモーターである、請求項7に記載のベクター。
- 請求項4~8のいずれか一項に記載のベクターを含む宿主細胞。
- 前記宿主細胞は、IL-2依存性ナチュラルキラー細胞である、請求項9に記載の宿主細胞。
- 有効量の請求項1又は2に記載のトラップを含む、対象におけるTGF-βの活性を阻害するための組成物。
- 対象においてTGF-βの活性を阻害するための組成物であって、有効量の前記TGF-βトラップを産生するのに十分な量の、請求項9又は10に記載の宿主細胞を含む組成物。
- 対象において新生物を治療するための組成物であって、治療有効量の請求項9又は10に記載の宿主細胞を含む組成物。
- 前記組成物に含まれる宿主細胞が、非経口的に、静脈内に、腫瘍周囲に、又は注入によって投与されるものである、請求項12又は13に記載の組成物。
- 前記対象に投与されるための追加の治療剤をさらに含む、請求項11~14のいずれか一項に記載の組成物。
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016520302A (ja) | 2013-04-17 | 2016-07-14 | ベイラー カレッジ オブ メディスンBaylor College Of Medicine | 免疫抑制TGF−βシグナルコンバーター |
JP2017506217A (ja) | 2014-02-10 | 2017-03-02 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 標的TGFβ阻害 |
WO2018204594A1 (en) | 2017-05-04 | 2018-11-08 | Acceleron Pharma Inc. | Tgf-beta receptor type ii fusion proteins and uses thereof |
JP2019510786A (ja) | 2016-04-05 | 2019-04-18 | グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドGlaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | 免疫療法におけるTGFβの阻害 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5225538A (en) | 1989-02-23 | 1993-07-06 | Genentech, Inc. | Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins |
CA3052445C (en) | 2004-07-10 | 2023-08-22 | Kerry S. Campbell | Genetically modified human natural killer cell lines |
US20220362333A1 (en) * | 2019-07-26 | 2022-11-17 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Methods Of Preventing Or Treating Fatty Degeneration Of Skeletal Muscle |
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2020
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016520302A (ja) | 2013-04-17 | 2016-07-14 | ベイラー カレッジ オブ メディスンBaylor College Of Medicine | 免疫抑制TGF−βシグナルコンバーター |
JP2017506217A (ja) | 2014-02-10 | 2017-03-02 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 標的TGFβ阻害 |
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Clin. Cancer Res.,2019年07月15日,Vol.25, No.14,pp.4400-4412 |
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