JP7344595B2 - キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 - Google Patents
キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7344595B2 JP7344595B2 JP2022011418A JP2022011418A JP7344595B2 JP 7344595 B2 JP7344595 B2 JP 7344595B2 JP 2022011418 A JP2022011418 A JP 2022011418A JP 2022011418 A JP2022011418 A JP 2022011418A JP 7344595 B2 JP7344595 B2 JP 7344595B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- capsid protein
- vector
- cells
- vectors
- aav capsid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 67
- 239000013598 vector Substances 0.000 title description 395
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 61
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 title description 23
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 title description 21
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 title description 11
- 238000010361 transduction Methods 0.000 claims description 175
- 230000026683 transduction Effects 0.000 claims description 175
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims description 115
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims description 115
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 93
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 71
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 71
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 69
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 claims description 67
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 56
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 46
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 40
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 38
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 34
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 32
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 32
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 31
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 29
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 claims description 27
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 17
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 17
- 230000008733 trauma Effects 0.000 claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 7
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 6
- 241000972680 Adeno-associated virus - 6 Species 0.000 claims description 5
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 claims description 4
- 241001655883 Adeno-associated virus - 1 Species 0.000 claims description 3
- 241000580270 Adeno-associated virus - 4 Species 0.000 claims description 3
- 241001634120 Adeno-associated virus - 5 Species 0.000 claims description 3
- 241001164823 Adeno-associated virus - 7 Species 0.000 claims description 3
- 241000649045 Adeno-associated virus 10 Species 0.000 claims description 3
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 claims 12
- 241001164825 Adeno-associated virus - 8 Species 0.000 claims 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 351
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 159
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 99
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 89
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 83
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 83
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 74
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 69
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 61
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 59
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 description 57
- 239000013608 rAAV vector Substances 0.000 description 55
- 235000002374 tyrosine Nutrition 0.000 description 55
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 53
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 53
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 53
- 101000972946 Homo sapiens Hepatocyte growth factor receptor Proteins 0.000 description 50
- 102000057421 human MET Human genes 0.000 description 50
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 48
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 48
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 47
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 47
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 47
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 47
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 44
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 43
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 43
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 42
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 42
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 42
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 41
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 41
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 40
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 40
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 39
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 39
- 208000006359 hepatoblastoma Diseases 0.000 description 37
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 description 36
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 34
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 34
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 33
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 32
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 32
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 32
- -1 antibodies Proteins 0.000 description 30
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 30
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 30
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 30
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 29
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 29
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 29
- 101000600434 Homo sapiens Putative uncharacterized protein encoded by MIR7-3HG Proteins 0.000 description 27
- 102100037401 Putative uncharacterized protein encoded by MIR7-3HG Human genes 0.000 description 27
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 26
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 26
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 26
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 25
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 25
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 24
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 24
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 24
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 23
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 23
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 23
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 23
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 22
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 22
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 21
- VNBRGSXVFBYQNN-UHFFFAOYSA-N N-[4-[(2-amino-3-chloro-4-pyridinyl)oxy]-3-fluorophenyl]-4-ethoxy-1-(4-fluorophenyl)-2-oxo-3-pyridinecarboxamide Chemical compound O=C1C(C(=O)NC=2C=C(F)C(OC=3C(=C(N)N=CC=3)Cl)=CC=2)=C(OCC)C=CN1C1=CC=C(F)C=C1 VNBRGSXVFBYQNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 20
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 20
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 20
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 19
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 19
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 19
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 19
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 19
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 19
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 19
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 19
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 18
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 18
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 17
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 17
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 17
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 17
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 17
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 17
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 17
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 17
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 16
- 102000008022 Proto-Oncogene Proteins c-met Human genes 0.000 description 16
- 108010089836 Proto-Oncogene Proteins c-met Proteins 0.000 description 16
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 16
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 16
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 16
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 15
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 15
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 15
- 238000011161 development Methods 0.000 description 15
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 15
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 15
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 239000013644 scAAV2 vector Substances 0.000 description 14
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 14
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 14
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 14
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 13
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 13
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 13
- 101000686790 Chaetoceros protobacilladnavirus 2 Replication-associated protein Proteins 0.000 description 13
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 13
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 13
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 13
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 13
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 13
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 13
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 13
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 12
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 12
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 12
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 12
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 12
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 11
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 11
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 11
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 11
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 11
- 230000034190 positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 description 11
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 11
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 description 11
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 11
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 10
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 10
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 10
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 10
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 10
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 9
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 9
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 9
- 239000013609 scAAV vector Substances 0.000 description 9
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 8
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 108010068250 Herpes Simplex Virus Protein Vmw65 Proteins 0.000 description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 8
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 8
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 8
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 7
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 7
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 7
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 7
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 7
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 7
- 102000008847 Serpin Human genes 0.000 description 7
- 108050000761 Serpin Proteins 0.000 description 7
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 7
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 7
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 7
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 7
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 7
- 230000008779 noncanonical pathway Effects 0.000 description 7
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 7
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 7
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 7
- 239000003001 serine protease inhibitor Substances 0.000 description 7
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 7
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 7
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 7
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 description 6
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 description 6
- 101000898034 Homo sapiens Hepatocyte growth factor Proteins 0.000 description 6
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 6
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 6
- 101150094934 TCS gene Proteins 0.000 description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 6
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 6
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 6
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 6
- WKWZNYIYGKLXNV-UHFFFAOYSA-N carbamodithioic acid;pyrrolidin-2-one Chemical compound NC(S)=S.O=C1CCCN1 WKWZNYIYGKLXNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 6
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 6
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000057308 human HGF Human genes 0.000 description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 6
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 6
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 6
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 6
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 238000012447 xenograft mouse model Methods 0.000 description 6
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 5
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 5
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 5
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 5
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 5
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 101000834253 Gallus gallus Actin, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 5
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 5
- 101000736088 Homo sapiens PC4 and SFRS1-interacting protein Proteins 0.000 description 5
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 5
- 102100036220 PC4 and SFRS1-interacting protein Human genes 0.000 description 5
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 5
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 5
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 5
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 5
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 5
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 5
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 5
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 5
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 5
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 5
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 230000017128 negative regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 description 5
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 5
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 5
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 5
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 5
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 5
- 239000012130 whole-cell lysate Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 4
- 102000040125 5-hydroxytryptamine receptor family Human genes 0.000 description 4
- 108091032151 5-hydroxytryptamine receptor family Proteins 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 4
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 4
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 4
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 4
- 102000003745 Hepatocyte Growth Factor Human genes 0.000 description 4
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 description 4
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 4
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 4
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 4
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 108010077432 Myeloid Differentiation Factor 88 Proteins 0.000 description 4
- 102000010168 Myeloid Differentiation Factor 88 Human genes 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 4
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 4
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 4
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-one Chemical compound C1=CC(C(=O)C=2C3=CC=CC=2)=C2C3=NNC2=C1 ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 4
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 4
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 4
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 4
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 4
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 4
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 4
- 239000013647 rAAV8 vector Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 1H-imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAWLNURBQMTKEB-URDPEVQOSA-N 213546-53-3 Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C(C)C)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N)C(C)C FAWLNURBQMTKEB-URDPEVQOSA-N 0.000 description 3
- 241000649047 Adeno-associated virus 12 Species 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 3
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 3
- 102000004031 Carboxy-Lyases Human genes 0.000 description 3
- 108090000489 Carboxy-Lyases Proteins 0.000 description 3
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 3
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 241000484121 Human parvovirus Species 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 3
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 3
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 3
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 102100020739 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP4 Human genes 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 3
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 3
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 3
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 3
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 3
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 3
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 238000002337 electrophoretic mobility shift assay Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000000913 erythropoietic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 3
- 229960000027 human factor ix Drugs 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000012405 in silico analysis Methods 0.000 description 3
- 102000002467 interleukin receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010093036 interleukin receptors Proteins 0.000 description 3
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 3
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 3
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 3
- 239000003909 protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 108010067247 tacrolimus binding protein 4 Proteins 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 3
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 3
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000649046 Adeno-associated virus 11 Species 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 208000031277 Amaurotic familial idiocy Diseases 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 2
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 2
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 2
- 102000004657 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinase Type 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010003721 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinase Type 2 Proteins 0.000 description 2
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030814 Eating disease Diseases 0.000 description 2
- 208000019454 Feeding and Eating disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 2
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 241001502974 Human gammaherpesvirus 8 Species 0.000 description 2
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 2
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000005755 Intercellular Signaling Peptides and Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010070716 Intercellular Signaling Peptides and Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000001617 Interferon Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 2
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 239000007760 Iscove's Modified Dulbecco's Medium Substances 0.000 description 2
- 239000012825 JNK inhibitor Substances 0.000 description 2
- 108010021101 Lamin Type B Proteins 0.000 description 2
- 201000003533 Leber congenital amaurosis Diseases 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 241000219745 Lupinus Species 0.000 description 2
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 2
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 2
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 208000002537 Neuronal Ceroid-Lipofuscinoses Diseases 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 2
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 2
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 241000282405 Pongo abelii Species 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 2
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710118046 RNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108050003978 Semaphorin Proteins 0.000 description 2
- 102000014105 Semaphorin Human genes 0.000 description 2
- 108020003224 Small Nucleolar RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000042773 Small Nucleolar RNA Human genes 0.000 description 2
- 108091060271 Small temporal RNA Proteins 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000941 Transcription factor TFIIB Proteins 0.000 description 2
- 102000004408 Transcription factor TFIIB Human genes 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 2
- 101710108545 Viral protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000008649 adaptation response Effects 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 2
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 2
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 2
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 208000005980 beta thalassemia Diseases 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000004041 dendritic cell maturation Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000014632 disordered eating Nutrition 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 2
- 238000011223 gene expression profiling Methods 0.000 description 2
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 210000005161 hepatic lobe Anatomy 0.000 description 2
- 102000053391 human F Human genes 0.000 description 2
- 108700031895 human F Proteins 0.000 description 2
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 2
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- 208000017476 juvenile neuronal ceroid lipofuscinosis Diseases 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 2
- VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N melittin Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(N)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- 230000001095 motoneuron effect Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 2
- 201000007607 neuronal ceroid lipofuscinosis 3 Diseases 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 230000026938 proteasomal ubiquitin-dependent protein catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 2
- 239000013646 rAAV2 vector Substances 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- OXQIKGQQLYDQBM-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[6-[[2-(2-hydroxyethylamino)-9-propan-2-ylpurin-6-yl]amino]hexyl]carbamate Chemical compound N1=C(NCCO)N=C2N(C(C)C)C=NC2=C1NCCCCCCNC(=O)OC(C)(C)C OXQIKGQQLYDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- DOEWDSDBFRHVAP-KRXBUXKQSA-N (E)-3-tosylacrylonitrile Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)\C=C\C#N)C=C1 DOEWDSDBFRHVAP-KRXBUXKQSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNETULKMXZVUST-UHFFFAOYSA-N 1-naphthoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)O)=CC=CC2=C1 LNETULKMXZVUST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVJUWEFOGFCHKR-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl 1-(3,4-dimethylphenyl)cyclopentane-1-carboxylate;hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=C(C)C(C)=CC=1C1(C(=O)OCCN(CC)CC)CCCC1 JVJUWEFOGFCHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VTJXFTPMFYAJJU-UHFFFAOYSA-N 2-[(3,4-dihydroxyphenyl)methylidene]propanedinitrile Chemical compound OC1=CC=C(C=C(C#N)C#N)C=C1O VTJXFTPMFYAJJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 1
- 241000649044 Adeno-associated virus 9 Species 0.000 description 1
- 230000007730 Akt signaling Effects 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 1
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 1
- 229940088872 Apoptosis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 1
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 1
- 108010055124 Chemokine CCL7 Proteins 0.000 description 1
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 102100030886 Complement receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005636 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010045171 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Proteins 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 1
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 108010054576 Deoxyribonuclease EcoRI Proteins 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 101100508533 Drosophila melanogaster IKKbeta gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 102100023795 Elafin Human genes 0.000 description 1
- 108010015972 Elafin Proteins 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 102100030013 Endoribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 101710199605 Endoribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102220482160 Endothelial differentiation-related factor 1_T74D_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010000916 Fimbriae Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 241001653121 Glenoides Species 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000027430 HGF receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008603 HGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282418 Hominidae Species 0.000 description 1
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 1
- 101000823116 Homo sapiens Alpha-1-antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 101000827785 Homo sapiens Alpha-fetoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000727061 Homo sapiens Complement receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 101001055157 Homo sapiens Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 101001002709 Homo sapiens Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000848653 Homo sapiens Tripartite motif-containing protein 26 Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 206010068237 Hypertransaminasaemia Diseases 0.000 description 1
- 102220467374 Hypoxia-inducible lipid droplet-associated protein_I87A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 239000003458 I kappa b kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 101150101999 IL6 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150108210 IX gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102100023915 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 1
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000049772 Interleukin-16 Human genes 0.000 description 1
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 1
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 229940118135 JNK inhibitor Drugs 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241000283986 Lepus Species 0.000 description 1
- 229940126560 MAPK inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710151805 Mitochondrial intermediate peptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100026888 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 7 Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100533310 Mus musculus Set gene Proteins 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 1
- 229930182474 N-glycoside Natural products 0.000 description 1
- 102100039240 NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 12 Human genes 0.000 description 1
- 101710084317 NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 12 Proteins 0.000 description 1
- 101710165986 Negative regulator of transcription Proteins 0.000 description 1
- 102000007339 Nerve Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010032605 Nerve Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010063605 Netrins Proteins 0.000 description 1
- 102000010803 Netrins Human genes 0.000 description 1
- 108050009450 Neuropilin Proteins 0.000 description 1
- 102000002111 Neuropilin Human genes 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 108010002747 Pfu DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 1
- 102100035846 Pigment epithelium-derived factor Human genes 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008611 Protein Kinase B Proteins 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108010044625 Proto-Oncogene Proteins c-mos Proteins 0.000 description 1
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSWDORGPIHIGNW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine dithiocarbamic acid Chemical compound SC(=S)N1CCCC1 VSWDORGPIHIGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150058540 RAC1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 102100022122 Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710146873 Receptor-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- CDMGBJANTYXAIV-UHFFFAOYSA-N SB 203580 Chemical compound C1=CC(S(=O)C)=CC=C1C1=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C(C=2C=CN=CC=2)N1 CDMGBJANTYXAIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012722 SDS sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010818 SYBR green PCR Master Mix Methods 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 229940121742 Serine/threonine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710113029 Serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 208000026578 Severe hemophilia B Diseases 0.000 description 1
- 208000018020 Sickle cell-beta-thalassemia disease syndrome Diseases 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004688 Small Nuclear RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000039471 Small Nuclear RNA Human genes 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000037453 T cell priming Effects 0.000 description 1
- 206010043391 Thalassaemia beta Diseases 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108700029229 Transcriptional Regulatory Elements Proteins 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004115 adherent culture Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000048 adrenergic agonist Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001446 anti-myeloma Effects 0.000 description 1
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940045988 antineoplastic drug protein kinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- NOFOAYPPHIUXJR-APNQCZIXSA-N aphidicolin Chemical compound C1[C@@]23[C@@]4(C)CC[C@@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]4CC[C@H]3C[C@H]1[C@](CO)(O)CC2 NOFOAYPPHIUXJR-APNQCZIXSA-N 0.000 description 1
- SEKZNWAQALMJNH-YZUCACDQSA-N aphidicolin Natural products C[C@]1(CO)CC[C@]23C[C@H]1C[C@@H]2CC[C@H]4[C@](C)(CO)[C@H](O)CC[C@]34C SEKZNWAQALMJNH-YZUCACDQSA-N 0.000 description 1
- 239000000158 apoptosis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150010487 are gene Proteins 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000003659 bee venom Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 230000036782 biological activation Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000012152 bradford reagent Substances 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I calcium;potassium;disodium;(2s)-2-hydroxypropanoate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].C[C@H](O)C([O-])=O BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000036978 cell physiology Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 108091092328 cellular RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000749 co-immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003145 cytotoxic factor Substances 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M diOC18(3) dye Chemical compound [O-]Cl(=O)(=O)=O.O1C2=CC=CC=C2[N+](CCCCCCCCCCCCCCCCCC)=C1C=CC=C1N(CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C2=CC=CC=C2O1 GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 210000000188 diaphragm Anatomy 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000011833 dog model Methods 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- MDCUNMLZLNGCQA-HWOAGHQOSA-N elafin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H]4C(=O)N5CCC[C@H]5C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H]5N(CCC5)C(=O)[C@H]5N(CCC5)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](C)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N4)C(=O)N[C@@H](CSSC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N3)=O)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)C(C)C)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)N MDCUNMLZLNGCQA-HWOAGHQOSA-N 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 238000011066 ex-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N gallotannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 102000046101 human AFP Human genes 0.000 description 1
- 102000056003 human IL15 Human genes 0.000 description 1
- 102000055229 human IL4 Human genes 0.000 description 1
- 102000051631 human SERPINA1 Human genes 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037451 immune surveillance Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 230000007688 immunotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000386 immunotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N iodixanol Chemical compound IC=1C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C=1N(C(=O)C)CC(O)CN(C(C)=O)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004359 iodixanol Drugs 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000281 joint capsule Anatomy 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003703 n methyl dextro aspartic acid receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-disulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=C(S(O)(=O)=O)C(S(=O)(=O)O)=CC=C21 YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C21 KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000018360 neuromuscular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002353 niosome Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000012223 nuclear import Effects 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005305 organ development Effects 0.000 description 1
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 208000024335 physical disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000102 pigment epithelium-derived factor Proteins 0.000 description 1
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
- 102000002022 plexin Human genes 0.000 description 1
- 108050009312 plexin Proteins 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 230000004063 proteosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N purine Chemical compound N1=C[N]C2=NC=NC2=C1 IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010242 retro-orbital bleeding Methods 0.000 description 1
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000005212 secondary lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000013275 serotonin uptake Effects 0.000 description 1
- 239000003772 serotonin uptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 230000037432 silent mutation Effects 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- VVYQSABQMIPWAU-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[6-amino-2-(2-hydroxyethylamino)hexyl]carbamate;9-propan-2-ylpurine Chemical compound N1=CN=C2N(C(C)C)C=NC2=C1.CC(C)(C)OC(=O)NCC(NCCO)CCCCN VVYQSABQMIPWAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008743 testicular receptors 4 Proteins 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000005100 tissue tropism Effects 0.000 description 1
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 230000010472 type I IFN response Effects 0.000 description 1
- 230000006663 ubiquitin-proteasome pathway Effects 0.000 description 1
- 230000009452 underexpressoin Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 229940099039 velcade Drugs 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000007502 viral entry Effects 0.000 description 1
- 230000009220 viral host cell interaction Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4615—Dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4622—Antigen presenting cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4634—Antigenic peptides; polypeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464454—Enzymes
- A61K39/464457—Telomerase or [telomerase reverse transcriptase [TERT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0091—Purification or manufacturing processes for gene therapy compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
- C12N15/864—Parvoviral vectors, e.g. parvovirus, densovirus
- C12N15/8645—Adeno-associated virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14142—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector virus or viral particle as vehicle, e.g. encapsulating small organic molecule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14145—Special targeting system for viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14171—Demonstrated in vivo effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2810/00—Vectors comprising a targeting moiety
- C12N2810/50—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein
- C12N2810/60—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from viruses
- C12N2810/6027—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from viruses ssDNA viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
関連出願の相互参照
本国際特許出願は、米国仮特許出願第60/910,798号(出願日2007年4月9日)(失効;代理人整理番号36689.266)に基づく優先権を主張するPCT国際特許出願番号PCT/US2008/059647(出願日2008年4月8日)の米国国内段階出願(国内移行;代理人整理番号36689.272)である米国特許出願第12/595,196号(出願日2009年12月31日)(現在は米国特許第8,445,267号;代理人整理番号36689.305)の一部継続出願である米国特許出願第13/899,481号(出願日2013年5月21日)(係属中;代理人整理番号36689.331)に基づく優先権を主張する。前述した出願のそれぞれの内容は明示的引用によりそのまま本明細書に組み込まれる。
本発明は、米国国立衛生研究所によって付与された助成金番号R01-HL-097088およびR21-EB-015684の下に、米国政府の支援を受けてなされた。米国政府は本発明に一定の権利を有する。
該当なし。
本発明は概して分子生物学およびウイルス学の分野に関し、具体的には遺伝子送達媒体の開発に関する。さまざまな診断レジメンおよび/または治療レジメンにおいて使用するために、さまざまな核酸、例えば治療用のタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、およびリボザイムコンストラクトをコードするものなどを、選ばれた宿主細胞に送達するのに有用な、改良されたrAAVベクター組成物も開示する。ウイルスに基づくさまざまな遺伝子治療において、特にヒトの疾患、障害、機能不全、外傷、または傷害を診断し、防止し、処置し、かつ/またはその症状を改善するために、これらの修飾rAAV系ベクターコンストラクトを調製し、使用する方法も提供する。本発明は、形質導入効率が増加しており、かつ/または選ばれた哺乳動物宿主細胞のウイルス感染力が改良されている、変異型rAAV系ウイルスベクター送達システムも提供する。特に本発明は、改良されたrAAVベクターを提供し、そしてまた、ウイルスキャプシドタンパク質の1つ以上の表面露出残基にアミノ酸置換を持つ粒子を有する改良されたrAAVビリオンを提供する。
遺伝子治療の分野における大きな進歩は、治療用遺伝物質を送達するためにウイルスを使用することによって達成された。アデノ随伴ウイルス(AAV)は、その低い免疫原性と非分裂細胞に効果的に形質導入する能力とにより、遺伝子治療のための非常に効果的なウイルスベクターとして、かなりの注目を集めてきた。AAVはさまざまな細胞タイプおよび組織タイプに感染することが示されており、このウイルス系をヒト遺伝子治療における使用に適合させるために、この十年間に大きな進展があった。
本発明は、1つ以上のポリペプチドの不足に起因する1つ以上の疾患、障害または機能不全を防止し、処置し、かつ/または改善するための医薬の調製に有用な、1つ以上の治療用作用物質をコードする改良された新規rAAV系遺伝子コンストラクトを提供することによって、先行技術に固有の制約および不足を克服する。特に本発明は、哺乳動物のさまざまな疾患、障害、機能不全、外傷、傷害などの診断、防止、処置、および/またはその症状の改善に使用するための、1つ以上の選ばれた分子、例えば1つ以上の診断用または治療用作用物質(例えばタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、抗体、抗原結合フラグメント、siRNA、RNAi、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびアンチセンスポリヌクレオチド、リボザイム、ならびにそれらの変種および/または活性フラグメントを含む)をコードする、VP3キャプシドタンパク質修飾rAAV系遺伝子コンストラクトを提供する。
すなわち、本願発明は、以下を提供する:
[項1]
(a)配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY252、Y272、Y444、Y701、Y705、およびY731に対応する1つ以上の位置にある非チロシンアミノ酸残基、
(b)配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のS459またはS663に対応する1つ以上の位置のそれぞれにある非セリンアミノ酸残基、
(c)配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のT251またはT492に対応する1つ以上の位置のそれぞれにある非スレオニンアミノ酸残基、
(d)配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のK528、K533、またはK545に対応する1つ以上の位置のそれぞれにある非リジンアミノ酸残基、
(e)配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質の、(i)位置Y701またはY705にある非チロシンアミノ酸残基、および(ii)位置Y705またはY731にある非チロシンアミノ酸残基、または位置S663にある非セリンアミノ酸残基、
(f)(a)、(b)、(c)、および(d)に列挙した、それぞれ非ネイティブアミノ酸による、3つ以上のアミノ酸置換の組み合わせ、
(g)(a)、(b)、(c)、および(d)に列挙した、それぞれ非ネイティブアミノ酸による、4つ以上のアミノ酸置換の組み合わせ、または
(h)(a)、(b)、(c)、および(d)に列挙した、それぞれ非ネイティブアミノ酸による、5つ以上のアミノ酸置換の組み合わせ
を含む、あるいはそれぞれ配列番号1、配列番号2、配列番号4、配列番号5、配列番号7、配列番号8、配列番号9、および配列番号10に示すAAV1、AAV2、AAV4、AAV5、AAV7、AAV8、AAV9、およびAAV10からなる群より選択される他の野生型ベクター血清型のいずれか一つにおいて、前記アミノ酸置換のそれぞれが、それに対応する等価なアミノ酸位置にある、修飾キャプシドタンパク質を含むrAAV3ベクター、
[項2]
非セリンアミノ酸残基が、フェニルアラニン(F)、バリン(V)、ヒスチジン(H)、イソロイシン(I)、アラニン(A)、ロイシン(L)、アスパラギン酸(D)、アスパラギン(N)、グルタミン酸(E)、アルギニン(R)、およびイソロイシン(I)からなる群より選択されるか、または非チロシン、非リジン、もしくは非スレオニンアミノ酸残基が、セリン(S)、フェニルアラニン(F)、バリン(V)、ヒスチジン(H)、イソロイシン(I)、アラニン(A)、ロイシン(L)、アスパラギン酸(D)、アスパラギン(N)、グルタミン酸(E)、アルギニン(R)、およびイソロイシン(I)からなる群より選択される、項1に記載のrAAV3ベクター、
[項3]
3つ以上のアミノ酸置換の組み合わせが、次に挙げる酸残基の組み合わせ:
配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質の
(a)Y701F、Y705F、およびY731F、
(b)Y705F、Y731F、およびS663V、
(c)Y705F、Y731F、およびT492V、
(d)Y705F、Y731F、K533R、
(e)S663V、T492V、およびK533R、
(f)Y705F、Y731F、S663V、およびT492V、もしくは
(g)Y705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533R、
または、それぞれ配列番号1、配列番号2、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、もしくは配列番号10にそれぞれ示す対応する野生型AAV1、AAV2、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、またはAAV10キャプシドタンパク質のいずれか一つにおける等価な表面露出アミノ酸残基、またはそれらの任意の組み合わせ
の1つ以上に非ネイティブアミノ酸置換を含む、項1または項2に記載のrAAV3ベクター、
[項4]
前記ベクターを含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV3ベクターを含むビリオンの形質導入効率より約2~約50倍高い、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項5]
前記ベクターを含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV3ベクターを含むビリオンの形質導入効率より約6~約40倍高い、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項6]
前記ベクターを含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV3ベクターを含むビリオンの形質導入効率より約8~約30倍高い、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項7]
前記ベクターを含むビリオンが、哺乳動物細胞中に導入された時に、対応する無修飾のrAAV3ベクターを含むビリオンよりユビキチン化を受けにくい、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項8]
前記ベクターを含む適切な宿主細胞において診断剤、治療剤、または化学療法剤をコードする核酸セグメントを発現させる能力を有するプロモーターに作動的に連結された前記核酸セグメントをさらに含む、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項9]
前記核酸セグメントが、前記核酸セグメントに作動的に連結されたエンハンサー、転写後調節配列、ポリアデニル化シグナル、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、項8に記載のrAAV3ベクター、
[項10]
前記核酸セグメントに作動的に連結された少なくとも1つの第1哺乳類イントロン配列をさらに含む、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項11]
前記プロモーターが、異種プロモーター、組織特異的プロモーター、細胞特異的プロモーター、構成的プロモーター、誘導性プロモーター、またはそれらの任意の組み合わせである、項8に記載のrAAV3ベクター、
[項12]
前記プロモーターが、肝臓特異的プロモーター、腫瘍細胞特異的プロモーター、またはそれらの組み合わせである、項10に記載のrAAV3ベクター、
[項13]
前記核酸セグメントが、ポリペプチド、ペプチド、リボザイム、ペプチド核酸、siRNA、RNAi、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンチセンスポリヌクレオチド、抗体、抗原結合フラグメント、またはそれらの任意の組み合わせを発現し、またはコードする、
項8に記載のrAAV3ベクター、
[項14]
前記少なくとも1つの第1核酸セグメントが化学療法剤をコードする、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項15]
前記診断剤、治療剤または化学療法剤が、アゴニスト、アンタゴニスト、抗アポトーシス因子、阻害因子、受容体、サイトカイン、細胞毒、赤血球新生因子、糖タンパク質、成長因子、成長因子受容体、ホルモン、ホルモン受容体、インターフェロン、インターロイキン、インターロイキン受容体、神経成長因子、向神経活性ペプチド、向神経活性ペプチド受容体、プロテアーゼ、プロテアーゼ阻害因子、タンパク質デカルボキシラーゼ、プロテインキナーゼ、タンパク質キナーゼ阻害因子、酵素、受容体結合タンパク質、輸送タンパク質またはその阻害因子、セロトニン受容体またはその取り込み阻害因子、セルピン、セルピン受容体、腫瘍抑制因子、細胞毒性因子、細胞分裂阻害因子、抗炎症因子、またはそれらの任意の組み合わせである、項8~14のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項16]
アデノ随伴ウイルス粒子内または感染性rAAV3ビリオン内に含まれている、前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
[項17]
前記項のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターをコードする単離された核酸セグメント、
[項18]
項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを含むビリオンまたはウイルス粒子、
[項19]
項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを含む複数の感染性ウイルス粒子、
[項20]
項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを含む単離された哺乳動物宿主細胞、
[項21]
幹細胞、造血細胞、血液細胞、神経細胞、網膜細胞、上皮細胞、内皮細胞、膵臓細胞、がん細胞、筋細胞、血管細胞、横隔膜細胞、胃細胞、肝臓細胞、腫瘍細胞、またはCD34+細胞である、項20に記載の単離された哺乳動物宿主細胞、
[項22]
(I)(a)項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクター、
(b)(a)のベクターをコードする核酸セグメント、または
(c)(b)の核酸セグメントを含む複数のビリオンもしくは感染性ウイルス粒子と、
(II)医薬上許容される緩衝剤、希釈剤、または賦形剤と
を含む組成物、
[項23]
限定するわけではないがHCCなどの肝がんを含む、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全を診断し、防止し、処置し、またはその1つ以上の症状を改善するためのキットに含まれる、項22に記載の組成物、
[項24]
脂質、リポソーム、脂質複合体、エトソーム、ニオソーム、ナノ粒子、マイクロ粒子、リポスフェア、ナノカプセル、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、項22または項23に記載の組成物、
[項25]
治療または予防に使用するための、項22~24のいずれか一項に記載の組成物、
[項26]
ヒトがんの治療または予防に使用するための、項22~25のいずれか一項に記載の組成物、
[項27]
(1)(a)項1~16のいずれか一項に記載のrAAVベクター、または
(b)項18または項19に記載のビリオンまたは複数の感染性ウイルス粒子
からなる群より選択される構成要素と、
(2)ヒトにおける肝がんの診断、防止、処置、またはその1つ以上の症状の改善における前記構成要素の使用に関する指示
とを含むキット、
[項28]
哺乳動物のがんを診断し、防止し、処置し、またはその1つ以上の症状を改善するための医薬の製造における、項22に記載の組成物の使用、
[項29]
ヒト肝がんを処置しまたはその1つ以上の症状を改善するための医薬の製造における、項28に記載の使用、
[項30]
診断有効量または治療有効量の選ばれた生物学的分子を、それを必要とする哺乳動物に与えるための方法であって、それを必要とする哺乳動物の細胞、組織または器官に、診断有効量または治療有効量の前記選ばれた生物学的分子を前記哺乳動物に与えるのに有効な量の項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを、診断有効量または治療有効量の前記選ばれた生物学的分子を前記哺乳動物に与えるのに有効な時間にわたって与えることを含む方法、
[項31]
哺乳動物におけるHCCを含む肝がんを診断し、防止し、処置し、またはその少なくとも1つ以上の症状を改善するための方法であって、それを必要とする哺乳動物に、項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを、前記哺乳動物における前記肝がんを診断し、防止し、処置し、または前記1つ以上の症状を改善するのに十分な量で、かつ十分な時間にわたって投与することを含む方法、
[項32]
前記哺乳動物がヒトである、項31に記載の方法、
[項33]
HCCを有すると診断されたヒト、またはHCCを有するヒト、またはHCCを有すると疑われるヒトにおける肝臓細胞または肝腫瘍細胞の集団に形質導入するための方法であって、前記ヒトに、有効量の項1~16のいずれか一項に記載のrAAV3ベクターを含む組成物を、肝臓細胞または肝腫瘍細胞の集団に形質導入するのに有効な時間にわたって投与することを含む方法。
(a)Y701F、Y705F、およびY731F;
(b)Y705F、Y731F、およびS663V;
(c)Y705F、Y731F、およびT492V;
(d)Y705F、Y731F、K533R;
(e)S663V、T492V、およびK533R;
(f)Y705F、Y731F、S663V、およびT492V;ならびに
(g)Y705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533R置換
を含むか、またはそれらを任意の組み合わせで含む。
本発明の原理の理解を増進するために、以下、図面に図解した実施形態または実施例に言及し、それを具体的な言葉を使って説明する。ただし、それが本発明の範囲の限定を意図していないことは、理解されるであろう。本発明が関係する技術分野の当業者であれば通常思いつくであろうとおり、記載する実施形態の任意の改変およびさらなる変更、ならびに本明細書に記載する発明の原理のさらなる任意の応用が考えられる。
配列番号1は、野生型アデノ随伴ウイルス血清型1(AAV1)のキャプシドタンパク質のアミノ酸配列である。
本発明の例示的実施形態を以下に説明する。明解な説明にするために、実際の実施態様の全ての特徴を、本明細書に記載することはしない。そのような実際の実施形態を開発する際にはいつでも、実施態様ごとに異なるであろう開発者の具体的目標、例えばシステム関連および業務関連の制約の遵守などを達成するために、数多くの実施態様特異的な決定を行わなければならないことは、当然、理解されるであろう。さらにまた、そのような開発努力は、複雑で時間を要するかもしれないが、本開示の恩恵を受ける当業者にとっては、日常的作業になるだろうと理解されるであろう。
4.7kbの一本鎖DNAゲノムを保護する能力を有する無エンベロープT-1正二十面体格子への、60個の個別キャプシドタンパク質サブユニットの超分子アセンブリは、ヘルパー依存性ヒトパルボウイルスであるアデノ随伴ウイルス2(AAV2)のライフサイクルにおいて、極めて重要なステップである。成熟した直径20nmのAAV2粒子は、比率が1:1:18の、VP1、VP2、およびVP3と呼ばれる3つの構造タンパク質(分子量はそれぞれ87、73、および62kDa)から構成される。その対称性とこれらの分子量推定値とによれば、粒子を構成する60個のキャプシドタンパク質のうち、3つがVP1タンパク質であり、3つがVP2タンパク質であり、54個がVP3タンパク質である。3種類の構造タンパク質を使用することにより、AAV血清型はパルボウイルスではユニークなものになっている。というのも、他の既知のパルボウイルスは全て、そのゲノムを、2種類のキャプシドタンパク質だけから構成される正二十面体粒子内にパッケージングするからである。これら60個のキャプシドタンパク質の逆平行βストランドバレル状配置が、分解に対して著しく耐性で明確な指向性を持つ粒子をもたらす。キャプシドタンパク質の1つ以上において1つ以上のチロシン残基を修飾すると、従来のプロトコールより低い用量かつ低いコストで優れたトランスフェクションが達成されることを、本発明者らは示した。キャプシドの表面上の1つ以上のチロシン残基を部位特異的に修飾することにより、本発明者らは形質導入効率の有意な改良を達成した。
本発明は、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全を診断し、防止し、処置し、またはその1つ以上の症状を改善するためのキットに含まれた本開示のチロシン修飾rAAVベクターの1つ以上を含む組成物を提供する。そのようなキットは、診断、予防、および/または治療に役立ち、とりわけ、がん、糖尿病、自己免疫疾患、腎臓疾患、心血管疾患、膵臓疾患、腸疾患、肝疾患、神経学的疾患、神経筋障害、神経運動欠損、神経骨格障害、神経学的身体障害、感覚神経機能不全、卒中、虚血、摂食障害、α1-アンチトリプシン(AAT)欠損、バッテン病、アルツハイマー病、鎌形血球症、β-サラセミア、ハンチントン病、パーキンソン病、骨格疾患、外傷、肺疾患、またはそれらの任意の組み合わせを処置し、防止し、かつ/またはその1つ以上の症状を改善するのに役立ちうる。
本方法論の重要な一側面は、本明細書に記載する改良されたrAAVベクターでは、高レベルの従来型非表面キャプシド修飾rAAVベクターを使って得られるものと同じ形質導入効率を達成するのに、送達されるウイルス粒子の力価が低くてもよいという事実である。この目的を達成するためのAAV組成物の量と前記組成物の投与時間は、本教示の恩恵を受ける当業者の理解の範囲内にあるだろう。実際、本発明者らは、本開示の組成物の治療有効量の投与は、単回投与によって、例えばそのような処置を受けている患者に治療上の利益を与えるのに十分な数の感染性粒子の単回注射によって、達成しうると考えている。あるいは、状況によっては、AAVベクター組成物を、そのような組成物の投与を監督する開業医による決定などに応じて、比較的短期間の間に、または比較的長期間にわたって、複数回投与または継続的に投与することが望ましいであろう。例えば、哺乳動物に投与される感染性粒子の数は、処置されるその特定疾患または特定障害の治療を達成するための必要などに応じて、単回投与として(または2回以上の投与などに分割して)与えられるおよそ107個、108個、109個、1010個、1011個、1012個、1013個、またはそれ以上の感染性粒子/mLとすることができる。実際には、一定の実施形態では、特定のレジメンまたは治療方法の所望の効果が達成されるように、2つ以上の異なるrAAVベクター系組成物を単独で、または1つ以上の他の診断剤、薬物、生物活性剤などと組み合わせて投与することが望ましいであろう。rAAVベクターを用いる遺伝子治療に基づく大半のレジメンでは、本明細書に記載する修飾キャプシドrAAVベクターを使用すれば、等価な野生型のまたは対応する「無修飾」rAAVベクターの使用と比較して、必要とされる感染性粒子の力価は低くなるであろうと、本発明者らは考えている。
本発明の遺伝子コンストラクトはさまざまな組成物中に調製することができ、ヒトまたは動物対象に投与するために、適当な医薬媒体中に製剤化することもできる。本発明のrAAV分子およびそれらを含む組成物は、さまざまな障害、とりわけ関節の疾患、障害、および機能不全、例えば変形性関節症、関節リウマチ、および関連障害などを処置し、制御し、その症状を改善するための、新しい有用な治療薬を提供する。
本発明によれば、ポリヌクレオチド、核酸セグメント、核酸配列などには、DNA(限定するわけではないがゲノムDNAまたはゲノム外DNAを含む)、遺伝子、ペプチド核酸(PNA)、RNA(限定するわけではないが、rRNA、mRNAおよびtRNAを含む)、ヌクレオシド、および全体または一部が人の手によって自然源から得られるか、化学合成されるか、修飾されるか、他の方法で調製または合成された適切な核酸セグメントが包含されるが、それらに限定されるわけではない。
以下に実施例を挙げて、本発明の好ましい実施形態を実証する。以下の実施例に開示する技法は、本発明の実施に際してよく機能することを本発明者らが見出した技法に相当し、したがってその実施の好ましい形態を構成するとみなしうることは、当業者には理解されるはずである。しかし、開示する具体的実施形態には多くの変更を加えることができ、それでもなお、本発明の本旨および範囲から逸脱することなく、ほぼ同じまたは類似する結果が得られることは、この開示に照らして、当業者には理解されるはずである。
本実施例では、AAV2キャプシド上の表面露出チロシン残基の変異によってユビキチン化ステップが回避され、その結果、プロテアソーム媒介分解が避けられることで、インビトロのヒト細胞およびインビボのマウス肝細胞においてこれらのベクターによる高効率形質導入がもたらされ、それが、低減したベクター用量での治療レベルのヒト凝固因子の生産につながることを実証する。チロシン変異体ベクターで観察される形質導入効率の増加は、ユビキチン化の欠如と、核への細胞内輸送の改良とによるものである。これらの研究は、AAV2のライフサイクルにおけるさまざまなステップでのAAV2キャプシドのチロシンリン酸化の役割についての知見を与えると共に、低用量で高効率の形質導入が可能な新規AAV2ベクターの開発をもたらした。
組換えAAV2ベクター.ニワトリβ-アクチン(CBA)プロモーターによって駆動される強化緑色蛍光タンパク質(EGFP)を含有するscAAV2ベクター(scAAV2-EGFP)と、アポリポタンパク質エンハンサー/ヒトα-1アンチトリプシン(ApoE/hAAT)プロモーターの制御下に第IX因子(F.IX)遺伝子を含有するssAAV2ベクター(ssAAV2-F.IX)の高精製ストックを、公表された方法を使って作製した。
表面露出チロシン残基の変異はAAV2ベクターの形質導入効率を有意に改良する.AAV2キャプシドのチロシンリン酸化がユビキチン化の増加につながり、細胞内輸送を損なう結果になること、そしてそれゆえにウイルス形質導入にとっては不利であることを実証するために、AAV2キャプシド上の表面露出チロシン残基を修飾した。AAV2構造のキャプシド表面を点検したところ、7つの表面露出チロシン残基(Y252、Y272、Y444、Y500、Y700、Y704、およびY730)が明らかになった。それら7つのチロシン残基のそれぞれについて部位指定変異誘発を行って、それらをフェニルアラニン残基(チロシン-フェニルアラニン、Y-F)で保存的に置換した(表1)。チロシン変異体キャプシドのそれぞれに封入されたscAAV2-EGFPゲノムがうまくパッケージングされ、表面露出チロシン残基の変異はベクター安定性の低減にはつながらなかった。
ヒト転写因子データベースを使ったインシリコ解析で、アデノ随伴ウイルス(AAV-2)ゲノム中に、細胞性免疫応答および炎症応答の中心的調節因子であるNF-κBに対するいくつかの結合部位の存在が実証されたので、本実施例では、AAVがそのライフサイクル中にNF-κBを利用するかどうかを調べる。組換えAAVベクターで形質導入されたHeLa細胞においてNF-κBの小分子調整因子を使用した。NF-κB活性化因子であるVP16はAAVベクター媒介導入遺伝子発現を25倍まで増強した。2つのNF-κB阻害因子のうち、標準NF-κB経路および非標準NF-κB経路をどちらも遮断するBay11は、導入遺伝子発現を完全に消失させ、一方、古典的NF-κB経路を妨害するピロリドンジチオカーバメイト(PDTC)には効果がなかった。VP16の存在下で非標準NF-κB経路の核p52タンパク質構成要素がウェスタンブロット分析によって多量に確認され、それがBay11によって消失したことから、AAV感染中に非標準的NF-κB経路の引き金が引かれることが示唆された。類似する結果がインビトロで初代ヒト樹状細胞(DC)でも観察され、ここでは、DC成熟マーカーCD83およびCD86のサイトカイン誘導性発現もBay11によって阻害された。インビボでは、正常C57BL/6マウスにおける遺伝子導入に先立つBay11の投与が、IL-1β、IL-6、TNFα、IL-12β、KC、およびRANTESなどといった炎症誘発性サイトカインおよびケモカインのAAVベクター誘導性生産を、7分の1まで減少させた。これらの研究により、AAVベクターによる形質導入に先立つNF-κB阻害因子による一過性の免疫抑制は免疫応答の鈍化につながり、それはヒト遺伝子治療におけるAAVベクターの最適な使用に大いに関連することが示唆された。
AAV-ITRはNF-κB応答性転写因子に対する結合部位を含有している.AAV2ゲノムの左逆方向末端反復(ITR)中の一本鎖D[-]-配列と特異的に相互作用する細胞タンパク質の存在は、以前に記述されている(Qing et al., 1997)。右ITR中のssD[+]-配列は左ITR中のssD[-]-配列と相補的であることから、ある推定細胞タンパク質も存在して、それが右ITR中のssD[+]-配列と相互作用するかもしれないと推論した。実際、ssD[+]-配列プローブを使った電気泳動移動度シフトアッセイで、別個の細胞タンパク質が検出され、ssD[+]-配列結合タンパク質(ssD[+]-BP)と名付けられた(Qing et al., 1997)。精製および質量分析により、ssD[+]-BPは、転写の負の調節因子である細胞NF-κB抑制因子に対して部分的なアミノ酸ホモロジーを有することがわかった。ヒト転写因子データベース[TRANSFAC]を使った追加のインシリコ解析により、p300、TFIIB、およびSpIIなどといったNF-κB結合補因子に対する結合部位がいくつか存在することが実証された。これらの一つは、AAVゲノムと会合することが最近示されたp300/CREB転写因子である(Dean et al., 2009)。NF-κBシグナリングが細胞表面受容体/補助受容体へのAAV結合によって活性化されるかどうかはわからないが、最近の研究により、先天性免疫応答は、a)Toll様受容体9(TLR9)-ミエロイド系分化因子88(MYD88)経路、またはb)細胞表面上のCD40リガンドの活性化のいずれかによって引き金を引かれうることが、マウスモデルにおいてインビボで実証されている(Zhu et al., 2009;Mays et al., 2009)。これらのリガンドはどちらも、それらの生物学的活性化に際し、下流でNF-κB転写因子と相互作用することが知られている(Mineva et al., 2007;Loiarro et al., 2005)。以下のデータにより、NF-κBはAAVのライフサイクルに関与することが実証された。
AAV感染後.一方、初代ヒト樹状細胞(DC)では、導入遺伝子発現はここでもNF-κB活性化因子によって大いに増加するものの(図2A)、AAV感染単独ではNF-κBを活性化しなかった(図2B)。VP16の存在下では、scAAVベクター形質導入DCと比較して、EGFP発現に約20倍の増加が観察された。NF-κB経路を活性化することが知られているサイトカイン(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)で処理すると、導入遺伝子発現は約26%までさらに増加し、それはBay11による処理後に約12%まで低減した(図2A)。核画分のウェスタンブロット分析により、NF-κB活性化の代替経路が機能していること(p52タンパク質の蓄積)が、さらに確証された(図2B)。同様の結果が、インビボでマウス肝臓へのscAAVベクター媒介遺伝子送達後にも得られた(図7)。本発明者らは、DCにおける表現型変化を誘発するNF-κB調整因子の能力も試験した。2つのDC成熟マーカーCD83およびCD86のフローサイトメトリー分析により、サイトカインカクテルと一緒に使用した場合に、VP16だけでは、成熟を誘発することも共刺激分子の発現を強化することもできないことが示された。しかし、Bay11による処理はAPCのサイトカイン媒介性成熟の阻害につながったことから、NF-κBの関与がさらに関係づけられた(表2)。成熟マーカー発現のこの減少は、抗原物質をプロセシングするDCの主要機能を減損し、T-細胞の活性化および増殖を低減する。したがって、ベクター投与に先立つNF-κB活性化の抑制は、AAVに対する先天性免疫応答を鈍化させることになるかもしれないという仮説が立てられた。
組換えAAVベクター.野生型(WT)プラスミドまたは三重チロシン変異体(TM;Y730+500+444F)プラスミドと、ニワトリβ-アクチン(CBA)プロモーターによって駆動される強化緑色蛍光タンパク質(EGFP)遺伝子とを含有する自己相補的(sc)AAV2ベクター(WT-scAAV2-EGFP、TM-scAAV2-EGFP)の高精製ストックを、HEK-293細胞の三重トランスフェクションによって作製した。次に、ベクターをCsCl勾配遠心分離によって精製し、ろ過滅菌し、記載されているようにスロットブロットハイブリダイゼーションによって定量した(Liu et al., 2003;Kube and Srivastava, 1997)。チロシン変異体pACG2-Y730+500+444F-Rep/Capプラスミドは最近記述されている(Markusic et al., 2010)。
非病原性ヒトパルボウイルスであるアデノ随伴ウイルス2(AAV2)は一本鎖DNAゲノムを含有し、種の壁を超越する広い組織指向性を有する(Muzyczka, 1992)。組換えAAV2ベクターは、さまざまなヒト疾患の潜在的遺伝子治療のための有望なベクター系として注目を集めており、いくつかの遺伝子治療臨床治験において現在使用されている(Daya and Berns, 2008)。つい最近になって、いくつかの新たなAAV血清型が単離され、特異的細胞タイプに効率よく形質導入することが示された(Muramatsu et al., 1996;Chiorini et al., 1997;Chiorini et al., 1999;Rutledge et al., 1998;Gao GP et al., 2002;Vandenberghe et al., 2004)。AAV2のライフサイクルのさまざまなステップはかなりよく理解されているが(Summerford and Samulski 1998;Qing et al., 1999;Summerford et al. 1999;Hansen et al., 2000;Hansen et al., 2001;Sanlioglu et al., 2000;Douar et al., 2001;Zhao et al., 2006;Thomas et al. 2004;Zhong et al. 2004;Ferrari et al., 1996;Fisher et al. 1996;Qing et al., 2004;Zhong et al., 2004;Zhong et al., 2004;Zhong et al., 2008;McCarty et al., 2004;Bainbridge et al., 2008)、他の血清型については、それほどわかっていない。
細胞株および培養物.ヒト子宮頸がん(HeLa)細胞株および肝細胞癌(Huh7)細胞株は、American Type Culture Collection(米国バージニア州マナッサス)から購入し、10%熱非働化ウシ胎児血清(FBS、Sigma-Aldrich、米国ミズーリ州セントルイス)、1%ペニシリンおよびストレプトマイシン(P/S、Lonza、米国メリーランド州ウォーカーズビル)を補足した完全DMEM培地(Mediatech, Inc.、米国バージニア州マナッサス)中で維持した。新たに樹立されたヒト肝芽腫(Hep293TT)細胞株(Chen et al., 2009)は、15%熱非働化FBS(Sigma-Aldrich)、1%ペニシリンおよびストレプトマイシン(P/S、Lonza、メリーランド州ウォーカーズビル)を補足した完全RPMI培地1640(Invitrogen、米国カリフォルニア州カマリロ)中に維持した。細胞を、37℃、5%CO2の湿潤雰囲気下で付着培養物として成長させ、室温において2~5分間、トリプシン-ヴェルセン混合物(Lonza)による処理後に継代し、洗浄し、完全培地に再懸濁した。ヒト乳がん細胞株T47D、およびhHGFR発現プラスミドを安定にトランスフェクトしたT47D細胞(T47D+hHGFR)は、10%熱非働化ウシ胎児血清(FBS、Sigma-Aldrich、米国ミズーリ州セントルイス)、1%ペニシリンおよびストレプトマイシン(Lonza)を補足した、600μg/mLのG418を含む、または含まない、完全DMEM培地(Mediatech, Inc.)中に維持した。
AAV3の感染力にはヒトHGFRが必要である.AAV3は、細胞補助受容体としてヒト肝細胞成長因子受容体(HGFR)を利用する(Ling et al., 2010)。この知見を疑いの余地なく確証するために、hHGFRの発現量が検出不能なレベルであるヒト乳がん細胞株T47D(Abella et al., 2005)と、hHGFR発現プラスミドを安定にトランスフェクトしたT47D細胞(T47D+hHGFR)(Abella et al., 2005)とを使用した。樹立細胞株T47D+hHGFRにおけるhHGFRタンパク質の発現は、ウェスタンブロット分析によって確認した(図12C参照)。同一条件下で、等しい数のT47D細胞およびT47D+hHGFR細胞に、さまざまな感染多重度(MOI)の自己相補的(sc)AAV3-CBAp-EGFPベクターで形質導入し、導入遺伝子発現を形質導入の72時間後に決定した。図11Aに示すこれらの結果は、AAV3ベクターの形質導入効率が、hHGFRを発現する細胞では、hHGFRを発現しない細胞より約8~13倍高いことを証明している。T47D+hHGFR細胞のAAV3ベクター媒介形質導入は、5μg/mLのhHGFの存在下では、完全に遮断することができた(図11B)。総合すると、これらのデータは、AAV3ベクターによる形質導入が成功するには、hHGFRの細胞表面発現が必要であることの決定的証拠になる。
樹状細胞(DC)は、適応免疫応答の調節において決定的な役割を果たす抗原提示細胞(APC)である。DCはユニークなAPCであり、DCの最も重要な機能は抗原を提示することであるため、またDCだけが休止ナイーブTリンパ球における一次免疫応答を誘発する能力を有することから、「プロフェッショナル」APCと呼ばれてきた(Banchereau and Steinman, 1998)。天然の抗腫瘍免疫応答を患者に検出することはできるが、この応答は腫瘍成長を制御することができない。これに対し、顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)およびインターロイキン4(IL-4)の存在下にエクスビボで生成する単球由来DC(moDC)は、抗原の内因性発現後に抗原特異的T細胞を刺激する能力を有する(Chapuis et al., 1997;den Brok et al., 2005)。そのため、遺伝子改変DCが広く研究され、がん患者におけるDCの効力を評価する第I相および第II相臨床治験が数多く開始されている(Figdor et al., 2004;Palucka et al., 2011)。しかし、現在のDCローディングの方法は、細胞生存力、抗原提示の寿命に関する不確定性、および患者のハロタイプによる制約の点で、不十分である(Palucka et al., 2011)。
細胞および抗体.HEK293細胞、HeLa細胞およびNIH3T3細胞はAmerican Type Culture Collectionから入手し、10%FBS(Sigma)および抗生物質(Lonza)を補足したDMEM(Invitrogen)中に単層培養物として維持した。白血球アフェレーシス由来末梢血単核球(PBMC)(AllCells)をFicoll-Paque(GEHeathCare)で精製し、無血清AIM-V培地(Lonza)に再懸濁し、半接着細胞画分を組換えヒトIL-4(500U/mL)およびGM-CSF(800U/mL)(R&D Systems)と共に7日間インキュベートした。10ng/mL TNF-α、10ng/mL IL-1、10ng/mL IL-6、および1mg/mL PGE2(R&D Systems)を含むサイトカイン混合物で、48時間にわたって、細胞成熟を開始させた。EGFP発現に先だって、細胞が成熟樹状細胞(mDC)の典型的表現型を満たすことを保証するために、細胞を共刺激分子発現について特徴づけた(CD80、RPE、マウスIgG1;CD83、RPE、マウスIgG1;CD86、FITC、マウスIgG1;Invitrogen)(Jayandharan et al., 2011)。
フォワード:5'-TCCCATAGTAACGCCAATAGG-3'(配列番号18)、
リバース:5'-CTTGGCATATGATACACTTGATG-3'(配列番号19)
と、SYBR Green PCR Master Mix(Invitrogen)とを使って、RT-PCRによって決定した(Aslanidi et al., 2009)。
特異的細胞セリン/スレオニンキナーゼの阻害はrAAV2ベクターの形質導入効率を増加させる.以前の研究で、細胞上皮成長因子受容体タンパク質チロシンキナーゼ(EGFR-PTK)活性の阻害および7つの表面露出チロシン残基の部位指定変異誘発は、これらの残基のリン酸化を防止し、よってベクターのユビキチン化とそれに続くプロテアソーム媒介分解を免れることによって、AAV2ベクターの形質導入効率を有意に増加させることが示された(Zhong et al., 2008)。しかし、AAV2キャプシドは15個の表面露出セリン残基も含有し、それらは、さまざまな細胞タイプおよび組織において広く発現している細胞セリン/スレオニンキナーゼによって、潜在的にリン酸化されうる。そのようなキナーゼ活性の阻害によって表面露出セリン残基のリン酸化を防止し、よってAAV2ベクターの細胞内輸送および核移行を改良することができるという仮説を検証するために、カルモジュリン依存性プロテインキナーゼII(CamK-II)、c-Jun N末端キナーゼ(JNK)、およびマイトジェン活性化プロテインキナーゼ(p38 MAPK)を含む細胞セリン/スレオニンキナーゼの市販の特異的阻害因子をいくつか使用した。HEK293細胞を、2-(2-ヒドロキシエチルアミノ)-6-アミノヘキシルカルバミン酸tert-ブチルエステル-9-イソプロピルプリン(CaMK-II用)、アントラ[1,9-cd]ピラゾール-6(2H)-オン、1,9-ピラゾロアントロン(JNK用)、および4-(4-フルオロフェニル)-2-(4-メチルスルフィニルフェニル)-5-(4-ピリジル)1H-イミダゾール(p38 MAPK用)などの特異的阻害因子により、さまざまな濃度で、1時間、前処理した。次に細胞に、1細胞あたり1,000ベクターゲノム(vg)の一本鎖(ss)または自己相補的(sc)AAV2ベクターで、形質導入した。これらの結果は、50μMの至適濃度で、全ての阻害因子が、ssAAV2ベクターおよびscAAV2ベクターの形質導入効率を有意に増加させ、p38 MAPK阻害因子が最も効果的であることを示した(図19Aおよび図19B)。この観察結果は、形質導入効率の増加が、ウイルス第二鎖DNA合成の改良によるのではなく、おそらくはベクターキャプシドのリン酸化の防止によるものであることを(証明しているとまではいえないものの)示唆している。
遺伝子改変樹状細胞が特異的抗腫瘍細胞傷害性T細胞応答を刺激する可能性はいくつかの臨床治験で証明されているが、治療用抗原の負荷、発現の制御、および抗原提示のための信頼できる方法は、今までのところまだ開発されていない(O’Neill and Bhardwaj, 2007;Tacken et al., 2007)。10年近く前に従来のssAAVベクターで樹状細胞に形質導入しようとした最初の試み以来(Pannazhagan et al., 2001)、これらのベクターの形質導入効率の増加には著しい進歩があった。例えば、自己相補的AAV(scAAV)ベクターの開発によって、ウイルス第二鎖DNA合成の大きな律速ステップは回避され、それが樹状細胞のさまざまなサブセットにおける導入遺伝子発現レベルを劇的に増加させた(Shin et al., 2008;Aldrich et al., 2006;Wang et al., 2003)。樹状細胞へのAAVベクターに基づく抗原送達は、いくつかのがんモデルに利用されて成功を収めている(Mahadevan et al., 2007;Eisold et al., 2007;Yu et al., 2008)。
アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターは、現在、いくつかの第I/II相臨床治験において、治療用遺伝子の持続的発現を達成する目的で、さまざまな組織を標的とするための送達媒体として使用されている(Daya and Berns 2008;Mueller and Flotte 2008;Srivastava 2008;Asokan et al., 2012;Flotte et al., 2012)。しかし、治療上の利益を得るには、高いベクター用量が必要である。十分量のベクターという要件は、生産上の難題になると共に、ベクターに対する宿主免疫を開始させるリスクも生じる(High and Aubourg, 2011;Mendell et al., 2012, Mingozzi and High, 2011)。より具体的に述べると、血友病Bの潜在的遺伝子治療に関する臨床治験ではまずAAV2血清型に基づく組換えベクターが使用されたが、この治験では、低ベクター用量では治療レベルのヒト第IX因子(hF.IX)の発現が達成されず、高ベクター用量では、AAV2キャプシドに対する細胞傷害性T細胞(CTL)応答ゆえに、hF.IXの治療レベルの発現が短寿命であった(Manno et al., 2006;Mingozzi and High, 2007;Mingozzi et al., 2007)。
細胞.ヒト胎児腎臓細胞株HEK293細胞およびマウス肝細胞細胞株H2.35細胞は、American Type Culture Collection(米国バージニア州マナッサス)から入手し、10%ウシ胎児血清(FBS;Sigma)および抗生物質(Lonza)を補足したDMEM(Invitrogen)において、単層培養物として維持した。
フォワード:5'-TCCCATAGTAACGCCAATAGG-3'(配列番号20)、
リバース: 5'-CTTGGCATATGATACACTTGATG-3'(配列番号21)
と、SYBR GreenER PCR Master Mix(Invitrogen)とを使って、qPCRによって決定した(Aslanidi et al., 2012;Aslanidi et al., 2009)。
AAV2キャプシド上の表面露出スレオニン残基の部位指定変異誘発.AAV2キャプシドは45個のスレオニン(T)残基を、3つのキャプシドVP、すなわちVP1、VP2、VP3のキャプシドウイルスタンパク質3(VP3)共通領域中に含有している。これらのうちの17個(251、329、330、454、455、503、550、592、581、597、491、671、659、660、701、713、716)は表面に露出している(Xie et al., 2002)。これら17残基のそれぞれを、以前に記述されているように(Aslanidi et al., 2012;Zhong et al., 2008)、部位指定変異誘発によってバリン(V)で置換した。大半の変異体はWT AAV2ベクターと同等の力価で生成させることができたが、例外として、T329VおよびT330Vは約10分の1の低い力価で生産され、T713VおよびT716Vは、検出可能なレベルのDNase I耐性ベクター粒子を生産しなかった。これらT-V変異体ベクターのそれぞれを、HEK293細胞における形質導入効率について評価した。図26Aおよび図26Bに示すこれらの結果は、これら17個の変異体のうち、T491V変異体がそのWT対応物より約4倍効率よくHEK293細胞に形質導入したことを示している。T455V、T550V、T659V変異体ベクターの形質導入効率は、約2倍増加した。これらのデータは、AAV2キャプシド上の特異的チロシン、セリン、およびスレオニン残基の細胞キナーゼによるリン酸化が、これらのベクターの形質導入効率の重要な決定要因であることを示した。
組換えAAV系ベクターは、さまざまな遺伝障害の潜在的処置としての遺伝子補充療法にとって、魅力的な送達媒体である。AAVベクターは多くの動物モデルに使用されて成功を収めており、近年、いくつかの臨床治験でも効力が示されているが、AAVのライフサイクルにおけるいくつかのステップは、依然として、遺伝子治療におけるこれらのベクターの有効性を制限しているようである。これらのステップには、細胞内輸送、核移行、脱外被、およびウイルス第二鎖DNA合成などが含まれる(Ding et al., 2005;Harbison et al., 2005;Nonnenmacher and Weber, 2012)。
(表面露出残基をそのアミノ酸位置の後の「*」で示す)
(表面露出残基をそのアミノ酸位置の後の「*」で示す)
キャプシドの内部に位置する残基=I
当該血清型の場合、その位置には相同なリジンがない=NA
AAVの結晶構造では見えない残基は灰色の網掛けにする;ただし、生化学データから、これらのアミノ酸は、ウイルスのライフサイクルのあるポイントまではAAVキャプシドの内部に位置し、次にそのポイントで外面化することが示唆されている。
肝細胞癌(HCC)は固形がんのなかでは第5位であり、世界中で毎年約695,900例が死亡している(Thomas and Zhu, 2005;Jemal et al., 2011)。過去20年間に米国におけるHCCの発生率は三倍になったが、5年生存率は12%未満のままである(El-Serag, 2011)。アジアとアフリカではさらに悪く、中国における年間発生率は3000人に1人である(Chen, et al., 2013)。現在、HCCの病期分類は最適な治療の計画にとって決定的に重要だと考えられている(Bruix et al., 2005)。初期HCCを持つ患者は根治的(治癒的)治療の恩恵を受けうる。また中期の患者は待機的処置の恩恵を受けうる。しかし、再燃は高頻度の合併症であり、処置失敗率は高い。進行HCCの患者の場合は、残念ながら、最善の対症療法が唯一の選択肢である(Verslype et al., 2009)。米国食品医薬品局によって進行HCCの治療薬として承認された医薬品が一つあるが(ソラフェニブ)、大規模第III相臨床治験では、生存率中央値(median survival rate)が7.9ヶ月から10.7ヶ月に増加したに過ぎない(Llovet et al., 2008)。
化学物質、プラスミドおよびプライマー.グレードI-Aヘパリンナトリウム塩はSigma-Aldrichから購入した。組換えhHGFはLife Technologiesから購入した。プラスミドpHelperはAgilent Technologiesから購入した。プラスミドpdsAAV-CBAp-EGFPおよびpAAV-CBAp-FLucは、ノースカロライナ大学チャペルヒル校のXiao Xiao博士から入手した。プラスミドpdsAAV-AFPp-EGFPは以前に記述されている(Glushakova et al., 2009)。TCS遺伝子(Shaw et al., 1994)は、公表された配列(キカラスウリ(T. kirilowii)トリコサンチン(TCS)mRNA、全cds;GenBank:M34858.1)に基づいてLife Technologiesによって合成され、AgeI制限部位とHindIII制限部位を使ってプラスミドpdsAAV-AFPp-EGFPにサブクローニングされた。プラスミドは全て使用前に配列決定した。
rAAV3ベクターはインビボでヒト肝腫瘍に選択的に形質導入する.1組目の研究では、ヒトHCC腫瘍におけるrAAV3ベクターとrAAV8ベクターの形質導入効率を、マウス異種移植片モデルにおいて、インビボで比較した。雌雄両方の非肥満糖尿病(NOD)重症複合免疫不全(scid)インターロイキン2欠損(IL2-)(NSG)マウス(n=4)の腹側、肩甲骨の間に、5×106個のヒトHuh7細胞を皮下注射したところ、それらは腫瘍を形成した。4週間後に、マウスに擬似注射するか、またはサイトメガロウイルス(CMV)エンハンサー/ニワトリβ-アクチンハイブリッドプロモーター(CBAp)の制御下にあるホタルルシフェラーゼ遺伝子(FLuc)を保因する1×1011ウイルスゲノム(vg)/マウスのrAAV3ベクターまたはrAAV8ベクターを尾静脈から注射した(図40A)。ベクター投与の3日後に全身バイオルミネセンスイメージングを行った。これらの結果を図36Aに示す。図からわかるように、rAAV3ベクターを注射したマウスでは、雄雌共に、FLuc発現が腫瘍に制限され、一方、rAAV8ベクターを注射したマウスでは、FLuc発現が相対的により広範であったが主として肝臓に局在化しており、rAAV8ベクターの形質導入効率は、雄マウスの方が有意に高かった。この観察結果は以前に公表された研究と合致している(Davidoff et al., 2003)。定量的データにより、rAAV3ベクター媒介導入遺伝子発現は腫瘍に制限され、導入遺伝子発現は肝臓にはほとんど検出されないことが、さらに実証された。対称的に、rAAV8ベクター注射マウスの場合、腫瘍では低レベルの導入遺伝子発現しか起こらず、肝臓での発現の方が有意に高かった。これらの結果を確証するために、2組目の実験では、rAAV3ベクターおよびrAAV8ベクターを使って、ヒトHuh7腫瘍(n=4)を保持する雄NSGマウスに、1×1011vg/マウスの量で直接腫瘍内注射し、ベクター注射の3日後に全身バイオルミネセンス像を得た。図36Cからわかるように、rAAV3ベクターを注射マウスでは高レベルの導入遺伝子発現が腫瘍に局在したのに対し、rAAV8ベクターを注射したマウスでは、腫瘍に加えて、肝臓にもかなりの導入遺伝子発現が検出された。このように、rAAV8ベクターとは対称的に、rAAV3ベクターはこの実験モデルではインビボでヒト肝腫瘍指向性を有する。
上述のように、ヒトにおける固形腫瘍のなかで第5位であるHCCは、世界中で毎年約695,900例の死亡につながっている。HCCの早期診断を受けた患者は外科的介入および/または化学療法による介入の恩恵を受けうるが、疾患の再燃は頻繁に起こり、処置の失敗率は高い。進行HCCと診断された患者の場合、選択肢はほとんど対症療法に限られる。米国食品医薬品局(FDA)は進行HCC患者におけるソラフェニブの使用を承認したが、生存期間中央値は約3ヶ月しか増加しない。したがって、HCCのための新規な治療選択肢の開発が強く必要とされていることは明白であり、遺伝子治療と伝統的漢方薬(TCM)との組合せは有望な選択肢である。TCM医薬品は、主要な補完的代替薬物療法として、既に中国ではHCCによく使用される処置になっている(Zhai et al., 2013)。最近、TCM薬草から抽出された生物活性単量体化合物が、rAAVベクターによって媒介される治療効率を有意に強化する能力を有することが報告された(Zhang et al., 2010;Mitchell et al., 2013;Wang et al., 2014;Ling et al., 2014)。ここでは、遺伝子治療をTCM投与と組み合わせる新規戦略であって、薬草から単離された治療用自殺遺伝子をrAAVベクターによってインビボの悪性細胞に全身性に送達する戦略を開発した。
以下の参考文献は、本明細書に記載したものを補う例示的手法または他の詳細を提供する限りにおいて、引用により特に本明細書に組み込まれる。
Claims (26)
- 非天然AAVキャプシドタンパク質をコードする核酸分子であって、
AAVキャプシドタンパク質が、1つ以上の以下の組み合わせに対応するアミノ酸置換:
配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質の
(a)Y705F、Y731F、およびT492V;
(b)Y705F、Y731F、S663V、およびT492V;または
(c)Y705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533R、を含む、
核酸分子。 - AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、およびT492Vに対応するアミノ酸置換を含む、請求項1に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、S663V、およびT492Vに対応するアミノ酸置換を含む、請求項1に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533Rに対応するアミノ酸置換を含む、請求項1に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、またはAAV10血清型キャプシドタンパク質である、請求項1-4のいずれか一項に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV3血清型キャプシドタンパク質である、請求項1-4のいずれか一項に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV6血清型キャプシドタンパク質である、請求項1-4のいずれか一項に記載の核酸分子。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV8血清型キャプシドタンパク質である、請求項1-4のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より2~50倍高い、請求項1-8のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より6~40倍高い、請求項1-9のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より8~30倍高い、請求項1-10のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 請求項1-11のいずれか一項に記載の核酸分子によりコードされるAAVキャプシドタンパク質。
- 1つ以上の以下の組み合わせ:
配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質の
(a)Y705F、Y731F、およびT492V;
(b)Y705F、Y731F、S663V、およびT492V;または
(c)Y705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533R、
に対応するアミノ酸置換を含む、非天然AAVキャプシドタンパク質。 - AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、およびT492Vに対応するアミノ酸置換を含む、請求項13に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、S663V、およびT492Vに対応するアミノ酸置換を含む、請求項13に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質のY705F、Y731F、S663V、T492V、およびK533Rに対応するアミノ酸置換を含む、請求項13に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、またはAAV10血清型キャプシドタンパク質である、請求項13-16のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV3血清型キャプシドタンパク質である、請求項13-16のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV6血清型キャプシドタンパク質である、請求項13-16のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- AAVキャプシドタンパク質が、AAV8血清型キャプシドタンパク質である、請求項13-16のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より2~50倍高い、請求項13-20のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より6~40倍高い、請求項13-21のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- 前記AAVキャプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子の形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する前記アミノ酸置換を含まないAAVキャプシドタンパク質を含むrAAV粒子の形質導入効率より8~30倍高い、請求項13-22のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質。
- 請求項1-8のいずれか一項に記載の核酸分子または請求項12-23のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質、および医薬上許容される緩衝剤、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
- 哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全の1以上の症状を診断し、防止し、処置し、または改善するための医薬の製造における、請求項24に記載の組成物の使用。
- 請求項1-11のいずれか一項に記載の核酸分子または請求項12-23のいずれか一項に記載のAAVキャプシドタンパク質を含む哺乳動物宿主細胞。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US13/899,481 | 2013-05-21 | ||
US13/899,481 US9920097B2 (en) | 2007-04-09 | 2013-05-21 | Capsid-modified rAAV vector compositions having improved transduction efficiencies, and methods of use |
JP2019214352A JP7021786B2 (ja) | 2013-05-21 | 2019-11-27 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019214352A Division JP7021786B2 (ja) | 2013-05-21 | 2019-11-27 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022068181A JP2022068181A (ja) | 2022-05-09 |
JP2022068181A5 JP2022068181A5 (ja) | 2022-08-08 |
JP7344595B2 true JP7344595B2 (ja) | 2023-09-14 |
Family
ID=51023068
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016515056A Active JP6628286B2 (ja) | 2013-05-21 | 2014-05-21 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
JP2019214352A Active JP7021786B2 (ja) | 2013-05-21 | 2019-11-27 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
JP2022011418A Active JP7344595B2 (ja) | 2013-05-21 | 2022-01-28 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016515056A Active JP6628286B2 (ja) | 2013-05-21 | 2014-05-21 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
JP2019214352A Active JP7021786B2 (ja) | 2013-05-21 | 2019-11-27 | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
EP (2) | EP2999791B1 (ja) |
JP (3) | JP6628286B2 (ja) |
KR (4) | KR102298579B1 (ja) |
CN (3) | CN111763690A (ja) |
AU (3) | AU2014274457B2 (ja) |
CA (1) | CA2917018A1 (ja) |
DK (1) | DK2999791T3 (ja) |
HK (1) | HK1217730A1 (ja) |
SG (2) | SG11201510757PA (ja) |
WO (1) | WO2014193716A2 (ja) |
Families Citing this family (41)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5410017A (en) * | 1993-05-21 | 1995-04-25 | Rohm And Haas Company | Continuous thermal polycondensation process for preparing polypeptide polymers |
US9725485B2 (en) | 2012-05-15 | 2017-08-08 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV vectors with high transduction efficiency and uses thereof for gene therapy |
US10294281B2 (en) | 2012-05-15 | 2019-05-21 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | High-transduction-efficiency rAAV vectors, compositions, and methods of use |
AU2014324717B2 (en) | 2013-09-26 | 2020-10-08 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Synthetic combinatorial AAV capsid library for targeted gene therapy |
EP3151866B1 (en) | 2014-06-09 | 2023-03-08 | Voyager Therapeutics, Inc. | Chimeric capsids |
GB201420139D0 (en) | 2014-11-12 | 2014-12-24 | Ucl Business Plc | Factor IX gene therapy |
WO2016126857A1 (en) | 2015-02-03 | 2016-08-11 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Recombinant aav1, aav5, and aav6 capsid mutants and uses thereof |
GB201508026D0 (en) | 2015-05-11 | 2015-06-24 | Ucl Business Plc | Capsid |
EP3356390B1 (en) | 2015-09-28 | 2021-01-20 | The University of North Carolina at Chapel Hill | Methods and compositions for antibody-evading virus vectors |
US20200181644A1 (en) * | 2015-10-22 | 2020-06-11 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Synthetic combinatorial aav3 capsid library |
CA3008013A1 (en) * | 2015-12-14 | 2017-06-22 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Modified capsid proteins for enhanced delivery of parvovirus vectors |
CN109890966A (zh) * | 2016-08-16 | 2019-06-14 | 北卡罗来纳-查佩尔山大学 | 用于靶向基因转移的方法和组合物 |
CA3034089A1 (en) * | 2016-08-18 | 2018-02-22 | The Regents Of The University Of California | Crispr-cas genome engineering via a modular aav delivery system |
JP7237843B2 (ja) * | 2017-02-21 | 2023-03-13 | ユニバーシティー オブ フロリダ リサーチ ファンデーション, インク. | 修飾されたaavキャプシドタンパク質およびその使用 |
KR20200022434A (ko) * | 2017-06-27 | 2020-03-03 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 유전 물질을 인간 세포 내로 표적화하여 도입하기 위한 향성-변형 재조합 바이러스 벡터 및 이의 용도 |
AU2018330208A1 (en) * | 2017-09-08 | 2020-02-27 | Generation Bio Co. | Lipid nanoparticle formulations of non-viral, capsid-free DNA vectors |
EP3740581A4 (en) * | 2018-01-16 | 2021-10-27 | CLS Therapeutics Limited | TREATMENT OF DISEASES BY LIVER EXPRESSION OF AN ENZYME WITH DESOXYRIBONUCLEASE (DNASE) ACTIVITY |
US10610606B2 (en) | 2018-02-01 | 2020-04-07 | Homology Medicines, Inc. | Adeno-associated virus compositions for PAH gene transfer and methods of use thereof |
EP3755795A4 (en) | 2018-02-19 | 2022-07-20 | Homology Medicines, Inc. | ADENO-ASSOCIATED VIRUS COMPOSITIONS FOR RECOVERING F8 GENE FUNCTION AND METHODS OF USE THEREOF |
WO2019191418A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Asklepios Biopharmaceutical, Inc. | Liver tropic recombinant aav6 vectors that evade neutralization |
JP2021519581A (ja) | 2018-04-03 | 2021-08-12 | ストライドバイオ,インコーポレイテッド | 抗体を回避するウイルスベクター |
EP3774854A1 (en) | 2018-04-03 | 2021-02-17 | Stridebio, Inc. | Antibody-evading virus vectors |
US20210363192A1 (en) * | 2018-04-27 | 2021-11-25 | Spark Therapeutics, Inc. | Engineered aav capsids with increased tropism and aav vectors comprising the engineered capsids and methods of making and using same |
JP7142815B2 (ja) * | 2018-06-21 | 2022-09-28 | 株式会社遺伝子治療研究所 | ヒト肝臓への遺伝子導入のためのアデノ随伴ウイルスビリオン |
US10842885B2 (en) | 2018-08-20 | 2020-11-24 | Ucl Business Ltd | Factor IX encoding nucleotides |
WO2020079256A1 (en) * | 2018-10-19 | 2020-04-23 | Genethon | Modulation, monitoring and prediction of the immune response directed against aav gene therapy vectors |
BR112021013996A2 (pt) | 2019-01-18 | 2021-10-26 | Institut Pasteur | Terapia gênica mediada por aav que recupera o gene otoferlina |
CN113727992A (zh) | 2019-03-21 | 2021-11-30 | 斯特里迪比奥公司 | 重组腺相关病毒载体 |
EP3736330A1 (en) * | 2019-05-08 | 2020-11-11 | European Molecular Biology Laboratory | Modified adeno-associated virus (aav) particles for gene therapy |
WO2021000024A1 (en) * | 2019-07-04 | 2021-01-07 | Children's Medical Research Institute | Methods and aav vectors for in vivo transduction |
EP3997214B1 (en) * | 2019-07-11 | 2023-08-02 | Centre National de la Recherche Scientifique | Chemically-modified adeno-associated virus |
EP4045525A1 (en) | 2019-10-17 | 2022-08-24 | Stridebio, Inc. | Adeno-associated viral vectors for treatment of niemann-pick disease type c |
WO2021108468A1 (en) * | 2019-11-25 | 2021-06-03 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Novel aav3b variants that target human hepatocytes in the liver of humanized mice |
US20230340526A1 (en) * | 2019-11-25 | 2023-10-26 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Novel aav3b variants that target hepatocytes and evade the humoral immune response |
TW202140791A (zh) | 2020-01-13 | 2021-11-01 | 美商霍蒙拉奇醫藥公司 | 治療苯酮尿症之方法 |
US20210348197A1 (en) * | 2020-05-05 | 2021-11-11 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Modified adeno-associated virus 5 capsids and uses thereof |
TW202208632A (zh) | 2020-05-27 | 2022-03-01 | 美商同源醫藥公司 | 用於恢復pah基因功能的腺相關病毒組成物及其使用方法 |
CA3201533A1 (en) | 2020-11-11 | 2022-05-19 | European Molecular Biology Laboratory | Modified viral particles for gene therapy |
CN113647359A (zh) * | 2021-08-15 | 2021-11-16 | 芜湖职业技术学院 | 注射衣霉素诱导急性肝损伤小鼠模型的构建方法 |
WO2023072181A1 (en) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Shanghai Vitalgen Biopharma Co., Ltd. | Adeno-associated virus capsid |
WO2023201368A2 (en) * | 2022-04-15 | 2023-10-19 | Dyno Therapeutics, Inc. | Capsid variants and methods of using the same |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6156303A (en) * | 1997-06-11 | 2000-12-05 | University Of Washington | Adeno-associated virus (AAV) isolates and AAV vectors derived therefrom |
EP1486567A1 (en) * | 2003-06-11 | 2004-12-15 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Improved adeno-associated virus (AAV) vector for gene therapy |
ES2426245T3 (es) * | 2005-04-07 | 2013-10-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Método para incrementar la funcionalidad de un vector de AAV |
EP2623605B1 (en) | 2007-04-09 | 2018-11-28 | University of Florida Research Foundation, Inc. | RAAV vector compositions having tyrosine-modified capsid proteins and methods for use |
US9725485B2 (en) * | 2012-05-15 | 2017-08-08 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV vectors with high transduction efficiency and uses thereof for gene therapy |
WO2010011404A2 (en) * | 2008-05-20 | 2010-01-28 | Eos Neuroscience, Inc. | Vectors for delivery of light-sensitive proteins and methods of use |
CA2826273C (en) * | 2011-02-10 | 2021-11-02 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Viral vectors with modified transduction profiles and methods of making and using the same |
CN103060331B (zh) * | 2012-12-05 | 2014-10-08 | 南京医科大学第一附属医院 | 介导膜稳定cd40l基因的衣壳蛋白突变的双链重组腺相关病毒制备方法与应用 |
-
2014
- 2014-05-21 SG SG11201510757PA patent/SG11201510757PA/en unknown
- 2014-05-21 KR KR1020217008950A patent/KR102298579B1/ko active IP Right Grant
- 2014-05-21 DK DK14733803.2T patent/DK2999791T3/en active
- 2014-05-21 CN CN202010551899.1A patent/CN111763690A/zh active Pending
- 2014-05-21 KR KR1020227033180A patent/KR102649543B1/ko active IP Right Grant
- 2014-05-21 WO PCT/US2014/039015 patent/WO2014193716A2/en active Application Filing
- 2014-05-21 EP EP14733803.2A patent/EP2999791B1/en active Active
- 2014-05-21 CN CN202010039122.7A patent/CN111411125A/zh active Pending
- 2014-05-21 KR KR1020157036164A patent/KR102234672B1/ko active IP Right Grant
- 2014-05-21 AU AU2014274457A patent/AU2014274457B2/en active Active
- 2014-05-21 SG SG10201709552XA patent/SG10201709552XA/en unknown
- 2014-05-21 CA CA2917018A patent/CA2917018A1/en active Pending
- 2014-05-21 CN CN201480041247.6A patent/CN105408486B/zh active Active
- 2014-05-21 KR KR1020217027678A patent/KR20210111878A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-05-21 EP EP18202680.7A patent/EP3492597A3/en active Pending
- 2014-05-21 JP JP2016515056A patent/JP6628286B2/ja active Active
-
2016
- 2016-05-18 HK HK16105737.9A patent/HK1217730A1/zh unknown
-
2019
- 2019-11-27 JP JP2019214352A patent/JP7021786B2/ja active Active
-
2020
- 2020-01-03 AU AU2020200041A patent/AU2020200041B2/en active Active
-
2022
- 2022-01-28 JP JP2022011418A patent/JP7344595B2/ja active Active
- 2022-06-17 AU AU2022204246A patent/AU2022204246A1/en active Pending
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Gene Therapy, 2012, Vol. 19, pp. 375-384 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2020048571A (ja) | 2020-04-02 |
JP6628286B2 (ja) | 2020-01-08 |
AU2014274457A1 (en) | 2016-01-21 |
JP7021786B2 (ja) | 2022-02-17 |
CA2917018A1 (en) | 2014-12-04 |
KR20210111878A (ko) | 2021-09-13 |
JP2022068181A (ja) | 2022-05-09 |
SG11201510757PA (en) | 2016-01-28 |
WO2014193716A3 (en) | 2015-01-22 |
KR102649543B1 (ko) | 2024-03-21 |
AU2020200041A1 (en) | 2020-02-06 |
SG10201709552XA (en) | 2018-01-30 |
CN111411125A (zh) | 2020-07-14 |
WO2014193716A2 (en) | 2014-12-04 |
EP3492597A3 (en) | 2019-08-28 |
HK1217730A1 (zh) | 2017-01-20 |
DK2999791T3 (en) | 2019-03-18 |
AU2020200041B2 (en) | 2022-03-17 |
AU2022204246A1 (en) | 2022-07-21 |
KR102234672B1 (ko) | 2021-04-06 |
CN105408486A (zh) | 2016-03-16 |
EP3492597A2 (en) | 2019-06-05 |
CN105408486B (zh) | 2020-07-14 |
EP2999791B1 (en) | 2018-12-05 |
KR20220136477A (ko) | 2022-10-07 |
JP2016520311A (ja) | 2016-07-14 |
KR20210037001A (ko) | 2021-04-05 |
KR20160010617A (ko) | 2016-01-27 |
AU2014274457B2 (en) | 2019-10-24 |
CN111763690A (zh) | 2020-10-13 |
EP2999791A2 (en) | 2016-03-30 |
KR102298579B1 (ko) | 2021-09-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7344595B2 (ja) | キャプシド修飾rAAV3ベクター組成物およびヒト肝がんの遺伝子治療における使用方法 | |
US20210253644A1 (en) | Capsid-modified, raav3 vector compositions and methods of use in gene therapy of human liver cancer | |
JP7416443B2 (ja) | 高形質導入効率rAAVベクター、組成物、および使用方法 | |
US12065467B2 (en) | High-transduction-efficiency rAAV vectors, compositions, and methods of use | |
US9611302B2 (en) | High-transduction-efficiency RAAV vectors, compositions, and methods of use |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220225 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220225 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220729 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230124 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230420 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230721 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230801 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230828 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7344595 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |